根据已发表的IL-12两个亚基P35 cDNA序列(NM-000882)与P40cDNA序列(NM-002187)设计2对引物.以LPS刺激的人脐血淋巴细胞为材料,采用RT-PCR技术从总RNA扩增hIL-12基因,包括完整的前体蛋白编码序列.所得到的序列与GenBank中发表的一致,但与CLMF和NKSF序列有所差异.P35同CLMF相比,244aa密码子GAC(Asp)→GAT(Asp)、247aa密码子ACG(Thr)→ATG (Met);与NKSF比较,44aa密码子GTC(Val)→GTG(Val).P40同NKSF比较239aa密码子AAC(Asn)→AAG(Lys),291aa密码子ACC(Thr)→ACG(Thr);P40同CLMF相比较,氨基酸与核苷酸序列完全一致.通过与不同物种氨基酸及核苷酸序列比较分析,P40亚基与其它动物的同源性80%以上,P35亚基与其它动物同源性在70%.
IL-12基因 cDNA克隆 序列分析