目的研究人胰岛素基因在家蝇中的表达,建立家蝇生物反应器.方法以家蝇作为实验动物,利用BAEKON6000型基因转移仪将胰岛素基因组基因导入家蝇进行实验研究.收集家蝇新产卵(1～1.5h内),将环状质粒pCMV-mINS、pCMV-ImINS、pEF1α-mINS、pEF1α-ImINS以10μg/ml浓度分别与新采集的家蝇卵混合后进行电转移.经人工孵化发育为成虫(F0),G418(3.0mg/ml)筛选F1代,待F1代发育至成虫并产卵后,采用PCR、Tricine-SDS-PAGE和Western-blot技术对F2代蝇蛆进行整合与表达水平检测.结果四种质粒均能在家蝇中表达人胰岛素,表达量各占蝇蛆总蛋白0.207%、0.357%、0.473%和0.831%.结论人胰岛素基因能够在蝇蛆中表达,即蝇蛆机体可对人胰岛素原进行翻译后加工.
胰岛素 人 基因表达 家蝇 电穿孔