费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)RT19与耐盐有关的4.4kb DNA片段含有3个相间的开放阅读框,经亚克隆及功能检测,证实其中的ORF2与耐盐有关.将ORF2分别克隆到表达载体pTHioHisA、B和C上,得到3个重组质粒pGA、pGB和pGC,转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5π. 经IPTG诱导后和作SDS朠AGE分析,发现只有pGC编码的融合蛋白获得了表达.其分子量为53kDa,恰好是trxA基因编码的硫氧还蛋白与推测的蛋白质分子量之和.Western印迹证实,表达的蛋白质是trxA基因和目的基因编码的.
费氏中华根瘤菌 耐盐 克隆 表达