利用大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC)作为模型,观察17β-雌二醇(17β-estradiol,E2)对VSMC诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性和蛋白表达的影响,并探讨其在内皮素-1(endothlin 1,ET-1)刺激的VSMC周期循环中的作用.检测指标包括同位素法测定iNOS的活性,免疫印迹法(western blot)检测iNOS蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期,观察一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂NG-硝基左旋精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)对E2抑制VSMC细胞周期的影响.结果显示,E2明显增加iNOS的活性和蛋白表达,在30 min和12 h时能诱导VSMC的iNOS活性明显增加,而60 min和24 h时VSMC的iNOS活性与对照组无显著差异,不呈明显浓度依赖性,雌激素受体(estrogen receptor,ER)拮抗剂Tamoxifen和L-NAME能明显抑制E2诱导的VSMC iNOS活性增加;E2增加VSMC的iNOS蛋白表达的作用在3 h时起效,12 h达高峰,以后逐渐下降,呈浓度依赖性,Tamoxifen能明显抑制E2诱导的VSMC iNOS蛋白表达;E2明显抑制ET-l诱导的S期细胞百分比和G2+S/G1增加,使VSMC在G1期发生细胞周期阻滞,这些作用可被预先给予L-NAME所明显减轻.上述结果提示,E2使ET-1刺激的VSMC细胞周期循环在G1期发生阻滞与增加VSMC iNOS活性有关,该作用至少部分通过ER介导.
血管平滑肌 雌激素 一氧化氮 一氧化氮合酶 细胞周期