目的 荧光共振能量转移(fluorescent resonance energy transfer,FRET)探针由于自身仍存在诸多局限,其在活体成像领域尚未得到广泛应用.本文旨在解决FRET探针在活体定量分子影像应用中所存在的瓶颈问题,即如何利用FRET探针精准计算目标物浓度,以及如何基于FRET探针实现三维成像.方法 基于探针和目标物结合时的化学反应平衡关系,提出一种新型分析方法,以精确定量待测物[钙调素(calmodulin,CaM)]的浓度.同时对于FRET探针的活体分子成像,结合荧光透射成像(3D-FMT)方法,建立了可进行三维时空动态FRET检测的平台系统,对FRET探针的测量结果(即待测物浓度)进行实时定量的三维重建.结果 准确地定量了待测物CaM浓度,并得到了高质量的3D-FRET分布影像.结论 提出FRET探针在活体成像应用领域两个关键问题的解决方案,为基因编码FRET探针向活体分子影像领域的推广奠定了重要的技术基础.
荧光共振能量转移 基因编码FRET探针 荧光蛋白 荧光断层成像 钙调素