将重组产几丁质酶C(Chi C)的菌体通过固定金属鳌合层析(IMAC),对目的蛋白进行初步纯化;然后采用透析法、凝胶过滤柱层析法和金属鳌合柱层析法对包涵体进行复性.结果表明,逐渐降低变性剂尿素浓度进行透析复性,酶液的酶活力为58.85 μkat·L-1,比活为0.425 mkat·g-1,蛋白回收率为95.3%.使用SepHacry S-200作为复性凝胶介质复性,酶液的酶活力为30.37 μkat·L-1,比活为0.620 mkat·g-1,蛋白回收率为72.9%.通过金属螯合层析法复性,酶液的酶活力为55.59 μkat·L-1,比活为1.917 mkat·g-1,蛋白回收率为43.2%.
几丁质酶 C 包涵体 复性 透析法 凝胶过滤柱层析法 金属螯合层析法