Retinal waves
ریٹینل لہریں ایکشن پوٹینشل کے بے ساختہ پھٹ ہوتے ہیں جو ترقی پذیر ریٹنا میں لہر جیسے انداز میں پھیلتے ہیں۔ یہ لہریں چھڑی اور شنک کی پختگی سے پہلے اور بینائی سے پہلے ہوتی ہیں۔ ریٹنا لہروں سے آنے والے سگنلز ڈورسل لیٹرل جینیکولیٹ نیوکلئس (ڈی ایل جی این) اور پرائمری ویژول کورٹیکس میں سرگرمی کو چلاتے ہیں۔ خیال کیا جاتا ہے کہ لہریں پڑوسی خلیوں میں بے ترتیب سمتوں میں پھیلتی ہیں جن کا تعین ابتدائی ڈی پولرائزیشن کے بعد آنے والے ریفریکٹونیس کے ادوار سے ہوتا ہے۔ خیال کیا جاتا ہے کہ ریٹنا کی لہروں میں ایسی خصوصیات ہوتی ہیں جو ریٹنا میں خلیوں کے درمیان سرکٹس اور مطابقت پذیری کے ابتدائی رابطے کی وضاحت کرتی ہیں۔ ریٹنا لہروں کے صحیح کردار کے بارے میں اب بھی کافی بحث جاری ہے۔ کچھ کا کہنا ہے کہ لہریں ریٹینوجینکلیٹ راستوں کی تشکیل میں انسٹرکشنل ہیں، جبکہ دیگر کا کہنا ہے کہ یہ سرگرمی ضروری ہے لیکن ریٹینوجینکلیٹ راستوں کی تشکیل میں انسٹرکشنل نہیں ہے۔ دریافت ریٹنا کی نشوونما کے دوران برقی سرگرمی کے بے ساختہ جھرنوں کے وجود کا نظریہ پیش کرنے والے پہلے سائنسدانوں میں سے ایک کمپیوٹیشنل نیورو بائیولوجسٹ ڈیوڈ جے ولشا تھے۔ انہوں نے تجویز پیش کی کہ ملحقہ خلیات آپس میں جڑے ہوئے پری سنپیٹک اور پوسٹ سنپیٹک خلیوں کی تہوں کے ذریعے لہر جیسی تشکیل میں برقی سرگرمی پیدا کرتے ہیں۔ خیال کیا جاتا ہے کہ پری اور پوسٹسیناپٹک خلیوں کے قریبی دورانیے کے ذریعے پھیلنے والی سرگرمی کے نتیجے میں پری اور پوسٹسیناپٹک خلیوں کے مقابلے میں مضبوط برقی سرگرمی ہوتی ہے جو دور ہیں، جس کے نتیجے میں سرگرمی کمزور ہوتی ہے۔ ولشا نے سوچا کہ فائرنگ کی طاقت اور خلیوں کے مقام میں یہ فرق سرگرمیوں کی حدود کا تعین کرنے کا ذمہ دار ہے۔ پڑوسی خلیے سے پڑوسی خلیے میں فائرنگ کی پس منظر کی حرکت، خلیوں کے ایک بے ترتیب علاقے سے شروع ہوتی ہے اور پری اور پوسٹسیناپٹک دونوں تہوں میں حرکت کرتی ہے، ریٹینوٹوپک نقشے کی تشکیل کے لیے ذمہ دار سمجھی جاتی ہے۔ برقی سرگرمی کے جھرن کی نقل کرنے کے لیے، ولشا نے ایک کمپیوٹر پروگرام لکھا جس میں قبل از اور پوسٹسیناپٹک سیل تہوں کے درمیان برقی سرگرمی کی نقل و حرکت کا مظاہرہ کیا گیا۔ جسے ولشا "بے ساختہ برقی سرگرمی" کہتے ہیں اسے آج "ریٹنا ویوز" کہا جاتا ہے۔ اس خالص نظریاتی تصور سے، اطالوی سائنس دان لوسیا گیلی اور لیمبرٹو مافی نے ریٹنا کے گینگلیئن خلیوں میں برقی سرگرمی کا مشاہدہ کرنے کے لیے جانوروں کے نمونوں کا استعمال کیا۔ گیلی اور مافی سے پہلے، قبل از پیدائش نشوونما کے دوران ریٹنا گینگلیئن سیل کی سرگرمی کبھی ریکارڈ نہیں کی گئی تھی۔ گینگلیئن سرگرمی کا مطالعہ کرنے کے لیے، گیلی اور مافی نے برقی سرگرمی کو ریکارڈ کرنے کے لیے، جنین کے دنوں 17 اور 21 کے درمیان، قبل از وقت چوہے کے ریٹنا کا استعمال کیا۔ اس مطالعے کے لیے کئی الگ تھلگ، واحد خلیات استعمال کیے گئے۔ ریکارڈنگ سے پتہ چلتا ہے کہ خلیوں کی سرگرمی گینگلیئن خلیوں سے اتپریرک ہوئی تھی۔ گیلی اور مافی نے قیاس کیا کہ ریٹینل گینگلیئن خلیوں میں نظر آنے والی برقی سرگرمی ریٹینل سنپیٹک کنکشن کی تشکیل اور ریٹینل گینگلیئن خلیوں کے اعلی کولیکولس اور لیٹرل جینیکولیٹ نیوکلئس (ایل جی این) کے تخمینوں کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے۔ جیسے جیسے ریٹنا ویوز کا خیال قائم ہوا، نیورو بائیولوجسٹ کارلا شٹز نے لہر جیسی تشکیل میں ایکشن پوٹینشلز کی حرکت کو دیکھنے کے لیے کیلشیم امیجنگ اور مائیکرو الیکٹروڈ ریکارڈنگ کا استعمال کیا۔ کیلشیم امیجنگ اور مائیکرو الیکٹروڈ ریکارڈنگ کے بارے میں مزید معلومات کے لیے نیچے سیکشن دیکھیں۔ کیلشیم امیجنگ نے دکھایا کہ گینگلیئن خلیات ریٹینل لہروں کی تشکیل کا آغاز کرتے ہیں، ساتھ ہی ملحقہ امیکرائن خلیات، جو برقی سرگرمی کی نقل و حرکت میں حصہ لیتے ہیں۔ مائیکرو الیکٹروڈ ریکارڈنگ کے بارے میں یہ بھی سوچا گیا تھا کہ ایل جی این نیوران پڑوسی ریٹنا گینگلیئن خلیوں میں برقی سرگرمی کی لہر جیسی تشکیل سے چل رہے ہیں۔ ان نتائج سے یہ تجویز کیا گیا کہ برقی سرگرمی کی لہریں اسپاٹیوٹیمپورل سرگرمی کے نمونے کو چلانے کے لیے ذمہ دار ہیں اور قبل از پیدائش نشوونما کے دوران بصری نظام کی تشکیل میں بھی کردار ادا کرتی ہیں۔ ریچل وانگ ایک اور محقق ہیں جو ریٹنا لہروں کے مطالعہ میں شامل ہیں۔ وانگ نے قیاس کیا کہ ریٹنا کے اندر برقی سرگرمی، قبل از پیدائش نشوونما کے دوران ریٹنا کے تخمینوں کی تنظیم میں شامل ہے۔ مزید خاص طور پر، برقی سرگرمی ڈی ایل جی این کی علیحدگی اور تنظیم کے لیے ذمہ دار ہو سکتی ہے۔ وانگ نے یہ بھی قیاس کیا کہ بصری نظام کے مخصوص حصوں، جیسے کہ آکولر ڈومینس کالمز، کو مکمل طور پر تیار کرنے کے لیے کسی نہ کسی طرح کی برقی سرگرمی کی ضرورت ہوتی ہے۔ اس کا یہ بھی خیال تھا کہ ریٹنا لہروں کے ذریعے انکوڈ کردہ اشاروں کا پتہ لگانے کے قابل ہونے سے سائنس دانوں کو یہ بہتر طور پر سمجھنے میں مدد مل سکتی ہے کہ ریٹنا کی لہریں ریٹنا کی نشوونما میں کس طرح کردار ادا کرتی ہیں۔ کچھ حالیہ تحقیقات جو کی جا رہی ہیں وہ نشوونما کے دوران ریٹنا لہروں کے انکوڈ شدہ اشاروں کو بہتر طور پر سمجھنے کی کوشش کر رہی ہیں۔ ایولین سرناگور کی طرف سے کی گئی تحقیق کے مطابق، یہ خیال کیا جاتا ہے کہ ریٹنا لہریں نہ صرف ان کی بے ساختہ برقی سرگرمی کے لیے ضروری ہیں بلکہ ریٹین کے راستوں کو زیادہ بہتر بنانے کے لیے اسپاٹیوٹیمپورل پیٹرن کی تشکیل میں استعمال ہونے والی معلومات کو انکوڈنگ کرنے کے لیے بھی ذمہ دار ہیں۔ اس تصور کی جانچ کے لیے کچھووں کا استعمال کرتے ہوئے، سرناگور نے ریٹنا کی نشوونما کے مختلف مراحل کے دوران ریٹنا کی لہروں میں تبدیلی کو دیکھنے کے لیے کیلشیم امیجنگ کا استعمال کیا۔ مطالعہ سے، نشوونما کے ابتدائی مراحل میں، ریٹنا کی لہریں تیزی سے اور بار بار چلتی ہیں، جس کی وجہ سے ریٹنا میں ایکشن پوٹینشل کی ایک بڑی لہر سمجھی جاتی ہے۔ تاہم، جیسے جیسے کچھوے کی نشوونما مکمل ہونے کے قریب آتی ہے، ریٹنا کی لہریں آہستہ آہستہ پھیلنا بند ہو جاتی ہیں اور اس کے بجائے ریٹنا گینگلیئن خلیوں کے غیر متحرک جھنڈ بن جاتی ہیں۔ یہ خیال کیا جاتا ہے کہ یہ ریٹنا کی مسلسل نشوونما کے دوران GABA کے حوصلہ افزا سے روک تھام میں تبدیل ہونے کا نتیجہ ہے۔ کیا نشوونما کے دوران ریٹنا لہر کی تشکیل میں تبدیلی کچھووں کے لیے منفرد ہے، اب بھی بڑی حد تک نامعلوم ہے۔ دیگر نظاموں میں لہروں کا مشاہدہ خود بخود پیدا ہونا اور لہروں کا پھیلاؤ ترقی پذیر سرکٹس میں کہیں اور دیکھا جاتا ہے۔ ابتدائی نشوونما میں اسی طرح کی ہم آہنگ بے ساختہ سرگرمی ہپپوکیمپس، ریڑھ کی ہڈی، اور آڈیٹری نیوکلئی کے نیوران میں دیکھی گئی ہے۔ عصبی رابطوں کی تشکیل کرنے والی طرز کی سرگرمی اور ریٹنا سمیت متعدد نظاموں میں مطابقت پذیری کی کارکردگی کا کنٹرول پریسیناپٹک اور پوسٹسیناپٹک خلیوں کے درمیان تعامل کو سمجھنے کے لیے اہم ہے جو اعصابی نظام کے کام کے لیے ضروری عین مطابق روابط پیدا کرتے ہیں۔ نشوونما کے دوران، امیکرائن خلیوں اور دیگر ریٹنا انٹر نیوران کے ساتھ ساتھ گینگلیئن خلیوں کے درمیان مطابقت پذیری کے ذریعے مواصلات اہم ہے، جو ریٹنا کی لہروں کے لیے سبسٹریٹ کے طور پر کام کرتے ہیں۔ نشوونما کے تین مراحل ہیں جو ممالیہ جانوروں میں ریٹنا لہر کی سرگرمی کی خصوصیت رکھتے ہیں۔ پیدائش سے پہلے، لہروں کی ثالثی غیر سنپیٹک دھاروں کے ذریعے کی جاتی ہے، پیدائش سے لے کر پیدائش کے 10 دن تک کی مدت کے دوران لہروں کی ثالثی نیکوٹینک ایکٹیلکولین ریسیپٹرز پر کام کرنے والے نیورو ٹرانسمیٹر ایکٹیلکولین کے ذریعے کی جاتی ہے، اور تیسری مدت کے دوران، پیدائش کے 10 دن بعد سے 2 ہفتوں تک، لہروں کی ثالثی آئنوٹروپک گلوٹامیٹ ریسیپٹرز کے ذریعے کی جاتی ہے۔ کولینجک لہر کی مدت کے دوران کیمیائی مطابقت پذیری میں اسٹار برسٹ امیکرائن خلیات (ایس اے سی) شامل ہوتے ہیں جو دیگر ایس اے سی پر ایسیٹیلکولین جاری کرتے ہیں، جو پھر لہروں کو پھیلاتے ہیں۔ اس مدت کے دوران، کولینجک لہر کی پیداوار گیپ جنکشن کے ذریعے لہر کی پیداوار سے تجاوز کر جاتی ہے، جس میں سگنل کافی کم ہو جاتے ہیں۔ یہ سگنلنگ اندرونی پلیکسفارم پرت میں دو قطبی خلیوں کے کنکشن بنانے سے پہلے ہوتی ہے۔ ایس اے سی کو ریٹنا لہروں کا ذریعہ سمجھا جاتا ہے کیونکہ سنپیٹک جوش و خروش کے بغیر بے ساختہ انحطاط کا مشاہدہ کیا گیا ہے۔ کولینجک لہر کی سرگرمی بالآخر ختم ہو جاتی ہے، اور دو قطبی خلیوں میں گلوٹامیٹ کی رہائی لہریں پیدا کرتی ہے۔ دو قطبی خلیے امیکرائن اور گینگلیئن خلیوں کے مقابلے میں بعد میں فرق کرتے ہیں، جو لہر کے رویے میں اس تبدیلی کی وجہ ہو سکتے ہیں۔ کولینجک ثالثی سے گلوٹامیٹرجک ثالثی میں تبدیلی اس وقت ہوتی ہے جب دو قطبی خلیات گینگلیئن خلیوں کے ساتھ اپنا پہلا سنپیٹک کنکشن بناتے ہیں۔ گلوٹامیٹ، دو قطبی خلیوں میں موجود نیورو ٹرانسمیٹر، گینگلیئن خلیوں میں بے ساختہ سرگرمی پیدا کرتا ہے۔ دو قطبی خلیات کے امیکرائن اور گینگلیئن خلیوں کے ساتھ سنپیٹک تعلق قائم کرنے کے بعد بھی لہریں موجود رہتی ہیں۔ ریٹنا لہروں میں شامل اضافی سرگرمی میں درج ذیل شامل ہیں۔ بعض انواع میں، GABA گینگلیئن خلیوں میں پھٹنے کی تعدد اور مدت میں ایک کردار ادا کرتا دکھائی دیتا ہے۔ خلیوں میں تعاملات مختلف ٹیسٹ مضامین اور مختلف پختگی کی سطحوں پر مختلف ہوتے ہیں، خاص طور پر امیکرائن خلیوں کے ذریعہ ثالثی میں پیچیدہ تعاملات۔ تمام ٹیسٹ مضامین میں گیپ جنکشن کے ذریعے پھیلنے والی سرگرمی کا مشاہدہ نہیں کیا گیا ہے۔ مثال کے طور پر، تحقیق سے پتہ چلا ہے کہ فیرٹ ریٹنا گینگلیئن خلیات جوڑے نہیں ہوتے ہیں۔ دیگر مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ پوٹاشیم جیسے ایکسٹرا سیلولر ایکسائٹیٹری ایجنٹ لہر کے پھیلاؤ میں اہم کردار ادا کر سکتے ہیں۔ تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ امیکرائن اور گینگلیئن خلیوں کے سنپیٹک نیٹ ورک لہروں کی پیداوار کے لیے ضروری ہیں۔ وسیع پیمانے پر، لہریں پیدا ہوتی ہیں اور نسبتا طویل ترقیاتی مدت کے دوران جاری رہتی ہیں، جس کے دوران ریٹنا اور سنپیپس کے نئے سیلولر اجزاء شامل کیے جاتے ہیں۔ ریٹنا لہروں کے طریقہ کار میں تغیر خلیوں کے درمیان رابطوں میں تنوع اور ریٹنا میں عمل کی پختگی کا سبب بنتا ہے۔ لہروں کی سرگرمی کا نمونہ لہریں تصادفی طور پر پیدا ہوتی ہیں لیکن عمل کی صلاحیت کے پھٹنے کے بعد خلیوں میں ریفریکٹری پیریڈ کی وجہ سے مقامی طور پر محدود ہوتی ہیں۔ ایک لہر کو ایک جگہ پر پھیلانے کے بعد، اسے دوبارہ اسی جگہ پر نہیں پھیلایا جا سکتا۔ لہر سے متاثر ہونے والے ریفریکٹری علاقے تقریبا 40 سے 60 سیکنڈ تک چلتے ہیں۔ تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ ریٹنا کے ہر علاقے میں لہر پیدا کرنے اور پھیلانے کا مساوی امکان ہوتا ہے۔ ریفریکٹری پیریڈ رفتار (لہر کے محاذوں کے درمیان فی یونٹ وقت کا فاصلہ) اور پیریڈکٹی (لہر سے چلنے والے کیلشیم ٹرانزینٹس یا گینگلیئن سیل پرت میں کسی خاص نیوران میں ریکارڈ شدہ ڈی پولرائزیشن کے درمیان اوسط وقت کا وقفہ) کا بھی تعین کرتا ہے۔ ریفریکٹری خلیوں کی کثافت اس بات سے مطابقت رکھتی ہے کہ ریٹنا لہریں کتنی تیزی سے پھیلتی ہیں۔ مثال کے طور پر، اگر ریفریکٹری خلیوں کی تعداد یا کثافت کم ہے، تو پھیلاؤ کی رفتار زیادہ ہوگی۔ تجرباتی طریقہ کار لہروں کا تصور ریٹنا لہروں کو دیکھنے کے دو بنیادی طریقے کیلشیم امیجنگ اور ملٹی الیکٹروڈ صف کا استعمال ہیں۔ کیلشیم امیجنگ ریٹنا کے ایک بڑے حصے پر لہر کے نمونے کے تجزیے کی اجازت دیتی ہے (ملٹی الیکٹروڈ ریکارڈنگ سے زیادہ)۔ اس طرح کی امیجنگ نے محققین کو سپیٹیوٹیمپورل خصوصیات یا لہروں کے ساتھ ساتھ لہر کے طریقہ کار اور نشوونما میں افعال کی تحقیقات کرنے کی اجازت دی ہے۔ ریٹینل لہروں کو متاثر کرنے کے لیے فی الحال تین اہم تکنیکیں استعمال کی جاتی ہیں: فارماکولوجیکل مادوں کا انٹراوکولر انجیکشن جو لہر کے نمونوں کو تبدیل کرتا ہے، امیونوٹاکسن کا استعمال جو امیکرائن خلیوں کی کچھ کلاسوں کو ختم کرتا ہے، یا ناک آؤٹ ماؤس لائنوں کا استعمال جس نے بے ساختہ فائرنگ کے نمونوں کو تبدیل کیا ہے۔ کئی فارماکولوجیکل ایجنٹ ہیں جو ریٹنا کی سرگرمی میں خلل ڈالنے کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ لیٹرل جینیکیولیٹ نیوران کی باہر جانے والی سرگرمی کے علاوہ آنے والی ریٹنا کی سرگرمی کو روکنے کے لیے ٹیٹروڈوٹاکسن (ٹی ٹی ایکس) کو آپٹک ٹریکٹ کے قریب انجکشن کیا جا سکتا ہے۔ ایک کولینجک ایگونسٹ، ایپیبیٹائڈائن کے انٹراوکولر انجیکشن، ریٹنا کے تمام گینگلیئن خلیوں میں سے نصف میں بے ساختہ فائرنگ کو روکنے اور بقیہ نصف میں غیر متعلقہ فائرنگ کا سبب بننے کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ ریٹنا گینگلیئن سیل کی سرگرمی پر فارماکولوجیکل ایجنٹوں کے اثرات ایم ای اے یا کیلشیم امیجنگ کا استعمال کرتے ہوئے دیکھے جاتے ہیں۔ امیونوٹاکسن کا استعمال اسٹار برسٹ امیکرائن خلیوں کو نشانہ بنانے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔ اسٹار برسٹ امیکرائن سیل ریٹینل انٹر نیوران ہوتے ہیں جو کولینجک ریٹینل لہروں کے لیے ذمہ دار ہوتے ہیں۔ تیسرا طریقہ یہ ہے کہ ناک آؤٹ چوہوں کو تبدیل شدہ بے ساختہ فائرنگ کے نمونوں کے ساتھ استعمال کیا جائے۔ اس طریقہ کار کے لیے ماؤس کی سب سے عام لائن نیورونل نیکوٹینک ایکٹیلکولین ریسیپٹر بیٹا-2 سب یونٹ ناک آؤٹ (β2-nAChR-KO) ہے۔ β2-nAChR-KO چوہوں میں دیکھا گیا ہے کہ ان کی آنکھوں کے لیے مخصوص ریٹینوٹوپک ریفائنمنٹ میں کمی آئی ہے جو کہ ایپیٹبیٹائڈائن انجکشن کی طرح ہے اور ساتھ ہی کوئی باہمی لہریں نہیں ہیں، جیسا کہ کیلشیم امیجنگ اور ایم ای اے ریکارڈنگ کے ساتھ مشاہدہ کیا گیا ہے۔ نیورونل نشوونما میں متنازعہ کردار اس وقت بھی اس بارے میں کافی تنازعہ موجود ہے کہ آیا ریٹنا کی لہریں ریٹینوجینکولیٹ راستے میں آنکھ کے مخصوص تخمینوں کی تشکیل میں 'انسٹرکشنل' یا 'اجازت دینے والا' کردار ادا کرتی ہیں۔ فارماکولوجیکل ایجنٹوں کے انجیکشن آنکھوں کے مخصوص ریٹینوجینکولیٹ ان پٹ کی تشکیل کو روکتے ہیں، جو اس بات کی نشاندہی کرتے ہیں کہ ریٹنا کی لہریں تشکیل میں کچھ کردار ادا کرتی ہیں۔ β2-nAChR-KO چوہوں میں بے ساختہ فائرنگ کے تبدیل شدہ نمونے پائے گئے ہیں۔ یہ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ اگرچہ ناک آؤٹ لائنوں میں کیے گئے تجربات نے آج تک ریٹنا لہروں کے بارے میں کچھ چیزوں کی وضاحت کرنے میں مدد کی ہے، لیکن صرف عام جسمانی درجہ حرارت پر اور عام کیمیائی ماحول میں ویو میں کیے گئے تجربات ہی صحیح معنوں میں اس بات کا تعین کر سکتے ہیں کہ ناک آؤٹ جانوروں میں فائرنگ کا اصل نمونہ کیا ہے۔ انسٹرکٹو دلیل ریٹنا لہر کی سرگرمی اس مدت کے ساتھ موافق پائی گئی ہے جس میں آنکھ کے مخصوص ریٹینوجینکولیٹ پروجیکشن تشکیل پاتے ہیں۔ یہ عارضی اوورلیپ ایک وجہ تعلقات کے لیے ضروری ہوگا۔ جنین بلیوں میں ٹی ٹی ایکس انجیکشن نے آنکھ کے مخصوص ریٹینوجینکولیٹ پروجیکشنز کی تشکیل کو روکا، جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ آنکھ کی مخصوص تہوں کی تشکیل کے لیے نیورونل سرگرمی ضروری ہے۔ ایپیبیٹائڈائن کے ساتھ علاج کے بعد، مضبوط فائرنگ کے ساتھ ساتھ آنکھ کی مخصوص پرت کی تشکیل کی کمی کے باوجود ریٹنا گینگلیئن خلیوں کے بقیہ نصف میں باہمی فائرنگ کی کمی کو اس بات کے ثبوت کے طور پر ظاہر کیا جا سکتا ہے کہ لہریں ایک انسٹرکشنل کردار ادا کرتی ہیں۔ امیونوٹاکسن کے استعمال کے بعد کیلشیم امیجنگ کے مشاہدے سے پتہ چلتا ہے کہ کچھ باہمی تعلق والی فائرنگ اب بھی باقی ہے جہاں جوڑے ہوئے وولٹیج کلیمپ ریکارڈنگ نے باہمی تعلق والی فائرنگ میں نمایاں کمی ظاہر کی۔ بقیہ باہمی فائرنگ آنکھ کے مخصوص ریٹینوجینکلیٹ پروجیکشنز کی تشکیل کی وضاحت کر سکتی ہے جو پایا گیا تھا۔ کیلشیم امیجنگ اور ایم ای اے ریکارڈنگ کا استعمال کرتے ہوئے ان خلیوں میں کوئی باہمی تعلق نہیں دکھایا گیا ہے۔ اس کے بجائے، فائرنگ کی شرحوں میں کمی کا مشاہدہ کیا گیا ہے، اور ایسا لگتا ہے کہ ایک خلیے میں ڈی پولرائزیشن آس پاس کے خلیوں کو روکتی ہے۔ β2-nAChR-KO چوہوں کا تبدیل شدہ فائرنگ کا نمونہ بھی متنازعہ ہے کیونکہ اس بات کے کچھ شواہد ملے ہیں کہ ناک آؤٹ چوہوں میں اب بھی باہمی فائرنگ ہوتی ہے، جیسا کہ اگلے حصے میں تفصیل سے بتایا گیا ہے۔ اجازت دینے والی دلیل ریٹینل لہریں پائی گئی ہیں جب کہ آنکھ کے مخصوص ریٹینوجینکولیٹ راستے بنتے ہیں۔ تاہم، یہ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ آج تک زیر مطالعہ تمام انواع میں ریٹینل لہریں ان آنکھوں کے مخصوص راستوں کی تشکیل سے پہلے شروع ہوتی ہیں اور اس کے بعد جاری رہتی ہیں۔ یہ بھی نوٹ کیا گیا ہے کہ کچھ انواع جن میں ریٹنا لہروں کو دستاویزی شکل دی گئی ہے ان کے تخمینے ہیں جو عبور کیے گئے ہیں۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ ریٹنا لہریں موجود ہو سکتی ہیں اور آنکھ کے مخصوص آدانوں میں سبق آموز کردار ادا نہیں کرتیں۔ ریٹنا کی سرگرمی کو روکنے کے لیے فارماکولوجیکل مادہ کے استعمال سے ڈیٹا کو دیکھتے وقت کئی مسائل پر غور کیا جانا چاہیے۔ سب سے پہلے، ٹی ٹی ایکس کے ساتھ علاج کے طویل مدتی اثرات نامعلوم ہیں، کیونکہ کسی برقرار جانور میں طویل مدت تک ریٹنا کی سرگرمی کی نگرانی کرنا ابھی ممکن نہیں ہے۔ یہ نتیجہ کہ ٹی ٹی ایکس کے طویل مدتی انجیکشن نے رکاوٹ نہیں ڈالی اور اس کے بجائے محض آنکھ کی مخصوص پرت کی تشکیل میں تاخیر کی وضاحت اس کے بعد طویل مدت میں ریٹنا کی سرگرمی پر ٹی ٹی ایکس کے کم اثرات سے کی جا سکتی ہے۔ یہ اس دلیل کی تائید کرتا ہے کہ ریٹنا کی تمام سرگرمیوں کو روکنا آنکھ کے مخصوص پروجیکشن کی تشکیل کو روکتا ہے جس کا تعین ہونا باقی ہے۔ مزید برآں، چونکہ اسٹار برسٹ امیکرائن خلیوں کو مارنے کے لیے امیونوٹاکسن کا علاج آنکھوں کے مخصوص ریٹینوجینکولیٹ پروجیکشنز کی تشکیل میں کوئی فرق نہیں دکھاتا ہے جبکہ ایپیبیٹائڈائن کے ساتھ علاج ہوتا ہے، اس سے یہ تجویز کیا جا سکتا ہے کہ آنکھ کی مخصوص پرت کی تشکیل کے لیے کسی قسم کی ریٹنا کی سرگرمی ضروری ہے، لیکن ریٹنا کی لہروں کے لیے نہیں۔ ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ β2-nAChR-KO چوہوں میں اب بھی ریٹنا لہر کی مضبوط سرگرمی تھی، جو پہلے رپورٹ کی گئی تھی۔ تاہم، انہوں نے پایا کہ ریٹنا لہروں کو کولینجک ٹرانسمیشن وائلڈ ٹائپ چوہوں کے ڈسپلے کے بجائے ناک آؤٹ لائن میں گیپ جنکشن کا استعمال کرتے ہوئے پھیلایا گیا تھا۔ مزید پڑھنے کے لیے حوالہ جات جانوروں کی ترقیاتی حیاتیات انسانی آنکھ کی اناٹومی بصری نظام