Selectable marker
سلیکٹ ایبل مارکر ایک ایسا جین ہوتا ہے جو کسی خلیے، خاص طور پر بیکٹیریا یا کلچر میں موجود خلیوں میں داخل کیا جاتا ہے، جو مصنوعی انتخاب کے لیے موزوں خاصیت فراہم کرتا ہے۔ وہ ایک قسم کے رپورٹر جین ہیں جو لیبارٹری مائکروبیولوجی، مالیکیولر بائیولوجی، اور جینیٹک انجینئرنگ میں استعمال ہوتے ہیں تاکہ کسی منتقلی یا دوسرے طریقہ کار کی کامیابی کی نشاندہی کی جا سکے جس کا مقصد کسی خلیے میں غیر ملکی ڈی این اے کو متعارف کرانا ہے۔ منتخب کردہ مارکر اکثر اینٹی بائیوٹک مزاحمتی جین ہوتے ہیں (ایک اینٹی بائیوٹک مزاحمتی مارکر ایک ایسا جین ہوتا ہے جو ایک پروٹین تیار کرتا ہے جو خلیوں کو اس پروٹین کو اینٹی بائیوٹک کے خلاف مزاحمت فراہم کرتا ہے۔) جن بیکٹیریا کو غیر ملکی ڈی این اے متعارف کرانے کے طریقہ کار کا نشانہ بنایا گیا ہے وہ اینٹی بائیوٹک پر مشتمل میڈیم پر اگائے جاتے ہیں، اور وہ بیکٹیریل کالونیاں جو بڑھ سکتی ہیں انہوں نے متعارف شدہ جینیاتی مواد کو کامیابی کے ساتھ لیا اور اس کا اظہار کیا ہے۔ عام طور پر اینٹی بائیوٹکس جیسے ایمپیسلن، کلورامفینکول، ٹیٹراسیکلائن یا کانامائسن وغیرہ کے خلاف مزاحمت کو انکوڈنگ کرنے والے جین کو ای کولی کے لیے مفید قابل انتخاب مارکر سمجھا جاتا ہے۔ موڈس اوپرینڈی غیر ریکومبیننٹ ریکومبیننٹ سے الگ ہوتے ہیں۔ یعنی، بیکٹیریا میں آر-ڈی این اے متعارف کرایا جاتا ہے، کچھ بیکٹیریا کامیابی کے ساتھ تبدیل ہو جاتے ہیں کچھ غیر تبدیل شدہ رہتے ہیں۔ جب ایمپیسلن پر مشتمل درمیانے درجے پر اگایا جاتا ہے تو ایمپیسلن مزاحمت کی کمی کی وجہ سے بیکٹیریا مر جاتے ہیں۔ اس پوزیشن کو بعد میں نائٹروسیلولوز کاغذ پر نوٹ کیا جاتا ہے اور مطلوبہ مصنوعات کی بڑے پیمانے پر پیداوار کے لیے انہیں غذائی ذرائع میں منتقل کرنے کے لیے الگ کیا جاتا ہے۔ سلیکٹ ایبل مارکر کا ایک متبادل اسکرین ایبل مارکر ہے جسے رپورٹر جین کے طور پر بھی ظاہر کیا جا سکتا ہے، جو محقق کو مطلوبہ اور ناپسندیدہ خلیوں کے درمیان فرق کرنے کی اجازت دیتا ہے، مثال کے طور پر۔ نیلی اور سفید کالونیوں کے درمیان۔ یہ مطلوب یا ناپسندیدہ خلیات محض غیر تبدیل شدہ خلیات ہیں جو تجربے کے دوران جین کو لینے سے قاصر تھے۔ مثبت اور منفی سالماتی حیاتیات کی تحقیق کے لیے طلب کردہ انتخاب کی بنیاد پر مختلف قسم کے مارکر استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ ان میں شامل ہیں: مثبت یا سلیکشن مارکر قابل انتخاب مارکر ہوتے ہیں جو میزبان حیاتیات کو انتخابی فائدہ دیتے ہیں۔ ایک مثال اینٹی بائیوٹک مزاحمت ہوگی، جو میزبان جاندار کو اینٹی بائیوٹک کے انتخاب سے بچنے کی اجازت دیتی ہے۔ منفی یا جوابی انتخاب کے قابل مارکر منتخب کرنے کے قابل مارکر ہیں جو انتخاب پر میزبان حیاتیات کی نشوونما کو ختم یا روکتے ہیں۔ ایک مثال تھائمیڈائن کینیز ہوگی، جو میزبان کو گینسیکلوویر کے انتخاب کے لیے حساس بناتی ہے۔ مثبت اور منفی قابل انتخاب مارکر ایک شرط کے تحت میزبان کو فائدہ دے کر مثبت اور منفی مارکر دونوں کے طور پر کام کر سکتے ہیں، لیکن ایک مختلف حالت میں ترقی کو روکتے ہیں۔ ایک مثال ایک ایسا انزائم ہوگا جو آکسوٹروفی (مثبت انتخاب) کی تکمیل کر سکتا ہے اور کسی کیمیکل کو زہریلے مرکب (منفی انتخاب) میں تبدیل کرنے کے قابل ہو سکتا ہے۔ منتخب کردہ مارکر کی عام مثالوں میں شامل ہیں: بیٹا-لیکٹامیز جو بیکٹیریل میزبانوں کو ایمپیسلن مزاحمت فراہم کرتا ہے۔ ٹی این 5 سے نیو جین، جو بیکٹیریا میں کانامائسن اور یوکرائیوٹک خلیوں میں جینیٹین کے خلاف مزاحمت فراہم کرتا ہے۔ ای کولی جینوم سے میوٹنٹ فابی آئی جین (ایم ایف اے بی آئی)، جو میزبان کو ٹرائکلوسن مزاحمت فراہم کرتا ہے۔ یو آر اے 3، خمیر سے نکلنے والا ایک اوروٹیڈائن-5 'فاسفیٹ ڈیکاربوکسیلیز ایک مثبت اور منفی قابل انتخاب مارکر ہے۔ یہ یوراسل بائیوسنتھیس کے لیے ضروری ہے اور یورا 3 میوٹینٹس کی تکمیل کر سکتا ہے جو یوراسل (مثبت انتخاب) کے لیے آکسوٹروفک ہیں۔ انزائم یو آر اے 3 5-فلوروروٹک ایسڈ (5 ایف او اے) کو زہریلے مرکب 5-فلوروراسیل میں بھی تبدیل کرتا ہے، لہذا یو آر اے 3 جین لے جانے والے کسی بھی خلیے کو 5 ایف او اے (منفی انتخاب) کی موجودگی میں مار دیا جائے گا۔ مستقبل کی پیش رفت مستقبل میں متبادل مارکر ٹیکنالوجیز کو زیادہ کثرت سے استعمال کرنے کی ضرورت ہوگی، کم از کم، حتمی مصنوعات میں ان کی استقامت کے بارے میں خدشات کو دور کرنے کے لیے۔ یہ بھی ممکن ہے کہ مارکر کو مکمل طور پر مستقبل کی تکنیکوں سے تبدیل کیا جائے جو ہٹانے کے قابل مارکر استعمال کرتے ہیں، اور دیگر جو مارکر بالکل استعمال نہیں کرتے ہیں، اس کے بجائے شریک تبدیلی، ہم جنس پرست دوبارہ ملاپ، اور دوبارہ جوڑنے والی ثالثی پر انحصار کرتے ہیں۔ جینیاتی مارکر مارکر جین بائیو مارکر حوالہ جات جینیاتی تکنیک سالماتی حیاتیات اینٹی مائکروبیل مزاحمت بھی دیکھیں۔