提取MCF-7乳腺癌细胞的总RNA,通过RT-PCR技术扩增出hPPAR γ/LBD cDNA,并克隆于载体pGEX-1γ上,测序表明该序列与已报道序列相同,将其转入BL21(DE3)大肠杆菌中,IPTG诱导表达GST-hPPAR γ/LBD,在不同培养温度或IPTG诱导浓度下,GST-hPPAR γ/LBD以可溶或包涵体形式存在,表达产物经谷胱甘肽Sepharose 4B亲和层析纯化,可被抗hPPARγ多克隆抗体特异识别,并与其天然配体发生特异性结合.
PPAR γ配体结合域 融合基因表达 纯化 鉴定