将野花生豆经浸取、硫酸铵分级沉淀、猪胃粘蛋白-Sepharose 4B亲和层析和Sephacryl S-200 HR分子筛层析后,可得到对人类A型血专一凝集的野花生豆凝集素(Crotalaria mucronata Lectin, CML).纯化的CML在PAGE和SDS-PAGE中均显示单一蛋白带.在含8mol/L脲和不含脲的缓冲体系中,分别用NEM修饰CML中的半胱氨酸残基,经计算被修饰巯基数目分别为3.1个和3.2个,且修饰后的CML的活性仍不丧失.通过NR/R单向SDS-PAGE和NR/R双向对角线SDS-PAGE研究,发现CML不含二硫键,表明CML中的半胱氨酸残基既与CML的凝集活性无关,也不形成稳定蛋白质结构的二硫键.
野花生豆凝集素 半胱氨酸 巯基 二硫键