目的:改善胶内酶切的肽段回收率,提高蛋白质的有效鉴定率.方法:将改进的胶内酶切"四步提取法",应用到96个双向电泳蛋白质斑点分析.结果:该方法提高了胶内蛋白质酶切肽段的回收率,改善了质谱图谱的质量.蛋白质的有效鉴定率达89.6%,其中,数据库检索得分80分以上者达82%.另外,证实了酶解原液直接用于质谱分析可获得较好信噪比的谱图.结论:应用"四步提取法"使得酶解肽段提取率和蛋白质的有效鉴定率明显提高.
胶内酶切 四步提取法 肽质量指纹图谱 蛋白质组学 光谱分析 质量 内肽酶类