目的研究旱莲苷A(Ecliptasaponin A)对肝癌细胞(HepG-2)的抑制增殖作用,探讨其诱导HepG-2细胞凋亡的机制.方法 旱莲苷A处理HepG-2细胞后,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期变化,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内ROS,JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位的变化.Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达情况.结果 旱莲苷A处理细胞48 h后,旱莲苷A能明显抑制 HepG-2细胞的生长,且呈浓度依赖性增长趋势,其 IC50为(29.8 ± 1.6) μmol/L.与对照组相比,浓度为12.5、25 μmol/L的旱莲苷A组AO/EB染色可看到凋亡细胞明显增加.流式细胞仪检测显示12.5、25 μmol/L旱莲苷A组细胞周期被阻滞在S期的比例增加,分别为24.03%、43.19%,其细胞早期凋亡比例分别增加了4.06%和11.82%.浓度为12.5 μmol/L、25 μmol/L的旱莲苷A组细胞内ROS水平明显增加,细胞线粒体膜电位显著下降,且随着旱莲苷A浓度的增加,线粒体膜电位下降更为明显.Western blot结果显示,旱莲苷 A组凋亡相关蛋白 Bcl-2表达减少,Bak表达增加.结论 旱莲苷A可有效抑制HepG-2细胞增殖,其作用机制可能是通过线粒体途径抑制Bcl-2表达,促进Bak和Caspase-3的表达,诱导细胞凋亡.
旱莲苷A 线粒体膜电位 细胞凋亡 Bcl-2