以我国重要的生物能源灌木--中间锦鸡儿枝叶和种子为材料,根据Genbank中已经发表fad2基因的同源序列,利用PCR技术克隆得到两个基因片段.在GenBank中Blast(GenBank登录号AY957393和AY957394),所得基因片段和同属豆科的Glycine max Gm fad2-2a,同源性高达88 %,属于fad2基因编码区中间片断.将所得片段经BamHI和SacI酶切后插入表达载体质粒pBI121,构建了反义表达载体pBI121 fad2,并利用农杆菌介导法转入烟草叶片,获得了抗卡那霉素和安苄青霉素的再生烟草植株.初步分析结果表明,与对照烟草相比较,转基因烟草种子脂肪酸含量没有明显差异,而亚油酸则减少了10.3 %.这为进行下一步柠条分子改良,获得高单不饱和脂肪酸的优质中间锦鸡儿新品种以及改造其它木本生物柴油用木本原料植物奠定了基础.
中间锦鸡儿 fad2基因 反义表达载体