目的获得可溶性的抗乙型肝炎病毒(HBV)核心蛋白(core )的人源单链可变区抗体(ScFv),为得到纯度高、活力强的HBc- ScFv和进一步的抗HBV 治疗奠定基础.方法采用噬菌体表面展示技术,以重组的HBV核心蛋白为包被抗原,从噬菌体单链可变区抗体库中经过5轮"吸附-洗脱-扩增"筛选过程,获得抗原结合活性较强的乙型肝炎核心蛋白人源单链可变区抗体ScFv 片段克隆,并对其进行DNA序列及免疫活性测定.从噬菌体抗体阳性克隆中提取质粒转化大肠杆菌HB2151,IPTG诱导表达乙型肝炎核心蛋白可溶性人源单链可变区抗体,ELISA和western blot检测其抗原结合特异性. 结果克隆了乙型肝炎核心蛋白的单链可变区抗体基因;经DNA酶切和序列分析表明,该抗体基因由771个碱基组成;ELISA 和western blot结果表明:在大肠杆菌HB2 151中经IPTG诱导表达的可溶性乙型肝炎核心蛋白的单链可变区抗体,具有结合乙型肝炎核心蛋白的特异性和免疫活性.结论克隆、鉴定并在大肠杆菌HB2151中表达了可溶性的HBc- ScFv.
乙型肝炎核心蛋白 单链可变区抗体 可溶性表达