本实验引物延伸合成人红细胞生成素信号肽序列;信号肽序列和人可溶性B淋巴细胞刺激因子(human suluble B Lymphocyte Stimulator,hsBLyS)基因重叠延伸拼接成融合基因;融合基因插入pcDNA3、pcDNA3.1、EFneo质粒;信号肽引物设计时,突变同义密码,最终重组质粒成为分泌表达质粒;磷酸钙共沉淀将表达质粒和标志质粒pSV-dhfr,共转染CHO-dhfr-细胞;选择培养液筛选,氨甲喋呤扩增表达,获稳定表达rhsBLyS细胞株;ELSA检测浓缩表达上清,结果表明:rhsBLyS表达量由0.13μg/mL上升至0.55μg/mL.
hsBLyS 信号肽 CH0 分泌表达