目的建立人精子间期核双色荧光原位杂交(dud-color fluorescence in situhybridization,D-FISH)的实验方法.方法采用双色荧光原位杂交技术对12例正常精子标本进行间期核的原位杂交,并统计精子间期核X、Y染色体的杂交信号颗粒数量.结果在显微镜下可见精子头部有以Bioton标记的pBamX7探针显示1个绿色杂交信号为X染色体精子(X精子),以Digoxigenin标记的pY3.4探针显示1个红色杂交信号为Y染色体精子(Y精子);精子头部有2个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子(如XX、XY、YY精子);间期核背景经DAPI复染显示蓝色;统计12例正常精子标本总共4800个精子间期核,X精子杂交信号阳性率为48.56%,Y精子杂交信号阳性率为49.73%,总共统计24000个精子,3种双体总杂交率为0.197%.结论本法具有荧光杂交信号直观易分辨、短时间内能大量分析精子数量和实验操作相对简便、结果准确可信等优点.
双色荧光原位杂交 非整倍体率 人精子染色体 DNA特异性探针