目的 通过液质联用法分析重组抗肿瘤抗病毒蛋白(乐复能)的一级结构.方法 采用高效液相-电喷雾四级杆飞行时间质谱技术(High performance liquid chromatography-electrospray ionization-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,HPLC-ESI-Q-TOF-MS)绘制乐复能经胰蛋白酶酶切后的液质肽图,并定位二硫键；采用电喷雾四级杆飞行时间质谱(ESI-Q-TOF-MS)测定乐复能的精确相对分子质量.结果 乐复能液质肽图的22个理论酶切肽段中,有6个肽段(T2、T5、T12、T15、T19、T22)共7个氨基酸未被检测到,氨基酸覆盖率为96％；通过分析胰蛋白酶酶切液质肽图,发现1种二硫键连接方式:Cys1 -Cys29、Cys99-Cys139;质谱测定相对分子质量为19 311.63,与理论相对分子质量(19 311.27)的相对误差为0.000 02％.结论 建立了乐复能的液质肽图分析方法,为该类制品的质量控制及其参考品的研制提供了参考.
液质联用 重组蛋白质类 氨基酸序列 二硫键定位 分子量