将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的Xhol Ⅰ和EcoR Ⅰ位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5.pPIC9/PD5经Bgl Ⅱ线性化,电转化法转入Pichia pastoris GS115,MD和MM平板筛选表型为His+MutS的转化子,PCR鉴定阳性转化子.转化子D24用BMGY培养至OD600为6.0时,经BMM诱导,上清液用Tricien-SDS-PAGE可检测到目标条带.同时经平板抑菌试验显示,D24的诱导发酵上清液可很好的抑制香蕉枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp. Cubense)及甘蓝黑腐菌[Xanthomona campestris (Smith) Dovosen]的生长.植物防御素PD5基因在毕赤酵母中得到表达.
植物防御素 PD5基因 分泌表达 抑菌活性