秀丽小杆线虫(Caenorhabditis elegans)是一种重要的模式生物,目前在C.elegans中发现的许多基因在序列和功能上与哺乳动物的基因有很高的同源性,对其基因功能的研究有助于阐明哺乳动物的基因功能.为检测细菌介导的通过发夹结构表达双链RNA(dsRNA)的RNA干扰(RNAi)在C.elegans中的作用效果,我们设计并构建了可以转录表达母源极性基因par-1的发夹dsRNA的RNAi载体,并转入E.coli HT115中,经过 IPTG诱导后浓缩.浓缩菌液在25℃下喂食C.elegans 48 h后,观察C.elegans胚胎发育情况,同时以含有空载体的菌液作为对照,并与par-1突变体及野生型比较.结果显示:发夹结构表达的dsRNA对par-1基因进行RNAi后,虫体内par-1 mRNA 几乎消失,C.elegans早期胚胎分裂不对称性丧失,par-1(RNAi)干扰率在95%以上[动物学报 53(3):545-551,2007].
秀丽小杆线虫 par-1 发夹结构 RNAi 克隆 构建