利用生物化学与生物物理学前沿技术系统地分析了鸽子(Columba livia)DHX36解旋酶的酶学特性.通过原核表达纯化系统获得了纯度大于95％的ClDHX36蛋白.利用荧光各向异性法研究ClDHX36的底物结合偏好性,结果表明ClDHX36偏好结合ssRNA、ssDNA和G4,并且优先结合序列中富含鸟嘌呤的ssDNA.通过快速停留光谱技术探索C1DHX36的解旋活性,明确了ClDHX36解旋方向性为3'-5',更倾向于解旋尾链为Grich和G4的dsDNA底物,且ClDHX36的解旋活性与底物的尾链长度呈负相关性.本研究揭示了C1DHX36在结合和解旋底物过程中均具有明显的底物偏好性,为深入研究DHX36的工作机理提供参考.
鸽子DHX36 蛋白表达纯化 结合活性 解旋活性