利用PEG介导的细胞融合方法,将已成系的牙鲆鳃细胞与中国对虾淋巴细胞进行细胞杂交,对所获得的杂交细胞用MEM:MPS(1:1)混合培养液进行体外培养.培养5天后发现,杂交细胞长成了单层,传代培养后仍可继续生长和分裂.通过逐渐提高混合培养液中MPS的所占比例所筛选出的杂交细胞,目前已传12代,生长和分裂势头仍然十分旺盛.通过接种对虾杆状病毒发现,10天后杂交细胞出现了明显的病变特征(细胞收缩变圆、脱落、死亡),至14天细胞便几乎完全脱壁死亡.取病变细胞的培养上清0.3mL再加入到一瓶已长成单层的杂交细胞中,结果5天后杂交细胞也出现了明显的病变特征,而未接种病毒的对照组杂交细胞生长正常.可初步认为我们所得到的杂交细胞确为对虾(杆状)病毒的靶细胞.
牙鲆 中国对虾 杂交细胞 体外培养