根据 GenBank 中公布的犬α-干扰素(CaIFN-α)基因核酸序列，去掉信号肽后设计并合成1对引物，引入EcoRⅠ和 HindⅢ酶切位点。以提取的犬肝脏 DNA 为模板，利用 PCR 技术扩增 CaIFN-α基因，并分别克隆至表达载体 pBV220、pET-32a(His 标签)中，转化大肠杆菌 BL21(DE3)原核表达系统。重组融合蛋白经 SDS-PAGE 及Western blotting 鉴定。纯化目的蛋白，并采用 MDCK/VSV 微量细胞病变抑制法检测其抗病毒活性。试验结果表明，与 pBV220载体连接的目的基因表达的蛋白活性较低，而与 pET-32a(His 标签)连接的目的基因表达的蛋白活性较高，达2.56×106 U/mL。通过分析不同载体对 IFN-α的表达情况，为生产高活性的 IFN 奠定基础。
犬 α-干扰素 原核表达 生物学活性