采用FIASCO方法构建大黄鱼(AC)n微卫星富集文库,从文库中随机挑选90个白色克隆,经过菌液PCR筛选得到60 (66.7%)个阳性克隆进行测序,其中有56个克隆(93.3%)含有 CA/GT 重复数大于5的微卫星序列.56个微卫星序列中,二核苷酸微卫星51个(91.1%),三核苷酸微卫星5个; 二核苷酸重复中有48个为(AC)n重复,占二核苷酸总数的94.1%.根据Weber的微卫星分类规则,完美型占75.0%,非完美型占8.9%,复合型微卫星占16.1%.共设计引物52对,在1个大黄鱼家系中35对引物所在位点具有多态性,28个(80.0%)位点子代基因型为1∶1∶1∶1(AB × CD/AB × AC )分离类型,6个位点属1∶1分离类型,1个位点属1∶2∶1 (AB× AB)分离类型.35个位点中有32个位点的分离符合孟德尔分离比(P>0.05),另外3个位点(LYC0137、LYC0139、LYC0152)明显偏离1∶1或者1∶1∶1∶1的孟德尔分离比(P<0.05).本研究开发的微卫星标记为大黄鱼微卫星遗传连锁图谱构建以及群体遗传学、分子进化和系统发育等研究提供了有用的分子工具.
大黄鱼 微卫星 孟德尔分离