Calcofluor-white
کیلکو فلور وائٹ یا سی ایف ڈبلیو ایک فلوروسینٹ نیلا رنگ ہے جو حیاتیات اور ٹیکسٹائل میں استعمال ہوتا ہے۔ یہ چٹین اور سیلولوز کے 1-3 بیٹا اور 1-4 بیٹا پولیسیکرائڈز سے جڑا ہوتا ہے جو فنگی، پودوں اور طحالب پر خلیوں کی دیواروں میں موجود ہوتے ہیں۔ پودوں کے خلیوں کی حیاتیات کی تحقیق میں، یہ طحالب اور اعلی پودوں دونوں کی خلیوں کی دیواروں کو داغدار کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ یہ طب اور جانوروں کی حیاتیات میں بھی ٹشو میں پھپھوندی کے تصور اور شناخت کے لیے ایک حساس آلے کے طور پر مفید ہے۔ یوزج میڈیسن سی ایف ڈبلیو کلینیکل مائیکولوجی اور پیراسائٹولوجی دونوں میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔ آکولر پرجاتیوں میں آزادانہ طور پر زندہ امیبا میں سسٹ ہو سکتے ہیں جنہیں داغ کے ساتھ واضح طور پر دیکھا جا سکتا ہے۔ پیپ اسمیئرز میں خمیر کے ردعمل کو مضبوط کرنے میں مدد کے لیے سی ایف ڈبلیو کو پاپینکولاؤ داغ کے ساتھ استعمال کیا جا سکتا ہے۔ تحقیق میں، کیلکو فلور وائٹ کا استعمال خمیر کے خلیوں کے بڈ کے داغوں کو داغدار کرنے کے لیے بھی کیا جاتا ہے کیونکہ بڈ کے داغوں میں چٹین کا مواد زیادہ ہوتا ہے، جو انہیں باقی سیل جھلی سے زیادہ داغدار کرتا ہے۔ اس داغ کی وجہ سے، کلی کے داغوں کو شمار کرنا ممکن ہے جو خلیے کی عمر کا اشارہ ہے۔ یہ گندم کے جراثیم ایگلوٹینن (ڈبلیو جی اے) کی طرح داغ کے نمونوں کو ظاہر کرتا ہے، جو پولیسیکرائڈز پر این-ایکٹیلگلوکوسامین اور سیالک ایسڈ کو باندھتے ہیں۔ یہ خاص طور پر میوکور اور زیگومائیکوسس کے محرکات کی شناخت کے لیے مفید ہے۔ بکتر بند ڈائنوفلیجلیٹس میں تھیکل پلیٹوں کو داغدار کرنے کے لیے کیلکو فلور وائٹ کا استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ٹیکسٹائل سی ایف ڈبلیو ایک کپڑے کو روشن کرنے والا رنگ ہے۔ یہ شروع میں پانی میں گھلنشیل اور بے رنگ ہوتا ہے۔ اس کا آپٹیکل روشن کرنے کا اثر ہے جو 1940 کی دہائی سے ٹیکسٹائل کو سفید شکل دینے کے لیے استعمال ہوتا رہا ہے۔ اسے لانڈری ڈٹرجنٹس میں تجارتی طور پر روشن کرنے والے کے طور پر بھی شامل کیا جاتا ہے۔ فلوریسنس سولیوشنز جو کیلکو فلور وائٹ کے لیے آبی ہوتے ہیں ان میں جذب سپیکٹرم 300 سے 412 این ایم تک ہوتا ہے جس کی چوٹی 347 این ایم ہوتی ہے۔ فلوروسینس کی چوٹی بالائے بنفشی روشنی کے ساتھ سب سے بہتر ہوتی ہے، لیکن بنفشی/نیلی بنفشی بھی فلوروسینس کے بہترین نتائج دیتی ہے۔ کیلکو فلور-وائٹ ایک فلوروسینٹ رنگ ہے، جس کا مطلب ہے کہ اس میں ایک حوصلہ افزائی اور اخراج طول موج ہے جو ایک دوسرے سے مختلف ہے۔ محرک طول موج 380 این ایم ہے جبکہ اخراج 475 این ایم ہے۔ فلوروسینس کو بالائے بنفشی روشنی کے ساتھ سب سے بہتر دیکھا جا سکتا ہے، لیکن اسے بنفشی یا نیلے بنفشی رنگ کے ساتھ بھی دیکھا جا سکتا ہے۔ مائکروسکوپی میں فلوروسینس کے لیے استعمال ہونے والے رکاوٹ فلٹرز کی وجہ سے پھپھوندی یو وی/وایلیٹ/وایلیٹ-بلیو روشنی کے نیچے روشن سبز رنگ ظاہر کرتی ہے۔ کیلکو فلور وائٹ کو داغ کی محتاط تشریح کرنی پڑتی ہے کیونکہ کچھ غیر مخصوص رد عمل پس منظر کو فلوروسینٹ پیلے سبز رنگ کا بنا سکتے ہیں۔ بہترین ممکنہ تصویر دیکھنے کے لیے نیلے رنگ کی روشنی میں خلیوں کو دیکھ کر یا دوسرے فلٹرز کے ساتھ دیکھ کر اسے کم کیا جا سکتا ہے۔ ایونز بلیو کیلکو فلور وائٹ کے لیے ایک جوابی داغ ہے کیونکہ یہ نیلی روشنی کے ساتھ پس منظر کے بافتوں اور خلیوں کو کم کرنے میں مدد کر سکتا ہے۔ تقابلی مطالعات فنگل اونائکومیکوسس کی تشخیص کے لیے کے او ایچ، کیلکو فلور-وائٹ اور فنگل کلچرز کے تقابلی مطالعے میں، سی ایف ڈبلیو کو انسانوں میں انفیکشن کا پتہ لگانے کے لیے سب سے حساس طریقہ کے طور پر دیکھا گیا۔ مطالعہ میں دیکھا گیا کہ 150 مریضوں میں سے سی ایف ڈبلیو نے ان میں سے 95 میں مثبت دکھایا۔ مطالعہ نے KOH پر کیلکو فلور-وائٹ داغ کے استعمال کے کلیدی فوائد کا بھی جائزہ لیا۔ اس میں بحث کی گئی کہ سی ایف ڈبلیو کو فوری اسکریننگ کے وقت کی ضرورت ہوتی ہے کیونکہ یہ کم پاور کے مقاصد پر دیکھا جا سکتا ہے اور ایک منٹ کے اندر کیا جا سکتا ہے جبکہ کے او ایچ کو ہر سلائیڈ کے لیے تقریبا 3 سے 4 منٹ درکار ہوتے ہیں۔ یہ کے او ایچ کے مقابلے اسکریننگ کا ایک تیز اور زیادہ حساس طریقہ ہے، اور پس منظر کے مواد کو سی ایف سی کا استعمال کرتے ہوئے موڑ دیا جا سکتا ہے۔ انسانوں میں پھپھوندی کے انفیکشن، مائیکوسز کی تشخیص کے طریقوں کے مطالعے میں، سی ایف ڈبلیو کا موازنہ کے او ایچ اور شکاگو اسکائی بلیو 6 بی سے کیا گیا۔ سی ایف ڈبلیو نے ایسے معاملات میں مثبت جانچ دکھائی جن میں مائیکوسس کے انفیکشن کا شبہ تھا جبکہ شکاگو اسکائی بلیو 6 بی میں 55 فیصد درستگی تھی۔ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ شکاگو اسکائی بلیو 6 بی کے مقابلے میں سی ایف ڈبلیو فوری پتہ لگانے میں کم موثر ہے، لیکن یہ فنگل انفیکشن کا پتہ لگانے کا ایک موثر طریقہ ہے۔ ایک مطالعہ جس نے فلوروسینٹ مائکروسکوپی کے ساتھ سی ایف ڈبلیو کا استعمال کرتے ہوئے کینسر یا قبل از وقت زخموں میں کینڈیڈا کا پتہ لگانے کی تحقیقات کی۔ مطالعہ مائیکوٹک انفیکشن کی ایک نوع کے خلاف کیلکو فلور وائٹ کی تاثیر کو دیکھنا چاہتا تھا جو امیونوکمپروائزڈ مریضوں کے خلاف موت یا سنگین چوٹ کا سبب بن سکتا ہے۔ اس نے گرام سٹیننگ اور پی اے ایس سٹیننگ کے مقابلے میں ڈائی کی حساسیت کی بھی تحقیقات کی۔ مطالعہ نے یہ نتیجہ اخذ کیا کہ یہ سائٹوپیتھولوجی اور ہسٹوپیتھولوجی میں تشخیص کا ایک تیز اور آسان طریقہ تھا، لیکن یہ نسبتا مہنگا تھا۔ مطالعہ سے یہ بھی پتہ چلا کہ داغ کو موثر بنانے کے لیے کسی خاص تکنیک کی ضرورت نہیں تھی۔ ڈائی پی اے ایس یا گرام سٹیننگ میں بھی مداخلت نہیں کرتا ہے۔ سائٹولوجی کے لیے، پیپ-سی ایف ڈبلیو نے 135 میں سے 50 بار مثبت جواب دیا، اور ہسٹوپیتھولوجی کے لیے، اس نے صرف سی ایف ڈبلیو داغ کے لیے 135 میں سے 43 مثبت جواب دیا۔ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ پیپ اور سی ایف ڈبلیو کی جوڑی سے داغ میں بہتری آئی ہے۔ نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ یہ رنگ فوری تشخیص اور تاثیر کے لحاظ سے ناقابل یقین حد تک موثر تھا، جس کی وجہ سے یہ اس خاص مطالعے میں گرام مثبت اور پی اے ایس سے بہتر ہے۔ مجموعی طور پر، داغ کے تحقیق اور تشخیصی مقاصد کے لیے کلیدی فوائد ہیں، لیکن اس میں قدرے مہنگا ہونے کا مسئلہ ہے اور بعض انواع کے لیے اتنا درست نہیں ہو سکتا۔ کیلکو فلور-وائٹ سٹیننگ سی ایف ڈبلیو کی حدود کوکیڈیوائڈز امیٹس، ہسٹوپلاسما کیپسولٹم، اور کرپٹوکوکس نیوفارمینس سمیت متعدد فنگل حیاتیات کے ناقص داغ اور فلوروسینس کو ظاہر کرتی ہیں۔ پھیپھڑوں کی بائیوپسیز میں نیومو سسٹس کیرینی کے سی ایف ڈبلیو داغ کو ابتدائی سی ایف ڈبلیو کے ذریعے کمرے کے درجہ حرارت پر پانچ منٹ کے لیے بہتر بنایا جا سکتا ہے جس کے بعد پانچ منٹ کے لیے 65 ڈگری سیلسیس انکیوبیشن کیا جا سکتا ہے۔ فلوروسینس کو گہرے رنگ کی روغن والی پھپھوندی سے چھپایا جا سکتا ہے۔ حوالہ جات بیرونی لنکس فلوکا سے پروڈکٹ کا دستاویزی صفحہ۔ داغدار رنگ