测定临床耐多药志贺菌株H24的外排泵emrE基因的表达情况,尝试建立一个快速检测外排泵基因表达的方法.提取多耐药志贺菌株H24的RNA,用实时荧光定量RT-PCR方法验证H24的外排泵emrE基因mRNA表达水平和耐药的相关性.实时荧光定量RT-PCR获得H24的外排泵基因emrE的mRNA相对表达量,emrE基因的相对表达量为内参基因gapA的2万多倍；同一标本重复扩增,emrE和gapA基因相对拷贝数的平均变异系数分别为1.4％和1.3％,提示本方法可准确检测二者的相对拷贝数.由emrE基因的高表达可以推断它与志贺茵的多耐药有正相关性,这个推断结果与以前通过克隆emrE基因的方法得到的结果一致.所建立的emrE基因荧光定量RT-PCR诊断方法特异性好、敏感性高,SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR可进一步应用于志贺茵多耐药株其他外排泵的临床诊断和科学研究.
志贺茵 外排泵 荧光定量RT-PCR