Papanicolaou stain
پاپینکولاؤ سٹین (پاپینکولاؤ کا داغ اور پیپ سٹین بھی) ایک کثیر رنگا رنگ (کثیر رنگا) سائٹولوجیکل سٹیننگ تکنیک ہے جسے جارج پاپینکولاؤ نے 1942 میں تیار کیا تھا۔ پاپینکولاؤ داغ سائٹولوجی میں سب سے زیادہ استعمال ہونے والے داغوں میں سے ایک ہے، جہاں یہ تشخیص کرنے میں پیتھولوجسٹوں کی مدد کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ اگرچہ پیپ ٹیسٹ یا پیپ سمیر میں سروائیکل کینسر کا پتہ لگانے میں اس کے استعمال کے لیے سب سے زیادہ قابل ذکر ہے، لیکن یہ مختلف قسم کے جسمانی سراو اور اعضاء اور بافتوں کی چھوٹی سوئی بائیوپسیز سے غیر جینیاتی نمونوں کی تیاریوں کو داغدار کرنے کے لیے بھی استعمال ہوتا ہے۔ پاپینکولاؤ نے 1942، 1954 اور 1960 میں اس داغ کی تین تشکیلات شائع کیں۔ استعمال پیپ سٹیننگ کا استعمال اسمیئر کی تیاریوں میں خلیوں کو مختلف جسمانی سراووں اور سوئی بائیوپسیز سے الگ کرنے کے لیے کیا جاتا ہے (جس میں نمونوں کو پھیلایا جاتا ہے یا شیشے کی خوردبین سلائیڈ پر لگایا جاتا ہے)۔ نمونوں میں گائنکولوجیکل اسمیئر (پیپ اسمیئر)، تھوک، برش، دھونا، پیشاب، دماغی اسپائنل سیال، پیٹ کا سیال، پھیپھڑوں کا سیال، سینوویل سیال، سیمینل سیال، باریک سوئی کی خواہشات، ٹیومر ٹچ نمونے، یا ڈھیلے خلیوں پر مشتمل دیگر مواد شامل ہو سکتے ہیں۔ پیپ کا داغ مکمل طور پر معیاری نہیں ہے اور کئی فارمولیشن میں آتا ہے، جو استعمال شدہ صحیح رنگوں، ان کے تناسب اور عمل کے وقت میں مختلف ہوتا ہے۔ پیپ سٹیننگ عام طور پر سائٹوپیتھولوجی سے وابستہ ہے جس میں ڈھیلے خلیوں کی جانچ کی جاتی ہے، لیکن داغ کو بھی تبدیل کیا گیا ہے اور ٹشو سلائسز پر استعمال کیا گیا ہے۔ پیپ ٹیسٹ پیپ سٹیننگ کا استعمال پیپ سمیر (یا پیپ ٹیسٹ) میں کیا جاتا ہے اور یہ گائنکولوجی میں سروائیکل کینسر اسکریننگ کی ایک قابل اعتماد تکنیک ہے۔ عام داغ لگانے کا طریقہ پاپینکولاؤ داغ کی کلاسیکی شکل میں تین حلوں میں پانچ داغ شامل ہوتے ہیں۔ داغدار ہونے والے پہلے محلول میں ہیماٹوکسیلن ہوتا ہے جو خلیوں کے مرکزوں کو داغدار کرتا ہے۔ پاپینکولاؤ نے اپنے شائع کردہ داغ کی تینوں فارمولیشنوں میں ہیرس کے ہیماٹوکسیلن کا استعمال کیا۔ دوسرا داغدار محلول (نامزد او جی-6)، فاسفوٹنگسٹک ایسڈ کی تھوڑی مقدار کے ساتھ 95 ٪ ایتھائل الکحل میں اورنج جی پر مشتمل ہوتا ہے۔ او جی-6 میں، او جی نارنجی جی کی نشاندہی کرتا ہے اور '6' شامل کیے گئے فاسفوٹنگسٹک ایسڈ کے ارتکاز کی نشاندہی کرتا ہے ؛ دیگر اقسام او جی-5 اور او جی-8 ہیں)۔ تیسرا داغدار محلول تین رنگوں پر مشتمل ہوتا ہے، ایوسن Y، ہلکا سبز SF پیلا، اور 95 ٪ ایتھائل الکحل میں بسمارک براؤن Y جس میں تھوڑی مقدار میں فاسفوٹنگسٹک ایسڈ اور لتیم کاربونیٹ ہوتا ہے۔ یہ حل، نامزد ای اے، اس کے بعد ایک نمبر جو رنگوں کے تناسب کو ظاہر کرتا ہے، دیگر فارمولیشن میں ای اے-36، ای اے-50، اور ای اے-65 شامل ہیں۔ جوابی داغ 95 فیصد ایتھائل الکحل میں تحلیل ہو جاتے ہیں جو خلیوں کو زیادہ داغ لگانے سے روکتا ہے جو جوہری تفصیل اور خلیوں کے خاکے کو غیر واضح کر دیتا ہے خاص طور پر اس صورت میں جب خلیات سلائیڈ پر اوور لیپ ہو رہے ہوں۔ فاسفوٹنگسٹک ایسڈ کو کاؤنٹر سٹین کے پی ایچ کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے شامل کیا جاتا ہے اور رنگ کی شدت کو بہتر بنانے میں مدد کرتا ہے۔ ای اے کاؤنٹرسٹین میں بسمارک براؤن اور فاسفوٹنگسٹک ایسڈ ہوتے ہیں، جو جب مل کر ہوتے ہیں تو دونوں حل سے باہر نکل جاتے ہیں، جس سے مرکب کی مفید زندگی کم ہو جاتی ہے۔ نتائج داغ کے نتیجے میں ایسے خلیات پیدا ہونے چاہئیں جو کافی حد تک شفاف ہوں تاکہ اوور لیپنگ خلیات والے موٹے نمونوں کی بھی تشریح کی جا سکے۔ خلیے کے مرکزے کرکرا، نیلے سے سیاہ رنگ کے ہونے چاہئیں اور مرکزے کے کرومیٹن کے نمونوں کی اچھی طرح سے وضاحت کی جانی چاہیے۔ سیل سائٹوپلازم نیلے سبز اور کیریٹن کے داغ نارنجی رنگ کے ہوتے ہیں۔ Eosin Y سطحی اپیتھیلیل اسکوایمس خلیات، نیوکلیولی، سیلیا، اور سرخ خون کے خلیات کو داغدار کرتا ہے۔ ہلکا سبز ایس ایف پیلا رنگ فعال خلیوں جیسے کالمر خلیات، پیراباسل اسکوایمس خلیات، اور انٹرمیڈیٹ سکوایمس خلیات کے سائٹوپلازم کے لیے نیلے رنگ کا داغ دیتا ہے۔ سطحی خلیات نارنجی سے گلابی ہوتے ہیں، اور درمیانی اور پیرابسل خلیات فیروزی سبز سے نیلے ہوتے ہیں۔ الٹرا فاسٹ پاپینکولاؤ سٹین الٹرا فاسٹ پاپینکولاؤ سٹین ٹھیک سوئی کی خواہش کے نمونوں کے لیے ایک متبادل ہے، جو نمایاں طور پر کم وقت میں تقابلی بصری وضاحت حاصل کرنے کے لیے تیار کیا گیا ہے۔ یہ عمل نمکین کے ساتھ ہوا سے خشک اسمیئر کی ری ہائیڈریشن میں مختلف ہے، 65 فیصد ایتھنول فکسیو میں 4 فیصد فارملڈیہائیڈ کا استعمال کریں، اور رچرڈ ایلن ہیماٹوکسیلن-2 اور سائٹو اسٹین کا استعمال کریں، جس کے نتیجے میں 90 سیکنڈ کا عمل شفاف پولی کرومیٹک داغ پیدا کرتا ہے۔ پاپینکولاؤ سٹین پیپرز کی مثالیں جارج این پاپینکولاؤ نے اپنے داغ پاپینکولاؤ، جارج این کو بیان کرتے ہوئے "اندام نہانی کے داغوں کے لیے ایک نیا طریقہ کار"۔ سائنس 95.2469 (1942): 438-439۔ پاپینکولاؤ، جارج این۔ "کینسر کی تشخیص کا سیل سمیر طریقہ"۔ امریکن جرنل آف پبلک ہیلتھ اینڈ دی نیشنز ہیلتھ 38.2 (1948): 202-205۔ پاپینکولاؤ، جارج این۔ "اٹلس آف ایکسفولیٹو سائٹولوجی"۔ ہارورڈ یونیورسٹی پریس کے ذریعہ دولت مشترکہ کے فنڈ کے لیے شائع کیا گیا۔ (1954)۔ پاپینکولاؤ، جارج این۔ "میمورنڈم آن سٹیننگ"۔ اٹلس آف ایکسفولیٹو سائٹولوجی۔ کیمبرج، ایم اے: ہارورڈ یونیورسٹی پریس، سپلیمنٹ II (1960): 12۔ یہ بھی دیکھیں کہ ڈف-کوئک-رومنوسکی سٹیننگ کا طریقہ عام طور پر سائٹولوجی حوالہ جات سٹیننگ سائٹوپیتھولوجی مائکروبیولوجی تکنیک لیبارٹری تکنیک ہسٹوپیتھولوجی سٹیننگ ڈائز ایس آر: پاپینکولاؤ ٹیسٹ میں استعمال ہوتا ہے۔