TMEM211
ٹرانس میمبرین پروٹین 211 (ٹی ایم ای ایم 211، bA9F11.1، کیو 6 آئی سی آئی 0، ایل ایچ ایف ایل پی 7) ایل ایچ ایف پی ایل ذیلی خاندان کے تحت ایک ٹیٹرا اسپین جھلی پروٹین ہے۔ یہ بنیادی طور پر آواز کے ادراک میں ایک کردار ادا کرتا ہے لیکن انسولین سگنلنگ میں ثانوی کردار ادا کر سکتا ہے۔ یہ TMEM211 جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے اور تقریبا تمام جانوروں میں پایا جاتا ہے۔ اظہار اور لوکلائزیشن ہیومن ٹی ایم ای ایم 211 آر این اے کا اظہار نسبتا کم سطحوں میں ہوتا ہے، لیکن یہ دماغ، پیٹ، پھیپھڑوں، سینوں، اعضاء، پروسٹیٹ، ٹریکیا اور تھوک غدود کے بافتوں میں واضح اسپائکس ظاہر کرتا ہے۔ جنین میں، TMEM211 RNA دوبارہ دماغ اور پیٹ میں ظاہر ہوتا ہے، لیکن آنتوں میں بھی ظاہر ہوتا ہے۔ TMEM211 جلد میں بھی ظاہر ہونے کے لیے جانا جاتا ہے، غیر سورج سے بے نقاب جلد کے مقابلے میں سورج سے بے نقاب جلد میں نمایاں طور پر زیادہ مقدار میں، اور ٹرپل منفی چھاتی کے کینسر میں حد سے زیادہ ظاہر ہوتا ہے۔ صحت مند کتوں کے بافتوں کے مجموعے میں، ٹی ایم ای ایم 211 نے پینکریاز میں سب سے زیادہ اظہار ظاہر کیا (شکل 1)۔ پینکریاز کے اندر، ٹی ایم ای ایم 211 لینجرہانس کے جزیروں میں انتہائی متعصبانہ کثرت کو ظاہر کرتا ہے، اور دیگر پینکریٹک ٹشو سے غیر حاضر ہے (شکل 2)۔ ٹی ایم ای ایم 211 اپنے چار ٹرانس میمبرین ہیلیکس کے نتیجے میں پلازما جھلی میں مقامی ہے۔ بچہ دانی، بیضہ دانی اور ماں کے دودھ میں پروٹین کی لوکلائزیشن کے باوجود، رجونورتی خواتین کو ایسٹراڈیول کی زبانی انتظامیہ TMEM211 کے اظہار کی سطح میں کوئی اہم تبدیلی پیدا نہیں کرتی ہے۔ تاہم، اس نے نمونوں کے درمیان ٹی ایم ای ایم 211 کی تغیر پذیری کو نمایاں طور پر کم کر دیا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ایسٹروجن ٹی ایم ای ایم 211 پر کنٹرول کرنے والا اثر ڈالتا ہے، ممکنہ طور پر ایک بالواسطہ طریقہ کار (شکل 3) کے ذریعے۔ ٹی ایم ای ایم 211 کو موٹے افراد میں اعلی سطح پر بھی ظاہر کیا گیا تھا (شکل 4)۔ اس نتیجے کی وضاحت اس نتیجے سے کی جا سکتی ہے کہ موٹاپا، خاص طور پر غیر ذیابیطس موٹاپا، لینگرہانس کے جزیروں کے حجم اور تعداد دونوں میں اضافے سے منسلک ہے۔ اسی طرح الزائمر کے مریضوں نے غیر الزائمر کے افراد کے مقابلے میں زیادہ TMEM211 کا اظہار کیا، جیسا کہ مردوں کے مقابلے میں خواتین نے کیا (شکل 5)۔ ترجمہ اور ہم جنس پرستی شکل 6 TMEM211 انسانی پروٹین کی ترتیب کے دلچسپی کے منتخب علاقوں کو ظاہر کرتی ہے۔ خاص طور پر، یہ ٹرانس میمبرین کے علاقوں اور ایکسون کی حد کے مقام اور موجودگی کو ظاہر کرتا ہے۔ آر این اے نقل چار ایکسون سے بنا ہے، لیکن ان میں سے صرف دو ایکسون کوڈنگ ترتیب پر مشتمل ہیں۔ منفرد طور پر، پروٹین میں دو اسٹارٹ کوڈن ہوتے ہیں، یہ دونوں ترجمہ شروع کر سکتے ہیں اور پروٹین کی مصنوعات کی طرف لے جا سکتے ہیں۔ یہ TMEM211 آئسوفارم کی بنیادی وجہ ہے۔ آرتھولوج اسپیس TMEM211 جانوروں کی اکثریت پرجاتیوں میں موجود ہے، لیکن جانوروں سے باہر موجود نہیں ہے (شکل 7)۔ حیاتیات کا سب سے قدیم گروہ جہاں جین ہر جگہ پایا جاتا ہے وہ انیمون ہے، جو 824 ملین سال پہلے انسانوں سے الگ ہوا تھا۔ یہ جین ان حیاتیات میں نہیں پایا جاتا جو 93.4 ملین سال پہلے جدا ہوئے تھے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ یہ جین 824 سے 93.4 ملین سال پرانا ہے۔ ارتقاء کے بعد، یہ جین پھر مچھلیوں، آبی حیات، رینگنے والے جانوروں، پرندوں اور ممالیہ جانوروں میں پایا جاتا ہے۔ تاہم، اظہار کے مختلف نمونوں کے ساتھ ایک کلاڈ ہے، آرتھروپوڈز۔ یہ جین آسانی سے کرسٹشین میں پایا جاتا ہے، لیکن دوسرے تمام آرتھروپوڈز سے غائب ہے۔ نامعلوم وجوہات کی بناء پر، سمندری آرتھروپوڈز TMEM211 جین کو برقرار رکھتے ہیں جبکہ زمینی آرتھروپوڈز نے اسے کھو دیا ہے۔ اس میں ایک ممکنہ رعایت ہے، وائٹ بٹر فلائی پیراسائٹ۔ یہ جین BLAST کے ذریعہ انسانی TMEM211 کی تلاش کرتے وقت پایا جاتا ہے، اور وائٹ بٹر فلائی پیراسائٹ کے TMEM211 تسلسل کی تلاش نے دوسرے پرجیوی ویرپس میں نتائج واپس کیے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ یہ ممکنہ طور پر ترتیب یا آلودگی کی غلطی نہیں تھی۔ ہو سکتا ہے کہ اس چھوٹے کلڈ نے جین کو محفوظ رکھا ہو جبکہ باقی زمینی آرتھروپوڈز نے اسے کھو دیا ہو۔ تاہم، اس کلاڈ کے اندر پائے جانے والے ٹی ایم ای ایم 211 جین انسانوں سے یکساں آبائی فاصلے کے ساتھ ہر دوسرے جاندار سے نمایاں طور پر کم ملتے جلتے ہیں۔ اگرچہ یہ جین ایک آرتھولوج ہو سکتا ہے، لیکن یہ بھینسوں کے اس گروپ کے لیے ایک نیا کام بھی کر سکتا ہے، یہی وجہ ہے کہ اس کلاڈ نے جین کو برقرار رکھا جبکہ دوسرے کیڑوں نے اسے کھو دیا۔ یہ اعلی فیصد انحراف کی بھی وضاحت کرے گا۔ اسی طرح، یہ ممکن ہے کہ یہ گروپ جین کا اظہار نہ کرے، جس کا مطلب یہ ہو کہ کوئی بھی ارتقائی قوتیں اس کی تغیر کے خلاف کام نہ کریں، جس سے یہ ان حیاتیات کے مقابلے میں تیزی سے تبدیل ہو سکے جہاں جین کو فعال پروٹین کے لیے ٹیمپلیٹ کے طور پر کام کرنا چاہیے۔ آخر میں، یہ ثابت ہوا ہے کہ کیٹرپلر پرجاتیوں جس پر ویرپس کا یہ گروپ شکار کرتا ہے وہ ایک اینٹوموپیتھجینک دفاعی طریقہ کار کا استعمال کرتا ہے۔ یہ وائرس کیٹرپلر کو بیماری کا سبب نہیں بنتا، لیکن بھاپ کے انڈوں اور بھاپ کے لاروا کو متاثر کرتا ہے اور افقی جین کی منتقلی کا سبب بنتا ہے۔ یہ آسانی سے قابل فہم ہے کہ ٹی ایم ای ایم 211 جین ان وائرسوں میں سے کسی ایک کے ذریعہ ویرپس کے اس ذیلی سیٹ کو دیا گیا تھا۔ پھر، چونکہ جین مصنوعی طور پر جینوم میں بنایا گیا تھا اور یہ کسی حقیقی مقصد کی تکمیل نہیں کرتا ہے، اس لیے یہ آزادانہ طور پر تبدیل ہوتا ہے، جس کی وجہ سے مشاہدہ شدہ انحراف ہوتا ہے جو توقع سے زیادہ ہوتا ہے۔ اس وضاحت کی تائید اس حقیقت سے ہوتی ہے کہ پروٹین کے دو حصوں کو الگ کرنے والا انٹرن غائب ہے۔ متبادل طور پر، BLAST کا نتیجہ گمراہ کن ہو سکتا ہے، اور جسے TMEM211 کے طور پر نشان زد کیا گیا ہے وہ دراصل متوازی LHFPL خاندان کا ایک رکن ہے، جو بھینسوں اور کیٹرپلرز دونوں میں پایا جاتا ہے، اور اس میں وہ اراکین بھی شامل ہیں جو TMEM211 انٹرن کا اشتراک نہیں کرتے ہیں۔ ترتیب کی صف بندی دور دراز کے آرتھولوگس کا ایم ایس اے کئی محفوظ علاقوں پر روشنی ڈالتا ہے (شکل 8)۔ تاہم، انسانی جین اس تحفظ کی اکثریت میں حصہ نہیں لیتا، اور نہ ہی دوسرے ممالیہ جانور۔ یہ ماں کے دودھ میں پروٹین کی موجودگی کے مطابق ہے ؛ غیر ممالیہ پرجاتیوں میں ماں کا دودھ نہیں ہوتا ہے، اور اس طرح پروٹین کے ممالیہ اور غیر ممالیہ میں قدرے مختلف افعال ہو سکتے ہیں۔ زیادہ تر پروٹین کی شناخت جو مماثل پائی جاتی ہے بکھرے ہوئے دکھائی دیتی ہے، لیکن سب سے زیادہ تحفظ کا ایک واضح خطہ ہے۔ انسانوں میں، یہ خطہ امینو ایسڈ 132-150 پر پھیلا ہوا ہے۔ انسانوں کے اشتراک سے اعلی تحفظ والے دیگر دو خطوں میں امینو ایسڈ 59-71 اور 110-117 ہیں۔ تمام انواع میں مکمل تحفظ کے ساتھ صرف چھ امینو ایسڈ ہیں، سیس 27، گلی 65، جی ایل این 100، پرو 115، سیس 127، سیس 138۔ مکمل طور پر محفوظ امینو ایسڈ میں سے نصف سسٹین ہوتے ہیں، اس طرح سسٹین کا سلف ہائیڈریل گروپ اور ڈائیسلفائیڈ برج اور کوولینٹ بانڈ بنانے کی صلاحیت پروٹین کی ساخت اور/یا فنکشن کے لیے اہم ہو سکتی ہے۔ مجموعی طور پر، انسانی ترتیب کے حوالے سے سب سے زیادہ تحفظ والے امینو ایسڈ ٹائروسین (81 ٪) اور ٹرپٹوفین (72 ٪) ہیں۔ یہ دو امینو ایسڈ ٹرانس میمبرین پروٹین کے لیے اہم ہیں کیونکہ وہ سیل کے اندر یا باہر ہائیڈروفوبک جھلی اور آبی ماحول دونوں کے ساتھ تعامل کر سکتے ہیں، اور اس طرح، یہ منطقی ہے کہ یہ امینو ایسڈ انتہائی محفوظ ہیں۔ ممالیہ جانوروں کی صف بندی کو دیکھتے ہوئے، پروٹین کی اکثریت محفوظ ہے (شکل 9)۔ در حقیقت، ہر وہ پروٹین جو مکمل طور پر غیر محفوظ ہے جھلی کے اندر سرایت شدہ پایا جاتا ہے، جہاں عین شناخت ممکنہ طور پر پروٹین کے کام کے لیے کم اہمیت رکھتی ہے۔ یہ نمونہ آرتھولوگس کے وسیع تر ایم ایس اے میں درست رہتا ہے، جہاں کم سے کم تحفظ کے علاقے زیادہ تر جھلی کے اندر ہوتے ہیں۔ اس تحفظ کو برقرار رکھتے ہوئے، ٹی ایم ای ایم 211 نے اسے لے جانے والے حیاتیات کے ساتھ ارتقا اور تغیر کیا ہے۔ ہر جاندار کے جین کا انحراف عام فائیلوجینی کی پیروی کرتا ہے (شکل 10)۔ محفوظ علاقے ایسے شواہد موجود ہیں جن سے پتہ چلتا ہے کہ ٹرانس میمبرین کے حصے پروٹین کے دوسرے حصوں کے مقابلے میں کم حد تک محفوظ ہیں، اس تصور کی تائید ان علاقوں میں چھوٹے، غیر قطبی امینو ایسڈ کے بار بار تبادلے سے ہوتی ہے۔ اس مفروضے کی جانچ کرنے کے لیے، پروٹین کے اندر ہر پوزیشن کے لیے شینن متغیر بٹس کا حساب لگایا گیا (شکل 11)۔ اگرچہ یہ ارتباط واقعتا مشاہدہ کیا گیا ہے، لیکن یہ رشتہ اتنا اچھا نہیں ہے کہ حتمی ہو۔ شینن بٹس کا استعمال کرتے ہوئے، شکل 12 تشریح شدہ تصوراتی ترجمہ کو ایک تشریح شدہ نمائندگی میں تبدیل کرتی ہے جو تین جہتی جگہ میں محفوظ علاقوں اور امینو ایسڈ کی قربت کو بہتر طور پر اجاگر کرتی ہے۔ پہلے اور تیسرے محفوظ علاقے پروٹین کے ایکسٹرا سیلولر سائیڈ پر ایک دوسرے سے متصل واقع ہیں، ممکنہ طور پر ایک فعال سائٹ بناتے ہیں۔ ٹرانس میمبرین ڈومینز کی واقفیت بھی کئی سسٹین کو قریب قریب لاتی ہے، جس سے وہ ڈائیسلفائیڈ پل تشکیل دے سکتے ہیں۔ پیرالاگ انسانی جینوم کے اندر انسانی TMEM211 ترتیب کا ایک بلاسٹ استفسار کوئی نتیجہ نہیں دیتا ہے۔ ایسا لگتا ہے کہ یہ اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ انسانوں کے پاس کوئی متوازی نہیں ہے۔ تاہم، غیر ممالیہ TMEM211 ترتیبات کو سوالات کے طور پر جمع کرنا ہومو سیپینز لیپوما ہائی موبلٹی گروپ I C پروٹین فیوژن پارٹنر جیسے ٹیٹراسپین ذیلی خاندان کے رکن 3 پروٹین آئسوفارم 2 (LHFPL3) کو واپس کرتا ہے۔ مزید برآں، ان حیاتیات کے جینوم کے اندر تلاش کرنے والے غیر ممالیہ TMEM211 سلسلے کے BLAST سوالات LHFPL خاندان کے اندر متعدد نتائج فراہم کرتے ہیں۔ یہ پروٹین اس حقیقت میں ٹی ایم ای ایم 211 سے ملتا جلتا ہے کہ یہ ایک ٹیٹراسپین جھلی پروٹین ہے۔ اس بات کا اندازہ کرنے کے لیے کہ آیا یہ چار ٹرانس میمبرین علاقے اعلی مماثلت کی وجہ ہیں، انسانی ٹی ایم ای ایم 211 اور انسانی ایل ایچ ایف پی ایل 3 کے درمیان ایک عالمی صف بندی بنائی گئی تھی (شکل 13)۔ مماثلت ٹرانس میمبرین علاقوں تک محدود نظر نہیں آتی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ یہ دونوں پروٹین متوازی ہو سکتے ہیں۔ مزید برآں، ٹی ایم ای ایم 211 آرتھولوگس میں مکمل طور پر محفوظ 6 میں سے 4 امینو ایسڈ ٹی ایم ای ایم 211 اور ایل ایچ ایف پی ایل 3 کے درمیان سیدھے ہوتے ہیں، اس ثبوت کو آگے بڑھاتے ہوئے کہ یہ پروٹین متوازی ہیں (پی <. 01)۔ ایل ایچ ایف پی ایل خاندان معروف فنکشن کا حامل ہے۔ خاندان کے اراکین دماغ میں پروٹین کے پابند ہونے میں مدد کرتے ہیں اور آواز کے ادراک کے لیے اہم ہوتے ہیں۔ ان خاندان کے افراد میں ناک آؤٹ یا فنکشن میوٹیشن کا نقصان انسانوں اور چوہوں میں مکمل یا جزوی بہرا پن کا سبب بنتا ہے جو پھر آٹوسومل ریسیسیو پیٹرن میں وراثت میں ملتا ہے۔ ایل ایچ ایف پی ایل میں دیگر تغیرات کو ٹیومر، آٹزم، الزائمر اور دیگر اعصابی حالات سے جوڑا گیا ہے۔ ٹی ایم ای ایم 211 میں محفوظ سسٹین کے باقیات اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ یہ ٹی ایم ای ایم 211 کے لیے بھی ایک ممکنہ فعل ہو سکتا ہے۔ محفوظ علاقے جو تین جہتی جگہ میں صف بندی کرتے ہیں وہ ایک بائنڈنگ سائٹ تشکیل دے سکتے ہیں جو سبسٹریٹس کو پہچاننے اور باندھنے کے لیے محفوظ سسٹین کے باقیات کا استعمال کرتا ہے۔ ٹی ایم ای ایم 211 کی طرح، ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے افراد دماغ اور تھوک غدود میں متعصبانہ اظہار ظاہر کرتے ہیں۔ ایل ایچ ایف پی ایل کو پینکریاز میں ظاہر نہیں کیا گیا تھا، لیکن مذکورہ بالا بحث کے مطابق، پینکریٹک نمونوں سے لینجرہانس کے جزیروں کو خارج کرنا اس نتیجے کا باعث بنے گا۔ ایل ایچ ایف پی ایل آر این اے، جیسے ٹی ایم ای ایم 211، جی آئی ٹریکٹ، گردے، پروسٹیٹ، تائیرائڈ اور جنسی اعضاء میں نچلی سطح پر موجود تھا۔ ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے افراد کا ٹی ایم ای ایم 211 سے زیادہ مطالعہ کیا گیا ہے، اور پروٹین کی کثرت کے اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ خاندان کا ہر فرد، ایل ایچ ایف پی ایل 2 کے استثناء کے ساتھ، دماغ میں صحت مند بافتوں میں اپنی سب سے زیادہ کثرت کی سطح ظاہر کرتا ہے۔ اگرچہ اب بھی دماغ کے بافتوں میں دماغ کے دیگر پروٹینوں کی اکثریت کے مقابلے میں زیادہ تعداد میں پایا جاتا ہے، ایل ایچ ایف پی ایل 2 پلیٹلیٹس میں کثرت ظاہر کرتا ہے جو 60 گنا زیادہ ہے، پلیٹلیٹ پروٹین کے سب سے اوپر 10 ٪ میں۔ خاندان کے ہر فرد نے پھیپھڑوں کے کینسر کے خلیوں کی لکیروں میں بھی بہت زیادہ کثرت کا مظاہرہ کیا، جیسا کہ ٹی ایم ای ایم 211 نے کیا۔ کئی ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے افراد بھی ماں کے دودھ میں پائے گئے، لیکن ٹی ایم ای ایم 211 سے بہت کم مقدار میں۔ سماعت اور آواز کے ادراک کے ساتھ وابستگی کے باوجود، نہ تو ٹی ایم ای ایم 211 یا ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کا کوئی فرد تھیلمس، عارضی لوب، یا صوتی پرانتستا کے لیے متعصبانہ لوکلائزیشن کا نمونہ ظاہر کرتا ہے۔ فائبرینوجن الفا کو تیزی سے تیار ہونے والا پروٹین سمجھا جاتا ہے، جبکہ سائٹوکروم سی آہستہ آہستہ تیار ہونے والے پروٹین کا نمونہ ہے۔ ٹی ایم ای ایم 211 کے درست انحراف کے لیے لکیری ٹرینڈ لائن سائٹوکروم سی (شکل 14) کے مقابلے میں فائبرینوجن الفا چین کے قریب ہے۔ خود اعداد و شمار کو دیکھتے ہوئے، ٹی ایم ای ایم 211 اور فائبرینوجن الفا چین پچھلے 400 ملین سالوں میں تقریبا ایک ہی شرح سے الگ ہو چکے ہیں۔ اس طرح، ٹی ایم ای ایم 211 بھی تیزی سے بدلتا ہوا پروٹین ہے۔ یہ پہلے مشاہدہ کیے گئے نمونوں کی وجہ سے ہو سکتا ہے، جہاں جھلی کے اندر پروٹین کے حصوں کو بڑی آزادی کے ساتھ تبدیل کرنے کی اجازت دی جاتی ہے۔ یہ بھی ممکن ہے کہ 200 ملین سال پہلے پہلے ممالیہ کے عروج کے ساتھ انحراف میں تیزی آئی ہو، یہ فرض کرتے ہوئے کہ ماں کے دودھ میں پروٹین کا وجود مختلف افعال کی نشاندہی کرتا ہے۔ آخر میں، انسانی ایل ایچ ایف پی ایل 3 جین انسانی ٹی ایم ای ایم 211 کے ساتھ 17.8% شناخت کا اشتراک کرتا ہے، جو 173% کے درست انحراف سے مطابقت رکھتا ہے۔ یہ انحراف انیمون کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے، جو کہ TMEM211 جین کا اشتراک کرنے والا سب سے دور انسانی آباؤ اجداد ہے، جس کی توقع کی جائے گی اگر دونوں جین ایک ہی آباؤ اجداد کے جین سے پیدا ہونے والے متوازی ہوں۔ ایل ایچ ایف پی ایل کی انحراف کی تاریخ کی پیش گوئی کرنے کے لیے ٹرینڈ لائن کا استعمال کرنے سے 634-903 میا (95 فیصد اعتماد کا وقفہ) کا تخمینہ لگایا جاتا ہے۔ یہ ملین سال پہلے TMEM211 جین 824-934 کے ظہور کی تخمینہ شدہ حد کو اوورلیپ کرتا ہے، اس خیال کی حمایت کرتا ہے کہ یہ دونوں متوازی ہیں۔ ٹرانسکرپشن پروموٹر TMEM211 کو GXP _ 6044388 پروموٹر (شکل 15) کے کنٹرول میں سمجھا جاتا ہے۔ GXP _ 6044388 پروموٹر وسیع پیمانے پر پرجاتیوں میں پایا جاتا ہے، اور تحفظ کے الگ الگ علاقوں کو برقرار رکھتا ہے (شکل 16)۔ انسانوں میں، اس پروموٹر اور ٹی ایم ای ایم 211 آر این اے ٹرانسکرپٹ کے پہلے ایکسن کے درمیان 40 بیس جوڑی اوورلیپ ہوتی ہے، حالانکہ یہ ایکسن نتیجے میں پروٹین کی ترتیب میں براہ راست حصہ نہیں ڈالتا ہے۔ پروموٹر دوسرے جینوں کے اتنے قریب ظاہر نہیں ہوتا ہے کہ وہ TMEM211 کے علاوہ کسی اور چیز کے اظہار کو متاثر کر سکے۔ اس پروموٹر ترتیب کے لیے آرتھولوگس TMEM211 آرتھولوگس سے پہلے بہت سی انواع میں پائے جاتے ہیں۔ کروموسوم 5,6,7، 13,14,15، 16,17,18، 19,20، اور Y پر پائے جانے والے GXP _ 6044388 پروموٹر تسلسل کے ساتھ اعلی مشترکہ شناخت کے ساتھ سلسلے موجود ہیں، حالانکہ ان میں سے بہت سے سلسلے دوسرے جینوں کے قریب واقع نہیں ہیں اور ان کا اظہار نہیں کیا جا سکتا ہے۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ جی ایکس پی _ 6044388 ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے اراکین کے 6 پروموٹروں کے ساتھ اوسط 43.83 ٪ شناخت کا اشتراک کرتا ہے۔ یہ مشترکہ شناخت اس نتیجے پر پہنچنے کے لیے کافی ہے کہ یہ پروموٹر ہم جنس پرست ہیں۔ ٹرانسکرپشن کے عوامل FEZF1.02 اور VDR_RXR.03 TMEM211 جین کے اظہار کو کنٹرول کرنے کے لیے سب سے زیادہ ممکنہ امیدوار ہیں۔ FEZF1.02 کو ممکنہ امیدوار کے طور پر منتخب کیا گیا تھا کیونکہ یہ دماغ کے لیے مخصوص ہونے والا واحد شناخت شدہ ممکنہ نقل عنصر تھا، جہاں TMEM211 کو اظہار کے دیگر مقامات کے مقابلے میں زیادہ مقدار میں ظاہر کیا جاتا ہے۔ FEZF1.02 نقل کو بڑھاتا ہے، اور VDR_RXR.03 کے سامنے باندھتا ہے، جو ایک ہیٹروڈائمر ٹرانسکرپشنل کو ایکٹیویٹر ہے جو کیلسیٹریول پر منحصر ہے۔ کیلسیٹریول وٹامن ڈی کی ایک شکل ہے جو جزوی طور پر سورج کی روشنی کے جواب میں جلد میں پیدا ہوتی ہے، جو سورج سے بے نقاب جلد کے مقابلے سورج سے بے نقاب جلد میں ٹی ایم ای ایم 211 کے اعلی اظہار کی وضاحت کرے گی۔ مزید برآں، کیلسیٹریول کی پیداوار کا بنیادی مقام گردہ ہے، جسے ایک ہارمون کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے جو تائیرائڈ غدود کو اشارہ کرتا ہے، اور یہ دونوں مقامات TMEM211 اظہار کے اعلی ترین علاقوں میں سے تھے۔ کیلسیٹریول دودھ پلانے والی ماؤں سے بھی ماؤں کے دودھ میں منتقل ہوتا ہے۔ مزید برآں، ایسٹروجن کی زبانی انتظامیہ کو استعمال شدہ کیلسیٹریول کی حیاتیاتی دستیابی میں اضافہ کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے، اور یہ گردش میں کیلسیٹریول کی اعلی سطح کی طرف لے جاتا ہے۔ اس طرح، VDR_RXR.03 TMEM211 اظہار پر زبانی ایسٹروجن انتظامیہ کے اثرات کی وضاحت کر سکتا ہے۔ کیلسیٹریول بھی ایک انو ہے جس پر مناسب کام کے لیے پھیپھڑوں کا انحصار ہوتا ہے۔ آخر میں، ٹی ایم ای ایم 211 نے پینکریٹک ٹشو میں لینجرہانس کے جزیروں میں لوکلائزیشن کا ایک انتہائی نمونہ دکھایا۔ پینکریٹک بیٹا خلیات کیلسیٹریول سگنلنگ میں حصہ لینے کے لیے جانے جاتے ہیں، جو لینجرہانس کے جزیروں سے انسولین کے سراو میں اضافے اور سیلولر تناؤ کے خلاف مزاحمت میں اضافے کے ساتھ جواب دیتے ہیں۔ مجموعی طور پر، VDR_RXR.03 اکیلے ہی TMEM211 اظہار اور لوکلائزیشن کی اکثریت کی وضاحت کر سکتا ہے۔ یہ بھی دلچسپ ہے کہ کیلسیٹریول علاج سے ایل ایچ ایف پی ایل آر این اے کے اظہار میں اضافہ ہوا ہے۔ ایم آر این اے ٹی ایم ای ایم 211 کا 5 'یو ٹی آر کوڈنگ ترتیب (شکل 17) سے کم حد تک محفوظ کیا گیا ہے۔ 3 'یو ٹی آر بالکل محفوظ نہیں ہے، اس حد تک کہ BLAST دیگر آرتھولوگس ترتیبات کا پتہ نہیں لگا سکتا۔ اس کی وجہ یہ ہو سکتی ہے کہ 3 'یو ٹی آر تھرموڈینامک طور پر سازگار نہیں ہے، اور ہر نوع کے اندر بہت سی ممکنہ تشکیلات ہیں۔ اس طرح، نوٹ کے صرف ساختی عناصر 5 'یو ٹی آر میں موجود ہیں۔ ایم آر این اے میں ایک مستحکم، انتہائی محفوظ اسٹیم لوپ موجود ہوتا ہے جو ترجمہ کے آغاز کے قریب واقع ہوتا ہے جو ترجمہ میں رکاوٹ بن سکتا ہے، یا، اس کے برعکس، ابتدائی عوامل یا نقل و حمل کے پروٹین سے پہچانا جا سکتا ہے (شکل 18، بائیں)۔ ایک ساختی عنصر ہے جو ترتیب اور ساخت دونوں میں آرتھولوگس میں محفوظ ہے، ملحقہ، انتہائی مستحکم اسٹیم لوپس کا ایک جوڑا (شکل 18، درمیانی)۔ یہ ڈھانچہ لکیری ترتیب کے ساتھ دیگر مقامات سے بہت دور واقع ہے، لیکن اسے ٹرانسپورٹ پروٹین یا سگنلنگ راستوں سے پہچانا جا سکتا ہے۔ آخر میں، 5 'یو ٹی آر کے 5' سرے پر ایک کم مستحکم اسٹیم لوپ موجود ہے (شکل 18، دائیں)۔ اگرچہ یہ اسٹیم لوپ دیگر ساختی عناصر کے مقابلے میں کم مستحکم ہے، لیکن لوپ کی ترتیب اور ساخت خود ہی آرتھولوگس میں مکمل طور پر محفوظ ہے، بشمول سائٹوسین جو اسٹیم سے باہر نکلتی ہے۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ یہ ڈھانچہ کچھ پروٹین سے پہچانا اور جڑا ہوا ہے، جہاں اس کے بعد تنے کے ساتھ بیس جوڑی کی نچلی سطح ساخت کو آسانی سے ختم کرنے کی اجازت دے گی اور ایم آر این اے کو پروٹین سے جڑا رہنے دے گی۔ در حقیقت، محفوظ اور بے نقاب لوپ کو MEIS1.01 کے ذریعہ ایک بائنڈنگ سائٹ کے طور پر تسلیم کیا جاتا ہے، جو ایک ہومیو باکس پروٹین ہے جو نیورل کرسٹ ڈویلپمنٹ اور نیورل تفریق میں شامل ہے۔ مزید برآں، ایم ای آئی ایس 1 کی کمی چوہوں میں سماعت کے نقصان کا سبب بنتی ہے، جس کا نتیجہ ایل ایچ ایف پی ایل پیرالاگس کے کام کرنے سے محروم ہونے پر بھی دیکھا جاتا ہے۔ ساخت اندرونی تکرار TMEM211 کے اندر صرف دو مقامی صف بندی ہیں جو مثبت اسکور پیدا کرتی ہیں (شکل 19)۔ ان میں سے کوئی بھی صف بندی متاثر کن طور پر ایک جیسی نہیں ہے، اور ممکنہ طور پر بے ترتیب موقع کا نتیجہ ہے۔ اس برطرفی کی تائید اس حقیقت سے ہوتی ہے کہ ان میں سے کوئی بھی تکرار دوسرے جانوروں میں محفوظ نہیں ہے۔ ساخت انسانی ٹی ایم ای ایم 211 کا سالماتی وزن 20.4 کے ڈی اور آئسو الیکٹرک پوائنٹ 9.64 ہے۔ یہ میگاواٹ اوسط انسانی پروٹین سے چھوٹا ہے، جبکہ پی آئی انسانی پروٹین کے اوسط پی آئی (6.5) سے کہیں زیادہ ہے، لیکن پھر بھی ٹرانس میمبرین پروٹین کے لیے معمول کی حد میں ہے۔ اس بلند پی آئی کے باوجود چارج کا کوئی کلسٹر نہیں ہے۔ پروٹین کی ترتیب اس کی امینو ایسڈ کی ساخت میں اوسط انسانی پروٹین سے نمایاں طور پر ہٹتی نہیں ہے (شکل 20)۔ انسانی TMEM211 پروٹین کی ترتیب کا ساختی عناصر، ڈومینز اور لوکلائزیشن کی معلومات تلاش کرنے کے لیے متعدد سافٹ ویئر کے ذریعے تجزیہ کیا گیا ہے۔ چار ٹرانس میمبرین ڈومینز کی موجودگی کی تصدیق پی ایس او آر ٹی II، یوکیریوٹک لکیری موٹف، اور انٹرپرو نے کی۔ ان سافٹ ویئر نے جھلی کے اندر پروٹین کی واقفیت اور اس کی لوکلائزیشن کی بھی تصدیق کی۔ مزید برآں، پی ایس او آر ٹی II اور پروزائٹ نے پوزیشن 56 سے شروع ہونے والے لیوسین زپر پیٹرن کی نشاندہی کی۔ خاص طور پر، مائی ہٹس موٹیف اسکین نے ایک ڈومین کی نشاندہی کی جو ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے ساتھ مشترکہ پوزیشنوں 100-157 پر پھیلا ہوا ہے۔ اسی طرح، موٹیف فائنڈر نے بھی ٹی ایم ای ایم 211 اور ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے درمیان مشترکہ ڈومین کی اطلاع دی، حالانکہ اس نے اس مشترکہ علاقے کو پوزیشنوں 53-158 تک بڑھایا۔ اس توسیع میں اب پہلے سے شناخت شدہ لیوسین زپر پیٹرن شامل ہے۔ ترجمہ کے بعد کی تبدیلیاں ترجمہ کے بعد کی ترمیم کی سائٹس تلاش کرنے کے لیے متعدد سافٹ ویئر کے ساتھ انسانی TMEM211 پروٹین کی ترتیب کا تجزیہ کیا گیا ہے۔ سب سے پہلے، یوکیریوٹک لکیری موٹف ٹول نے کئی شماریاتی طور پر اہم فاسفوریلیشن سائٹس اور ایک گلائکوسامینوگلیکن منسلک سائٹ کی نشاندہی کی، لیکن یہ سب ٹرانس میمبرین ڈومینز کے اندر موجود تھے جہاں امینو ایسڈ کی ترتیب ان عوامل سے بے نقاب نہیں ہوگی۔ مزید برآں، یہ مقامات آرتھولوگس میں محفوظ نہیں ہیں، یہاں تک کہ دوسرے ممالیہ جانوروں میں بھی نہیں۔ اسی طرح مارکوئل، سلفینیٹر، فاسفو سائٹ پلس، جی پی ایس-ایس یو ایم او، نیٹ این جی لائک، اور نیٹ اوگلیک سے منفی نتائج حاصل کیے گئے۔ نیٹفوس بہت مضبوطی سے پیش گوئی کرتا ہے کہ S93 فاسفوریلیٹڈ ہوگا، لیکن یہ سیرائن پریمیٹس سے باہر آرتھولوگس میں موجود نہیں ہے۔ تاہم، یہ ممکن ہے کہ یہ ممالیہ مخصوص فعل کا حصہ ہو۔ یہ سیرائن مفروضہ شدہ فعال جگہ سے جھلی کے مخالف سمت میں ہے، لہذا اس بات کا امکان نہیں ہے کہ یہ پروٹین کی سرگرمی کو تبدیل کرے۔ یہ فاسفوریلیشن سائٹ ایک سگنل راستے کا حصہ ہو سکتا ہے جو پروٹین چلاتا ہے۔ ڈیانا کو نتائج بھی ملتے ہیں، جو C127 اور C138 کے درمیان ڈائیسلفائیڈ بانڈ کی ممکنہ تشکیل کو اجاگر کرتے ہیں۔ دوسرے نتائج جن میں خلیے کی جھلی کے پار بانڈ شامل تھا، مسترد کر دیے گئے۔ پیش گوئی شدہ بانڈ میں سسٹین ایم ایس اے کے تمام حیاتیات میں مکمل طور پر محفوظ ہیں، اور اس طرح، یہ بانڈ ممکنہ طور پر ٹی ایم ای ایم 211 کی ساخت اور اس کے نتیجے میں ہونے والے کام کے لیے اہم اہمیت کا حامل ہے۔ انسانی TMEM211 (شکل 21) کے پچھلے ماڈل میں شناخت شدہ دلچسپی کے ڈومینز کو شامل کیا گیا تھا۔ لیوسین زپر پیٹرن پروٹین کے انتہائی محفوظ حصے پر پایا جاتا ہے، یہ دونوں ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے ساتھ مشترکہ توسیع شدہ ڈومین میں شامل ہیں۔ یہ توسیعی ڈومین پیش گوئی شدہ فعال سائٹ کے پورے حصے کا احاطہ کرتا ہے، یہ سب پرجاتیوں میں بھی انتہائی محفوظ ہے۔ مختصر مشترکہ ڈومین وضاحت کے لیے دکھایا جاتا ہے، لیکن یہ چھوٹا ڈومین بھی فعال سائٹ کی اکثریت کو اوورلیپ کرتا ہے اور انتہائی محفوظ ہوتا ہے۔ اگرچہ لیوسین زپرز کو انٹرا سیلولر افعال کے حوالے سے بہتر طور پر سمجھا جاتا ہے، لیکن ایکسٹرا سیلولر لیوسین زپرز کو پروٹین بائنڈنگ میں مدد کرنے اور سگنل ریسیپٹرز کے فعال اجزاء ہونے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ یہ دونوں ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے شناخت شدہ افعال ہیں اور ٹی ایم ای ایم 211 کے لیے افعال ہو سکتے ہیں۔ ٹرانس میمبرین ڈومینز میں سے ہر ایک کو زیادہ تر ہائیڈروفوبک باقیات کی ساخت کے علاوہ پروٹین کی ترتیب، ترمیم، یا ثانوی ڈھانچے کے ذریعہ اپنی جگہ پر رکھا جاتا ہے۔ پہلا ٹرانس میمبرین ڈومین انٹرا سیلولر سائیڈ پر مثبت طور پر چارج شدہ ارجنائن کے باقیات کے ذریعے رکھا جاتا ہے جو ڈومین کو جھلی میں پھسلنے سے روکتے ہیں۔ ٹرانس میمبرین ڈومینز 1 اور 2 دونوں کو ان کے درمیان ترتیب میں بیٹا شیٹس کی تشکیل سے ایکسٹرا سیلولر سائیڈ پر مستحکم کیا جاتا ہے۔ یہ ڈھانچہ جھلی سے گزرنے کے قابل نہیں ہوگا۔ انٹرا سیلولر سائیڈ پر، ٹرانس میمبرین ڈومین 2 کو چارج شدہ ارجنائن کے باقیات اور پولر سیرائن کے باقیات کے ذریعے حرکت کرنے سے روکا جاتا ہے۔ یہ باقیات پیش گوئی شدہ فاسفوریلیشن سائٹ بھی ہیں، جو ٹرانس میمبرین ڈومین کی نقل و حرکت کو مزید روک دیں گے۔ ٹرانس میمبرین ڈومین 3 ممکنہ طور پر ایکسٹرا سیلولر اسپیس کی طرف مزید منتقل ہو سکتا ہے، کیونکہ اس سے پہلے آنے والی سات امینو ایسڈ کی ترتیب مکمل طور پر ہائیڈروفوبک ہے۔ کچھ ہی دیر بعد، تھریونین کے باقیات اور مکمل طور پر محفوظ گلوٹامین کے باقیات ترتیب کو جھلی میں مزید منتقل ہونے سے روکتے ہیں۔ ٹرانس میمبرین ڈومین 3 کے دوسری طرف مکمل طور پر محفوظ C127 کے لیے جھلی سے باہر نکلنے اور c138 کے ساتھ پیش گوئی شدہ ڈائیسلفائیڈ بانڈ بنانے کے لیے سات پوزیشنیں بھی درکار ہیں۔ ایک بار بننے کے بعد، یہ بانڈ ڈومین کو اپنی اصل پوزیشن میں واپس آنے سے روکتا ہے۔ ٹرانس میمبرین ڈومین 4 ممکنہ طور پر زیادہ آزادانہ طور پر منتقل ہو سکتا ہے، کیونکہ اس کی پوزیشن سے قطع نظر، یہ کچھ مقدار میں چارج شدہ یا قطبی باقیات کو جھلی میں مجبور کرے گا۔ یہ اس وقت تک سلائڈ کرنے کے قابل ہو سکتا ہے جب تک کہ اس کا سامنا c138 کے ڈائیسلفائیڈ بانڈ سے نہ ہو، اس پوزیشننگ کے لیے جھلی میں قطبی اور چارج شدہ امینو ایسڈ کی کم سے کم تعداد کو مجبور کرتا ہے۔ ہائیڈروفوبک جھلی کے اندر قطبی اور چارج شدہ باقیات کا یہ علاقہ پروٹین کے سب سے کم محفوظ علاقوں میں سے ایک ہے، ممکنہ طور پر اس وجہ سے کہ یہ غیر مستحکم ہے اور فعال جگہ سے دور ہے۔ ترتیری ڈھانچہ ٹی ایم ای ایم 211 کی ساخت کی پیش گوئی بہت زیادہ اعتماد کے ساتھ کی جا سکتی ہے (شکل 22)۔ کم اعتماد والا واحد خطہ سی-ٹرمینس سے پہلے کا خطہ ہے، جو انتہائی غیر محفوظ اور غیر مستحکم ہے۔ یہ پروٹین کی ساخت کا واحد بڑا حصہ بھی ہے جو مختلف انواع میں مختلف ہوتا ہے۔ جیسا کہ دکھایا گیا ہے، چار ٹرانس میمبرین ڈومینز ایک ساتھ جمع ہوتے ہیں، لیکن جگہ بھرنے والے ماڈل واضح طور پر ظاہر کرتے ہیں کہ وہ ایک قابل گزر چینل نہیں بناتے ہیں۔ اگرچہ لکیری TMEM211 ترتیب میں چارج کے کسی کلسٹر کا پتہ نہیں چلا، لیکن بائنڈنگ سائٹ کے اندر مثبت اور منفی چارج کا ایک واضح کلسٹر موجود ہے (شکل 23)۔ یہ TMEM211 فعال سائٹ کو اپنے لگینڈ کے ساتھ آئنک طور پر تعامل کرنے کی اجازت دے گا، اور ساتھ ہی پروٹین کو صرف ساخت سے زیادہ سبسٹریٹ کی خاصیت فراہم کرے گا۔ اہم بات یہ ہے کہ TMEM211 کی پیش گوئی شدہ بائنڈنگ سائٹ سالوینٹ قابل رسائی ہے، باقی پروٹین سے زیادہ (شکل 23)۔ یہ رسائی لگینڈ کو پروٹین میں داخل ہونے اور اس کے ساتھ تعامل کرنے کی اجازت دے گی۔ چارج، ساخت، اور محفوظ سسٹین کے باقیات کا مجموعہ ممکنہ طور پر TMEM211 کو لگینڈ سے جڑے رہنے میں مدد کرتا ہے۔ ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے اراکین کے بائنڈنگ سائٹس دوسرے پروٹینوں کو باندھتے ہیں، لیکن ٹی ایم ای ایم 211 کے لیے کوئی فعال پروٹین-پروٹین تعاملات دریافت نہیں ہوئے ہیں۔ واحد تعامل جو مشاہدہ کیا گیا ہے وہ ہیپاٹائٹس ڈیلٹا کے TMEM211 اور P29996 کے درمیان ہے۔ تاہم، P29996 مختلف اقسام کے 156 دیگر انسانی پروٹینوں کے ساتھ تعامل کرنے کے لیے جانا جاتا ہے، اور TMEM211 ممکنہ طور پر اس بے حیائی میں پھنس گیا ہے اور کسی مخصوص فعال کردار کے لیے ہدف نہیں ہے۔ تغیر خاموش تغیرات کو چھوڑ کر، 7 ایس این پیز ہیں جو ٹی ایم ای ایم 211 جینوں کی انسانی آبادی میں ہیٹروزائگوسیٹی کے ساتھ پائے جاتے ہیں۔ ان تغیرات کو TMEM211 (شکل 25) کی نمائندگی میں شامل کیا گیا تھا۔ اتپریورتن W67R، 50 ٪ ہیٹروزائگوسیٹی کے ساتھ پیش کرتا ہے، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ اس اتپریورتن کا ممکنہ طور پر پروٹین فنکشن پر بہت کم یا کوئی اثر نہیں پڑتا ہے۔ تاہم، کئی دیگر تغیرات فینوٹائپز کے ساتھ اہم ارتباط رکھتے ہیں۔ G140 میں تغیرات، جو R یا A بن جاتے ہیں، بی ایم آئی میں نمونوں سے وابستہ ہیں۔ اگر یہ تبدیلیاں پروٹین کے فنکشن کو متاثر کرتی ہیں، جو کہ لینجرہانس کے جزیروں میں موجود ہونے کے لیے جانا جاتا ہے، تو یہ خفیہ انسولین کی سطح میں تبدیلیوں کے ذریعے بی ایم آئی پر اثر ڈال سکتا ہے۔ تغیر M145I الزائمر کے بڑھتے ہوئے خطرے سے وابستہ ہے، جو ایل ایچ ایف پی ایل کے معروف تغیرات کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے جو الزائمر کے خطرے کو بھی بڑھاتا ہے۔ خاص طور پر، تغیر C127W بہرے پن اور سماعت کے نقصان سے وابستہ ہے۔ C127 بائنڈنگ جیب میں واقع ہے اور اس کے C138 کے ساتھ ڈائیسلفائیڈ بانڈ بنانے کی پیش گوئی کی گئی ہے۔ ٹرپٹوفین ڈائیسلفائیڈ بانڈ میں مشغول نہیں ہو سکے گا اور ممکنہ طور پر بائنڈنگ سائٹ کی فعال صلاحیتوں کو تبدیل کر دے گا۔ C127W ممکنہ طور پر فنکشن اتپریورتن کا نقصان ہے، جو اس کے بعد LHFPL خاندان کے ممبروں میں فنکشن اتپریورتن کے نقصان سے معلوم ہونے والے بہرے پن اور سماعت کے نقصان کی بالکل عکاسی کرتا ہے۔ مماثلت کو آگے بڑھاتے ہوئے، سسٹین کی یہ جوڑی ایل ایچ ایف پی ایل خاندان میں مکمل طور پر محفوظ ہے۔ ممکنہ نقل کے عوامل کے بائنڈنگ سائٹس کے اندر یا ایم آر این اے ساختی عناصر کے اندر کوئی تغیرات نہیں ہو رہے تھے، لیکن یہ نتیجہ اخذ کرنے کے لیے کافی ڈیٹا دستیاب نہیں تھا کہ یہ ان ترتیبات کے ضروری تحفظ کی وجہ سے ہے۔ فنکشن فی الحال، TMEM211 کا کوئی معلوم فنکشن نہیں ہے۔ ایک معلوماتی تجربہ چوہوں میں ایک ناک آؤٹ تجربہ ہوگا، جہاں TMEM211 جین کو ہٹایا جاتا ہے یا CRISPR کا استعمال کرتے ہوئے تبدیل کیا جاتا ہے۔ یہ فرض کرتے ہوئے کہ پروٹین کچھ کام کر رہا ہے، پھر ماؤس میں کسی پہلو میں کمی ہوگی۔ آواز کے بارے میں ماؤس کے ادراک پر مخصوص توجہ دی جانی چاہیے، کیونکہ یہ ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے افراد پر ناک آؤٹ تجربات کا نتیجہ ہے۔ اگرچہ یہ تجربہ ممکنہ طور پر ٹی ایم ای ایم 211 کے مخصوص افعال کو ثابت نہیں کرے گا، لیکن یہ مستقبل کے تجربات میں توجہ مرکوز کرنے کے لیے خطوں یا راستوں کی نشاندہی کر سکتا ہے۔ یہ پینکریاز، چھاتی، دماغ اور جنسی اعضاء کے بافتوں میں پروٹین کی کثرت سے تجویز کردہ ممکنہ افعال کے میدان کو تنگ کر دے گا۔ انسولین سیلولر گلوکوز کے اضافے کا ایک اہم پہلو ہے، اور انسانی جسم کے زیادہ تر خلیوں کو اس کی ضرورت ہوتی ہے۔ یہ خون میں گلوکوز کی بلند سطح کے جواب میں جاری کیا جاتا ہے۔ اینٹی باڈی سٹیننگ سے پتہ چلتا ہے کہ ٹی ایم ای ایم 211 پینکریٹک ٹشو میں لینجرہانس کے انسولین خفیہ کرنے والے جزیروں میں لوکلائزیشن کے لیے انتہائی تعصب ظاہر کرتا ہے، اور ٹی ایم ای ایم 211 اور ایل ایچ ایف پی ایل فیملی کا ایک تجویز کردہ فنکشن سگنل ریلے ہے۔ اس طرح، ٹی ایم ای ایم 211 کے ایکسٹرا سیلولر بائنڈنگ سائٹ کا ایک ممکنہ کام گلوکوز سے منسلک ہونا اور اس سگنل کو ریلے کرنا ہو سکتا ہے کہ گلوکوز خون کے بہاؤ میں موجود ہے۔ یہ اڈینوسین ٹرائی فاسفیٹ حساس K + چینل کا معروف فنکشن ہے، لیکن سگنل کے راستے اکثر بے کار ہوتے ہیں اور انسانی جسم کے لیے یہ منطقی ہوگا کہ اس نے زندگی کے لیے ضروری عمل کے لیے بے کار پن پیدا کیا ہو۔ اس مفروضے کی جانچ کرنے کے لیے، مستحکم ٹی ایم ای ایم 211 اور گلوکوز کے محلول کا استعمال کرتے ہوئے سطح پلازمون گونج کا تجربہ کیا جانا چاہیے۔ تجربے کا یہ طریقہ چھوٹے لگینڈس اور جھلی پروٹین کے درمیان بائنڈنگ کا اندازہ لگانے میں موثر ہے۔ اگر بائنڈنگ کی شرح کا تعین غیر صفر ہے، تو گلوکوز ممکنہ طور پر فعال سائٹ پر پابند ہے۔ اگر بائنڈنگ کی شرح کا تعین صفر ہے، تو اس تجربے کو غیر گلوکوز غذائی اجزاء کے ساتھ دہرایا جانا چاہیے جو انسولین کے سراو کو متاثر کرتے ہیں، یعنی فری فیٹی ایسڈ اور فری امینو ایسڈ، اور ایسے ہارمونز کے ساتھ دہرایا جانا چاہیے جو انسولین کے سراو کو متاثر کرتے ہیں، بشمول میلاٹونن، ایسٹروجن، لیپٹن، گروتھ ہارمون، اور پیپٹائڈ-1 جیسے گلوکوگن۔ اگر ان میں سے کسی کے نتیجے میں غیر صفر بائنڈنگ کی شرح ہوتی ہے، تو اس بات کا تعین کرنے کے لیے ایک تجربہ کیا جا سکتا ہے کہ آیا یہ تعامل انسولین کی رہائی کے اشارے کے لیے ذمہ دار ہے یا نہیں۔ یہ بھی ممکن ہے کہ گلوکوز کے راستے کے برعکس، ٹی ایم ای ایم 211 کا پابند ہونا اور اس کے نتیجے میں سگنل انسولین کی رہائی کو روک دے۔ اس تجربے کے نتائج کو پھر کہیں اور لاگو کیا جا سکتا ہے۔ ٹی ایم ای ایم 211 والے بہت سے دوسرے خلیات اور بافت بھی گلوکوز یا ہارمونز کا جواب دیتے ہیں، اور جب کہ سگنل ہر خلیے کی قسم میں مختلف ردعمل کا سبب بن سکتا ہے، ایکسٹرا سیلولر بائنڈنگ سائٹ کو ٹشو کی قسم سے قطع نظر اپنے لگینڈ کے لیے اپنی خاصیت برقرار رکھنی چاہیے۔ مثال کے طور پر، تھوک غدود گلوکوز کی موجودگی میں اضافی تھوک پیدا کرتا ہے اور اس میں ٹی ایم ای ایم 211 کا اعلی اظہار ہوتا ہے۔ اگر پینکریٹک تجربات کے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ ٹی ایم ای ایم 211 گلوکوز کی سطح کا پتہ لگا رہا ہے اور اس کا اشارہ دے رہا ہے، تو یہ قیاس کیا جا سکتا ہے کہ ٹی ایم ای ایم 211 تھوک غدود میں تھوک کی پیداوار کو تبدیل کر رہا ہے۔ آخر میں، نہ تو ٹی ایم ای ایم 211 اور نہ ہی کسی ایل ایچ ایف پی ایل خاندان کے رکن نے صوتی پروسیسنگ سے وابستہ دماغ کے حصوں کے لیے متعصبانہ کثرت ظاہر کی، پھر بھی تغیرات کسی جاندار کی سننے کی صلاحیت کو متاثر کرتے ہیں۔ تاہم، ٹی ایم ای ایم 211 ایم آر این اے کا 5 'یو ٹی آر انتہائی محفوظ ہے اور MEIS1.01 سے جڑا ہوا ہے، جو عصبی تفریق میں شامل ایک جنین پروٹین ہے۔ یہ ممکن ہے کہ ان جینوں میں تغیرات آواز کے ادراک کے راستے کو توڑ کر بہرے پن یا سماعت کے نقصان کا سبب نہ بنیں، بلکہ صوتی اشاروں پر عمل کرنے کے لیے درکار ڈھانچوں کی مناسب نشوونما کو روک کر۔ تغیرات سماعت کے راستے کے کچھ پہلو کو نشوونما کے دوران صحیح طریقے سے جمع ہونے یا فرق کرنے سے روک سکتے ہیں۔ یہ وہ طریقہ کار ہے جس کے ذریعے کان کے دیگر اندرونی ٹرانس میمبرین پروٹین میں تغیر بہرے پن کا سبب بنتا ہے۔ یہ تغیرات چوہوں میں پیدا کیے جا سکتے ہیں، جس سے ٹی ایم ای ایم 211 تغیرات والے چوہوں، ایل ایچ ایف پی ایل تغیرات والے چوہوں، اور کنٹرول چوہوں کے درمیان ساخت اور صوتی پروسیسنگ میں فرق کی جانچ کی جا سکتی ہے۔ ایف ایم آر آئی محققین کو یہ مشاہدہ کرنے کی اجازت دے گا کہ آڈیٹری پروسیسنگ کے راستے میں خرابی کہاں ہو رہی تھی۔ ان میکانزم کو الگ کرنے کے لیے، تجرباتی چوہوں کو جنگلی قسم کے چوہوں کے ساتھ پالنا چاہیے تاکہ چوہوں کی ایک نسل پیدا کی جا سکے جو تغیر کے لیے ہیٹروزائگس ہوں۔ یہ چوہے اب بھی صوتی پروسیسنگ کے کچھ پہلوؤں کو دکھاتے ہیں اور محققین کو اس راستے میں مخصوص خرابی کی طرف لے جا سکتے ہیں جو تغیر کی وجہ سے ہوتی ہے۔ اس مطالعہ میں اندرونی کان کا جسمانی معائنہ شامل ہونا چاہیے۔ سماعت کے راستے میں فنکشن ان نمونوں کی بھی وضاحت کرتا ہے جن میں جاندار جین رکھتے ہیں۔ سنیڈریا وہ پہلے جانور تھے جو اپنے جسم کے ارد گرد موجود سیال میں کمپن کا پتہ لگانے کے قابل تھے۔ انیمون یہاں تک کہ بالوں جیسی ساختوں کا استعمال کرتا ہے جو انسانی اندرونی کان سے مشابہت رکھتے ہیں، ایک ایسی ساخت جس نے ممکنہ طور پر جدید کانوں کو جنم دیا۔ ورٹیبریٹس اور آرتھروپوڈز واحد جانور ہیں جن پر کان کا لیبل لگایا جاتا ہے، لیکن بہت سے انورٹیبریٹس اب بھی انیمون سے ملتے جلتے ڈھانچے استعمال کرتے ہیں۔ یہ انحراف گراف کے نقطہ کی وضاحت کرتا ہے جہاں جین تیزی سے تبدیل ہونا شروع ہوتا ہے، جو زمینی جانوروں کے عروج کے ساتھ بالکل مطابقت رکھتا ہے۔ جین تیزی سے تبدیل ہونا شروع ہوا جب حیاتیات نے پانی کے برعکس ہوا میں صوتی ادراک کو اپنانا شروع کیا۔ یہ اس بات کی بھی وضاحت کرتا ہے کہ امفیبیئن انسانی TMEM211 کے ساتھ ان کے انحراف کی تاریخ کی بنیاد پر توقع سے بہت کم شناخت کیوں ظاہر کرتے ہیں۔ ان کے پروٹین کو اتنا تبدیل کرنے کی ضرورت نہیں تھی جتنا وہ آبی ماحول میں رہے۔ زمینی آرتھروپوڈز کے پاس TMEM211 نہیں ہے، حالانکہ ان کے کان ہیں۔ تاہم، زمینی ریڑھ کی ہڈی والے جانور اور زمینی آرتھروپوڈز زمینی آباؤ اجداد کا اشتراک نہیں کرتے ہیں۔ ریڑھ کی ہڈی والے جانور ٹیٹرا پوڈز کے طور پر زمین پر آباد ہونے کے لیے تیار ہوئے، جنہوں نے TMEM211 جین کو ڈھال لیا تاکہ وہ ہوا میں آواز پر عمل کر سکیں۔ زمینی آرتھروپوڈز سمندری آرتھروپوڈز سے پیدا ہوئے، اور اگرچہ انہوں نے کچھ ایسا تیار کیا جس پر کان کا لیبل لگا ہوا ہے، یہ مشترکہ ارتقاء کی پیداوار ہے، نہ کہ مشترکہ نسب کی۔ آرتھروپوڈز کے کانوں کا ارتقاء TMEM211 جین کا استعمال روک سکتا تھا کیونکہ انہوں نے ہوا میں آواز کو سمجھنے کے لیے ایک متبادل راستہ تلاش کیا۔ حوالہ جات