在集胞藻PCC6803中,基因敲除是研究基因功能的最直接有效的方法,但是对于某些生存必需的基因则无法通过这种方法获得突变株.为研究集胞藻PCC6803中此类基因的功能 ,在其基因组中构建了一个petE基因启动子(PpetE)控制的铜离子诱导表达的平台.将集胞藻PpetE装配在lacZ报告基因的上游,通过同源双交换整合到这种蓝藻的基因组中.通过调节培养基中铜离子的浓度发现,lacZ的表达能够人为控制.特别是当铜离子浓度在6-400nmol/L范围时,LacZ活力随铜离子浓度增加呈S型增长关系.利用这个铜离子诱导表达平台,可以控制某些必需基因的表达:提供铜离子维持细胞生存;而撤去铜离子时则关闭基因的表达 ,可以观察其对生命活动的影响.
集胞藻 PpetE lacZ 铜离子