采用硫酸铵分级盐析、透析、聚乙二醇浓缩和高效液相色谱柱层析从韦伯灵芝TZC-1发酵液中分离纯化得到电泳纯漆酶,其纯化倍数为37.1倍,酶活性回收率为21.3%.活性-PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)结果表明该漆酶由一种同工酶组成,纯化漆酶经SDS-PAGE检测显示为单一条带,其分子质量约为40kD.该漆酶催化底物ABTS的最适反应温度为50～60℃,最适反应pH值为4.6,在60℃以下和pH3.0～5.0范围内保持稳定,以ABTS为底物的表观K_m值为13.8 μmol/L.Fe~(2+)完全抑制酶活,Al~(3+)和Mn~(2+)对该漆酶也仃明显抑制作用,Hg~+、Cu~(2+)和Mg~(2+)对该酶有明显激活作用,而Zn~(2+)、Ba~(2+)及K~+对该酶活性影响不大.
韦伯灵芝 漆酶 纯化 酶活