玻璃化法超低温保存(Cryopreservation by vitrification)是1980年代兴起的一种冷冻保存新技术,它的基本过程是将生物样品用一定配方的玻璃化法保护剂处理后快速投入液氮贮存.描述离体培养物或再生小苗高度含水化时也用"玻璃化"一词,但本文中的"玻璃化"是指一个生物物理学过程--细胞和溶液在快速降温时进入一种均一的无定形态,细胞里的水不转变成冰,而呈超冷液体状态,一种对细胞冷冻损伤最小的状态[1].为了使细胞呈玻璃化,首先要选择一种高效低毒的玻璃化冷冻保护剂,其次是控制好冷冻和化冻的温度、气压等条件.从1989年起至1993年,用玻璃化法冻存成功的植物材料仅10多种[2],至今已达20多种,在园艺植物的种质保存中显示出很大潜力.传统的二步冷冻法保存水稻、大麦以及其他禾谷类作物胚性培养物的研究已有不少[3～5],但玻璃化法的应用才刚刚起步.本文报道一个优化的玻璃化法冻存水稻胚性悬浮细胞的程序,并从恢复生长的细胞再生了大量可育植株.
水稻胚性悬浮细胞 玻璃化 超低温保存 植株再生