茂原链轮丝菌Streptoverticillium mobaraense所产生的谷氨酰胺转胺酶发酵液通过抽滤、超滤、乙醇沉淀、离心和冷冻干燥,制得粗酶粉的酶活约为1 033 U/g.对粗酶研究发现,该酶的最适反应温度为52 ℃,最适pH为6.0;粗酶的pH稳定范围在4～8,温度稳定范围在20～40 ℃,离子强度对该酶的活性稍有影响.粗酶经CM-纤维素层析和Sephadex G-75凝胶过滤层析后得到较纯的酶,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检验蛋白质纯度,得到较弱的单一区带.其中,CM-纤维素层析的纯化倍数为4.5,收率质量分数约为78.8%;凝胶过滤层析纯化倍数为1.11,收率质量分数为50%;用凝胶过滤法测得谷氨酰胺转胺酶的相对分子质量为40 092.
谷氨酰胺转胺酶 纯化 酶学性质