[目的]研究3种不同长度的四联shRNA载体及其在细胞与个体水平的沉默效应差异.[方法]以EGFP为靶标基因,用hU6、mU6、h7SK、hHl 4种启动子,构建21、27、29 bp的3种四联沉默载体,通过转染Vero细胞和注射小鼠肌肉,以实时荧光定量PCR的方法检测绿色荧光蛋白基因的mRNA水平.[结果]3种载体都有很强的沉默效应,其在细胞水平上的沉默效应远高于个体水平上,可以通过未成年鼠的肌肉注射进行转基因.[结论]多位点串联表达shRNA是一种可以达到较好干扰效果的方法,肌肉注射将是一个简便的转基因途径.
细胞 个体 沉默 差异