Ellman's reagent
ایلمین کا ریجینٹ (5,5′-ڈیتھوبس-(2-نائٹروبینزوک ایسڈ) یا ڈی ٹی این بی) ایک رنگین کیمیکل ہے جو نمونے میں تھائول گروپوں کی تعداد یا ارتکاز کی مقدار کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ اسے جارج ایل ایلمین نے تیار کیا تھا۔ تیاری ایلمین کے اصل کاغذ میں، اس نے اس ریجینٹ کو 2-نائٹرو-5-کلوروبینزالڈیہائیڈ کو کاربوکسلک ایسڈ میں آکسائڈائز کرکے، سوڈیم سلفایڈ کے ذریعے تھائول کو متعارف کروا کر، اور آیوڈین کے ساتھ آکسیڈائزیشن کے ذریعے مونومر کو جوڑ کر تیار کیا۔ آج یہ ریجینٹ تجارتی طور پر آسانی سے دستیاب ہے۔ ایلمین کے ٹیسٹ تھیولز اس مرکب کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، ڈائیسلفائڈ بانڈ کو 2-نائٹرو-5-تھیوبینزوئٹ (ٹی این بی −) دینے کے لیے الگ کرتے ہیں، جو غیر جانبدار اور الکلین پی ایچ پر پانی میں ٹی این بی 2 − ڈیانین میں آئنائز ہوتا ہے۔ اس ٹی این بی 2− آئن کا رنگ پیلا ہے۔ یہ تعامل تیز اور اسٹائکیومیٹرک ہوتا ہے، جس میں تھائول کے ایک مول کے اضافے سے ٹی این بی کا ایک مول خارج ہوتا ہے۔ ٹی این بی 2-کو سپیکٹرو فوٹومیٹر میں 412 این ایم پر مرئی روشنی کے جذب کی پیمائش کرکے، پتلے بفر حل کے لیے 14,150 ایم-1 سینٹی میٹر-1 کے معدومیت گتانک کا استعمال کرتے ہوئے، اور نمک کی زیادہ مقدار کے لیے 13,700 ایم-1 سینٹی میٹر-1 کے گتانک کا استعمال کرتے ہوئے، جیسے کہ 6 ایم گوانیڈینیم ہائیڈروکلورائڈ یا 8 ایم یوریا کی مقدار مقرر کی جاتی ہے۔ ایلمین کی اصل 1959 کی اشاعت میں مولر کے معدومیت کا تخمینہ 13,600 M−1 cm−1 لگایا گیا تھا، اور یہ قدر بہتر تعین کے باوجود طریقہ کار کی کچھ جدید ایپلی کیشنز میں پائی جا سکتی ہے۔ تجارتی ڈی ٹی این بی مکمل طور پر خالص نہیں ہو سکتا ہے، اس لیے مکمل طور پر درست اور دوبارہ پیش کرنے کے قابل نتائج حاصل کرنے کے لیے دوبارہ کرسٹلائزیشن کی ضرورت پڑ سکتی ہے۔ ایلمین کا ریجینٹ کم مالیکیولر ماس تھائولز جیسے گلوٹاتھیون کو خالص حل اور حیاتیاتی نمونوں، جیسے خون، دونوں میں ناپنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ یہ پروٹین پر تھائول گروپوں کی تعداد کی بھی پیمائش کر سکتا ہے۔ حوالہ جات بیرونی روابط سلف ہائیڈریلز ڈی ٹی این بی کی مقدار، ایلمین کے ریجینٹ (غلط جذب گتانک کا استعمال کرتا ہے) بائیو کیمسٹری کا پتہ لگانے کے رد عمل نامیاتی ڈسلفائڈز بینزوک ایسڈ نائٹروبینزین بائیو کیمسٹری ریجینٹس بائیو کیمسٹری ریجینٹس