以2×CTAB法从欧美杨107号嫩叶提取的基因组DNA为试材,建立了木质素合成酶COMT基因的PCR扩增体系.通过对PCR反应的影响因子--模板DNA用量、dNTP浓度、DNA聚合酶量、引物浓度和退火温度进行优化,最终建立了扩增COMT的PCR优化体系为:在20 μL 的反应体系中,dNTP为2.5 pmol,引物各为5 pmol,模板为5 ng,Red TaqTM DNA 聚合酶1.25 U,退火温度为51℃,可以扩增出清晰的扩增带.
COMT 优化 聚合酶链式反应