目的 建立在改良条件下新生大鼠器官型脑组织片培养方法,初步探索空间信号对神经干细胞增殖分化的诱导作用.方法 选取新生SD大鼠,以振荡切片机切取200 μm脑组织片,以改良的Stoppini方法进行培养,培养不同时间在倒置相差显微镜下对脑组织片进行观察；采用本实验室改良后神经干细胞培养方法分离培养SD大鼠胚胎第14～15天大脑皮质神经干细胞,以CM-DiI对培养第3代细胞进行标记,并移植于体外培养2周后的脑组织片；对移植后CM-DiI阳性标记细胞的存活和分化情况进行观察.结果　器官型脑组织片在体外培养体系中存活良好,脑片周围细胞向外迁移；培养2周后,组织片厚度由原来的200 μm减小至130 μm,原有的细胞构筑发生变化；接受细胞移植后的脑片上可见大量Dil标记细胞,继续培养7d后,部分标记细胞分化为GFAP阳性星形胶质细胞和β-tubulin Ⅲ阳性神经元.结论　新生大鼠器官型脑组织片体外培养成功,可以作为研究空间信号诱导神经干细胞增殖分化的模型.
器官型脑组织片 神经干细胞 分化