透明质酸酶(Hyalurondiase,HAase)是一种具有医药作用的水解酶,为了提高HAase在重组毕赤酵母中的分泌表达量,对重组毕赤酵母诱导阶段的温度进行了优化.研究发现,降低诱导温度可以提高HAase的产量,其中两阶段控制温度诱导策略效果最为显著.诱导阶段0～60 h温度控制在25 ℃,60～96 h温度控制在22℃,HAase酶活最高为1.18×106 U/mL,是诱导温度为30℃时(4.53×105 U/mL)的2.6倍.此外,采用两阶段控制温度诱导策略有利于细胞活性的提高和AOX1启动子的表达.两阶段控制温度诱导策略还可以应用到其他酵母表型中,为毕赤酵母高效表达外源蛋白质提供一种新思路.
透明质酸酶 毕赤酵母 两阶段控制温度 分泌表达