用PCR随机诱变方法，研究氨基酸置换对耐热邻苯二酚2，3-双加养酶性质的影响。比较分析了突变体ro229Ser和Glu243Gly与野生型酶的酶学性质。结果显示点突变Pro229→Ser或Glu243→Gly并未改变酶的最适反应温度（均为60℃）；突变体Pro229Ser（Kcat／Km＝4.89±0.01×106mol－1s－1）以及突变体Glu243Gly(Kcat／Km＝5.88±0.01×106mol－1s－1)的催化能力与野生型酶（Kcat／Km＝6.97±0.01×106mol－1s－1）相比有所下降；点突变Pro229→Ser大幅度降低了酶的热稳定性（ΤTm≈10.2℃），而点突变Glu243→Gly对酶的热稳定性影响较小（Tm≈1.5℃）。推测Pro229对耐热邻苯二酚2，3双加养酶的热稳定性有重要贡献。
随机诱变 热稳定性 耐热邻苯二酚2 3-双加养酶