为了进一步探讨端粒酶RNA(hTR)的反义cDNA对乳腺癌MCF-7细胞凋亡可诱导性的影响,构建了能将外源基因整合至细胞基因组的整合型腺病毒载体vAd-AAV,并将hTR全长cDNA反向连接至此载体上,获得反义重组腺病毒vAdT-AAV.vAd-AAV和vAdT-AAV分别感染MCF-7细胞后,获得两个细胞株MCF-7-vAd-AAV和MCF-7-vAdT-AAV,其中MCF-7-vAdT-AAV细胞基因组内整合有hTR反义cDNA并能稳定表达.利用生存曲线、细胞形态学观察、DNA片段分析和流式细胞分析来测定NaBu和无血清DMEM诱导后细胞凋亡的反应性.通过生存曲线,发现NaBu诱导的MCF-7-VAdT-AAV细胞比对照组MCF-7和MCF-7-vAd-AAV细胞更早出现凋亡.电镜下,NaBu或去血清诱导的MCF-7-vAdT-AAV细胞更早出现凋亡形态学指标.流式细胞分析和DNA片段凝胶电泳实验均显示MCF-7-vAdT-AAV细胞对凋亡的抵抗力下降.研究结果表明,端粒酶RNA的反义cDNA使乳腺癌MCF-7细胞的凋亡可诱导性增强.
人端粒酶RNA 反义核酸技术 凋亡