探讨乙型肝炎病毒X蛋白结合蛋白(hepatitis B X interacting protein,HBXIP)基因在乙型肝炎病毒X蛋白(HBX)诱导肝癌细胞凋亡时对细胞周期的影响.构建HBXIP基因真核表达载体pcDNA3-hbxip,进行瞬时基因转染,将克隆有HBx基因的pCMV-X(分别为1μg、2μg和3 μg)和pcDNA3-hbxip质粒分别和共转染至人H7402肝癌细胞中(总体积分别为50 μl).发现瞬时转染3μgpCMV-X质粒后,肝癌细胞凋亡发生率为34.4%,肝癌细胞的细胞周期相关蛋白p27表达水平发生明显上调;与对照组相比,瞬时转染1μg、2μg和3μg时,细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平均发生明显上调,但随着HBX水平的增加细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平发生明显下降;在稳定转染pCMV-X质粒的H7402-X肝癌细胞中无明显的细胞凋亡发生,研究发现p27的表达水平发生了明显下调,而细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平发生了明显上调;当pcDNA3-hbxip质粒与pCMV-X质粒进行共瞬时转染时,细胞凋亡发生率由pcDNA3质粒与pCMV-X质粒共转染时的29.2%下降为13.3%,p27的表达水平发生了下调,但细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平无明显变化.研究结果表明,瞬时转染一定剂量的x基因可导致肝癌细胞发生凋亡,细胞周期相关蛋白p27、细胞周期蛋白D和细胞周期蛋白E的表达水平发生了变化,HBXIP蛋白可抑制HBX蛋白介导的细胞凋亡.
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