目的探讨几种常见的环境类雌激素壬基酚(NP)、双酚A(BisA)和邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对人雌激素受体阳性卵巢癌细胞PEO4增殖和凋亡相关基因PCNA,bcl-2和bax mRNA及相应蛋白质表达的影响.方法 PEO4细胞在DMEM培养液(含10%小牛血清)中进行常规传代培养,实验前将细胞转移至无酚红DMEM(含5%活性碳葡聚糖苷处理过的FBS)中继续培养5 d,收集细胞,PBS洗涤后接种于内置血盖片的六孔板或75ml培养瓶,32×10-7 mo/L BisA和NP及32×10-6mol/L DBP对PEO4细胞分别处理72 h,用半定量RT-PCR技术观察其对核增殖抗原PCNA、bcl-2及bax mRNA表达的影响,并用免疫组化方法对结果进行验证.结果与溶剂对照组相比,32×10-7mo/L NP和BisA对PEO4处理72h可促进核增殖抗原PCNA和抗凋亡基因bcl-2 mRNA表达,但对bax mRNA的表达没有影响;DBP可促进PCNA的表达,但对bcl-2和bax的表达均没有明显的影响.随后进行的免疫组化实验结果显示,NP和BisA可促进Bcl-2蛋白的表达,并抑制Bax蛋白的表达.结论对PCNA和bcl-2表达的影响可能是环境类雌激素调节卵巢癌细胞PEO4增殖和凋亡的重要机制之一.
环境雌激素 PEO4细胞 bcl-2 bax PCNA