基因敲除是一项20世纪80年代末发展起来的新型分子生物学技术，在微生物领域的机制和功能研究中，具有极其重要的意义。经过数十年的发展，基因敲除技术从最传统的同源重组策略发展出λRed重组系统、Cre-loxP重组系统等方法，近年又诞生了成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9等基于核酸内切酶原理的高效打靶技术，将微生物基因功能研究推向新的高度和方向。本文就这些应用于原核微生物的基因敲除策略的原理、现状和前景等研究进展作一综述。
基因敲除 聚合酶链反应 连接诱变技术 λRed重组系统 Cre-loxP重组系统 成簇的规律间隔的短回文重复序列/Cas9技术