目的 研究四周尾部悬吊模拟失重大鼠胸主动脉(thoracic aorta,TA)和腹主动脉(abdominal aorta,AA)溶酶体相关分子的基因和蛋白表达改变.方法 采用4周尾部悬吊大鼠模拟失重对心血管系统的影响,通过Western blot技术、免疫组织化学染色和实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测溶酶体相关膜蛋白1(lysosomal associated membrane protein 1,LAMP1),调控溶酶体合成的转录因子EB(transcription factor EB,TFEB)、转录因子 E3(transcription factor E3,TFE3)以及溶酶体相关基因包括 LAMP1、酸性神经酰胺酶(N-acylsphingosine amidohydrolase 1,ASAH1)、液泡型 ATP 酶转运协助蛋白 1(adenosine triphosphatase(ATPase)H+transporting accessory protein 1,ATP6AP1)、液泡型 ATP 酶 H 亚基(ATPase H+transporting V1 subunit H,ATP6V1H)以及粘脂蛋白 1(mucolipin 1,MCOLN1)的蛋白表达、分布和 mRNA 水平变化.结果 Western blot 显示,与对照(control,CTR)组相比,悬吊(hindlimb unloading tail suspension,HU)组大鼠TA和AA的LAMP1蛋白表达均显著降低(P＜0.05).免疫组化则显示LAMP1主要分布于TA和AA的内膜和中膜;CTR大鼠TA内膜、中膜的LAMP1蛋白表达均显著高于AA(P＜0.05);与CTR组相比,HU组大鼠TA、AA内膜LAMP1表达无明显变化,但在TA中膜呈现均匀的表达降低,而在AA中膜则呈现不均匀的表达降低(P＜0.05);qRT-PCR显示,与CTR组比较,溶酶体相关基因表达在HU组大鼠TA显著增加(P＜0.05),但在AA则显著降低(P＜0.05).转录因子TFEB和TFE3呈现与溶酶体相关基因相同变化,蛋白表达在HU组大鼠TA和AA中均显著降低(P＜0.05),但基因表达在TA增加,在AA降低(P＜0.05).结论 HU组大鼠TA和AA溶酶体相关蛋白表达均降低,但基因转录及转录因子表达呈现部位特异性改变,可能参与动脉重塑过程.
模拟失重 大鼠 胸主动脉 腹主动脉 溶酶体 溶酶体相关膜蛋白1 转录因子EB 转录因子E3