Light-induced fluorescence transient
لائٹ انڈیوسڈ فلوروسینس ٹرانزینٹ (ایل آئی ایف ٹی) ایک ایسا آلہ ہے جو تیز اور غیر تباہ کن طریقے سے پودوں میں کلوروفل فلوروسینس کی دور سے پیمائش کرتا ہے۔ ایکسائٹیشن لائٹ دالوں کی ایک سیریز کا استعمال کرتے ہوئے، ایل آئی ایف ٹی کلوروفل فلوروسینس ڈیٹا کو سپیکٹرم اور آر جی بی کی معلومات کے ساتھ جوڑتا ہے تاکہ مختلف فوٹو سنتھیٹک خصلتوں اور پودوں کے اشاریوں کے بارے میں بصیرت فراہم کی جا سکے۔ ایل آئی ایف ٹی پمپ-تحقیقات کے طریقہ کار کو لیزر سے چلنے والے فلوروسینس کے اصول کے ساتھ جوڑتا ہے۔ فلوروسینس پیمائش کا اصول پودوں میں فوٹو سنتھیس کے عمل میں فوٹو سنتھیٹک روغنوں کے ذریعے روشنی کا جذب، رد عمل کے مرکز میں توانائی کی منتقلی، چارج کی علیحدگی جس سے آکسیجن کا ارتقاء ہوتا ہے، اور الیکٹران ٹرانسپورٹ کے عمل کا ایک سلسلہ شامل ہوتا ہے۔ فوٹو سنتھیسز کی کارکردگی کا تعین الیکٹران ٹرانسپورٹ کی شرح، کاربن فکسشن، اور توانائی کی پیداوار جیسے عوامل سے ہوتا ہے۔ ایل آئی ایف ٹی پودے کو نیلی روشنی کی مختصر چمک سے بے نقاب کرکے اور ایف آر آر تکنیک کی مدد سے وقت کے ساتھ فلوروسینس میں ہونے والی تبدیلیوں کا تجزیہ کرکے فوٹو سنتھیسز کی پیمائش کرتا ہے۔ لفٹ ایف آر آر تکنیک لفٹ فاسٹ ریپیٹیشن ریٹ (ایف آر آر) فلوروسینس تکنیک پلانٹ فلوروسینس کی پیمائش کا ایک طریقہ ہے۔ یہ پلانٹ میں فوٹو سسٹم II کو متحرک کرنے کے لیے ایل ای ڈی سے نیلی روشنی کی دالوں کے مختصر پھٹنے کا ایک سلسلہ استعمال کرتا ہے۔ جب کوئنون قبول کنندہ اے (کیو اے) الیکٹرانوں کو باندھنے کی اپنی صلاحیت تک پہنچ جاتا ہے، تو نظام سنترپت ہو جاتا ہے اور اس کے نتیجے میں سرخ فلوروسینس خارج ہوتا ہے۔ یہ ایک عین مطابق ایکسائٹیشن پروٹوکول کے ذریعے ریگولیٹ کیا جاتا ہے، جو ایک سیچوریشن سیکوینس (SQA) اور ایک ریلیکسشن سیکوینس (RQA) پر مشتمل ہوتا ہے جس میں مختصر ایکسائٹیشن فلیش (1 μs) کا ایک سیٹ ہوتا ہے۔ اس کے بعد فلوروسینس کو ایف آر آر فلورومیٹری سے ماپا جا سکتا ہے۔ اس مقصد کے لیے، ایل آئی ایف ٹی آلے میں 685 ± 10 این ایم کی طول موج کے ساتھ سرخ کلوروفل فلوروسینس کو عکاسی شدہ روشنی سے الگ کرنے کے لیے ایک بلٹ ان آپٹیکل انٹرفیرنس فلٹر ہوتا ہے۔ اس ایکسائٹیشن پروٹوکول کے نتیجے میں ہونے والا فلوروسینس ٹرانزینٹ کیو اے کی کمی اور اس کے بعد کے ری آکسیڈیشن کی حرکیات کو ظاہر کرتا ہے، اور اسے مختلف فوٹو سنتھیٹک اشارے کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ یہ اشارے فوٹو سنتھیٹک سرگرمی کی سطح کے بارے میں معلومات فراہم کرتے ہیں، جیسے کہ روشنی کے استعمال کی کارکردگی، فوٹو کیمیکل تبدیلی کی کوانٹم پیداوار، اور الیکٹران ٹرانسپورٹ کی شرح۔ لفٹ سے بازیافت شدہ فوٹو سنتھیٹک اشارے لفٹ سسٹم پودے کو ایکسائٹیشن لائٹ سے متحرک کرکے کلوروفل فلوروسینس کی پیمائش کرتا ہے، جس کی وجہ سے فلوروسینس میں اس کی زیادہ سے زیادہ (ایف ایم ') تک اضافہ ہوتا ہے۔ قدرتی طور پر پائے جانے والے فلوروسینس (F ') کو ایکسائٹیشن لائٹ کے بغیر بھی ماپا جا سکتا ہے۔ متغیر فلوروسینس (ایف کیو) کا حساب ایف ایم 'اور ایف' کے درمیان فرق کے طور پر لگایا جا سکتا ہے۔ فوٹو سسٹم II کی آپریٹنگ کارکردگی کا حساب اس مساوات کا استعمال کرتے ہوئے کیا جا سکتا ہے: Fq '/Fm' = (Fm '-F')/Fm 'آرام کی ترتیب (RQA) کے لیے، مختلف وقت کے حصوں کے مطابق مختلف آرام کے پیرامیٹرز کا حساب لگایا جا سکتا ہے: Fr1، ~ 0.625 ms زیادہ سے زیادہ فلوروسینس ہونے کے بعد اور Fr2، ~ 6.5 ms زیادہ سے زیادہ فلوروسینس ہونے کے بعد۔ ان پیرامیٹرز کو کیو اے یعنی ری آکسیڈیشن کی کارکردگی کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ روشنی کے مطابق ڈھالنے والے پودوں کے لیے فوٹو سسٹم I میں کیو اے سے پی کیو پول کے درمیان الیکٹران کی منتقلی کی حرکیات۔ ترقی کی تاریخ اور ماڈل ہوا سے چلنے والے لفٹ آلے کا تصور 1998 میں رٹگرز یونیورسٹی میں زبگنیو کولبر نے تیار کیا تھا۔ پہلا فیلڈ ٹیسٹ 2002 میں ایریزونا میں بایوسفیئر 2 میں ایک اسٹیشنری بڑے لفٹ سیٹ اپ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا جو 50 میٹر تک کے فاصلے پر کام کرنے والے لیزر سے لیس تھا۔ پروٹو ٹائپ آلے کو بعد میں کارنیگی انسٹی ٹیوٹ، اسٹینفورڈ، اور ایریزونا کے زرعی تحقیقی مرکز میں بہتر بنایا گیا، جہاں اسے ٹریکٹر فریم پر چلانے کی پہلی کوشش کی گئی تھی۔ 2010 میں کئی آلات کارنیگی سے فورسچنگزینٹرم جولیچ منتقل کیے گئے جہاں انہیں غیر حملہ آور، ہائی تھرو پٹ ڈیٹا کے حصول کے لیے روبوٹک پوزیشننگ سسٹم میں لیبارٹری اور فیلڈ ریسرچ کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ موجودہ تحقیق حالیہ تحقیق میں، ایل آئی ایف ٹی کو فوٹو سنتھیسز کی حرکیات کو تلاش کرنے کے لیے لیبارٹری کی ترتیبات میں استعمال کیا گیا ہے اور اسے خشک سالی کا جلد پتہ لگانے کے لیے ہائی تھرو پٹ فینوٹائپنگ پلیٹ فارمز میں بھی لاگو کیا گیا تھا۔