经发酵大量表达重组人成骨蛋白-1(rhOP-1).SDS-PAGE发现rhOP-1表达量占细菌总蛋白的35%.菌体经裂解、洗涤后,用8 mol/L尿素溶解包涵体,离心后提取目的蛋白.经离子交换色谱法对变性状态下的目的蛋白进行纯化,绝大部分杂蛋白被去除,目的蛋白纯度达93%以上.为进一步提高目的蛋白浓度,采用分子排阻色谱法对目的蛋白进行再次纯化,纯度达98%以上.利用降低尿素梯度的方法对纯化的蛋白进行复性,二聚体的含量在50%以上.Western blot证明了复性后的目的蛋白以单体和有活性的二聚体的形式存在.
重组人成骨蛋白-1 包涵体 离子交换色谱 分子排阻色谱复性