采用一株大肠杆菌BL21(DE3)[pBLMVL2EGF]生产人表皮生长因子(hEGF),其中hEGF表达由PL启动子控制并通过phoA信号肽分泌到胞外.实验结果表明:诱导阶段以恒定比供应速率流加葡萄糖时,流加速率对hEGF的表达和分泌有很大影响.当葡萄糖比供应速率为0.122g/(g·h)时,hEGF表达水平最低,分泌效率最差,只有37.5%;随着葡萄糖比供应速率的增加,胞外和胞内hEGF比生产速率明显增加,当葡萄糖比供应速率为0.196 g/(g·h)时,单位菌体产生的hEGF水平最高(121.6 mg/g),其中分泌至胞外的hEGF占42%.此外,诱导前补充有机氮源有利于提高诱导初始hEGF的生产速率.
人表皮生长因子 PL启动子 分泌 大肠杆菌