Non-receptor tyrosine kinase
غیر رسیپٹر ٹائروسین کینیز (این آر ٹی کے) ایک سائٹوسولک انزائم ہے جو نیوکلیوسائڈ ٹرائی فاسفیٹ ڈونر، جیسے اے ٹی پی، سے پروٹین میں ٹائروسین کے باقیات میں فاسفیٹ گروپ کی منتقلی کو متحرک کرنے کا ذمہ دار ہے۔ غیر رسیپٹر ٹائروسین کنیز پروٹین فیملی ٹائروسین کینیز کا ایک ذیلی گروپ ہے، انزائم جو فاسفیٹ گروپ کو اے ٹی پی سے پروٹین (فاسفوریلیشن) کے ٹائروسین کے باقیات میں منتقل کر سکتے ہیں۔ یہ انزائم سیل میں موجود دوسرے انزائموں کو آن یا آف کر کے بہت سے سیلولر افعال کو منظم کرتے ہیں۔ ریسیپٹر ٹائروسین کینیس (آر ٹی کے) کے برعکس، ٹائروسین کینیس کا دوسرا ذیلی گروپ، غیر ریسیپٹر ٹائروسین کینیس سائٹوسولک انزائم ہیں۔ انسانی خلیوں میں بتیس غیر رسیپٹر ٹائروسین کنیز کی نشاندہی کی گئی ہے۔ غیر رسیپٹر ٹائروسین کینیسز خلیوں کی نشوونما، پھیلاؤ، تفریق، چپکنے، نقل مکانی اور اپوپٹوسس کو منظم کرتے ہیں، اور یہ مدافعتی نظام کے ضابطے میں اہم اجزاء ہیں۔ فنکشن این آر ٹی کے کا بنیادی کام مدافعتی نظام میں فعال ٹی اور بی خلیوں میں سگنل ٹرانسڈکشن میں ان کی شمولیت ہے۔ بہت سے ریسیپٹرز کے ذریعے سگنلنگ کا انحصار این آر ٹی کے پر ہوتا ہے جن میں ٹی سیل ریسیپٹرز (ٹی سی آر)، بی سیل ریسیپٹرز (بی سی آر)، آئی ایل-2 ریسیپٹرز (آئی ایل-2 آر)، آئی جی ریسیپٹرز، erythropoietin (EPoR) اور پرولیکٹن ریسیپٹرز شامل ہیں۔ ٹی لیمفوسائٹس پر سی ڈی 4 اور سی ڈی 8 ریسیپٹرز کو ایس آر سی خاندان کے رکن ایل ایل کے کو سگنل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔ جب اینٹیجن ٹی سیل ریسیپٹر سے جڑا ہوتا ہے، ایل کے آٹو فاسفوریلیٹڈ ہو جاتا ہے اور ٹی سیل ریسیپٹر کی زیٹا چین کو فاسفوریلیٹ کرتا ہے، اس کے بعد ایک اور این آر ٹی کے، زیپ 70، اس ٹی سیل ریسیپٹر سے جڑا ہوتا ہے اور پھر ڈاؤن اسٹریم سگنلنگ ایونٹس میں حصہ لیتا ہے جو سائٹوکین جینز کے ٹرانسکرپشنل ایکٹیویشن میں ثالثی کرتے ہیں۔ ایس آر سی خاندان کا ایک اور رکن لن بی سیل ریسیپٹر کی ثالثی میں سگنلنگ میں شامل ہے۔ لین کو بی-سیل ریسیپٹر کی محرک کے ذریعے چالو کیا جاتا ہے، جو زیپ 70 سے متعلق این آر ٹی کے، سائک کی بھرتی اور فاسفوریلیشن کا باعث بنتا ہے۔ ایک اور این آر ٹی کے، بی ٹی کے، بھی بی سیل رسیپٹر کی ثالثی میں سگنلنگ میں شامل ہے۔ بی ٹی کے جین میں تغیرات ایکس سے منسلک اگماگلوبولینیمیا کے لیے ذمہ دار ہیں، یہ ایک ایسی بیماری ہے جس کی خصوصیت بالغ بی خلیوں کی کمی ہے۔ ساخت رسیپٹر ٹائروسین کنیز کے برعکس، این آر ٹی کے میں رسیپٹر جیسی خصوصیات کی کمی ہوتی ہے جیسے ایک ایکسٹرا سیلولر لگینڈ بائنڈنگ ڈومین اور ایک ٹرانس میمبرین پھیلے ہوئے علاقے۔ زیادہ تر این آر ٹی کے سائٹوپلازم میں مقامی ہوتے ہیں، لیکن کچھ این آر ٹی کے امینو ٹرمینل ترمیم کے ذریعے سیل جھلی میں لنگر انداز ہوتے ہیں۔ ان انزائموں میں عام طور پر ایک ماڈیولر تعمیر ہوتی ہے اور انفرادی ڈومینز لچکدار لنکر ترتیب کے ذریعے ایک ساتھ جڑے ہوتے ہیں۔ این آر ٹی کے کے اہم ڈومین میں سے ایک ٹائروسائن کینیز اتپریرک ڈومین ہے، جس کی لمبائی تقریبا 275 باقیات ہیں۔ اتپریرک ڈومین کی ساخت کو چھوٹے اور بڑے لوب میں تقسیم کیا جا سکتا ہے، جہاں اے ٹی پی چھوٹے لوب سے جڑا ہوتا ہے اور پروٹین سبسٹریٹ بڑے لوب سے جڑا ہوتا ہے۔ اے ٹی پی اور سبسٹریٹ کے این آر ٹی کے سے جڑے ہونے پر، فاسفیٹ کی منتقلی کا اتپریرک ان دونوں لوبوں کے درمیان ایک دراڑ میں ہوتا ہے۔ یہ پایا گیا کہ این آر ٹی کے میں ہدف ٹائر کے ارد گرد کچھ ترتیب کی ترجیح ہوتی ہے۔ مثال کے طور پر، ایس آر سی کی ترجیحی ترتیب گلو-گلو/ایس پی-الی-ٹائر-گلی/گلو-گلو-فی ہے اور ایبل کی ترجیحی ترتیب الی/ویل-ٹائر-گلی-وال-لیو/ویل ہے۔ ایس آر سی اور اے بی ایل میں ٹائر کے ارد گرد مختلف ترجیحی ترتیبات سے پتہ چلتا ہے کہ یہ دو قسم کے این آر ٹی کے مختلف اہداف کو فاسفوریلیٹ کرتے ہیں۔ غیر رسیپٹر ٹائروسین کنیز میں صرف ٹائروسین کینیز ڈومین نہیں ہوتا ہے، این آر ٹی کے کے پاس ایسے ڈومین بھی ہوتے ہیں جو پروٹین-پروٹین، پروٹین-لپڈ، اور پروٹین-ڈی این اے کے تعاملات میں ثالثی کرتے ہیں۔ این آر ٹی کے میں پروٹین-پروٹین تعامل کے ڈومینز میں سے ایک ایس آر سی ہومیولوجی 2 (ایس ایچ 2) اور 3 (ایس ایچ 3) ڈومینز ہیں۔ لمبا ایس ایچ 2 ڈومین (~ 100 باقیات) فاسفوٹائروسین (پی-ٹائر) کے باقیات کو ترتیب مخصوص انداز میں باندھتا ہے۔ پی-ٹائر ایک گہرے پھٹے میں ایس ایچ ڈومین کے ساتھ تعامل کرتا ہے، جو غیر فاسفوریلیٹڈ ٹائر کو باندھ نہیں سکتا۔ ایس ایچ 3 ڈومین چھوٹا ہے (~ 60 باقیات) اور پولی پرولین ٹائپ II ہیلکس بنانے کے قابل پرولین پر مشتمل ترتیبات کو باندھتا ہے۔ ایس ایچ 2 اور ایس ایچ 3 ڈومینز کے بغیر کچھ این آر ٹی کے میں پروٹین-پروٹین تعاملات کے لیے استعمال ہونے والے کچھ ذیلی خاندان کے مخصوص ڈومینز ہوتے ہیں۔ مثال کے طور پر، مخصوص ڈومینز جو سائٹوکائن ریسیپٹرز (جیک فیملی) کے سائٹوپلاسمک حصے میں انزائمز کو نشانہ بناتے ہیں یا دو ڈومینز: ایک انٹیگرن بائنڈنگ ڈومین اور ایک فوکل چپکنے والی بائنڈنگ ڈومین (ایف اے سی فیملی)۔ این آر ٹی کے اے بی ایل ایس ایچ 2 اور ایس ایچ 3 ڈومینز کا مالک ہے، لیکن تعاملات کے لیے دوسرے ڈومینز کا بھی مالک ہے: ایف ایکٹین بائنڈنگ ڈومین اور ڈی این اے بائنڈنگ ڈومین میں نیوکلیئر لوکلائزیشن سگنل ہوتا ہے اور یہ نیوکلئس اور سائٹوپلازم دونوں میں پایا جاتا ہے۔ ایس ایچ 2 اور ایس ایچ 3 ڈومینز کے علاوہ، این آر ٹی کے کے بی ٹی کے/ٹی ای سی ذیلی خاندان ایک اور ماڈیولر ڈومین، ایک پلیکسٹرین ہومیولوجی (پی ایچ) ڈومین رکھتے ہیں۔ یہ پی ایچ ڈومینز فاسفیٹائڈیلینوسٹول لپڈ سے منسلک ہوتے ہیں جو ہیڈ گروپ پر مخصوص پوزیشنوں پر فاسفوریلیٹ کیے گئے ہیں۔ یہ انزائمز فاسفوریلیٹڈ فاسفیٹائڈینوسٹول لپڈ کے ساتھ پی ایچ ڈومین کے تعاملات کے ذریعے جھلی میں فعال سگنلنگ کمپلیکس سے جڑے رہ سکتے ہیں۔ ریگولیشن این آر ٹی کے اور آر ٹی کے ریگولیشن میں سب سے عام موضوع ٹائروسین فاسفوریلیشن ہے۔ چند مستثنیات کے ساتھ، این آر ٹی کے کے ایکٹیویشن لوپ میں ٹائروسینز کا فاسفوریلیشن انزیمیٹک سرگرمی میں اضافے کا باعث بنتا ہے۔ ایکٹیویشن لوپ فاسفوریلیشن مختلف این آر ٹی کے کے ذریعے ٹرانس آٹو فاسفوریلیشن یا فاسفوریلیشن کے ذریعے ہوتا ہے۔ ایکٹیویشن لوپ سے باہر ٹائروسینز کے فاسفوریلیشن کے ذریعے کینیز سرگرمی کو منفی طور پر منظم کرنا ممکن ہے۔ پروٹین ٹائروسین فاسفیٹیس (پی ٹی پی) این آر ٹی کے کو ان کی سرگرمی کی بنیادی حالت میں بحال کرتے ہیں۔ کچھ معاملات میں پی ٹی پی مثبت طور پر این آر ٹی کے کی سرگرمی کو منظم کرتے ہیں۔ ایس آر سی خاندان کے ایس آر سی اور اے بی ایل ٹائروسین کنیز ایک ہی مخصوص ڈھانچے پر مشتمل ہوتے ہیں: مائرسٹولیٹڈ ٹرمینس، مثبت طور پر چارج شدہ باقیات کا ایک خطہ، کم سیکوینس ہومیولوجی والا ایک مختصر خطہ، ایس ایچ 3 اور ایس ایچ 2 ڈومینز، ایک ٹائروسین کینیز ڈومین، اور ایک مختصر کاربوکسی ٹرمینل دم۔ دو اہم ریگولیٹری ٹائروسین فاسفوریلیشن سائٹس ہیں۔ کینیز سرگرمی کو دبانے کے لیے یہ این آر ٹی کے سی ایس کے کے ذریعے ایس آر سی کی کاربوکسی ٹرمینل دم میں ٹائر-527 کے فاسفوریلیشن کے ذریعے ممکن ہے۔ وی-ایس آر سی کے تجربے سے، جو ایس آر سی کی ایک آنکوجینک قسم ہے، اس فاسفوریلیشن سائٹ کی اہمیت کی تصدیق ہوئی۔ یہ آنکوجینک وی-ایس آر سی راس سارکوما وائرس کی پیداوار ہے اور کاربوکسی-ٹرمینل ٹرنکیشن کے نتیجے میں، وی-ایس آر سی میں منفی ریگولیٹری سائٹ ٹائر-527 کا فقدان ہے جس کی وجہ سے یہ انزائم آئینی طور پر فعال ہوتا ہے جو بدلے میں متاثرہ خلیوں کی بے قابو نشوونما کا سبب بنتا ہے۔ مزید برآں، سی-ایس آر سی میں اس ٹائروسین کو فینائلالینائن کے ساتھ تبدیل کرنے کے نتیجے میں ایکٹیویشن ہوتا ہے۔ ایس آر سی میں دوسرا ریگولیٹری فاسفوریلیشن سائٹ ٹائر-416 ہے۔ یہ ایکٹیویشن لوپ میں ایک آٹو فاسفوریلیشن سائٹ ہے۔ یہ پایا گیا کہ ٹائر-416 اور ٹائر-416 کا فاسفوریلیشن ٹائر-527 → فی اتپریورتن کو ٹائر-416 → فی اتپریورتن کے ذریعے فعال کرنے کی تبدیلی کی صلاحیت کو دبا سکتا ہے جس سے کنیز سرگرمی کی زیادہ سے زیادہ محرک پیدا ہوتی ہے۔ ایس آر سی سرگرمی کے منفی ضابطے کے لیے ایس ایچ 2 اور ایس ایچ 3 دونوں ڈومین اہم ہیں۔ ایس ایچ 2 اور ایس ایچ 3 ڈومینز میں تغیرات جو فاسفوٹائروسین کے بائنڈنگ میں خلل ڈالتے ہیں کنیز سرگرمی کو چالو کرنے کا باعث بنتے ہیں۔ اگرچہ این آر ٹی کے اے بی ایل ایس ایچ 3، ایس ایچ 2، اور کنیز ڈومینز پر مشتمل ہے جو ایس آر سی کی طرح لکیری ترتیب میں ہے، لیکن اے بی ایل کا ضابطہ مختلف ہے۔ اے بی ایل میں منفی ریگولیٹری فاسفوریلیشن سائٹ کا فقدان ہے جو ایس آر سی کے کاربوکسی ٹرمینس میں موجود ہے، اس لیے اے بی ایل کے کاربوکسی ٹرمینس کا کنیز سرگرمی کے کنٹرول میں کوئی فعال کردار نہیں ہے۔ ایس آر سی کے برعکس، اے بی ایل کے ایس ایچ 2 ڈومین میں تغیرات جو فاسفوٹائروسین بائنڈنگ کو منسوخ کرتے ہیں، ویو میں اے بی ایل کو چالو نہیں کرتے ہیں۔ ای بی ایل کی کنیز سرگرمی کو دبانے کے لیے ایس ایچ 3 ڈومین اہم ہے ؛ ایس ایچ 3 ڈومین میں تغیرات کے نتیجے میں ای بی ایل اور سیلولر تبدیلی کو فعال کیا جاتا ہے۔ زیڈ اے پی 70/سائک اور جے اے کے ایس ایچ 2 ڈومینز کے ذریعے سائک کی کنیز سرگرمی کو منظم کیا جاتا ہے۔ ٹی سیل ریسیپٹر کی زیٹا چین میں دو ایس ایچ 2 ڈومینز کو ٹائروسین-فاسفوریلیٹیڈ آئی ٹی اے ایم (امیونوریسیپٹر ٹائروسین پر مبنی ایکٹیویشن موٹف) کے سلسلے سے جوڑنے سے کنیز ڈومین پر روک تھام کو دور کرنے کے بارے میں سوچا جاتا ہے، جس سے اتپریرک سرگرمی کی تحریک ہوتی ہے۔ زیپ 70 کی کینیس سرگرمی کو ایس آر سی خاندان کے رکن ایل کے کے ذریعے ایکٹیویشن لوپ میں ٹائر-493 کے فاسفوریلیشن کے ذریعے بڑھایا جا سکتا ہے۔ اس کے برعکس ٹائر-492 کا فاسفوریلیشن زیپ 70 کی کنیز سرگرمی کو روکتا ہے۔ ٹائر-492 کی فینائلالینائن میں تبدیلی کے نتیجے میں زیپ 70 ہائپر ایکٹیویٹی ہوتی ہے۔ جیک خاندان کے اراکین کے پاس ایک مکمل طور پر فعال ٹائروسین کینیس ڈومین اور اضافی طور پر چھدم کینیس ڈومین ہوتا ہے جس میں کئی کلیدی اتپریرک باقیات کی تبدیلی کینیس سرگرمی کو غیر فعال کرنے کا باعث بنتی ہے۔ یہ فرضی کینیز ڈومین انزائیمی طور پر غیر فعال ہے، لیکن شاید یہ جیک سرگرمی کے ضابطے میں کردار ادا کرتا ہے۔ جیک خاندان کے رکن ٹائیک 2 کے میوٹینٹ کے ساتھ تجربات، جس میں سڈو کینیز ڈومین کو حذف کر دیا گیا ہے، سے پتہ چلتا ہے کہ ان میوٹینٹ انزائم میں وٹرو میں اتپریرک سرگرمی کا فقدان ہے اور یہ انٹرفیرون کی ثالثی والے سگنل ٹرانسڈکشن کے قابل نہیں ہے۔ اس کے برعکس، جیک خاندان جیک 2 کا ایک اور متغیر، جس میں بھی چھدم کینیس ڈومین کی کمی تھی، گروتھ ہارمون سگنلنگ میں ثالثی کرنے میں کامیاب رہا۔ جیک ریگولیشن میں سیوڈو کینیز ڈومین کا کردار ابھی تک پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آیا ہے۔ ایکٹیویشن لوپ کے اندر دو ٹائروسین فاسفوریلیشن سائٹس ہیں۔ یہ معلوم ہے کہ ان ٹائروسینوں میں سے پہلے کا آٹوفاسفوریلیشن ٹائروسین کنیز سرگرمی اور حیاتیاتی فعل کی محرک کے لیے اہم ہے، لیکن دوسرے ٹائروسین کا کردار واضح نہیں ہے۔ جے اے کے ایس او سی ایس (سائٹوکائن سگنلنگ کا دبانے والا) پروٹین کے ذریعے بھی منظم کیے جاتے ہیں۔ ان پروٹینوں میں ایک فرضی سبسٹریٹ کی ترتیب ہوتی ہے جس کے بارے میں سوچا جاتا ہے کہ وہ جیک سبسٹریٹ بائنڈنگ اور فاسفوریل ٹرانسفر میں مداخلت کرتا ہے۔ ایک فرضی سبسٹریٹ ترتیب کے علاوہ، ایس او سی ایس پروٹین میں ایک ایس ایچ 2 ڈومین ہوتا ہے جو جیک ایکٹیویشن لوپ میں فاسفوٹائروسین سے جڑا ہوتا ہے، جو فرضی سبسٹریٹ ترتیب اور کینیس ڈومین کے درمیان تعامل کو آسان بنا سکتا ہے۔ ایس ایچ 2 ڈومین کو ایکٹیویشن لوپ سے جوڑنا سبسٹریٹ تک براہ راست رسائی کو روک سکتا ہے یا اتپریرک سرگرمی کو دبانے کے لیے ایکٹیویشن لوپ کی تشکیل کو تبدیل کر سکتا ہے۔ انفیکٹرز غیر رسیپٹر ٹائروسین کینیز کے لیے جین میں تغیر اس انزائم کی غیر معمولی سرگرمی کا نتیجہ ہو سکتا ہے۔ این آر ٹی کے کی یہ روگیاتی طور پر بڑھتی ہوئی سرگرمی کینسر کے خلیوں کی نشوونما اور ترقی، منشیات کے خلاف مزاحمت کی شمولیت، میٹاسٹیسس کی تشکیل اور ٹیومر نیووسکولرائزیشن کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے۔ این آر ٹی کے کی روک تھام ان ٹیومرز کے علاج میں مدد کر سکتی ہے۔ کچھ این آر ٹی کے انابائٹرز کا پہلے ہی کینسر مخالف ایجنٹوں کے طور پر تجربہ کیا جاتا ہے۔ یہ ٹارگیٹڈ تھراپی خلیوں کی ٹیومر کی تبدیلی اور/یا ٹیومر خلیوں کے مہلک فینوٹائپ کی دیکھ بھال میں شامل انٹرا سیلولر عمل کو روکتی ہے۔ عام طور پر مونوکلونل اینٹی باڈیز کا استعمال آر ٹی کے کی ٹارگٹڈ ناکہ بندی کے لیے کیا جاتا ہے، جو ریسیپٹر کے ایکسٹرا سیلولر ڈومین کو بلاک کرتے ہیں اور لگینڈ کے پابند ہونے سے روکتے ہیں۔ تاہم، این آر ٹی کے کی مخصوص ناکہ بندی کے لیے، کم سالماتی وزن والے مادے استعمال کیے جاتے ہیں جنہیں ٹائروسین-کینیز انفیکٹر (ٹی کے آئی) کہا جاتا ہے، جو یا تو انٹراسائٹوسپلاسمیٹک سطح پر ٹرانسڈکشن کاسکیڈ کو روکتے ہیں، یا براہ راست این آر ٹی کے کو روکتے ہیں۔ غیر رسیپٹر ٹائروسین کنیز کی مثالوں میں شامل ہیں: اے بی ایل فیملی اے بی ایل 1 اے آر جی اے سی کے فیملی اے سی کے 1 ٹی این کے 1 سی ایس کے فیملی سی ایس کے میٹک فیک فیملی فیک پی کے 2 ایف ای ایس فیملی ایف آر کے فیملی ایف آر کے بی آر کے ایس آر ایم ایس جیک فیملی جیک 1 جیک 2 جیک 3 ٹی وائی کے 2 ایس آر سی فیملی ایس آر سی ایف جی آر ایف وائی این وائی ای ایس 1 بی ایل کے ایچ سی کے ایل سی کے لین ایس وائی کے فیملی ایس وائی کے زیپ 70 ٹی ای سی فیملی ٹی ای سی بی ایم ایکس بی ٹی کے آئی ٹی کے ٹی ایکس کے حوالہ جات ای سی 2.7.10 معروف ڈھانچے کے انزائم