以正常腹腔巨噬细胞(PMφ)和脂多糖(Lipopolysacharide,LPS)刺激的PMφ为对象,用MTT法和激光共焦扫描显微术检测肿瘤坏死因子α(TNFα)释放量和单细胞[Ca2+]i的动态变化,研究了大黄酸(Rhein)的作用特征和机理.结果显示,大黄酸对正常PMφ释放TNFα没有明确的影响,但对LPS刺激的PMφ释放TNFα有显著的抑制作用,其抑制作用随浓度增加而增强,10-4mol/L大黄酸抑制了10μg/mL LPS效应的72%.值得注意的是,大黄酸不但抑制了LPS引发的PMφ[Ca2+]i的升高,而且使LPS引发的[Ca2+]i由宽平台峰状转变为振荡动力学模式,胞外介质无钙时又转变为更低幅值的峰.以上结果表明,大黄酸降低LPS引发的PMφ的[Ca2+]i升高是其抑制TNFα释放的信号传导通路的重要环节,并提示大黄酸在降低胞内钙释放和胞外钙内流的同时又对其动力学进行了类周期性的调制.
巨噬细胞 脂多糖 大黄酸 激光共聚焦扫描显微术 TNFα 细胞内自由钙浓度([Ca2+]i)