研究旨在检测信号转导与转录激活因子3 (STAT3)的表达规律,克隆STAT3基因,构建真核表达载体,并探索STAT3基因对广西黄牛肌肉干细胞(MuSCs)分化的调控作用.采集6、12、18月龄广西黄牛肌肉组织以及生长期(GM)和分化期(DM)肌肉干细胞,分别提取RNA并反转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR检测STAT3基因和成肌相关基因的表达规律;克隆黄牛STAT3基因完整编码区序列,构建过表达载体pCD-STAT3并检测其对黄牛肌肉干细胞分化的影响.实时荧光定量PCR结果表明,STA T3基因在6、12、18月龄黄牛肌肉组织中均有表达,且在18月龄中表达量最高,12月龄中表达量最低;STAT3和成肌调节因子6(MYF6)基因在分化期肌肉干细胞中表达量均极显著高于生长期(P＜0.01).广西黄牛STAT3基因编码区全长2313 bp,与空载体pCDNA3.1相连成功构建过表达载体pCD-STAT3,将pCD-STAT3转入体外培养广西黄牛肌肉干细胞,肌肉干细胞中STA T3基因及成肌决定蛋白(MyoD1)、骨骼肌肌球蛋白重链(MyHC)基因表达量极显著升高(P＜0.01),肌细胞生成素(M yoG)基因表达量显著升高(P＜0.05),且肌管数量、大小均显著高于pCDNA3.1组(P＜0.05).本研究检测了转录因子STAT3在广西黄牛背最长肌中的表达规律;且过表达STAT3基因显著促进了广西黄牛肌肉干细胞的成肌分化,为深入研究STAT3基因在肌肉生长发育中的作用及其分子调控机制奠定基础.
广西黄牛 转录因子 STAT3基因 肌肉干细胞