为挖掘不同碳源影响毕赤酵母(Pichia pastoris)生长代谢的机制,对其进行了比较研究.结果发现,相较于甘油,当碳源转变为甲醇时,细胞内宏自噬相关基因(Autophagy associated gene 8,Atg8)的表达量显著上升,而过氧化物酶自噬相关基因(Autophagy associated gene 30,Atg30)的表达量下降.甲醇培养时,细胞内宏自噬水平提高,菌体生长缓慢,而过氧化物酶体自噬被抑制,AOX1酶的活性提高.同时,对比甘油转运体(Glycerol transporter 1,GT1)敲除的菌株(P.pastorisΔGT1)与野生型菌株(P.pastoris Wild Type,WT)的细胞自噬受碳源调控的规律,发现甲醇和甘油引起的P.pastorisΔGT1细胞内Atg8和Atg30基因表达变化的差值低于野生型菌株.说明GT1基因的敲除缓解了甘油和甲醇对细胞自噬调控的差异,这也符合P.pastorisΔGT1菌株缓解了甘油抑制甲醇代谢的特性,进一步证实自噬水平的调控是不同碳源引起细胞生长代谢改变的主要原因之一.从细胞自噬角度解析了巴斯德毕赤酵母碳源代谢调控的机制,同时为进一步提高甲醇利用效率和外源蛋白表达效率提供了新的方向和理论基础.
毕赤酵母 生长代谢 过氧化物酶体自噬 宏自噬 甘油转运体