Hydrodynamic delivery
ہائیڈروڈائنامک ڈیلیوری (ایچ ڈی) چوہوں کے نمونوں میں ڈی این اے داخل کرنے کا ایک طریقہ ہے۔ جین جانوروں کے خون کے بہاؤ میں انجکشن کے ذریعے پہنچائے جاتے ہیں، اور جگر میں ظاہر ہوتے ہیں۔ یہ پروٹوکول جین فنکشن کا تعین کرنے، جین کے اظہار کو منظم کرنے اور ویو میں دواسازی تیار کرنے میں مددگار ہے۔ طریقہ کار ہائیڈروڈائنامک ڈیلیوری کو وائرل انفیکشن (ٹرانسفیکشن) کے بغیر جین داخل کرنے کے طریقے کے طور پر تیار کیا گیا تھا۔ اس طریقہ کار کے لیے ہائی پریشر سوئی کا استعمال کرتے ہوئے چوہے کی رگوں میں ہائی والیوم ڈی این اے حل داخل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔ ڈی این اے کا حجم عام طور پر 8-10% جانور کے جسمانی وزن کے 8-10% کے برابر ہوتا ہے، اور 5 سے 7 سیکنڈ کے اندر انجکشن کیا جاتا ہے۔ اندراج کا دباؤ کارڈیک کنجشن (دل میں دباؤ میں اضافہ) کا باعث بنتا ہے، جس سے ڈی این اے کا محلول خون کے بہاؤ سے گزرتا ہے اور جگر میں جمع ہوتا ہے۔ دباؤ سیل جھلی میں سوراخوں کو بڑھاتا ہے، ڈی این اے کے مالیکیولز کو پیرنچیما، یا اعضاء کے فعال خلیوں میں مجبور کرتا ہے۔ جگر میں، یہ خلیے ہیپاٹوسائٹس ہوتے ہیں۔ انجکشن کے بعد دو منٹ سے بھی کم وقت میں، دباؤ قدرتی سطح پر واپس آ جاتا ہے، اور سوراخ واپس سکڑ جاتے ہیں، ڈی این اے کو سیل کے اندر پھنس جاتے ہیں۔ انجکشن کے بعد، زیادہ تر جین طویل عرصے تک جانور کے جگر میں ظاہر ہوتے ہیں۔ اصل میں ڈی این اے داخل کرنے کے لیے تیار کیا گیا، ایچ ڈی میں مزید پیش رفت نے خلیوں میں آر این اے، پروٹین، اور مختصر اولیگونیوکلیوٹائڈز کو داخل کرنے کے قابل بنایا ہے۔ ایپلی کیشنز ہائیڈروڈائنامک ڈیلیوری کے طریقوں کی ترقی ویو تجربات میں مطالعہ کرنے کا ایک متبادل طریقہ فراہم کرتی ہے۔ یہ طریقہ چھوٹے ممالیہ جانوروں میں وائرل ٹرانسفیکشن کے ممکنہ خطرات اور پیچیدگیوں کے بغیر موثر ثابت ہوا ہے۔ ان مطالعات کے استعمال میں شامل ہیں: ریگولیٹری عناصر کی جانچ، اینٹی باڈیز پیدا کرنا، جین تھراپی کی تکنیکوں کا تجزیہ کرنا، اور بیماریوں کے لیے ماڈل تیار کرنا۔ عام طور پر، جین کا اظہار جگر میں ہوتا ہے، لیکن اس طریقہ کار کو گردے، پھیپھڑوں، پٹھوں، دل اور پینکریاز میں جین کے اظہار کے لیے تبدیل کیا جا سکتا ہے۔ جینیاتی بیماریوں سے نمٹنے کی کوشش میں جین داخل کرنے کے لیے جین تھراپی ہائیڈروڈائنامک ڈیلیوری کا استعمال کیا گیا ہے۔ چونکہ ایچ ڈی نے بنیادی طور پر چھوٹے ممالیہ جانوروں جیسے چوہوں پر توجہ مرکوز کی ہے، اس لیے انسانوں میں اس کا اطلاق محدود ہے۔ جاری تحقیق بڑے ممالیہ جانوروں اور مستقبل کے طبی مطالعات میں استعمال میں اضافہ کر رہی ہے۔ کمپیوٹر کی مدد سے امیج گائیڈڈ تکنیک سرجنوں کو عین مطابق جگہ پر سوئی یا کیتھیٹر ڈالنے کی اجازت دیتی ہے، جبکہ ایک خودکار انجیکشن ڈیوائس زیادہ سے زیادہ جین ٹرانسمیشن کے لیے درکار دباؤ کی نگرانی اور ایڈجسٹ کرتا ہے۔ زیادہ عین مطابق انجیکشن کے ساتھ، ڈی این اے کے محلول کی مقدار کو حیاتیات کے جسمانی وزن کے تقریبا 1 فیصد تک کم کیا جا سکتا ہے۔ انجیکشن لگانے کے لیے کیتھیٹر کا استعمال کرکے، سرجن جگر کے علاوہ دیگر اعضاء میں جین کا اظہار کرنے کے قابل ہوتے ہیں۔ کیتھیٹر کو متبادل مقامات پر رکھنے سے ڈی این اے کے محلول کو ہدف تک پہنچنے میں مدد ملتی ہے، حالانکہ جگر میں جین اب بھی ظاہر ہوتے ہیں۔ ماڈل حیاتیات تیار کرنا ہائیڈروڈائنامک ڈی این اے ڈیلیوری انسانی بیماری کے لیے ماڈل سسٹم بنانے کے لیے ایک مفید ٹول ہے۔ اس تکنیک کا استعمال کرتے ہوئے، لیبارٹریز ویو میں جینیاتی بیماریوں کا مطالعہ کرنے کے قابل ہیں۔ مطالعات علاج کا مطالعہ کرنے کے لیے لیب کے جانوروں میں آنکوجین داخل کرنے کے قابل ہیں۔ جین کی منتقلی کے علاوہ، ایچ ڈی کو ٹیومر کے خلیوں میں بھی کام کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ میٹاسٹیٹک کینسر کے خلیات کو مخصوص کینسر کا مطالعہ کرنے کے لیے ماڈل حیاتیات میں کامیابی سے پہنچایا جا سکتا ہے۔ غیر وائرل منتقلی کے متبادل طریقے وائرل ویکٹر کے بغیر کسی جاندار میں جین داخل کرنے کے لیے متبادل طریقے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ ان کو جسمانی اور کیمیائی تکنیکوں میں تقسیم کیا جا سکتا ہے۔ جسمانی طریقے: الیکٹروپوریشن جین گن سونوپوریشن مائکرونیڈل میگنیٹوفیکشن کیمیائی طریقے: کیشنک لیپڈز کیشنک پولیمر ڈینڈریمر پر مبنی ویکٹر پولی پیپٹائڈ پر مبنی ویکٹر غیر نامیاتی، پولیمرک، اور لپڈ نینو پارٹیکلز جیمنی سرفکٹینٹس حوالہ جات حیاتیاتی تصورات