用抑制性差减杂交结合SMART cDNA合成和RACE-PCR技术, 克隆得到雌核发育银鲫(Carassius auratus gibelio)4种孵化酶基因的全长cDNA.4种孵化酶基因分别被命名为GHE1、GHE2、 GHE3、GHE4.序列分析表明,4种孵化酶基因cDNA的开放阅读框均为795bp,都编码265个氨基酸.它们推断的编码氨基酸序列同源性在79.6～95.1%之间.种系分析表明,GHE1、GHE2、 GHE3、GHE4的进化地位位于日本鳗鲡(Anguilla japonica)孵化酶和青(Oryzias latipes) 孵化酶之间.不同发育时期胚胎的RT-PCR分析表明,银鲫GHE1、GHE2、GHE3、GHE44种孵化酶基因从尾芽期到幼苗期都检测到表达, 且GHE3和GHE4在神经胚期也检测到表达.各种组织的RT-PCR表明,它们在成鱼组织中不表达.
银鲫 孵化酶 抑制性差减杂交 SMART cDNA RACE-PCR