为筛选林木抗性基因,培育高抗转基因林木,以山新杨(Populus davidiana×P.alba var.pyramidlis)为试材,采用RT-PCR技术克隆获得1 560 bp的PdPapGH12(Potri.004G109200.1)基因cDNA,生物信息学分析表明该基因编码519个氨基酸,该蛋白属于亲水性酸性蛋白.依据亚细胞定位预测结果推测其在胞内发挥水解的作用.蛋白结构分析发现Pd-PapGH12与4个杨树品种的9条GHs序列具有高度一致性.qRT-PCR分析显示,PdPapGH12在茎基、老叶和根中表达量更高.并发现200 mmol/L NaCl、pH为10的Na2C03溶液和聚乙二醇6000(PEG 6000;质量分数30％)胁迫48 h其在茎尖、叶和根中均上调表达;5种植物致病病原真菌胁迫48 h均使其在茎尖的表达下调.只有核盘菌使其在叶中表达显著上调;尖孢镰刀菌、链格孢菌和立枯丝核菌使其在根内表达显著上调.受激素诱导48 h,ABA(100 μmol/L)仅使其在根部表达上调;SA(100 μmol/L)仅使其在叶中表达上调,而JA(100 μmol/L)使其在叶和根中的表达均上调.结果表明PdPapGH12参与植物抵抗逆境胁迫和激素诱导的信号途径.
糖苷水解酶 非生物胁迫 生物胁迫 激素诱导 qRT-PCR