前列腺特异膜抗原是一种具有高度前列腺特异性的糖蛋白,其表达的增高与肿瘤的术后复发、激素抵抗及较差的预后正相关,在前列腺癌的诊断和治疗中有广泛的应用前景.从前列腺癌组织提取总RNA,利用RT-PCR技术获得PSMA基因的全长序列,构建了重组酵母表达载体pPIC3.5K/PSMA.电击法转化 Pichia pastoris酵母,通过表型筛选和PCR鉴定证实该基因已稳定整合入Pichia pastoris酵母基因组中.SDS-PAGE显示,获得的PSMA蛋白分子量约100kD,表达产物经Western印迹证实可特异地与PSMA单克隆抗体4G5结合.结果表明,成功地获得PSMA编码的cDNA并在酵母细胞中获得表达.
前列腺特异膜抗原 Pichia pastoris酵母 基因表达 鉴定