RNASEH2B
ربن نیوکلیز ایچ 2، سب یونٹ بی ایک پروٹین ہے جسے انسانوں میں آر این اے ایس ای ایچ 2 بی جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے۔ RNase H2 ایک اتپریرک ذیلی اکائی (A) اور دو غیر اتپریرک ذیلی اکائیوں (B اور C) پر مشتمل ہے، اور RNA کے RNA: DNA ہائبرڈ کو خراب کرتا ہے۔ خیال کیا جاتا ہے کہ آر نیس ایچ 2 کی غیر اتپریرک بی ذیلی اکائی ڈی این اے کی نقل میں کردار ادا کرتی ہے۔ اس جین میں تغیرات آئکارڈی-گوٹیئرس سنڈروم ٹائپ 2 (اے جی ایس 2) کی وجہ ہیں۔ ماڈل حیاتیات ماڈل حیاتیات کو RNASEH2B فنکشن کے مطالعہ میں استعمال کیا گیا ہے۔ ایک مشروط ناک آؤٹ ماؤس لائن، جسے Rnaseh2bTM1a (EUCOMM) Wtsi کہا جاتا ہے، انٹرنیشنل ناک آؤٹ ماؤس کنسورشیم پروگرام کے حصے کے طور پر تیار کیا گیا تھا-دلچسپی رکھنے والے سائنسدانوں کو بیماری کے جانوروں کے ماڈل تیار کرنے اور تقسیم کرنے کے لیے ایک ہائی تھرو پٹ میوٹیجینیسیس پروجیکٹ۔ نر اور مادہ جانوروں کو حذف کرنے کے اثرات کا تعین کرنے کے لیے ایک معیاری فینوٹائپک اسکرین سے گزرنا پڑا۔ اتپریورتن چوہوں پر چوبیس ٹیسٹ کیے گئے اور تین اہم غیر معمولی چیزیں مشاہدہ کی گئیں۔ حمل کے دوران کسی بھی ہم جنس پرست متغیر جنین کی نشاندہی نہیں کی گئی تھی، اور اس وجہ سے کوئی بھی دودھ چھڑانے تک زندہ نہیں رہا۔ بقیہ ٹیسٹ ہیٹروزائگس میوٹینٹ بالغ چوہوں پر کیے گئے اور خواتین جانوروں میں بیکٹیریل انفیکشن کی حساسیت میں اضافہ دیکھا گیا۔ ڈی این اے میں غلط طور پر شامل ربنیوکلیوٹائڈز کو آر این اے ایس ای ایچ 2 کے ذریعے ہٹا دیا جاتا ہے۔ چوہوں میں RNASEH2 کی کمی کی سرگرمی سفید مادے کے نقائص، نیورو انفلامیشن اور سیربیلم کے ایروفی کا سبب بنتی ہے، ایسے حالات جو انسانوں میں آئکارڈی-گوٹیئرس سنڈروم کی عکاسی کرتے ہیں۔ غیر مرمت شدہ ڈی این اے نقصان سگنلنگ نیوروڈیجینریٹو خصوصیات کی بنیادی وجہ معلوم ہوتی ہے جو آئکارڈی-گوٹیئرس سنڈروم کی خصوصیت ہیں۔ میوٹاجینیسیس کا مطالعہ چوہوں میں Rnaseh2b جین ناک آؤٹ ابتدائی جنین کی مہلکیت کا باعث بنتا ہے، اس لیے جینیاتی طور پر تیار کردہ چوہوں کو ایکسن 7 Rnaseh2b میں قبل از وقت اسٹاپ کوڈن کے ساتھ بنایا گیا تھا۔ یہ قیاس کیا گیا تھا کہ نمو کی گرفتاری جینومک ڈی این اے میں واحد آر این کے جمع ہونے سے وابستہ پی 53 پر منحصر ڈی این اے نقصان کے ردعمل کا نتیجہ تھی۔ ربن نیوکلیوٹائڈ ڈی این اے پولیمریز کے ذریعے شامل ہونے کے نتیجے میں آر این اے ایس ایچ 2 نیل خلیوں میں جمع ہوتا ہے۔ ربن نیوکلیوٹائڈ کی شمولیت میٹا زوان میں ہوتی ہے اور یہ زخم ممالیہ خلیوں کے لیے نقصان دہ ہوتے ہیں، اور ان کو ہٹانا ماؤس کے جنین کی نشوونما کے لیے ضروری ہے۔ زخم واحد یا ڈی آر این ہوتے ہیں جو تقریبا ایک تعدد پر جینومک ڈی این اے میں مشترکہ طور پر شامل ہوتے ہیں۔ 1.000.000 سائٹس فی سیل، جو اسے ممالیہ جینوم میں سب سے عام اینڈوجینس بیس زخم بناتا ہے۔ ان زخموں کی بہترین وضاحت بڑے ریپلیکیٹو پولیمریز کے ذریعے غلط انضمام کے ذریعے کی جاتی ہے۔ RNase H2 ایک جینوم نگرانی انزائم ہے جو ربن نیوکلیوٹائڈ کو ہٹانے کے لیے ضروری ہے۔ آر نیس ایچ 2 نل چوہوں کے جینومک ڈی این اے میں ربن نیوکلیوٹائڈ کا جمع ہونا جینوم کی سالمیت کو برقرار رکھنے میں آر نیس ایچ 2 کمپلیکس کو متاثر کرتا ہے۔ یہ ربن نیوکلیوٹائڈ تبدیلیاں نقصان دہ ہونے کا امکان ہے، کیونکہ ان کا ربوز 2 '-ہائیڈروکسیل گروپ ملحقہ فاسفوڈیسٹر بانڈ کی ہائیڈرولیسس کے لیے حساسیت کو بڑھاتا ہے۔ دراصل، وہ رپورٹ کرتے ہیں کہ ربن نیوکلیوٹائڈز 1 ہر ~ 7.600 nt کو صفر خلیوں = 1.300.000 زخم فی خلیے میں شامل کیا جا رہا ہے۔ اس کی شدت کی وہی ترتیب ہے جس کی پیش گوئی یوکرائیوٹک ریپلیکیٹو پولیمریز کے ذریعہ ان وٹرو انضمام کی شرحوں سے کی گئی ہے۔ غلط طور پر شامل ربن نیوکلیوٹائڈ ڈی این اے کو نقصان پہنچاتا ہے۔ ایسا نہیں ہے کہ ربن نیوکلیوٹائڈز نقل کو نہیں روکتے ؛ بلکہ پول ڈی این اے ربن نیوکلیوٹائڈز کے ساتھ ٹیمپلیٹس کو برداشت کر سکتا ہے، جس میں عام ابتدائی ایمبریوجینیسیس ہوتا ہے۔ یہ مسئلہ ربن نیوکلیوٹائڈز کی ضرورت سے زیادہ تعداد کے ساتھ ظاہر ہوتا ہے۔ ڈی این اے نقصان رسپانس سگنلنگ شاید ربونیوکلیوٹائڈز کو شامل کرکے مشکل علاقوں میں یا دیگر نقصان دہ زخموں کے قریب شامل کرکے چالو کیا جاتا ہے۔ انہوں نے کروموسومل ریارنگمنٹ بھی پایا: ڈی این اے کے ٹوٹنے کی ابتدا مخالف ڈی این اے اسٹرینڈز پر آر این کی نقل کانٹے کے گرنے یا ہائیڈرولیسس سے ہو سکتی ہے۔ نیز، جنین میں ڈی این اے کے نقصان کے اشارے کی نمایاں سرگرمی پھیلاؤ کی پی 53-ثالثی کی روک تھام پیدا کر سکتی ہے جو کالعدم جنین کی مہلکیت میں معاون ثابت ہو سکتی ہے۔ صحت اور بیماری میں ربن نیوکلیوٹائڈ کی شمولیت۔ پچھلے مطالعات میں صرف دو سیاق و سباق کی اطلاع دی گئی ہے جہاں ربن نیوکلیوٹائڈز کی مستحکم شمولیت ہوتی ہے: 1) ایس پومبے میں ڈائربنیوکلیوٹائڈز ہومولوگس ریکومبینیشن شروع کرنے کا اشارہ ہو سکتا ہے۔ 2) ایم ٹی ڈی این اے (ماؤس اور ہیلا خلیات) میں ربنیوکلیوٹائڈز۔ نیوکلیئر جینوم میں شامل ربن نیوکلیوٹائڈز کی کم سطح کو برداشت کیا جا سکتا ہے۔ دراصل، غیر معمولی نیوکلک ایسڈ سبسٹریٹس، جو مرمت کے راستوں سے پیدا ہوتے ہیں غیر-RNaseH2 انحصار (آئکارڈی-گوٹیئرس سنڈروم میں RNaseH2 سرگرمی میں کمی کی وجہ سے) کے بارے میں سوچا جاتا ہے کہ وہ پیدائشی مدافعتی ردعمل کو چلاتے ہیں۔ متبادل طور پر، ربن نیوکلیوٹائڈز ڈی این اے نقصان رسپانس سگنلنگ کو جنم دے سکتے ہیں جو خود انٹرفیرون کی پیداوار کو متحرک کر سکتا ہے۔ ربن نیوکلیوٹائڈز ممالیہ کے خلیے کے لیے انتہائی نقصان دہ ہو سکتے ہیں، جس سے جینوم میں عدم استحکام پیدا ہوتا ہے، اور یہ کہ RNaseH2 جینومک ڈی این اے کی سالمیت کو یقینی بنانے کے لیے ایک اہم انزائم ہے۔ یہ اس راستے (راستوں) کے بارے میں بھی توجہ اور دلچسپی کا مطالبہ کرتا ہے جو جینومک ڈی این اے سے ربنیوکلیوٹائڈز کو ہٹاتا ہے، ربنیوکلیوٹائڈز سے پیدا ہونے والے ڈی این اے نقصان کی جگہ اور نوعیت، اور جینوم میں ربنیوکلیوٹائڈز کی تقسیم۔ یہ جان کر، یہ جینومک ڈی این اے میں آر این کے پیتھولوجیکل اور فزیالوجیکل کرداروں کے بارے میں تفہیم حاصل کر سکتا ہے، جو نیوکلک ایسڈ سے چلنے والی آٹو امیونٹی اور کارسنوجینیسیس دونوں کے لیے اہمیت کا حامل ہے۔ مزید پڑھنے کے حوالہ جات بیرونی روابط جین ریویوز/این سی بی آئی/این آئی ایچ/یو ڈبلیو انٹری آن آئکارڈی-گوٹیئرس سنڈروم جینز چوہوں میں تبدیل شدہ انسانی پروٹین