为澄清中性粒细胞胞浆Ca2+和某些O1.2产生相关激酶对NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的作用,利用分化为中性粒细胞样的HL-60细胞研究了胞浆Ca2+螯合剂BAPTA-AM和激酶抑制剂对这些激酶激活、NADPH氧化酶激活和肌动蛋白聚合的影响.使用10 μmol/L的Ca2+螯合剂BAPTA-AM去除胞浆Ca2+后,趋化肽fMLP诱导的O1.2产生明显减少,但不影响fMLP诱导的肌动蛋白聚合;8μmol/L的PKC激酶抑制物GFl09203x几乎完全抑制O1.2产生;50 μmol/L的p38激酶抑制物SB203580、50 μmol/L的ERK激酶抑制物PD098059和0.1 μmol/L的PI3激酶抑制物渥曼青霉素(wortmannin)使fMLP诱导的O1.2产生大约减少一半;其中Wortmannin还抑制fMLP诱导的肌动蛋白聚合;fMLP刺激细胞后,PI3-K、p38和ERK激酶迅速激活,但这些激酶的激活对Ca2+是非必需的.这些结果说明Ca2+依赖途径(PKC)和Ca2+非依赖途径(PI3-K、p38和ERK)对NADPH氧化酶激活都起着重要作用,而Ca2+非依赖途径中的PI3-K激酶还参与中性粒细胞样HL-60细胞的肌动蛋白聚合.
胞浆Ca2+ 激酶 NADPH氧化酶 肌动蛋白聚合 fMLP HL-60细胞