利用原核表达系统获得包涵体表达形式的重组蛋白hPD-L220~123(IgV结构域)和hPD-L220~208(IgV结构域和IgC结构域);将重组蛋白利用Ni-NTA柱亲和层析纯化与复性后,作为免疫原免疫Balb/c雌性小鼠制备鼠抗人的多抗血清,经ELISA法检测其效价均达到1:106;Western-blot实验结果表明,制备的多抗血清均能特异性识别hPD-L2蛋白.以制备的多抗血清进行IHC实验评估与鉴定,结果显示:以hPD-L220~123重组蛋白为免疫原制备的多抗血清阳性较弱且定位模糊,以hPD-L220~208重组蛋白为免疫原制备的多抗血清具有很强的膜定位且背景清晰.
人源PD-L2蛋白 主要抗原表位区 原核表达 抗血清