以大肠杆菌原核系统表达的方法制备了MspA蛋白质纳米孔,并利用表面活性剂高温提取获得高活性MspA蛋白纳米孔。实验结果表明,0.5%的提取剂90℃提取30 min为最佳提取条件。利用制备的MspA纳米孔在单分子水平上研究了其与多种环糊精的相互作用,结果表明,在众多环糊精分子中,全-6-氨基-β-环糊精( am7-β-CD)与MspA蛋白纳米孔相互作用较强且阻塞平台较一致,其滞留时间随电压增大而逐渐减小,但阻塞电流受电压影响不大。筛选使用am7-β-CD作为适配体非共价键装配MspA纳米孔,在单分子水平上研究主客体化学反应。加入am7-β-CD后,当盐酸金刚烷胺小分子浓度为50 nmol/L时,即出现二级阻塞平台,其滞留时间随电压增大而逐渐减小。这种新型蛋白质纳米孔单分子传感器可用于有机小分子的检测识别,极大拓宽了MspA纳米孔分析技术的的应用范围。
Mycobacterium smegmatis porin A 纳米通道 单分子检测 环糊精 盐酸金刚烷胺