研究旨在比较4种不同来源木聚糖酶基因在大肠杆菌E.coli BL21中表达后的酶活等性质,为生产中筛选高表达量及耐极性木聚糖酶基因提供依据.根据已发表的木聚糖酶基因序列设计引物,分别扩增出浸麻芽孢杆菌( B.macerans )B3、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis )B6、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)B10和枯草芽孢杆菌(B.subtilis)B12的木聚糖酶基因片段,经克隆表达后获得4种工程菌.经培养和IPTG诱导后进行SDS-PAGE电泳检测及酶特性分析.测序结果表明,4个基因的开放阅读框均为642 bp.其中前3种木聚糖酶基因均为首次报道.4种重组木聚糖酶在55℃下的酶活分别为:36.16、3.85、7.22、98.98 U/ml.4种重组木聚糖酶的最适反应温度均在50～60℃,且枯草芽孢杆菌木聚糖酶最为耐热.结果提示,枯草芽孢杆菌来源的木聚糖酶具有较高的酶活和较好的耐热性.
木聚糖酶基因 克隆 表达 酶学性质