SIGLEC6
سیالیک ایسڈ بائنڈنگ آئی جی نما لیکٹن 6 ایک پروٹین ہے جسے انسانوں میں SIGLEC6 جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے۔ اس جین کو اصل میں ان جینوں کے درمیان مماثلت کی وجہ سے سی ڈی 33 ایل (سی ڈی 33 کی طرح) کا نام دیا گیا تھا لیکن بعد میں اس عنصر سے جڑے رہنے کی صلاحیت کی وجہ سے او بی-بی پی 1 (او بی [لیپٹن]-بائنڈنگ پروٹین 1) کے نام سے جانا جانے لگا اور آخر کار، سگلیک 6 شناخت کے لیے سگلیک خاندان کے چھٹے رکن کے طور پر۔ اس پروٹین کو سی ڈی کا نام سی ڈی 327 بھی دیا گیا ہے۔ ایکسپریشن سگلیک-6 کا اظہار سب سے پہلے پلکینٹل ٹشو میں پایا گیا، جس کی تصدیق اس وقت ہوئی جب اس پروٹین کی شناخت لیپٹن بائنڈنگ پروٹین کی اسکرین میں آزادانہ طور پر کی گئی۔ پروٹین کے اظہار کا پتہ لگانے کے لیے سگلیک-6 کے خلاف ایک نئی تیار کردہ مونوکلونل اینٹی باڈی کا استعمال کرتے ہوئے، اس مؤخر الذکر مطالعہ سے پتہ چلا ہے کہ سگلیک-6 کا اظہار پلاسینٹل سائٹوٹروفوبلاسٹس اور سنکیٹیوٹروفوبلاسٹس کے ساتھ ساتھ کئی انسانی ہیماٹوپوئیٹک سیل لائنوں، بشمول ٹی ایف-1، ایچ ای ایل، یو 937، اور ٹی ایچ پی-1 خلیوں کے ذریعے کیا گیا تھا۔ یہ مونوکلونل اینٹی باڈی تقریبا تمام انسانی پردیی خون بی خلیوں سے بھی منسلک ہے، حالانکہ حالیہ رپورٹوں میں اس دریافت کی نقل نہیں کی گئی ہے۔ سگلیک-6 انسانی مستول خلیوں پر بھی انتہائی اظہار پایا گیا ہے، بشمول بنیادی سی ڈی 34 + پروجینیٹر سیل سے ماخوذ مستول خلیات اور ایل اے ڈی 2 سیل لائن۔ کئی بافتوں سے مستول خلیوں کے پروٹیوم کی جانچ کرتے ہوئے، یہ طے کیا گیا کہ سگلیک-6 نسبتا اعلی سطح پر مختلف انسانی بافتوں سے مستول خلیوں پر مستقل طور پر ظاہر ہوتا ہے، بشمول چربی، جلد، پھیپھڑے اور بڑی آنت۔ سگلیک-6 کا کسی بھی پردیی خون کے لیوکوسائٹس پر پتہ نہیں چلا۔ انسانی مستول کے خلیوں پر سگلیک-6 کا اظہار اس کے بعد سے ان لوگوں تک بڑھا دیا گیا ہے جو جلد سے الگ تھلگ اور کلچر شدہ ہیں اور مستول کے خلیوں کی لکیریں HMC-1.2، LUVA، ROSA KITWT، اور ROSA KITD816V، KIT اتپریورتن کی حیثیت سے قطع نظر، یہاں تک کہ جب متعلقہ رسیپٹر سگلیک-8 کا سیل سطح کا اظہار ختم ہو جاتا ہے۔ اس کے علاوہ، ایسوفینوفیلک ایسوفیگائٹس یا صحت مند کنٹرول مضامین کے مریضوں سے غذائی نالی کی بائیوپسیز کے سنگل سیل آر این اے سیک سے پتہ چلتا ہے کہ SIGLEC6 ٹرانسکرپٹ کا پتہ صرف مستول خلیوں میں لگایا جاتا ہے نہ کہ اس ٹشو میں موجود کسی دوسرے خلیے کی قسم میں۔ مستول خلیوں کے علاوہ، سگلیک-6 کے اظہار کا پتہ تھکے ہوئے ٹشو جیسے بی خلیوں اور ڈینڈرائٹک خلیوں (ڈی سی) کی ایک معمولی آبادی پر لگایا گیا ہے جسے اے ایکس ایل + سگلیک 6 + (اے ایس) ڈی سی کے نام سے جانا جاتا ہے۔ سگلیک-6 دائمی لیمفوسیٹک لیوکیمیا اور ایکیوٹ مائیلوئڈ لیوکیمیا خلیوں پر بھی پایا گیا ہے اور اسے سی اے آر ٹی سیل تھراپی کے ہدف کے طور پر تلاش کیا جا رہا ہے۔ لیگینڈ بائنڈنگ سگلیک-6 کی شناخت لیپٹن بائنڈنگ پروٹین کی اسکرین میں کی گئی تھی، حالانکہ اس نے لیپٹن رسیپٹر کے مقابلے میں کم وابستگی کے ساتھ لیپٹن کے ساتھ تعامل کیا۔ سیالیک ایسڈ بائنڈنگ کے لیے ضروری محفوظ ارجنائن کے باقیات کے ساتھ ریسیپٹرز کے سگلیک خاندان کے ایک رکن کے طور پر، سگلیک-6 سے توقع کی جاتی تھی کہ وہ اس کے لگینڈز کے ساتھ سیالیک ایسڈ پر منحصر انداز میں تعامل کرے گا۔ تاہم، لیپٹن سیالیلیٹڈ نہیں ہوتا ہے، اور اس لیے سگلیک-6 سے جڑا ہونا سیالیک ایسڈ سے آزاد ہونا چاہیے۔ اس تعامل کی جسمانی مطابقت کا تعین نہیں کیا گیا ہے۔ ٹرافوبلاسٹ سیل لائنوں سے جڑا ہوا گلائکوڈلن اے سیالک ایسڈ پر منحصر اور لیپٹن بائنڈنگ کے ساتھ مسابقتی پایا گیا۔ گلائکوڈلن اے نے اس مطالعے میں چیمیرک سگلیک-6-ایف سی پروٹین کے ساتھ مل کر امیونوپریسیپیٹیٹ کیا، جو پروٹین کے درمیان براہ راست تعامل کی نشاندہی کرتا ہے، جسے گلائکوڈلن اے سے سیالک ایسڈ کے انزیمیٹک ہٹانے پر بھی کم کیا گیا تھا۔ سگلیک-6 بائنڈنگ کے لیے ضروری گلائکوڈلن اے پر نہ تو متعلقہ سیالک ایسڈ لنکج اور نہ ہی باقی گلائکن ڈھانچہ معلوم ہے۔ ماسٹ سیل بائیولوجی سے بظاہر تعلق رکھنے والے کسی بھی فزیالوجیکل سگلیک-6 لگینڈ کی نشاندہی نہیں کی گئی ہے۔ ابتدائی مطالعات سے پتہ چلا ہے کہ سگلیک-6 سیالائل-ٹی این اینٹیجن (نیو 5 اے سی اے 2-6 گیل این اے سی اے) سے منسلک ہوتا ہے لیکن ٹی این اینٹیجن (گیل این اے سی اے)، 6 ′-سیالائل-لییکٹوز (نیو 5 اے سی اے 2-6 گیل بی ٹی 1-4 جی ایل سی)، یا 3 ′-سیالائل-لییکٹوز (نیو 5 اے سی اے 2-3 گیل بی ٹی 1-4 جی ایل سی) سے نہیں۔ سگلیک-6 کی گلائکن بائنڈنگ خاصیت کی مزید خصوصیت سے پتہ چلتا ہے کہ سگلیک-6، جو سگلیک خاندان کے دیگر ممبروں کے مطابق ہے، کو سیالک ایسڈ پر کاربوکسیل گروپ کی ضرورت ہوتی ہے، لیکن یہ اس لحاظ سے منفرد ہے کہ اسے پابند کرنے کے لیے سیالک ایسڈ کے گلائکولائل گروپ کی ضرورت نہیں ہے۔ سگنلنگ اور فنکشن سگلیک-6 اپنے سائٹوپلاسمک ڈومین میں دو معروف سگنلنگ موفٹس پر مشتمل ہے جن کی شناخت امیونوریسیپٹر ٹائروسین پر مبنی انفیکٹو موفٹ (آئی ٹی آئی ایم) اور امیونوریسیپٹر ٹائروسین پر مبنی سوئچ موفٹ (آئی ٹی ایس ایم) کے طور پر کی گئی ہے۔ ان نقشوں کی موجودگی کی بنیاد پر، یہ فرض کیا گیا تھا کہ سگلیک-6 ایس ایچ پی-1/2 جیسے پروٹین ٹائروسین فاسفیٹیس کی بھرتی اور ایکٹیویشن کے ذریعے امیونوریسیپٹر ٹائروسین پر مبنی ایکٹیویشن موٹف (آئی ٹی اے ایم) والے رسیپٹر کے ذریعے شروع کیے گئے سگنلنگ جھرنوں پر روک تھام کا اثر ڈالتا ہے۔ پلاسینٹل ٹرافوبلاسٹس آئی ٹی آئی ایم، آئی ٹی ایس ایم، یا دونوں میں کلیدی ٹائروسین کے باقیات کی کمی والے سگلیک-6 کے تبدیل شدہ ورژن کو ٹرافوبلاسٹ سیل لائن میں متعارف کراتے ہوئے اور سیل کو فاسفیٹیس انفیکٹر پرواناڈیٹ کے ساتھ علاج کرتے ہوئے، یہ طے کیا گیا کہ دونوں موفٹس فاسفوریلیٹ ہونے کے قابل ہیں اور یہ کہ سگلیک-6 ان موفٹس کے فاسفوریلیشن پر ایس ایچ پی-2 کو بھرتی کرنے کے قابل ہے۔ مزید برآں، گلائکوڈلن اے کو ٹرافوبلاسٹ سیل لائنوں سے جوڑنے سے ای آر کے 1/2 فاسفوریلیشن، سی-جون پروٹین اور ایم آر این اے کی سطح، ایم ایم پی 2 اور یو پی اے ایم آر این اے کی سطح، اور سیالیک ایسڈ-اور سگلیک-6 پر منحصر انداز میں جارحیت کو کم کرنے کے لیے پایا گیا، جس سے یہ پتہ چلتا ہے کہ سگلیک-6 فیصلہ کن اینڈومیٹریم میں گلائکوڈلن اے کے اظہار کا سامنا کرنے کے جواب میں ٹرافوبلاسٹ کی جارحیت کو کم کرتا ہے۔ انسانی سی ڈی 34 + پروجینیٹر سے ماخوذ ماسٹ خلیوں پر سگلیک-6 کے ماسٹ سیلز اینٹی باڈی لائیگیشن نے جی ایم-سی ایس ایف کے سراو کو روک دیا اور آئی جی ای کراس لنکنگ کے جواب میں انحطاط کو قدرے کم کر دیا، حالانکہ محرک کے جواب میں آئی ایل-8 سراو اسی طرح متاثر نہیں ہوا تھا۔ مستول خلیوں پر سگلیک-6 انابائٹری فنکشن کے اس مشاہدے کو آئی ٹی اے ایم والے ایف سی ای آر آئی کے علاوہ انسانی جلد سے ماخوذ مستول خلیوں اور جی پروٹین سے جڑے ریسیپٹرز ایم آر جی پی آر ایکس 2 اور سی 5 اے آر تک بڑھایا گیا۔ سگلیک-6 کے اینٹی باڈی لائیگیشن نے ان ریسیپٹرز کے ذریعے کام کرنے والے محرکات کی نچلی سطح کے جواب میں ماسٹ سیل ڈیگرانولیشن کو کم کیا۔ تاہم، سیکنڈری کراس لنکنگ اینٹی باڈی کے استعمال یا سگلیک-6 اور ایف سی ای آر آئی کو نشانہ بنانے والے اینٹی باڈیز کے سٹریپٹاویڈن پر مبنی ٹیٹریمرز کے استعمال کے ذریعے شریک کراس لنکنگ سگلیک-6 اور ایف سی ای آر آئی کے ذریعے بہت زیادہ طاقتور روک تھام کا مشاہدہ کیا گیا۔ مزید برآں، سگلیک-6 لائیگیشن کا روک تھام اثر کم از کم 4.5 گھنٹے تک رہا، شاید اینٹی باڈی لائیگیشن کے بعد سیل کی سطح پر رسیپٹر کے مشاہدہ شدہ استحکام کی وجہ سے، یہ تجویز کرتا ہے کہ رسیپٹر طویل عرصے تک روک تھام سگنلنگ میں حصہ لینا جاری رکھ سکتا ہے۔ ایچ آئی وی سے متاثرہ افراد کے تھکے ہوئے ٹشو جیسے بی خلیوں میں ایس آئی آر این اے کا استعمال کرتے ہوئے ایس آئی جی ایل ای سی 6 کا ناک ڈاؤن ان خلیوں کی محرک پر سی سی ایل 3 یا آئی ایل-6 کو پھیلانے یا خفیہ کرنے کی صلاحیت کو بڑھاتا ہے۔ اس نظام میں معروف سگلیک-6 لگینڈ کی کمی سے پتہ چلتا ہے کہ سگلیک-6 ٹانک سگنلنگ کے ذریعے ان خلیوں کی ردعمل کو کم کر سکتا ہے۔ حوالہ جات بیرونی روابط تفریق کے کلسٹر SIGLEC