为提高蛋白表达量,研究选用串联表达技术对鸡β-防御素5(AvBD-5,也称Gal-5)重组蛋白进行表达及其生物学活性检测.按照NCBI上鸡β-防御素5的cDNA编码区序列,优化其基因序列后串联得到2×Gal-5,将2×Gal-5与pET-28a双酶切后连接为重组表达载体pET-28a-2×Gal-5,之后将pET-28a-2×Gal-5转化到大肠杆菌(BL21)中诱导表达蛋白;重组蛋白表达成功后对其进行纯化以及体外抗菌活性的测定.结果表明,重组蛋白2×Gal-5在BL21中成功表达,分子质量约为12 ku,主要以包涵体形式存在;纯化后的重组蛋白对大肠杆菌有明显的抗菌活性,对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和链球菌抗菌活性较弱.试验成功构建可串联表达Gal-5且具有生物学活性的大肠杆菌原核表达载体.
鸡Gal-5 串联表达技术 大肠杆菌 表达载体 抗菌活性