探讨转化生长因子-β超家族肽类的细胞内信号转导分子Smads蛋白在发育不同阶段大鼠睾丸的表达及在精子发生中的作用机理.分别选用出生后3、7、14和28 d以及成年大鼠,应用蛋白质免疫印迹杂交技术及免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵增强技术,检测Smad 1、Smad 2、Smad 4和Smad 5蛋白在大鼠睾丸的表达、定位和发育变化,并通过图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析.免疫印迹杂交发现,Smad 1、Smad 2和Smad 4在3、7、14和28 d以及成年大鼠睾丸均有蛋白质表达,Smad 5蛋白则仅表达于28 d和成年大鼠睾丸.免疫组织化学结果显示,Smad 1在14 d大鼠睾丸的生精细胞中即可见免疫阳性反应;Smad 2从7 d起开始表达,免疫阳性产物位于各级生精细胞的胞质内;Smad 4在发育的各个阶段的间质细胞中均有较强的表达;Smad 5仅在28 d和成年大鼠的间质细胞中有弱的表达.结果提示:Smads蛋白在睾丸中的分布不同,表达量存在差异,为揭示TGF-β超家族在精子发生和发育过程中的分子机制提供了直接证据.
大鼠 睾丸 转化生长因子-β Smads蛋白