本研究旨在分离大熊猫肠道内唾液乳杆菌,为获得抑菌效果好,适应性强的熊猫源乳酸菌.通过选取健康大熊猫新鲜粪便,利用MRS培养基进行厌氧培养和单克隆纯化,通过形态学、 生理生化鉴定、16S rDNA基因序列测定及同源性分析筛选到10株唾液乳杆菌.采用牛津杯法、 活菌计数法、 药敏纸片法(K-B法)和PCR技术对分离菌株作进一步的耐受性、 抑菌性和耐药性分析.结果表明:ZM02、ZZ03菌株在pH2.0的条件下培养2 h有76.62％、80.75％的存活率;在胆盐浓度为0.3％的条件下培养2 h有97.76％、99％的存活率.抑菌试验结果表明:大肠杆菌抑菌效果最佳为ZM01(10.45±0.43)mm;乙型副伤寒沙门氏菌抑菌效果最佳为ZZ03(12.58±0.24)mm;铜绿假单胞菌抑菌效果最佳为ZZ04(13.99±0.29)mm;金黄色葡萄球菌抑菌效果最佳为ZM06(16.85±0.32)mm.耐药基因检测结果表明26对耐药基因仅有ZM02菌株未检测含有耐药基因.药敏实验表明:分离菌株对青霉素类(盘尼西林除外)、 其他抗生素类(呋喃妥因、 亚胺培南)和氯霉素类均无耐药.综上所述,本研究从大熊猫新鲜粪便中分离鉴定得到10株唾液乳酸杆菌并从中筛选到一株生物特性好、 抑菌效果明显、 不含耐药基因的唾液乳杆菌-编号103并命名ZM02.该研究可为后续熊猫源微生态制剂提供发展空间.
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