目的:利用人工Mu转座技术研究解淀粉芽孢杆菌的功能基因.方法:使用加入0.5%甘氨酸的M9-YE培养基,细菌生长到D600nm值为0.5时制备感受态细胞,加入Mu转座复合物(含42 ng Mu DNA),以1.8 kV电压电击获得转化子.对转化子进行功能突变表型筛选、基因克隆、DNA序列分析,以确定插入突变的功能基因.结果:获得最佳电转化效率1.9×103CFU/μg DNA.同时获得2个芽孢杆菌抑真菌作用的调节基因rpmGA和yxlC.结论:人工Mu转座技术是研究芽孢杆菌功能基因的快速有效的好方法.
解淀粉芽孢杆菌 电转化 人工Mu转座技术