根据南极适冷菌Psychrobacter sp.G的基因组完成图,对其假定蛋白基因PSYCG_10180全长进行了基因克隆、序列分析与异源表达,并利用qRT-PCR和western blotting技术对其在不同温度/盐度胁迫条件下的表达特征进行了研究.序列分析表明,与蛋白PSYCG_10180相似性较高的均为假定蛋白;相似性最高的已知功能蛋白为蓝光传感蛋白(WP_010201745.1),二者的相似性仅有37%.在mRNA水平上,基因PSYCG_10180的表达被低温(0℃)显著诱导,在2,12 h均被不同盐度显著抑制;在温度/盐度协同胁迫下,2 h内低温均能诱导其表达,而高温低盐(30℃,15)则抑制其表达.在蛋白水平上,不同温度胁迫下,蛋白PSYCG_10180的表达量在2 h变化不大,12 h时均被诱导;在不同盐度胁迫下,该蛋白的表达在12 h均被诱导;在温/盐协同胁迫下,除在2 h被高温低盐(30℃,15)诱导外,其余条件下该蛋白的表达均被抑制.比较分析表明,在mRNA水平上,基因PSYCG_10180的表达更容易受温度的影响;在蛋白水平上,盐度对该基因表达的影响则要大于温度;在温盐协同胁迫时,盐度起主导作用.冻融试验表明,表达该假定蛋白可显著提高重组菌株的冻融存活率.本研究表明,假定蛋白基因PSYCG_10180可能在菌株Psychrobacter sp.G的低温等环境适应性中起着重要作用.
Psychrobacter PSYCG_10180 胁迫表达 qRT-PCR westernblotting