副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种能引起食源性疾病的重要病原菌.首次将一种新颖的核酸扩增技术-环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)应用于副溶血弧菌的快速检测.针对副溶血弧菌不耐热溶血毒素基因(tlh)设计4条特异性引物(两条内引物和两条外引物)进行LAMP扩增,对扩增反应进行优化,最佳反应时间为60min,反应温度为60℃.对12种细菌共28株菌进行LAMP扩增,仅14株副溶血弧菌得到阳性扩增结果,证明引物具有很高的特异性.副溶血弧菌基因组DNA和纯培养物的检测灵敏度分别约为90fg和24cfu/ml.对模拟食品样品进行直接检测,检测限为89cfu/g.结果表明,该方法检测副溶血弧菌特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低,1小时即可完成,有望发展成为快速检测副溶血弧菌的有效手段.
副溶血弧菌 环介导等温扩增技术(LAMP) 不耐热溶血毒素基因(tlh) 检测