谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)能够催化L-谷氨酸(盐)脱羧反应生成γ-氨基丁酸,它是微生物发酵法生产γ-氨基丁酸的关键酶,具有很高的工业应用价值.本文将来源于巨大芽孢杆菌的谷氨酸脱羧酶(BmGad)经克隆至表达载体pET21b后,转化到大肠杆菌BL21 (DE3)中进行IPTG诱导表达,并采用亲和层析的方法将该酶纯化后,用比色法测定该酶的酶活性.结果表明,BmGad克隆表达后,采用SDS-PAGE分析可知其相对分子质量约为5.3×104Da.重组蛋白经亲和纯化后,该酶的最适温度为50℃,酶活性达到153U/mg;最适pH为5,酶活性为151 U/mg,在偏中性环境中比较稳定,适合于工业化生产的应用.
谷氨酸脱羧酶 γ-氨基丁酸 最适pH 酶活性