目的:提纯角膜内皮抗原(corneal endothelial antigen,CEN-Ag)及抗角膜内皮抗原抗体(anti-corneal endothelial antibody,ACEN-Ab),为角膜移植排斥反应的理论研究提供基础.方法:用猪角膜内皮做抗原,上皮做对照.经离子交换层析及2B4.14.1单克隆抗体亲和层析制得纯化的CEN-Ag和角膜上皮抗原(corneal epithelial antigen,CEP-Ag).用提纯的CEN-Ag和CEP-Ag分别免疫家兔,取血清经亲和层析得到ACEN-Ab和抗角膜上皮抗原抗体(anti-corneal epithelial antibody,ACEP-Ab).结果:经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,抗原分子质量分别为43kD和53kD,相应的免疫球蛋白是IgG2和IgG3.结论:CEN-Ag和ACEN-Ab可以被提纯并从理论上证明,不同的角膜抗原和抗体穿透房水屏障的能力有所不同和角膜排斥反应的临床分型是正确的.
内皮 角膜 抗原/分离和提纯 抗体/分离和提纯 层析