耐冷的植物促生菌(plant growth-promoting bacteria,PGPB)对于研制在低温环境下应用的微生物菌肥具有重要意义.为获得具有耐低温能力的PGPB资源,本研究采用选择性培养基在15℃下从祁连山高寒草地2种优势豆科植物扁蓿豆(Melissitus ruthenica)和黄花棘豆(Oxytropis ochrocephala)根际和根内筛选固氮、解磷菌株,并定量分析菌株的固氮、解磷、分泌吲哚-3-乙酸(IAA)、合成铁载体和1-氨基环丙烷-1-羧酸(l-aminocyclopropane-l-carboxylic acid,ACC)脱氨酶等促生特性.结合16S rRNA的限制性片段长度多态性PCR技术(PCR-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)与16S rRNA基因测序方法进行菌种鉴定,并挑选促生性能突出的优良菌株接种祁连山退化天然草地补播主要牧草品种—垂穗披碱草(Elymus nutans)幼苗,验证其对垂穗披碱草在低温下生长的影响.结果共筛选到87株PGPB,其中45株在4℃仍有促生活性,所有菌株分属5个菌属,以假单胞菌属(Pseudomonas)占绝对优势,兼具2种以上促生功能的占63.22％.接种不同功能特性的PGPB对垂穗披碱草的地下部分(根长,根表面积,平均根直径,根尖数,根干重)和地上部分(株高,茎粗,茎干重)均表现出一定促生效果,接种固氮菌株和分泌IAA菌株的促生效果最突出.本研究筛选到的耐冷PGPB菌种资源具备在高寒地区农牧业生产中开发应用的潜力,对研制适用于青藏高原退化草地修复的微生物菌肥有重要意义.
植物促生菌(PGPB) 耐冷 分离 祁连山 高寒草地