为了探究盐穗木金属硫蛋白(HcMT)对金属离子的结合能力和转基因工程菌对非生物协迫的耐受性,将HcMT基因亚克隆至原核表达载体pET-32a上.诱导表达后,用5-Br-PAPS方法测定融合蛋白TrxA-HcMT与Zn2+离子的结合能力,并用原子吸收分光光度法测定其与多种金属离子的结合能力,用含有非生物协迫因素的培养基培养转基因工程菌,探究其对非生物协迫的耐受性.结果显示在诱导过程中添加Zn2+,融合蛋白TrxA-HcMT反应体系中吸光值与对照TrxA相比显著增高.TrxA-HcMT能够结合多种金属离子,其中对Cu2+的结合能力最强,是对照的20.3倍,对Cd2+的结合能力次之,是对照的5.6倍.在H2O2、NaHCO3、Na2CO3非生物协迫的条件下,转HcMT基因工程菌比对照组菌的耐受性更好.
盐穗木金属硫蛋白 金属结合能力 原子吸收分光光度法 非生物胁迫