目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定血清中25-羟基维生素D2[25-hydroxyvitamin D2,25(OH)D2]、25-羟基维生素D3[25-hydroxyvitamin D3,25(OH)D3]和维生素K1(vitamin K1,VK1)的方法,并用此方法诊断维生素缺乏症,评估人群营养状况.方法 血清标本采用乙腈沉淀血清蛋白,正己烷提取.采用BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)进行分离,以甲醇-0.1％甲酸水溶液梯度洗脱.质谱采用电喷雾正离子模式和多反应监测检测.以稳定同位素标记的d6-25(OH) D3、d7-维生素K1作为内标定量.结果 25 (OH) D2、25 (OH) D3和维生素K1分别在浓度为5.0～75.0 ng/mL、2.0～81.5 ng/mL和0.3～ 12.0 ng/mL的范围内呈良好线性关系,相关系数r＞0.995;检出限分别为1、0.25和0.1 ng/mL,定量限分别为3、0.75和0.3 ng/mL;血清基质中3种维生素高中低3个浓度水平的精密度均＜5.0％、加标回收率为98.5％～104.3％(n=6).结论 本研究建立的UPLC-MS/MS方法检测血清中25(OH) D2 、25(OH) D3和维生素K1灵敏度高、准确性好,适用于人群维生素D及维生素K1营养状况的监测.
超高效液相色谱-串联质谱法 25-羟基维生素D2 25-羟基维生素D3 维生素K1 血清