Somatic mutation and recombination tests
سومیٹک میوٹیشن اینڈ ریکومبینیشن ٹیسٹ (ایس ایم اے آر ٹی) ان ویو جینوٹوکسائٹی ٹیسٹ ہیں جو ڈروسفیلا میلانوگاسٹر (فروٹ فلائی) میں کیے جاتے ہیں۔ یہ فروٹ فلائی ٹیسٹ ایک قلیل مدتی ٹیسٹ اور ماحول میں پائے جانے والے پوٹیٹو جینوٹاکسن کی ان ویو ٹیسٹنگ کے لیے ایک غیر ممالیہ نقطہ نظر ہے۔ ڈی۔ میلانوگاسٹر کی مختصر عمر ہوتی ہے، جو تیز تولیدی چکروں اور ہائی تھرو پٹ جینوٹوکسائٹی ٹیسٹنگ کی اجازت دیتی ہے۔ ڈی۔ میلانوگاسٹر میں انسانی بیماری سے متعلق جینوں کے تقریبا 75 فیصد فعال آرتھولوگ بھی ہوتے ہیں، جو اسے انسانی تحقیق کے لیے ویو ماڈل میں پرکشش بناتے ہیں۔ ٹیسٹ بالغ بافتوں میں فینوٹائپک طور پر قابل مشاہدہ جینیاتی مارکر کا استعمال کرتے ہوئے ہیٹروزائگس یا ٹرانس ہیٹروزائگس بالغوں میں مخصوص جینیاتی مارکر کے لیے ہیٹروزائگوسیٹی کے نقصان کی نشاندہی کرتے ہیں۔ اگرچہ متنوع واقعات جیسے پوائنٹ میوٹیشنز/ڈیلیشنز، نان ڈزجنکشن، اور ہومولوگس مائٹوٹک ریکومبینیشن نظریاتی طور پر ہیٹروزائگوسیٹی کے اس نقصان کا سبب بن سکتے ہیں، لیکن نان ڈزجنکشن کے عمل عام طور پر زیادہ تر جانچ شدہ کیمیکلز کے لیے متعلقہ نہیں ہوتے ہیں۔ اسمارٹ دو مختلف ٹیسٹ ہیں جو ایک ہی جینیاتی بنیاد کا استعمال کرتے ہیں، لیکن مختلف بالغ بافتوں کو نشانہ بناتے ہیں اور اسی کے مطابق ان کا نام رکھا جاتا ہے: ونگ اسپاٹ ٹیسٹ اور آئی اسپاٹ ٹیسٹ۔ پس منظر نشوونما کے مرحلے میں، لاروا ڈھانچے اور خیالی ڈسکس-غیر متفرق اپیتھیلیم کے ڈپلوئڈ خلیوں کے کلسٹر-جنین میں بنتے ہیں۔ پیوپا لاروا کے مراحل کی تکمیل کے بعد ابھرتا ہے، اور میٹامورفوسس نظامی ہارمونل ریگولیشن کے نتیجے میں ہوتا ہے، جس میں لاروا کے اعضاء کا ہسٹولیسس اور بالغ اجزاء میں خیالی ڈسکس کی تفریق ہوتی ہے۔ جب یہ خیالی ڈسکس جینوٹوکسک مادوں کے سامنے آتی ہیں تو جینیاتی تغیرات ممکنہ ڈی این اے نقصان کی وجہ سے ہوتے ہیں جو مائٹوسس کے دوران پروجینی خلیوں کو وراثت میں مل سکتے ہیں۔ ان جینیاتی تغیرات کی فینوٹائپک شکلیں بالغ جسم کی شکلوں جیسے پروں اور آنکھوں میں دیکھی جا سکتی ہیں، اور اس طرح بالترتیب ونگ اسپاٹ ٹیسٹ اور آئی اسپاٹ ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے جانچ کی جا سکتی ہے۔ ہیٹروزائگس افراد میں مخصوص جینیاتی مارکر کے لیے ہیٹروزائگوسیٹی (ایل او ایچ) کا نقصان بالغ بافتوں میں ڈی این اے نقصان/جینوٹوکسائٹی کے بصری اسکورنگ کے قابل بناتا ہے۔ ونگ اسپاٹ ٹیسٹ متغیر دھبوں کو شامل کرنے کا تعین کرتا ہے جو کروموسوم نمبر 3 پر واقع ریسیسیو جینیاتی مارکر ملٹیپل ونگ ہیئر (ایم ڈبلیو ایچ) اور فلیئر-3 (ایف ایل آر 3) کا استعمال کرتے ہوئے پوائنٹ میوٹیشن، ڈیلیشن، نان ڈزجنکشن، یا مائٹوٹک ریکومبینیشن کی وجہ سے ہیٹروزائگوزیٹی کے نقصان کی نمائندگی کرتے ہیں۔ آئی اسپاٹ ٹیسٹ آنکھ ڈبلیو/ڈبلیو + ایس ایم اے آر ٹی جانچ میں ایکس کروموسوم وائٹ (ڈبلیو) جین کو جنگلی قسم کی آنکھوں میں سفید کلون کی موجودگی کی نگرانی کے لیے ایک ریسیسیو مارکر کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے، جو پوائنٹ میوٹیشن اور/یا حذف ہونے کی وجہ سے سفید لوکس میں ہیٹروزائگوسیٹی کے نقصان کے ساتھ ساتھ ویو ایپلی کیشنز میں ڈروسفیلا کے ڈبلیو/ڈبلیو + سومیٹک خلیوں میں نان ڈزجنکشن اور ہومولوگس مائٹوٹک ریکومبینیشن کی نشاندہی کرتا ہے۔ یہ ٹیسٹ خاص طور پر اعلی یوکرائیوٹک حیاتیات کے سومیٹک خلیوں میں کیمیکلز کی ممکنہ جینوٹوکسائٹی کا تجزیہ کرنے (ویو میں) کرنے کے لیے موثر آلات ہیں کیونکہ وہ بنیادی طور پر جین میوٹیشن اور ہومولوگ کی پیداوار کا پتہ لگاتے ہیں۔ یہ بات قابل غور ہے کہ سومیٹک خلیوں میں مائٹوٹک ریکومبینیشن کی پیمائش جینوٹوکسائٹی اسکریننگ کے لیے اہم ہے کیونکہ غیر معمولی ریکومبینیشن سرگرمی اکثر کینسر سے منسلک ہوتی ہے۔ درحقیقت، ان ٹیسٹوں کا استعمال مختلف قسم کے ایجنٹوں کی جینوٹوکسائٹی کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا ہے، جن میں تابکاری، دھاتیں، کیمیکل، پودوں کے نکات/مصنوعات، علاج معالجے کی دوائیں، کھانے کی مصنوعات اور مختلف قسم کے آلودگیاں شامل ہیں اور ممکنہ اینٹی میوٹیجنز کی تلاش کے لیے بھی استعمال کیا گیا ہے۔ حوالہ جات کا تغیر