为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞的产生,细胞经乙醇固定、DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核分裂及纺锤体定位;最后检测SIK1过表达对细胞生存能力的影响.结果表明:过表达Sik1会干扰纺锤体定位,但对细胞核迁移没有明显影响.在16℃低温胁迫条件下,过表达Sik1降低了纺锤体定位突变体kar9Δ的生长活力却部分恢复了num1Δ细胞的生长,说明Sik1可能在Dynein通路中起作用.
芽殖酵母 纺锤体定位 Sik1 Num1 核迁移