目的:构建人高迁移率族蛋白(HMGB1)全长编码基因的原核表达载体,诱导和纯化重组蛋白,分析其对人骨髓间充质干细胞的迁移作用.方法:RT-PCR方法从人的单个核细胞中扩增出HMGB1全长编码基因,克隆于原核表达载体pET-24a-d(+),经IPTG诱导表达,通过亲和层析方法纯化得到携带(His)6标签的HMGB1融合蛋白;RT-PCR方法检测间充质干细胞HMGB1受体的表达;观察 HMGB1对人骨髓来源间充质干细胞的迁移作用.结果: 构建了融合蛋白HMGB1的原核表达载体,获得了高度纯化的HMGB1融合蛋白.RT-PCR方法检测到间充质干细胞表达HMGB1的某些受体如RAGE和TLR-4. HMGB1在体外能够诱导人骨髓来源的间充质干细胞的迁移.结论: 重组HMGB1蛋白能够诱导骨髓间充质干细胞的迁移,此作用有可能通过RAGE和(或)TLR-4介导.
高迁移率族蛋白 间充质干细胞 迁移 逆转录聚合酶链反应