从实验室保存的一株能高效降解苯胺的不动杆菌中克隆到完整的苯胺双加氧酶基因簇,序列分析表明该基因簇包含6个完整的ORF,全序列与已报道的不动杆菌YAA的苯胺双加氧酶基因簇在氨基酸水平上有较高的同源性.将该基因簇连接于pLAFR6载体,电转化至E.coli,构建了该基因簇的工程菌.发酵条件优化表明,在苯胺浓度0.5mg/ml,采用pH7.0的LB培养基,E.coli DH5α为宿主菌,于37℃培养,接种量为3%的条件下,邻苯二酚产量在20h达到0.546mg/ml,底物分子水平转化率可达92.4%.
苯胺 苯胺双加氧酶基因簇 邻苯二酚