本研究旨在探索贝莱斯芽孢杆菌(Bacillusuelezensis)ND诱变育种的最佳条件,确定原生质体的最佳制备条件和融合条件.结果表明,紫外灯下50 cm处诱变30 s涂布于2.0％ LiCl平板的复合诱变,最有利于获得VK2产量提高的突变子.溶菌酶0.1 mg/mL于33 ℃下保温20 min,原生质体再生率最高,为41.2％;65 ℃热处理10 min或紫外处理40 s,原生质体的灭活率可达到100％;40％ PEG-6000在37 ℃下处理6 min原生质体融合频率最高,为9.8％.本研究将分光光度法测定与HPLC法测定提取液中维生素K2(VK2,MK-7)的含量相结合构建了一种可快速筛选产VK2突变体的方法,最终获得一株VK2产量提高31.42％的突变菌株.另外也为贝莱斯芽孢杆菌的诱变育种和原生质体制备提供了研究基础.
贝莱斯芽孢杆菌 维生素K2 诱变育种 原生质体