应用PCR-DGGE和rRNA分析法研究了昆明盐矿古老岩盐沉积中的原核生物多样性.样品的细菌DGGE分析得到27条带,古菌得到18条带.样品与纯培养得到的19个属菌株的DGGE图谱对比分析发现,细菌18个属菌株,只有1个属菌株与样品中的1条带迁移位置都不一致;古菌1个属的菌株不与样品中任何条带迁移位置一致.表明纯培养所得菌株并非该环境中的优势类群.同时,建立了样品细菌和古菌的16S rDNA克隆文库,从中分别挑取36个细菌克隆和20个古菌克隆进行ARDRA分析.细菌可分为10个OTUs,其中3个OTUs是优势类群,分别占38.9%,25.0%,16.7%,其余7个OTUs各含有1个克隆.古菌分为8个OTUs,没有明显的优势类群.每个OUT的代表克隆16S rDNA序列分析表明,细菌分属3大类群:α-Proteobacteria,γ-Proteobacteria和Actinobacteria,以 Pseudomonas 属菌为优势,含有其它岩盐沉积中没有发现的Actinobacteria.古菌主要是 Halorubrum属、Haloterrigena 属菌和未培养古菌.本研究表明,昆明盐矿古老岩盐沉积具有较丰富的原核生物多样性,含有大量未知的、未培养或不可培养的原核生物,但在原核生物物种组成和丰度上,免培养与此前的纯培养研究结果存在一定差异.因此,结合使用两类方法才能较全面地认识高盐极端环境微生物的多样性.
古老岩盐沉积 16S rDNA PCR-DGGE 克隆文库 ARDRA 原核生物多样性