Monobody
مونو باڈیز مصنوعی بائنڈنگ پروٹین ہیں جو فائبرونیکٹن ٹائپ III ڈومین (ایف این 3) کو مالیکیولر اسکیفولڈ کے طور پر استعمال کرتے ہوئے بنائے جاتے ہیں۔ خاص طور پر، بائنڈنگ پروٹین کی یہ کلاس انسانی فائبرونیکٹن کے 10 ویں ایف این 3 ڈومین کی متنوع لائبریری پر بنائی گئی ہے۔ مونو باڈیز ٹارگٹ بائنڈنگ پروٹین بنانے کے لیے اینٹی باڈیز کا ایک آسان اور مضبوط متبادل ہیں۔ ہائبرڈ اصطلاح مونو باڈی 1998 میں کوئڈ گروپ نے تیار کی تھی جس نے انسانی فائبرونیکٹن کے دسویں ایف این 3 ڈومین کا استعمال کرتے ہوئے مونو باڈی تصور کا مظاہرہ کرنے والا پہلا مقالہ شائع کیا تھا۔ مونو باڈیز مشترکہ کتب خانوں سے تیار کی جاتی ہیں جن میں ایف این 3 اسکیفولڈ کے کچھ حصوں کو مالیکیولر ڈسپلے اور ہدایت شدہ ارتقاء کی ٹیکنالوجیز جیسے فیج ڈسپلے، ایم آر این اے ڈسپلے اور خمیر کی سطح کے ڈسپلے کا استعمال کرتے ہوئے متنوع بنایا جاتا ہے۔ مونو باڈیز کی ایک بڑی تعداد جو اپنے متعلقہ اہداف سے زیادہ وابستگی اور اعلی خاصیت رکھتی ہے، رپورٹ کی گئی ہے۔ مونو باڈیز کا تعلق مالیکیولز کی کلاس سے ہے جسے اجتماعی طور پر اینٹی باڈی میمکس (یا اینٹی باڈی میمیٹکس) اور متبادل اسکیفولڈز کہا جاتا ہے جس کا مقصد قدرتی اینٹی باڈی مالیکیولز کی کوتاہیوں پر قابو پانا ہے۔ روایتی اینٹی باڈیز کے مقابلے میں مونو باڈیز کا ایک بڑا فائدہ یہ ہے کہ مونو باڈیز کو آسانی سے جینیاتی طور پر انکوڈڈ انٹرا سیلولر انفیکٹرز کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے، یعنی آپ صرف مونو باڈی ایکسپریشن ویکٹر کے ساتھ سیل کو منتقل کرکے اپنی پسند کے سیل میں مونو باڈی انفیکٹر کا اظہار کر سکتے ہیں۔ یہ بنیادی ایف این 3 سکافولڈ کی خصوصیات کی وجہ سے ہے: چھوٹے (~ 90 باقیات)، مستحکم، پیدا کرنے میں آسان، اور اس میں ڈائیسلفائڈ بانڈز کی کمی جو سیلولر ماحول کی ریڈوکس صلاحیت سے قطع نظر فنکشنل مونو باڈیز پیدا کرنا ممکن بناتی ہے، بشمول سائٹوپلازم اور نیوکلئس کا کم ہونے والا ماحول۔ اس کے برعکس، زیادہ تر اینٹی باڈیز اور اینٹی باڈیز کے ٹکڑے ڈائیسلفائیڈ بانڈز کی تشکیل پر منحصر ہوتے ہیں اور انہیں آکسیڈائزنگ ماحول میں تیار کیا جانا چاہیے۔ مونو باڈی ٹیکنالوجی کو بائیوٹیکنالوجی کی صنعت میں اپنایا گیا ہے، خاص طور پر ایڈنیکسس، ایک بائیوٹیکنالوجی کمپنی جو 2007 سے ایڈنیکٹنس کے نام سے برسٹل-مائرز اسکبب کا حصہ رہی ہے (اصل میں اس کے پیشرو، فائیلوس کے ذریعہ ٹرائنکٹنس کے طور پر)۔ ایک مثال پیگڈینینیب (انجیوسیپٹ) ہے، جو ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر ریسیپٹر 2 (وی ای جی ایف آر-2) کا مخالف ہے، جو اکتوبر 2007 میں گلیوبلاسٹوما کے علاج کی تحقیقات کرنے والے فیز II کلینیکل ٹرائلز میں داخل ہوا ہے۔ ساخت مقامی ایف این 3 سکافولڈ 94 امینو ایسڈ پر مشتمل ہوتا ہے اور اس میں تقریبا 10 کے ڈی اے کا مالیکیولر ماس ہوتا ہے، جو آئی جی جی قسم کے اینٹی باڈی سے پندرہ گنا چھوٹا ہوتا ہے اور اینٹی باڈی کے واحد متغیر ڈومین کے سائز سے موازنہ کرتا ہے۔ وہ انسانی فائبرونیکٹن کی ساخت پر مبنی ہیں، خاص طور پر اس کے دسویں ایکسٹرا سیلولر ٹائپ III ڈومین پر۔ اس ڈومین میں اینٹی باڈی متغیر ڈومینز کی طرح ایک ڈھانچہ ہے، جس میں سات بیٹا شیٹس ہیں جو بیٹا سینڈوچ بناتی ہیں اور ہر طرف تین بے نقاب لوپس ہیں جو تین تکمیلی تعین کرنے والے علاقوں سے مطابقت رکھتے ہیں۔ مونو باڈیز میں دھاتی آئنوں اور مرکزی ڈائیسلفائیڈ بانڈ کے لیے بائنڈنگ سائٹس کی کمی ہوتی ہے۔ مونو باڈی لائبریری ڈیزائن مختلف ٹارگٹ مالیکیولز کے لیے اعلی وابستگی اور خاصیت کے ساتھ مونو باڈیز کو مشترکہ لائبریریوں سے تیار کیا جا سکتا ہے جس میں ایف این 3 اسکیفولڈ کے حصے متنوع ہوتے ہیں۔ مونو باڈی لائبریریوں کے دو الگ الگ ڈیزائن ہیں جو کامیاب رہے ہیں۔ پہلی قسم کچھ یا تمام لوپس بی سی (دوسرے اور تیسرے بیٹا شیٹس کے درمیان)، ڈی ای (چوتھے اور پانچویں بیٹا شیٹس کے درمیان) اور ایف جی (چھٹے اور ساتویں شیٹس کے درمیان) میں ترمیم کرتی ہے۔ یہ ڈیزائن ایک کنویکس سطح پر متنوع پوزیشنیں پیدا کرتا ہے جو کنکیو سطحوں جیسے انزائم فعال سائٹس کو نشانہ بنانے کے لیے موزوں ہے۔ دوسری قسم سی ڈی اور ایف جی لوپس کے علاوہ کچھ یا تمام سی، ڈی، ایف اور جی (یا تیسرے، چوتھے، چھٹے اور ساتویں) اسٹرینڈز میں پوزیشنوں میں ترمیم کرتی ہے۔ یہ ڈیزائن ایک چپٹی، قدرے کنکریٹ سطح بناتا ہے جو عام طور پر پروٹین-پروٹین تعاملات میں شامل سطحوں کو نشانہ بنانے کے لیے موزوں ہے۔ سنگل ڈومین اینٹی باڈی حوالہ جات اینٹی باڈی میمیٹکس بھی دیکھیں