目的观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究细胞周期调节蛋白-p27Kipl蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化;并探讨细胞凋亡与p27Kipl之间的关系.方法对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)予以不同浓度的庆大霉素溶液分别作用24～96h,以MTr法测定庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖的抑制率,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡条带,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞增殖动力学,Western Blot法检测细胞内p27Kipl的蛋白表达,RT-PCR法检测细胞p27KiplmRNA表达的变化.结果庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,具诱导LLC-PK1细胞凋亡的作用,凋亡率呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期.p27Kipl蛋白在细胞内的表达随着干预的庆大霉素浓度增加而逐渐上调,蛋白水平与凋亡率之间呈正相关,其mRNA表达趋势与其蛋白表达一致.结论庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期蛋白p27Kipl表达密切相关.
庆大霉素 LLC-PK1细胞 凋亡 p27Kipl