目的构建小鼠嗜铬颗粒蛋白B(chromogranm B,CgB)重组原核表达载体.方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出CgB基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-T vector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达.结果表达产物经Western Blot分析,在140处有一明显特异带,与预期结果相符.结论构建重组融合表达载体pGEX-CgB,在原核细胞中成功表达出小鼠CgB-GST融合蛋白.
RT-PCR 嗜铬颗粒蛋白B 基因表达