热休克蛋白90(HSP90)作为一种研究的常规免疫基因,在许多物种都有过报道.本研究从构建的魁蚶转录组文库中筛选得到的HSP90基因部分序列为基础,通过RACE技术获得其cDNA全长序列(命名为SbHSP90),以期明确魁蚶HSP90基因的结构特征、组织分布及其对病原菌刺激的免疫变化规律.序列和结构分析表明,该cDNA全长2707bp,编码一个由728个氨基酸组成的多肽,该多肽含有HSP90家族共有的5个签名序列,C端高度保守的MEEVD短肽序列和ATPase结构域;预测蛋白的分子量(Mw)为83.72kDa,理论等电点(pI)为4.85;预测该蛋白无信号肽,具有4个糖基化位点.同源性及系统分析表明,SbHSP90基因与软体动物的HSP90相似性达到83％以上,其中与长牡蛎(Crassostrea gigas)和海湾扇贝(Argopecten irradians)相似度最高达86％,与甲壳动物HSP90的相似度都在81％左右,与脊椎动物HSP90-α和HSP90-β的同源性都很接近.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果表明:SbHSP90 mRNA在魁蚶血细胞、斧足、鳃、外套膜、闭壳肌和肝胰腺和中均有表达,斧足中的表达量相对较高,而在肝胰腺中的表达量则相对较低;注射鳗弧菌后,相对于对照组,SbHSP90基因在所检测的每个组织中mRNA水平上的表达量都显著上调(P＜0.01),而且具有显著的时间依赖性和瞬时表达趋势.
魁蚶 热休克蛋白90 基因表达 免疫反应