将转化至Escherichia coli BL21 Gold(DE3)中aglA基因的质粒表达葡萄糖苷酶用以催化生产α-熊果苷.再利用超声波破碎技术和镍离子层析柱提取并纯化转葡萄糖苷酶,并将其用海藻酸钠-明胶混合固定,使其可重复使用.确定最佳的固定化条件,即将3.0％海藻酸钠和3.0％明胶配制溶解于pH 7的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲溶液的混合胶体,在高度45 cm左右进行滴定4℃预冷的300 g/L氯化钙溶液并固定化20 min.冲洗后进行50 min的-20℃钙化操作,获得直径为3.97 mm、质量为0.311 g的固定化珠.
诱导表达 α-熊果苷 转葡萄糖苷酶 固定化