苹果酸乳酸酶(简称苹乳酶)是果酒生产过程中苹果酸乳酸发酵(简称苹乳发酵)的关键酶.为了构建分泌表达苹乳酶的大肠杆菌表达系统,作者通过融合PCR将信号肽基因(487 bp)和苹乳酶基因(1623 bp)的编码序列连接在一起,将融合片段(2110 bp)克隆到表达质粒pET28a(+)上并转化大肠杆菌,得到阳性克隆子.IPTG诱导阳性克隆子后可得到相对分子质量约为60000左右的蛋白质,利用HPLC可在其发酵上清液中检测到240.7 mg/L的L-乳酸.这说明成功构建了分泌表达苹乳酶的大肠杆菌系统,该菌株的获得将为苹乳酶的研究和应用提供了技术平台.
苹果酸乳酸酶 苹乳发酵 分泌表达系统