拟探讨热应激诱导LLC-PK1细胞线粒体凋亡相关因子的表达和活性情况,以及激活线粒体凋亡通路的时间.采用qRT-PCR方法和Caspase活性检测试剂盒分别检测42℃热应激处理后0,2,4,8,16 h以及37℃培养的LLC-PK1细胞中HSP72、Bcl-2、Bax、AIF和Cyt.c的基因表达以及Caspase-9和Caspase-3的活性.结果显示,42℃热应激1h,LLC-PK1细胞Bcl-2/Bax(P＜0.05)和AIF(P＜0.01)基因表达以及Caspase-3(P＜0.01)活性从0h开始升高(P＜0.01),到2h达到最高(P ＜0.01);HSP72基因表达和Caspase-9活性0h即达到最高(P ＜0.01);Cyt.c基因表达在2h开始极显著升高(P＜0.01),并且此时最高,8h以后全部因子恢复到正常水平.结果表明,42℃热应激1h即激活LLC-PK1细胞线粒体凋亡通路,且热应激后的0～8h线粒体凋亡通路处于活化状态,其中2h时最为活跃.
热应激 猪肾小管上皮细胞 线粒体凋亡