化学方法合成是新药研发的一种重要途径.结合抗肿瘤药物的作用机制以及蒽醌类衍生物的构效关系,设计合成了一类新的蒽醌类衍生物1-硝基-2-酰基蒽醌-缬氨酸(简称C3),发现其具有很好的抗肿瘤活性.为了确定蒽醌类衍生物C3对结肠癌HCT116和HT29细胞的作用及其分子机制,首先通过MTT比色法检测C3对结肠癌HCT116和HT29细胞活性的影响.结果显示,C3对这两种结肠癌细胞具有明显的抑制作用,呈时间和剂量依赖性.60 μg/mL的C3处理HCT116和HT29细胞48 h,细胞活性分别是50.67％和59.77％,达到了半抑制浓度;同时,其细胞形态和细胞核发生明显变化.进一步采用Western印迹和qRT-PCR技术,检测C3对DNA切除修复交叉互补1 (excision repair cross-complementation group 1,ERCC1)转录水平和蛋白质水平表达及其稳定性的影响.结果表明,C3降低了ERCC1转录水平和蛋白质水平的表达,并且减弱了ERCC1转录水平和蛋白质水平的稳定性.最后,用U0126(MEK1/2抑制剂)和C3联合作用结肠癌HCT116和HT29细胞,通过Western印迹检测ERCC1蛋白质水平的表达.结果表明,C3通过降低p-ERK1/2的蛋白质水平的表达,从而抑制ERCC1的表达.上述结果证明,C3通过细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)信号通路,降低了ERCC1转录水平和蛋白质水平的稳定性,使ERCC1转录水平和蛋白质水平表达发生下调,进而抑制结肠癌HCT116和HT29细胞的活性.
蒽醌类衍生物 切除修复交叉互补1 细胞外调节蛋白激酶 结肠癌