利用三亲接合的方法将含有ntrB基因部分序列的自杀载体导入固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501中,获得了ntrB基因的非极性突变株(AdnB).RT-PCR实验证明,AdnB菌株中与ntrB连锁的下游基因ntrC能正常转录;ntrB基因的非极性突变导致细胞完全丧失固氮能力,但其突变株能在含NH4+的基本培养基K中正常生长;在以硝酸盐为唯一氮源时,AdnB比野生型A1501的细胞生长延迟约14～18 h,认为ntrB基因与硝酸盐的氮代谢有关.功能互补实验结果表明,AdnB的功能互补菌株能完全恢复细胞的固氮作用和对硝酸盐的利用.
斯氏假单胞菌A1501 ntrB非极性突变株 功能互补