骨形态发生蛋白(BMP)属于细胞因子和转化生长因子β(TGF-β)超家族,在胚胎形态发生和器官形成中起重要作用,但目前缺乏BMP信号通路Ⅰ型受体SAX的各类抗体.本文利用果蝇胚胎提取出总RNA,反转录得到cDNA,将其作为模板通过PCR得到sax基因片段,将片段连接到pCAGGS-P7上,构建成重组质粒pCAGGS-P7-sax.采用质粒DNA免疫技术,免疫了BALB/C小鼠,制备了果蝇SAX蛋白多克隆抗体.进一步分析表明,构建的真核表达重组质粒pCAGGS-P7-sax DNA具有良好的免疫原性,在免疫小鼠后所获得的抗血清抗体效价达1∶100.Western blot和果蝇胚胎免疫荧光检测表明,抗血清能特异型地识别SAX蛋白.果蝇SAX抗体的成功制备为进一步研究sax基因及BMP信号在果蝇心脏发育中的作用奠定了基础.
sax DNA免疫技术 免疫荧光