为了弄清小麦多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP)的作用机制,并为其在基因工程中的应用提供依据,对其结构进行了研究.用Edman降解法测得小麦PGIP的N端序列为Lys-Pro-Leu-Leu-Thr-Lys-Ile-Thr-Lys-Gly-Ala-Ala-Ser-Thr.用CD谱研究其二级结构,发现小麦PGIP天然态含有43.7%的β折叠和13.1%的α螺旋.酸碱和温度变性引起了二级结构改变.不完全变性阶段,二级结构的变化表现为α螺旋无明显变化,β折叠遭到破坏;活性完全丧失阶段,β折叠变化很小,α螺旋含量明显减少.用NR/R(非还原/还原)双向对角线SDS-PAGE鉴定出小麦PGIP含有链内二硫键.用去糖基化法确证了小麦PGIP的糖含量为22%.小麦PGIP与双子叶植物PGIP相比,一级结构差异较大,同源性由36%变为9%;二级结构相似,都是高β-折叠的蛋白;均具有链内二硫键;在糖含量上也相似.研究结果为进一步弄清小麦PGIP作用机理打下了基础,同时对于植物抗赤霉病基因工程具有重要意义.
多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 小麦 结构