LPTS是利用定位候选克隆策略,得到的一个新的肝相关候选肿瘤抑制基因(a novel liver-related putative tumor suppressor),为了进一步研究其结构与功能,利用DNA重组技术,将LPTS的cDNA克隆到融合表达载体pET-24a中,在E.coli中表达,以Ni +柱亲和层析,获得纯化的6×His-LPTS融合蛋白.以此为抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,ELISA法检测其滴度达20000以上,经亲和层析纯化,Western印迹结果表明,该纯化抗体可与真核表达的HA-LPTS蛋白和内源性的LPTS蛋白特异性结合;免疫荧光分析显示SMMC-7721细胞内源性表达的LPTS蛋白呈点状分布于细胞核内.以上结果表明获得了效价高,活性强的针对LPTS蛋白的多克隆抗体,可用于对LPTS的结构和功能研究.
LPTS 多克隆抗体 亲和层析 免疫荧光 特异性