目的 探讨白藜芦醇衍生物TMS(trans-3,5,4’-trimethoxystilbene)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中一氧化氮(nitric oxide,NO)、血管细胞间黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)及核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达的影响.方法 取P3代HUVECs,采用CCK-8法检测不同TMS浓度(0、5、10、20、50、100 μmol/L)对HUVECs细胞存活率的影响.将P6代HUVECs分为正常对照组、LPS组、TMS(高、中、低浓度)+LPS组及PDTC+ LPS组,Griess法检测各组细胞产生NO浓度;Real-time PCR法检测各组细胞中VCAM-1、NF-κB p65基因mRNA的转录水平;Western blot法检测各组细胞中VCAM-1、NF-κB p65和IκBα蛋白的表达水平;免疫细胞化学染色法检测各组细胞中VCAM-1和NF-κB p65蛋白的表达水平.结果 5、10 μmol/L浓度组TMS对细胞存活率影响较小,50、100 μmol/L浓度组中细胞生存率明显下降(P＜0.05),且呈时间、剂量依赖性.低、中、高浓度TMS+LPS组与PDTC+LPS组细胞中NO浓度显著下降(P＜0.05);中浓度TMS+ LPS组和PDTC+ LPS组细胞中VCAM-1、NF-κB p65基因mRNA转录和蛋白表达水平均明显低于LPS组(P＜0.05),IκBα蛋白表达水平明显高于LPS组(P＜0.05);正常对照组细胞胞质中有弱VCAM-1蛋白荧光表达,未见NF-κB p65蛋白荧光表达,LPS组可见VCAM-1和NF-κB p65蛋白的强荧光表达,中浓度TMS+LPS组和PDTC+ LPS组中VCAM-1和NF-κB p65蛋白荧光表达均弱于LPS组.结论 白藜芦醇衍生物TMS可抑制LPS诱导HUVECs表达NO、VCAM-1和NF-κB p65,且其抑制VCAM-1效应可能是通过NF-κB细胞信号通路而发挥作用的,本研究为临床治疗血管内皮功能紊乱相关疾病提供了实验依据.
白藜芦醇衍生物TMS 脂多糖 人脐静脉内皮细胞 一氧化氮 血管细胞间黏附分子-1 核转录因子-κB