本工作旨在研究缺氧预处理(hypoxic preconditioning,HPC)对于心肌细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulatedprotein kinases,ERK)活性、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响,及其在缺氧复氧诱导心肌细胞损伤中的作用.通过在培养的SD乳鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型上,观察HPC对于24 h后H/R诱导心肌细胞损伤的影响,以台盼蓝排斥实验检测心肌细胞存活率、以TUNEL法检测细胞凋亡、并用荧光素染料Hoechst33258测定心肌细胞凋亡率;制备心肌细胞蛋白提取物,以磷酸化的ERK1/2抗体测定ERK1/2活性,以抗HIF-1α抗体检测HIF-1α的表达,并观察ERKs的上游激酶(MEK1/2)抑制剂PD98059对于HPC诱导的ERKs磷酸化、HIF-1α表达以及心肌细胞保护作用的影响,并分析细胞损伤与ERK1/2活性、HIF-1α表达量之间的相互关系.结果显示缺氧复氧造成心肌细胞损伤,HPC可以增加心肌细胞H/R后存活率,降低凋亡率,并激活ERK1/2,诱导HIF-1α表达;细胞凋亡与ERKs活性、HIF-1α表达量之间存在负相关,即ERKs活化、HIF-1α表达与预防细胞损伤有关；而ERKs活性与HIF-1α表达量之间存在正相关,ERKs的上游激酶MEK抑制剂PD98059可以消除HPC诱导的ERKs磷酸化、HIF-1α表达和心肌细胞保护作用.由此得出的结论是HPC可以提高乳鼠心肌细胞对于H/R的耐受性,其机制涉及ERKs介导的HIF-1α表达.
缺氧诱导因子-1α 缺血预处理 细胞凋亡 心肌细胞