本试验旨在建立简单、准确且较快速检测鸡蛋中叶酸含量的方法,并研究饲粮中添加叶酸对鸡蛋叶酸含量的影响,以及1个生物学产蛋年叶酸在鸡蛋中的富集规律.试验方法:1)基于高效液相色谱法,比较荧光检测器和紫外检测器的性能,比较超声、高温、酶解等提取方法及其组合对蛋黄叶酸检测值的影响,确定最佳检测方法.2)选取30周龄京红蛋鸡648只,随机分为6组,每组6个重复,每个重复18只,分别饲喂在基础饲粮中添加0(对照组)、1、3、6、12和24 mg/kg叶酸的试验饲粮,试验期35 d,筛选生产富叶酸鸡蛋饲粮中叶酸适宜添加量.3)依据筛选结果,在16000只蛋鸡舍选10个监测点,于20、21、22、23、24、25、27、29、33、37、41、46、50、55、60周龄检测鸡蛋叶酸含量.结果 表明:1)荧光检测器的检出限和定量限低于紫外检测器,峰面积和峰高极显著高于紫外检测器(P<0.01).高温和超声5 min+高温提取的蛋黄叶酸含量检测值显著高于超声5 min+酶解和高温+酶解(P<0.05).检测方法确定为超声5 min后90℃水浴5 min提取、荧光检测器检测,其精密度和稳定性的相对标准偏差(RSD)分别为2.15％和0.57％,回收率平均为98.01％.2)6和12 mg/kg组鸡蛋叶酸含量极显著高于对照组和1 mg/kg组(P<0.01),与3和24 mg/kg组无显著差异(P>0.05).回归分析显示饲粮叶酸添加量与全蛋叶酸含量存在极显著三次曲线关系(决定系数=0.679;P<0.001).3)20～60周龄饲喂添加7.5 mg/kg叶酸的饲粮,蛋黄叶酸含量在23周龄趋于饱和.20～33周龄,全蛋叶酸含量从36.9μg/枚逐渐增加到87.7μg/枚,之后基本稳定.综上所述:1)本试验优化改进的检测鸡蛋中叶酸含量的方法操作简单,准确性高,较快速.2)从20周龄起在京红蛋鸡饲粮中添加7.5 mg/kg叶酸,23周龄后蛋黄叶酸含量保持在5μg/g以上,33周龄后全蛋叶酸含量保持在85μg/枚以上.
蛋黄 5-甲基四氢叶酸 高效液相色谱 叶酸富集