本研究旨在建立猪胎儿肾脏成纤维细胞体外培养体系,并探讨其作为猪体细胞克隆供体的可能性.使用组织块培养法从体长为10 cm以上的猪胎儿分离得到猪胎儿肾脏成纤维细胞,绘制了生长曲线,鉴定了细胞类型并且进行了细胞周期同期化效果的研究.结果表明:该培养体系可以支持猪胎儿肾脏成纤维细胞的体外生长,单个细胞均为梭形细胞,抗波形蛋白免疫荧光染色显示为阳性,而抗角形蛋白免疫荧光染色为阴性,分离到的细胞为胎儿肾脏成纤维细胞.使用血清饥饿法和接触抑制法诱导细胞进入G0/G1期,并且分别比较两者同期化效率,结果显示:血清饥饿2 d和4 d 的同期化效率差异不显著,但都比8 d组的高(88.97%和87.69%比82.45%,P＜0.05);接触抑制4 d、6 d组间同期化效率差异不显著,但都比0 d组的高(85.56%和85.89%比81.82%,P＜0.05).本研究在国内首次分离得到猪胎儿肾脏成纤维细胞,已经在体外传代培养到32代,其同期化效果好,可以作为体细胞克隆供体.
猪 胎儿肾脏成纤维细胞 组织块培养 间接免疫荧光 流式细胞仪 细胞周期同期化