Ovarian culture
اووری کلچر ایک ان وٹرو عمل ہے جو بیضہ دانی کی نشوونما، ٹاکسیکولوجی اور پیتھولوجی کی تحقیقات کی اجازت دیتا ہے۔ اس تکنیک کو زرخیزی کے علاج کے ممکنہ استعمال کا مطالعہ کرنے کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ابتدائی بیضہ دانی کے پھوڑوں سے oocytes کو الگ کرنا جو فرٹیلائزیشن کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ماؤس اووریئن ٹشو کا استعمال کرتے ہوئے کلچر کے طریقے کئی کلچر سسٹم ہیں جنہیں اووریئن اور فولیکولر کی نشوونما اور نشوونما کی تحقیقات کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ پورے بیضہ دانی کی ثقافت برقرار بیضہ دانی کی ثقافت ابتدائی پھوڑوں کی تشکیل اور نشوونما کی حمایت کرتی ہے۔ اعضاء کو نوزائیدہ چوہے کے بچوں سے الگ کیا جاتا ہے اور اعضاء کے کلچر میڈیم میں رکھا جاتا ہے جس میں بووائن سیرم البیومین (بی ایس اے) α-Minimal Essential Media (αMEM) میں تحلیل ہوتا ہے۔ کلچرز کو 37 ڈگری سیلسیس، 5 فیصد کاربن ڈائی آکسائیڈ انکیوبیٹر میں برقرار رکھا جاتا ہے اور پھر مزید مطالعہ کو آسان بنانے کے لیے اعضاء کو منجمد یا فکس کیا جاتا ہے۔ فولیکل کلچر انفرادی کلچر کا یہ طریقہ انفرادی فولیکلز کی نشوونما کو دیر سے پری اینٹرل سے لے کر پری اوولیٹری مرحلے تک سپورٹ کرتا ہے۔ یہ نظام پھوڑے کی نشوونما اور ہارمون کی پیداوار کا مطالعہ کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ چھوٹے چوہوں کے اعضاء (19-23 دن) کو ہٹا دیا جاتا ہے اور آدھا کر دیا جاتا ہے، اور پھوڑوں کی شناخت خوردبین کے تحت کی جاتی ہے۔ لیٹ پری اینٹرل فوکلز کی شناخت 180-200 μm کے قطر اور گرینولوسا خلیوں کی 2-3 تہوں پر مشتمل ہونے کے طور پر کی جاتی ہے۔ پودوں کو دستی طور پر الگ کیا جاتا ہے اور پھر کلچر کے لیے موزوں ہونے کے لیے جانچ کی جاتی ہے۔ پودوں کو کلچر کے لیے صرف اس صورت میں منتخب کیا جاتا ہے جب وہ صحت مند ہوں (قطر 190 ± 10 مائیکرو میٹر ؛ شفاف ؛ سیاہ ایٹریٹک علاقوں کے بغیر ؛ برقرار بیسال لامینا۔) پھوڑے کلچر میڈیم پر مشتمل کنویں (α-Minिमल ایسینشیل میڈیا، ریکومبیننٹ ہیومن فولیکل اسٹیمولیٹنگ ہارمون، ایسکوربک ایسڈ اور بالغ خواتین ماؤس سیرم) کو جراثیم سے پاک سلکان کے تیل سے ڈھک دیا جاتا ہے، جو درمیانے درجے کے بخارات کو روکتا ہے۔ ہر کنویں کے نچلے حصے میں ایک پھوڑے کو رکھا جاتا ہے اور اسے 37 ڈگری سیلسیس، 5 فیصد کاربن ڈائی آکسائیڈ انکیوبیٹر میں رکھا جاتا ہے، جسے 6 دن تک تازہ میڈیم والے کنویں میں منتقل کیا جاتا ہے۔ اگر نمو کی پیمائش بصری طور پر لی جا رہی ہے تو تیل کی پرت کی وجہ سے ہونے والی مسخ کا حساب لگانا ضروری ہے۔ پودوں کو منجمد یا فکس کیا جاتا ہے تاکہ مزید تجزیہ کیا جا سکے۔ قریب قریب 2 پودوں کو کلچر کرنے سے، پودوں اور پودوں کے تعاملات کی جانچ کی جا سکتی ہے۔ پھوڑے ایک ساتھ بڑھ کر دو پھوڑے والی اکائی بنا سکتے ہیں۔ فوکلز کو اوپر کی طرح بیضہ دانی سے الگ کیا جاتا ہے، پھر جوڑوں میں ایک دوسرے کے ساتھ رابطے میں رکھا جاتا ہے، ایک کنویں میں فوکل کلچر میڈیم اور سٹریلائزڈ سلکان آئل کے ساتھ۔ مختلف جینیاتی ذرائع سے آنے والے پودوں کو مشترکہ طور پر کاشت کیا جا سکتا ہے تاکہ بافتوں کی ابتداء کو مشترکہ طور پر تقسیم کیا جا سکے۔ میڈیم کو ہر 2 دن بعد تبدیل کیا جاتا ہے اور 6 دن کے بعد کلچر کو مزید پروسیسنگ کے لیے فکس یا منجمد کیا جاتا ہے۔ پھولیکل-اووری شریک کلچر یہ طریقہ پھولیکل-اووری تعاملات کا مطالعہ کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ اعضاء اور پھوڑوں کو اوپر کی طرح الگ کیا جاتا ہے اور پھر ایک پھوڑے کو پلیٹ پر نوزائیدہ بیضہ دانی کے ایک کھمبے کے ساتھ رابطے میں رکھا جاتا ہے۔ فولیکل-اووری پلیٹ کو فولیکل کلچر میڈیم میں 37 ڈگری سیلسیس، 5 فیصد کاربن ڈائی آکسائیڈ پر 5 دن تک کلچر کیا جاتا ہے۔ اس مقام پر مزید پروسیسنگ سے پہلے شریک کلچر کو منجمد یا فکس کیا جاتا ہے۔ ٹشو کی ابتداء کے درمیان فرق کو آسان بنانے کے لیے بیضہ دانی اور پھوڑے کو مختلف جینیاتی ذرائع سے ہونا چاہیے۔ اعضاء کے کلچر کی تکنیکوں کے استعمال زہریلا مطالعہ فی الحال تولیدی زہریلا سائنس کے میدان میں تحقیق بنیادی طور پر ویو میں کی جاتی ہے، تاہم نئے کلچر کے طریقے تیار کیے گئے ہیں جس کا مقصد اعضاء کے پھوڑوں کو وٹرو میں اگانے کی اجازت دینا ہے۔ یہ نئے طریقے ہمیں الگ تھلگ بیضہ دانی کے پھوڑے، جنین، بیضہ دانی (پورا اعضاء یا ٹشو کا صرف ایک حصہ)، اور جنین اسٹیم سیلز کو کلچر کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔ اعضاء کی ثقافتیں تحقیق کے لیے مفید ہیں کیونکہ وہ ہمیں موڈیولڈ کلچر conditions.The ان وٹرو اووری کلچرز کے ساتھ ماحول میں منظم پھوڑے کی نشوونما، وقتا فوقتا بیضہ دانی، اور پھوڑے کے ایٹریشیا کی نقل تیار کرنے کی اجازت دے سکتے ہیں تاکہ بیضہ دانی اور اس کے فوکلز اور اووسائٹس کے خصوصی ڈھانچوں کو پہنچنے والے نقصان کا پتہ لگایا جا سکے، ممکنہ نشوونما اور/یا تولیدی زہریلے مادوں کی تیزی سے جانچ کی اجازت دیتا ہے۔ لہذا، تولیدی حیاتیات اور زہریلا سائنس میں اعضاء کے کلچر کے نظام تیزی سے وسیع پیمانے پر استعمال ہو رہے ہیں۔ پورے بیضہ دانی یا بیضہ دانی کے ٹکڑوں کی کلچر ایک کنٹرول شدہ طریقے سے مختلف پیرامیٹرز کی تشخیص کی اجازت دیتی ہے اور اس لیے، تولیدی زہریلے پن کے مزید مکمل مطالعے کی صلاحیت رکھتی ہے۔ اعضاء کے کلچر کا ایک بڑا فائدہ یہ ہے کہ اعضاء کے ذخائر کو بنانے والے ابتدائی پودوں کے تالاب پر منشیات کے اثرات کا اندازہ کرنے کی صلاحیت ہے۔ تاہم، یہ حکمت عملی کلچر کے وقت کی مدت کے حوالے سے محدود ہے، کیونکہ فولیکولر نشوونما کو یقینی بنانے کے لیے مختصر مدت کافی نہیں ہو سکتی ہے۔ اس کے برعکس، خلیات طویل عرصے تک کلچر سے منفی طور پر متاثر ہو سکتے ہیں۔ وٹرو ٹاکسیکولوجی کے زیادہ تر مطالعات خواتین چوہوں اور چوہوں کے نمونوں کا استعمال کرتے ہیں۔ ان انواع کو ہینڈل کرنے میں آسانی اور چھوٹے سائز کی وجہ سے تولیدی فعل اور زرخیزی پر منشیات کے منفی اثرات کا اندازہ لگانے کے لیے منتخب کیا گیا ہے۔ مزید برآں، ان پرجاتیوں کی اچھی خصوصیات ہیں ؛ جسمانی، جسمانی اور جینیاتی طور پر۔ ان کی مختصر زندگی کے چکر حمل، دودھ پلانے اور بلوغت کا اندازہ لگانا آسان بناتے ہیں۔ متنوع انسانی آبادیوں میں زہریلے خطرے کی تشخیص کے لیے جانوروں کے مطالعے کی مطابقت کا تعین نہیں کیا گیا ہے کیونکہ یہ معلوم نہیں ہے کہ حاصل کردہ نتائج کو انسانوں تک پہنچایا جا سکتا ہے یا نہیں۔ زرخیزی کا علاج اعضاء کے کلچر میں ان ویوو پختگی کا استعمال پولی سسٹک اووری سنڈروم (پی سی او ایس) کے مریضوں میں آئی وی ایف کے دوران اووری ہائپر اسٹیمولیشن سنڈروم کے خطرے کو ختم کر دے گا۔ ان لوگوں کے لیے جن کے پاس پی سی او ایس نہیں ہے، ان وٹرو پختگی کے اب بھی فوائد ہیں کیونکہ یہ عمل کم شدید ہے کیونکہ سپر اوولیشن کی ضرورت نہیں ہے۔ اعضاء کے کلچر کے اصولوں کا اطلاق ان خواتین پر کیا جا سکتا ہے جو ایف ایس ایچ یا ایسٹروجن حساس ٹیومر کے خلاف مزاحم ہیں۔ آئی وی ایف کے مقابلے میں، وٹرو پختگی میں استعمال ہونے والے خلیات کو چھوٹے سائز میں کاٹا جاتا ہے، نامکمل اور مییوسس کے میٹا فیز I مرحلے میں گرفتار کیا جاتا ہے۔ ایک بار لیب میں داخل ہونے کے بعد وہ میٹا فیز II میں پختگی سے گزرتے ہیں۔ زرخیزی کے تحفظ سے اعضاء کے ٹشو کو اعضاء کو نقصان پہنچانے والے علاج سے پہلے کاٹا جا سکتا ہے اور بعد کے مرحلے میں کریو پریزرویشن کا استعمال کرتے ہوئے دوبارہ لگایا جا سکتا ہے۔ تاہم، یہ طریقہ اعضاء کے کینسر اور لیوکیمیا میں مبتلا افراد میں بدنیتی کے دوبارہ ہونے سے وابستہ ہے۔ نظریہ طور پر، ان مریضوں میں فرٹیلائزیشن کے لیے بالغ اووسائٹس تیار کرنے کے لیے بیضہ دانی کے ٹشو کلچر ایک محفوظ طریقہ ہے۔ حوالہ جات بیرونی روابط ان وٹرو فرٹیلائزیشن سیل کلچر تولیدی ادویات ماحولیاتی زہریلا سائنس