天然态蛋白质能否在溶液中存在多种构象是一个有争议的问题.在前报道中已经鉴定出绿脓杆菌去辅基天青蛋白突变体M121L可以多种构象共存.用差热扫描量热和圆二色性的方法研究了野生型去辅基天青蛋白的热变性.结果表明在pH从4.0到9.0的范围内存在着两个摩尔热容最大值.较低温度下的去折叠反应在所研究pH范围内均部分可逆,而较高温度下的去折叠反应均不可逆.蛋白质去折叠的热容变化双峰用可相互转化的两种构象共存模型进行拟合.较低温度下能够去折叠的构象在pH 4.0时占64%,在pH 9.0时占55%.监测热变性过程中圆二色谱在219 nm处的信号变化也可以观测到两个独立的去折叠变化.信号变化的比值与在相同条件下差热扫描法测得的两种构象摩尔比一致.上述结果进一步支持了前文提出的去辅基天青蛋白在溶液中至少存在着两种构象的设想.
热变性 去辅基天青蛋白 差热温度扫描 圆二色性 蛋白质构象