U7-ctenitoxin-Pn1a
U7-ctenitoxin-Pn1a (یا مختصر طور پر U7-CNTX-Pn1a) ایک نیوروٹاکسن ہے جو TRPV1 چینلز کو روکتا ہے، اور جراثیم کش اثرات ظاہر کر سکتا ہے۔ یہ قدرتی طور پر فونوٹریا نگر وینٹر کے زہر میں پایا جاتا ہے۔ ٹاکسن کا مجوزہ نام U7-ctenitoxin-Pn1a ہے۔ یہاں، 'ٹینیٹاکسن' سے مراد ٹاکسن ہیں جو ٹینیڈی خاندان سے مکڑیوں کے زہر میں پائے جاتے ہیں۔ 'پی این' فونوٹریا نگریوینٹر کا مخفف ہے، جو اس جانور کی نسل اور انواع کا حوالہ دیتا ہے جس سے اسے الگ کیا گیا تھا۔ U7-CNTX-Pn1a کے لیے عام طور پر استعمال ہونے والا متبادل نام PnTx3-5 ہے، جو فونیوٹریہ نگریوینٹر ٹاکسن 3-5 کا مخفف ہے۔ یہاں، 3 سے مراد یہ ہے کہ یہ تیسرے زہریلے پروٹین کے حصے کا حصہ ہے جسے جیل فلٹریشن اور ریورس فیز فاسٹ پروٹین مائع کرومیٹوگرافی کے امتزاج پر مشتمل تکنیک کا استعمال کرتے ہوئے زہر سے الگ کیا گیا تھا۔ اسی طرح، 5 سے مراد یہ ہے کہ یہ پانچواں پیپٹائڈ ہے جو اس حصے سے ریورس فیز اور آئن ایکسچینج ہائی پرفارمنس مائع کرومیٹوگرافی کے ذریعے الگ کیا گیا تھا۔ ذرائع U7-CNTX-Pn1a قدرتی طور پر فونوٹریا نگریوینٹر کے زہر میں پایا جاتا ہے، جسے اکثر برازیلی بھٹکتی ہوئی یا 'مسلح' مکڑی کہا جاتا ہے۔ مزید برآں، ریکومبیننٹ پروٹین الگ تھلگ نیوروٹاکسن سے حاصل کردہ امینو ایسڈ کی ترتیب کی بنیاد پر تیار کیا گیا ہے۔ کیمسٹری ڈھانچہ U7-CNTX-Pn1a ایک 5063.6 g/مول، 45 امینو ایسڈ پروٹین (UNIPROT: P81791) ہے۔ بالغ پروٹین کی امینو ایسڈ کی ترتیب یہ ہے: 0 GCIGRNESCK FDRHGCCWPW SCSCWNKEGQ PESDVWCECS LKIGK 45 نیوروٹاکسن کی متوقع ساخت چار ڈائیسلفائڈ بانڈز پر مشتمل ہوتی ہے، جو مندرجہ ذیل طریقے سے ترتیب دی جاتی ہیں: 1-4,2-5,3-8,6-7۔ خیال کیا جاتا ہے کہ ڈائیسلفائیڈ بانڈز میں سے تین ایک انفیکٹر سسٹین گرہ بناتے ہیں، جو گرمی کی انحطاط اور پروٹیولیسس کے خلاف مزاحمت کو بڑھانے کے لیے جانا جاتا ہے۔ ٹرانسکرپٹومیکس نے این-ٹرمینل سگنل پیپٹائڈ اور پرو پیپٹائڈ دونوں کی موجودگی کا انکشاف کیا ہے، جو ترجمہ کے بعد الگ ہو جاتے ہیں۔ فیملی U7-CNTX-Pn1a کو CSTX خاندان کا رکن سمجھا جاتا ہے۔ اگرچہ اس خاندان میں بنیادی طور پر کپینیئس سیلی کے زہر میں پائے جانے والے زہریلے مادے ہوتے ہیں، U7-CNTX-Pn1a بھی اس کی انتہائی مماثل ڈائیسلفائڈ بانڈ ساخت کی وجہ سے شامل ہے۔ ہدف اور سالماتی میکانزم جب U7-CNTX-Pn1a کا HEK 293 خلیوں پر تجربہ کیا گیا جو rTRPV1 سے منتقل ہوئے تھے، تو کیپسائسن رسیپٹر، اندرونی Ca2 + کرنٹس کو روک دیا گیا تھا۔ U7-CNTX-Pn1a نے ٹرائیجیمینل گینگلیئن سے گلوٹامیٹ کی رہائی کو روک دیا۔ اس سے مل کر پتہ چلتا ہے کہ ٹاکسن ٹی آر پی وی 1 ریسیپٹرز کو روکتا ہے۔ ایس بی-366791 کے مقابلے میں، جو ایک انتخابی ٹی آر پی وی 1 بلاکر ہے، ٹاکسن زیادہ روک تھام کی طاقت کا استعمال کرتا پایا گیا کیونکہ یو 7-سی این ٹی ایکس-پی این 1 اے کی بہت کم حراستی کی ضرورت تھی، جس میں مقامی، ریکومبیننٹ یو 7-سی این ٹی ایکس-پی این 1 اے اور ایس بی-366791 کے لیے بالترتیب 47 ± 0.18nM، 45 ± 1.18nM اور 390 ± 5.1nM کا آئی سی 50 تھا۔ مزید برآں، نیورو پیتھک درد کے ماڈل میں ٹاکسن کو ایل ٹائپ وی جی سی سی بلاکرز کا استعمال کرتے ہوئے ایل ٹائپ وولٹیج گیٹڈ کیلشیم چینلز (وی جی سی سی) کو نشانہ بنانے کے لیے دریافت کیا گیا۔ ہلکا اینٹی نوسیسیپٹو اثر الٹ گیا جب U7-CNTX-Pn1a چوہوں کو دیا گیا (30 fmol/سائٹ، یعنی. )، تاہم، عین مطابق بنیادی طریقہ کار ابھی تک دریافت نہیں ہوا تھا۔ زہریلا پن انٹرا سیریبروونٹریکلر انجکشن کے ذریعے 5 پی جی/ماؤس لگانے پر یو 7-سی این ٹی ایکس-پی این 1 اے چوہوں کے پچھلے اعضاء میں فالج کا سبب بنتا پایا گیا۔ حرکت اور جارحیت 24 گھنٹوں کے اندر کم ہونے کا مشاہدہ کیا گیا۔ یو 7-سی این ٹی ایکس-پی این 1 اے کے علاج کے استعمال کو ممکنہ طور پر طبی ترتیب میں درد کش اور اینٹی نوسیسیپشن کے طور پر یا ٹی آر پی وی 1 چینل فیملی کا مطالعہ کرنے کے لیے فارماکولوجیکل ٹول کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ مختلف درد کے ماڈلز میں اس نے مختلف حد تک اینٹی نوسیسیپٹو اثرات کا مظاہرہ کیا۔ آپریشن کے بعد کے درد میں چیر ماڈل میں، اس نے جانوروں کے ماڈل (30-300 fmol/سائٹ، یعنی) میں مکینیکل ہائپرلجیزیا کو کم کیا۔ مزید برآں، یو 7-سی این ٹی ایکس-پی این 1 اے (30 ایف ایم او ایل/سائٹ، یعنی ٹی کے روزانہ استعمال کے بعد مستقل اینٹی نوسیسیپٹو اثرات کی پیمائش کی گئی۔ )، اور، نیورو پیتھک درد کے جزوی سایٹک اعصابی لائیگیشن ماڈل میں، مکینیکل ہائپرلجیزیا میں قلیل مدتی کمی مشاہدہ کی گئی (1h)۔ U7-CNTX-Pn1a کا سب سے زیادہ امید افزا اور نیا علاج کینسر سے متعلق درد کے ماڈلز میں ہے، جو چوہوں میں لگایا گیا تھا۔ 30 ایف ایم او ایل/سائٹ، یعنی۔ ان چوہوں کے ماڈلز میں مکینیکل ہائپرلجیزیا کو کم کیا گیا چوہوں کے لیے بھی جنہوں نے مورفین رواداری کو فروغ دیا۔ حوالہ جات آئن چینل ٹاکسن مکڑی کے ٹاکسن