背景与目的:诱导细胞凋亡是许多化疗药物的作用机制,多药耐药细胞常可以抵抗药物诱导的凋亡,有必要从分子机理上探索其抗凋亡机制.但正是由于耐药细胞的抗凋亡特性,难以在凋亡通路中展开相关研究.本研究用环孢素 A( Cyclosporin A, CsA)诱导药物敏感的人急性白血病细胞 HL-60及其多药耐药细胞 HR20和 HT9凋亡,通过对二者凋亡通路中的关键分子进行比较,分析耐药细胞与敏感细胞凋亡途径的差别.方法:用 10、 20 mg/L CsA分别处理 HL-60、 HR20和 HT9细胞,用细胞核形态观察、 DNA凝胶电泳以及流式细胞术方法鉴定凋亡,通过分光光度法和免疫印迹法检测凋亡过程中相关因子的变化.结果: 10、 20 mg/L CsA处理 HL-60、 HR20和 HT9细胞,能够诱导细胞都发生明显的凋亡,包括染色质凝集、 DNA片断化因子 (DNA fragmentation factor,DFF)裂解激活以及 DNA断裂,然而仅在 HL-60凋亡细胞中检测到 Caspase-3活化,而在 HR20和 HT9凋亡细胞中 Caspase-3没有活化.结论: CsA诱导 HR20和 HT9细胞凋亡的通路可能不依赖于 Caspase-3,其凋亡通路中可能存在除 Caspase-3以外的 DFF活化因子.推测 Caspase-3不容易活化可能是 HR20和 HT9多药耐药的原因之一.
多药耐药 Caspase-3 细胞凋亡