Anterograde tracing
نیورو سائنس میں، اینٹروگریڈ ٹریسنگ ایک تحقیقی طریقہ ہے جو ان کے ماخذ (سیل باڈی، یا سوما) سے ان کے اختتامی نقطہ (مطابقت پذیری) تک محوری تخمینوں کا سراغ لگانے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ اینٹروگریڈ ٹریسنگ کی ایک پہچان پریسیناپٹک اور پوسٹسیناپٹک نیوران کی لیبلنگ ہے۔ سنپیٹک شگاف کو عبور کرنا اینٹروگریڈ ٹریسروں اور مورفولوجیکل تعمیر نو کے لیے استعمال ہونے والے ڈائی فلرز کے درمیان ایک اہم فرق ہے۔ تکمیلی تکنیک ریٹروگریڈ ٹریسنگ ہے، جو عصبی رابطوں کو ان کے خاتمے سے ان کے منبع تک تلاش کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہے (یعنی۔ سیل باڈی میں مطابقت پذیری)۔ اینٹروگریڈ اور ریٹروگریڈ ٹریسنگ دونوں تکنیکیں محوری نقل و حمل کے حیاتیاتی عمل کے تصور پر مبنی ہیں۔ اینٹروگریڈ اور ریٹروگریڈ ٹریسنگ تکنیک ایک واحد نیوران یا نیوران کی ایک متعین آبادی سے نیورونل پروجیکشنز کی تفصیلی وضاحت کو پورے اعصابی نظام میں ان کے مختلف اہداف تک پہنچانے کی اجازت دیتی ہے۔ یہ تکنیکیں کسی خاص ساخت میں نیوران کے درمیان رابطوں کی "نقشہ سازی" کی اجازت دیتی ہیں (مثال کے طور پر۔ آنکھ) اور دماغ میں ہدف نیوران۔ کنیکشنل نیورواناٹومی کے بارے میں فی الحال جو کچھ معلوم ہے اس میں سے زیادہ تر اینٹروگریڈ اور ریٹروگریڈ ٹریسنگ تکنیک کے استعمال کے ذریعے دریافت کیا گیا تھا۔ تکنیک سوما سے شروع ہونے والے تخمینوں کو ان کے ہدف والے علاقوں کی طرف تلاش کرنے کے لیے کئی طریقے موجود ہیں۔ یہ تکنیکیں ابتدائی طور پر مختلف بصری ٹریسر مالیکیولز کے براہ راست جسمانی انجکشن پر انحصار کرتی تھیں (مثال کے طور پر۔ سبز فلوروسینٹ پروٹین، لیپوفیلک رنگ یا تابکار طور پر ٹیگ شدہ امینو ایسڈ) دماغ میں داخل ہوتے ہیں۔ یہ مالیکیول مختلف نیوران کے سوما (سیل باڈی) کے ذریعے مقامی طور پر جذب ہوتے ہیں اور ایکسن ٹرمینلز میں منتقل ہوتے ہیں، یا وہ ایکسن کے ذریعے جذب ہوتے ہیں اور نیوران کے سوما میں منتقل ہوتے ہیں۔ دیگر ٹریسر مالیکیول ٹریسر کے سامنے آنے والے نیوران سے پھیلے ہوئے ایکسونل پروجیکشن کے بڑے نیٹ ورک کے تصور کی اجازت دیتے ہیں۔ حالیہ برسوں میں وائرل ویکٹرز کو اینٹروگریڈ ٹریسروں کے طور پر تیار اور نافذ کیا گیا ہے تاکہ پیش کردہ نیوران کے ہدف والے علاقوں کی شناخت کی جا سکے۔ متبادل طور پر حکمت عملی ٹرانسسیناپٹک اینٹروگریڈ ٹریسرز ہیں، جو ایک راستے کے اندر متعدد نیوران کو لیبل کرتے ہوئے سنپیٹک پھٹے کو عبور کر سکتے ہیں۔ وہ جینیاتی یا مالیکیولر ٹریسر بھی ہو سکتے ہیں۔ حال ہی میں مینگنیز سے بہتر مقناطیسی گونج امیجنگ (ایم ای ایم آر آئی) کو زندہ دماغوں میں فنکشنل سرکٹس کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا گیا ہے، جیسا کہ رس جیکبز، روبیا پالٹلر، ایلن کوریٹسکی اور ایلین بیئر نے پیش کیا ہے۔ Mn2 + آئن T1 وزن والے MRI میں ایک ہائپر انٹینس سگنل دیتا ہے اور اس طرح ایک برعکس ایجنٹ کے طور پر کام کرتا ہے۔ ایم این 2 + وولٹیج پر منحصر کیلشیم چینلز کے ذریعے داخل ہوتا ہے، اسے انٹرا سیلولر آرگنیلز میں لے جایا جاتا ہے اور اسے کینیسن-1 سمیت اینڈوجینس نیورونل ٹرانسپورٹ سسٹم کے ذریعے منتقل کیا جاتا ہے، جو دور دراز مقامات پر جمع ہوتا ہے۔ ٹائم لیپس امیجز میں ایم این کے جمع ہونے کی شماریاتی پیرامیٹرک میپنگ نہ صرف نیورونل سرکٹری کے بارے میں بلکہ ان کے اندر نقل و حمل کی حرکیات اور دور دراز کے رابطوں کے مقام کے بارے میں بھی تفصیلی معلومات فراہم کرتی ہے۔ یہ نقطہ نظر زندہ جانوروں میں پورے دماغ میں سرکٹری کے بارے میں معلومات فراہم کرتا ہے۔ جینیاتی ٹریسروں (وائرل نیورونل ٹریسنگ بھی دیکھیں) کسی مخصوص علاقے یا خلیے سے تخمینوں کا پتہ لگانے کے لیے، جینیاتی ساخت، وائرس یا پروٹین کو مقامی طور پر انجکشن کیا جا سکتا ہے، جس کے بعد اسے انٹروگریڈلی منتقل کرنے کی اجازت دی جاتی ہے۔ وائرل ٹریسرس مطابقت پذیری کو عبور کر سکتے ہیں، اور بہت سے مطابقت پذیری میں دماغ کے علاقوں کے درمیان رابطے کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ اینٹروگریڈ ٹریسنگ کے لیے استعمال ہونے والے وائرس کی مثالیں کوئپرز نے بیان کی ہیں۔ سب سے زیادہ مشہور ہرپس سمپلیکس وائرس ٹائپ 1 (ایچ ایس وی) اور رابڈو وائرس ہیں۔ ایچ ایس وی کا استعمال دماغ اور معدے کے درمیان رابطوں کا پتہ لگانے کے لیے کیا گیا تھا، تاکہ ویسرو سنسری پروسیسنگ میں شامل دماغ کے علاقوں کی جانچ کی جا سکے۔ ایک اور تحقیق میں نظری راستے کی تحقیقات کے لیے ایچ ایس وی ٹائپ 1 اور ٹائپ 2 کا استعمال کیا گیا: وائرس کو آنکھ میں انجیکشن لگا کر، ریٹنا سے دماغ میں جانے والے راستے کا تصور کیا گیا۔ وائرل ٹریسروں میں میزبان خلیے پر ایک رسیپٹر کا استعمال اس سے منسلک ہونے کے لیے کیا جاتا ہے اور پھر اسے اینڈوسیٹوز کیا جاتا ہے۔ مثال کے طور پر، ایچ ایس وی نیکٹن رسیپٹر کا استعمال کرتا ہے اور پھر اسے اینڈوسیٹوز کیا جاتا ہے۔ اینڈوسیٹوسس کے بعد، پھپھوندی کے اندر کم پی ایچ وائرین کے لفافے کو کاٹ دیتا ہے جس کے بعد وائرس خلیے کے جسم میں منتقل ہونے کے لیے تیار ہوتا ہے۔ یہ دکھایا گیا کہ ایچ ایس وی کے لیے سیل کو متاثر کرنے کے لیے پی ایچ اور اینڈوسیٹوسس اہم ہیں۔ محور کے ساتھ وائرل ذرات کی نقل و حمل مائیکرو ٹیوبلر سائٹوسکیلیٹن پر منحصر دکھائی گئی۔ سالماتی ٹریسروں کا ایک گروپ بھی ہوتا ہے جو پروٹین کی مصنوعات پر مشتمل ہوتا ہے جسے خلیے کے ذریعے لیا جا سکتا ہے اور مطابقت پذیری کے پار اگلے خلیے میں منتقل کیا جا سکتا ہے۔ گندم کے جراثیم کے ایگلوٹینن (ڈبلیو جی اے) اور فیزولس ولگرس لیوکواگگلوٹینن سب سے زیادہ معروف ٹریسروں ہیں، تاہم وہ سخت اینٹروگریڈ ٹریسروں نہیں ہیں: خاص طور پر ڈبلیو جی اے کو اینٹروگریڈلی کے ساتھ ساتھ ریٹروگریڈلی بھی منتقل کیا جاتا ہے۔ ڈبلیو جی اے اولیگوساکرائڈز کے پابند ہو کر خلیے میں داخل ہوتا ہے، اور پھر کیوولی پر منحصر راستے کے ذریعے اینڈوسیٹوسس کے ذریعے لیا جاتا ہے۔ نیورواناٹومی میں بڑے پیمانے پر استعمال ہونے والے دیگر اینٹروگریڈ ٹریسروں میں بائیوٹینیلیٹڈ ڈیکسٹرین امینز (بی ڈی اے) ہیں، جو ریٹروگریڈ ٹریسنگ میں بھی استعمال ہوتے ہیں۔ اس تکنیک کا استعمال کرتے ہوئے مطالعات کی جزوی فہرست اینٹروگریڈ ٹریسنگ تکنیک اب ایک وسیع تر تحقیقی تکنیک ہے۔ درج ذیل مطالعات کی جزوی فہرست ہے جس میں اینٹروگریڈ ٹریسنگ تکنیک کا استعمال کیا گیا ہے: تالی، ایم، رچ مین، ای بی، سنیل، این جے، ہارٹ مین، جی جی، فشر، جے ڈی، سورکاک، اے، سینٹویو، جے ایف، چو فریڈ، سی، نائر، این، جانسن، ایم، زیمنسکی، جے آر، اور بارنیہ، جی۔ (نومبر 2017)۔ ٹرانس ٹینگو کے ذریعہ مکھی میں دوسرے درجے کے ذائقہ والے نیوران کی ٹرانسسیناپٹک نقشہ سازی۔ نیوران، 96 (4)، 783-795.e4۔ https://doi.org/10.1016/j.neuron.2017.10.011 یہ بھی دیکھیں کہ ریٹروگریڈ ٹریسنگ وائرل نیورونل ٹریسنگ حوالہ جات لیبارٹری تکنیک