采用多光子激发荧光光谱和寿命成像显微技术,在单个活细胞内实时检测蟾酥灵(bufalin,Bu)诱导人类肺腺癌(ASTC-a-1)细胞死亡过程中caspase-3的活化特性.利用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测蟾酥灵对人类肺腺癌细胞活性的抑制效应.蟾酥灵处理稳定表达FRET质粒SCAT3的人类肺腺癌后,在不同时间点检测单个活细胞中SCAT3的多光子激发荧光光谱及其供体ECFP的荧光寿命,从而检测bufalin诱导细胞凋亡过程中caspase-3活化特性.实验结果表明:蟾酥灵以浓度依赖性的方式显著地抑制人类肺腺癌细胞的生长;蟾酥灵处理细胞24 h后,细胞内SCAT3未被切割,而蟾酥灵作用细胞48 h后SCAT3被切割.说明caspase-3参与调控蟾酥灵诱导人类肺腺癌细胞凋亡的过程.
蟾酥灵 荧光光谱 荧光寿命成像 caspase-3 荧光共振能量转移