目的:构建带Flag标签的人转录因子激活蛋白2γ (TFAP2γ)基因真核表达载体,获得Flag-TFAP2γ蛋白,检测其对乳腺癌细胞生长的影响.方法:采用PCR技术从乳腺文库中扩增出人TFAP2γ基因,并将其正确插入Flag载体;将重组质粒与空载体转染人乳腺癌细胞系ZR75-1和MCF-7细胞后,Western印迹检测表达情况,并进行生长曲线实验.结果:双酶切和测序鉴定表明,Flag-TFAP2γ真核表达质粒构建成功,转染ZR75-1和MCF-7细胞后获得表达;生长曲线实验结果表明,TFAP2γ可促进乳腺癌细胞的生长.结论:构建了带Flag标签的人TFAP2γ基因真核表达载体,并能在乳腺癌细胞ZR75-1和MCF-7中表达,且能促进细胞的生长.本实验为进一步研究TFAP2γ在乳腺癌中的功能奠定了基础.
人转录因子激活蛋白2γ 克隆 真核表达