针对化学法制备低聚原花青素存在环保压力和副产物多等问题,研究了通过生物酶法降解高聚原花青素来制备低聚原花青素的方法.首先通过基因筛选方法筛选出SananA和EcnanA基因用于酶法降解高聚原花青素,将SananA和EcnanA基因连接在不同质粒载体表达蛋白的结果表明,SananA基因连接在pETDuet-1载体上时的蛋白表达效果较优.进而,利用纯化的SananA蛋白优化高聚原花青素降解条件,结果显示较优的酶解条件为温度50℃、pH=10、反应时间8h,在此条件下原花青素单体积累量为35.67 mg/g,二聚体积累量为14.49 mg/g.
原花青素 低聚原花青素 N-乙酰神经氨酸裂解酶