Photoacoustic flow cytometry
فوٹوکاسٹک فلو سائٹومیٹری یا پی اے ایف سی ایک بائیو میڈیکل امیجنگ کا طریقہ ہے جو فلو سائٹومیٹری انجام دینے کے لیے فوٹوکاسٹک امیجنگ کا استعمال کرتا ہے۔ خلیوں کا بہاؤ انفرادی سگنل ردعمل پیدا کرنے والے فوٹو اکوسٹک نظام سے گزرتا ہے۔ ان پٹ نمونے کی مقداری تشخیص پیدا کرنے کے لیے ہر سگنل کو شمار کیا جاتا ہے۔ روایتی بہاؤ سائٹومیٹری ایک لیمینار سنگل فائل اسٹریم میں خلیوں کا استعمال کرتا ہے جو پھر روشنی کے منبع سے گزرتا ہے۔ خلیوں سے روشنی کے بکھرنے کی مختلف مقدار کا استعمال نظام کو سیلولر سائز اور پیچیدگی کی مقدار طے کرنے کے قابل بناتا ہے جسے بالآخر نمونے کے اندر سیل کی ساخت کی مقدار میں واپس کیا جا سکتا ہے۔ فوٹوکاسٹک فلو سائٹومیٹری اسی طرح کے اصولوں پر کام کرتی ہے، لیکن سیلولر پیٹرن کو الگ کرنے کے لیے فوٹوکاسٹک سگنل کا استعمال کرتی ہے۔ مزید برآں، فلو سائٹومیٹری زبردست ایکس ویو تجزیہ فراہم کرتا ہے، لیکن اس کے خالص نظری ماخذ کی وجہ سے اس کی دخول کی گہرائی محدود ہے جس سے ان ویو تجزیہ محدود ہو جاتا ہے۔ متبادل طور پر، فوٹوکاسٹکس فلو سائٹومیٹری پر ایک فائدہ فراہم کر سکتا ہے کیونکہ یہ آپٹیکل سگنل کے بجائے ایک صوتی سگنل وصول کرتا ہے اور زیادہ گہرائی تک گھس سکتا ہے جیسا کہ آپریٹنگ اصولوں اور ریاضی میں مزید بحث کی گئی ہے۔ فوٹو اکوسٹک (پی اے) اثر الیگزینڈر بیل نے 1880 میں دریافت کیا تھا، یہ اس وقت ہوتا ہے جب ایک فوٹون ماخذ ایک الٹراسونک لہر پیدا کرنے والے آپٹک طور پر قبول کرنے والے مادے کے ذریعے جذب ہوتا ہے۔ پیدا ہونے والی الٹراسونک لہر کی طاقت جذب شدہ فوٹون کی شدت کا ایک فعل ہے، اور مادہ کی پیدائشی خصوصیات کو روشن کیا جاتا ہے۔ دلچسپی کا ہر مادہ ایک مخصوص طول موج پر فوٹونوں کو جذب کرتا ہے، اس کے نتیجے میں صرف کچھ مادہ فطری طور پر دی گئی طول موج پر پی اے سگنل پیدا کریں گے۔ مثال کے طور پر، ہیموگلوبن اور میلانین دو عام حیاتیاتی مادے ہیں جو 680 این ایم طول موج کی حد کے ارد گرد لیزر دالوں کے جواب میں مضبوط پی اے سگنل پیدا کرتے ہیں۔ پی اے کے لیے جذب سپیکٹرم مرئی برقی مقناطیسی سپیکٹرم کے اندر ہوتا ہے، جو پی اے امیجنگ کو غیر تابکار نوعیت کا بناتا ہے۔ مخصوص جذب سپیکٹرم پی اے امیجنگ کی ایک حد اور استحصال دونوں ہو سکتا ہے (ایپلی کیشنز میں مزید دیکھیں)۔ نظام عام طور پر ایک این ڈی: وائی اے جی (نیوڈیمیم ڈوپڈ یٹریم ایلومینیم گارنیٹ) یا ایل ای ڈی لیزر سسٹم کا استعمال کرتے ہیں جو دلچسپی کے حیاتیاتی ٹشو میں گھسنے کے لیے نبض کرتا ہے۔ ٹشو کے ساتھ رابطے میں آنے والی ہر نبض کے ساتھ، الٹراساؤنڈ لہر کی شکل میں ایک پی اے سگنل پیدا ہوتا ہے۔ یہ الٹراساؤنڈ لہر ٹشو کے ذریعے اس وقت تک پھیلتی ہے جب تک کہ یہ ایک لائن پیدا کرنے کے لیے الٹراساؤنڈ ٹرانسڈیوسر تک نہ پہنچ جائے۔ ہر اے لائن کا زیادہ سے زیادہ طول و عرض نکالا جاتا ہے اور اس کی قیمت کو وقت بمقابلہ طول و عرض کے گراف پر پلاٹ کیا جاتا ہے جو سائٹومیٹری گرافک تیار کرتا ہے۔ آپریٹنگ اصول اور ریاضی حرارت کی پیداوار فوٹو اکوسٹک فلو سائٹومیٹری فوٹو اکوسٹک اثر کے اصول پر کام کرتی ہے، جس کے تحت مرئی سپیکٹرم میں لیزر درجہ حرارت میں اضافہ پیدا کرتا ہے اور اس طرح تھرمل توسیع پیدا ہوتا ہے۔ پلسنگ لیزر کے لیے لیزر کی شدت کے سلسلے میں تھرمل توسیعی مساوات ذیل میں بیان کی گئی ہے۔ مرکوز مساوات کا جذب گتانک کہاں ہے، لیزر کی شدت ہے، لیزر پلس کی تعدد ہے، t وقت ہے۔ اسے یولر کے فارمولے کے ذریعہ طے شدہ سینوسائڈل فنکشن کے ایکسپونینشل اظہار کے طور پر بیان کیا گیا ہے۔ یہ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ لیزر کی دخول کی گہرائی پھیلنے والے نظام کے ذریعہ محدود ہوتی ہے، جو تابکاری کے حیاتیاتی ہدف سے پہلے ٹشو کے ذریعے تخفیف پر منحصر ہوتی ہے۔ فوٹوکاسٹک لہر کا تعلق نیچے پھر فوٹوکاسٹک سگنل کے لیے گرمی کے دباؤ کا تعلق قائم کرتا ہے۔ جہاں ρ مقامی تعلق کے ساتھ طے شدہ جزوی تفریق مساوات ہے، دلچسپی کے مادے میں آواز کی رفتار ہے، t وقت ہے، وقت اور خلا دونوں کی تقریب کے طور پر دباؤ ہے، β تھرمل توسیعی گتانک ہے، مخصوص حرارت کی صلاحیت ہے، اور اوپر بیان کردہ حرارت کی مساوات کا جزوی تفریق ہے۔ مساوات کا بائیں رخ دباؤ لہر مساوات کو بیان کرتا ہے جو الٹراسونک دباؤ لہر مساوات کے ماڈلنگ کے لیے اخذ کیا گیا ہے۔ مساوات کا دایاں رخ حرارت کی پیداوار اور تھرمل توسیع کے تعلقات کا تعین کرتا ہے جس کے نتیجے میں دباؤ کی لہر پیدا ہوتی ہے۔ جبکہ حقیقت ایک سہ جہتی لہر پیدا کرتی ہے جو ٹشو کے ذریعے پھیلتی ہے، پی اے ایف سی کے مقاصد کے لیے، درکار معلومات صرف ایک جہتی تجزیہ سے متعلق ہوتی ہے۔ ذیل میں پلسڈ لیزر کی وجہ سے یک جہتی حل دکھایا گیا ہے۔ جذب گتانک کہاں ہے، تھرمل توسیع گتانک ہے، مخصوص حرارت ہے، F لیزر کا بہاؤ ہے، کسی دیئے گئے مادے میں آواز کی رفتار ہے اور لیزر پلس سے حاصل ہونے والی کل توانائی ہے۔ یہ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ لیزر کی نمائش کے طویل عرصے کے لیے، لہر کی مساوات بڑی حد تک لیزر کی شدت کا ایک فعل بن جاتی ہے۔ پی اے سگنل کا تجزیہ کرنے کے مقاصد کے لیے، لیزر پلس کو وقت میں کم ہونا چاہیے تاکہ یہ سگنل تیار کیا جا سکے کہ دلچسپی کے اہداف میں فرق کرنے کے لیے تابکاری والے مادے کی خصوصیات پر اس کی قیمت مختلف ہوتی ہے۔ پیدا ہونے والی دباؤ کی لہر میں فرق پی اے ایف سی میں سگنل کی علیحدگی کی بنیاد ہے۔ سگنل کا پتہ لگانا پیدا ہونے والی دباؤ کی لہر الٹراساؤنڈ لہر کی شکل میں ہوتی ہے۔ لہر مواد کے ذریعے پھیلتی ہے اور الٹراساؤنڈ ٹرانسڈیوسر کے ذریعے اس کا پتہ لگایا جاتا ہے۔ دباؤ کو پیزو الیکٹرک کرسٹل کے ذریعے محسوس کیا جاتا ہے جو دباؤ کو وولٹیج کی تبدیلی میں تبدیل کرتا ہے، یعنی۔ سگنل کا طول و عرض کسی بھی وقت دباؤ کی قیمت کے متناسب ہوتا ہے۔ اس وولٹیج کو وقت کے فنکشن کے طور پر پلاٹ کیا جاتا ہے اور اس کے نتیجے میں پہلے بیان کردہ اے لائن کی تشکیل ہوتی ہے۔ عارضی ڈیٹا دیگر اقسام کی فوٹو اکوسٹک امیجنگ کے لیے اہم ہے، لیکن پی اے ایف سی کے مقاصد کے لیے، اے لائن کے اندر زیادہ سے زیادہ طول و عرض کو ڈیٹا پوائنٹ کے طور پر نکالا جاتا ہے۔ ہر لیزر پلس کے لیے اس زیادہ سے زیادہ طول و عرض کی قیمت کو پلاٹ کیا جاتا ہے بمقابلہ وقت جو فلو سائٹومیٹری سگنل ٹریسنگ پیدا کرتا ہے۔ ہر لکیر لیزر پلس کی نمائندگی کرتی ہے اور اس کا طول و عرض تابکاری والے ہدف کی عکاسی کرتا ہے۔ طول و عرض کی حد کا انتخاب کرکے جو کسی خاص خلیے کی قسم کا نمائندہ ہو، اشاروں کو شمار کیا جا سکتا ہے اور اس طرح کسی دیئے گئے نمونے کے اندر خلیوں کی اقسام کی مقدار طے کی جا سکتی ہے۔ شکل 1 بہتے ہوئے خلیوں کی حرکت پذیری اور اس کے نمائندہ پی اے ایف سی سگنل ٹریسنگ کو دکھاتا ہے۔ ایپلی کیشنز بیکٹیریا ریاستہائے متحدہ میں سالانہ 20 لاکھ سے زیادہ بیکٹیریل انفیکشن ہوتے ہیں۔ اینٹی بائیوٹک مزاحمت میں اضافے کے ساتھ ان انفیکشن کا علاج تیزی سے مشکل ہوتا جا رہا ہے جس سے درست اینٹی بائیوٹک کا انتخاب ہمیشہ اہم ہوتا جا رہا ہے۔ بہترین اینٹی بائیوٹک کا انتخاب جارحانہ بیکٹیریا کا تعین کرنے کی صلاحیت پر منحصر ہے۔ روایتی طور پر، بیکٹیریل سپیسیشن کا تعین کلچر اور پی سی آر ٹیکنالوجیز کے ذریعے کیا جاتا ہے۔ ان ٹیکنالوجیز میں کم از کم 48 گھنٹے اور بعض اوقات اس سے زیادہ وقت لگتا ہے۔ قیاس آرائی کے لیے طویل مدت کی وجہ سے، فراہم کنندگان کو براڈ سپیکٹرم اینٹی بائیوٹکس کا انتخاب کرنا چاہیے۔ پی اے ایف سی کا استعمال زیادہ بروقت اینٹی بائیوٹک انتخاب کے لیے خون میں موجود بیکٹیریا کا پتہ لگانے کے لیے کیا جا سکتا ہے۔ پی اے ایف سی کے ساتھ پتہ لگانے کا پہلا قدم بیکٹیریا کو نشان زد کرنا ہے تاکہ ان کا پتہ لگانے کے لیے پی اے سگنل ہو۔ عام طور پر، یہ ڈائی آف اور ڈائی کو دلچسپی کے بیکٹیریا سے منسلک کرنے کے طریقہ کار پر مشتمل ہوتا ہے۔ اگرچہ ماضی میں اینٹی باڈیز کا استعمال کیا گیا ہے، لیکن بیکٹیریوفیجز پیدا کرنے کے لیے سستے اور زیادہ مستحکم ثابت ہوئے ہیں۔ متعدد مطالعات نے دلچسپی کے حامل بیکٹیریا، خاص طور پر ایم آر ایس اے، ای کولی، اور سالمونیلا کے لیے بیکٹیریوفیج کے انتخاب کی خاصیت کو ظاہر کیا ہے۔ رنگ مختلف ہوتے ہیں، لیکن سب سے زیادہ استعمال ہونے والے گولڈ نینو پارٹیکلز، انڈوسیانائن گرین (آئی سی جی)، اور ریڈ ڈائی 81 ہیں۔ رنگ زیادہ حساس پتہ لگانے کے قابل بنانے کے لیے ایک بہتر سگنل پیدا کرتے ہیں۔ ایک مطالعہ میں پائے جانے والے پتہ لگانے کی حدود میں تقریبا 1 بیکٹیریل سیل فی 0.6 مائیکرو میٹر 3 دکھایا گیا۔ جانوروں پر زہریلے ہونے کے لیے مخصوص رنگوں کا تجربہ کیا گیا ہے اور اس کے نتیجے میں کوئی واضح نقصان نہیں ہوا ہے۔ اگرچہ خون میں بیکٹیریا کا پتہ لگانے کے لیے انسانی مطالعات کی ابھی کوشش کی جانی باقی ہے، پی اے ایف سی بیکٹیریا کا پتہ لگانے کے مستقبل کے استعمال میں کردار ادا کر سکتا ہے۔ ملیریا دنیا بھر میں سالانہ 40 لاکھ افراد کی موت کا سبب بنتا ہے۔ موجودہ ادویات کے ساتھ، ابتدائی پتہ لگانا ان اموات کو روکنے کی کلید ہے۔ موجودہ طریقوں میں خون کی فلم، سیرولوجی، یا پی سی آر پر خوردبین کا پتہ لگانا شامل ہے۔ لیب کے تکنیکی ماہرین میں تجربے کی کمی ہو سکتی ہے یا بعض سہولیات کے لیے ٹیکنالوجی بہت مہنگی ہو سکتی ہے، لامحالہ تشخیص سے محروم ہو سکتی ہے۔ مزید برآں موجودہ طریقے عام طور پر 50 فی مائکرو لیٹر سے کم پرجیویوں پر ملیریا کا پتہ نہیں لگا سکتے اور پتہ لگانے سے پہلے انفیکشن کے بعد 3 سے 4 دن درکار ہوتے ہیں۔ اس طرح، مریضوں کے نتائج کو بہتر بنانے کے لیے زیادہ خودکار اور حساس پتہ لگانے کے طریقہ کار کی ضرورت ہے۔ پی اے ایف سی نے موجودہ طریقوں کے مقابلے میں پتہ لگانے کی حدود کو بہت کم ثابت کیا ہے۔ ایک مطالعہ نے گردش کرنے والے خون کے 0.16 ملی لیٹر میں ایک پرجیوی کی حساسیت کا مظاہرہ کیا اور اس طرح ٹیکہ لگانے کے بعد 1 سے 2 دن میں اس کا پتہ لگایا جا سکتا ہے۔ مزید برآں، مطالعات نے خون نکالنے اور ان وٹرو تجزیہ سے تباہ شدہ خلیوں سے چھوٹ جانے والی تشخیص کے امکان کو دور کرنے کے لیے ان ویو پتہ لگانے کی فزیبلٹی کا مظاہرہ کیا ہے۔ پی اے ایف سی سروگیٹ مارکر ہیموزوئن کے ذریعے ملیریا کا پتہ لگاتا ہے، جو کہ میروزوائٹ مرحلے میں ملیریا کی طرف سے تیار کردہ بریک ڈاؤن پروڈکٹ ہے۔ ہیموزوئن ایک بہترین فوٹو اکوسٹک ہدف ہے اور 671 این ایم اور 820 این ایم کی طول موج پر مضبوطی سے جواب دیتا ہے۔ اگرچہ پس منظر کے اشارے آر بی سی کے اندر ہیموگلوبن کے ذریعے تیار کیے جاتے ہیں، ہیموزوئن کے ساتھ متاثرہ آر بی سی (آئی آر بی سی) ان طول موج پر ہیموگلوبن کے اوپر ایک مضبوط اشارے پیدا کرتے ہیں۔ وٹرو طریقوں میں پتہ لگانے کے لیے 1 سینٹی میٹر/سیکنڈ (وٹرو میں) کے بہاؤ کے ساتھ 50 مائکرو میٹر کیپلیری ٹیوبوں کا استعمال کیا جاتا ہے۔ اس کے برعکس، مینیوف اور دیگر۔ ویو میں ملیریا کا پتہ لگانے کا مظاہرہ کیا۔ چوہوں کے سطحی اور گہرے برتنوں پر پتہ لگایا گیا۔ سطحی جہاز زیادہ سگنل سے شور کا تناسب (ایس این آر) فراہم کرتے ہیں، لیکن انسانی جہازوں سے کم موازنہ کرتے ہیں۔ چوہوں کی جگلر رگوں اور کیروٹڈ شریانوں کا سائز چھوٹی انسانی شریانوں سے ملتا جلتا ہے جو خون کی دھڑکن اور سانس کی مختلف حالتوں کی وجہ سے اعلی نمونوں کا مظاہرہ کرتے ہیں، لیکن ان کا حساب لگایا جا سکتا ہے۔ اگرچہ پی اے ایف سی پتہ لگانے کی زیادہ حساس حد فراہم کرتا ہے، لیکن یہ طریقہ کچھ حدود کے ساتھ آتا ہے۔ جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے کہ ہیموزوائن کا پتہ صرف اس وقت لگتا ہے جب پرجیویوں کا موروزوائٹ مرحلے میں ہوتا ہے۔ یہ ٹرافزوائٹ مرحلے میں پرجیویوں بمقابلہ پتہ لگانے کے پتہ لگانے کے وقت کے فریم کو محدود کرتا ہے، لیکن پھر بھی موجودہ طریقوں کے مقابلے میں پہلے پتہ لگانے کی سہولت فراہم کرتا ہے۔ دوسرا، اب تک جن برتنوں کے سائز کی جانچ کی گئی ہے وہ صرف چوہوں میں ہیں۔ انسانوں میں گہرے برتن کے تجزیے سے حاصل ہونے والے آثار پی اے ایف سی کی حساسیت کو کم کر سکتے ہیں جس سے پتہ لگانے کی حد فی الحال تجویز کردہ حد سے کم مفید ہو جاتی ہے۔ اگرچہ چیلنجز اب بھی موجود ہیں، پی اے ایف سی انسانوں میں ملیریا کی تشخیص کو بہتر بنانے میں کردار ادا کر سکتا ہے۔ گردش کرنے والے ٹیومر سیل (سی ٹی سی) گردش کرنے والے ٹیومر سیل یا سی ٹی سی وہ ٹیومر سیل ہیں جو اپنے بنیادی ٹیومر سے ٹوٹ چکے ہیں اور خون میں سفر کرتے ہیں۔ یہ سی ٹی سی پھر دور دراز مقامات کو بیج دیتے ہیں جس کے نتیجے میں میٹاسٹیس ہوتے ہیں۔ میٹاسٹیس کینسر سے ہونے والی 90 فیصد اموات کا سبب بنتا ہے اور اس طرح، سی ٹی سی کا پتہ لگانا میٹس کی روک تھام کے لیے اہم ہے۔ مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ سی ٹی سی کا پہلے پتہ لگانے سے علاج میں بہتری آتی ہے اور اس طرح بقا کا وقت طویل ہوتا ہے۔ (15) موجودہ پتہ لگانے کے طریقوں میں آر ٹی-پی سی آر، فلو سائٹومیٹری، آپٹیکل سینسنگ، سیل سائز فلٹریشن شامل ہیں۔ یہ طریقے نکالے گئے خون (~ 5-10 mL) سے نمونے لینے کے سائز کی وجہ سے محدود ہیں جس کے نتیجے میں ~ 10 CTC/mL کی CTC پتہ لگانے کی حد ہوتی ہے۔ ان طریقوں کے نتائج حاصل کرنے میں گھنٹوں سے لے کر دنوں تک کا وقت لگتا ہے جس کے نتیجے میں علاج شروع کرنے میں تاخیر ہو سکتی ہے۔ پی اے ایف سی مستقبل میں سی ٹی سی کا پتہ لگانے میں کردار ادا کر سکتا ہے۔ مریض سے خون نکالنے کے ذریعے چھوٹے حجم کے نمونے لینے کی حد کو روکنے کے لیے، پی اے ایف سی خون کی بڑی مقدار کی نگرانی کے لیے ان ویو طریقہ استعمال کرتا ہے (یعنی۔ پورا حجم)۔ مطالعہ نے ماؤس آورٹا کی نگرانی کا مظاہرہ کیا، وہ پتہ لگانے کے 1 منٹ کے اندر ماؤس کے خون کے پورے حجم کا تصور کرنے میں کامیاب رہے۔ میلانوما جیسے سی ٹی سی میں ایک اندرونی کروموفور ہوتا ہے اور ہیموگلوبن کے پس منظر کے اوپر پتہ لگانے کے لیے لیبلنگ کی ضرورت نہیں ہوتی ہے۔ ٹیومر کے دیگر خلیوں (جیسے کینسر کے اسکوایمس خلیات) کو نینو پارٹیکلز کے ساتھ ٹیگ کیا جا سکتا ہے تاکہ ان کا پتہ لگانے کے لیے آر بی سی پر ایک بڑا پی اے سگنل تیار کیا جا سکے۔ ان طریقوں کے نتیجے میں سی ٹی سی کی پتہ لگانے کی حد بہتر ہوئی۔ ڈی لا زردا اور دیگر۔ کینسر کے خلیوں کو ٹیکہ لگانے کے صرف 4 دن بعد سی ٹی سی کا پتہ چلا۔ ان کا پتہ لگانے کی حد 1 سی ٹی سی/ایم ایل مقرر کی گئی تھی، جو حساسیت میں 10 گنا بہتری ہے۔ مزید برآں، نینو پارٹیکل لیبلنگ غیر زہریلی پائی گئی اور سی ٹی سی کو بہتر طریقے سے ٹیگ کرنے میں صرف 10 منٹ لگے۔ یہ سی ٹی سی کا پتہ لگانے کا استعمال میٹاسٹیٹک اسکریننگ کے لیے کیا جا سکتا ہے، لیکن اس کے علاج کے مضمرات بھی ہیں۔ ٹیومر ریسیکشن یا ہیرا پھیری کے دوران یہ طے کیا گیا ہے کہ یہ ہیرا پھیری سی ٹی سی جاری کرتی ہیں۔ پی اے ایف سی کو ان سی ٹی سی کی رہائی کی نگرانی کے لیے ایک طریقہ کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے جس کے بعد منظم طریقے سے علاج کی ضرورت پڑ سکتی ہے۔ سی ٹی سیز/نینو پارٹیکلز پر لیزر کے غیر لکیری تھرمویلسٹک اثر کی وجہ سے لیزر کا زیادہ بہاؤ مقامی آر بی سیز کو نقصان پہنچائے بغیر سی ٹی سی کے پھٹنے کا سبب بن سکتا ہے۔ سی ٹی سی میں کمی کے ساتھ، یہ نظاماتی طریقوں سے علاج کو بہتر بنا سکتا ہے یا ضرورت کو مکمل طور پر ختم کر سکتا ہے۔ اگرچہ درخواست کے لیے ایک بہت بڑا امکان ہے، لیکن ابھی بھی بہتری کے لیے علاقے موجود ہیں۔ سب سے پہلے، پی اے ایف سی کی گہرائی محدود ہے اور اس کا تجربہ صرف انسانوں کی سطحی جلد میں کیا گیا ہے جو زیادہ مرکزی طور پر واقع ٹیومر جیسے پھیپھڑوں یا آنتوں کے لیے مشکل پیدا کر سکتا ہے۔ دوسرا، اگرچہ ماؤس کے ابتدائی ماڈلز نے نینو پارٹیکل لیبلنگ کے ساتھ افادیت ظاہر کی ہے، اس امیجنگ کے طریقہ کار کی حفاظت کو یقینی بنانے کے لیے مخصوص کینسر کی قسم کی لیبلنگ اور ڈائی کے مضر اثرات کا مزید گہرائی سے مطالعہ کرنے کی ضرورت ہے۔ حوالہ جات بائیو میڈیکل انجینئرنگ