通过对不同电激活参数的摸索,电激活和化学激活联合的研究,以确定适合于猪卵母细胞孤雌激活的最佳方案.结果表明,体外成熟猪卵母细胞在电场时程60 μs,1次直流脉冲的条件下,电场强度1.6kV/cm时其卵裂率(88.68％)和桑葚胚率(81.13％)较其他各组高.在电场强度为1.6 kV/cm,1次直流脉冲的条件下,脉冲时程20 μs时,卵母细胞卵裂率仅为75.38％,桑葚胚率为64.62％；40和80 μs时,卵裂率分别是84.62％和77.17％; 100 μs时,卵母细胞的卵裂率和桑葚胚率都明显下降.在电场强度为1.6kV/cm,电场时程为60 μs的条件下,2次电脉冲激活卵母细胞的卵裂率(87.50％)、桑葚胚率(81.25％)和1次电脉冲的卵裂率(88.68％)、桑葚胚率(80.13％)之间无显著性差异(P＞0.05),但两者均显著高于3次电脉冲的卵裂率(72.50％)和桑葚胚率(70.27％).成熟卵母细胞经电刺激(ES)后,分别用CB (7.5μg/mL)、CHX( 10μg/mL)、6-DMAP(2 mmol/L)、CB(7.5 μg/mL)+CHX(10 μg/mL)、CB (7.5 μg/mL)+6-DMAP(2 mmol/L)各自处理4h,ES+CB+CHX和ES+CB+6-DMAP组卵裂率显著高于其他3组,但其桑葚胚率差异不显著.结果显示,电场强度为1.6 kV/cm,电场时程60μs,1次脉冲的电刺激对体外成熟的猪卵母细胞(IVM)孤雌激活效果最好；1次或2次电脉冲就足以激活猪卵母细胞,过高脉冲对细胞反而有伤害作用;电激活和化学激活联合应用可提高猪卵母细胞的卵裂率.
卵母细胞 体外培养 孤雌激活 猪