产丁二酸放线杆菌以秸秆糖为碳源固定CO2过程中,磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶是其转化关键酶. 文章在菌株酶基因克隆基础上,通过改变pH值、离子和底物,分析了该关键酶的酶特性.结果获得了登录号为EU253567的基因序列,发酵24 h时其酶活超过700 U/mg.离子分析结果表明,Mn2+与Mg2+对该酶具有明显的激活作用,而Cu2+则对酶活具有显著的抑制作用.围绕底物的酶促动力学分析表明,该酶对HCO3-的Km为7.0×10-2 mol/L,即该酶对HCO3-的亲和力较弱,这表明发酵体系应保持高浓度的HCO3-.分析可知,关键酶能够在一定程度上提高酶活力,从而能够间接指导发酵工艺,提高生产力.
丁二酸 CO2固定 磷酸烯醇式丙酮酸羧化激酶