钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2在哺乳动物组织中广泛表达,具有转运中性氨基酸的功能,在谷氨酸-谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用.为了方便测定SNAT2在细胞膜上的表达和定位,本研究采用PCR扩增和酶切连接将HA标签蛋白与SNAT2的C末端连接,构建了真核生物表达载体pBK - CMV△( 1098 - 1300) - SNAT2 - HA表达载体.用脂质体转染法将该表达载体瞬时转染到HEK293T细胞中,通过Western blot法检测到SNAT2 - HA融合蛋白在细胞膜上的正确表达和定位.pBK - CMV△( 1098 - 1300) -SNAT2 - HA表达载体的成功构建,为今后对SNAT2的结构和功能的研究提供了有效方法.
中性氨基酸转运蛋白SNAT2 融合蛋白 构建和鉴定