目的:研究三氯生对原代大鼠卵巢颗粒细胞孕酮(P4)分泌功能的影响.方法:原代大鼠卵巢颗粒细胞培养备用.取备用的卵巢颗粒细胞采用不同浓度的三氯生(0、0.01、0.1、1μM)染毒.24 h后分别采用MTT法检测颗粒细胞的相对活力、酶联免疫法(ELISA法)检测颗粒细胞P4分泌水平、实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)及western blot法检测类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)以及3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的基因及蛋白表达水平.结果:三氯生在本研究所采用的浓度范围内对颗粒细胞的活性并没有影响(P＞0.05);三氯生(0.1、1μM)可抑制颗粒细胞P4的分泌,且呈现剂量依赖性下降(P＜0.05).三氯生(0.1、1μM)可使StAR的基因表达水平显著增高、P450scc的基因表达水平下降(P＜0.05).1μM三氯生可使StAR及P450scc的蛋白表达水平明显降低(P＜0.05).三氯生对3β-HSD的基因及蛋白表达水平皆没有影响(P＞0.05).结论:三氯生可抑制原代大鼠卵巢颗粒细胞的P4分泌,对类固醇激素合成关键分子的影响可能是其作用机制之一.
三氯生 原代大鼠卵巢颗粒细胞 孕酮