从裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)基因组中克隆获得编码醛酮还原酶SpoAKR3C2的基因,并成功构建了表达SpoAKR3C2的重组工程菌Escherichia coli BL21(DE3)/pET 28b-SpoA KR3C2.为了提高SpoAKR3C2在E.coli BL21(DE3)中的表达水平,分别考察了种子液接种量、诱导时间、温度、转速以及诱导剂浓度等对产醛酮还原酶SpoAKR3C2的影响.结果表明:该酶的最适诱导温度为19℃,最适转速为140 r/min,最适诱导时间为14 h,最适接种量为1.5％(体积比).以IPTG为诱导剂,最适诱导剂浓度为0.1 mmol/L.在最佳诱导条件下,粗酶液中SpoAKR3C2对酮基泛解酸内酯的比酶活可达6.762 U/mg,与未优化前相比提高了3.4倍.
裂殖酵母 醛酮还原酶 克隆表达 优化 诱导