EPSP synthase
5-اینولپیرویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ (ای پی ایس پی) سنتھس پودوں اور خرد حیاتیات کے ذریعہ تیار کردہ ایک انزائم ہے۔ ای پی ایس پی ایس کیمیائی رد عمل کو متحرک کرتا ہے: فاسفینولپیروویٹ (پی ای پی) + 3-فاسفو شیکیمیٹ (ایس 3 پی) فاسفیٹ + 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ (ای پی ایس پی) اس طرح، اس انزائم کے دو سبسٹریٹ فاسفینولپیروویٹ (پی ای پی) اور 3-فاسفوشیکیمیٹ ہیں، جبکہ اس کی دو مصنوعات فاسفیٹ اور 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ ہیں۔ یہ انزائم جانوروں کے جینوم میں موجود نہیں ہوتا ہے۔ یہ جڑی بوٹیوں جیسے گلائیفوسیٹ کے لیے ایک پرکشش حیاتیاتی ہدف پیش کرتا ہے۔ جینیاتی طور پر تبدیل شدہ فصلوں میں اس جین کا گلائیفوسیٹ مزاحم ورژن استعمال کیا گیا ہے۔ نامیات انزائم کا تعلق ٹرانسفرسز کے خاندان سے ہے، خاص طور پر وہ جو میتھائل گروپوں کے علاوہ ایرل یا الکائل گروپوں کو منتقل کرتے ہیں۔ اس انزائم کلاس کا منظم نام فاسفینولپیروویٹ ہے: 3-فاسفوشیکیمیٹ 5-O-(1-کاربوکسی وینائل)-ٹرانسفرس۔ عام استعمال میں دیگر ناموں میں شامل ہیں: 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ سنتھس، 3-اینولپیروویلشیکیمیٹ 5-فاسفیٹ سنتھس، 3-اینولپیروویلشیکیمک ایسڈ-5-فاسفیٹ سنتھس، 5 '-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ سنتھس، 5-اینولپیروویل-3-فاسفوشیکیمیٹ سنتھس، 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ سنتھس، 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفورک ایسڈ سنتھس، اینولپیروویلشیکیمیٹ فاسفیٹ سنتھس۔ ساخت ای پی ایس پی سنتھاز ایک مونومیرک انزائم ہے جس کی سالماتی کمیت تقریبا 46,000 ہے۔ یہ دو ڈومینز پر مشتمل ہے، جو پروٹین اسٹرینڈز سے جڑے ہوئے ہیں۔ یہ سٹرینڈ قبضے کے طور پر کام کرتا ہے، اور دونوں پروٹین ڈومینز کو قریب لا سکتا ہے۔ جب کوئی سبسٹریٹ انزائم سے جڑا ہوتا ہے، تو لگینڈ بانڈنگ انزائم کے دو حصوں کو فعال سائٹ میں سبسٹریٹ کے ارد گرد جکڑنے کا سبب بنتی ہے۔ گلائیفوسیٹ حساسیت کے مطابق ای پی ایس پی سنتھس کو دو گروپوں میں تقسیم کیا گیا ہے۔ کلاس I انزائم، جو پودوں اور کچھ بیکٹیریا میں موجود ہوتا ہے، کم مائکروملر گلائیفوسیٹ کے ارتکاز پر روکا جاتا ہے، جبکہ کلاس II انزائم، جو دوسرے بیکٹیریا میں پایا جاتا ہے، گلائیفوسیٹ کے ذریعے روک تھام کے خلاف مزاحم ہوتا ہے۔ شیکیمیٹ پاتھ وے ای پی ایس پی سنتھس بیکٹیریا، فنگی اور پودوں میں شیکیمیٹ پاتھ وے کے ذریعے خوشبودار امینو ایسڈ فینائلالینائن، ٹائروسائن، اور ٹرپٹوفین کی حیاتیاتی ترکیب میں حصہ لیتا ہے۔ ای پی ایس پی سنتھس صرف پودوں اور مائکرو حیاتیات کے ذریعہ تیار کیا جاتا ہے۔ اس کے لیے جین کوڈنگ ممالیہ جینوم میں نہیں ہے۔ کچھ جانوروں کے آنتوں کے پودوں میں ای پی ایس پی ایس ہوتے ہیں۔ رد عمل ای پی ایس پی سنتھس اس رد عمل کو متحرک کرتا ہے جو شیکیمیٹ-3-فاسفیٹ کے علاوہ فاسفینولپیروویٹ کو ایسیٹل جیسے ٹیٹراہیڈرل انٹرمیڈیٹ کے ذریعے 5-اینولپیروویلشیکیمیٹ-3-فاسفیٹ (ای پی ایس پی) میں تبدیل کرتا ہے۔ فعال جگہ میں بنیادی اور امینو ایسڈ پی ای پی کے ہائیڈروکسیل گروپ کے ڈیپروٹونیشن میں اور بالترتیب ٹیٹراہیڈرل انٹرمیڈیٹ سے متعلق پروٹون ایکسچینج مراحل میں شامل ہوتے ہیں۔ اس تعامل کے لیے انزائم کیینیٹکس کے مطالعے نے عمل کے ہر مرحلے کی مخصوص ترتیب اور توانائی کا تعین کیا ہے۔ جڑی بوٹیوں کا ہدف ای پی ایس پی سنتھس جڑی بوٹیوں کے گلائیفوسیٹ کا حیاتیاتی ہدف ہے۔ گلائیفوسیٹ ای پی ایس پی سنتھس کا ایک مسابقتی روک تھام ہے، جو ایک ٹرانزیشن اسٹیٹ اینالاگ کے طور پر کام کرتا ہے جو پی ای پی کے مقابلے میں ای پی ایس پی ایس-ایس 3 پی کمپلیکس سے زیادہ مضبوطی سے جڑا ہوتا ہے اور شیکیمیٹ راستے کو روکتا ہے۔ یہ بائنڈنگ انزائم کے اتپریرک کی روک تھام کا باعث بنتی ہے اور راستے کو بند کر دیتی ہے۔ آخر کار اس کے نتیجے میں خوشبودار امینو ایسڈ کی کمی سے جاندار کی موت ہو جاتی ہے جس کی جاندار کو زندہ رہنے کے لیے ضرورت ہوتی ہے۔ انزائم کا ایک ورژن جو دونوں گلائیفوسیٹ کے خلاف مزاحم تھا اور جو اب بھی پودوں کی مناسب نشوونما کو چلانے کے لیے کافی موثر تھا، مونسینٹو کے سائنسدانوں نے سی پی 4 () نامی ایگروبیکٹیریم تناؤ میں کافی آزمائش اور غلطی کے بعد اس کی نشاندہی کی۔ سی پی 4 کا تناؤ گلائیفوسیٹ کی پیداوار کی سہولت میں فضلہ سے بھرے کالم میں زندہ پایا گیا۔ سی پی 4 ای پی ایس پی سنتھس انزائم کو کئی جینیاتی طور پر تبدیل شدہ فصلوں میں تیار کیا گیا ہے۔ حوالہ جات مزید پڑھنے کے لیے ای سی 2.1 معروف ساخت کے انزائم