目的 研究钠氢交换调控因子1(Na+/H+exchanger regulatory factor-1,NHERF1)的蛋白降解机制.方法 采用蛋白酶体抑制剂MG132处理乳腺癌细胞并检测NHERF1的蛋白和mRNA表达水平;过表达多种泛素连接酶并筛选特异性下调NHERF1蛋白表达水平的泛素连接酶;在乳腺癌细胞中梯度过表达TRAF6(TNF receptor-associated factor 6),检测TRAF6对NHERF1的蛋白和mRNA表达水平的影响;采用免疫荧光、 免疫共沉淀和GST-pull down实验验证NHERF1和TRAF6的相互作用.结果 NHERF1蛋白的稳定性受泛素-蛋白酶体途径调控;TRAF6不影响NHERF1 mRNA的表达水平,但可以通过其泛素连接酶活性下调NHERF1的蛋白表达水平;NHERF1与TRAF6两者之间存在相互作用.结论 泛素连接酶TRAF6参与了NHERF1的泛素蛋白酶体途径降解.
钠氢交换调控因子1 TRAF6 泛素化 PDZ蛋白 蛋白相互作用