Actibind
ایکٹابائنڈ ایک ایکٹین بائنڈنگ فنگل ٹی (2)-آر نیس پروٹین ہے جو بلیک مولڈ ایسپرگلس نائجر کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے، جو بائیوٹیکنالوجی اور فوڈ ٹیکنالوجی میں استعمال ہونے والا ایک مائکروجنزم ہے۔ پودوں میں، ایکٹبائنڈ ایکٹین کو باندھتا ہے، جو سائٹوسکیلیٹن کا ایک اہم جزو ہے، جو پودوں کی جرگ کی نلیوں میں مداخلت کرتا ہے اور خلیوں کی نشوونما کو روکتا ہے۔ 15 مئی 2006 کو جرنل کینسر میں شائع ہونے والی تحقیق میں اس بات کے شواہد کی اطلاع دی گئی ہے کہ ایکٹبائنڈ میں اینٹی انجیوجینک اور اینٹی کارسنجینک خصوصیات ہیں۔ انسانی بڑی آنت کے کینسر، چھاتی کے کینسر اور میلانوما میں، ایکٹابائنڈ کی سطح میں اضافہ ان خلیوں کی ٹیومرجینک کالونیاں بنانے کی صلاحیت کو کم کرنے کے لیے پایا گیا۔ جانوروں کے ماڈلز میں، ایکٹابائنڈ میں اضافہ بڑی آنت کے کینسر سے حاصل ہونے والے ٹیومر، میٹاسٹیس اور خون کی شریانوں کی تشکیل کو روکتا ہے۔ ہیومن جینوم پروجیکٹ کی تکمیل کے دوران، RNaseT2 کے لیے جین انکوڈنگ، انسانی ایکٹابائنڈ نما پروٹین، کروموسوم 6 پر پایا گیا۔ ایکٹیویٹ کیوں؟ ACTIBIND بائیو کیمیکل لیبارٹریوں میں دلچسپی کا ایک انزائم ہونے کی وجہ یہ ہے کہ محققین نے مشاہدہ کیا ہے کہ ACTIBIND پلانٹ سیل کے انٹرا سیلولر ایکٹین نیٹ ورک میں مداخلت کرکے پولن ٹیوبوں کی لمبائی کو روکتا ہے۔ مخصوص ایکٹین نیٹ ورک ایکٹبینڈ کی روک تھام ایکٹین سے بھرپور سڈوپوڈز ہیں، جو مختلف قسم کے سیلولر افعال کے لیے اہم ہیں جن میں پودوں کی جرگ کی نلیوں کی لمبائی، ممالیہ خلیوں کی حرکت پذیری، اور سب سے اہم کینسر سیل فنکشن شامل ہیں۔ خاص طور پر کینسر کے خلیوں میں، ایکٹین سے بھرپور سڈوپوڈز کینسر کے حملے اور میٹاسٹیسس میں مدد کرتے ہیں۔ چونکہ ACTIBIND پودوں کے خلیوں میں ایکٹین نیٹ ورک میں مداخلت کرنے کے قابل تھا، محققین کا مقصد یہ معلوم کرنا تھا کہ آیا ACTIBIND ممالیہ کینسر کے خلیوں کی نشوونما کو بھی روک سکتا ہے۔ ایک اینٹی انجیوجینک ایکٹیوبینڈ کے طور پر ایکٹیوبینڈ، ایک ایکسٹرا سیلولر ربنیوکلیز (T2-RNase)، پر بائیو کیمیکل لیبارٹریوں میں بہت زیادہ تحقیق کی گئی ہے کیونکہ انزائم کی RNA مالیکیولز کو مؤثر طریقے سے ہائیڈرولائز/ڈیگریڈ کرنے کی صلاحیت ہے۔ آر این اے مالیکیولز کو الگ کرنے کی صلاحیت ACTIBIND کو ایک موثر اینٹی انجیوجینک بناتی ہے۔ انجیوجینیسیس موجودہ رگوں سے خون کی شریانوں کی نشوونما ہے، اور ٹیومر کی نشوونما میں اہم ہے۔ انجیوجینن کے ذریعہ متحرک آر آر این اے کی ترکیب کو بنیادی طریقہ کے طور پر شناخت کیا گیا ہے کہ ٹیومر نئی خون کی نالیاں بناتے ہیں، اور اس وجہ سے اینٹی انجیوجینک خصوصیات کا مقصد ان خون کی وریدوں کی نشوونما کو روکنا اور ٹیومر کو ممکنہ طور پر خون کی فراہمی کو روکنا ہے لہذا نشوونما کو سست کرنا ہے۔ انجیوجینن چھاتی، کولوریکٹل، گیسٹرک، پینکریٹک، گردے، جلد اور پھیپھڑوں کے کینسر میں اظہار کو بڑھاتا ہے۔ ACTIBIN ایکسٹرا سیلولر RNA مالیکیولز کو الگ کرکے انجیوجینسیس کو روکتا ہے جو ٹیومر سے وابستہ اینڈوتھیلیل خلیوں کو باندھنے اور ممکنہ طور پر چالو کرنے کے قابل ہوتے ہیں۔ ACTIBIND انجیوجینن کے ساتھ مقابلے کے ذریعے انجیوجینسیس میں بھی مداخلت کرتا ہے۔ ویو میں کیے گئے تجربات سے یہ ظاہر ہوا کہ سیل کی سطح کا ایکٹین ممکنہ طور پر اینڈوتھیلیل خلیوں میں ایکٹینڈ کا ہدف ہو سکتا ہے، جس کا مطلب ہے کہ ایکٹینڈ اور انجیوجینن کو سیل کی سطح کے ایکٹین کے لیے مقابلہ کرنے کی ضرورت ہوگی۔ اگر ACTIBIIND پہلے ایکٹین کے ساتھ بنتا ہے، تو یہ ایکٹین-انجیوجینن کی تشکیل کو روک دے گا جو کینسر سیل تنظیم میں انجیوجینن شروع کرتا ہے۔ یہ تجویز کیا گیا تھا کہ ACTIBIND خلیوں کی سطح ایکٹین سے بھرپور سڈوپوڈز کو باندھ کر اور انٹرا سیلولر ایکٹین نیٹ ورک میں مداخلت کرکے ایکسٹرا سیلولر سبسٹریٹس کے ذریعے کینسر کے خلیوں کے مواصلات، کالونیوں اور نقل و حرکت کو روکتا ہے۔ انسانوں میں ACTIBIND کے زیادہ ممکنہ اینٹی کارسنجینک اور اینٹی انجیوجینک اثرات کا تعین کرنے کے لیے مزید تحقیق کی جانی چاہیے۔ ACTIBIND ایک اینٹی کارسنجینک کے طور پر یہ ذیل میں بیان کردہ تجربات کے ذریعے بھی ثابت ہوا کہ ACTIBIND نہ صرف انجیوجینسیس بلکہ اپوپٹوسس کو بھی روکتا ہے۔ اپوپٹوسس کا استعمال جسم کی طرف سے ان ناپسندیدہ خلیوں کو ختم کرنے کے لیے کیا جاتا ہے جو مرمت سے بالاتر نقصان پہنچا چکے ہیں ؛ پروگرام شدہ سیل کی موت کا عمل۔ اپوپٹوسس کی بے قاعدگی بے قاعدہ ردعمل کو متحرک کر سکتی ہے جو کینسر کی نشوونما میں معاون ہے۔ وٹرو کینسر سیل کالونی کی تشکیل میں ایکٹبنڈ کے تجربات کینسر سیل کالونی کی تشکیل پر ایکٹبنڈ کے اثرات کا تعین کرنے کے لیے، 2006 میں کی گئی ایک تحقیق میں انسانی بڑی آنت، چھاتی اور اعضاء کے کینسر کے خلیات کو فلسک میں بڑھایا گیا اور پھر ایکٹبنڈ کی موجودگی یا عدم موجودگی میں کسی میڈیم میں چڑھایا گیا۔ ACTIBIND تمام کینسر کے خلیوں کی تشکیل کو سنجیدگی سے روکتا ہے جن کی جانچ کی گئی تھی۔ اس تجربے سے یہ بھی ظاہر ہوا کہ ACTIBIND کے بغیر کنٹرول پلیٹوں نے بہت سی سائٹوپلاسمک ایکسٹینشنز کو ظاہر کیا، اس کے مقابلے میں پلیٹوں میں روک دی گئی سیل ایکسٹینشن جس میں ACTIBIND موجود تھی۔ اس نے محققین کو مشورہ دیا کہ ACTIBIND درحقیقت ممالیہ خلیوں کی حرکت کو روکتا ہے۔ کینسر بلڈ ویسل فارمیشن کینسر (انجیوجینیسیس) میں خون کی شریانوں کی نشوونما پر ایکٹائنڈ کی صلاحیت کا بھی ان وٹرو میں تجربہ کیا گیا۔ جیسا کہ اوپر والے حصے میں بیان کیا گیا ہے، ACTIBIND ایکسٹرا سیلولر RNA مالیکیولز کو الگ کرکے انجیوجینسیس کو روکتا ہے جو ٹیومر سے وابستہ اینڈوتھیلیل خلیوں کو باندھنے اور ممکنہ طور پر چالو کرنے کے قابل ہوتے ہیں۔ لہذا، اس تجربے میں ACTIBIND کی موجودگی یا غیر موجودگی میں انسانی نال رگ اینڈوتھیلیل سیل انجیوجینیسیس جانچ کا استعمال کیا گیا۔ یہ طے کیا گیا کہ ACTIBIND کے ساتھ جانچ میں کنٹرول کے مقابلے میں خون کی شریانوں کی تشکیل کم تھی۔ ایکٹین-ایکٹبنڈ ایچ ٹی-29 خلیات، جو کینسر کی تحقیق میں عام طور پر استعمال ہونے والے بنیادی ٹیومر سے الگ تھلگ ایک سیل لائن ہے، کا ٹیسٹ 3 دن کے لیے ایکٹبنڈ کی موجودگی یا غیر موجودگی میں کیا گیا تاکہ یہ دیکھا جا سکے کہ ایکٹبنڈ کینسر سیل کے انٹرا سیلولر ایکٹین نیٹ ورک کو کس طرح متاثر کرتا ہے۔ خلیے میں خوردبین ایکٹین تنوں کو دیکھنے کے قابل ہونے کے لیے، امیونوسٹیننگ کا استعمال کیا گیا۔ ایچ ٹی-29 خلیوں نے اے سی ٹی آئی بی آئی این ڈی کی موجودگی یا عدم موجودگی کے لحاظ سے داغ کے مختلف نمونے پیش کیے۔ یہ طے کیا گیا کہ کنٹرول خلیوں میں، سرخ داغ کی وجہ سے خلیے کے وسط میں ایکٹین نیٹ ورک کا مشاہدہ کیا گیا۔ تاہم، ACTIBIND علاج شدہ خلیوں نے اندرونی طور پر کوئی فلوروسینٹ داغ نہیں دکھایا، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ اندرونی ایکٹین نیٹ ورک کو روکا گیا تھا۔ ویوو زینو گرافٹ ٹیومر ماڈل میں ACTIBIND تجربات ماؤس زینو گرافٹ کینسر ماڈل میں سیل لائن سے ماخوذ زینو گرافٹ کو امیونو ڈیفیشینٹ یا ہیومنائزڈ چوہوں میں ٹرانسپلانٹ کرنا شامل ہے۔ یہ انسانی کینسر کو بڑھانے اور علاج کے ساتھ تجربہ کرنے کے لیے ایک ماحول کو قابل بناتا ہے۔ اس مطالعے میں ایتھمک چوہوں میں ایچ ٹی-29 سے ماخوذ زینو گرافٹ ماؤس ماڈل کا استعمال کیا گیا، جس کا مطلب ہے کہ چوہے تھائمس اور ٹی خلیوں کی کمی کی وجہ سے امیونو ڈیفیشینٹ ہیں۔ تمام چوہوں کو قابل عمل ایچ ٹی-29 خلیوں کے ساتھ انجکشن کیا گیا تھا اور نصف چوہوں کو 42 دن تک روزانہ ایکٹائبنڈ دیا گیا تھا۔ اس کے بعد ٹیومر کی پیمائش تجربے کے اختتام پر سائز کے مطابق کی جائے گی۔ نتائج نے اس بات کا تعین کیا کہ ACTIBIND نے ایپیٹیلیل ٹشو میں HT-29 سے ماخوذ کینسر کی شرح نمو کو نمایاں طور پر کم کر دیا۔ اس کا تعین کرنے میں کامیاب رہا کیونکہ ACTIBIND علاج شدہ ٹیومر میں کینسر کے خلیات کو کمپیکٹ کیپسول میں الگ کیا گیا تھا اور کنٹرول کے خلیات سے چھوٹا تھا۔ انسانی میلانوما کی نشوونما کی روک تھام اس مطالعے میں میلانوما کے خلیوں کو ایتھمک چوہوں میں انجکشن کیا گیا اور پھر 30 دن تک ہر دوسرے دن یا تو ACTIBIND یا کنٹرول کے ساتھ علاج کیا گیا۔ کنٹرول گروپ کے تمام چوہوں میں میلانوما خلیوں کے انجیکشن کے 5 دن کے اندر ٹیومر بڑھ گئے، اس کے برعکس ACTIBIND علاج شدہ چوہوں نے ٹیومر کا کوئی ثبوت نہیں دکھایا۔ پہلی پیمائش 16 دنوں میں کی گئی تھی، جہاں کنٹرول گروپ میں چوہوں میں 100 ملی میٹر 3 کے اوسط حجم کے ساتھ ٹیومر تھے، علاج شدہ چوہوں کے مقابلے میں جن میں 10 ملی میٹر 3 کے اوسط زی کے ساتھ ٹیومر تھے۔ ریکارڈ کی گئی آخری پیمائش سے پتہ چلا کہ کنٹرول گروپ چوہوں میں ٹیومر 800 ملی میٹر 3 اوسط حجم اور 100 ملی میٹر 3 اوسط حجم تک بڑھ گئے۔ حوالہ جات پروٹین