为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase ,A K ) ,并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体,通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M 372I ,T379S和M372I‐T379S ,对野生型(W T )和突变体分别进行诱导表达、纯化及酶学性质表征 .结果表明:突变体M372I ,T379S 和M372I‐T379S AK 与 W T A K 相比,V max分别提高了13 .77 ,15 .02 ,15 .60倍,Km 和 n值均降低;最适pH值分别升高为8 .0,8 .5,8 .5,且半衰期分别延长了1 .0,0 .9, 2 .3 h ;M372I‐T379S AK最适温度为30 ℃,比W T A K高2 ℃;当浓度为1～10 m mol／L时,突变体均削弱或部分解除了抑制剂Lys的反馈抑制作用 .