以假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.zb7-4)发酵制备褐藻胶裂解酶粗酶液,采用弱阴离子DEAE交换层析分离褐藻胶裂解酶,分析纯化褐藻胶裂解酶AlgL的酶学特性.结果表明:AlgL的表观分子质量约为32 ku,比活力为(208.26±5.87)U·mg-1;其最适反应pH为7.0,在pH为6.0～ 10.0范围内稳定性较好,保温1h仍能保持80％以上的相对酶活力;最适反应温度50℃,在40℃保温30 min,其残余酶活力高于80％;Cu2+、Cr3+、Co2+、Ba2+、Sr2+、Hg2+对该酶具有不同程度的抑制作用,Hg2+抑制作用最为明显;该酶具有较好的盐耐受性,在3 mol·L-1 NaCl反应体系中保温2h,仍残余66％酶活力.动力学参数Km、Kmax、Kcat测定表明,该酶对聚古罗糖醛酸钠(PG)亲和力较高,为偏好聚甘露糖醛酸钠(PM)裂解作用的双功能酶.
褐藻胶裂解酶 假交替单胞菌 纯化 酶学性质