Notexin
نوٹکسن ٹائیگر سانپ (نوٹچیس سکوٹیٹس) کے ذریعہ پیدا ہونے والا ایک زہر ہے۔ یہ ایک مایوٹوکسک اور پریسیناپٹک، نیوروٹوکسک فاسفولیپیس اے 2 (پی ایل اے 2 ایس) ہے۔ یہ انزائم ہیں جو 2 پوزیشن پر فیٹی ایسڈ میں فیٹی ایسڈ کی دم اور گلیسرول کے درمیان بندھن کو ہائیڈرولائز کرتے ہیں۔ تاریخ نوٹ ایکسین کا نام اس حقیقت سے آیا ہے کہ یہ زہر سب سے پہلے ٹائیگر سانپ کے زہر میں اہم جزو پایا گیا تھا۔ اس طرح نوٹکسن نام نوٹچیس جینس نام اور لفظ ٹاکسن کا مجموعہ ہے۔ ٹائیگر سانپ کو سب سے پہلے 1861 میں ولہیم پیٹرز نے بیان کیا تھا۔ اس زہر کو پہلی بار سو سال سے زیادہ عرصے بعد 1972 میں کارلسن اور دیگر افراد نے صاف کیا تھا۔ اس سے نوٹایکسن پر مزید تحقیق کی حوصلہ افزائی ہوئی۔ ساخت نوٹکسن ایک واحد مالیکیول پر مشتمل ہوتا ہے۔ یہ انو 119 امینو ایسڈ کے باقیات کا ایک واحد پیپٹائڈ سلسلہ ہے جو 7 ڈائیسلفائڈ پلوں کے ساتھ جڑے ہوئے ہیں۔ نوٹیکسین کے کرسٹل ڈھانچے کا تعین کرنے کے لیے ایکس رے ڈفریکشن کا استعمال کیا گیا ہے اور اس نتیجے پر پہنچا ہے کہ نوٹیکسین کا تعلق یا تو P3121 یا P3221 خلائی گروپ سے ہے جس میں جالی کے پیرامیٹرز a = b = 74.6 Å، c = 49.0 Å 120 0 کے β کے ساتھ ہیں۔ یہ ڈیٹا 2.0 Å کے ریزولوشن کے ساتھ پایا گیا تھا اور اس میں 16.5% کا R-فیکٹر تھا۔ پروٹین کے اعداد و شمار کے لیے، یہ آر عنصر عام طور پر 20 فیصد ہوتا ہے، جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ نوٹایکسن کی کرسٹل ساخت نسبتا اچھی طرح سے بیان کی گئی ہے۔ نوٹایکسن کی سپرمولیکولر ساخت دیگر پی ایل اے 2 سے بہت ملتی جلتی ہے۔ نوٹ ایکسین اور بہت سے پی ایل اے 2 دونوں میں چار خاص اہم ہیلیکس (αA، αB، αC اور αE ہیلیکس) اور ان کی ثانوی ساخت میں ایک مختصر کاربوکسیل اینڈ ہیلکس ہوتے ہیں۔ نیز فعال سائٹ دیگر پی ایل اے 2 سے کافی ملتی جلتی معلوم ہوتی ہے تاکہ انزیمیٹک خصوصیات پر تبادلہ خیال کرتے وقت ان کے ماڈل بلڈنگ اسٹڈیز کو استعمال کیا جا سکے۔ نوٹکسن مختلف اہم سلسلہ کی لمبائی اور 69 ویں امینو ایسڈ کے باقیات میں اس کی تشکیل کی وجہ سے دیگر پی ایل اے 2 سے نمایاں طور پر ہٹ جاتا ہے۔ نوٹایکسن کی فعال جگہ اس کے 48 پر مشتمل ہے۔ یہ بقیہ ایک ایس پی-99 بقیہ کے کاربوکسیلیٹ آکسیجین کے ساتھ قریبی رابطے میں ہے، جو نوٹ ایکسین میں بھی موجود ہے۔ زیادہ تر پی ایل اے 2 کے لیے فعال سائٹ کی دیوار ہائیڈروفوبک باقیات سے ڈھکی ہوتی ہے۔ جب پانی کی آکسیجن پر ایک تنہا جوڑا ایسٹر پر حملہ کرتا ہے، تو اس کا 48 بقیہ پروٹون کی منتقلی میں سہولت فراہم کرتا ہے اور پی ایل اے 2 پر مثبت طور پر چارج شدہ این ایچ گروپوں کے ذریعہ سبسٹریٹس کی کاربونل آکسیجن کو ممکنہ طور پر طے اور مستحکم کیا جاتا ہے۔ عمل کا طریقہ کار نوٹکسن عام طور پر مہلک ہوتا ہے اگر یہ چوہوں میں خون کے بہاؤ میں داخل ہوتا ہے۔ یہ مہلک اثر سانس لینے والے پٹھوں کے نیورومسکلر جنکشنز میں ٹرانسمیشن کی پریسیناپٹک ناکہ بندی کا نتیجہ ہے، جس کی وجہ سے دم گھٹتا ہے۔ یہ بھی دکھایا گیا ہے کہ اندرونی انجکشن پر مایوٹوکسک اثرات ہوتے ہیں۔ مایوٹوکسک اثرات عام طور پر پٹھوں کے نیکروسس کا باعث بنتے ہیں۔ یہ تجویز کیا گیا تھا (ڈکسن اور دیگر، 1996) کہ نوٹکسن کی یہ مایوٹوکسائٹی سرکولیمما کے ساتھ نوٹکسن کے پابند ہونے کا نتیجہ ہے، جس کی وجہ سے ہائپر کنٹریکشن ہوتا ہے اور اس طرح ہائپر کنٹریکشن کے پھٹنے کی جگہوں کے درمیان جھلی کے نتیجے میں پٹھوں کا نیکروسیس ہوتا ہے۔ تاہم، پریسیناپٹک سرگرمی بہت زیادہ طاقتور ہے، کم از کم چوہوں میں۔ نوٹکسن متاثرہ اعصابی ٹرمینلز میں ایسیٹیلکولین کی رہائی میں بالواسطہ کمی یا مکمل خاتمے کا سبب بنتا ہے۔ یہ ایسیٹیلکولین عام طور پر ایک ایکشن پوٹینشل کا سبب بنتا ہے اور اس طرح پٹھوں کے سکڑنے کا سبب بنتا ہے۔ یہ پایا گیا کہ ایسیٹیلکولین کی رہائی میں یہ کمی سنپیٹک ویسیکلز کی خراب ری سائیکلنگ کی وجہ سے ہوئی تھی کیونکہ متاثرہ بافتوں میں سنپیٹک ویسیکلز اور غیر معمولی طور پر بڑے ویسیکلز کے مواد میں کمی دیکھی گئی تھی۔ اس کے بعد اعصابی ٹرمینلز سکڑ گئے اور ان ٹرمینلز میں پھپھوندی کی مقدار کم ہو گئی۔ خلیے کے ساتھ تعامل کا صحیح طریقہ معلوم نہیں ہے، لیکن یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ نوٹکسن، دوسرے پی ایل اے 2 کی طرح، اعلی وابستگی والے مخصوص پروٹین ریسیپٹرز یا پٹھوں کے خلیوں اور موٹر نیوران کے کم وابستگی والے لپڈ ڈومینز کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔ پلازما جھلی کے ساتھ نوٹایکسن کے تعامل کے نتیجے میں خلیے کی جھلی میں فاسفولیپیڈز کا ہائیڈرولیسس ہوتا ہے۔ ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ پی ایل اے 2 سرگرمی کے بغیر، نوٹایکسن میں جھلی کو نقصان پہنچانے والے اثرات بھی ہوتے ہیں، جس سے پتہ چلتا ہے کہ نوٹایکسن میں خلیوں کی جھلی کو نقصان پہنچانے کے متعدد طریقہ کار ہوتے ہیں۔ خلیے کی جھلیاں آئنوں کے لیے پارगम्य ہو جاتی ہیں اور ماورائے خلیے میڈیم سے Ca2 + کی آمد کا سبب بنتی ہیں۔ پٹھوں کے خلیوں میں Ca2 + کی آمد مایوفیلامینٹس کے ہائپر کنٹریکشن کا سبب بنتی ہے، جو پلازما جھلی کو مکینیکل نقصان پہنچا سکتی ہے۔ مائٹوکونڈریا Ca2 + لے گا، جس کے نتیجے میں مائٹوکونڈریل کی فعالیت میں کمی واقع ہوگی۔ سائٹوسول میں اعلی Ca2 + ارتکاز Ca2 + پر منحصر پروٹینسیس، کیلپینز، اور اینڈوجینس Ca2 + پر منحصر فاسفولیپیس A2 کو متحرک کرتا ہے۔ کیلپین سیل کے سائٹوسکیلیٹل اجزاء کو خراب کرتے ہیں اور Ca2 + پر منحصر فاسفولیپیس A2 سیل جھلی کو ہائیڈرولائز کرتا ہے، جس کی وجہ سے سیل کا مزید انحطاط ہوتا ہے اور Ca2 + کی بڑی آمد ہوتی ہے۔ ایک خاص مقام پر نقصان ناقابل واپسی ہوتا ہے اور خلیے کا نیکروسس ہوتا ہے۔ نیوران میں کیلشیم کی آمد ریلیز کے لیے تیار سنپیٹک ویسیکلز اور سنپیٹک ویسیکلز کے ریزرو پول کی رہائی کا سبب بنتی ہے۔ تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ نیوران، نوٹکسن کے ساتھ علاج کے بعد، سنپیٹک ویسیکلز کی تعداد کو مضبوطی سے کم کر دیا تھا۔ یہ نتائج اس بات کی نشاندہی کرتے نظر آتے ہیں کہ نوٹکسن نئے سنپیٹک ویسیکلز کے اینڈوسیٹوسس کو روکتا ہے، اس کے علاوہ Ca2 + کی آمد کے نتیجے میں ایکسوسیٹوسس کو بھی روکتا ہے۔ پٹھوں کے خلیوں کی طرح، نیوران میں Ca2 + کی آمد بھی مائٹوکونڈریل کی فعالیت کو کم کرنے اور کیلپین اور اینڈوجینس Ca2 + پر منحصر پی ایل اے 2 کی سرگرمی کا باعث بنتی ہے۔ اس سے وہی ساختی نقصان ہوتا ہے جو پٹھوں کے خلیوں میں ہوتا ہے۔ تجرباتی تحقیق سے یہ بھی پتہ چلا ہے کہ چوہوں پر نوٹیکسینہڈ نیفروٹوکسک اثرات ہوتے ہیں۔ ایک مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ خوراک کے لحاظ سے، 24 گھنٹوں کے اندر گردوں کے نلکے اور گلومیرولر نقصان ہوا۔ مدافعتی ردعمل نوٹایکسن کے میٹابولزم کے بارے میں زیادہ معلوم نہیں ہے۔ تاہم، مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ مخصوص اینٹی باڈیز کے ذریعے زہر کو غیر موثر بنایا جا سکتا ہے۔ ایک مخصوص مطالعہ میں، چوہے نوٹایکسن کے خلاف مزاحم بن جاتے ہیں، زہریلے مادے کی اسی طرح کی آئسوفارم اور اسی اصل سے دیگر زہر۔ یہ چوہوں کو غیر ڈیٹوکسفائیڈ نوٹکسن سے بے نقاب کرکے کیا گیا تھا۔ یہ پایا گیا کہ نوٹایکسن پیپٹائڈ چین کا سی-ٹرمینل حصہ ان اینٹی باڈیز کے لیے بائنڈنگ سائٹ ہے اور اس طرح یہ معلوم ہوتا ہے کہ یہ ایک اینٹیجینک ڈومین کے لیے سائٹ ہے۔ ایک اور تحقیق سے پتہ چلتا ہے کہ کم از کم کچھ اینٹی جین جو نوٹایکسن کے اثرات کو روکنے کے قابل ہوتے ہیں وہ کراس نیوٹرلائزیشن کے ذریعے ایسا کرتے ہیں۔ بعض اینٹی باڈیز میں مختلف نوٹایکسن آئسوفارم کے لیے مختلف وابستگی بھی دکھائی گئی ہے۔ یہ مختلف آئسوفارم ان سانپوں میں پائے جاتے ہیں جن کے مختلف جغرافیائی مقامات ہوتے ہیں۔ اس طرح ایسا نہیں ہے کہ نوٹیکسین اینٹی باڈیز لازمی طور پر تمام نوٹیکسین آئسوفارم سے ایک ہی وابستگی کے ساتھ منسلک ہوتی ہیں۔ علامات نوٹکسن کاٹنے کی جگہ پر درد کا سبب بنتا ہے جس کے بعد ضرورت سے زیادہ تھوک، کمزوری، غنودگی، سانس لینے میں دشواری، بلڈ پریشر میں کمی اور ہونٹوں، حلق، زبان اور چہرے کے پٹھوں کا فالج ہوتا ہے۔ ممکنہ طور پر، بینائی کی دھندلاپن، پیٹوسس، سر درد اور آتشزدگی بھی ہو سکتی ہے۔ زہریلا انسانوں میں نوٹکسن کے رد عمل پر کوئی تحقیق نہیں ہوئی ہے، تاہم یہ معلوم ہے کہ زہر کے ساتھ انجکشن لگانے پر پٹھوں کو نقصان پہنچے گا اور میوگلوبینوریا ہوگا۔ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ ٹائیگر سانپ آسٹریلیا میں سانپ کے کاٹنے کی بڑی وجوہات میں سے ایک ہے جو سانپ کے کاٹنے سے ہونے والی موت کی دوسری سب سے عام وجہ ہے۔ چوہوں میں نوٹایکسن کے زہریلے اثرات پر کئی نتائج رپورٹ کیے گئے ہیں۔ جب چوہے کے سولیوس پٹھوں میں 1 سے 2 ایم کیو جی خالص ٹاکسن کا انجیکشن لگایا جاتا ہے، تو یہ تمام پٹھوں کے ریشوں کو تباہ کر دے گا۔ چوہوں میں ایل ڈی 50 0.214 ایم جی/کلوگرام ہوتا ہے جب ذیلی جلد سے لگایا جاتا ہے اور 0.04 ایم جی/کلوگرام جب نس کے اندر لگایا جاتا ہے۔ نوٹ ایکسین انجکشن کے بعد ماؤس ایکسٹینسر ڈیجیٹورم لانگس (ای ڈی ایل) کے پٹھوں کو دوبارہ بڑھنے کی فعال اور مورفولوجیکل خصوصیات پر بھی تحقیق کی گئی ہے۔ انجکشن کے تین دن بعد فائبر مکمل طور پر ٹوٹ گیا اور فعال صلاحیت میں کمی واقع ہوئی۔ دس دن کے بعد عضلات مکمل طور پر دوبارہ بڑھنے والے ریشوں سے بنے تھے۔ علاج مارکیٹ میں کوئی نوٹ ایکسین اینٹی وینوم دستیاب نہیں ہے۔ ٹائیگر سانپ کے دو عام اینٹی وینوم دستیاب ہیں جو ممکنہ طور پر کام کر سکتے ہیں۔ نوٹ ایکسین پر ٹائیگر سانپ کے اینٹی وینومز کی تاثیر پر کوئی مطالعہ نہیں پایا گیا ہے۔ حوالہ جات نیوروٹاکسن سانپ کے زہریلے مادے ایکٹیلکولین ریلیز انفیکٹرز