目的观察体外培养人胎脑神经干细胞球的形成,并鉴别球内是否有成熟的神经细胞存在,证实神经球的异质性.方法用添加表皮生长因子(EGF,20 ng/mL)和成纤维细胞生长因子2(FGF2,10ng/mL)的无血清N2培养基,从人胎脑培养获得神经干细胞球,在倒置显微镜下观察其形成过程,用间接免疫荧光技术检测神经球的细胞表型标志神经丝(NF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、半乳糖脑苷脂(GalC)和巢蛋白(nestin)的表达,并计算出阳性细胞球的百分比.结果前6 d,培养中形成大量的细胞集落,检测的细胞标志中,只有nestin+,其余标志均为阴性.培养至12 d左右,细胞球的数量减少约1/3,球体的形态和大小也不相同.培养30 d的神经球中,69.2%神经球为NF+,81.8%为GFAP+,100%为nestin+,未观察到GalC+.结论神经球有个成熟过程,神经球之间具有异质性,球内的细胞构成也具有异质性.
神经球 人胎脑 神经球构成细胞 细胞表型标志