目的 探讨27-羟基胆固醇(27-hydroxycholesterol,27-OHC)在神经细胞(SH-SY5Y)和星形胶质细胞(C6)共培养体系中对细胞溶酶体胆固醇转运相关因子表达的影响.方法 采用Trans-well小室进行SH-SY5Y细胞和C6细胞共培养,使用不同剂量的27-OHC对共培养体系下细胞进行处理,分为对照组(DMEM组)、低剂量组(27-OHC 5μmol/L)、中剂量组(27-OHC 10μmol/L)及高剂量组(27-OHC 20 μmol/L).采用COD-PAP法检测两种细胞中的总胆固醇浓度;采用Real-time PCR和Western blotting检测两种细胞溶酶体内特异性胆固醇转运蛋白质——尼曼匹克蛋白质1(Niemann-Pick C protein 1,NPC1)、NPC2的基因表达水平和蛋白质表达水平.结果 随着27-OHC处理浓度的升高,SH-SY5Y细胞内胆固醇浓度逐渐上升(P＜0.05),C6细胞内胆固醇浓度逐渐降低(P＜0.05);SH-SY5Y细胞溶酶体内NPC基因及蛋白质表达水平显著下调(P＜0.05);C6细胞内溶酶体NPC基因及蛋白质表达水平显著上调(P＜0.05).结论 27-OHC可引起神经细胞及星形胶质细胞溶酶体内胆固醇转运障碍,使胆固醇在神经细胞溶酶体内蓄积.
27-羟基胆固醇 神经细胞 星形胶质细胞 溶酶体 转运 共培养