NcRNA therapy
انسانی جینوم کی اکثریت غیر پروٹین کوڈنگ ڈی این اے سے بنی ہوتی ہے۔ یہ اندازہ لگاتا ہے کہ اس طرح کے سلسلے عام طور پر پروٹین کے لیے انکوڈ کرنے کے لیے استعمال نہیں کیے جاتے ہیں۔ تاہم، اگرچہ یہ علاقے پروٹین کے لیے کوڈ نہیں کرتے ہیں، ان کے دیگر افعال ہیں اور ضروری ریگولیٹری information.They کو این سی آر این اے کے سائز کی بنیاد پر درجہ بندی کیا جا سکتا ہے۔ چھوٹے نان کوڈنگ آر این اے کو عام طور پر 200 بی پی سے کم لمبائی کے طور پر درجہ بند کیا جاتا ہے، جبکہ طویل نان کوڈنگ آر این اے 200 بی پی سے زیادہ ہوتا ہے۔ اس کے علاوہ، ان کی درجہ بندی خلیے کے اندر ان کے کام سے کی جا سکتی ہے ؛ بنیادی ڈھانچہ اور ریگولیٹری این سی آر این اے۔ ایسا لگتا ہے کہ ٹرانسلیشن اور اسپلیسنگ میں انفراسٹرکچر این سی آر این اے کا ہاؤس کیپنگ کا کردار ہے اور اس میں آر آر این اے، ٹی آر این اے، snRNA.Regulatory این سی آر این اے جیسی انواع شامل ہیں جو دوسرے آر این اے کی ترمیم میں شامل ہیں۔ لانگ نان کوڈنگ آر این اے لانگ نان کوڈنگ آر این اے (ایل این سی آر این اے) آر این اے کی ایک قسم ہے جسے عام طور پر ٹرانسکرپٹ کے طور پر بیان کیا جاتا ہے جو لمبائی میں 200 بیس جوڑوں سے زیادہ ہوتے ہیں اور پروٹین میں ترجمہ نہیں ہوتے ہیں۔ یہ حد ایل این سی آر این اے کو چھوٹے غیر کوڈنگ آر این اے سے ممتاز کرتی ہے جس میں مائیکرو آر این اے (ایم آئی آر این اے)، چھوٹے مداخلت کرنے والے آر این اے (ایس آئی آر این اے)، پیوی انٹرایکٹنگ آر این اے (پی آئی آر این اے)، چھوٹے نیوکلولر آر این اے (سنو آر این اے)، اور دیگر مختصر آر این اے شامل ہیں۔ لمبے غیر کوڈنگ آر این اے میں لنک آر این اے، انٹونک این سی آر این اے، سرکلر اور لکیری این سی آر این اے شامل ہیں۔ لانگ انٹرجینک نان کوڈنگ آر این اے لانگ انٹرجینک نان کوڈنگ آر این اے (لنک آر این اے) کی تعریف آر این اے ٹرانسکرپٹ کے طور پر کی گئی ہے جو 200 نیوکلیوٹائڈز سے زیادہ لمبے ہوتے ہیں۔ ان آر این اے میں کھلے پڑھنے کے فریم نہیں ہونے چاہئیں جو پروٹین کو انکوڈ کرتے ہیں۔ اصطلاح "انٹرجینک" سے مراد جینوم کے ان علاقوں سے ان نقل کی شناخت ہے جن میں پروٹین انکوڈنگ جین نہیں ہوتے ہیں۔ ایل این سی آر این اے میں پروموٹر-یا بڑھانے والے سے وابستہ آر این اے بھی ہوتے ہیں جو جین پراکسیمل ہوتے ہیں اور معنی یا اینٹی سینس واقفیت میں ہو سکتے ہیں۔ سرکلر آر این اے سرکلر آر این اے (سرکلر آر این اے) اینڈوجینس نان کوڈنگ آر این اے کی ایک نئی کلاس ہے اور ان کی خصوصیت ان کے کوولینٹی بند لوپ ڈھانچے ہیں۔ این سی آر این اے کی اس کلاس میں 5 'ٹوپی یا 3' پولی اے دم نہیں ہے۔ یہ قیاس کیا گیا ہے کہ سر آر این اے بیماری کی تشخیص اور علاج کے لیے ممکنہ سالماتی مارکر کے طور پر کام کر سکتے ہیں اور انسانی بیماریوں کے آغاز اور ترقی میں اہم کردار ادا کر سکتے ہیں۔ چھوٹے غیر کوڈنگ آر این اے چھوٹے غیر کوڈنگ آر این اے (ایس این سی آر این اے) آر این اے کی ایک قسم ہیں۔ جسے عام طور پر نقل کے طور پر بیان کیا جاتا ہے جو لمبائی میں 200 بیس جوڑوں سے کم ہوتے ہیں اور پروٹین میں ترجمہ نہیں ہوتے ہیں۔ یہ حد ایس این سی آر این اے کو ایل این سی آر این اے سے ممتاز کرتی ہے۔ اس کلاس میں مائیکرو آر این اے (ایم آئی آر این اے)، چھوٹے مداخلت کرنے والے آر این اے (ایس آئی آر این اے)، پیوی انٹرایکٹنگ آر این اے (پی آئی آر این اے)، چھوٹے نیوکلولر آر این اے (سنو آر این اے)، اور دیگر مختصر آر این اے شامل ہیں لیکن ان تک محدود نہیں ہیں۔ مائیکرو آر این اے مائیکرو آر این اے (ایم آئی آر این اے) جین کے اظہار کو منظم کرنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ زیادہ تر ایم آئی آر این اے ڈی این اے کی ترتیب سے بنیادی ایم آئی آر این اے میں نقل کیے جاتے ہیں۔ ان بنیادی ایم آئی آر این ایز کو مزید پیشگی ایم آئی آر این ایز میں، اور آخر میں بالغ ایم آئی آر این ایز میں پروسیس کیا جاتا ہے۔ زیادہ تر معاملات میں ایم آر این اے ایم آر این اے کے انحطاط اور ٹرانسلیشنل جبر کو فروغ دینے کے لیے ہدف کے 3 'یو ٹی آر خطے کے ساتھ تعامل کرتے ہیں۔ دیگر خطوں کے ساتھ ایم آئی آر این اے کے تعاملات، بشمول 5 'یو ٹی آر، کوڈنگ سیکوینس، اور جین پروموٹرز کی بھی اطلاع دی گئی ہے۔ بعض حالات کے تحت، ایم آئی آر این اے ترجمہ کو چالو کرنے یا نقل کو منظم کرنے کے قابل بھی ہوتے ہیں، لیکن یہ اثر کے مقام جیسے عوامل پر منحصر ہوتا ہے۔ تعامل کا یہ عمل بہت متحرک ہے اور متعدد عوامل پر منحصر ہے۔ ربوسومل آر این اے ربوسومل آر این اے (آر آر این اے) میں غیر کوڈنگ آر این اے شامل ہیں جو آر آر این اے کے ضابطے میں ضروری کردار ادا کرتے ہیں۔ ربوسومل آر این اے (آر آر این اے) پروٹین کی ترکیب میں حصہ لیتا ہے۔ کبھی کبھار آر این اے مالیکیول آر این اے انزائمز (رائبوزائمز) کے طور پر اتپریرک طور پر کام کرتے ہیں یا پروٹین کی برآمد میں حصہ لیتے ہیں۔ سب سے اہم ربوزیم ربوسوم کی بڑی ذیلی اکائی کا بڑا آر آر این اے ہے (یوکرائٹس میں 28s آر آر این اے)۔ اب یہ قبول کیا جاتا ہے کہ 28S rRNA ایک اہم ساختی کردار ادا کرنے کے علاوہ پولی پیپٹائڈ کی ترکیب میں اہم مرحلے کو متحرک کرتا ہے۔ چھوٹے نیوکلیئر آر این اے اور چھوٹے نیوکلولر آر این اے چھوٹے نیوکلیئر آر این اے (ایس این آر این اے) اور چھوٹے نیوکلولر آر این اے (ایس این او آر این اے) وسیع پیمانے پر نیوکلیوٹائڈ ترمیم اور آر آر این اے کی پروسیسنگ کی رہنمائی کے لیے جانے جاتے ہیں۔ ایس این آر این اے اور ایس این او آر این اے دونوں کو چھوٹے آر این اے مالیکیولز کی ایک کلاس میں درجہ بند کیا گیا ہے جو نیوکلئس میں موجود ہوتے ہیں۔ تاہم، وہ فنکشن کے لحاظ سے بہت مختلف ہوتے ہیں۔ ایس این آر این اے 80-350 نیوکلیٹائڈز لمبے ہوتے ہیں جبکہ سنو آر این اے خمیر میں 80-1000 نیوکلیوٹائڈز لمبے ہوتے ہیں۔ ایس این آر این اے ایم آر این اے سے پہلے کی خاموشی کو منظم کرنے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ دوسری طرف، سنو آر این اے ایم آر این اے میں ترمیم، آر آر این اے اور ٹی آر این اے میں ترمیم، اور جینوم امپرنٹنگ میں شامل ہیں۔ سنو آر این اے کے بڑے کام میں رائبوسومل تشکیل کے دوران آر آر این اے کی پختگی شامل ہے۔ چھوٹے نیوکلیئر اور چھوٹے نیوکلولر آر این اے ایس این آر این پیز اور ایس این او آر این پیز کے اہم اجزاء ہیں اور یوکرائیوٹک خلیوں کے مرکزے کے اندر بالترتیب ایم آر این ایز اور آر آر این ایز کی پختگی میں اہم کردار ادا کرتے ہیں۔ ایس این آر این اے اور ایس این او آر این اے دونوں نقل کے فورا بعد آر این اے میں ترمیم کرنے میں شامل ہیں۔ ایس این آر این اے cell.snRNA کے نیوکلئس کے اسپلیسنگ سپیکلز اور کیجل باڈیز میں پایا جا سکتا ہے اور اسنو آر این اے کو نیوکلیئر ایکسپورٹ (پی ایچ اے ایکس) کے لیے ایک فاسفوریلیٹڈ اڈاپٹر کی ضرورت ہوتی ہے تاکہ اسے نیوکلئس کے اندر کارروائی کی جگہ تک پہنچایا جا سکے۔ ٹرانسفر آر این اے ٹرانسفر آر این اے (ٹی آر این اے) میسنجر آر این اے کی ترتیب کو پروٹین میں ڈی کوڈ کرنے میں مدد کرتا ہے۔ وہ ترجمہ کے دوران رائبوسوم کے اندر مخصوص مقامات پر کام کرتے ہیں (کوڈ سے پروٹین تک جانے والا عمل)۔ ایم آر این اے مالیکیول کے اندر ہمارے پاس لمبائی کے کوڈن میں تین نیوکلیوٹائڈز ہوتے ہیں۔ ان تمام کوڈنوں کا ایک منفرد عالمگیر کوڈ ہوتا ہے جو ایک مخصوص امینو ایسڈ کی نمائندگی کرتا ہے۔ ٹی آر این اے کو ایک اڈاپٹر مالیکیول کے طور پر درجہ بند کیا جا سکتا ہے، جس کی لمبائی عام طور پر 76 سے 90 نیوکلیوٹائڈز ہوتی ہے۔ تاریخ 1869 میں ڈاکٹر فریڈرک میشر کے ذریعہ سالمن کے سپرم اور پس کے خلیوں سے غیر کوڈنگ آر این اے ڈی این اے کی صفائی نے سائنسدانوں کو پروٹین کے علاوہ خلیے میں اضافی مالیکیولز کی موجودگی کی طرف رہنمائی کی۔ میشر نے ایک انتہائی تیزابی مالیکیول کی موجودگی کی نشاندہی کی جسے اس نے مواد کے خلیوں سے الگ کیا اور اسے "نیوکلین" کا نام دیا۔ یہ اصطلاح اس لیے بنائی گئی تھی کہ میشر کے ذریعے الگ تھلگ کیا گیا ڈی این اے پروٹین نہیں تھا اور یہ خلیے کے مرکزے سے ماخوذ تھا۔ یہ 1944 تک نہیں تھا، جب اوسوالڈ ایوری نے ڈی این اے کو معلومات کے جینیاتی کیریئر کے طور پر تجویز کیا کہ میشر کی دریافت کو دوبارہ منظر عام پر لایا گیا۔ ایکس رے کرسٹلگرافی کے بعد، روزالنڈ فرینکلن کی طرف سے اور 1953 میں واٹسن اور کرک کی طرف سے ڈی این اے ڈبل ہیلکس کے تعین نے ڈی این اے کی ساخت کی تفہیم کو مزید بڑھایا اور سالماتی حیاتیات کے مرکزی عقیدے کے قیام کی اجازت دی۔ تاہم، مرکزی عقیدے کی خامیوں میں سے ایک یہ مفروضہ تھا کہ معلومات کا بہاؤ ڈی این اے سے آر این اے میں پروٹین کی طرف جاتا ہے، جو مختلف ریگولیٹری میکانزم کی تفہیم میں رکاوٹ ہے۔ 1955 میں، جارج پلاڈے نے پہلے این سی آر این اے کی شناخت بڑے ربن نیوکلیوپروٹین کمپلیکس (آر این پی) کے ایک حصے کے طور پر کی۔ دریافت ہونے والی این سی آر این اے کی دوسری کلاس 1957 میں ٹرانسفر آر این اے (ٹی آر این اے) تھی۔ تاہم، پہلا ریگولیٹری این سی آر این اے ایک مائیکرو آر این اے تھا جسے 1988 میں E.coli سے دریافت کیا گیا تھا اور اسے مائیک ایف کے طور پر لیبل کیا گیا تھا۔ دوسری طرف، پہلا یوکرائیوٹک مائکرو آر این اے 1993 میں C.elegans میں دریافت کیا گیا تھا۔ یہ جین لن-4 سے ماخوذ تھا اور اس کی شناخت ایک چھوٹے آر این اے مالیکیول (لمبے ایم آر این اے مالیکیولز کے مقابلے میں) کے طور پر کی گئی تھی جو اسٹیم لوپ ڈھانچے تشکیل دیتا ہے۔ اس ڈھانچے میں مزید ترمیم کی جاتی ہے تاکہ ایک چھوٹا آر این اے تیار کیا جا سکے جو لین-14 نقل کے 3 'یو ٹی آر خطے کی تکمیل کرتا ہے۔ اس راستے نے مختلف پوسٹ ٹرانسلیشنل جین سائلنسنگ راستوں کی بہتر تفہیم کی اجازت دی۔ اس کے بعد سے، بہت سے دوسرے ایم آئی آر این اے دریافت ہوئے ہیں۔ اس پوسٹ ٹرانسلیشنل سائلنسنگ راستے کے پیچھے کے طریقہ کار کی تفصیلی تفہیم 2001 میں تھامس ٹشل نے قائم کی تھی۔ یہ دریافت کیا گیا کہ ڈبل اسٹرینڈڈ آر این اے کو ایک چھوٹے 25 نیوکلیوٹائڈز لمبے ٹکڑے میں پروسیس کیا جاتا ہے جسے پھر دروشا کمپلیکس کے ذریعے ہیئر پن جیسی ساخت میں تبدیل کیا جاتا ہے۔ اس کے بعد مالیکیول کو ڈائسر انزائمز کے ذریعے فنکشنل ڈبل اسٹرینڈڈ آر این اے (ڈی ایس آر این اے) میں تقسیم کیا جاتا ہے۔ اس کے بعد انہیں آر آئی ایس سی کمپلیکس پر لوڈ کیا جاتا ہے جو پھر سائٹوپلازم میں دلچسپی کے ہدف شدہ ایم آر این اے کو ڈھونڈتا اور الگ کرتا ہے۔ یہ 1989 تک نہیں تھا کہ امپرنٹنگ جین دریافت ہوئے اور جینوم امپرنٹنگ قائم ہوئی۔ پہلے دو جینومک امپرنٹنگ جینز کو پدرانہ طور پر Igf2r اور H19 کا اظہار کیا گیا تھا۔ یہ دونوں چوہوں میں آزادانہ طور پر دریافت ہوئے تھے اور کروموسوم 7 میں مقامی تھے۔ H19 عجیب ہے کیونکہ یہ ایک lncRNA کے طور پر کام کرتا ہے لیکن اس میں پری-mRNA پروسیسنگ جیسی تبدیلیاں ہوتی ہیں جیسے کہ اسپلیسنگ، 3 'پولیڈینایلیشن اور RNA پولیمریز II کے ذریعے نقل کیا جاتا ہے۔ یہ ایل این سی آر این اے چوہوں کی جنین کی نشوونما میں اہم کردار ادا کرتا ہے اور اگر قبل از پیدائش مراحل کے دوران ظاہر کیا جائے تو یہ مہلک ہو سکتا ہے۔ یوکرائٹس میں اوور ٹائم میں مزید ایل این سی آر این اے دریافت ہوئے ہیں۔ ایسی ہی ایک دریافت جس نے H19 افعال کے درمیان بہتر تفہیم کی اجازت دی وہ ایک lncRNA تھی جسے XIST (X غیر فعال مخصوص نقل) کہا جاتا ہے۔ فوڈ اینڈ ڈرگ ایڈمنسٹریشن (ایف ڈی اے) (1998) اور یورپی میڈیسن ایجنسی (ای ایم اے) (1999) کے ذریعہ منظور شدہ پہلی این سی آر این اے علاج معالجہ دوا کو فومیویرسن یا ویتراوین کہا جاتا ہے۔ ہدف اعضاء آنکھ ہے اور امیونوکمپروائزڈ مریضوں میں سائٹومیگالو وائرس (سی ایم وی) ریٹینائٹس کے خلاف کام کرتا ہے۔ یہ دوا ایک اینٹی سینس اولیگونیوکلیوٹائڈ کے طور پر کام کرتی ہے اور ایم آر این اے کی تکمیلی ترتیب سے منسلک ہوتی ہے جو انسانی سائٹومیگالو وائرس کی نقل کو روکتی ہے۔ اس تھراپی کو اینٹی سینس اولیگونیوکلیوٹائڈ (اے ایس او) تھراپی کے طور پر بھی درجہ بندی کیا جا سکتا ہے۔ بہت سے اے ایس او آر این اے علاج معالجے ہوئے ہیں جنہیں سالوں کے دوران ایف ڈی اے اور/یا ای ایم اے نے منظور کیا ہے، لیکن یہ 2018 تک نہیں تھا کہ ای ایم اے نے پیٹیسیرن/اون پیٹرو نامی دوا کی منظوری دی۔ یہ دوا ڈی ایس-ایس آئی آر این اے کو عمل کے طریقہ کار کے طور پر استعمال کرتی ہے اور اسے موروثی ٹرانستھیریٹن امیلائڈوسس کے خلاف موثر سمجھا جاتا ہے۔ یہ طریقہ کار خاص طور پر ٹرانستھیریٹن (ٹی ٹی آر) ایم آر این اے کو نشانہ بناتا ہے۔ آر این اے علاج کے اہداف بالغ ایم آر این اے تک محدود نہیں ہیں بلکہ پختگی کے مختلف مراحل میں ایم آر این اے کو نشانہ بنانے کے لیے استعمال کیے گئے ہیں۔ ایسی ہی ایک مثال نوسینرسن (سپینارزا) ہے، یہ ایک اے ایس او کے طور پر کام کرتا ہے اور اسپلائنگ سے پہلے پری-ایم آر این اے کو نشانہ بناتا ہے جو موٹر نیوران 2 جین (ایس ایم این 2) کی بقا سے مطابقت رکھتا ہے۔ اس ڈرگ تھراپی کو ایف ڈی اے اور ای ایم اے نے بالترتیب 2016 اور 2017 میں منظور کیا تھا۔ کچھ ایسی دوائیں ہیں جنہیں ایف ڈی اے نے منظور کیا ہے نہ کہ ای ایم اے نے۔ یہ ایٹیپلرسن (ایکسونڈس 51) نامی اے ایس او قسم کے علاج کے معاملے میں دیکھا جا سکتا ہے جسے ایف ڈی اے نے 2016 میں منظور کیا تھا لیکن ای ایم اے نے نہیں۔ یہ ڈسٹروفین (ڈی ایم ڈی) سے متعلق پری-ایم آر این اے کو نشانہ بناتا ہے اور ڈوچن مسکولر ڈسٹروفی کے خلاف کام کرتا ہے۔ بہت سے اضافی علاج معالجے ہیں جو تیار کیے گئے ہیں اور کلینیکل ٹرائلز کے پہلے یا دوسرے مرحلے میں ہیں۔ کلینیکل ٹرائلز میں موجودہ آر این اے علاج مختلف قسم کے ہدف اعضاء اور بیماریوں سے لے کر جلد (کیلوئڈ جیسی بیماری کا ممکنہ علاج) سے لے کر ٹیومر (سکوامس سیل پھیپھڑوں کا کینسر) تک ہوتا ہے۔ آج تک، ایف ڈی اے اور ای ایم اے دونوں کے لیے، این سی آر این اے کو کیمیائی ترکیب کے ذریعے ان کی پیداوار کی وجہ سے "سادہ" طبی مصنوعات سمجھا جاتا ہے۔ جب ان میں سے کچھ، جو حیاتیاتی طور پر تیار کیے گئے ہیں (جنہیں بائیو انجینیئرڈ این سی آر این اے ایجنٹس: بی ای آر اے کے نام سے جانا جاتا ہے)، مارکیٹ میں لائے جائیں گے، تو حیاتیاتی طبی مصنوعات کی حیثیت کا اطلاق ہوگا، جس سے قانون سازی میں تضادات پیدا ہو سکتے ہیں۔ ایپلی کیشنز اینٹی سینس اولیگونیوکلیوٹائڈز (اے ایس اوز) سنگل اسٹرینڈڈ ڈی این اے مالیکیول ہیں جو ایک منتخب ہدف ایم آر این اے کی مکمل تکمیل کے ساتھ ہیں اور پروٹین کے ترجمہ کو روک کر (سٹیریک رکاوٹ کے ذریعے)، ایم آر این اے کی انحطاط کا سبب بن کر (آر نیس ایچ-کلیویج کے ذریعے) یا پری-ایم آر این اے اسپلیسنگ کو تبدیل کر کے کام کر سکتے ہیں۔ یہ مختصر اولیگونیوکلیوٹائڈز پہلے ہی ایف ڈی اے کی طرف سے دس جینیاتی عوارض کے لیے منظور کیے جا چکے ہیں اور بہت سے اس وقت منظوری/جانچ کے لیے پائپ لائن میں ہیں۔ اولیگونیوکلیوٹائڈ ٹیکنالوجی کا استعمال کرتے ہوئے، اب ہم آر این اے مداخلت کے ذریعے پروٹین کے اظہار کو کنٹرول کرنے کے قابل ہیں، اور پہلے سے بیان کردہ "غیر جدوجہد" پروٹین کو متاثر کرنے کے قابل ہیں۔ اگرچہ اس تھراپی میں بہت سارے وعدے اور امکانات ہیں، لیکن یہ بہت سی حدود کے ساتھ آتا ہے۔ ایس آئی آر این اے اور مائیکرو آر این اے کے مقابلے میں، اے ایس اوز پروٹین کے اظہار کو کم کرنے میں زیادہ ورسٹائل ہیں، ان میں ٹارگٹ ٹرانسلیشن کو بڑھانے کی صلاحیت بھی ہے۔ اے ایس اوز کو آسانی اور درستگی کے ساتھ بھی اپنی مرضی کے مطابق بنایا جا سکتا ہے، جس سے عملی طور پر کسی بھی تبدیل شدہ جین کو نشانہ بنایا جا سکتا ہے۔ یہ درستگی اور ذاتی طب کے میدان میں زیادہ سے زیادہ استعمال کی اجازت دیتا ہے۔ مخصوص ٹشوز اور سیلولر اپٹیک کے لیے اے ایس او تھراپیز کا بنیادی چیلنج وہ ہے جو ایک بڑا چیلنج اور حد بندی کا باعث بنتا ہے۔ اس طرح کے مسائل پر قابو پانے کے لیے لیپوسومل ڈیلیوری ایک ایسا طریقہ ہے۔ لیپوسومل ڈیلیوری سسٹم حدود کے اپنے حصے کے ساتھ آتا ہے۔ خون کے بہاؤ میں سیرم پروٹین لیپوپروٹین کو غیر مستحکم کرتے ہیں۔ یہ عدم استحکام پروٹین کی کمی اور غیر مستحکم ماحول میں کارگو کو بے نقاب کرنے کا باعث بنتا ہے۔ پی ای جی (پولی (ایتھلین گلائکول) کا استعمال کرکے اس رکاوٹ پر قابو پایا جا سکتا ہے۔ تاہم، پی ای جیز بائیوڈیگریڈیبل نہیں ہوتے ہیں جس کی وجہ سے وہ جسم کے اندر جمع ہو جاتے ہیں جس سے منفی اثرات مرتب ہوتے ہیں اور زیادہ حساسیت پیدا ہوتی ہے۔ اس کے علاوہ، پی ای جی کے ساتھ تھراپی کے متعدد دور پی ای جی اینٹی باڈیز کی تشکیل کا باعث بن سکتے ہیں، جو اس سے منسلک لیپوسوم کے پھٹنے کو روکنے میں کارکردگی کی کمی کا باعث بن سکتے ہیں۔ امیونولیپوسومز کا استعمال کرتے ہوئے یہ دکھایا گیا ہے کہ ہدف زیادہ مخصوص ہو سکتا ہے کیونکہ اس علاقے میں اظہار کے پروٹین کے لیے مخصوص اینٹی باڈیز کا استعمال کرتے ہوئے، اس کے نتیجے میں اے ایس او دوا براہ راست ہدف کی جگہ کو متاثر کرتی ہے اور کہیں اور نہیں۔ مزید برآں، امیونولیپوسومز الگ ہونے میں سست ہوتے ہیں جس کی وجہ سے اے ایس او دوا کی عین مطابق رہائی ہوتی ہے جسے وہ سمیٹتے ہیں۔ ایل این سی آر این اے ایک علاج کے نقطہ نظر کے طور پر لانگ نان کوڈنگ آر این اے (ایل این سی آر این اے) بڑے ٹرانسکرپٹ (200 سے زیادہ نیوکلیوٹائڈز لمبے) ہوتے ہیں جن کی ترکیب کا طریقہ کار ایم آر این اے کی طرح ہوتا ہے لیکن ایم آر این اے کے برعکس، ایل این سی آر این اے کا پروٹین میں ترجمہ نہیں ہوتا ہے۔ ایل این سی آر این اے انٹرایکٹر عناصر اور ساختی عناصر پر مشتمل ہے۔ انٹرایکٹر عناصر دوسرے نیوکلک ایسڈ یا پروٹین کے ساتھ براہ راست تعامل کرتے ہیں جبکہ ساختی عناصر کچھ ایل این سی آر این اے کی ثانوی اور/یا ترتیری ڈھانچے بنانے کی صلاحیت کی نشاندہی کرتے ہیں۔ ایل این سی آر این اے کی اپنے انٹرایکٹر عناصر کا استعمال کرتے ہوئے نیوکلک ایسڈ کے ساتھ تعامل کرنے کی یہ صلاحیت اور اس کے ثانوی ڈھانچے کا استعمال کرتے ہوئے پروٹین کے ساتھ تعامل کرنے کی اس کی صلاحیت اسے دوسرے این سی آر این اے جیسے ایم آئی آر این اے (مائیکرو آر این اے) کے مقابلے میں زیادہ متنوع انداز میں کام کرنے کی اجازت دیتی ہے۔ ایل این سی آر این اے کو ٹرانسکرپشنل عناصر اور مختلف ایپیجینیٹک تبدیلیوں سے جڑے رہنے کے لیے جین کے مخصوص علاقوں کی صلاحیت کو متاثر کر کے جین کے ضابطے میں کردار ادا کرنے کے لیے قائم کیا گیا ہے۔ ایسی ہی ایک مثال X غیر فعال مخصوص نقل (XIST) کے معاملے میں دیکھی جا سکتی ہے۔ انسانوں میں، 46، XX خواتین 46، XY مردوں کے مقابلے میں ایک اضافی X کروموسوم (155Mb ڈی این اے) رکھتی ہیں۔ اس خوراک کے عدم توازن پر قابو پانے کے لیے، ایک ایکس کروموسوم انسانی خواتین میں جنین کی نشوونما کے تقریبا 2-8 سیل مرحلے میں تصادفی طور پر غیر فعال ہو جاتا ہے۔ ابتدائی خاموشی اور غیر فعال ایکس کروموسوم (ژی) کے بعد کی دیکھ بھال دونوں کے دوران ایپیجینیٹک شراکت کی وجہ سے سیل ڈویژنوں میں یہ غیر فعالیت بہت مستحکم ہے۔ یہ غیر فعالیت lncRNA، XIST کے ذریعے انجام دی جاتی ہے۔ XIST سی آئی ایس میں تیار کیا جاتا ہے اور ایکس کروموسوم کو غیر فعال کر دیتا ہے جس سے یہ پیدا ہوا ہے۔ غیر فعال ایکس کروموسوم کو "بار باڈی" نامی ایک گاڑے ہوئے ہیٹروکرومیٹن ڈھانچے کے طور پر دیکھا جا سکتا ہے۔ 2013 میں ایک مطالعہ نے XIST کی اس صلاحیت کو ٹرائسومی 21 کے علاج کے لیے ممکنہ علاج کے نقطہ نظر کے طور پر استعمال کیا۔ ٹرائسومی 21 کو عام طور پر ڈاؤن سنڈروم کے نام سے جانا جاتا ہے اور یہ کروموسوم 21 کی اضافی کاپی کی موجودگی کی وجہ سے ہوتا ہے۔ یہ مطالعہ اپنی نوعیت کا منفرد تھا کیونکہ اس کے بڑے سائز کی وجہ سے کوئی اور مطالعہ XIST جین کو کروموسوم میں شامل کرنے کے قابل نہیں رہا ہے۔ مطالعہ نے ڈاؤن سنڈروم کے مریضوں سے جمع کیے گئے خلیوں میں کروموسوم 21 میں سے ایک میں XIST کو شامل کیا۔ مطالعہ کروموسوم 21 میں سے ایک کی غیر فعالیت کا مشاہدہ کرنے کے قابل تھا جو ایک گاڑھا ہیٹروکرومیٹن کی شکل میں تھا اور اسے کروموسوم 21 بار باڈی کے طور پر لیبل کیا گیا تھا۔ اس طرح کے تجربات لیب کی ترتیب میں خلیوں میں کام کرنے کے لیے دکھائے گئے ہیں حالانکہ کلینیکل ٹرائلز میں کوئی ایل این سی آر این اے پر مبنی علاج نہیں ہیں۔ اس طرح کے کام کے مضمرات ٹرائیسومی 21 اور دیگر کروموسومل عوارض کو مستقبل کی جین تھراپی کی تحقیق کے لیے غور کے دائرے میں لا سکتے ہیں۔ چیلنجز این سی آر این اے تھراپی میں رکاوٹ بننے والے بڑے مسائل میں سے ایک واحد پھنسے ہوئے آر این اے مالیکیول کا استحکام ہے۔ آر این اے عام طور پر سنگل اسٹرینڈڈ ہوتا ہے لہذا ڈی ایس ڈی این اے مالیکیولز کے مقابلے میں قدرے غیر مستحکم ہوتا ہے۔ تاہم سنگل اسٹرینڈڈ آر این اے کو ڈبل اسٹرینڈڈ آر این اے (ڈی ایس آر این اے) بنا کر اس پر قابو پایا جا سکتا ہے۔ یہ کافی مؤثر ہے کیونکہ ڈی ایس آر این اے کمرے کے درجہ حرارت پر زیادہ مستحکم ہوتا ہے اور اس کی شیلف لائف طویل ہوتی ہے۔ دوسرا بڑا مسئلہ آر این اے مالیکیولز کا سیل/ٹشو/اعضاء مخصوص ہدف ہے۔ عام طور پر، اس پر قابو ایک لپڈ نینو پارٹیکل میں ڈی ایس آر این اے کو شامل کرکے اور ہدف سیل کی سطح پر رسیپٹر سے جڑے رہنے کے لیے اسے لگینڈ کے طور پر استعمال کرکے پایا جاتا ہے۔ لپڈ کے ذرات کو ان کے مخصوص ریسیپٹرز کے ذریعے جگر کے خلیوں میں لے جایا جاتا ہے اور یہ طریقہ کار جگر کے خلیوں/کینسر کو نشانہ بنانے میں موثر معلوم ہوتا ہے۔ ایک اور اعضاء جس کی ترسیل کا طریقہ کار نسبتا آسان ہے وہ آنکھ ہے۔ اس کے لیے دلچسپی کے این سی آر این اے کو براہ راست آنکھ میں انجیکشن لگانے کی ایک ناگوار تکنیک کی ضرورت ہوتی ہے۔ یہ تکنیکیں نہ صرف حملہ آور ہوتی ہیں بلکہ اس بات کو بھی یقینی نہیں بناتی ہیں کہ آیا ہدف کے اعضاء کے تمام خلیات دلچسپی کے این سی آر این اے کے ذریعے نشانہ بنائے جا رہے ہیں۔ آر این اے مالیکیول کے خلیے میں داخل ہونے کے بعد اضافی مسائل پیدا ہوتے ہیں۔ ان مسائل میں سے ایک مدافعتی نظام ہے۔ ہمارا مدافعتی نظام انٹرا سیلولر پیتھوجین سے وابستہ مالیکیولر پیٹرن (پی اے ایم پی) ریسیپٹرز اور ایکسٹرا سیلولر ٹول نما ریسیپٹرز (ٹی ایل آر) کا استعمال کرتے ہوئے آر این اے کو پہچان سکتا ہے۔ ریسیپٹرز کی فعالیت سائٹوکائن (آئی ایف این وائی-انٹرفیرون گاما) ثالثی مدافعتی ردعمل کی طرف لے جاتی ہے۔ مدافعتی ردعمل پر قابو پانے کے لیے عام ایپلی کیشنز میں دوسری نسل کی کیمیائی تبدیلیاں شامل ہیں۔ اس عمل میں مدافعتی ردعمل سے بچنے کے لیے ایک وقت میں کیمیائی تبدیلیوں میں چھوٹے کا تعارف شامل ہے۔ تاہم، اس طرح کے ترمیم شدہ ریجینٹس کو استعمال کرتے ہوئے کلینیکل ٹرائلز میں منفی مدافعتی ردعمل کی کچھ اطلاعات ہیں۔ امیونوجینسیٹی اور این سی آر این اے تھراپی کے مسائل کا کوئی طے شدہ جواب نہیں ہے۔ ترمیم شدہ اڈینو وائرس ویکٹرز کو بہت سے کلینیکل ٹرائلز میں این سی آر این اے ڈیلیوری میکانزم کے طور پر بڑے پیمانے پر استعمال کیا گیا ہے۔ خاص طور پر، ایڈینو وائرس ویکٹر کو زندہ خلیوں کے اندر اس کے استحکام اور غیر پیتھوجینسیٹی کی وجہ سے ایک موثر ترسیل کا نظام سمجھا جاتا ہے۔ اگرچہ وائرل ٹرانسفیکشن نے بنیادی تحقیق میں اہم نتائج حاصل کیے ہیں، لیکن ان مسائل میں سے ایک غیر مخصوصیت ہے جو ہدف کی منتقلی کو روکتی ہے۔ مستقبل کے ٹیسٹ اور کلینیکل ٹرائلز کے لیے وائرل ٹرانسفیکشن کی درستگی کو بہتر بنانے کے لیے مزید تحقیق کی ضرورت ہے۔ اے ایس او رہنما خطوط دسمبر 2021 میں، ایف ڈی اے نے اے ایس او منشیات کی مصنوعات کے استعمال کے لیے رہنمائی کا مسودہ تیار کیا۔ یہ مسودہ رہنمائی اسپانسر-تفتیش کاروں کی طرف ہدایت کی گئی تھی جو شدید طور پر کمزور یا جان لیوا بیماریوں کے لیے انفرادی تفتیشی اینٹی سینس اولیگونیوکلیوٹائڈز (اے ایس او) منشیات کی مصنوعات تیار کر رہے ہیں۔ شدید طور پر کمزور کرنا کسی ایسی بیماری یا حالت سے مطابقت رکھتا ہے جو بڑی ناقابل واپسی بیماری کا سبب بنتی ہے۔ تاہم، جان لیوا ہونے کی تعریف اس طرح کی گئی ہے کہ بیماری یا حالت میں موت کا امکان ہوتا ہے جب تک کہ علاج کا عمل بقا کے اختتامی نقطہ کی طرف نہ لے جائے۔ عام طور پر جن افراد کو شدید طور پر کمزور کرنے والی جان لیوا بیماری ہوتی ہے ان کے پاس علاج کا کوئی متبادل نہیں ہوتا ہے، اور ان کی بیماریاں تیزی سے بڑھ رہی ہوں گی، جس کی وجہ سے علاج کے بغیر مختصر وقت کے اندر جلد موت اور/یا تباہ کن یا ناقابل واپسی بیماری ہو جائے گی۔ منشیات کی نشوونما عام طور پر افراد کی ایک بڑی تعداد کو نشانہ بنایا جاتا ہے، اس معاملے میں یہ ممکن نہیں ہے کیونکہ اے ایس او کے عمل کے طریقہ کار کی خاصیت کے ساتھ ساتھ علاج کے قابل مریض آبادی کی نایابیت بھی شامل ہے۔ ایف ڈی اے کے ضوابط کے تحت، ایک پروٹوکول جس کے تحت ایک انفرادی اے ایس او پروڈکٹ کو کسی انسانی موضوع پر زیر انتظام کیا جاتا ہے، اس سے پہلے کہ اسے انسانی مضامین میں زیر انتظام کیا جا سکے، ادارہ جاتی جائزہ بورڈ (آئی آر بی) کے ذریعہ اس کا جائزہ لیا جانا اور اس کی منظوری دی جانی چاہیے۔ جب فرد بچہ ہوتا ہے، تو اضافی حفاظتی اقدامات کی نشاندہی کرنے کی ضرورت ہوتی ہے تاکہ کسی بھی ترقیاتی مسئلے کو ہونے سے روکا جا سکے جو فرد کی زندگی کو متاثر کر سکتا ہے۔ کفیل تفتیش کار کو فرد سے یا فرد کے لیے ذمہ دار شخص سے باخبر رضامندی حاصل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔ رضامندی میں اے ایس او دوا کے استعمال کے حصے کے طور پر معقول طور پر متوقع خطرات یا تکلیفوں کی تفصیل شامل کرنے کی ضرورت ہے۔ اس بات کی تصدیق کرنے کے لیے کہ اے ایس او فائدہ مند ہوگا، اسپانسر کو افراد سے طبی اور جینیاتی تشخیص کروانے کی بھی ضرورت ہے۔ تجزیہ جین کی ترتیب، انزیمیٹک تجزیہ، بائیو کیمیکل ٹیسٹنگ، امیجنگ تشخیص کے ذریعے ہو سکتا ہے۔ تمام نتائج کو درخواست میں شامل کرنے کی ضرورت ہے۔ اس کے علاوہ اسپانسر کو ایسے شواہد شامل کرنے کی ضرورت ہے جو اے ایس او دوا کے ذریعے نشانہ بنائے گئے جین کے مختلف قسم کے کردار کو قائم کرتے ہیں۔ اسپانسر/تفتیش کار کو یہ ثبوت بھی فراہم کرنے کی ضرورت ہے کہ شناخت شدہ جین کی مختلف حالت یا مختلف حالت فرد کے لیے منفرد ہیں۔ رہنمائی سے پتہ چلتا ہے کہ ابتدائی خوراک دستیاب غیر طبی اعداد و شمار پر مبنی ہونی چاہیے جو ماڈل حیاتیات یا ان وٹرو اسٹڈیز سے جمع کیے گئے ہیں اور دیگر اے ایس او منشیات کی مصنوعات کی خوراک کی معلومات کے ساتھ ارتباط میں ہونی چاہیے جو دستیاب ہے۔ ابتدائی خوراک پر، فارماکولوجیکل اثرات متوقع ہیں۔ مزید برآں، یہ مشورہ دیا جاتا ہے کہ خوراک بڑھانے کا طریقہ استعمال کیا جائے۔ اس میں فارماکوڈینامک اثرات اور/یا ٹرائل کے شرکاء کے اے ایس او کے ردعمل کی بنیاد پر اس کی ابتدائی خوراک سے بچاؤ کو بڑھانے کا مرحلہ شامل ہے۔ اس کے علاوہ، ایف ڈی اے کو پیش کردہ پروٹوکول میں ابتدائی خوراک کے انتخاب، خوراک کے وقفے، اور فرد پر دوا کے کلینیکل فارماکوڈینامک اثرات کی بنیاد پر خوراک میں اضافے یا خوراک میں کمی کا منصوبہ بنانے کے لیے ایک واضح خوراک کا منصوبہ اور جواز ہونا ضروری ہے۔ اس کے علاوہ ایف ڈی اے کو پیش کیے جانے پر تمام متوقع نتائج کو ڈرگ پلان میں شامل کیا جانا چاہیے۔ تفتیش کاروں کے لیے یہ انتہائی ضروری ہے کہ وہ خوراک میں اضافے کے دوران مریض کی قریب سے نگرانی کریں۔ اضافے کی مدت کے دوران، علاج کے نتائج دیکھنے کے لیے مناسب وقت فراہم کیا جانا چاہیے۔ یہ مشورہ دیا جاتا ہے کہ تفتیش کار بغیر کسی جواز کے خوراک کے ساتھ ساتھ خوراک کے وقفے میں بیک وقت تبدیلیاں نہ کرے۔ اگر زہریلا پن دیکھا جاتا ہے تو پیش کردہ منصوبے میں ڈی ایسکلیشن/منقطع کرنے کا منصوبہ شامل ہونا چاہیے۔ تمام منشیات کی انتظامیہ کو صرف ایک اندرونی مریض کی ترتیب میں ہونے کی ضرورت ہے تاکہ منشیات کے منفی اثرات کو سمجھا جا سکے۔ ایک بار جب منشیات کے زہریلے پن، فائدے اور منفی اثرات کی نشاندہی ہو جاتی ہے، تو منشیات کو آؤٹ پیشنٹ انداز میں اس وقت تک دیا جا سکتا ہے جب تک کہ منشیات کی ایک ہی مقدار کا انتظام کیا جائے۔ آر این اے تھیراپیوٹکس میسنجر آر این اے آر این اے ایڈیٹنگ حوالہ جات آر این اے جین اظہار پروٹین بائیوسنتھیس مالیکیولر جینیٹکس اسپلیسیوسوم آر این اے اسپلیسنگ لائف سائنسز انڈسٹری بھی دیکھیں۔