构建FOXA1的原核表达载体，诱导表达并纯化后获得人FOXA1的C端和N端蛋白片段，为寻找 FOXA1的互作蛋白提供材料基础。提取人乳腺癌细胞 MCF7的总RNA ，逆转录成cDNA ，设计引物PCR克隆FOXA1的cDNA ，再以此为模板扩增FOXA1的C端、N端cDNA片段，分别并克隆进带有GST 标签的原核表达载体pGEX‐4T‐1，构建重组表达质粒。双酶切及测序鉴定正确后，转化至大肠杆菌BL21 Rosetta DE3，经IPTG诱导，Glutathione Sepharose 4B 亲和纯化，通过 SDS‐PAGE 电泳及 Western blot 确定FOXA1蛋白的表达。与MCF7细胞裂解液孵育，进行GST‐Pull down试验，检测纯化蛋白与FOXA1已知互作蛋白 TLE3的相互作用。成功构建 pGEX‐4T‐1‐FOXA1‐C 和 pGEX‐4T‐1‐FOXA1‐N的原核表达载体；在大肠杆菌中诱导目的蛋白表达；经Glutathione Sepha‐rose 4B纯化后，获得了人FOXA1的C端蛋白片段GST‐FOXA1‐C与N端蛋白片段GST‐FOXA1‐N ；证实GST‐FOXA1‐C能与FOXA1已知互作蛋白TLE3的相互作用。