大肠杆菌的破碎方法对包含体的纯度有较大影响.采用酶解和超声波相结合的方式进行了大肠杆菌的破碎实验研究,考察了溶菌酶用量、酶解温度、超声处理功率和时间等因素对菌体破碎程度的影响,通过测定破碎液的A650,A280,A260 nm来反映细胞的破碎程度和胞内蛋白及核酸物质的释放情况.在优化的条件下,每克湿菌体添加2 mg溶菌酶,30 ℃酶解60 min、500 W超声破碎50次后,经分离洗涤可获得纯度达57%的包含体.本方法可获得纯度更高的包含体,利于重组蛋白的进一步纯化.
酶解 超声波 大肠杆菌 包含体