采用基于顺磁微粒标记抗体的免疫层析法,制备金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)快速定量检测的层析试纸条.利用EDC和NHS交联活化顺磁微粒,对顺磁微粒包被抗体的体系进行优化;根据双抗夹心法原理制备免疫层析试纸条,对制备的SEB免疫层析试纸条进行测试研究.优化的顺磁微粒偶联抗体的缓冲体系为pH 9.0,5mmol/L硼酸,0.05％ Tween-20;磁珠包被抗体量为125 μg/2 mg磁珠,封闭剂为0.25％的脱脂牛奶,磁珠保存液为5mmol/L硼酸、0.05％ Tween-20十0.05％ Triton X-100,0.01％ NaN3,0.5％BSA,pH9.0;建立的SEB顺磁微粒免疫层析试纸条T线抗体浓度为lmg/mL,最低检测限为1 ng/mL,磁信号检测显示,该试纸条在SEB浓度0.1～1 000ng/mL范围内具有很好的线性关系.SEB顺磁微粒免疫层析法具有简单快速、灵敏度高、可定量的特点,可应用于SEB的快速检测.
金黄色葡萄球菌肠毒素B 顺磁微粒 免疫层析