通过腹主动脉缩窄(abdominal aortic coarctation,AAC)心肌肥厚大鼠模型制备、差速离心提纯心肌细胞核、酶学方法测定Ca2+-ATPase活性、45Ca2+同位素法测定核钙摄取和荧光分光光度计测定细胞核内自由钙浓度,初步揭示压力超负荷心肌肥厚大鼠心肌细胞核钙转导异常的环节.结果发现:心肌细胞核上存在具有[Ca2+]和ATP依赖性的高亲和力Ca2+-ATPase,以[Ca2+]依赖的方式摄取45Ca2+,并呈先升高后降低趋势.AAC术后4周大鼠心肌显著肥厚,伴有明显的血流动力学异常,与对照组比较,AAC大鼠心肌细胞核Ca2+-ATPase活性减少51.93%(p<0.001),但核45Ca2+摄入量(核外[Ca2+]浓度为800-1600nmol/L时)和核内[Ca2+](核外[Ca2+]浓度为0-1000nmol/L时)均明显增加(p<0.05);正常组离体心肌细胞核Ca2+摄取受PKA刺激(p<0.05),而被PKC抑制剂和CaM抑制剂显著抑制(p<0.05),AAC大鼠心肌细胞核Ca2+摄取仅受CaM抑制剂抑制(p<0.01),而PKA和PKC抑制剂对其无明显影响(p>0.05).结论为心肌肥厚时,心肌细胞核Ca2+转运系统及其磷酸化调节可能发生改变.
心肌肥厚 细胞核 Ca2+-ATPase 钙摄取