目的 探讨血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)对脑心肌炎病毒(encephalo-myocarditis virus,EMCV)体外增殖的影响及其作用机制.方法 将EMCV按MOI=0.001感染C2C12细胞,于感染24及48 h时,采用qPCR及Western blot法检测C2C12细胞中VCAM-1基因mRNA转录及VCAM-1蛋白表达水平.将表达质粒pcDNA3.1-VCAM-1及siVCAM-1序列分别转染C2C12细胞,qPCR及Western blot法检测C2C12细胞中VCAM-1过表达及抑制表达情况,再将EMCV按MOI=0.001感染,qPCR及TCID50法分别检测病毒拷贝数及病毒滴度.Pull-down试验检测VCAM-1与EMCV结构蛋白的相互作用.结果 C2C12细胞中VCAM-1基因mRNA转录及VCAM-1蛋白表达水平随着EMCV感染时间的延长明显降低(P＜0.001).转染表达质粒pcDNA3.1-VCAM-1后,C2C12细胞中VCAM-1基因mRNA转录及VCAM-1蛋白表达水平显著升高(P＜0.01),EMCV感染后,病毒拷贝数及病毒滴度均显著降低(P＜0.001).转染siVCAM-1序列后,C2C12细胞中VCAM-1基因mRNA转录及VCAM-1蛋白表达水平显著降低(P＜0.001),EMCV感染后,病毒拷贝数及病毒滴度均显著升高(P＜0.001).VCAM-1与病毒蛋白VP1、VP2有明显的相互作用,与VP3无相互作用.结论 VCAM-1在EMCV体外增殖过程中起负调控作用,可能是通过VCAM-1与EMCV结构蛋白VP1、VP2的相互作用实现的.
血管细胞黏附分子-1 脑心肌炎病毒 体外增殖