为了获得人重组persephin(PSP)并研究其生物学活性,从人胎脑组织中提取总RNA,以RT-PCR方法获取编码人PSP成熟蛋白cDNA.将人PSPcDNA插入含T7启动子的质粒pET-28a(+),构建表达质粒pET-PSP,转化大肠杆菌B121(DE3)获得表达菌株BLPSP,经IPTG诱导表达的PSP形成包含体.凝胶自动扫描分析表明,PSP表达量约占菌体总蛋白20%以上.用Ni2+-NTA树脂一步法纯化目的蛋白,纯度达85%以上.纯化和复性的PSP蛋白能显著促进脊髓神经元的存活.
人PSP 基因克隆 基因表达 脊髓神经元