建立了免疫亲和柱净化/高效液相色谱串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中生物素的方法.样品用磷酸盐缓冲液溶解,并通过生物素免疫亲和柱净化后,采用Ultimate AQ-C18(2.1mm× 100 mm,3μm)色谱柱分离,以甲醇-0.1％甲酸(30∶70)为流动相,进样量为5.0 μL,流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,并经电喷雾电离串联质谱在多离子反应监测(MRM)模式下进行测定,定量子离子为227.2,定性子离子为227.2、96.9,碰撞能量分别为10、30 V.结果显示,生物素在0.1～1.0μg/mL范围内线性关系良好,方法检出限为20.3 μg/kg.对空白试样进行3个浓度水平的加标回收实验,测得加标回收率为92.7％～98.5％,相对标准偏差为1.7％ ～ 1.9％.该方法具有样品处理简单、灵敏度高、重现性好、分析时间短等优点,可以满足婴幼儿配方乳粉中生物素含量的测定要求.
免疫亲和柱 乳粉 生物素 高效液相色谱-串联质谱