目的为探讨突变MyBPC基因致肥厚型心肌病致病机制,首先需要分离所需研究基因、构建表达载体. 方法用32PdCTP标记的MyBPC cDNA片段为探针,自人心肌cDNA文库筛选克隆正常MyBPC cDNA;重叠PCR法制备5种不同突变MyBPC cDNA片段,酶切后分别重组入PMW172和C MV载体并进行序列分析. 结果获得含有全表达序列(33-3858)的Pbluescript 质粒;酶切鉴定载体构建成功;序列测定证实目标突变存在. 结论为表达MyBPC蛋白,比较与肌凝蛋白的结合功能奠定了基础.
肌凝蛋白结合C 基因 DNA探针 序列分析