3-甾酮-9α-羟化酶是转化雄甾-4-烯-3,17-二酮生成9α-羟基雄甾-4-烯-3,17-二酮的关键酶,其加氧酶组分在底物进入酶活性中心入口处,存在一个由16个氨基酸构成的柔性 loop.为了明晰 loop对酶活性的影响,利用定点突变技术对 loop上结构变化较大的氨基酸进行研究,解析出了各氨基酸的作用,T224、N225、Y226与周围α,5螺旋和 β折叠存在一定相互作用,共同调节底物通道与底物运送能力;D227和 D228起到支撑固定 loop结构的作用,使T224-Y226能与其周围的氨基酸产生相互作用.这为进一步采用蛋白质工程改造9α-羟化酶提供了理论依据.
3-甾酮-9α-羟化酶 雄甾-4-烯-3 17-二酮 9α-羟基雄甾-4-烯-3 loop 定点突变