目的:确定copine V蛋白的亚细胞定位,初步研究该蛋白的生物学功能.方法:将copine V编码区基因分别构建真核表达载体pEGFP-copine V(或pRED-copine V),转染HEK293、HeLa细胞,在激光共聚焦荧光显微镜下与转染空载体pEGFP-N1(或pRED-N1)的细胞比较观察.结果:经限制性内切酶分析鉴定,构建的重组表达载体正确.通过激光共聚焦荧光显微镜观察,转染了重组载体pEGFP-copine V的细胞荧光信号集中分布于胞膜和内膜系统;进一步研究表明copine V定位于内质网而非线粒体,而空载体则在整个细胞中均匀分布.结论:copine V蛋白定位于细胞膜和内质网上,而不定位于线粒体.
copine V蛋白 亚细胞定位 内质网 线粒体 细胞膜