从猪胃窦和十二指肠提取总RNA,采用美国Ambion RNA公司生产的Quantum RNA classic 18S为内标,建立了半定量RT-PCR方法,并对胃窦和十二指肠胃泌素mRNA进行了定量检测、测序和比较分析.结果表明,扩增的猪胃窦和十二指肠胃泌素核苷酸序列与猪前胃泌素(propregastrin)核苷酸的同源性达到99%.将其与已发表的人、牛、大鼠和小鼠等物种相应序列的比较结果表明,无论是核苷酸水平,还是氨基酸水平,都显示出了较高的同源性(80%～99%).另外,建立的RT-PCR方法灵敏度高,操作快捷方便,可用于定量检测少量的组织样品中低丰度表达的胃泌素mRNA.
RT-PCR 胃泌素 同源性分析