采用PCR突变技术改造人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)cDNA,将扩增的cDNA片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21(DE3)/pET3c-[Ser69,87]hbFGF,用IPTG诱导表达,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白30%.通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法获得了纯度达98%的[Ser69,87]hbFGF样品.用MTT法测得纯化的[Se69,87]hbFGF样品与野生型hbFGF促Balb/c 3T3细胞增殖的比活性相当.以野生型hbFGF作对照,分析反复冻融对突变体[Ser69,87]hbFGF形成寡聚体的影响,并在25℃和37℃的条件下分析其寡聚体的形成情况.结果表明,不管是反复冻融还是在25℃和37℃的条件下,突变体[Ser69,87]hbFGF形成的寡聚体都较野生型hbFGF明显减少.
人碱性成纤维细胞生长因子 突变体 寡聚体