为揭示菊芋(H elianthus tuberosus L.)查尔酮合成酶(chalcone synthase,CHS)基因的功能,以菊芋'廊芋8号'叶片为材料,采用同源克隆和RT-PCR技术,克隆得到菊芋 CHS基因命名为 HtCHS,其编码区全长为1 197 bp(GenBank登录号M N124515),编码398个氨基酸.H tC H S的基因组DNA(gDNA)全长为1 567 bp,含2个外显子和1个内含子.序列比对和系统进化树分析显示,不同植物中的CHS氨基酸序列具有极高的同源性,菊芋与同属的向日葵CHS氨基酸序列一致性达到99.25％,共聚于一个分支.HtCHS蛋白相对分子质量为43.61 ku,等电点为6.33.HtCHS蛋白具有查尔酮合成酶结构域,属于查尔酮合成酶超家族成员,HtCHS不含信号肽和跨膜区,属于非分泌蛋白.实时荧光定量PCR结果显示,H tCH S在根中表达量最高.与对照相比,150 mmol·L-1 NaCl和20％PEG 6000处理6 h时 H tC H S表达显著上调,处理12 h时显著下调.原核诱导表达分析结果显示,成功诱导出与预测蛋白大小一致的目的蛋白.
菊芋 查尔酮合成酶 基因克隆 生物信息学分析 原核表达 基因表达分析