[目的]将改造后的GFP(super-fold GFP,简写为sfGFP)作为三分子荧光互补技术的基础,通过应用多种GFP结合蛋白(GFP binding protein,GBP),筛选并验证可强化荧光互补作用的GFP结合蛋白.[方法]将sfGFP拆分为三部分(GFP1-9,GFP10和GFP11),建立GFP三分子荧光互补技术体系,利用多种GFP结合蛋白对GFP三分子荧光互补技术进行试验,通过观察荧光变化筛选可强化荧光互补作用的GFP结合蛋白.[结果]发现DARPin-GFP、GFP-enhan-cer和NbsfGFP这三种GFP结合蛋白能够与GFP共定位并对GFP三分子重组装有增强效果,其中GFP-enhancer与NbsfGFP增强效果约为原荧光强度4倍,DARPin-GFP约为2倍.[结论]GFP结合蛋白可作为一种新手段,使以GFP三分子荧光互补技术为基础的蛋白质-蛋白质相互作用研究的检测效率和灵敏度得到提高.
super-folder GFP GFP结合蛋白 三分子荧光互补技术