研究酿酒葡萄‘桂葡1号’幼叶原生质体的最佳分离条件.以‘桂葡1号’20～30日龄无菌苗幼叶为分离原生质体试材,对分离过程中酶液组合、酶解时间、稳定剂浓度、纯化时离心速度及离心时间进行比较分析.酶组合以2％纤维素酶+0.5％果胶酶为宜.随着酶解时间的延长,原生质体的产量逐渐增高,适合‘桂葡1号’幼叶原生质体的酶解时间以8h为宜.在0.45～0.55 mol/L的甘露醇范围内,随浓度提高,原生质的产率明显上升,0.55 mol/L时达到最大2.48×106个/(g·FW),活力为79.78％.在悬浮纯化原生质体时,以1000 r/min离心6～8 min的效果较好.分离材料的适宜酶液组合为2％ Celluasw Onozuka R-10+0.5％ PectolyaseY-23+25 mmol/L MES+0.55 mol/L甘露醇,解离时间以8h为宜.悬浮纯化时,蔗糖浓度以30％、1000 r/min离心6～8 min效果较好.
酿酒葡萄 原生质体 幼叶 分离