类黄酮3'-羟化酶(Flavonoid 3'-hydroxylase,F3'H)是细胞色素P450单加氧酶,在花青素合成途径中催化二氢山奈酚生成二氢槲皮素,进而形成矢车菊色素.利用津田芜菁BrF3'H1和赤丸芜菁BrF3'H2基因构建过量表达载体后遗传转化烟草,转基因植株的花色加深.通过染色体步移法克隆了BrF3'H1和BrF3'H2基因上游846和851 bp的启动子序列.生物信息学分析表明,BrF3'H1P和BrF3'H2P均包含TATA box、CAAT box、光调控元件、MRE、ABRE、ATGCAAAT-motif、ERE、02-site、RY-element、LTR等多个顺式作用元件;二者的核苷酸序列在7个位点存在差异.利用BrF3'H1P和BrF3'H2P序列替换pCAMBIA1301植物表达载体的35S启动子后遗传转化烟草.GUS组织化学染色结果表明,BrF3'H1P和Br F3 'H2P序列均能驱动GUS基因表达.通过PCR方法获得了BrF3'H1P和BrF3'H2P的一系列缺失片段,融合GUS基因后转化烟草.染色结果显示,BrF3'H1P和BrF3'H2P系列缺失片段均具有起始GUS基因表达的活性.BrF3'H1和BrF3'H2基因的功能鉴定及启动子的初步分析将为揭示津田芜菁和赤丸芜菁F3'H基因的光诱导表达调控机理奠定研究基础.