Phenol red
فینول ریڈ (جسے فینولسلفونفتھلین یا پی ایس پی بھی کہا جاتا ہے) ایک پی ایچ اشارے ہے جو سیل بائیولوجی لیبارٹریوں میں اکثر استعمال ہوتا ہے۔ کیمیائی ساخت اور خصوصیات فینول ریڈ ایک سرخ کرسٹل کے طور پر موجود ہے جو ہوا میں مستحکم ہے۔ اس کی گھلنشیلتا پانی میں 0.77 گرام فی لیٹر (جی/ایل) اور ایتھنول میں 2.9 گرام/ایل ہے۔ یہ ایک کمزور تیزاب ہے جس میں پی کے اے = 8 ایٹ ہے۔ فینول ریڈ کا محلول پی ایچ اشارے کے طور پر استعمال ہوتا ہے، اکثر سیل کلچر میں۔ اس کا رنگ پی ایچ کی حد 6.8 سے 8.2 پر پیلے رنگ (λmax = 443 این ایم) سے سرخ (λmax = 570 این ایم) میں بتدریج منتقلی کو ظاہر کرتا ہے۔ پی ایچ 8.2 سے اوپر، فینول ریڈ ایک روشن گلابی (فوشیا) رنگ میں بدل جاتا ہے۔ کرسٹل کی شکل میں، اور بہت تیزابی حالات (کم پی ایچ) کے تحت محلول میں، مرکب ایک زوٹیرون کے طور پر موجود ہوتا ہے جیسا کہ اوپر دکھائے گئے ڈھانچے میں دکھایا گیا ہے، جس میں سلفیٹ گروپ منفی طور پر چارج ہوتا ہے، اور کیٹون گروپ ایک اضافی پروٹون لے جاتا ہے۔ یہ شکل بعض اوقات علامتی طور پر نارنجی-سرخ کے طور پر لکھی جاتی ہے۔ اگر پی ایچ میں اضافہ کیا جاتا ہے (پی کے اے = 1.2)، تو کیٹون گروپ کا پروٹون ختم ہو جاتا ہے، جس کے نتیجے میں پیلا، منفی طور پر چارج شدہ آئن ہوتا ہے جسے ایچ پی ایس-کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ اب بھی زیادہ پی ایچ (پی کے اے = 7.7) پر، فینول کا ہائیڈروکسی گروپ اپنا پروٹون کھو دیتا ہے، جس کے نتیجے میں سرخ آئن پی ایس 2− کے طور پر ظاہر ہوتا ہے۔ کئی ذرائع میں، فینول ریڈ کی ساخت کو سلفر ایٹم کے چکور گروپ کا حصہ ہونے کے ساتھ دکھایا گیا ہے، جو فینولفتھالین کی ساخت سے ملتا جلتا ہے۔ تاہم، اس چکور ساخت کی تصدیق ایکس رے کرسٹلگرافی سے نہیں ہو سکی۔ کئی اشارے فینول ریڈ سے ملتی جلتی ساخت کا اشتراک کرتے ہیں، جن میں بروموتھیمول بلیو، تھائمول بلیو، بروموکریسل جامنی، تھائمولفتھالین، اور فینولفتھالین شامل ہیں۔ (پی ایچ اشارے پر مضمون میں دیگر عام کیمیائی اشارے کی ایک میز دستیاب ہے۔) فینولسلفونفتھالین ٹیسٹ فینول ریڈ کا استعمال لیونارڈ راؤنٹری اور جان گیراگٹی نے 1911 میں گردے کے ذریعے خون کے مجموعی بہاؤ کا اندازہ لگانے کے لیے فینولسلفونفتھالین ٹیسٹ میں کیا تھا۔ یہ گردے کی کارکردگی کا پہلا ٹیسٹ تھا اور تقریبا ایک صدی تک استعمال ہوتا رہا لیکن اب یہ متروک ہے۔ یہ ٹیسٹ اس حقیقت پر مبنی ہے کہ فینول ریڈ تقریبا مکمل طور پر پیشاب میں خارج ہوتا ہے۔ فینول کا سرخ محلول نس کے ذریعے دیا جاتا ہے ؛ پیدا شدہ پیشاب جمع کیا جاتا ہے۔ رنگین پیمائش سے خارج ہونے والے فینول ریڈ کی مقدار کی پیمائش کرکے، گردے کے کام کا تعین کیا جا سکتا ہے۔ سیل کلچرز کے لیے اشارے زیادہ تر زندہ بافت قریب غیر جانبدار پی ایچ یعنی 7 کے قریب پی ایچ پر ترقی کرتے ہیں۔ مثال کے طور پر خون کا پی ایچ 7.35 سے 7.45 تک ہوتا ہے۔ جب خلیات ٹشو کلچر میں اگائے جاتے ہیں، تو جس میڈیم میں وہ بڑھتے ہیں وہ اس فزیالوجیکل پی ایچ کے قریب ہوتا ہے۔ اس گروتھ میڈیم میں شامل کی جانے والی فینول ریڈ کی تھوڑی مقدار عام حالات میں گلابی-سرخ رنگ کی ہوگی۔ عام طور پر، سیل کلچر کے لیے 15 ملی گرام/ایل استعمال ہوتے ہیں۔ مسائل کی صورت میں، مرنے والے خلیوں یا آلودگیوں کی زیادہ نشوونما سے پیدا ہونے والی فضلہ کی مصنوعات پی ایچ میں تبدیلی کا سبب بنیں گی، جس کی وجہ سے اشارے کے رنگ میں تبدیلی آئے گی۔ مثال کے طور پر، ممالیہ کے خلیوں کو نسبتا آہستہ آہستہ تقسیم کرنے کی ثقافت بیکٹیریل آلودگی سے تیزی سے بڑھ سکتی ہے۔ اس کے نتیجے میں عام طور پر میڈیم کی تیزابیت ہوتی ہے، جو اسے پیلا کر دیتی ہے۔ بہت سے ماہر حیاتیات ٹشو کلچر کی صحت کو تیزی سے جانچنے کا یہ ایک آسان طریقہ سمجھتے ہیں۔ اس کے علاوہ، ممالیہ خلیوں کے ذریعہ خود تیار کردہ فضلہ کی مصنوعات آہستہ آہستہ پی ایچ کو کم کر دیں گی، آہستہ آہستہ محلول کو نارنجی اور پھر پیلا کر دے گی۔ یہ رنگ کی تبدیلی اس بات کا اشارہ ہے کہ آلودگی کی عدم موجودگی میں بھی میڈیم کو تبدیل کرنے کی ضرورت ہے (عام طور پر، یہ میڈیم کے مکمل طور پر نارنجی ہونے سے پہلے کیا جانا چاہیے)۔ چونکہ فینول ریڈ کا رنگ کچھ سپیکٹروفوٹومیٹرک اور فلوروسینٹ جانچ میں مداخلت کر سکتا ہے، اس لیے کئی قسم کے ٹشو کلچر میڈیا بھی فینول ریڈ کے بغیر دستیاب ہیں۔ ایسٹروجن ممیک فینول ریڈ ایک کمزور ایسٹروجن ممیک ہے، اور سیل کلچرز میں ایسٹروجن ریسیپٹر کو ظاہر کرنے والے خلیوں کی نشوونما کو بڑھا سکتا ہے۔ اس کا استعمال رجونورتی کے بعد خواتین سے بیضہ دانی کے اپیتھیلیل خلیوں کو اووسائٹس (انڈے) کی خصوصیات والے خلیوں میں فرق کرنے کے لیے کیا گیا ہے، جس کے زرخیزی کے علاج اور اسٹیم سیل تحقیق دونوں کے لیے ممکنہ مضمرات ہیں۔ سوئمنگ پول ٹیسٹ کٹس میں فینول ریڈ کا استعمال، جسے بعض اوقات مختلف نام سے لیبل کیا جاتا ہے، جیسے کہ "گارڈیکس سولیوشن #2"، گھریلو سوئمنگ پول ٹیسٹ کٹس میں پی ایچ اشارے کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ کلورین کے نتیجے میں تھیوسلفیٹ کی عدم موجودگی میں آکسیڈائزنگ کلورین کو روکنے کے لیے ڈائی کی بلیچنگ ہو سکتی ہے۔ برومین کی اعلی سطح فینول ریڈ کو بروموفینول ریڈ میں تبدیل کر سکتی ہے (ڈائبروموفینولسلفونفتھالین، جس کے کم پی کے اے کے نتیجے میں ایک اشارے میں تیزابیت کی سمت میں منتقل ہونے والی حد کے ساتھ-پی ایچ 6.8 پر پانی 7.5 پر ٹیسٹ کرتا نظر آئے گا)۔ یہاں تک کہ برومین کی اعلی سطح (> 20 پی پی ایم) کے نتیجے میں بروموفینول ریڈ کو اس سے بھی کم پی کے اے کے ساتھ بروموفینول بلیو میں ثانوی تبدیلی ہو سکتی ہے، جس سے غلطی سے یہ تاثر ملتا ہے کہ خطرناک حد تک کم ہونے کے باوجود پانی کا پی ایچ انتہائی زیادہ ہے۔ حوالہ جات بیرونی روابط فینول سرخ سرگرمی کے مظاہرے اور درمیانے درجے کی تیاری کے پی ایچ اشارے کی ویڈیو ٹرائریلمیتھین رنگ فینولز بینزینسلفونٹس