[目的]建立检测重组乙肝疫苗(汉逊酵母)纯度的高效液相色谱法(HPLC).[方法]采用TSK gel G5000PW色谱柱,优化流动相、流速、柱温及pH等参数,确定最佳试验条件;并与TSK gel G3000SW色谱柱检测乙肝纯度的方法进行比较.[结果]确定了最佳试验条件:流动相为0.01 mmol/L PB(磷酸缓冲液),流速为0.6 mL/min,柱温为室温(20℃),pH为7.0,检测波长280 nm;乙肝表面抗原(HBsAg)在色谱柱TSK gel G5000PW和TSK gel G3000SW的保留时间分别为8.5 min、17.5 min;检测时间分别为20 min、40 min.[结论]建立的HPLC方法专属性、重复性良好,更省时、高效,可用于HBsAg的纯度检测.
高效液相色谱法 乙型肝炎病毒 重组乙型肝炎疫苗 纯度 乙肝表面抗原