目的：建立高纯度的新生SD大鼠皮质神经元原代培养方法。方法：取24 h内的新生SD大鼠皮质，用木瓜酶和DNaseⅠ共同消化，5%胎牛血清终止消化，吹打分离组织获得单细胞悬液，进行细胞计数，用无血清DMEM/F12种植培养，4 h后换成用无血清Neurobasal配制的维持培养液继续培养，尼氏小体染色和免疫荧光法鉴定神经元的纯度。结果：培养第10 d，神经元胞体饱满，结构清晰完整，光晕明显，折光性强，可见粗长的树突和轴突，相邻细胞形成紧密网状联系，神经元纯度达到96%以上。结论：经改良和优化，无须添加阿糖胞苷抑制胶质细胞的生长即能够获得生长状态良好、高纯度的神经元。
皮质 神经元 细胞培养 大鼠