目的 探讨小干扰RNA(siRNA)干扰内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)基因表达对高氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的影响及作用机制.方法 培养人肺腺癌A549细胞,用构建的siRNA片段通过脂质体LipofectamineTM 2000转染A549细胞,将细胞分为高氧空白组、阴性对照(阴性siRNA)组和实验(GRP78-siRNA)组3组,利用950 mL/L O2建立高氧细胞损伤模型.48 h后通过实时定量PCR检测C/EBP同源蛋白(CHOP) mRNA的表达,Western blot技术检测CHOP蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果 应用siRNA抑制GRP78表达后,GRP78 mRNA和蛋白表达下调、CHOP mRNA和蛋白表达上调、A549细胞凋亡增加.结论 下调GRP78基因可增强高氧活化的CHOP凋亡途径,诱导肺泡上皮细胞凋亡.
小干扰RNA 葡萄糖调节蛋白78 肺泡上皮细胞 凋亡