目的:探讨雄激素作用于骨髓巨噬细胞(BMMs)的途径,研究雄激素与BMMs结合后对其产生的功能性影响. 方法:体外诱导培养BMMs,提取细胞总RNA和蛋白,用RT-PCR和Western印迹方法观察BMMs中雄激素经典受体的表达情况.激光共聚焦显微镜观察T-BSA-FITC结合BMMs的情况.雄激素作用下,用Fura-2方法观察BMMs内钙离子浓度水平及特异性钙离子通道拮抗剂NiCl2对这种作用的影响,并用膜片钳方法观察BMMs膜表面离子电流的变化. 结果:RT-PCR和Western 印迹法都未检测到巨噬细胞中的雄激素受体,而阳性对照组(睾丸组织)的条带显著.用激光共聚焦显微镜观察到BSA-FITC能结合于巨噬细胞的细胞膜上.雄激素作用于BMMs后能迅速引起胞内游离钙离子浓度增加,这种作用可被NiCl2阻断.用膜片钳方法观察到雄激素作用于BMMs后引起胞外的阳离子内流,与Fura-2方法得出的结果一致. 结论:雄激素可能作用于BMMs膜表面的非经典受体,诱发细胞外钙离子快速内流,使细胞内钙离子浓度升高,从而对巨噬细胞产生功能性影响.
雄激素 骨髓巨噬细胞 钙离子 小鼠