斑腹刺益蝽(Podisus maculiventris)抗真菌肽Thanatin是目前发现的6种昆虫抗真菌肽之一,对真菌具有广谱的免疫诱导杀菌活性,由21个氨基酸残基组成,对革兰氏阳性和阴性细菌也有一定的杀菌作用.根据已报道的抗真菌肽Thanatin基因的氨基酸序列,推导出cDNA序列,采用基因片段合成结合PCR扩增的策略,获得大量完整的Thanatin基因片段,通过T-A克隆法克隆至pGEM-T Easy载体,进行测序,结果证实合成的Thanatin基因与预期设计的完全一致.然后将其亚克隆至表达载体pET-21d中.经IPTG诱导表达后,采用RNA-DNA点杂交和RT-PCR检测具Thanatin基因插段的RNA转录表达活性,初步结果显示该融合表达产物对烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus)和绿色木霉菌(Trichoderma riricle)2种病原真菌均有一定的抑菌效果.
昆虫抗真菌肽 Thanatin基因 基因表达