Αr15 RNA
αr15 بیکٹیریل چھوٹے غیر کوڈنگ RNAs کا ایک خاندان ہے جس کے نمائندے rhizobiales آرڈر سے α-پروٹوبیکٹیریا کے ایک وسیع گروپ میں ہیں۔ اس خاندان کے پہلے ارکان (ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر سی 15 سی 2) سینورہیزوبیم میلیلوٹی 1021 کروموسوم (سی) کے اسی انٹرجینک ریجن (آئی جی آر) میں مل کر ترتیب دیے گئے تھے۔ مزید ہومیولوجی اور ڈھانچے کے تحفظ کے تجزیے نے کئی نائٹروجن فکسنگ سمبائیوٹک ریزوبیا میں مکمل لمبائی ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 ہومیولوگس کی نشاندہی کی ہے۔ آر۔ لیگیومینوسارم بی وی۔ ویکیہ، آر۔ لیگیومینوسارم بی وی۔ ٹرائیفولی، آر ایٹلی، اور کئی میسوریزوبیئم پرجاتیوں)، ایگروبیکٹیریم پرجاتیوں سے تعلق رکھنے والے پودوں کے پیتھوجینز میں (یعنی۔ اے۔ ٹیومیفیسینس، اے۔ وائٹس، اے۔ ریڈیوبیکٹر، اور ایگروبیکٹیریم ایچ 13) کے ساتھ ساتھ بروسیلا پرجاتیوں (بی۔ اوویس، بی۔ کینس، بی۔ ایبرٹس اور بی۔ مائکروٹس، اور بی۔ میلیٹینسیس کے کئی بائیوورز) کے وسیع میدان عمل میں۔ ایس ایم آر 15 سی 1 (115 این ٹی) اور ایس ایم آر 15 سی 2 (121 این ٹی) ہومولوگس بھی ریزوبیئم اور ایگروبیکٹیریم پرجاتیوں کے اسی آئی جی آر خطے کے اندر مل کر انکوڈ کیے گئے ہیں، جبکہ بروسیلا پرجاتیوں میں αr15C لوکی کروموسوم I کے آئی جی آر میں پھیلے ہوئے ہیں۔ مزید برآں، اس تجزیے میں مذکور نائٹروجن فکسنگ α-پروٹوبیکٹیریا کی ایکسٹرا کروموسومل نقلوں اور بروسیلا پرجاتیوں کے کروموسوم II میں ایک تیسرے αr15 لوکی کی بھی نشاندہی کی گئی۔ αr15 RNA انواع 99-121 nt لمبی ہیں (ٹیبل 1) اور تین اسٹیم لوپس (شکل 1) پر مشتمل ایک اچھی طرح سے متعین مشترکہ ثانوی ڈھانچہ کا اشتراک کرتی ہیں۔ αr15 خاندان کی نقل کو α-پروٹوبیکٹیریل جینومز (شکل 5) کے انٹرجینک علاقوں (آئی جی آر) کے اندر قابل شناخت پروموٹر اور ٹرانسکرپشن کے خاتمے کے دستخطوں کے ساتھ آزاد ٹرانسکرپشن یونٹوں کے ذریعے انکوڈ کردہ ٹرانس ایکٹنگ ایس آر این اے کے طور پر درج کیا جا سکتا ہے۔ دریافت اور ساخت ایس ایم آر 15 سی 1 وائی ایس ایم آر 15 سی 2 ایس آر این اے کو ڈیل ویل اور دیگر نے حوالہ ایس میلیلوٹی 1021 تناؤ (http://iant.toulouse.inra.fr/bacteria/annotation/cgi/rhime.cgi) کے انٹرجینک علاقوں (آئی جی آر) میں کمپیوٹیشنل تقابلی جینومک نقطہ نظر کے نتیجے میں بیان کیا تھا۔ اگرچہ ایس ایم آر 15 سی 1 وائی ایس ایم آر 15 سی 2 کی بنیادی نیوکلیوٹائڈ ترتیب میں اعلی مماثلت (84 فیصد شناخت) دکھائی گئی، لیکن ہر ایس آر این اے کے لیے مخصوص تحقیقات تیار کی جا سکتی ہیں جو مختلف سائز اور اظہار پروفائلز کی نقل کا پتہ لگاتی ہیں۔ ٹی اے پی پر مبنی 5 '-آر اے سی ای تجربات نے ایس میلیلوٹی 1021 جینوم (http://iant.toulouse.inra.fr/bacteria/annotation/cgi/rhime.cgi) میں ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 ٹرانسکرپشن اسٹارٹ سائٹس (ٹی ایس ایس) کا نقشہ بنایا۔ ایس ایم آر 15 سی 1 ٹی ایس ایس کو کروموسومل پوزیشن 1698731 این ٹی اور ایس ایم آر 15 سی 2 کے ٹی ایس ایس کو این ٹی 1698937 میں نقشہ بنایا گیا تھا۔ 3 '-اینڈز کو بالترتیب 1698617 این ٹی اور 1698817 این ٹی پر واقع سمجھا گیا تھا، جو ایک حقیقی رو-آزاد ٹرمینیٹر (شکل 5) کے مسلسل یو ایس اسٹریچ کے آخری باقیات سے ملتا جلتا ہے۔ متوازی اور بعد کے مطالعات، جن میں ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 نقل کو ایس آر اے 41 یا ایس ایم 3/ایس ایم 3 کی دو کاپیاں کہا جاتا ہے، نے آزادانہ طور پر ایس میلیلوٹی اور اس کے قریب سے متعلق تناؤ 2011 میں ان ایس آر این اے کے اظہار کی تصدیق کی۔ ایس میلیلوٹی 2011 کے چھوٹے آر این اے فریکشن (50-350 این ٹی) کی حالیہ گہری ترتیب پر مبنی خصوصیت نے بھی ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کے اظہار کو ظاہر کیا، جسے یہاں بالترتیب ایس ایم ایل سی 411 اور ایس ایم ایل سی 412 کہا جاتا ہے، جس میں مکمل لمبائی کے نقل کے 5 '-اور 3'-سروں کی نقشہ سازی بنیادی طور پر ڈیل ویل ایٹ ال کی طرح ہی ہے۔ ایس میلیلوٹی 1021 کروموسوم میں۔ تاہم، اس مطالعے میں 1698948 کی پوزیشن پر ایس ایم آر 15 سی 2 کے لیے ایک اضافی ٹی ایس ایس کی نشاندہی کی گئی۔ ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کے نیوکلیوٹائڈ کے سلسلے کو ابتدائی طور پر آر فیم ڈیٹا بیس (ورژن 10.0 ؛ http://rfam.xfam.org) کے خلاف تلاش کرنے کے لیے استفسار کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ اس تلاش سے دونوں نقل کی جزوی ہم آہنگی کا انکشاف ہوا، جو دوسرے ہیئر پن اور رو-آزاد ٹرمینیٹر تک محدود تھی، جو کہ آر این اے کے آر ایف 00519 خاندان کو ایس ایچ بی (http://rfam.xfam.org/family/RF00519) کے نام سے جانا جاتا ہے۔ تاہم، اس ڈیٹا بیس میں مکمل لمبائی والے ایس آر این اے کے کوئی ساختی ہومولوگ نہیں پائے گئے۔ دونوں S.melilloti αr15 sRNAs کو اس وقت دستیاب تمام بیکٹیریل جینومز (20 اپریل 2011 کو 1,615 ترتیبات ؛ https://www.ncbi.nlm.nih.gov) کے خلاف ڈیفالٹ پیرامیٹرز کے ساتھ بھی BLAST کیا گیا تھا۔ استفسار کی ترتیب (78-89% مماثلت) میں اہم ہم آہنگی ظاہر کرنے والے علاقوں کو انفیرنل (version1.0) (شکل 2) کا استعمال کرتے ہوئے بیج کی صف بندی سے کوویرینس ماڈل (CM) بنانے کے لیے نکالا گیا تھا۔ اس سی ایم کو موجودہ بیکٹیریل جینومک ڈیٹا بیس میں αr15 خاندان کے نئے اراکین کی مزید تلاش میں استعمال کیا گیا تھا۔ نتائج کا دستی طور پر معائنہ کیا گیا تاکہ خاندان کے لیے متفقہ ثانوی ڈھانچے کا اندازہ لگایا جا سکے (شکل 1 اور شکل 2)۔ حاصل شدہ پیش گوئیوں کا موازنہ کرتے ہوئے لوکارنیٹ پروگرام کے ساتھ اتفاق رائے کے ڈھانچے کی بھی آزادانہ طور پر پیش گوئی کی گئی تھی۔ انفیرنل کا استعمال کرتے ہوئے سی ایم کے ساتھ پائے جانے والے ترتیبات کے دستی معائنے نے فائیلوجنیٹک طور پر متعلقہ α-پروٹوبیکٹیریل جینومز میں 38 حقیقی ہومولوگوں کو تلاش کرنے کی اجازت دی۔ 26 قریب ترین αr15 خاندان کے افراد ایس میللوٹی کے علاوہ مندرجہ ذیل پرجاتیوں کے لیے ایک ہی کروموسومل آئی جی آر میں ٹینڈم کے طور پر پائے گئے: سینورہیزوبیم پرجاتیوں: ایس میڈیکی اور ایس فریڈی ریزوبیم پرجاتیوں: دو آر لیگیومینوسارم ٹرائیفولی تناؤ (ڈبلیو ایس ایم 304 اور ڈبلیو ایس ایم 35)، دو آر ایٹلی تناؤ سی ایف این 42 اور سی آئی اے ٹی 652، حوالہ آر لیگیومینوسارم بی وی۔ ویسیا 3841 تناؤ ایگروبیکٹیریم پرجاتیوں: اے۔ وائٹس، اے۔ ٹیومیفیشینز، اے۔ ریڈیوبیکٹر اور اے۔ ایچ۔ 13 ان تمام ترتیبات نے نمایاں بٹ اسکور اور انفیرنل ای-ویلیوز (1.71e-28-2.03e-20) دکھائے۔ تاہم، تمام مذکور α-پروٹوبیکٹیریل جینومز کی پلازمیڈک کاپیاں اور بروسیلا پرجاتیوں (بی اوویس، بی کینس، بی ایبرٹس، بی مائکروٹس، اور بی میلیٹینسیس کے کئی بائیوورز) کے ذریعے انکوڈ کیے گئے ان αr15 اراکین کی پلازمیڈک کاپیاں، بروسیلا اینتھروپی اور میسورہیزوبیم نے (1e-19 اور 8e-03) کے درمیان اعلی ای-ویلیوز کو لوٹیش کیا لیکن بہت کم بٹ اسکور۔ اظہار اور عملی معلومات متعدد مطالعات نے مختلف حیاتیاتی حالات کے تحت ایس میلیلوٹی 1021 میں ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کے اظہار کا جائزہ لیا ہے۔ ٹی وائی میں بیکٹیریا کی نشوونما، کم سے کم میڈیم (ایم ایم) اور لیوٹولین-ایم ایم شوربے اور اینڈو سمبائیوٹک بیکٹیریا (یعنی۔ پختہ سمبائیوٹک الفالفا نوڈلز)، نمک کا زیادہ دباؤ، آکسیڈیٹیو تناؤ اور سرد اور گرم صدمے کا دباؤ۔ نتائج نے دونوں ایس آر این اے کے لیے مختلف اظہار پروفائلز دکھائے، جو ایک ہی آئی جی آر کے اندر آزاد اور مختلف طور پر ریگولیٹڈ ٹرانسکرپشن یونٹس میں ان کی تنظیم کے مطابق ہیں (شکل 4 اور شکل 5)۔ آزاد زندگی گزارنے والے بیکٹیریا میں ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کا اظہار نشوونما پر منحصر لیکن مخالف انداز میں پایا گیا۔ جبکہ ایس ایم آر 15 سی 1 مستحکم مرحلے میں جمع ہوتا ہے ایس ایم آر 15 سی 2 آزاد زندہ بیکٹیریا میں ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کا اظہار نشوونما پر منحصر لیکن مخالف انداز میں پایا گیا۔ جبکہ ایس ایم آر 15 سی 1 مستحکم مرحلے میں جمع ہوتا ہے، ایس ایم آر 15 سی 2 ترجیحی طور پر لاگ بیکٹیریل کلچرز میں ظاہر ہوتا ہے۔ مزید برآں، شلوٹر اور دیگر۔ حال ہی میں کولڈ شاک اسٹریس کے تحت ایس ایم آر 15 سی 2 کے اپ ریگولیشن کو بیان کیا گیا ہے، جبکہ ایس ایم آر 15 سی 1 کے اظہار میں درجہ حرارت میں کمی کے کوئی اثرات نہیں دیکھے گئے۔ ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2 کے نمو پر منحصر مخالف اظہار پروفائلز، ان کے ایگروبیکٹیریم ٹیومیفیشین ہم منصبوں میں نہیں دیکھے گئے ہیں جنہیں بالترتیب اے بی سی آر 1 اور اے بی سی آر 2 کہا جاتا ہے۔ (اس کام میں اے ٹی آر 15 سی 1 اور اے ٹی آر 15 سی 2)۔ اے بی سی آر 1 اور اے بی سی آر 2 بیک وقت متاثر ہوتے ہیں اور دونوں مستحکم مرحلے میں جمع ہوتے ہیں۔ یہ طرز عمل اس حقیقت سے اتفاق کرتا ہے کہ اے بی سی آر 1 اور اے بی سی آر 2 میں پروموٹر جیسی ترتیبات ایک جیسی ہیں، یہ ایس ایم آر 15 سی 2 سے بہت ملتی جلتی ہیں، لیکن ایس ایم آر 15 سی 1 کے پروموٹر ترتیب سے نہیں (پروموٹر تجزیہ دیکھیں)۔ مزید برآں، اے بی سی آر جینز کے فنکشن کے لیے پہلے نقطہ نظر سے پتہ چلتا ہے کہ یہ ایس آر این اے ایچ ایف کیو پر منحصر انداز میں متعلقہ اے بی سی ٹرانسپورٹر جینز کے ڈاؤن ریگولیشن کے ذریعے جی اے بی اے اپ ٹیک سسٹم کو خاموش کر دیتے ہیں۔ جی اے بی اے ان پودوں کے اشاروں میں سے ایک ہے جو پودوں اور بیکٹیریا کے درمیان کچھ تعاملات میں ریزوبیکٹیریا کے ذریعے پہچانے جاتے ہیں۔ اس طرح، یہ نتائج، پودوں کے دفاعی میکانزم کو ختم کرنے کے لیے اے۔ ٹیومیفیشینز کے ذریعے استعمال کیے جانے والے طریقے کے طور پر جی اے بی اے اپ ٹیک سسٹم کی ترکیب کو بند کرنے کی طرف اشارہ کرتے ہیں۔ حالیہ شریک امیونوپریسیپیٹیشن تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ دونوں، ایس ایم آر 15 سی 1 اور ایس ایم آر 15 سی 2، ایس میلیلوٹی آر این اے چیپرون ایچ ایف کیو کو باندھتے ہیں، اور اس بیکٹیریم میں ان نقل کے لیے بھی ایک کردار کی حمایت کرتے ہیں کیونکہ ٹرانس ایکٹنگ اینٹی سینس riboregulators.They کو بھی غذائی اجزاء کو ٹھیک کرنے کے لیے دکھایا گیا تھا۔ پروموٹر تجزیہ تمام αr15 لوکی میں قابل شناخت σ70 پر منحصر پروموٹر ہوتے ہیں جو-35/- 10 متفقہ موٹف سی ٹی ٹی جی اے سی-این 17-سی ٹی اے ٹی اے ٹی کو ظاہر کرتے ہیں، جو پہلے پروٹوبیکٹیریا کے α-ذیلی گروپ میں کئی دیگر نسلوں کے درمیان وسیع پیمانے پر محفوظ دکھایا گیا ہے۔ ان پروموٹر علاقوں کی ایک سے زیادہ ترتیب کی صف بندی سے پتہ چلتا ہے کہ تمام αr15 لوکی میں ٹرانسکرپشن اسٹارٹ سائٹ کے اوپر کی طرف 80 بی پی تک پھیلی ہوئی ایک محفوظ ترتیب کا پھیلاؤ ہے جس میں صرف ایس میلیلوٹی، S.fredii اور ایس میڈیکی αr15C1 پروموٹرز کے استثناء ہیں۔ ٹرانسکرپشن کے دیگر معروف عوامل کے لیے بائنڈنگ سائٹس کی شناخت کے لیے ہم نے ریگ پریڈیکشن (http://regpredict.lbl.gov/regpredict/help.html) کے فراہم کردہ فاسٹا سیکوینسز کا استعمال کیا، اور ریگولون ڈی بی (http://regulondb.ccg.unam.mx) کے فراہم کردہ پوزیشن ویٹ میٹرکس (پی ایس ڈبلیو ایم) کا استعمال کیا۔ ہم نے اتفاق رائے/پیٹرسر پروگرام کا استعمال کرتے ہوئے ریگ پیشن گوئی کے سلسلے سے ہر نقل کے عنصر کے لیے پی ایس ڈبلیو ایم بنایا، 14 اور 30 کے درمیان موٹف لمبائی کے لیے بہترین حتمی میٹرکس کا انتخاب کرتے ہوئے ہر میٹرکس کے لیے ایک حد اوسط ای-ویلیو <10E-10 قائم کیا گیا، (http://gps-tools2.its.yale.edu میں "تھریشولڈ اتفاق رائے" دیکھیں)۔ مزید برآں، ہم نے ایم ای ایم ای (http://meme.sdsc.edu/meme4_6_1/intro.html) کا استعمال کرتے ہوئے محفوظ شدہ نامعلوم نقشوں کی تلاش کی اور آرام دہ باقاعدہ تاثرات (یعنی۔ پیٹرن میچنگ) تمام αr15 ہومیولوگس پروموٹرز پر۔ ان مطالعات سے ایس۔ میلیلوٹی، S.fredii اور S. میڈیکی αr15C1 sRNAs اور αr15 خاندان کے باقی افراد کے درمیان ان کے اصل گروپ (ریزوبیئم یا ایگروبیکٹیریم) اور جینومک لوکیشن (αr15C1، αr15C2، αr15plasmid) (شکل 4) سے آزادانہ طور پر ضابطے میں فرق ظاہر ہوا۔ خاندان کے باقی افراد نے پوزیشن-36 اور-75 کے درمیان ایک بہت اچھی طرح سے محفوظ 30 بی پی طویل خطہ پیش کیا۔ یہ محفوظ علاقہ، ٹام ٹام کے ساتھ معروف ٹرانسکرپشن فیکٹر موفٹس کے ڈیٹا بیس کو استفسار کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، سب سے بہترین مماثل موفٹ ایس ایم بی 20667 _ Rhizobiales تھا، جو کہ ریگ ٹرانس بیس (http://regtransbase.lbl.gov/cgi-bin/regtransbase?page=main) سے تعلق رکھنے والا موفٹ تھا۔ ایس ایم بی 206667 ریزوبیلیز میں ڈائکاربوکسیلیٹ میٹابولزم ریگولیٹر کے لیے بائنڈنگ سائٹ سے مطابقت رکھتا ہے جس کا تعلق لیسی خاندان سے ہے۔ اس موٹف کی شناخت ٹارٹریٹ ڈی ہائیڈروجنیز کے کلسٹرنگ جینز، سوکینٹ سیمیالڈیہائیڈ ڈی ہائیڈروجنیز، ایس میلیلوٹی میں 3-ہائیڈروکسیسوبیوٹیریٹ ڈی ہائیڈروجنیز اور ہائیڈروکسی پائروویٹ آئسومیرس، اور کئی ریزوبیمز سے کی گئی تھی اور اسے پروموٹر صف بندی کے اعداد و شمار (شکل 5) میں نارنجی باکس کے ساتھ نشان زد کیا گیا ہے۔ مزید برآں، سینورہیزوبیم پرجاتیوں αr15C1 کے پروموٹر خطے میں ایم ای ایم ای کا استعمال کرتے ہوئے ایک اور محفوظ ترتیب پائی گئی۔ اس محفوظ علاقے کو ٹام ٹام کے ساتھ معروف ٹرانسکرپشن فیکٹر موفٹس کے ڈیٹا بیس کو استفسار کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا، اور بہترین مماثل موفٹ ایس ایم بی 20537 _ ریزوبیلیس (سرخ رنگ میں شکل 5) تھا، جو لیسی خاندان سے بھی ریزوبیلیس میں چینی کے استعمال کے ریگولیٹر کے لیے بائنڈنگ سائٹ کی شناخت کرتا ہے۔ جینومک سیاق و سباق αr15 خاندان کے زیادہ تر افراد کروموسومل آئی جی آر میں آزاد پروموٹروں سے نقل شدہ ٹرانس انکوڈڈ ایس آر این اے ہیں۔ αr15 اراکین میں سے بہت سے پڑوسی جینوں کی تشریح نہیں کی گئی تھی، اور اس طرح انہیں مزید دستی طور پر تیار کیا گیا تھا۔ نتیجے کے طور پر، ہم خاندان کے اراکین کو ان کے جینومک سیاق و سباق کے مطابق چار ذیلی گروپوں میں درجہ بندی کر سکتے ہیں۔ پہلے گروپ میں ریزوبیم، سینورہیزوبیم اور ایگروبیکٹیریم پرجاتیوں کے ٹینڈم αr15C1 اور αr15C2 لوکی ہیں۔ انہوں نے اوپر اور نیچے کی طرف جینوں میں بہت زیادہ تحفظ کی نمائش کی، جن کی پیش گوئی بالترتیب ایل آئی ایس آر ٹرانسکرپشنل ریگولیٹر اور اے ایس آر ٹرانسکرپشنل ریگولیٹر پروٹین کے لیے کی گئی ہے (شکل 5)۔ اس گروپ میں واحد رعایت ایس فریڈی کے لیے پائی گئی جس نے ایک بہت ہی مختلف جینومک سیاق و سباق پیش کیا۔ دوسرے گروپ میں بروسیلا پرجاتیوں (اضافی فائل 2) میں αr15CI1 لوکی شامل ہے، جس نے پہلے گروپ کے ساتھ جزوی مطابقت کے ساتھ ایک بہت اچھی طرح سے محفوظ جینومک سیاق و سباق (ایسپرٹیٹ امینو ٹرانسفرس اور LysR/نامعلوم ٹرانسکرپشنل ریگولیٹر) پیش کیا۔ ایک بہت ہی مختلف جینومک سیاق و سباق، جو زیادہ تر معاملات میں جزوی طور پر محفوظ بھی نہیں تھا، تمام پلاسمڈ سے پیدا ہونے والے αr15 لوکی (اضافی فائل 1) میں موجود تھا، جو متعین گروپ تین کو مربوط کرتا ہے، جہاں فلینکنگ جینز اے بی سی ٹرانسپورٹر پروٹین، ایکسائزنز یا ٹرانسپوز سے مطابقت رکھتے ہیں۔ بروسیلا پرجاتیوں میں αr15CI2 لوکی (اضافی فائل 3) گروپ چار کے مطابق ہے اور اس نے ایک اوپر اور نیچے کی طرف محفوظ جینومک سیاق و سباق پیش کیا، جس میں تمام خطوں کو یو ڈی پی-3-او-ہائیڈروکسی مائرسٹائل این-ایکٹیلگلوکوسامین ڈیسیٹیلیز اور جی ٹی پی اے ایس سیل ڈویژن پروٹین ایف ٹی ایس زیڈ کے لیے کوڈ کیا گیا۔ آخری گروپ بروسیلا گروپ (اضافی فائل 4) میں αr15CII لوکی سے مطابقت رکھتا ہے جہاں جینوں میں سے صرف ایک کو ہمیشہ گلائسین ڈیسائڈروجنیز کے طور پر بیان کیا جا سکتا ہے، دوسرے ایس آر این اے فلینکنگ پوزیشن کا زیادہ تر مقابلہ بروسیلا گروپ میں محفوظ ایک فرضی پروٹین کے ذریعے کیا گیا تھا جس میں کوئی ڈومین، موٹف یا جی او فنکشنل اینوٹیشن تفویض نہیں کیا جا سکتا تھا۔ اضافی فائلیں: αr15 فیملی پلازمیڈ کاپیز کا جینومک سیاق و سباق گراف: تصویر: بروسیلا گروپ میں αr15CI1 لوکی کا جینومک سیاق و سباق گراف: تصویر: بروسیلا گروپ میں αr15CI2 لوکی کا جینومک سیاق و سباق گراف: تصویر: بروسیلا گروپ میں αr15CII لوکی کا جینومک سیاق و سباق گراف: تصویر: Smbr15 3.png بروسیلا گروپ میں αr15CII لوکی کا جینومک سیاق و سباق گراف: تصویر: Smbr15 4.png حوالہ جات RNA