[研究目的]构建一个同时反义共抑制甘蓝型油菜(Brassica napus)透明种皮12基因家族(BnTT12)转录的植物表达栽体.[方法]通过PCR扩增得到BnTT12家族一段503bp的特异保守片段TT12A,通过亚克隆整合到中间载体pCambia2301G,构建TT12反义植物表达载体pCambia2301G-TT12A.采用液氮冻融法将其转化到根癌农杆菌.[结果]经过PCR鉴定、酶切鉴定和DNA测序证实栽体构建成功,并转化到根癌农杆菌LBA4404菌株中形成TT12反义表达载体的工程菌株.[结论]pCambia2301G-TT12A的成功构建为利用此反义载体通过遗传转化获得转基因新型黄籽油菜和进一步探明TT12基因在甘蓝型油菜种皮色素合成途径中的分子生物学机理奠定了基础.
TT12 类黄酮 反义 载体 甘蓝型油菜