海藻糖酶是一种二糖水解酶,催化海藻糖转换为葡萄糖,为昆虫包括发育、壳多糖合成及飞翔代谢在内的多种生理过程所必需.尽管某些昆虫的海藻糖酶基因已被鉴定,但优雅蝈螽的海藻糖酶编码序列尚未见报告.本研究采用RACE结合多重PCR技术,分离鉴定优雅蝈螽的水溶性海藻糖酶(GgTre1)和类膜结合型海藻糖酶(GgTre2-like)的全长编码序列(cDNA),包括携带不同长度3’-非翻译区(3'-UTR)的3个GgTre1 cDNA亚型(GenBank:No.KY400001-KY400003)和3个GgTre2-likecDNA亚型(GenBank:No.KY400004-KY400006).3个GgTre1 cDNA序列分别为2 107,2 021和1 914bp,具有相同长度的5’-UTR(33 bp),但3’-UTR长度不同,分别为322,248和129 bp.GgTre1-2 cDNA含1 740 bp,编码579个氨基酸残基组成的多肽链,分子量为67.29 kD;与之不同,根据cDNA演绎的GgTre1-1和GgTre1-3序列较GgTre1-2多4个氨基酸残基,多肽链的分子量为67.88 kD.3个GgTre2-like cDNA(GgTre2-like-1,-2和-3)序列全长分别为2 491,2 460和2 381 bp.5 '-UTR均为284 bp,3’-UTR分别为398,367和285 bp.GgTre2-like cDNA开阅读框为1 809 bp,编码602氨基酸残基组成的多肽链,分子量为67.88 kD.实时定量PCR,分析GgTre1和GgTre2-like基因在雌、雄个体(各20个)的组织特异性表达.结果显示,GgTre1在卵巢和附腺表达量最高;GgTre2-like主要在卵巢表达,在雄性肌肉和马氏管的表达量高于其他组织.上述结果表明,本研究从优雅蝈螽分离到3’-UTR长度不同的3个水溶性和3个类膜结合型海藻糖酶cDNA序列.结果还提示,GgTre1在各组织的表达差异较大,而GgTre2-like在各组织的表达相对稳定.不同长度3 '-UTR的GgTre1和GgTre2-like亚型的存在,以及不同长度的3'-UTR在翻译过程中的特殊作用,尚待今后研究证实.
海藻糖酶基因 实时荧光定量PCR 组织特异性表达 可变多聚腺苷酸化 3’-非翻译区