[目的]研究血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)、CD34、CD133和血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)四种表面标志物分子在大鼠骨髓源性内皮祖细(endothelial progenitor cells,EPCs)的分离鉴定中的应用.[方法]采用Ficoll密度梯度离心法分离提取骨髓单个核细胞,体外诱导培养.观察细胞形态的动态变化,流式细胞技术检测CD31、CD34、CD133和VEGFR-2四种细胞表面标志物的表达、荧光双染Dil-ac-LDL与FITC-UEA-I等方法对EPCs进行鉴定.[结果]分离培养的EPCs在3～4d时,光学显微镜下可见部分贴壁细胞集落样生长,呈圆形或不规则形;7～10d,贴壁的梭形细胞从细胞团边缘出芽生长;14～21d可观察到梭形细胞首尾相连成条索状结构,梭形细胞基本融合,融合后逐渐呈铺路石状.细胞培养至7d时,Dil-ac-LDL/FITC-UEA-I双阳性细胞率大于85％,流式细胞术结果显示:EPCs四种表面分子CD31、CD34、CD133和VEGFR-2表达阳性.[结论]密度梯度离心法结合检测CD31、CD34、CD133和VEGFR-2四种表面标志物的表达等技术,可用于分离鉴定稳定增殖分化的内皮祖细胞,其生物学特征明显.
内皮祖细胞 表面标志物 鉴定