目的 克隆人IL-18编码区cDNA,研究其在大肠杆菌中的表达.方法 应用RT-PCR方法 从人外周血单个核细胞(PBMC)中扩增出成熟(hIL-18)cDNA.利用基因重组技术构建IL-18的原核重组表达质粒pGEX-3X-hIL-18,转化E.coli JM109,以IPTG诱导培养,收集菌体直接进行SDS-PAGE分析.结果 经测序证实获得人IL-18的cDNA序列与文献报道的cDNA完全一致;携此重组质粒pGEX-3X-hIL-18的大肠杆菌经IPTG诱导,表达了分子量为43kD的重组融合蛋白.结论 克隆了人IL-18cDNA,利用大肠杆菌成功地表达了重组蛋白.为进一步探讨人IL-18的生物学作用及可能的临床应用打下基础.
PBMC IL-18 RT-PCR 基因克隆 重组表达