针对毕赤酵母发酵液中分离重组人血白蛋白(rHSA),采用新型介质IAA-CYS,探讨HSA吸附性能,优化分离条件,实现rHSA高效分离.考察了不同pH和盐浓度下IAA-CYS介质对HSA的吸附,发现pH为4.5是最佳条件,HSA饱和吸附容量达到157.6 mg.mL-1,盐浓度影响较小.测定了不同NaCl浓度和线性流速下IAA-CYS介质对HSA的动态载量,发现流速影响较大,合适流速为100 cm.h-1;盐浓度影响较小,无需对酵母发酵液进行稀释预处理,rHSA动态载量达48.3 mg.mL-1.进一步优化了发酵液中分离rHSA,上样pH为4.5,上样流速为100 cm.h-1,上样量为38.6 mg.mL-1,在pH为5.0和质量浓度为400 mg.mL－1的NaCl条件下淋洗,在pH为8.0和质量浓度为 200 mg.mL－1的NaCl条件下洗脱,rHSA纯度为90.1％,收率为88.6％.结果表明,IAA-CYS介质分离rHSA条件温和,耐盐性好,料液无需稀释预处理,过程简便高效,具有良好的应用前景.
人血白蛋白 层析介质 吸附性能 蛋白分离