目的·研究SUMO化修饰对胸腺嘧啶DNA糖基化酶(thymine DNA glycosylase,TDG)蛋白的结构、稳定性及活性的影响.方法·建立体外表达纯化体系,获取可用于晶体筛选及活性检测的SUMO-1-TDG蛋白.通过晶体筛选、衍射数据收集及结构解析,分析SUMO-1-TDG的分子结构.利用蛋白热稳定性实验检测在SUMO化修饰前后TDG稳定性的变化.建立TDG活性测试体系,探讨SUMO化修饰对TDG活性产生的影响.结果·通过结构解析得到SUMO-1-TDG分子结构.稳定性、活性实验检测发现TDG蛋白熔解温度(Tm)值提高约16℃,催化活性提升约9.70％.结论·SUMO-1分子结合TDG对其进行修饰使得结合位点附近氨基酸形成分子间相互作用,并进一步参与调控TDG蛋白的稳定性及催化活性.
胸腺嘧啶DNA糖基化酶 SUMO化 晶体结构 稳定性实验 活性检测