纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillus subtilis natto)的apr基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性.利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增B.subtilis natto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化了起始30个氨基酸的密码子,构建了重组表达质粒pHT0 1-aprN.经限制性酶酶切、PCR扩增和测序验证了其编码的正确性.通过电击法将含有强启动子的pHT01-aprN导入B.subtilis,利用氯霉素抗性筛选获得B.s 168/pHT01-apr工程菌.经IPTG诱导表达,摇瓶发酵培养最高酶活力为(289.00±3.42) U/mL,是野生菌的3.9倍,酶活力表达稳定性良好.