为探究可逆自组装活性纳米笼形铁蛋白的成熟高效制备技术,以构建的人源重链铁蛋白(recombinant human H-chain ferritin,rHuHF)大肠杆菌原核表达系统(BL21-pET3a-rHuHF)为对象,在发酵罐内进行高效表达,并对搅拌转速、空气通量及诱导表达时间3个关键工艺参数进行优化.采用透射电子显微镜和动静态光散射仪对rHuHF的纳米结构及粒径进行表征.结果显示:搅拌转速200 r/min、空气通量1.6 L/min、表达时间9 h为最佳表达条件.经鉴定,铁蛋白存在于菌体胞内可溶物部分且具有良好的自组装活性和单分散笼形结构,9次实验中表达量最高达290 mg/L,明显高于相同条件下摇瓶培养的表达量;pH 7时rHuHF粒径为(11.23±0.10)nm,pH 2时rHuHF粒径为(2.73±0.10)nm.本实验可对铁蛋白在纳米靶向递送系统中的应用等工作提供一定的科学依据.
人源铁蛋白 原核表达 蛋白纯化 可逆自组装