本研究以鲫鱼(Carassius auratus)为研究对象,采用巢式PCR和RACE技术克隆鲫鱼半胱亚磺酸脱酸酶CSAD基因cDNA序列,并且利用实时荧光定量PCR检测了CSAD mRNA在鲫鱼不同组织和昼夜节律中的相对表达水平,同时还研究了牛磺酸对鲫鱼肠道CSAD mRNA表达的影响.结果表明:(1)鲫鱼CSAD基因cDNA序列包含186bp的5'UTR序列,675bp的3'UTR序列,1503bp开放阅读框,编码500个氨基酸.同源性分析表明,鲫鱼和鲤鱼的同源性为97.2％.系统发育分析表明,鲫鱼与鲤鱼之间的亲缘关系最接近,置信度为100.经预测,其编码的蛋白质的分子量和等电点分别为56.82kDa和5.77;(2) CaCSAD mRNA在肌肉、心脏、肠道及肝脏中的表达水平较高,在脑和鳃组织中的相对表达量较低;(3)鲫鱼肠道CSAD mRNA的相对表达量在6:00am点时最高,9:00pm点时相对表达量最低;(4)鲫鱼CSAD的相对表达丰度随着牛磺酸添加量的增加而逐渐下降.本研究结果不仅有助于理解鲫鱼CSAD基因的分子特征,同时将为进一步研究鱼类CSAD营养调控功能提供理论依据.
鲫鱼 半胱亚磺酸脱酸酶(CSAD) 牛磺酸 相对表达量