目的:克隆适于在大肠杆菌(Escherichia coli,E. coli)中表达的人降钙素(hCT)基因,为提高其表达水平奠定基础.方法:根据大肠杆菌密码子频率表,在不改变hCT氨基酸组成的前提下,设计并合成适于在大肠杆菌中表达的编码hCT的DNA序列,经PCR扩增后,与质粒载体pGEM -Teasy进行连接.连接产物转化感受态JM109大肠杆菌,筛选阳性菌落,经扩大培养后,对所含重组质粒进行鉴定.结果:经酶切鉴定及DNA序列分析证实,hCT编码DNA序列成功地克隆入pGEM -Teasy载体中,其序列与设计的完全一致.结论:完成了大肠杆菌偏嗜性人降钙素基因的克隆,为下一步hCT表达载体的构建及在大肠杆菌中进行表达的研究奠定了基础.
人降钙素 克隆 表达