Mad1
میڈ 1 ایک غیر ضروری پروٹین ہے جو خمیر میں اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ (ایس اے سی) میں کام کرتا ہے۔ یہ چیک پوائنٹ سپنڈل مائکرو ٹیوبلز سے کروموسوم کے منسلک ہونے کی نگرانی کرتا ہے اور خلیوں کو انافس شروع کرنے سے روکتا ہے جب تک کہ سپنڈل تعمیر نہ ہو جائے۔ نام پاگل اس مشاہدے سے مراد ہے کہ مائیکرو ٹیوبل ڈیپولیمرائزیشن کے دوران اتپریورتن خلیات مائٹوٹک گرفتاری کی کمی (ایم اے ڈی) ہیں۔ میڈ 1 انافس انفیکٹر میڈ 2 کو غیر منسلک کنیٹوچورس میں بھرتی کرتا ہے اور ویو میں میڈ 2-سی ڈی سی 20 پیچیدہ تشکیل کے لیے ضروری ہے لیکن ان وٹرو میں نہیں۔ ویو میں، میڈ 1 میڈ 2-سی ڈی سی 20 کمپلیکس کے مسابقتی انفیکٹر کے طور پر کام کرتا ہے۔ میڈ 1 کو ایم پی ایس 1 کے ذریعے فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے جو پھر دیگر سرگرمیوں کے ساتھ مل کر مائٹوٹک چیک پوائنٹ کمپلیکس (ایم سی سی) کی تشکیل کی طرف لے جاتا ہے۔ اس طرح یہ انافس کو فروغ دینے والے کمپلیکس/سائکلوسوم (اے پی سی/سی) کی سرگرمی کو روکتا ہے۔ میڈ 1 کے ہومیولوگس خمیر سے لے کر ممالیہ جانوروں تک یوکرائٹس میں محفوظ ہیں۔ تعارف 90 کی دہائی کے اوائل میں خمیر کے جینوں کی نشاندہی کی گئی جس کے نتیجے میں مائکرو ٹیوبل کو الگ کرنے (مائٹوٹک گرفتاری کی کمی والے جین-ایم اے ڈی جین) کے جواب میں مائٹوٹک گرفتاری میں خرابی پیدا ہوئی۔ ان خلیوں نے مائکرو ٹیوبل پولیمرائزیشن انفیکٹرز کی موجودگی میں کوئی مائٹوٹک گرفتاری نہیں دکھائی اور اس وجہ سے خلیوں کی تقسیم میں تاخیر کرنے کے قابل نہیں تھے۔ شناخت شدہ جینوں میں ایم اے ڈی 1، ایم اے ڈی 2 اور ایم اے ڈی 3 جین شامل تھے۔ وہ تمام یوکرائٹس میں محفوظ ہیں اور ایک ایسے راستے میں شامل ہیں جو بہن کرومیٹائڈز کی قبل از وقت علیحدگی کو روکنے کے لیے پرومیٹافیز میں فعال ہے اور نام نہاد اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ (ایس اے سی) تشکیل دیتے ہیں۔ یہ چیک پوائنٹ مائٹوٹک تکلے سے کروموسوم کے منسلک کی حیثیت کی نگرانی کرتا ہے اور انافس کو فروغ دینے والے کمپلیکس/سائکلوسوم (اے پی سی/سی) کی سرگرمی کو روک کر اور اس طرح سیل سائیکل ریگولیٹرز کے انحطاط کو روک کر انافس منتقلی میں میٹا فیز کو روکتا ہے۔ میڈ 1 اس راستے میں غیر منسلک کینیٹوکورس پر جمع ہوتا ہے اور اس مشینری میں غیر منسلک کینیٹوکورس کے لیے سینسر کے طور پر کام کرتا ہے۔ فنکشن یوکرائیوٹک خلیات مائکرو ٹیوبل پولیمرائزیشن انفیکٹرز کی موجودگی میں مائٹوٹک گرفتاری ظاہر کرتے ہیں۔ ایک تکلا اسمبلی چیک پوائنٹ تکلا کی حیثیت کی نگرانی کرتا ہے اور میٹا فیز-انافس منتقلی کو مائٹوٹک تکلا سے تمام کنیٹوکورز کے مناسب دو قطبی منسلک سے جوڑتا ہے۔ اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ ڈاون اسٹریم ایفیکٹرز کے انحطاط کو روک کر انافس کو فروغ دینے والے کمپلیکس کی سرگرمی کو روکتا ہے، جو بصورت دیگر انافس کے آغاز اور مائٹوسس سے باہر نکلنے کا باعث بنتا ہے۔ میڈ 1 کی کمی ایس اے سی فنکشن کے نقصان کا باعث بنتی ہے۔ میڈ 1 بنیادی طور پر غیر منسلک کینیٹوکورز پر مقامی ہوتا ہے اور ایک غیر منسلک کینیٹوکور کی صورت میں مائٹوٹک گرفتاری کو متحرک کرتا ہے۔ میڈ 1 اہم ایس اے سی جزو میڈ 2 کو غیر منسلک کنیٹوچورس میں بھرتی کرتا ہے اور مائٹوٹک گرفتاری کے سگنل کو بڑھاتا ہے۔ اس کی غیر فعال کھلی تشکیل میں مفت سائٹوپلاسمک میڈ 2 کا ایک پول ہے جسے او-ایم اے ڈی 2 کہا جاتا ہے۔ جب میڈ 1 سے منسلک ہوتا ہے، تو میڈ 2 ایک فعال تشکیل کو اپناتا ہے جسے بند (سی-میڈ 2) کہا جاتا ہے اور دو میڈ 1 اور دو سی-میڈ 2 اکائیوں کا ہیٹروٹیٹریمر بناتا ہے۔ میڈ 1-سی-میڈ 2 کا ہیٹروٹیٹریمر بہت مستحکم ہے اور مفت سائٹوپلاسمک او-میڈ 2 کے لیے اتپریرک رسیپٹر کے طور پر کام کرتا ہے۔ مفت او-میڈ 2 اس رسیپٹر سے جڑا رہتا ہے اور اس کی تشکیل کو فعال بند شکل میں تبدیل کر دیتا ہے۔ یہ دوسرا سی-ایم اے ڈی 2 ابھی تک نامعلوم میکانزم کے ساتھ سی ڈی سی 20 میں منتقل کیا جاتا ہے اور سی ڈی سی 20-سی-میڈ 2 کمپلیکس بناتا ہے۔ یہ کمپلیکس مائٹوٹک چیک پوائنٹ کمپلیکس (ایم سی سی) کا ایک لازمی جزو ہے۔ ایم سی سی اے پی سی/سی کو باندھتا اور روکتا ہے اور اس وجہ سے مائٹوسس کے ذریعے ترقی کو روکتا ہے۔ فاسفوریلیشن کے ذریعے میڈ 1 فنکشن کو ریگولیٹ کرنے میں دو اپ اسٹریم چیک پوائنٹ کنیز شامل ہیں۔ ایم پی ایس 1 فاسفوریلیٹس میڈ 1 دونوں وٹرو اور ویوو میں اور خیال کیا جاتا ہے کہ میڈ 1 اور میڈ 2 لوکلائزیشن کو کنیٹوچورس اور ان کے تعامل کی حرکیات کو منظم کرتا ہے۔ بی یو بی 1 دوسرا کنیز ہے جو میڈ 1 کو کنیٹوچورس میں بھرتی کرتا ہے اور اگر کوئی کنیٹوچور غیر منسلک ہو تو اسے چالو کرتا ہے۔ اگر کوئی کینیٹوکور تکلے سے منسلک ہے، تو ایس اے سی انفیکٹر پی 31 کومیٹ میڈ 2 کی میڈ 1 ثالثی تشکیلی ترتیب کو روکتا ہے اور میڈ 2 کو سی ڈی سی 20 سے منسلک ہونے سے روکتا ہے۔ ساختی خصوصیات اور میکانزم بائیو کیمیکل طریقوں سے میڈ 1 کی پیش گوئی کی گئی تھی کہ وہ 1995 میں ایک خاص چھڑی کی شکل کے ساتھ 90 کے ڈی، 718-باقیات، کنڈلی کنڈلی پروٹین کو انکوڈ کرے گا۔ کرسٹل ڈھانچے جلد ہی عمل میں آئے۔ پھر 2002 میں انسانی میڈ 1 کا کرسٹل ڈھانچہ انسانی میڈ 2 کے ساتھ ایک ٹیٹریمر بنانے والے کمپلیکس میں شائع ہوا۔ تجرباتی حدود کی وجہ سے ڈھانچہ صرف میڈ 1 کے باقیات 484-584 کو ظاہر کرتا ہے۔ لمبا میڈ 1 مونومرز کو ایک متوازی کنڈلی کنڈلی کے ذریعے مضبوطی سے ایک ساتھ رکھا جاتا ہے جس میں این-ٹرمینل الفا ہیلیسیس شامل ہوتے ہیں۔ میڈ 1 زنجیریں کنڈلی کنڈلی سے اپنے میڈ 2 لگینڈ کی طرف اشارہ کرتی ہیں جو میڈ 2 کے ساتھ دو ذیلی کمپلیکس بناتی ہیں۔ الفا ہیلیکس 1 اور 2 کے درمیان کا حصہ میڈ 2 بائنڈنگ ڈومین پر مشتمل ہے۔ اس بائنڈنگ ڈومین کا پہلا حصہ لچکدار ہے اور ایک غیر متناسب کمپلیکس کو جنم دیتے ہوئے مختلف تشکیلات کو اپناتا ہے۔ اپنے کام میں، تھرموڈینامک اسٹڈیز کا استعمال کرتے ہوئے، سیرونی اور دیگر۔ دکھائیں کہ میڈ 1 افعال جیسے کہ میڈ 2-سی ڈی سی 20 پیچیدہ تشکیل کی شرح کو کم کرنا اور اس وجہ سے ویو میں مسابقتی رکاوٹ کے طور پر کام کرتا ہے۔ مزید برآں مصنفین کا خیال ہے کہ میڈ 1-میڈ 2 بائنڈنگ سائٹس کو ڈھانچے کے اندر دفن کیا گیا ہے شاید بائنڈنگ سائٹس کو سی ڈی سی 20 بائنڈنگ کے لیے ناقابل رسائی بنا دیا گیا ہے۔ میڈ 1-میڈ 2 بائنڈنگ اس لحاظ سے غیر معمولی ہے کہ میڈ 2 سی-ٹرمینل میڈ 1 پر فولڈ ہو جاتا ہے۔ اس لیے مصنفین یہ نتیجہ اخذ کرتے ہیں کہ ایک غیر متزلزل میڈ 1-میڈ 2 کمپلیکس میڈ 2 کو جاری نہیں کرے گا جس کے لیے ایک ناول کی ضرورت ہوتی ہے، جسے اب تک ناقص طور پر سمجھا گیا ہے، تشخیصی تبدیلی کا طریقہ کار۔ مییوسس کے دوران کروموسوم نمبر (اینیوپلوئڈیز) میں کینسر کی بے ضابطگیاں ڈاؤن سنڈروم جیسی انسانی بیماریوں کے لیے ذمہ دار ہیں اور کینسر کے خلیوں میں بھی کثرت سے سامنے آتی ہیں۔ ایس اے سی کا لازمی کام اس مفروضے کو جنم دیتا ہے کہ ایس اے سی کی تغیرات اور خاص طور پر ایس اے سی کی غیر فعالیت ٹیومرجینسیس کی وجہ ہو سکتی ہے یا کم از کم ٹیومرجینسیس کو آسان بنا سکتی ہے۔ اس خیال کے خلاف، یہ دکھایا گیا کہ جب ایس اے سی کے اجزاء موجود نہیں ہوتے ہیں تو کینسر کے خلیات apoptosis سے گزرتے ہیں۔ اس ماڈل میں، دوسرے ماڈل کے برعکس، ایس اے سی کی غیر فعالیت تیزی سے تقسیم ہونے والے کینسر کے خلیوں کو مارنے کا ایک ممکنہ طریقہ بن جاتا ہے۔ میڈ 1 پی، ایس اے سی، اپوپٹوسس اور کینسر کے درمیان سالماتی روابط اب بھی پوری طرح سے سمجھ میں نہیں آئے ہیں۔ مزید دیکھیں MAD2 ہائپر فاسفوریلیشن حوالہ جات سیل سائیکل Saccharomyces cerevisiae جین پروٹین