为探讨神经干细胞不同接种密度对其增生和分化的影响,取10～12周龄胎儿的大脑皮质用胰酶消化获得单细胞,分别以1×102/mL、1×104/mL和1×106/mL的细胞密度接种,用无血清培养基DMEM/F12、上皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白血病抑制因子(LIF)培养;用MTT法测OD值并观察神经干细胞的存活和增生情况.从培养基中剔除生长因子,继尔以10%胎牛血清诱导分化,用免疫细胞化学(ICC)方法,研究不同细胞密度培养后神经干细胞的分化能力.结果:在1×106/mL细胞密度下培养,神经干细胞增生活跃,形成神经球,Nestin表达阳性,10%胎牛血清诱导后神经干细胞可分化为神经细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞;低细胞密度(低于1×104/mL)培养不利于神经干细胞的存活和增生,血清诱导未见分化的细胞.提示:适宜的神经干细胞接种密度有利于其增生和分化.
神经干细胞 增生 分化