Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside
{{DISPLAYTITLE: Isopropyl β-D-1-theogalactopyranoside}} Isopropyl β-1-theogalactopyranoside (IPTG) ایک سالماتی حیاتیات ریجینٹ ہے۔ یہ مرکب ایلولیکٹوز کی ایک سالماتی نقالی ہے، ایک لییکٹوز میٹابولائٹ جو لاک اوپیرون کی نقل کو متحرک کرتا ہے، اور اس وجہ سے یہ پروٹین کے اظہار کو متاثر کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے جہاں جین لاک آپریٹر کے کنٹرول میں ہوتا ہے۔ عمل کا طریقہ کار ایلولیکٹوز کی طرح، آئی پی ٹی جی لاک ریپریسر سے جڑا رہتا ہے اور لاک آپریٹر سے ٹیٹرامیرک ریپریسر کو ایلوسٹیرک انداز میں جاری کرتا ہے، جس سے لاک اوپیرون میں جینوں کی نقل کی اجازت ملتی ہے، جیسے کہ بیٹا-گیلیکٹوسیڈیز کے لیے جین کوڈنگ، ایک ہائیڈرولیز انزائم جو β-گیلیکٹوسائڈز کے ہائیڈرولیسس کو مونوساکرائڈز میں اتپریرک کرتا ہے۔ لیکن ایلولیکٹوز کے برعکس، سلفر (ایس) ایٹم ایک کیمیائی بندھن بناتا ہے جو خلیے کے ذریعہ غیر ہائیڈرولیزیبل ہوتا ہے، جو خلیے کو انڈیوسر کو میٹابولائز کرنے یا خراب کرنے سے روکتا ہے۔ لہذا، ایک تجربے کے دوران اس کا ارتکاز مستقل رہتا ہے۔ ای کولی کے ذریعہ آئی پی ٹی جی کا استعمال لییکٹوز پارمیز کے عمل سے آزاد ہو سکتا ہے، کیونکہ نقل و حمل کے دیگر راستے بھی شامل ہیں۔ کم ارتکاز پر، آئی پی ٹی جی لییکٹوز پارمیز کے ذریعے خلیوں میں داخل ہوتا ہے، لیکن زیادہ ارتکاز پر (عام طور پر پروٹین انڈکشن کے لیے استعمال ہوتا ہے)، آئی پی ٹی جی لییکٹوز پارمیز سے آزادانہ طور پر خلیوں میں داخل ہو سکتا ہے۔ لیبارٹری میں استعمال جب 4 ڈگری سیلسیس یا اس سے نیچے پاؤڈر کے طور پر ذخیرہ کیا جائے تو آئی پی ٹی جی 5 سال تک مستحکم رہتا ہے۔ یہ محلول میں نمایاں طور پر کم مستحکم ہے ؛ سگما کمرے کے درجہ حرارت پر ایک ماہ سے زیادہ کے لیے ذخیرہ کرنے کی سفارش کرتا ہے۔ آئی پی ٹی جی 100 ایم یو ایم او ایل/ایل سے 3 ایم ایم او ایل/ایل کے ارتکاز کی حد میں پروٹین کے اظہار کا ایک موثر محرک ہے۔ عام طور پر، آئی پی ٹی جی کے ایک جراثیم سے پاک، فلٹر شدہ 1 مول/ایل محلول کو تیزی سے بڑھتے ہوئے بیکٹیریل کلچر میں شامل کیا جاتا ہے، تاکہ 1 ایم ایم او ایل/ایل کا حتمی ارتکاز دیا جا سکے۔ استعمال شدہ ارتکاز کا انحصار مطلوبہ انڈکشن کی طاقت کے ساتھ ساتھ استعمال شدہ خلیوں یا پلازمیڈ کے جینوٹائپ پر بھی ہوتا ہے۔ اگر لیک آئی کیو، ایک میوٹینٹ جو لیک ریپریسر کو زیادہ پیدا کرتا ہے، موجود ہے، تو آئی پی ٹی جی کا زیادہ ارتکاز ضروری ہو سکتا ہے۔ نیلی سفید اسکرین میں، آئی پی ٹی جی کو ایکس-گیل کے ساتھ مل کر استعمال کیا جاتا ہے۔ نیلی سفید اسکرین ان کالونیوں کی اجازت دیتی ہے جو کلوننگ کے تجربات میں شناخت کے لیے غیر ریکومبیننٹ کے بجائے ریکومبیننٹ پلازمیڈ کے ساتھ تبدیل ہو چکی ہیں۔ حوالہ جات بیرونی روابط آئی پی ٹی جی پی ڈی بی کاربوہائیڈریٹ سالماتی حیاتیات آئسوپروپائل مرکبات نامیاتی سلفر مرکبات میں پروٹین سے منسلک ہیں