使用酶消化法及机械分离法对Hensen细胞进行分离,置于倒置显微镜下用碘化丙啶及钙敏荧光染料Fluo-3进行细胞活性鉴定并在激光扫描共聚焦显微镜下观察静息状态Hensen细胞内的游离Ca2+的时空分布.结果证明,每个豚鼠耳蜗可以得到单离的Hensen细胞5～12个.细胞活性良好,可保持5～6 h.当细胞变性、坏死时可见一系列的形态学变化.对此得出几点判断Hensen细胞活性的标准:(1)细胞体呈卵圆形或椭圆形,大小可不一致;(2)细胞膜完整,细胞边界清楚,折光现象明显;(3)细胞浆清澈透明,无布朗运动,无溢出;(4)细胞浆内的脂滴清晰可辨,折光现象明显;(5)细胞无水肿(即无气球样变).在静息状态下,Hensen细胞内的Ca2+在细胞内分布不均匀,脂滴所在部位没有Ca2+的分布.随时间延长,细胞内的[Ca2+]i可小幅度振荡,但基本处于一种稳定状态.本工作为进一步对Hensen细胞的其他特性进行研究打下了基础.
Hensen细胞 细胞活性 形态学 耳蜗 豚鼠