miR-139在结肠癌、肝癌、外周神经鞘瘤、食管鳞状细胞癌、胶质瘤、胃癌中低表达,表明其在上述各种肿瘤中起到重要作用.本研究旨在验证miR-139在胃癌组织中的表达情况,就其在胃癌发生发展中的作用机制进行初步研究.采用实时荧光定量RT-PCR分析胃癌和癌旁组织中miR-139的表达水平;运用生物信息学手段,预测miR-139靶基因,并采用RT-PCR和Western blot分别检测潜在的靶基因在胃癌组织中的mRNA表达和蛋白水平表达变化;将miR-139mimics瞬时转染胃癌细胞AGS细胞系,RT-PCR检测靶基因的表达水平.对瞬时转染miR-139 mimics及inhibitors的AGS细胞系,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期变化,Tran swel实验检测细胞侵袭能力.结果:(1)miR-139在胃癌中低表达.(2)生物学预测ROCK2是miR-139的靶基因,其在胃癌组织中mRNA和蛋白高表达.(3)miR-139 mimics转染后,抑制ROCK2 mRNA表达.(4)miR-139对胃癌的抑制作用:MTT结果表明,miR-139可抑制胃癌细胞增殖.Transwel实验提示miR-139可抑制细胞的侵袭,miR-139可能通过下调靶基因的表达抑制胃癌细胞的增殖、侵袭能力.
微小RNA139 胃癌 RT-PCR分析 AGS细胞素 靶基因 蛋白激酶2