为了探讨人绒毛膜促性腺激素hCGβ亚基DNA避孕疫苗的可能性,以恒河猴绒毛膜促性腺激素rrmCGβ亚基全长氨基酸编码序列的cDNA片段构建了真核质粒表达载体pCMV4-rmCGβ.通过脂质体转染的方法导入HeLa细胞,采用RT-PCR方法检测rmCGβ在mRNA水平上的表达.实验证明HeLa细胞在转染后24 h表达最强,48 h和72 h表达依次减弱;利用ELISA方法检测了pCMV4-rmCGβ在HeLa细胞中rmCGβ蛋白的表达,mCGβ蛋白主要以细胞内或膜结合的形式存在,其含量可达0.5μg/106细胞.pCMV4-mCGβ DNA免疫接种雌性BALB/c纯系小鼠,能诱导小鼠产生强烈的体液免疫应答,滴度最高可达1:6000以上,高滴度的免疫反应持续10周以上,且免疫反应的强度与pCMV4-mCGβ DNA无剂量依赖关系.
恒河猴CGβDNA疫苗HeLa细胞表达免疫