目的 研究富血小板血浆(PRP)对人成骨样细胞MG63增殖能力的影响,探讨PRP的生物学功能.方法 采集健康志愿者的静脉血,两次离心法制备PRP,氯化钙加人凝血酶激活后离心提取PRP萃取液.碱性磷酸酶(ALP)染色检测不同体积分数PRP(0、1％、2％、3％)对MG63分化活性的影响,碘化丙啶(PI)荧光染色观察PRP作用下MG63细胞形态的变化,免疫细胞化学检测PRP对MG63表达转化生长因子-β(TGF-β)的影响,扫描电子显微镜(SEM)观察PRP对MG63在人工骨材料表面生长情况的影响,CCK-8法检测PRP对MG63增殖活性的影响,流式细胞术(FCM)检测经PRP培养后不同时间MG63的细胞周期,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测PRP作用下MG63中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ) mRNA的表达量.结果 ALP检测见3％PRP组ALP阳性细胞染色最深,并随体积分数的增加染色强度增加,且PRP组细胞均出现不同程度的脱片现象.PI荧光染色见PRP组细胞核荧光染色较对照组增强.免疫细胞化学检测见3％PRP组TGF-β表达量最高(P＜0.05).SEM观察:PRP组材料表面MG63密集,生长状态良好.CCK-8法测定细胞增殖活性,显示4.8％PRP组吸光度A450nm值高于对照组(P＜0.05).FCM检测表明:PRP组第2天S期细胞百分比高于对照组(P＜0.05);第10天PRP组G0/G1期细胞百分比高于对照组(P＜0.05)；除第6天外,PRP组G2/M期细胞百分比均高于对照组.RT-PCR结果表明:PRP组MG63的Col-Ⅰ mRNA表达量较对照组明显上调.结论 适宜体积分数的PRP对MG63的增殖、迁移和相关蛋白、基因的表达有促进作用,PRP具有统一、协调细胞生物学行为的作用.
富血小板血浆 人成骨样细胞MG63 细胞增殖