目的 探索一种简单有效的大鼠睾丸间质细胞的分离、纯化方法.方法 采用0.1％ Ⅱ、Ⅳ型胶原酶混合液消化组织块分离睾丸间质细胞,用差速贴壁法纯化间质细胞,用3β-HSD免疫荧光染色鉴定间质细胞,同时用酶联法测定间质细胞分泌睾酮的活性.结果 (1)采用0.1％ Ⅱ、Ⅳ型胶原酶联合消化法分离睾丸间质细胞的最佳酶解时间为1 h左右.(2)利用差速贴壁纯化睾丸间质细胞的最佳贴壁时间为1～2 h.(3)培养24 h后,3β-HSD免疫荧光染色鉴定睾丸间质细胞纯度达(98.1±1.5)％,盼蓝染色鉴定睾丸间质细胞存活率达(97.3±1.6)％.(4)贴壁后培养12 h,睾丸间质细胞即达分泌高峰.结论 本实验建立了一种简便易行、稳定可靠的原代睾丸间质细胞分离纯化方法,通过此法能够获得足够多具高活性的高纯度睾丸间质细胞,并且睾丸间质细胞增殖能力较强.
睾丸间质细胞 分离 纯化 鉴定 大鼠