DsbC protein family
ڈی ایس بی سی (ڈائیسلفائیڈ بانڈ سی) ایک پروکیریوٹک ڈائیسلفائیڈ بانڈ آئسومیرس ہے۔ مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈز کی تشکیل پروٹین کے مناسب فولڈنگ اور پروٹین کے ترتیری ڈھانچے کو مستحکم کرنے میں اہم کردار ادا کرتی ہے۔ ڈی ایس بی سی پروکیریوٹس میں ڈی ایس بی خاندان کے 6 پروٹینوں میں سے ایک ہے۔ دیگر پروٹین ڈی ایس بی اے، ڈی ایس بی بی، ڈی ایس بی ڈی، ڈی ایس بی ای اور ڈی ایس بی جی ہیں۔ یہ انزائم پروٹین کے اظہار کے دوران ڈائیسلفائیڈ بانڈ بنانے کے لیے ایک دوسرے کے ساتھ مل کر کام کرتے ہیں۔ ڈی ایس بی سی اور ڈی ایس بی جی تشکیل پانے والے ڈائیسلفائیڈ بانڈز کے پروف ریڈر کے طور پر کام کرتے ہیں۔ وہ غیر مقامی ڈائیسلفائیڈ بندھنوں کو توڑتے ہیں جو تشکیل پائے تھے اور مقامی ڈائیسلفائیڈ بندھنوں کی تشکیل کے لیے چیپرون کے طور پر کام کرتے ہیں۔ ڈائیسلفائیڈ بانڈز کی آئسومیرائزیشن پیریپلازم میں ہوتی ہے۔ انزائم میکانزم ڈی ایس بی اے، ڈی ایس بی سی اور ڈی ایس بی جی میں ان کی فعال جگہ میں ایک عام سیس-XXX-XXX-Cys (Cys-Cysteine) موٹف ہوتا ہے، جہاں XXX کوئی بھی امینو ایسڈ ہو سکتا ہے۔ پیریپلازم میں، ڈی ایس بی اے سسٹین میں تھائولز کو آکسائڈائز کر کے پروٹین میں ڈائیسلفائیڈ بانڈ بناتا ہے۔ ڈی ایس بی اے اپنی آکسیڈائزنگ صلاحیت سائٹوسول سے ڈی ایس بی بی کے ذریعے حاصل کرتا ہے۔ تاہم، غیر مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈ بننے کا امکان پروٹین کی ترتیب میں سسٹین کی تعداد کے ساتھ بڑھتا ہے۔ یہ غلط طریقے سے فولڈ شدہ پروٹین کی طرف جاتا ہے۔ ڈی ایس بی سی اور ڈی ایس بی جی غیر مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈز کو توڑ کر پروٹین کے مناسب فولڈنگ کو آسان بناتے ہیں۔ اس کے علاوہ، ڈی ایس بی سی چیپرون سرگرمی کو بھی ظاہر کرتا ہے۔ ڈی ایس بی سی پر کم شدہ سسٹین ہدف غیر مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈ پر نیوکلیوفیلک حملہ کرتا ہے، تاکہ ڈی ایس بی سی اور پروٹین کے درمیان غیر مستحکم ڈائیسلفائیڈ بانڈ تشکیل پائے۔ پروٹین میں ایک اور تھیولیٹ گروپ پھر اس غیر مستحکم بند پر حملہ کرتا ہے۔ حتمی نتیجہ مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈ کی تشکیل اور ڈی ایس بی سی میں تھیولیٹ گروپ کی اصلاح ہوگی۔ ڈی ایس بی جی بھی اسی طرح کے میکانزم کے ساتھ کام کرتا ہے، لیکن ڈی ایس بی سی کے مقابلے میں اس کی سلیکٹیویٹی زیادہ ہوتی ہے۔ ڈی ایس بی سی اور ڈی ایس بی جی دونوں اپنی کم کرنے کی طاقت، ڈی ایس بی ڈی کے ذریعے، سائٹوسول سے حاصل کرتے ہیں۔ ڈی ایس بی سی اور ڈی ایس بی جی کو ان کی کم شدہ شکلوں میں برقرار رکھا گیا ہے تاکہ متعدد ڈائیسلفائیڈ بانڈز کی تشکیل کے ساتھ پروٹین کی مناسب تہہ کو یقینی بنایا جا سکے۔ اینزیم اسٹرکچر ڈی ایس بی سی ایک ماڈیولر ڈائمر ہے، جس میں دو 23.3 کے ڈی اے ذیلی یونٹ ہیں۔ ہر مونومر میں چار سسٹین ہوتے ہیں، جن میں سے دو فعال جگہ پر موجود ہوتے ہیں۔ عام موٹف Cys98-Gly-tir-Cys101 ہے۔ یہ حقیقت کہ سیس 98 جزوی طور پر سالوینٹ بے نقاب ہے، اوپر فراہم کردہ طریقہ کار کی حمایت کرتا ہے۔ ڈی ایس بی جی میں ڈی ایس بی سی کے ساتھ 24 فیصد شناخت کی سیکوینس ہومیولوجی ہے، اس طرح ڈی ایس بی سی کے ساتھ اسی طرح کی ساخت کا مشورہ دیتا ہے۔ ای کولی سے ڈی ایس بی سی کی ساخت جیسا کہ میکارتھی اور دیگر نے رپورٹ کیا ہے۔ سسٹین کو آکسیڈائزڈ حالت میں دکھاتا ہے۔ جنگلی قسم کے خلیوں میں، دونوں سسٹین کم حالت میں ہوتے ہیں۔ متعدد ڈائیسلفائیڈ بانڈز کے ساتھ پروٹین کی بیماری کی مطابقت کی ترکیب غیر مقامی ڈائیسلفائیڈ بانڈز کی تشکیل کی وجہ سے مشکل ہے۔ یہ عام طور پر اگھلنشیل، غیر فعال پروٹین کا باعث بنتا ہے۔ ڈی ایس بی اے اور ڈی ایس بی سی کو شریک اظہار کرنے سے پانچ سے زیادہ ڈائیسلفائیڈ بانڈز کے ساتھ گھلنشیل پروٹین کو ظاہر کرنے میں مدد ملتی ہے۔ طبی ایپلی کیشنز کے ساتھ پروٹین کی دو مثالیں جن کا اظہار اس نقطہ نظر کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا ہے وہ ہیں E.Coli میں ریٹی پلس کا اظہار اور ای میں سنگل چین ایف وی اینٹی باڈیز کا فعال اظہار۔ کولی ریٹی پلس اسکیمک اسٹروک کے علاج میں استعمال ہوتا ہے اور اس میں 9 ڈائیسلفائیڈ بانڈز ہوتے ہیں۔ ڈی ایس بی اے اور ڈی ایس بی سی کے ساتھ پروٹین کو شریک اظہار کرنے سے پہلے، غلط ڈائیسلفائیڈ بانڈ کی تشکیل کی وجہ سے ویو میں گھلنشیل اظہار بہت کم تھا۔ اس مشترکہ اظہار کے نظام سے حاصل ہونے والے پروٹین میں بھی پہلے کی اطلاع سے 20 گنا زیادہ تھرومبولائٹک سرگرمی ہونے کی اطلاع دی گئی تھی۔ حوالہ جات پروٹین ڈومینز