分别从23岁、 64岁、 72岁、 83岁以及94岁无神经性和精神性疾病史个体大脑皮层枕叶区取样, 制备蛋白质样品, 进行双向凝胶电泳(2-DE)、考马斯亮蓝染色、凝胶扫描和Image Master 2D Elite软件分析, 每张胶上平均可检测到1 000个以上蛋白质点. 通过软件半定量分析, 进一步研究了衰老过程中枕叶蛋白质的差异表达, 发现随年龄增长有7种蛋白质有一致的显著上升或下降趋势. 应用质谱进行肽质量指纹图谱(PMF)和/或肽序列标签(PST)分析, 数据库检索共鉴定了11种蛋白质, 其中有5种具有一致的上调或下调性, 包括神经元突触结构蛋白低分子量神经丝蛋白(Neurofilament triplet L protein, NF-L)、参与抗氧化反应的硫氧还原蛋白过氧化物酶(Peroxiredoxin)、三羧酸循环关键酶(顺)乌头酸水合酶(Aconitate hydratase)和糖代谢途径中的关键酶烯醇化酶2(Enolase 2)以及分子伴侣蛋白T复合物蛋白1(T-complex protein 1). 首次建立了正常人脑枕叶区的双向电泳蛋白质表达图谱, 针对人脑枕叶区蛋白质在衰老过程中的差异表达进行了研究, 并对差异表达蛋白在衰老进程中可能的生物学意义做了探讨.
蛋白质组 双向凝胶电泳 质谱 人脑枕叶区 衰老