目的建立完善的造血干细胞体外培养及分析体系,用来研究比长期培养起始细胞(LTC-IC)更为原始的造血干祖细胞.在此基础上,研究更适合于NK细胞的分化、培养介质.方法构建并表达FPIL6/IL2,采用髓系-NK起始细胞体外培养、分析体系,通过观察培养后单细胞是否能同时向髓系及NK细胞分化,来判断此单细胞是否为髓系-NK起始细胞,即髓系-淋系起始细胞(myeloid-lvmphoid initiating cell,ML-IC).髓系检测指标是以祖细胞造血集落形成(CFC)法检测LTC-IC.NK细胞的检测指标是以FACS法检测CD56+NK细胞集落.通过观察培养后NK细胞集落数目的变化,研究FPIL6/IL2对NK-IC分化、增殖的影响.结果经过起始4周的培养后,实验组中(25.75±5.68)%的细胞能够在一个或更多的二级培养体系中产生功能性NK-IC细胞,而对照组为(6.81±1.97)%,经过6～7周的培养后,实验组共检测出102个NK-IC细胞,而对照组为33个,实验组较对照组明显扩增.结论髓系-NK起始细胞体外培养、分析体系能同时定量及定性研究造血干细胞的分化及增殖.FPIL6/IL2能明显促进ML-IC向NK祖细胞分化并在较长时间内维持其祖细胞的自我保留作用并能促进其进一步增殖.
融合蛋白IL6/IL2 髓系-NK起始细胞 造血干细胞 自我保留 增殖