目的：探究Wnt信号通路相关蛋白LEF1、 TCF1、野生型β-catenin和激活型β-catenin对肿瘤相关钙信号转导因子Trop2启动子转录活性的调控作用，找出调控Trop2转录活性的转录因子并分析其可能的分子机制。方法通过生物信息学方法预测Trop2启动子上潜在的转录因子，构建小鼠Trop2启动子报告质粒，在293 T细胞中，采用荧光素酶双报告系统分析LEF1、 TCF1、野生型β-catenin和激活型β-catenin对Trop2启动子的调控作用。找出Trop2启动子上的TCF/LEF结合位点，通过定点突变的方法构建Trop2启动子TCF/LEF结合位点突变体，探究Trop2启动子转录活性调控可能的分子机制。结果经预测， Trop2启动子上存在LEF1、 TCF1等众多的潜在转录因子结合位点。荧光素酶双报告实验证明，在293 T细胞中，与空载体相比， LEF1、 TCF1都不同程度地增强Trop2启动子转录活性。其中LEF1对Trop2启动子转录活性的增强作用最为明显，达108倍。突变Trop2启动子上的TCF/LEF结合位点可以明显降低LEF1对Trop2启动子的转录活性。结论在293 T细胞中， LEF1可以极大地增强Trop2启动子的转录活性。 LEF1上调Trop2启动子转录活性是通过结合到Trop2启动子上的两个TCF/LEF结合位点而发挥作用的。
Trop2 LEF1 启动子 转录激活