目的 比较4种方法对血浆游离结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)DNA和质粒DNA的提取效率.方法 MTB DNA和重组质粒DNA经紫外分光光度法准确定量并梯度稀释,建立标准品.构建含有一定浓度MTB DNA和质粒DNA的血浆,分别采用4种方法提取血浆游离DNA,采用实时荧光PCR技术定量检测模拟血浆中MTB DNA和质粒DNA的含量,比较各种方法的提取效率.结果 4种方法中,磁珠法对MTB DNA和质粒DNA的提取效率最高,分别为52.8%和69.2%;相对丢失率最低,分别为40.1%和31.8%;重复性最好,其变异系数分别为26.7%和26.0%.结论 在4种方法中,磁珠法对血浆游离DNA的提取效率最高,尤其适合于小片段DNA的提取.
血浆游离DNA 荧光定量PCR 提取效率