建立了利用高效液相色谱法(H PLC)分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸(胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸)的方法.采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为Eclipse XDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵(TBAOH,10%)=894.5:100:5:0.5;流速为1.0mL/min;四种核苷酸标准曲线相关系数r均达到0.999利用5'-磷酸二酯酶酶解双孢蘑菇中提取制得的核酸制品,为获得酶解的最适工艺条件,通过单因素实验,在底物浓度为2mg/mL的条件下,对其酶解条件:时间、温度、pH和酶底比进行了初步研究,研究结果表明酶解的最适工艺条件:时间为3h、温度为40℃、pH为5.8、酶底比为1300U/g核酸,在该条件下核酸酶解率为68.1%.
高效液相色谱 核苷酸 双孢蘑菇 5’-磷酸二酯酶