以脱氮假单胞菌为出发菌株,利用化学诱变剂-亚硝基胍(NTG)结合抗生素抗性筛选以提高维生素B12的生产水平.通过对致死率和正突变率的考察,确定NTG浓度为25μg/mL,利福平和庆大霉素的最适筛选浓度分别为4.5μg/mL和35μg/mL.得到的突变株经摇瓶发酵后,采用高效液相色谱仪(HPLC)对最终发酵液进行检测.筛选到的突变株RE-24最高产量达到243.3μg/mL,比原始菌株提高了33.5％.
维生素B12 化学诱变 抗性筛选