Thymidine kinase
تھائمیڈائن کینیز ایک انزائم ہے، ایک فاسفوٹ ٹرانسفرس (ایک کینیز): 2 '-ڈیوکسیتھائمیڈائن کینیز، اے ٹی پی-تھائمیڈائن 5'-فاسفوٹ ٹرانسفرس، ای سی 2.7.1.21۔ یہ زیادہ تر زندہ خلیوں میں پایا جا سکتا ہے۔ یہ ممالیہ خلیوں، ٹی کے 1 اور ٹی کے 2 میں دو شکلوں میں موجود ہے۔ بعض وائرسوں میں وائرل تھائمیڈائن کنیز کے اظہار کے لیے جینیاتی معلومات بھی ہوتی ہیں۔ تھائمیڈائن کینیس رد عمل کو متحرک کرتا ہے: Thd + ATP → TMP + ADP جہاں Thd (deoxy) تھائمیڈائن ہے، ATP اڈینوسین ٹرائی فاسفیٹ ہے، TMP (deoxy) تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ ہے اور ADP اڈینوسین ڈائی فاسفیٹ ہے۔ تھائمیڈائن کینیسز کا ڈی این اے کی ترکیب میں اور اس وجہ سے خلیوں کی تقسیم میں کلیدی کام ہوتا ہے، کیونکہ وہ ڈی این اے میں تھائمیڈائن کو متعارف کرانے کے لیے منفرد رد عمل کے سلسلے کا حصہ ہیں۔ کھانے اور مردہ خلیوں سے ڈی این اے کے انحطاط کے نتیجے میں تھائمیڈائن جسم کے سیالوں میں موجود ہوتا ہے۔ بہت سی اینٹی وائرل دوائیوں کے عمل کے لیے تھائمیڈائن کینیز کی ضرورت ہوتی ہے۔ یہ مونوکلونل اینٹی باڈیز کی پیداوار میں ہائبرڈوما سیل لائنوں کو منتخب کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ کلینیکل کیمسٹری میں یہ تشخیص، علاج پر قابو پانے اور مہلک بیماری کی پیروی میں پھیلاؤ کے مارکر کے طور پر استعمال ہوتا ہے، بنیادی طور پر ہیماتولوجیکل بدنیتی کے۔ تاریخ ڈی این اے میں تھائمیڈائن کی شمولیت کا مظاہرہ 1950 کے آس پاس ہوا۔ کچھ عرصے بعد، یہ دکھایا گیا کہ یہ انضمام فاسفوریلیشن سے پہلے تھا، اور، 1960 کے آس پاس، ذمہ دار انزائم کو پاک اور خصوصیت دی گئی تھی۔ درجہ بندی تھائمیڈائن کنیز کی دو مختلف کلاسوں کی نشاندہی کی گئی ہے اور اس سپر فیملی میں شامل ہیں: ایک فیملی گروپ مل کر ہرپس وائرس سے تھائمیڈائن کینیز کے ساتھ ساتھ سیلولر تھائمیڈیلیٹ کینیز، دوسرے فیملی گروپ ٹی کے مختلف ذرائع سے جن میں ریڑھ کی ہڈی والے جانور، بیکٹیریا، بیکٹیریوفیج ٹی 4، پوکس وائرس، افریقی سوائن بخار وائرس (اے ایس ایف وی) اور فش لیمفوسسٹس بیماری وائرس (ایف ایل ڈی وی) شامل ہیں۔ کیڑے آئریڈسینٹ وائرس کا بڑا کیپسڈ پروٹین بھی اسی خاندان سے تعلق رکھتا ہے۔ پروسائٹ پیٹرن صرف سیلولر قسم کے تھائمیڈائن کنیز کو پہچانتا ہے۔ آئسوزیم ممالیہ جانوروں میں دو آئسوینزیم ہوتے ہیں، جو کیمیائی طور پر بہت مختلف ہوتے ہیں، ٹی کے 1 اور ٹی کے 2۔ پہلا سب سے پہلے جنین کے ٹشو میں پایا گیا تھا، دوسرا بالغ ٹشو میں زیادہ مقدار میں پایا گیا تھا، اور ابتدائی طور پر انہیں جنین اور بالغ تھائمیڈائن کینیز کہا جاتا تھا۔ جلد ہی یہ دکھایا گیا کہ ٹی کے 1 صرف سیل ڈویژن (سیل سائیکل پر منحصر) کی توقع میں سائٹوپلازم میں موجود ہے، جبکہ ٹی کے 2 مائٹوکونڈریا میں واقع ہے اور سیل سائیکل سے آزاد ہے۔ دونوں آئسوینزیموں میں مختلف رد عمل کی حرکیات ہوتی ہیں اور مختلف انابائٹرز کے ذریعہ روک دی جاتی ہیں۔ وائرل تھائمیڈائن کینیسز ساختی اور حیاتیاتی طور پر ممالیہ انزائموں سے مکمل طور پر مختلف ہوتے ہیں اور ان کو ان انفیکٹرز کے ذریعے روکا جاتا ہے جو ممالیہ انزائموں کو روکتے نہیں ہیں۔ دو انسانی آئسوینزیموں کے جین 1970 کی دہائی کے وسط میں مقامی بنائے گئے تھے۔ ٹی کے 1 کے جین کو کلون اور ترتیب دیا گیا تھا۔ متعلقہ پروٹین کا سالماتی وزن تقریبا 25 کلو ڈی ہوتا ہے۔ عام طور پر، یہ ٹشو میں ایک ڈائمر کے طور پر ہوتا ہے جس کا سالماتی وزن تقریبا 50 کے ڈی ہوتا ہے۔ اسے اے ٹی پی کے ذریعے چالو کیا جا سکتا ہے۔ فعال ہونے کے بعد، ایک ٹیٹریمر ہوتا ہے جس کا سالماتی وزن تقریبا 100 کلو میٹر ہوتا ہے۔ تاہم، گردش میں موجود انزائم کی شکل پروٹین سے مطابقت نہیں رکھتی جیسا کہ جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے: گردش میں فعال انزائم کے مرکزی حصے کا سالماتی وزن 730 کے ڈی ہوتا ہے اور یہ ممکنہ طور پر دوسرے پروٹین کے ساتھ ایک کمپلیکس میں جڑا ہوتا ہے۔ یہ کمپلیکس زیادہ مستحکم ہے اور کم سالماتی وزن کی کسی بھی شکل سے زیادہ مخصوص سرگرمی رکھتا ہے۔ ریکومبیننٹ ٹی کے 1 کو اس طرح فعال اور ٹیٹریمر میں تبدیل نہیں کیا جا سکتا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ خلیوں میں پائے جانے والے انزائم کو ترکیب کے بعد تبدیل کیا گیا ہے۔ ٹی کے 1 کو سیل ڈویژن کے ایس مرحلے کے دوران سیل کے ذریعے ترکیب کیا جاتا ہے۔ سیل ڈویژن مکمل ہونے کے بعد، ٹی کے 1 کو انٹرا سیلولر طور پر خراب کیا جاتا ہے اور عام سیل ڈویژن کے بعد جسم کے سیالوں میں منتقل نہیں ہوتا ہے۔ خلیے میں تھائمیڈائن کینیز کے عمل کا ایک فیڈ بیک ریگولیشن ہوتا ہے: تھائمیڈائن ٹرائی فاسفیٹ (ٹی ٹی پی)، جو تھائمیڈائن کے مزید فاسفوریلیشن کا پروڈکٹ ہے، تھائمیڈائن کینیز کو روکنے والے کے طور پر کام کرتا ہے۔ یہ نیوکلک ایسڈ کی ترکیب کے لیے دستیاب ٹی ٹی پی کی متوازن مقدار کو برقرار رکھنے کا کام کرتا ہے، نہ کہ نظام کو زیادہ سیچوریٹ کرنے کا۔ 5 '-امینوتھائمیڈائن، تھائمیڈائن کا ایک غیر زہریلا ینالاگ، اس ریگولیٹری میکانزم میں مداخلت کرتا ہے اور اس طرح تھائمیڈائن اینالاگس کی سائٹوٹوکسائٹی کو بڑھاتا ہے جو اینٹی نوپلاسٹک دوائیوں کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ تھائمیڈائن اور تھائمیڈائن اینالاگس فاسفوریلیشن کے رد عمل کی حرکیات پیچیدہ ہیں اور صرف جزوی طور پر معلوم ہیں۔ تھائمیڈائن کا تھائمیڈائن ٹرائی فاسفیٹ میں مجموعی طور پر فاسفوریلیشن مائیکلس-مینٹن حرکیات کی پیروی نہیں کرتا ہے، اور تھائمیڈائن اور یوریڈین کے مختلف فاسفیٹ ایک دوسرے کے فاسفوریلیشن میں مداخلت کرتے ہیں۔ مختلف انواع سے ٹی کے کی حرکیات ایک دوسرے سے مختلف ہوتی ہیں اور ایک دی گئی نوع سے مختلف شکلیں (مونومر، ڈائمر، ٹیٹریمر اور سیرم فارم) میں بھی مختلف حرکی خصوصیات ہوتی ہیں۔ ہرپس سمپلیکس وائرس، ویریلا زسٹر وائرس اور ایپسٹین-بار وائرس میں وائرس کے مخصوص تھائمیڈائن کنیز کے لیے جینوں کی نشاندہی کی گئی ہے۔ + اے ٹی پی---> + اے ڈی پی تھائمیڈائن اے ٹی پی کے ساتھ تعامل کر کے تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ اور اے ڈی پی دیتا ہے۔ فنکشن تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ، تھائمیڈائن کنیز کے ذریعہ اتپریرک ہونے والے رد عمل کی پیداوار، اس کے نتیجے میں تھائمیڈائلٹ کینیز انزائم کے ذریعہ تھائمیڈائن ڈائی فاسفیٹ میں فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے اور اس کے بعد نیوکلیوسائڈ ڈائی فاسفیٹ کینیز انزائم کے ذریعہ تھائمیڈائن ٹرائی فاسفیٹ میں تبدیل کیا جاتا ہے۔ ٹرائی فاسفیٹ ڈی این اے مالیکیول میں شامل ہوتا ہے، ایک رد عمل جو ڈی این اے پولیمریز اور ایک تکمیلی ڈی این اے مالیکیول (یا ریورس ٹرانسکرپٹیز کے معاملے میں ایک آر این اے مالیکیول، ریٹو وائرس میں موجود انزائم) کے ذریعے اتپریرک ہوتا ہے۔ تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ بھی خلیے کے ذریعہ ایک مختلف رد عمل میں تیار کیا جاتا ہے جو تھائمیڈائن سے غیر متعلقہ دیگر میٹابولک راستوں کی پیداوار، تھائمیڈائلٹ سنتھس انزائم کے ذریعہ ہوتا ہے۔ دوسرا راستہ ڈی این اے کی مرمت کے لیے تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ کی فراہمی کے لیے کافی ہے۔ جب کوئی خلیہ تقسیم ہونے کی تیاری کرتا ہے، تو ڈی این اے کا ایک مکمل نیا سیٹ اپ درکار ہوتا ہے، اور تھائمیڈائن ٹرائی فاسفیٹ سمیت بلڈنگ بلاکس کی ضرورت بڑھ جاتی ہے۔ خلیات تقسیم کے دوران درکار کچھ انزائم بنا کر خلیات کی تقسیم کے لیے تیاری کرتے ہیں۔ وہ عام طور پر خلیوں میں موجود نہیں ہوتے ہیں اور بعد میں کم ہو جاتے ہیں اور خراب ہو جاتے ہیں۔ اس طرح کے انزائموں کو سیلویج انزائم کہا جاتا ہے۔ تھائمیڈائن کینیز 1 ایک ایسا سیلویج انزائم ہے، جبکہ تھائمیڈائن کینیز 2 اور تھائمیڈیلیٹ سنتھاز سیل سائیکل پر منحصر نہیں ہیں۔ کمی تھائمیڈائن کینیز 2 کو خلیات مائٹوکونڈریل ڈی این اے کی ترکیب کے لیے استعمال کرتے ہیں۔ ٹی کے 2 کے لیے جین میں تغیرات مائٹوکونڈریل ڈی این اے ڈیپلیشن سنڈروم کی مایوپیتھک شکل کا باعث بنتے ہیں۔ ٹی کے 2 کی کمی کی ایک اور وجہ آکسیڈیٹیو اسٹریس سے متاثر ایس-گلوٹاتھیونیلیشن اور مائٹوکونڈریل تھائمیڈائن کینیس 2 کا پروٹولائٹک انحطاط ہو سکتا ہے۔ ٹی کے 1 کی کمی کی وجہ سے کوئی سنڈروم معلوم نہیں ہے، شاید ایک عیب دار ٹی کے 1 جین جنین کی موت کا باعث بنے گا۔ نشوونما کے دوران تھائمیڈائن کینیز ترکیب کے بعد تھائمیڈائن کینیز 1 میں ترمیم کے بعد ٹیٹریمر کی تشکیل انزائم کی سرگرمی کو بڑھاتا ہے۔ یہ تجویز کیا گیا ہے کہ یہ انزائم کی سرگرمی کو منظم کرنے کا ایک طریقہ کار ہے۔ ٹیٹریمرز کی تشکیل ڈکٹیوسٹیلیم کی نشوونما کے مرحلے کے بعد مشاہدہ کی جاتی ہے۔ ڈی این اے کی ترکیب کے عمدہ ضابطے کے لیے اس کا استعمال گرم خون والے جانوروں میں ریڑھ کی ہڈی والے جانوروں سے شاخوں کے بعد قائم کیا گیا ہے۔ نیز نشوونما میں تھائمیڈائن کینیز جیسے انزائموں کی نشوونما کا مطالعہ کیا گیا ہے۔ پرجاتیوں کی تقسیم تھائمیڈائن کینیز جانوروں، پودوں، کچھ بیکٹیریا، آثار قدیمہ اور وائرس میں موجود ہے۔ پوکس وائرس، افریقی سوائن بخار وائرس، ہرپس سمپلیکس وائرس، ویریلا زسٹر وائرس اور ایپسٹین-بار وائرس سے تھائمیڈائن کینیسز کی نشاندہی کی گئی ہے اور ان کی خصوصیت مختلف ہے۔ وائرس میں موجود انزائم کی شکل دوسرے جانداروں سے مختلف ہوتی ہے۔ تھائمیڈائن کینیز پھپھوندی میں موجود نہیں ہے۔ ایپلی کیشنز تقسیم کرنے والے خلیوں کی شناخت بائیو کیمیکل تحقیق میں تھائمیڈائن کینیز کا پہلا بالواسطہ استعمال ریڈیو لیبلڈ تھائمیڈائن کو شامل کرکے تقسیم کرنے والے خلیوں کی شناخت اور تقسیم کرنے والے خلیوں کی شناخت کے لیے تابکاری یا آٹوڈیگرافی کی بعد کی پیمائش تھی۔ اس مقصد کے لیے ٹریٹیٹڈ تھائمیڈائن کو گروتھ میڈیم میں شامل کیا جاتا ہے۔ تکنیک میں غلطیوں کے باوجود، یہ اب بھی مہلک خلیوں کی نشوونما کی شرح کا تعین کرنے اور امیونولوجی میں لیمفوسائٹس کی سرگرمی کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ فعال ٹیومرز کا پی ای ٹی اسکین فلوروتھیمیڈائن ایک تھائمیڈائن ینالاگ ہے۔ اس کا استعمال تھائمیڈائن کینیز 1 کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے، اور اس لیے اسے تیزی سے پھیلے ہوئے ٹیومر ٹشو کے ذریعے ترجیحی طور پر لیا جاتا ہے۔ فلورائن آاسوٹوپ 18 ایک پوزیٹرون ایمیٹر ہے جو پوزیٹرون ایمیشن ٹومگرافی (پی ای ٹی) میں استعمال ہوتا ہے۔ فلورائن-18 ریڈیولیبلڈ فلوروتھیمیڈائن ایف-18 اس لیے فعال ٹیومر کے پھیلاؤ کی پی ای ٹی امیجنگ کے لیے مفید ہے، اور زیادہ عام طور پر استعمال ہونے والے مارکر فلوڈیوکسیگلوکوز (18 ایف) کے ساتھ موازنہ کرتا ہے۔ ایک معیاری پروٹوکول تجویز کیا گیا ہے جو طبی مطالعات کے موازنہ میں مدد کرے گا۔ ہائبرڈوما ہائبرڈوما کا انتخاب وہ خلیات ہیں جو ٹیومر خلیوں (جو لامحدود تقسیم کر سکتے ہیں) اور امیونوگلوبلین پیدا کرنے والے لیمفوسائٹس (پلازما خلیات) کو ملا کر حاصل کیے جاتے ہیں۔ ہائبرڈوما کو ایک مخصوص منفرد خاصیت (مونوکلونل اینٹی باڈیز) کے ساتھ بڑی مقدار میں امیونوگلوبلن تیار کرنے کے لیے بڑھایا جا سکتا ہے۔ ایک مسئلہ یہ ہے کہ سیل فیوژن کے بعد غیر استعمال شدہ خلیوں کی بڑی اضافی مقدار سے ہائبرڈوما کو الگ کرنا ہے۔ اس کو حل کرنے کا ایک عام طریقہ فیوژن کے لیے تھائمیڈائن کینیز نیگیٹیو (TK−) ٹیومر سیل لائنوں کا استعمال کرنا ہے۔ تھائمیڈائن کینیز منفی خلیات تھائمیڈائن اینالاگس کی موجودگی میں ٹیومر سیل لائن کو بڑھا کر حاصل کیے جاتے ہیں، جو تھائمیڈائن کینیز مثبت (ٹی کے +) خلیوں کو مار دیتے ہیں۔ اس کے بعد منفی خلیوں کو بڑھایا جا سکتا ہے اور ٹی کے + پلازما خلیوں کے ساتھ فیوژن کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ فیوژن کے بعد، خلیات کو میتھوٹریکسٹ یا امینوپٹین کے ساتھ ایک میڈیم میں اگایا جاتا ہے جو انزائم ڈائی ہائیڈروفولیٹ ریڈکٹیس کو روکتا ہے اس طرح تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ کی ڈی نووو ترکیب کو روکتا ہے۔ ایسا ہی ایک میڈیم جو عام طور پر استعمال ہوتا ہے وہ ایچ اے ٹی میڈیم ہے، جس میں ہائپوکسنتھائن، امینوپٹین اور تھائمیڈائن ہوتا ہے۔ تھائمیڈائن کینیز کی کمی والی سیل لائن سے غیر استعمال شدہ خلیات مر جاتے ہیں کیونکہ ان میں تھائمیڈائن مونو فاسفیٹ کا کوئی ذریعہ نہیں ہوتا ہے۔ لمفوسائٹس بالآخر مر جاتے ہیں کیونکہ وہ "لافانی" نہیں ہوتے ہیں۔ صرف ہائبرڈوما جو اپنے سیل لائن آباؤ اجداد سے "امرتا" رکھتے ہیں اور پلازما سیل سے تھائمیڈائن کینیز زندہ رہتے ہیں۔ جو مطلوبہ اینٹی باڈی تیار کرتے ہیں انہیں پھر منتخب کیا جاتا ہے اور مونوکلونل اینٹی باڈی تیار کرنے کے لیے کلچر کیا جاتا ہے۔ ہائبرڈوما خلیوں کو بھی اسی اصول کا استعمال کرتے ہوئے الگ کیا جا سکتا ہے جیسا کہ ایک اور جین ایچ جی پی آر ٹی کے حوالے سے بیان کیا گیا ہے، جو بچاؤ کے راستے میں جی ایم پی نیوکلیوٹائڈ کی ترکیب کے لیے ضروری آئی ایم پی کی ترکیب کرتا ہے۔ کروموسوم کی ساخت کا مطالعہ ڈی این اے ریشوں کی مالیکیولر کنگھی کو ابھرتے ہوئے خمیر Saccharomyces cerevisiae میں کروموسوم کی ساخت کی نگرانی کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ یہ انفرادی مالیکیولز کے ڈی این اے ریپلیکیشن پروفائلز فراہم کرتا ہے۔ اس کے لیے ضروری ہے کہ خمیر کے تناؤ تھائمیڈائن کینیز کا اظہار کریں، جو جنگلی قسم کے خمیر نہیں کرتے، فنگی ہونے کی وجہ سے (واقعہ دیکھیں)۔ لہذا، تھائمیڈائن کینیز کے لیے ایک جین کو جینوم میں شامل کیا جانا چاہیے۔ کلینیکل کیمسٹری تھائمیڈائن کینیز ایک سیلویج انزائم ہے جو صرف خلیوں کی تقسیم کی توقع میں موجود ہے۔ انزائم کو عام تقسیم سے گزرنے والے خلیوں سے آزاد نہیں کیا جاتا ہے جہاں خلیوں کے پاس پروٹین کو خراب کرنے کا ایک خاص طریقہ کار ہوتا ہے جس کی خلیوں کی تقسیم کے بعد مزید ضرورت نہیں ہوتی ہے۔ عام مضامین میں، سیرم یا پلازما میں تھائمیڈائن کینیز کی مقدار اس لیے بہت کم ہوتی ہے۔ ٹیومر کے خلیات گردش میں انزائم جاری کرتے ہیں، شاید مردہ یا مرنے والے ٹیومر کے خلیوں میں خلل ڈالنے کے سلسلے میں۔ لہذا سیرم میں تھائمیڈائن کینیز کی سطح بالواسطہ طور پر ٹیومر کی جارحیت کی پیمائش کے طور پر، مہلک پھیلاؤ کی پیمائش کے طور پر کام کرتی ہے۔ علاج کی ایپلی کیشنز کچھ دوائیں خاص طور پر خلیوں کو تقسیم کرنے کے خلاف ہوتی ہیں۔ ان کا استعمال ٹیومر اور وائرل بیماریوں (دونوں ریٹرو وائرس کے خلاف اور دوسرے وائرس کے خلاف) کے خلاف کیا جا سکتا ہے، کیونکہ بیمار خلیات عام خلیوں کے مقابلے میں بہت زیادہ کثرت سے نقل کرتے ہیں اور زیادہ تیزی سے خلیوں کی نقل سے متعلق کچھ غیر مہلک بیماریوں کے خلاف بھی (مثال کے طور پر psoriasis)۔ یہ تجویز کیا گیا ہے کہ تھائمیڈائن اینالاگس کی اینٹی وائرل اور کینسر مخالف سرگرمی، کم از کم جزوی طور پر، مائٹوکونڈریل تھائمیڈائن کینیس کے ڈاؤن ریگولیشن کے ذریعے حاصل کی جاتی ہے۔ سائٹوسٹیٹکس تھائمیڈائن میٹابولزم کے خلاف ہدایت کی جانے والی دوائیوں کی مختلف کلاسیں ہیں اور اس طرح تھائمیڈائن کینیز شامل ہوتا ہے جو کینسر سے وابستہ سیل ڈویژن کو کنٹرول کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ چین ٹرمینیٹر تھائمیڈائن اینالاگس ہوتے ہیں جو بڑھتی ہوئی ڈی این اے چین میں شامل ہوتے ہیں، لیکن ان میں ترمیم کی جاتی ہے تاکہ زنجیر کو مزید لمبا نہ کیا جا سکے۔ تھائمیڈائن کے ینالاگ کے طور پر، اس قسم کی دوائیوں کو آسانی سے 5 '-مونو فاسفیٹس میں فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے۔ مونو فاسفیٹ کو مزید متعلقہ ٹرائی فاسفیٹ میں فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے اور اسے بڑھتی ہوئی ڈی این اے زنجیر میں شامل کیا جاتا ہے۔ اینالاگ میں ترمیم کی گئی ہے تاکہ اس میں 3 'پوزیشن میں ہائڈروکسیل گروپ نہ ہو جو سلسلہ کی مسلسل نشوونما کے لیے ضروری ہے۔ زیڈووڈائن (AZT ؛ ATC: J05AF01) میں 3 '-ہائیڈروکسیل گروپ کو ایک ایزڈو گروپ سے تبدیل کر دیا گیا ہے، اسٹاووڈائن (ATC: J05AF04) میں اسے بغیر کسی تبدیلی کے ہٹا دیا گیا ہے۔ اے زیڈ ٹی کو سیرم میں تھائمیڈائن کینیز کے تعین کے طریقوں میں سے ایک میں سبسٹریٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ اس کا مطلب یہ ہے کہ اے زیڈ ٹی اس طریقہ کار میں مداخلت کرتا ہے اور یہ ایک حد ہو سکتی ہے: اے زیڈ ٹی ایچ آئی وی انفیکشن میں ایچ اے اے آر ٹی تھراپی کا ایک معیاری جزو ہے۔ ایڈز کا ایک عام نتیجہ لیمفوما ہے اور تھائمیڈائن کینیز کے تعین کا سب سے اہم تشخیصی اطلاق لیمفوما کی نگرانی کے لیے ہے۔ دیگر تھائمیڈائن اینالاگس، مثال کے طور پر آئیڈوکسورائڈائن (اے ٹی سی: جے 05 اے بی 02) بعد میں نقل کے چکروں کے دوران بیس جوڑی کو روک کر کام کرتے ہیں، اس طرح نتیجے میں ڈی این اے چین کو عیب دار بناتے ہیں۔ مہلک خلیوں کے اپوپٹوسس کو حاصل کرنے کے لیے اسے تابکاری کے ساتھ بھی جوڑا جا سکتا ہے۔ اینٹی وائرل کچھ اینٹی وائرل دوائیں، جیسے ایسائکلوویر (ATC: J05AB01) اور گینسیکلوویر (ATC: J05AB06) کے ساتھ ساتھ دیگر نیوکلیوسائڈ اینالاگس وائرل تھائمیڈائن کینیز کی سبسٹریٹ کی خاصیت کا استعمال کرتے ہیں، جیسا کہ انسانی تھائمیڈائن کینیز کے برخلاف ہے۔ یہ دوائیں منشیات کے حامی کے طور پر کام کرتی ہیں، جو اپنے آپ میں زہریلی نہیں ہوتیں، لیکن وائرل تھائمیڈائن کینیز کے ذریعے فاسفوریلیشن کے ذریعے زہریلی دوائیوں میں تبدیل ہو جاتی ہیں۔ اس لیے وائرس سے متاثر خلیات انتہائی زہریلے ٹرائی فاسفیٹ پیدا کرتے ہیں جو خلیوں کی موت کا باعث بنتے ہیں۔ انسانی تھائمیڈائن کینیز، اس کے برعکس، اس کی زیادہ تنگ خاصیت کے ساتھ، فاسفوریلیٹ اور پروڈرگ کو چالو کرنے سے قاصر ہے۔ اس طرح، صرف وائرس سے متاثرہ خلیات ہی اس دوا کے لیے حساس ہوتے ہیں۔ اس طرح کی دوائیں صرف ہرپس گروپ کے وائرس کے خلاف ان کے مخصوص تھائمیڈائن کنیز کے ساتھ موثر ہوتی ہیں۔ اس قسم کی دوائیوں سے علاج کیے جانے والے مریضوں میں، اینٹی وائرل منشیات کے خلاف مزاحمت کی نشوونما اکثر مشاہدہ کی جاتی ہے۔ ہرپس سمپلیکس وائرس اور ویریلا زسٹر وائرس میں تھائمیڈائن کینیز جین کی ترتیب تیزی سے جینیاتی تغیر کو ظاہر کرتی ہے اور اینٹی وائرل منشیات کی مزاحمت کی تشخیص میں سہولت فراہم کر سکتی ہے۔ دسمبر 1979 میں ڈبلیو ایچ او کی طرف سے چیچک کے خاتمے کے اعلان کے بعد، ویکسینیشن کے پروگرام ختم کر دیے گئے۔ حادثاتی طور پر یا حیاتیاتی جنگ کے نتیجے میں اس بیماری کا دوبارہ ظہور غیر محفوظ آبادی کا سامنا کرے گا اور اس کے نتیجے میں ایک ایسی وبا پھیل سکتی ہے جس پر قابو پانا مشکل ہو سکتا ہے۔ چیچک کی وبا سے نمٹنے کے لیے بڑے پیمانے پر ویکسینیشن مشکل ہو سکتی ہے کیونکہ چیچک کی واحد منظور شدہ ویکسین، ویکسینیا وائرس کے شدید مضر اثرات ہو سکتے ہیں۔ اس کے باوجود، کچھ حکومتیں اس امکان کے خلاف بیمہ کرنے کے لیے چیچک کی ویکسین کا ذخیرہ کرتی ہیں۔ تاہم، مخصوص اور موثر اینٹی وائرل ادویات کی ترقی کو ترجیح دی جاتی ہے۔ ایک ممکنہ طریقہ یہ ہوگا کہ اس مقصد کے لیے پوکس وائرس کے تھائمیڈائن کینیز کی خاصیت کو اسی طرح استعمال کیا جائے جس طرح اسے ہرپس وائرس کے خلاف دوائیوں کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ ایک مشکل یہ ہے کہ پوکس وائرس تھائمیڈائن کینیس کا تعلق تھائمیڈائن کینیس کے اسی خاندان سے ہے جو انسانی تھائمیڈائن کینیس سے ہے اور اس طرح کیمیائی طور پر زیادہ ملتا جلتا ہے۔ اس لیے پوکس وائرس تھائمیڈائن کینیسز کی ساخت کا تعین ممکنہ اینٹی وائرل ادویات تلاش کرنے کے لیے کیا گیا ہے۔ تاہم، تلاش کے نتیجے میں ابھی تک پوکس وائرس کے خلاف قابل استعمال اینٹی وائرل دوا نہیں ملی ہے۔ جین تھراپی میں "خودکشی جین" کے طور پر ہرپس وائرس تھائمیڈائن کینیز جین کو جین تھراپی کے تجربات میں حفاظتی نظام کے طور پر "خودکشی جین" کے طور پر بھی استعمال کیا گیا ہے، جس سے جین کا اظہار کرنے والے خلیوں کو گینسیکلوویر کا استعمال کرتے ہوئے مار دیا جاتا ہے۔ یہ اس صورت میں مطلوب ہے جب ریکومبیننٹ جین ایک اتپریورتن کا سبب بنتا ہے جس کی وجہ سے خلیوں کی بے قابو نشوونما (انسرشنل میوٹیجینیسیس) ہوتی ہے۔ ان ترمیم شدہ خلیوں کے ذریعہ تیار کردہ سائٹوٹوکسک مصنوعات پڑوسی خلیوں میں پھیل سکتی ہیں، جس سے وہ اسی طرح گینسیکلوویر کے لیے حساس ہو جاتے ہیں، جسے "بائی اسٹینڈر ایفیکٹ" کے نام سے جانا جاتا ہے۔ یہ نقطہ نظر جانوروں کے نمونوں میں کینسر کے علاج کے لیے استعمال کیا گیا ہے، اور اس لحاظ سے فائدہ مند ہے کہ جین کا اظہار کرنے والے 10 فیصد مہلک خلیوں کے ساتھ ٹیومر کو مار دیا جا سکتا ہے۔ ٹماٹر تھائمیڈائن کینیس اور اے زیڈ ٹی کا استعمال کرتے ہوئے اسی طرح کا نظام آزمایا گیا ہے۔ اس کے علاوہ، تھائمیڈائن کینیز جین کو زلمکسس نامی ہیماٹوپوئیٹک اسٹیم سیل ٹرانسپلانٹ تھراپی میں خطرناک گرافٹ بمقابلہ میزبان بیماری سے نمٹنے کے لیے خودکش جین کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے جسے یورپ میں 2016 میں مشروط طور پر منظور کیا گیا تھا۔ ٹیومر مارکر جین تھائمیڈائن کینیز کا اسی طرح کا استعمال عام خلیوں (ٹیومر مارکر) میں موجود مادوں کے کچھ ٹیومر خلیوں میں موجودگی کا استعمال کرتا ہے۔ اس طرح کے ٹیومر مارکر، مثال کے طور پر، سی ای اے (کارسینو ایمبریونک اینٹیجن) اور اے ایف پی (الفا فیٹوپروٹین) ہیں۔ ان ٹیومر مارکر کے جینوں کو تھائمیڈائن کینیز کے پروموٹر جین کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ اس کے بعد تھائمیڈائن کینیز کو ٹیومر مارکر کا اظہار کرنے والے خلیوں میں چالو کیا جا سکتا ہے لیکن عام خلیوں میں نہیں، اس طرح کہ گینسیکلوویر کے ساتھ علاج صرف ٹیومر کے خلیوں کو مار دیتا ہے۔ اس طرح کے جین تھراپی پر مبنی نقطہ نظر اب بھی تجرباتی ہیں، تاہم، ٹیومر کے خلیوں میں جین کی منتقلی کو نشانہ بنانے سے وابستہ مسائل ابھی تک مکمل طور پر حل نہیں ہوئے ہیں۔ ٹیومر کے لیے نیوٹرون کیپچر تھراپی تجویز کی گئی ہے اور دماغی ٹیومر کے بورون نیوٹرون کیپچر تھراپی کے لیے جانوروں کے ماڈلز میں بورون کے ساتھ تھائمیڈائن اینالاگ کو شامل کرنے کی کوشش کی گئی ہے۔ بورون پر مشتمل تھائمیڈائن مشتقات کی ایک بہت وسیع تعداد بیان کی گئی ہے۔ پرجیوی جینوم میں ٹی کے جین کا تعارف بی آر ڈی یو کو شامل کرنا ممکن بناتا ہے اور اس طرح پرجیوی کو اس دوا کے ساتھ علاج کے لیے حساس بناتا ہے اور یہ پرجیوی جینوم کی نقل کا ایک حساس اشارہ بھی تجویز کیا گیا ہے۔ پیمائش سیرم اور پلازما میں سیرم یا پلازما میں تھائمیڈائن کینیز کی سطح کو زیادہ تر انزائم سرگرمی کی جانچ کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا ہے۔ تجارتی جانچ میں، یہ سبسٹریٹ اینالاگ کے ساتھ سیرم کے نمونے کے انکیوبیشن اور بننے والی مصنوعات کی مقدار کی پیمائش کے ذریعے کیا جاتا ہے۔ امیونواسے کے ذریعے تھائمیڈائن کینیز پروٹین کا براہ راست تعین بھی استعمال کیا گیا ہے۔ اس طریقہ کار سے پائے جانے والے تھائمیڈائن کینیز کی مقدار انزائم کی سرگرمیوں کے ساتھ اچھی طرح سے مطابقت نہیں رکھتی ہے۔ اس کی ایک وجہ یہ ہے کہ امیونواسے کے ذریعے شناخت شدہ سیرم ٹی کے 1 کی ایک بڑی مقدار انزائیمی طور پر فعال نہیں ہے۔ یہ خاص طور پر ٹھوس ٹیومر کے معاملے میں ہوتا ہے جہاں امیونواسے زیادہ حساس ہو سکتے ہیں۔ ٹشو میں ٹشو نکالنے کے بعد ٹشو کے نمونوں میں تھائمیڈائن کینیز کا تعین کیا گیا ہے۔ نکالنے یا جانچ کے لیے کوئی معیاری طریقہ تیار نہیں کیا گیا ہے اور خلیوں اور بافتوں سے نکالنے میں ٹی کے کے تعین کی کسی مخصوص طبی سوال کے سلسلے میں توثیق نہیں کی گئی ہے، تاہم دیکھیں رومیئن اور دیگر۔ اور آرنر اور دیگر۔ سبسٹریٹ اینالاگ 5-بروموونائل 2 '-ڈیوکسیوریڈائن کا استعمال کرتے ہوئے سیل کے نکات میں ٹی کے 2 کے مخصوص تعین کے لیے ایک طریقہ تیار کیا گیا ہے۔ ذیل میں مذکور مطالعات میں استعمال شدہ طریقے اور نتائج کی اطلاع دینے کا طریقہ اتنا مختلف ہے کہ مختلف مطالعات کے درمیان موازنہ ممکن نہیں ہے۔ نشوونما کے دوران جنین کے بافتوں میں TK1 کی سطح بعد میں متعلقہ بافتوں کے مقابلے میں زیادہ ہوتی ہے۔ بعض غیر مہلک بیماریاں خلیوں اور بافتوں میں ٹی کے اقدار کی ڈرامائی بلندی کو بھی جنم دیتی ہیں: مونوسیٹوسس کے دوران پردیی لمفوسائٹس میں اور تباہ کن خون کی کمی کے دوران بون میرو میں۔ چونکہ ٹی کے 1 خلیوں کی تقسیم کے دوران خلیوں میں موجود ہوتا ہے، اس لیے یہ فرض کرنا مناسب ہے کہ مہلک بافتوں میں ٹی کے کی سرگرمی متعلقہ عام بافتوں سے زیادہ ہونی چاہیے۔ زیادہ تر مطالعات میں بھی اس کی تصدیق ہوتی ہے۔ تھائمیڈائن کینیز کے خلاف امیونو ہسٹو کیمیکل سٹیننگ اینٹی باڈیز امیونو ہسٹو کیمیکل کا پتہ لگانے کے لیے دستیاب ہیں۔ اسٹیج 2 بریسٹ کارسنوما کے مریضوں کی شناخت کے لیے تھائمیڈائن کینیز کے لیے داغ لگنا ایک قابل اعتماد تکنیک پائی گئی۔ شناخت شدہ مریضوں کی سب سے زیادہ تعداد تھائمیڈائن کنیز اور کی-67 داغ کے امتزاج سے حاصل کی گئی۔ اس تکنیک کی تصدیق پھیپھڑوں کے کینسر، کولوریکٹل کارسنوما، پھیپھڑوں کے کینسر اور گردوں کے سیل کارسنوما کے لیے بھی کی گئی ہے۔ فلوروسینٹ سٹیننگ 2 '-ڈیوکسی-2'، 2 '-ڈفلوورو-5-ایتھائنلورائڈائن (ڈی ایف-ایڈیو) ہرپس سمپلیکس وائرس تھائمیڈائن کینیس سے جڑا ہوتا ہے لیکن، سٹیرکل رکاوٹ کی وجہ سے، انسانی تھائمیڈائن کینیس سے نہیں۔ یہ ریجینٹ ایک فلوروسینٹ ایزائڈ کے ساتھ مل کر متاثرہ خلیوں کی فلوروسینس کا سبب بنتا ہے لیکن غیر متاثرہ خلیوں کی نہیں۔ لہذا، یہ سبسٹریٹ اینالاگ خاص طور پر متاثرہ خلیوں کو داغ لگانا ممکن بناتا ہے۔ یہ بھی دیکھیں کہ تھائمیڈائن کینیز 1 تھائمیڈائن کینیز فرام ہرپس وائرس تھائمیڈیلیٹ کینیز نیوکلیوسائڈ-ڈائیفاسفیٹ کینیز تھائمیڈیلیٹ سنتھس تھائمیڈائن کینیز ان کلینیکل کیمسٹری ڈیوئٹم (آر) ٹی کے اے ٹیسٹ فار تھائمیڈائن کینیز حوالہ جات مزید پڑھنا بیرونی روابط ای سی 2.7.1