甘露糖基转移酶Alg11是N糖基化途径中的关键酶,催化第4和第5个甘露糖(Man)残基以α-1,2连键的形式转移到底物Man3-GlcNAc2-PP-Dol生成Man5-GlcNAc2-PP-Dol,人类ALG11基因致病突变会导致相关的先天性糖基化疾病ALG11-CDG(Congenital Disorders of Glycosylation).目前,对ALG11-CDG的研究更侧重于其临床症状,而患者Alg11突变蛋白的性质还有待探索.作者以研究ALG11-CDG突变蛋白的重组表达及活性为目的,首先在人胚胎肾细胞HEK293和酿酒酵母中分别表达了Alg11野生型及突变体蛋白,发现其表达量存在显著差异,突变体蛋白不能稳定表达.最终在大肠杆菌中成功稳定表达了野生型及ALG11-CDG相关突变蛋白,利用液质联用定量分析了蛋白质的活性,结果显示,突变蛋白的活性存在不同程度的降低,其降低程度与ALG11-CDG疾病的严重程度存在一定的相关性.上述研究结果证明:1)ALG11-CDG相关突变蛋白的不稳定有可能是造成疾病的原因之一;2)体外定量测试大肠杆菌表达的ALG11-CDG相关突变蛋白的活性可以为相应患者的疾病严重程度提供参考.
N-糖基化 糖基转移酶Alg11 ALG11-CDG 酶活