以三倍体杨树品种‘银中杨’(Populus alba×P.berolinensis Yinzhong)无菌苗叶片为材料,对其原生质体分离及纯化条件进行研究,为进一步通过细胞融合、基因工程等进行品种改良探索新的途径.结果表明:酶的种类及浓度、渗透压、酶解时间对‘银中杨’叶肉原生质体分离效果有显著影响,适宜的分离条件为CPW+3％Cellulase RS+0.5％ Macerozyme R-10+0.3％ Pectinse Y-23+ 0.6 mol/L甘露醇+0.6 g/L MES+1 g/L BAS,酶解时间为8h,原生质体产量和活力分别为2.13×10 7个/g和80.18％;‘银中杨’叶肉原生质体纯化最佳方法为上浮法蔗糖等密度离心,且蔗糖浓度为40％时原生质体产量最高(1.06×10 7个/g),可满足进一步的原生质体培养等技术的要求.
’银中杨’ 原生质体 分离 纯化