[目的]为构建狗脊蕨叶cDNA 文库,保存珍贵基因资源,克隆和研究与有效成分合成相关的基因等提供技术参考.[方法]以狗脊蕨叶片为材料,采用CTAB法、一步法、酚-SDS法和RNA试剂盒提取分离法提取总RNA,通过比较分析确定最优方法.[结果]这4种方法都能提取出18、28 S的RNA,但CTAB法和试剂盒提取分离法的总RNA质量较高,CTAB法还提取出清晰的5S RNA.一步法和SDS法带型模糊,有降解现象.CTAB法提取的狗脊蕨叶片总RNA 质量较好,28S、18S和5S条带清晰,且无明显降解.CTAB提取法OD260/OD280的值在1.93～2.06,试验中其OD260/OD280值为2.012,接近 2.0,纯度较高.一步法和SDS法OD260/OD280＞2.0,试剂盒法OD260/OD280＜2.0.[结论]CTAB法适合提取的狗脊蕨叶片总RNA,质量较好,可用于cDNA合成、文库构建等后续分子生物学试验.
狗脊蕨叶片 总RNA 提取