用聚合酶链式反应扩增并克隆了真养产碱杆菌(Alcaligenes eutrophus)中合成聚-β-羟基丁酸酯(PHB)的一个关键酶--3-酮硫裂解酶基因phbA.DNA序列分析表明,所克隆的基因与国外报道序列同源性很高,只有1个碱基的区别.为了检测该基因的功能及导肽的定位效率,构建了带有导肽基因的组成型表达载体,并转化烟草得到转基因植株.蛋白质电泳结果表明,导肽可以将外源蛋白定位于质体,phbA基因能翻译成相应大小的蛋白.酶活性分析证实,转基因烟草中的3-酮硫裂解酶可以催化乙酰-CoA合成乙酰乙酰-CoA.
phbA基因 聚-β-羟基丁酸酯(PHB) 3-酮硫裂解酶