目的 观察腺苷酸环化酶AC1和AC4对泡沫细胞胆固醇流出的影响.方法 以人AC1和AC4基因为靶点,设计合成shRNA寡核苷酸片段,插入慢病毒载体pGMLV-SC1,构建重组慢病毒载体.用构建的AC-shRNA慢病毒感染THP-1细胞,qPCR检测干扰载体对AC1和AC4基因的干扰效果.慢病毒感染泡沫细胞后,采用液体闪烁计数法测定apoA-1介导的泡沫细胞胆固醇流出率.结果 测序结果表明,AC1和AC4基因的shRNA寡聚核苷酸序列已成功插入慢病毒载体.荧光观察显示,两种慢病毒的感染效率达80％.qPCR分析表明,AC1-shRNA和AC4-shRNA干扰载体对靶基因有明显的抑制效果(P＜0.01),其抑制效率分别为83.9％和80.1％.AC1和AC4-shRNA慢病毒感染泡沫细胞后,胆固醇流出明显降低(P＜0.01).结论 本实验初步证实AC1和AC4可降低泡沫细胞胆固醇流出,提示其可能在胆固醇代谢中起作用.
腺苷酸环化酶 泡沫细胞 胆固醇