生长抑制因子(growth inhibitory factor,GIF),又称金属硫蛋白-3,为68个氨基酸组成的脑特异性金属硫蛋白,具有广泛的生理功能;GIF可能与阿尔茨海默氏症(Alzheimer's)病理相关,在Alzheimer's脑提取物存在下,还对神经细胞具有特异的生长抑制活性.然而,对其发挥生长抑制作用的分子机制并不清楚.运用酵母双杂交系统从人脑cDNA文库中筛选与GIF相互作用因子,从4.1×106个人脑cDNA文库转化子中,首次筛选到Ras家族G蛋白Rab3a C端,包含87个氨基酸的片段能与GIF相互作用;用PCR自人胎盘总cDNA中获得包含完整Rab3a编码序列的cDNA;通过酵母双杂交实验表明,全长Rab3a蛋白亦能与GIF相互作用.免疫共沉淀和蛋白质印迹实验进一步验证了GIF与Rab3a在哺乳动物细胞中可以相互作用;而且,Rab3a是以GTP结合形式(GTP-Rab3a)与GIF发生相互作用.
生长抑制因子 阿尔茨海默氏症 酵母双杂交系统 Rab3a 免疫共沉淀