目的 建立可视化环介导等温扩增 (LAMP) 方法检测肺炎克雷伯菌耐药基因blaKPC-2, 并初步评估其应用价值.方法 设计3对特异性的LAMP引物, 建立25μL的LAMP检测体系并进行优化, 通过与聚合酶链反应 (PCR) 进行比较, 分析其特异性和敏感性.结果 成功建立了检测肺炎克雷伯菌耐药基因blaKPC-2的可视化LAMP方法.63℃保温40 min可实现对blaKPC-2基因的快速检测.特异性与PCR一致, 敏感性比PCR高约10倍.采用新建立的可视化LAMP方法检测出25株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南其中之一耐药的肺炎克雷伯菌中有12株携带blaKPC-2基因, 31株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南敏感的肺炎克雷伯菌中有5株携带blaKPC-2基因, 二者比较差异有统计学意义 (P=0.009 9) .结论 建立的可视化LAMP方法可作为检测肺炎克雷伯菌耐药基因blaKPC-2的方法, 但尚不能替代体外药物敏感性试验.
环介导等温扩增 肺炎克雷伯菌 耐碳青霉烯酶 blaKPC-2基因