目的:鉴定并分析EFTUD2 (elongation factor Tu GTP-binding domain-containing 2)基因的启动子区域.方法:应用生物信息学技术对EFTUD2基因结构及潜在启动子区域进行分析,预测4个EFrUD2启动子序列.使用全基因合成技术以及高保真PCR扩增得到目的启动子序列,通过BglⅡ和Nhe Ⅰ双酶切,将目的条带克隆到双荧光素酶报告基因载体psiCHECK-2中,得到4个长度不同并覆盖EFTUD2基因转录起始位点附近约2 kb的EFTUD2基因启动子双荧光素酶报告基因重组体.荧光素酶分析检测启动子活性.结果:经酶切、测序鉴定,成功构建了人EFTUD2启动子荧光素酶报告基因重组质粒.通过荧光素酶活性检测,重组体EFTUD2-0.5的相对荧光素酶活性增加(P＜0.05),提示EFTUD2基因核心启动子序列位于转录起始位点附近约500 bp的区域内.结论:EFTUD2基因转录起始位点上游500 bp具有启动子活性,初步判定其核心启动子位于该区域.
EFTUD2 剪接体 启动子