构建CBFβ敲除HepG2细胞系及CBFβ真核表达载体。 CRISPR/Cas9基因敲除,将表达CBFβ sgRNA, Cas9的表达载体共转HepG2细胞,嘌呤霉素筛选基因敲除细胞,构建细胞系。 infusion cloning方法构建CBFβ表达载体,HepG2细胞提取RNA,反转成cDNA,设计CBFβ引物扩增目的基因,连接,转化,挑取阳性克隆,PCR鉴定,酶切鉴定,测序进一步鉴定。获得了稳定敲除CBFβ的HepG2细胞系及在HepG2细胞中稳定表达的CBFβ真核表达载体。为研究CBFβ基因在对乙型肝炎病毒复制的调控及调控机制奠定了基础。
CBFβ CRISPR/Cas9 基因敲除 真核表达载体