人可溶性gp190(sgp190)是白血病抑制因子(LIF)的可溶性受体,可能在LIF行使众多生物学功能中扮演着重要的角色.为获得这一蛋白以研究它在人体内的生物学活性,在酵母Pichia pastoris中实现了重组sgp190分泌表达.利用基因重组技术,将编码人可溶性gp190(LIF受体α亚基gp190胞外区)cDNA克隆到毕赤酵母Pichia pastoris分泌表达载体pPIC9K,构建了重组表达质粒pPIC9K- sgp190.原生质体法转染Pichia pastoris GS115菌株,经过G418筛选,得到了高效分泌表达sgp190蛋白的毕赤酵母菌株GS115/pPIC9K-sgp190,sgp190蛋白占摇瓶培养表达上清中总蛋白质的26%.经初步纯化,对表达产物的性质鉴定表明,其分子量约125 kD,具有免疫活性.对sgp190体外活性分析表明它能够抑制LIF诱导滋养层细胞分泌hCG.
毕赤酵母 白血病抑制因子受体 可溶性受体 分泌表达