根据已发表的A/California/04/2009(H1N1)基因序列,通过基因合成获得该毒株的完整M、HA和NA的基因序列,并克隆于pET32a.从经典猪流感病毒A/swine/2003(H1N1)提取的RNA中扩增了完整M、HA和NA的基因序列,并克隆于pGEM-T.测序后采用体外转录方法制备6种RNA纯品.初步定量稀释后,将2个病毒的3个基因分别混合分装,采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验,并委托外部实验室采用外标实时定量RT-PCR方法对所有RNA片段进行定值.均一性结果显示瓶间差异小于5%,稳定性实验表明室温20～25℃(相对湿度20%～50%)14天,2～8℃6个月以及-20℃保存1年的含量均无明显变化.
计量学 2009大流行H1N1流感病毒 经典H1N1猪流感病毒 核酸扩增 标准物质