目的制备诱生型一氧化氮合酶(iNOS)特异性抗体并应用于iNOS检测.方法将iNOS N端片段装入原核表达载体pET-28a(+),在大肠杆菌BL21中表达,两步法纯化目的蛋白,使用纯化蛋白制备iNOS多克隆抗体.获得的抗血清用于小鼠巨噬细胞及小鼠脑缺血模型中iNOS的检测. 结果得到具有较高表达量的融合蛋白,经两步纯化获得iNOS N端融合蛋白纯品,将此蛋白免疫家兔,得到iNOS多克隆抗体,Western blot分析表明该抗体不与nNOS、eNOS交叉反应,而能检测组织、细胞中的iNOS.结论原核表达iNOS N端片段制备的iNOS抗体具有很好的反应性及特异性.
诱生型一氧化氮合酶 重组蛋白 特异性抗体