探讨了胚胎干细胞在体外大量扩增的方法.将胚胎干细胞复苏后,选择合适的培养基(含高糖和谷氨酰胺的DMEM,加入ψ=20%胎牛血清,105U/L青链霉素双抗,0.1 mmol/LL-谷氨酰胺,103IU/L白血病抑制因子,0.1 mmol/L β-巯基乙醇)进行培养.此外,使用早代胚胎干细胞;培养时使用不涂明胶的一次性培养瓶;掌握好消化、复苏和冻存时机并及时换液;按照严格步骤进行培养、传代、冻存.对扩增后的ES细胞进行染色体和全能性检测.结果表明,在较短时间内(5 d)可将胚胎干细胞扩增16倍以上.扩增后的ES细胞较好地保持了胚胎干细胞的全能性和核型.可见使用合适的培养基,按照严格步骤操作,短期内完全可以大量扩增胚胎干细胞.
胚胎 干细胞 培养 扩增