为揭示玉米赤霉烯酮(ZEA)生殖毒性的机理,试验以小鼠睾丸间质细胞系TM3细胞为对象,白藜芦醇(RSV)为激活剂,探究了SIRT1在玉米赤霉烯酮(ZEA)致小鼠睾丸间质细胞氧化损伤中的调控作用.试验分设对照组、RSV组(5μmol/L)、ZEA组(10 μmol/L)、RSV+ZEA组(5μmol/L RSV+10μmol/L ZEA),处理24 h后,通过CCK-8法检测细胞活力,qRT-PCR检测细胞SIRT1基因表达,实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)实时监测细胞指数,流式细胞术检测活性氧(ROS)水平,试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)含量和过氧化氢酶(CAT)活性,qRT-PCR检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)基因表达,AO/EB染色检测细胞凋亡情况.结果 显示,与对照组比,ZEA浓度为10 μmol/L时能极显著抑制TM3细胞的活性(P＜0.01),提高细胞内MDA水平(P＜0.01),抑制过氧化氢酶CAT活性,晚期凋亡的TM3细胞明显增多;与ZEA组相比,RSV+ZEA组细胞活力显著提高(P＜0.05),SIRT1基因明显激活(P＜0.01),MDA水平极显著下降(P＜0.01),CAT活力呈现显著性上升,GSH-Px和SOD基因表达水平显著上升(P＜0.05),晚期凋亡的TM3细胞明显减少.结论 认为,SIRT1基因的激活可减轻ZEA对小鼠睾丸间质细胞的氧化损伤作用,减少细胞的凋亡损伤,对ZEA致TM3细胞损伤具有保护作用.
SIRT1基因 白藜芦醇 玉米赤霉烯酮 睾丸间质细胞 氧化损伤 细胞凋亡