目的:miRNA分子被广泛用于各种疾病的研究,是临床上诊断、预后的重要生物标志,但因其分子较小,且在组织中的表达量水平很低,传统的核酸提取方法无法对其进行高效提取,因此本文拟构建一套用于miRNA高效提取的磁珠法提取体系.方法:在传统的核酸提取方法的基础上,本研究主要选择LGC、PuriMag和WD三个品牌不同的磁珠进行miRNA提取体系的建立,主要探讨了磁珠用量和裂解液pH对体系提取miRNA的影响,并用实时荧光定量PCR进行验证.结果:WD磁珠(25 mg/mL)在磁珠使用量为30μL、裂解液pH=8.0时,提取效果最好.结论:研究建立了一套以WD磁珠为核心miRNA提取体系,为miRNA提取方法的进一步优化奠定了基础.
miRNA提取 磁珠 实时荧光定量PCR