目的:初步构建基于直接标记法的抗体微阵列,并评价其应用于临床的可能性. 方法:选择白蛋白作为目标蛋白,通过琼脂糖铺片、玻片活化、机器点样、点样后固定等步骤构建抗体微阵列,经封闭非特异位点、标记抗原、加样后对白蛋白进行检测,对关键步骤--抗原标记进行最佳条件摸索,通过对临床标本的检测评价其潜在应用价值.结果:应用BCA蛋白定量试剂盒测定尿液样本总蛋白浓度做出的标准曲线,其R2均大于0.99;温度为37 ℃时抗原标记效果最佳;标记后抗原存放1周对信号的影响无统计学意义(P＜0.01);本方法能够检测出临床检测为阴性的尿微量白蛋白浓度.结论:本研究构建了基于直接标记法的抗体微阵列,并对关键的抗原标记环节进行了最佳工作条件优化,有应用于临床检测的潜力.
抗体微阵列 直接标记法 BCA蛋白定量 蛋白标记