Ribonuclease L
ربن نیوکلیز ایل یا آر نیس ایل (لیٹنٹ کے لیے)، جسے بعض اوقات ربن نیوکلیز 4 یا 2 '-5' اولیگواڈینیلیٹ سنتھٹیس پر منحصر ربن نیوکلیز کے نام سے جانا جاتا ہے، ایک انٹرفیرون (آئی ایف این) سے متاثر ربن نیوکلیز ہے، جو چالو ہونے پر سیل کے اندر موجود تمام آر این اے (سیلولر اور وائرل دونوں) کو تباہ کر دیتا ہے۔ RNase L ایک انزائم ہے جسے انسانوں میں RNASEL جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے۔ یہ جین انٹرفیرون-ریگولیٹڈ 2 '-5' اولیگواڈینیلیٹ (2 '-5' اے) نظام کے ایک جزو کو انکوڈ کرتا ہے جو انٹرفیرون کے اینٹی وائرل اور اینٹی پھیلاؤ کرداروں میں کام کرتا ہے۔ آر نیس ایل کو ڈائمرائزیشن کے ذریعے چالو کیا جاتا ہے، جو 2 '-5' اے بائنڈنگ پر ہوتا ہے، اور اس کے نتیجے میں خلیے میں موجود تمام آر این اے میں دراڑ پڑ جاتی ہے۔ یہ ایم ڈی اے 5 کو چالو کرنے کا باعث بن سکتا ہے، جو انٹرفیرون کی تیاری میں شامل ایک آر این اے ہیلیکیس ہے۔ عام سیل سائیکل کے دوران ترکیب اور ایکٹیویشن RNase L بہت چھوٹی مقدار میں موجود ہوتا ہے۔ جب انٹرفیرون سیل ریسیپٹرز سے جڑا ہوتا ہے، تو یہ اینٹی وائرل حالت لانے کے لیے تقریبا 300 جینوں کی نقل کو چالو کرتا ہے۔ پیدا ہونے والے انزائموں میں آر نیس ایل ہے، جو ابتدائی طور پر غیر فعال شکل میں ہوتا ہے۔ نقل شدہ جینوں کا ایک مجموعہ 2 '-5' اولیگواڈینیلیٹ سنتھٹیس (او اے ایس) کے لیے کوڈ کرتا ہے۔ نقل شدہ آر این اے کو پھر سائٹوپلازم تک پہنچنے اور او اے ایس کی غیر فعال شکل میں ترجمہ ہونے سے پہلے نیوکلئس میں تقسیم اور ترمیم کیا جاتا ہے۔ خلیے میں او اے ایس کا مقام اور 2 '-5' اولیگواڈینیلیٹ کی لمبائی کا انحصار او اے ایس کی نقل کے بعد اور ترجمہ کے بعد کی تبدیلیوں پر ہوتا ہے۔ او اے ایس صرف وائرل انفیکشن کے تحت چالو ہوتا ہے، جب وائرل ڈی ایس آر این اے کے ساتھ پروٹین کی غیر فعال شکل کا سخت پابند ہوتا ہے، جو کہ ریٹرو وائرس کے ایس ایس آر این اے اور اس کے تکمیلی اسٹرینڈ پر مشتمل ہوتا ہے۔ ایک بار فعال ہونے کے بعد، او اے ایس اے ٹی پی کو پائروفاسفیٹ اور 2 '-5' سے منسلک اولیگواڈینیلیٹس (2-5 اے) میں تبدیل کرتا ہے، جو 5 'اینڈ فاسفوریلیٹڈ ہوتے ہیں۔ 2-5 اے مالیکیول پھر آر نیس ایل سے جڑے ہوتے ہیں، جو ڈائمرائزیشن کے ذریعے اس کی سرگرمی کو فروغ دیتے ہیں۔ اپنی فعال شکل میں آر نیس ایل خلیے میں موجود تمام آر این اے مالیکیولز کو الگ کر دیتا ہے جس کی وجہ سے آٹوفیجی اور اپوپٹوسس ہوتا ہے۔ نتیجے میں آنے والے کچھ آر این اے کے ٹکڑے آئی ایف این-β کی پیداوار کو مزید فروغ دے سکتے ہیں جیسا کہ اہمیت کے حصے میں بتایا گیا ہے۔ آر این ایز ایل کی اس ڈائمرائزیشن اور ایکٹیویشن کو فلوروسینس ریسوننس انرجی ٹرانسفر (ایف آر ای ٹی) کا استعمال کرتے ہوئے پہچانا جا سکتا ہے، کیونکہ مخالف مقامات پر ایک قوینچر اور ایک فلوروفور پر مشتمل اولیگوریبونوکلیوٹائڈز کو غیر فعال آر این ایز ایل والے محلول میں شامل کیا جاتا ہے۔ اس کے بعد ایف آر ای ٹی سگنل کو قوینچر کے طور پر ریکارڈ کیا جاتا ہے اور فلوروفور ایک دوسرے کے بہت قریب ہوتے ہیں۔ 2-5 اے مالیکیولز کے اضافے پر، آر نیس ایل فعال ہو جاتا ہے، جو اولیگوریبونوکلیوٹائڈز کو الگ کرتا ہے اور ایف آر ای ٹی سگنل میں مداخلت کرتا ہے۔ وٹرو میں، آر نیس ایل کو کرکومین کے ذریعے روکا جا سکتا ہے۔ اہمیت آر نیس ایل جسم کے پیدائشی مدافعتی دفاع کا حصہ ہے، یعنی خلیے کی اینٹی وائرل حالت۔ جب کوئی خلیہ اینٹی وائرل حالت میں ہوتا ہے، تو یہ وائرل حملوں کے لیے انتہائی مزاحم ہوتا ہے اور کامیاب وائرل انفیکشن پر اپوپٹوسس سے گزرنے کے لیے بھی تیار ہوتا ہے۔ خلیے کے اندر تمام آر این اے کی انحطاط (جو عام طور پر پروٹین کینیز آر کی وجہ سے ہونے والی ٹرانسلیشن سرگرمی کے خاتمے کے ساتھ ہوتا ہے) کسی وائرس کے خلاف خلیے کا آخری موقف ہوتا ہے اس سے پہلے کہ وہ اپوپٹوسس کی کوشش کرے۔ انٹرفیرون بیٹا (آئی ایف این-β)، ایک قسم I انٹرفیرون جو اینٹی وائرل سرگرمی کا ذمہ دار ہے، متاثرہ خلیے میں آر نیس ایل اور میلانوما تفریق سے وابستہ پروٹین 5 (ایم ڈی اے 5) سے متاثر ہوتا ہے۔ آئی ایف این کی پیداوار میں آر نیس ایل اور ایم ڈی اے 5 کے درمیان تعلق کی تصدیق ایس آئی آر این اے ٹیسٹوں سے ہوئی ہے جو کسی بھی مالیکیول کے اظہار کو خاموش کرتے ہیں اور آئی ایف این کی پیداوار میں نمایاں کمی کو نوٹ کرتے ہیں۔ ایم ڈی اے 5، ایک آر این اے ہیلیکیس، وائرل جینوم سے نقل شدہ پیچیدہ اعلی سالماتی وزن ڈی ایس آر این اے کے ذریعے چالو ہونے کے لیے جانا جاتا ہے۔ آر نیس ایل والے خلیے میں، ایم ڈی اے 5 سرگرمی کو مزید بڑھایا جا سکتا ہے۔ فعال ہونے پر، آر نیس ایل وائرل آر این اے کو الگ کرتا ہے اور اس کی شناخت کرتا ہے اور اسے ایم ڈی اے 5 ایکٹیویشن سائٹس میں کھلاتا ہے، جس سے آئی ایف این-β کی پیداوار میں اضافہ ہوتا ہے۔ آر این ایز ایل کے ذریعہ تیار کردہ آر این اے کے ٹکڑوں میں دوہرے پھنسے ہوئے علاقے ہوتے ہیں، ساتھ ہی مخصوص مارکر بھی ہوتے ہیں، جو انہیں آر این ایز ایل اور ایم ڈی اے 5 کے ذریعے شناخت کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔ کچھ مطالعات نے تجویز کیا ہے کہ RNase L کی اعلی سطح دراصل IFN-β کی پیداوار کو روک سکتی ہے، لیکن RNase L سرگرمی اور IFN-β کی پیداوار کے درمیان ایک واضح تعلق اب بھی موجود ہے۔ مزید برآں، یہ دکھایا گیا ہے کہ آر نیس ایل بہت سی بیماریوں میں ملوث ہے۔ 2002 میں، "موروثی پروسٹیٹ کینسر 1" لوکس (ایچ پی سی 1) کو آر این اے ایس ای ایل جین میں نقشہ بنایا گیا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ اس جین میں تغیرات پروسٹیٹ کینسر کی پیش گوئی کا سبب بنتے ہیں۔ دائمی تھکاوٹ سنڈروم (سی ایف ایس) میں او اے ایس/آر این ایز ایل راستے کی خرابیوں کی تحقیقات کی گئی ہیں۔ حوالہ جات مزید پڑھنے بیرونی روابط ربن نیوکلیز پروسٹیٹ کینسر