根据GenBank中斑马鱼(Danio rerio)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss)孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)基因序列设计保守区域简并引物,通过PCR扩增获得草鱼(Ctenopharyngodon idellus)PXR cDNA核苷酸序列片段为509 bp,经推导获取169 aa序列.对草鱼与其它物种PXR氨基酸序列进行同源性比较,用以鉴定其在物种中的进化.应用实时荧光定量PCR( qRT-PCR)检测草鱼9种组织PXR和细胞色素P450 3A(cytochrome P450 3A,CYP3A)基因mRNA相对含量,结果表明,其表达丰度依次为:前肠＞肝脏＞肾脏＞鳃＞肌肉＞后肠＞性腺＞心脏＞脾脏,CYP3A和PXR基因在草鱼组织中表达分布基本一致,在前肠、肝脏和肾脏高度表达,而在其它组织低度表达.为了进一步研究PXR和CYP3A基因表达相关性,通过细胞,特选用诱导剂利福平(rifampicin,RIF),最佳诱导浓度40μM,孵育1、2、4、6、8、10、12、24 h后,用qRT-PCR检测CYP3A-PXR基因动态表达过程.结果显示,诱导组CYP3A和PXR基因表达量均高于对照组,显示出显著诱导效应.
草鱼 孕烷X受体 细胞色素P450 3A 草鱼肾细胞系