探讨靶向microR-155(微小RNA 155,miR-155)放射性探针在乳腺癌细胞水平的靶向调控、摄取和分布情况,以期为活体靶向研究提供有效的候选探针.通过双功能偶联剂NHS-MAG3构建放射性99m Tc标记的miR-155靶向和无义探针.置于人新鲜血清中,使用薄层层析法测定其放化纯度.转染乳腺癌MCF-7细胞后,通过western blotting评价其对miR-155靶蛋白C/EBPβ的调节作用,并测定不同时间点该探针的细胞摄取率.合成荧光蛋白FAM标记的靶向和无义探针,通过共聚焦显微镜评价荧光标记探针在肿瘤细胞内的分布情况.结果显示,99mTc标记miR-155靶向探针的标记率为97％,放化纯度大于98％,放射性比活度为3.75 GBq/μg.在人新鲜血清中12h,放化纯度大于95％.与未处理细胞对比,未标记和标记的miR-155靶向探针均能上调MCF-7细胞内C/EBPβ蛋白表达水平.随着孵育时间延长,99mTc标记的miR-155靶向探针在MCF-7肿瘤细胞的细胞摄取率明显高于对照组.荧光标记的miR-155靶向探针在MCF-7细胞中24 h显示出稳定、高效的靶向分布.结果表明,miR-155靶向的放射性探针在乳腺癌细胞水平具有良好的靶向性和生物活性,具有潜在的体内肿瘤显像应用价值.
微小RNA 放射性标记 细胞摄取 荧光成像 MCF-7