桔青霉Penicillium citrinum)产核酸酶P1浓缩液采用活性炭脱色、硫酸铵分级沉淀、脱盐和凝胶层析等分离技术,得到核酸酶P1纯组分,并研究了该酶的酶学性质.该酶纯化后比酶活达到33967 U/mg,纯化倍数为8.48倍;该酶的米氏常数Km、最大反应速度Vm和催化常数Kcat分别为2.50mmol/L、0.0864 mmol/(mL·min)和252.43 s-1.该酶最适温度为75℃,热稳定范围60～75℃;最适pH为5.5,pH稳定范围为4.0～6.0;Zn2+在1 mmol/L条件下对核酸酶P1有很好的激活作用,Cu2+和Co2+对该酶的抑制作用明显,而Ni2+、Fe2+、Mn2+等离子具有不同程度的抑制作用.本研究对于该酶的广泛应用奠定了科学基础.
核酸酶P1 纯化 动力学参数 酶学性质