为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2) mRNA表达水平,改进竞争性RT-PCR方法,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制.将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6 RNA聚合酶启动子序列,将DNA竞争模板在体外转录成为RNA.以此RNA作为竞争性RT-PCR中的竞争模板,与所提取的总RNA一同进行RT-PCR,消除逆转录效率对定量结果的影响.定量检测碘缺乏和正常大鼠颅骨总RNA中BMP-2 mRNA的水平.碘缺乏大鼠(1 d～84 d)颅骨中BMP-2表达含量明显降低.1 d时降低6.43倍,以后差距逐渐缩小,至84 d相差1.55倍.结果提示,碘缺乏所致的骨骼发育不良与BMP-2表达不足有关,结果首次揭示微量元素碘和甲状腺激素与BMP-2基因表达的调控有关.
碘缺乏 骨发育 RNA竞争模板 骨形态发生蛋白-2