Geniom RT Analyzer
جینیم آر ٹی تجزیہ کار ایک آلہ ہے جو مالیکیولر بائیولوجی میں تشخیصی جانچ کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ جینوم آر ٹی تجزیہ کار ٹشو مائیکرو آر این اے کی سطح کی متحرک نوعیت کو بیماری کی ترقی کے لیے بائیو مارکر کے طور پر استعمال کرتا ہے۔ جینیم تجزیہ کار مائیکرو فلوئڈک اور بائیوچپ مائیکرو ارے ٹیکنالوجی کو شامل کرتا ہے تاکہ مائیکرو فلوئڈک پرائمر ایکسٹینشن اسیسے (ایم پی ای اے) تکنیک (شکل 2) کے ذریعے مائیکرو آر این اے کی مقدار طے کی جا سکے۔ پس منظر کینسر جیسی بہت سی انسانی بیماریاں متحرک مائیکرو آر این اے کی سطح کے ساتھ سالماتی سطح پر شامل ہونے کے بارے میں سوچا جاتا ہے۔ مائکرو آر این اے جین کے اظہار کو منظم کرنے میں اہم ہیں اور اس وجہ سے بالترتیب آنکوجینز یا ٹیومر دبانے والے جینوں کو چالو کرنے یا غیر فعال کرنے پر اہم اثرات مرتب کر سکتے ہیں۔ کینسر کی مخصوص اقسام کی ترقی کے دوران مختلف سطحوں پر بعض مائیکرو آر این اے کا پتہ چلا ہے۔ ابتدائی تشخیصی جانچ بہت سی انسانی بیماریوں کے لیے ایک چیلنج ثابت ہوئی ہے، کیونکہ علامتی فینوٹائپز یا تو مبہم یا باریک نوعیت کے ہو سکتے ہیں۔ نتیجے کے طور پر، سالماتی بائیو مارکروں کی خصوصیت کے لیے وقف ایک وسیع تحقیقی شعبہ کھل گیا ہے۔ بائیو مارکر بیماری کے مختلف مراحل پر حیاتیاتی مالیکیولز کی درست پیمائش کی اجازت دیتے ہیں۔ یہ پیمائش بالآخر مستقبل کی ابتدائی تشخیصی جانچ کے لیے مفید ایک وافر ڈیٹا سورس میں معاون ثابت ہوں گی۔ جینوم آر ٹی تجزیہ کار خودکار مائیکرو آر این اے بائیو مارکر پروفائلنگ انجام دیتا ہے جو بدلے میں اس بڑھتے ہوئے ڈیٹا سورس میں معاون ثابت ہوگا۔ مائیکرو آر این اے کی سطحوں کا حیاتیات کا پتہ لگانا جگہ اور وقت دونوں یا دونوں کے امتزاج میں مفید ثابت ہوسکتا ہے۔ مقامی مائیکرو آر این اے حرکیات: حالیہ دریافتوں نے خون میں آزاد تیرتے ہوئے مائیکرو آر این اے کا پتہ لگایا ہے۔ یہ آزاد تیرتے ہوئے مائیکرو آر این اے بافتوں کے خلیوں کے اندر مائیکرو آر این اے کے مقابلے میں اینڈوجینس آر این اے ایز سرگرمی سے محفوظ پائے جاتے ہیں۔ یہ تحفظ ان آزاد تیرتے ہوئے مائیکرو آر این اے کو مناسب مستحکم بائیو مارکر کے طور پر پیش کرتا ہے۔ ٹشوز کے درمیان مائیکرو آر این اے کی سطح کا موازنہ کرتے وقت اس مستحکم بائیو مارکر کو کنٹرول کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ مائیکرو آر این اے کی سطحوں کا موازنہ کرنا اور اس طرح بافتوں میں اظہار کے نمونوں کا اندازہ لگانا مختلف ایپلی کیشنز جیسے کینسر اور بیماری کی درجہ بندی میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔ عارضی مائیکرو آر این اے حرکیات: کینسر کے مریضوں کے لیے ٹیومر دبانے والی دوائیوں کو ڈیزائن کرنے اور تیار کرنے میں ایک پیچیدگی یہ ہے کہ ٹیومر کے اندر اور اس کے آس پاس کا سالماتی ماحول ٹیومر کی نشوونما کے پورے عمل میں مستقل نہیں لگتا ہے۔ مائیکرو آر این اے مالیکیولز کی ایک کلاس ہیں جو ٹیومر کے لیے اس ماحولیاتی اتار چڑھاؤ میں معاون ہیں۔ وقت کے ساتھ ٹیومر یا باقاعدہ بافتوں میں مائیکرو آر این اے کی سطح کا پتہ لگانے سے ان ماحولیاتی تبدیلیوں کی نوعیت کے بارے میں بصیرت حاصل کرنے میں مدد مل سکتی ہے۔ اس معلومات کو بدلے میں یہ فیصلہ کرنے میں استعمال کیا جا سکتا ہے کہ مختلف علاج کی مداخلتوں کے لیے مناسب وقت کب ہے۔ ورک فلو جینوم آر ٹی تجزیہ کار کے لیے پلیٹ فارم ایک بائیو چپ پر مشتمل ہوتا ہے جس میں 8 الگ الگ مائیکرو آرے ہوتے ہیں۔ ٹشو سے ماخوذ مائیکرو آر این اے کو بائیوچپ کے تعارف سے پہلے علاج کی ضرورت نہیں ہوتی ہے۔ بائیوچپ میں توثیق شدہ اور بہتر حسب ضرورت کیپچر پروبز ہوتے ہیں اور آن چپ مائیکرو فلوئڈک پرائمر ایکسٹینشن اسیس (ایم پی ای اے) براہ راست مائیکرو آر این اے-کیپچر پروب ہائبرڈائزیشن کو قابل بناتا ہے۔ بائیوٹن لیبلنگ، پرائمر ایکسٹینشن اور دھونے کے بعد، جینوم اینالائزر صفوں کی خودکار پروسیسنگ سے گزرتا ہے۔ چارج کپلڈ ڈیوائس (سی سی ڈی) کیمرا بائیوچپ ریڈ آؤٹ میں مدد کرتا ہے جو مائیکرو آر این اے کی مقدار کی تصویری تصویر دکھاتا ہے۔ اس تصویر کو بائیوٹینیلیٹڈ نیوکلیوٹائڈز کے استعمال اور اس کے بعد سٹریپٹا ویڈن-فائیکوریتھرین-کنجوگیٹ کے ساتھ داغ لگانے سے تقویت ملتی ہے۔ فی بائیوچپ 8 الگ الگ مائیکرو ارے کے استعمال کی وجہ سے، سات نقل کی شدت کی ریڈنگ دستیاب کرائی جاتی ہیں اور میڈین ویلیو عام طور پر گرافیکل نتائج پر لاگو ہوتی ہے۔ اس کے بعد بائیو مارکر تشخیص کا تجزیہ کیا جاتا ہے اور ڈیٹا کو ایم آئی آر ڈی بی ایکس پی ڈیٹا بیس میں محفوظ کیا جا سکتا ہے۔ انوویشن ایم پی ای اے: ایم پی ای اے تکنیک مائیکرو فلوئڈک ٹیکنالوجی کا استعمال کرتی ہے تاکہ صحیح وقت کو یقینی بنایا جا سکے اور اس کے نتیجے میں مائیکرو آر این اے مالیکیولز کے ساتھ کیپچر پروبز کی درست صف بندی کو یقینی بنایا جا سکے۔ پروب مائیکرو آر این اے ہائبرڈائزیشن کے روایتی طریقوں کے لیے ممکنہ طور پر مہنگے ریجینٹس کے ساتھ مائیکرو آر این اے کے پہلے علاج کی ضرورت ہوتی ہے۔ ان روایتی طریقوں میں ہائبرڈائزیشن سے پہلے بائیوٹن کے ابتدائی تعارف کی بھی ضرورت ہوتی ہے۔ مائکرو فلوڈکس کے استعمال کی وجہ سے، پرائمر کی توسیع سے پہلے نہ تو ابتدائی بائیوٹن اور نہ ہی ریجینٹ ٹریٹمنٹ کی ضرورت ہوتی ہے۔ بلکہ غیر لیبل شدہ، ہائبرڈائزڈ مائیکرو آر این اے انزیمیٹک طول و عرض کے لیے پرائمر کے طور پر برتاؤ کرتا ہے، ایک ایسا عمل جس میں بائیوٹینیلیٹڈ نیوکلیوٹائڈز کو جمع کیا جاتا ہے۔ حوالہ جات سالماتی حیاتیات