根据Hoechst与ssDNA作用时不产生荧光或荧光很弱,而与dsDNA作用时荧光增强的原理,将待测ssDNA与互补ssDNA杂交形成dsDNA,实现Hoechst染料对ssDNA的检测.文中研究了不同序列、不同长度、互补链及碱基错配链等杂交产物与Hoechst染料作用的荧光强度的变化规律.同时以H1N1禽流感病毒DNA特定序列为例建立了定量检测ssDNA的新方法.线性范围为5.6×10-10～3.0×10-8mol/L,线性关系:y=24.005x+0.4858,R2=0.9967,检出限为4.8×10-10mol/L.该方法具有操作简单,检测快速,灵敏度高和选择性好等优点.
荧光染料Hoechst ssDNA 杂交 荧光光谱 定量分析