CAR T cell
حیاتیات میں، چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹرز (سی اے آر)-جسے چیمیرک امیونوریسیپٹرز، چیمیرک ٹی سیل ریسیپٹرز یا مصنوعی ٹی سیل ریسیپٹرز بھی کہا جاتا ہے-وہ ریسیپٹر پروٹین ہیں جو ٹی خلیوں کو ایک مخصوص اینٹیجن کو نشانہ بنانے کی نئی صلاحیت دینے کے لیے تیار کیے گئے ہیں۔ ریسیپٹر اس لحاظ سے چمیرک ہوتے ہیں کہ وہ اینٹیجن بائنڈنگ اور ٹی سیل ایکٹیویٹنگ افعال دونوں کو ایک ہی ریسیپٹر میں جوڑتے ہیں۔ سی اے آر ٹی سیل تھراپی کینسر کے علاج کے لیے سی اے آر کے ساتھ تیار کردہ ٹی خلیوں کا استعمال کرتی ہے۔ سی اے آر-ٹی امیونو تھراپی کی بنیاد کینسر کے خلیوں کو پہچاننے کے لیے ٹی خلیوں میں ترمیم کرنا ہے تاکہ انہیں زیادہ مؤثر طریقے سے نشانہ بنایا جا سکے اور تباہ کیا جا سکے۔ سائنس دان لوگوں سے ٹی خلیات حاصل کرتے ہیں، انہیں جینیاتی طور پر تبدیل کرتے ہیں، پھر اس کے نتیجے میں آنے والے سی اے آر ٹی خلیات کو مریضوں میں ان کے ٹیومر پر حملہ کرنے کے لیے ڈالتے ہیں۔ سی اے آر ٹی خلیات یا تو مریض کے اپنے خون میں ٹی خلیات سے (خودکار طور پر) یا کسی دوسرے، صحت مند، عطیہ دہندہ کے ٹی خلیات سے (یکساں طور پر) حاصل کیے جا سکتے ہیں۔ ایک بار کسی شخص سے الگ ہونے کے بعد، یہ ٹی خلیات جینیاتی طور پر ایک مخصوص سی اے آر کو ظاہر کرنے کے لیے تیار کیے جاتے ہیں، جس میں ایچ آئی وی جیسے انجینئرڈ لینٹیوائرس سے حاصل کردہ ویکٹر کا استعمال کیا جاتا ہے (جین تھراپی میں لینٹیویرل ویکٹر دیکھیں)۔ سی اے آر وصول کنندہ کے ٹی خلیوں کو ٹیومر کی سطح پر موجود اینٹیجن کو نشانہ بنانے کے لیے پروگرام کرتا ہے۔ حفاظت کے لیے، سی اے آر ٹی خلیات کو ایک اینٹیجن کے لیے مخصوص ہونے کے لیے تیار کیا جاتا ہے جو ٹیومر پر ظاہر ہوتا ہے لیکن صحت مند خلیوں پر ظاہر نہیں ہوتا ہے۔ سی اے آر ٹی خلیات کو مریض میں داخل کرنے کے بعد، وہ کینسر کے خلیات کے خلاف "زندہ دوا" کے طور پر کام کرتے ہیں۔ جب وہ کسی خلیے کی سطح پر اپنے ہدف شدہ اینٹیجن کے ساتھ رابطے میں آتے ہیں، تو سی اے آر ٹی خلیات اس سے جڑے ہوتے ہیں اور فعال ہو جاتے ہیں، پھر پھیلتے ہیں اور سائٹوٹوکسک بن جاتے ہیں۔ سی اے آر ٹی خلیات خلیوں کو کئی میکانزم کے ذریعے تباہ کرتے ہیں، بشمول وسیع تر محرک خلیوں کا پھیلاؤ، اس حد تک بڑھانا جس تک وہ دوسرے زندہ خلیوں کے لیے زہریلے ہوتے ہیں (سائٹوٹوکسائٹی)، اور ان عوامل کے بڑھتے ہوئے سراو کا سبب بن کر جو دوسرے خلیوں جیسے سائٹوکائنز، انٹرلیوکنز اور نشوونما کے عوامل کو متاثر کر سکتے ہیں۔ سی اے آر ٹی خلیوں کی سطح دو قسم کے شریک رسیپٹرز، سی ڈی 4 اور سی ڈی 8 میں سے کسی ایک کو برداشت کر سکتی ہے۔ یہ دو خلیوں کی اقسام، جنہیں بالترتیب سی ڈی 4 + اور سی ڈی 8 + کہا جاتا ہے، مختلف اور تعامل کرنے والے سائٹوٹوکسک اثرات رکھتے ہیں، اور ایسا معلوم ہوتا ہے کہ خلیوں کی اقسام کے 1 سے 1 تناسب کو استعمال کرنے والے علاج ہم آہنگی والے اینٹی ٹیومر اثرات فراہم کرتے ہیں۔ اینٹی باڈی اور ٹی سیل ریسیپٹر کے حصوں پر مشتمل پہلا چیمیرک ریسیپٹر 1987 میں یوشیہیسا کووانا اور دیگر نے بیان کیا تھا۔ جاپان میں فوجیٹا ہیلتھ یونیورسٹی اور کیووا ہکو کوگیو کمپنی لمیٹڈ میں، اور آزادانہ طور پر 1989 میں اسرائیل کے ویزمین انسٹی ٹیوٹ میں گیڈیون گروس اور زیلگ ایشار کے ذریعہ۔ اصل میں "ٹی باڈیز" کہلانے والے، ان ابتدائی طریقوں نے ٹی سی آر-α یا ٹی سی آر-β پروٹین کے مستقل ڈومینز کے ساتھ متنوع اہداف سے خاص طور پر جڑے رہنے کی اینٹی باڈی کی صلاحیت کو یکجا کیا۔ 1991 میں، کیلیفورنیا یونیورسٹی، سان فرانسسکو میں آرتھر ویس کے ذریعہ سی ڈی 3 جی او کے انٹرا سیلولر سگنلنگ ڈومین پر مشتمل چیمیرک ریسیپٹرز کو ٹی سیل سگنلنگ کو چالو کرنے کے لیے دکھایا گیا۔ اس کام نے CD3ζ انٹرا سیلولر ڈومینز کو اینٹی باڈی جیسے ایکسٹرا سیلولر ڈومینز، عام طور پر سنگل چین فریکشن متغیر (SCFv) ڈومینز کے ساتھ ساتھ پروٹین جیسے CD4 کے ساتھ چیمیرک ریسیپٹرز میں شامل کرنے کا اشارہ کیا، جسے بعد میں پہلی نسل کے CARs کہا گیا۔ سی ڈی 4 ایکسٹرا سیلولر ڈومین اور سی ڈی 3 جی او انٹرا سیلولر ڈومین پر مشتمل پہلی نسل کا سی اے آر 1990 کی دہائی کے وسط میں بائیوٹیکنالوجی کمپنی سیل جینسیس کے ذریعہ چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹر ٹی خلیوں کے پہلے کلینیکل ٹرائل میں استعمال کیا گیا تھا، جس سے گود لینے والے ٹی خلیوں کو ایچ آئی وی سے متاثرہ خلیوں کو نشانہ بنانے کی اجازت ملی، حالانکہ یہ کوئی کلینیکل بہتری ظاہر کرنے میں ناکام رہا۔ 1990 کی دہائی میں ٹھوس ٹیومر میں سی اے آر ٹی خلیوں کے اسی طرح کے ابتدائی کلینیکل ٹرائلز میں پہلی نسل کے سی اے آر کا استعمال کرتے ہوئے ٹھوس ٹیومر اینٹیجن جیسے ایم یو سی 1 کو نشانہ بناتے ہوئے منتقل شدہ ٹی خلیوں کی طویل مدتی استقامت نہیں دکھائی دی یا اس کے نتیجے میں نمایاں تخفیف نہیں ہوئی۔ 2000 کی دہائی کے اوائل میں، سی ڈی 28 یا 4-1 بی بی جیسے شریک محرک ڈومینز کو پہلی نسل کے سی اے آر کے سی ڈی 3 زیو انٹرا سیلولر ڈومین میں شامل کیا گیا۔ دوسری نسل کے سی اے آر کے نام سے موسوم، ان تعمیرات نے پری کلینیکل ماڈلز میں زیادہ استقامت اور ٹیومر کلیئرنس میں بہتری دکھائی۔ 2010 کی دہائی کے اوائل میں کلینیکل ٹرائلز میں دوسری نسل کے سی اے آر کا استعمال کرتے ہوئے سی ڈی 19 کو نشانہ بنایا گیا، جو ایک پروٹین ہے جس کا اظہار عام بی خلیوں کے ساتھ ساتھ بی سیل لیوکیمیا اور لیمفوما نے کیا ہے، این سی آئی، یونیورسٹی آف پنسلوانیا، اور میموریل سلوان کیٹرینگ کینسر سینٹر کے تفتیش کاروں نے سی اے آر ٹی سیل تھراپی کی کلینیکل افادیت کا مظاہرہ کیا اور اس کے نتیجے میں بہت سے پہلے سے علاج شدہ مریضوں میں مکمل معافی ہوئی۔ ان آزمائشوں کی وجہ سے بالآخر امریکہ میں 2017 میں ایف ڈی اے کی طرف سے سی اے آر ٹی خلیوں کی پہلی دو منظوریاں حاصل ہوئیں، جو کہ ٹساجینلیکلیوسل (کیمریا) کے لیے تھیں، جن کی مارکیٹنگ نووارٹس نے اصل میں بی-سیل کے پیش رو ایکیوٹ لیمفوبلاسٹک لیوکیمیا (بی-اے ایل ایل) کے لیے کی تھی، اور آکسیکابٹیجین سیلولیسل (یسکارٹا)، جسے کائٹ فارما نے اصل میں پھیلے ہوئے بڑے بی-سیل لیمفوما (ڈی ایل بی سی ایل) کے لیے مارکیٹنگ کی تھی۔ اب چھ ایف ڈی اے سے منظور شدہ سی اے آر ٹی تھراپی موجود ہیں۔ پیداوار سی اے آر ٹی خلیوں کی تیاری کا پہلا قدم انسانی خون سے ٹی خلیوں کی علیحدگی ہے۔ سی اے آر ٹی خلیات یا تو مریض کے اپنے خون سے تیار کیے جا سکتے ہیں، جسے آٹولوگس علاج کہا جاتا ہے، یا صحت مند عطیہ دہندہ کے خون سے، جسے ایلوجینک علاج کہا جاتا ہے۔ دونوں صورتوں میں پیداوار کا عمل ایک جیسا ہے ؛ صرف ابتدائی خون دینے والے کا انتخاب مختلف ہے۔ سب سے پہلے، لیوکوسائٹس کو خون کے خلیے کے جداکار کا استعمال کرتے ہوئے الگ کیا جاتا ہے جسے لیوکوسائٹ افریسس کہا جاتا ہے۔ اس کے بعد پردیی خون کے مونو نیوکلیئر خلیات (پی بی ایم سی) کو الگ اور جمع کیا جاتا ہے۔ لیوکوسائٹ افریسس کی مصنوعات کو پھر سیل پروسیسنگ سینٹر میں منتقل کیا جاتا ہے۔ سیل پروسیسنگ سینٹر میں، مخصوص ٹی سیلز کو متحرک کیا جاتا ہے تاکہ وہ فعال طور پر پھیل جائیں اور بڑی تعداد میں پھیل جائیں۔ ان کی توسیع کو بڑھانے کے لیے، ٹی خلیوں کا علاج عام طور پر سائٹوکائن انٹرلیوکن 2 (آئی ایل-2) اور اینٹی سی ڈی 3 اینٹی باڈیز کے ساتھ کیا جاتا ہے۔ کچھ پروٹوکول میں اینٹی-سی ڈی 3/سی ڈی 28 اینٹی باڈیز بھی استعمال کی جاتی ہیں۔ توسیع شدہ ٹی خلیوں کو پاک کیا جاتا ہے اور پھر ایک جین کے ساتھ منتقل کیا جاتا ہے جو ایک ریٹو وائرل ویکٹر کے ذریعے انجینئرڈ سی اے آر کو انکوڈنگ کرتا ہے، عام طور پر یا تو ایک انٹیگریٹنگ گاماریٹرو وائرس (آر وی) یا لینٹ وائرل (ایل وی) ویکٹر۔ یہ ویکٹر جدید دور میں U3 خطے کے جزوی حذف ہونے کی وجہ سے بہت محفوظ ہیں۔ جین ایڈیٹنگ کا نیا ٹول سی آر آئی ایس پی آر/کاس 9 حال ہی میں ریٹرو وائرل ویکٹرز کے بجائے سی اے آر جین کو جینوم میں مخصوص مقامات میں ضم کرنے کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔ انجینئرڈ سی اے آر ٹی خلیوں کے تعارف سے پہلے مریض لیمفوڈیپلیشن کیموتھراپی سے گزرتا ہے۔ مریض میں گردش کرنے والے لیوکوسائٹس کی تعداد میں کمی پیدا ہونے والے سائٹوکائنز کی تعداد کو بڑھاتا ہے اور وسائل کے لیے مسابقت کو کم کرتا ہے، جس سے انجینئرڈ سی اے آر ٹی خلیوں کی توسیع کو فروغ دینے میں مدد ملتی ہے۔ کلینیکل ایپلی کیشنز مارچ 2019 تک، عالمی سطح پر تقریبا 364 کلینیکل ٹرائلز جاری تھے جن میں سی اے آر ٹی خلیات شامل تھے۔ ان آزمائشوں کی اکثریت خون کے کینسر کو نشانہ بناتی ہے: سی اے آر ٹی تھراپی ہیماتولوجیکل بدنیتی کے تمام آزمائشوں میں سے نصف سے زیادہ ہیں۔ سی ڈی 19 اب بھی سب سے زیادہ مقبول اینٹیجن کا ہدف ہے، اس کے بعد بی سی ایم اے (عام طور پر ایک سے زیادہ مائیلوما میں ظاہر ہوتا ہے) ہے۔ 2016 میں، مطالعات نے دیگر اینٹی جینز، جیسے کہ سی ڈی 20 کی عملداری کو تلاش کرنا شروع کیا۔ ٹھوس ٹیومر کے ٹرائلز میں سی اے آر ٹی کا کم غلبہ ہوتا ہے، تقریبا نصف سیل تھراپی پر مبنی ٹرائلز میں دوسرے پلیٹ فارم جیسے این کے سیل شامل ہوتے ہیں۔ کینسر ٹی خلیات جینیاتی طور پر کامیرک اینٹیجن ریسیپٹرز کو ظاہر کرنے کے لیے تیار کیے جاتے ہیں جو خاص طور پر مریض کے ٹیومر خلیوں پر اینٹیجن کی طرف جاتے ہیں، پھر مریض میں داخل ہوتے ہیں جہاں وہ کینسر کے خلیوں پر حملہ کرتے ہیں اور انہیں مار دیتے ہیں۔ سی اے آر کا اظہار کرنے والے ٹی خلیوں کی گود لینے والی منتقلی ایک امید افزا کینسر مخالف علاج ہے، کیونکہ سی اے آر میں ترمیم شدہ ٹی خلیوں کو ممکنہ طور پر کسی بھی ٹیومر سے وابستہ اینٹیجن کو نشانہ بنانے کے لیے تیار کیا جا سکتا ہے۔ ابتدائی سی اے آر ٹی سیل تحقیق نے خون کے کینسر پر توجہ مرکوز کی ہے۔ پہلے منظور شدہ علاج سی اے آر کا استعمال کرتے ہیں جو اینٹیجن سی ڈی 19 کو نشانہ بناتے ہیں، جو بی سیل سے ماخوذ کینسر جیسے ایکیوٹ لیمفوبلاسٹک لیوکیمیا (اے ایل ایل) اور پھیلے ہوئے بڑے بی سیل لیمفوما (ڈی ایل بی سی ایل) میں موجود ہوتے ہیں۔ خون کے کینسر کے بہت سے دوسرے اینٹیجنز کو نشانہ بنانے کے لیے سی اے آر انجینئر کرنے کی کوششیں بھی جاری ہیں، جن میں ریفریکٹری ہڈکن کے لیمفوما میں سی ڈی 30 ؛ ایکیوٹ مائیلوئڈ لیوکیمیا (اے ایم ایل) میں سی ڈی 33، سی ڈی 123، اور ایف ایل ٹی 3 ؛ اور ایک سے زیادہ مائیلوما میں بی سی ایم اے شامل ہیں۔ ٹھوس ٹیومر نے ایک زیادہ مشکل ہدف پیش کیا ہے۔ اچھے اینٹی جینز کی شناخت مشکل رہی ہے: اس طرح کے اینٹی جینز کا کینسر کے خلیوں کی اکثریت پر بہت زیادہ اظہار ہونا چاہیے، لیکن عام بافتوں پر زیادہ تر غیر حاضر ہونا چاہیے۔ سی اے آر ٹی خلیات کو بھی ٹھوس ٹیومر ماس کے مرکز میں مؤثر طریقے سے اسمگل نہیں کیا جاتا ہے، اور مخالف ٹیومر مائیکرو انوائرمنٹ ٹی سیل کی سرگرمی کو دبا دیتا ہے۔ آٹو امیون بیماری اگرچہ زیادہ تر سی اے آر ٹی سیل کے مطالعے ایک سی اے آر ٹی سیل بنانے پر مرکوز ہوتے ہیں جو ایک مخصوص سیل کی آبادی کو ختم کر سکتا ہے (مثال کے طور پر، سی اے آر ٹی سیل جو لیمفوما خلیوں کو نشانہ بناتے ہیں)، اس ٹیکنالوجی کے دیگر ممکنہ استعمال بھی ہیں۔ ٹی خلیات اینٹی جینز کے تئیں رواداری میں بھی ثالثی کر سکتے ہیں۔ سی اے آر سے لیس ایک ریگولیٹری ٹی سیل میں کسی مخصوص اینٹیجن کو رواداری فراہم کرنے کی صلاحیت ہو سکتی ہے، جسے اعضاء کی پیوند کاری یا لیوپس جیسی گٹھیا کی بیماریوں میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ایف ڈی اے سے منظور شدہ سی اے آر ٹی سیل تھراپیز سیفٹی سنگین مضر اثرات ہیں جو سی اے آر ٹی خلیوں کے جسم میں داخل ہونے کے نتیجے میں ہوتے ہیں، بشمول سائٹوکائن ریلیز سنڈروم اور اعصابی زہریلا پن۔ چونکہ یہ ایک نسبتا نیا علاج ہے، سی اے آر ٹی سیل تھراپی کے طویل مدتی اثرات کے بارے میں بہت کم اعداد و شمار موجود ہیں۔ طویل مدتی مریض کی بقا کے ساتھ ساتھ سی اے آر ٹی خلیوں سے علاج شدہ خواتین مریضوں میں حمل کی پیچیدگیوں کے بارے میں اب بھی خدشات موجود ہیں۔ انافیلکسس ایک ضمنی اثر ہو سکتا ہے، کیونکہ سی اے آر ایک غیر ملکی مونوکلونل اینٹی باڈی سے بنایا جاتا ہے، اور اس کے نتیجے میں مدافعتی ردعمل پیدا ہوتا ہے۔ آن ٹارگیٹ/آف ٹیومر شناخت اس وقت ہوتی ہے جب سی اے آر ٹی سیل صحیح اینٹیجن کو پہچانتا ہے، لیکن اینٹیجن کا اظہار صحت مند، غیر پیتھوجینک ٹشو پر ہوتا ہے۔ اس کے نتیجے میں سی اے آر ٹی خلیات غیر ٹیومر ٹشو پر حملہ کرتے ہیں، جیسے کہ صحت مند بی خلیات جو سی ڈی 19 کا اظہار کرتے ہیں جس کی وجہ سے بی سیل ایپلیشیا ہوتا ہے۔ اس منفی اثر کی شدت مختلف ہو سکتی ہے لیکن پہلے سے امیونوسوپریشن، لیمفوڈیپلیٹنگ کیموتھراپی اور ہدف پر اثرات کا مجموعہ جس کی وجہ سے ہائپوگیماگلوبولینیمیا اور طویل سائٹوپینیا مریضوں کو سنگین انفیکشن کے خطرے میں ڈالتا ہے۔ اس بات کا بھی امکان نہیں ہے کہ انجینئرڈ سی اے آر ٹی خلیے خود داخل شدہ میوٹیجینیسیس کے ذریعے کینسر کے خلیوں میں تبدیل ہو جائیں گے، وائرل ویکٹر کی وجہ سے سی اے آر جین کو ٹیومر سپریسر یا میزبان ٹی سیل کے جینوم میں اونکوجین میں داخل کیا جاتا ہے۔ کچھ ریٹرو وائرل (آر وی) ویکٹر لینٹ وائرل (ایل وی) ویکٹر سے کم خطرہ رکھتے ہیں۔ تاہم، دونوں میں آنکوجینک ہونے کی صلاحیت ہے۔ سی اے آر ٹی سیل فنکشن اور ویو میں استقامت کی بہتر تفہیم کے لیے ٹی خلیوں میں سی اے آر داخل کرنے کی جگہوں کا جینومک سیکوینسنگ تجزیہ قائم کیا گیا ہے۔ سائٹوکائن ریلیز سنڈروم سی اے آر ٹی خلیوں کے ساتھ علاج کے بعد سب سے عام مسئلہ سائٹوکائن ریلیز سنڈروم (سی آر ایس) ہے، ایک ایسی حالت جس میں مدافعتی نظام فعال ہوتا ہے اور سوزش والے سائٹوکائنز کی بڑھتی ہوئی تعداد کو جاری کرتا ہے۔ اس سنڈروم کا طبی مظہر تیز بخار، تھکاوٹ، دل کی بیماری، متلی، کیپلری رساو، ٹیکی کارڈیا اور دیگر کارڈیک ڈسفیکشن، جگر کی ناکامی، اور گردے کی خرابی کے ساتھ سیپسس سے ملتا جلتا ہے۔ سی آر ایس تقریبا تمام مریضوں میں ہوتا ہے جن کا علاج سی اے آر ٹی سیل تھراپی سے کیا جاتا ہے۔ درحقیقت، سی آر ایس کی موجودگی ایک تشخیصی مارکر ہے جو اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ سی اے آر ٹی سیل کینسر کے خلیوں کو مارنے کے ارادے سے کام کر رہے ہیں۔ سی آر ایس کی شدت کا تعلق علاج کے بڑھتے ہوئے ردعمل سے نہیں ہے، بلکہ بیماری کے زیادہ بوجھ سے ہے۔ سیویر سائٹوکائن ریلیز سنڈروم کا انتظام امیونوسوپریسنٹس جیسے کورٹیکوسٹیرائڈز، اور ٹوسیلیزوماب، ایک اینٹی-آئی ایل-6 مونوکلونل اینٹی باڈی کے ساتھ کیا جا سکتا ہے۔ ٹوسیلیزوماب کا استعمال کرتے ہوئے ابتدائی مداخلت کو علاج کے علاج کے اثر کو متاثر کیے بغیر متعدد مطالعات میں شدید سی آر ایس کی تعدد کو کم کرنے کے لیے دکھایا گیا تھا۔ امیون ایفیکٹر سیل سے وابستہ نیوروٹوکسائٹی اعصابی زہریلا پن بھی اکثر سی اے آر ٹی سیل کے علاج سے وابستہ ہوتا ہے۔ بنیادی طریقہ کار کو ناقص طور پر سمجھا گیا ہے، اور اس کا تعلق سی آر ایس سے ہو بھی سکتا ہے اور نہیں بھی۔ طبی علامات میں الجھن، زبان کی تشریح کرنے کی صلاحیت کے باوجود مربوط طور پر بات کرنے کی صلاحیت کا جزوی نقصان (ایکسپریسیو افاسیا)، کم چوکسی (اوبیٹنڈیشن)، اور دورے شامل ہیں۔ کچھ کلینیکل ٹرائلز کے دوران، نیوروٹوکسائٹی کی وجہ سے اموات ہوئی ہیں۔ نیوروٹوکسائٹی سے موت کی بنیادی وجہ دماغی ایڈیما ہے۔ جونو تھیراپیوٹکس، انکارپوریٹڈ کے ذریعہ کی گئی ایک تحقیق میں، مقدمے کی سماعت میں داخل ہونے والے پانچ مریضوں کی دماغی ایڈیما کے نتیجے میں موت ہوگئی۔ دو مریضوں کا علاج صرف سائکلوفوسفامائڈ سے کیا گیا اور باقی تین کا علاج سائکلوفوسفامائڈ اور فلڈارابائن کے امتزاج سے کیا گیا۔ فریڈ ہچنسن کینسر ریسرچ سینٹر کے زیر اہتمام ایک اور کلینیکل ٹرائل میں، سی اے آر ٹی خلیوں کی انتظامیہ کے 122 دن بعد ناقابل واپسی اور مہلک اعصابی زہریلا ہونے کا ایک کیس رپورٹ ہوا۔ چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹر ڈھانچہ چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹر عام ٹی سیل ایکٹیویشن کے بہت سے پہلوؤں کو ایک ہی پروٹین میں جوڑتے ہیں۔ وہ ایک ایکسٹرا سیلولر اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین کو ایک انٹرا سیلولر سگنلنگ ڈومین سے جوڑتے ہیں، جو ایک اینٹیجن کے پابند ہونے پر ٹی سیل کو چالو کرتا ہے۔ سی اے آر چار خطوں پر مشتمل ہوتے ہیں: ایک اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین، ایک ایکسٹرا سیلولر ہینج ریجن، ایک ٹرانس میمبرین ڈومین، اور ایک انٹرا سیلولر ٹی سیل سگنلنگ ڈومین۔ اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین کو سیل کے باہر، ریسیپٹر کے آکٹوڈومین حصے میں بے نقاب کیا جاتا ہے۔ یہ ممکنہ ٹارگٹ مالیکیولز کے ساتھ تعامل کرتا ہے اور مماثل مالیکیول کا اظہار کرنے والے کسی بھی سیل میں سی اے آر ٹی سیل کو نشانہ بنانے کے لیے ذمہ دار ہے۔ اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین عام طور پر مونوکلونل اینٹی باڈی کے متغیر علاقوں سے اخذ کیا جاتا ہے جو ایک واحد زنجیر متغیر ٹکڑے (ایس سی ایف وی) کے طور پر ایک ساتھ جڑے ہوتے ہیں۔ ایس سی ایف وی ایک چیمیرک پروٹین ہے جو امیونوگلوبن کی ہلکی (وی ایل) اور بھاری (وی ایچ) زنجیروں سے بنا ہوتا ہے، جو ایک مختصر لنکر پیپٹائڈ سے جڑا ہوتا ہے۔ ان وی ایل اور وی ایچ علاقوں کو ٹارگٹ اینٹیجن (جیسے سی ڈی 19) کے پابند ہونے کی صلاحیت کے لیے پہلے سے منتخب کیا جاتا ہے۔ دونوں زنجیروں کے درمیان لنکر ہائیڈروفیلک باقیات پر مشتمل ہوتا ہے جس میں لچک کے لیے گلائسین اور سیرائن کے پھیلاؤ کے ساتھ ساتھ اضافی گھلنشیلتا کے لیے گلوٹامیٹ اور لائسین کے پھیلاؤ ہوتے ہیں۔ سنگل ڈومین اینٹی باڈیز (مثال کے طور پر وی ایچ، وی ایچ ایچ، وی این اے آر) کو ٹی خلیوں میں ٹرانسڈکشن کی اعلی کارکردگی کی وجہ سے سی اے آر فارمیٹ میں اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین کے طور پر تیار اور تیار کیا گیا ہے۔ اینٹی باڈی کے ٹکڑوں کے علاوہ، غیر اینٹی باڈی پر مبنی طریقوں کو بھی سی اے آر کی خاصیت کو ہدایت دینے کے لیے استعمال کیا گیا ہے، عام طور پر لگینڈ/ریسیپٹر جوڑوں کا فائدہ اٹھاتے ہوئے جو عام طور پر ایک دوسرے سے جڑے ہوتے ہیں۔ سائٹوکائنز، پیدائشی مدافعتی ریسیپٹرز، ٹی این ایف ریسیپٹرز، نمو کے عوامل، اور ساختی پروٹین سبھی کو سی اے آر اینٹیجن شناخت کے ڈومین کے طور پر کامیابی کے ساتھ استعمال کیا گیا ہے۔ قبضہ کا علاقہ قبضہ، جسے سپیسر بھی کہا جاتا ہے، ایک چھوٹا سا سا سا سا ساختی ڈومین ہے جو اینٹیجن کی شناخت کے علاقے اور خلیے کی بیرونی جھلی کے درمیان بیٹھتا ہے۔ ایک مثالی قبضہ ایس سی ایف وی رسیپٹر ہیڈ کی لچک کو بڑھاتا ہے، جس سے سی اے آر اور اس کے ٹارگٹ اینٹیجن کے درمیان مقامی رکاوٹیں کم ہوتی ہیں۔ یہ سی اے آر ٹی خلیوں اور ہدف خلیوں کے درمیان اینٹیجن بائنڈنگ اور مطابقت پذیری کی تشکیل کو فروغ دیتا ہے۔ قبضہ کے سلسلے اکثر دیگر مدافعتی مالیکیولز بشمول آئی جی جی، سی ڈی 8، اور سی ڈی 28 سے جھلی کے قریب ترین علاقوں پر مبنی ہوتے ہیں۔ ٹرانس میمبرین ڈومین ٹرانس میمبرین ڈومین ایک ساختی جزو ہے، جو ایک ہائیڈروفوبک الفا ہیلکس پر مشتمل ہوتا ہے جو سیل میمبرین کو پھیلاتا ہے۔ یہ سی اے آر کو پلازما جھلی میں لنگر انداز کرتا ہے، جو خلیوں کے باہر کے قبضے اور اینٹیجن کی شناخت کے ڈومینز کو خلیوں کے اندر سگنلنگ کے علاقے سے جوڑتا ہے۔ یہ ڈومین مجموعی طور پر رسیپٹر کے استحکام کے لیے ضروری ہے۔ عام طور پر، اینڈوڈومین کے سب سے زیادہ جھلی کے قریب ترین جزو سے ٹرانس میمبرین ڈومین استعمال کیا جاتا ہے، لیکن مختلف ٹرانس میمبرین ڈومینز کے نتیجے میں مختلف رسیپٹر استحکام پیدا ہوتا ہے۔ سی ڈی 28 ٹرانس میمبرین ڈومین ایک انتہائی اظہار شدہ، مستحکم رسیپٹر کے نتیجے میں جانا جاتا ہے۔ سی ڈی 3-زیٹا ٹرانس میمبرین ڈومین کا استعمال کرنے کی سفارش نہیں کی جاتی ہے، کیونکہ اس کے نتیجے میں مصنوعی ٹی سی آر کو مقامی ٹی سی آر میں شامل کیا جا سکتا ہے۔ انٹرا سیلولر ٹی سیل سگنلنگ ڈومین انٹرا سیلولر ٹی سیل سگنلنگ ڈومین سیل کے اندر رسیپٹر کے اینڈوڈومین میں واقع ہے۔ ایک اینٹیجن کے بیرونی اینٹیجن ریکگنیشن ڈومین سے منسلک ہونے کے بعد، سی اے آر ریسیپٹرز ایک ساتھ جمع ہوتے ہیں اور ایک ایکٹیویشن سگنل منتقل کرتے ہیں۔ پھر رسیپٹر کا اندرونی سائٹوپلاسمک اختتام ٹی سیل کے اندر سگنلنگ کو برقرار رکھتا ہے۔ عام ٹی سیل ایکٹیویشن کا انحصار سی ڈی 3-زیٹا کے سائٹوپلاسمک ڈومین میں موجود امیونوریسیپٹر ٹائروسائن پر مبنی ایکٹیویشن موفٹس (آئی ٹی اے ایم) کے فاسفوریلیشن پر ہوتا ہے۔ اس عمل کی نقل کرنے کے لیے، سی ڈی 3-زیٹا کا سائٹوپلاسمک ڈومین عام طور پر مرکزی سی اے آر اینڈوڈومین جزو کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ آئی ٹی اے ایم پر مشتمل دیگر ڈومینز کو بھی آزمایا گیا ہے، لیکن وہ اتنے موثر نہیں ہیں۔ فعال ہونے کے بعد برقرار رہنے کے لیے ٹی خلیوں کو سی ڈی 3 سگنلنگ کے علاوہ شریک محرک مالیکیولز کی بھی ضرورت ہوتی ہے۔ اس وجہ سے، سی اے آر ریسیپٹرز کے اینڈوڈومینز میں عام طور پر شریک محرک پروٹین سے ایک یا زیادہ چیمیرک ڈومینز بھی شامل ہوتے ہیں۔ مختلف قسم کے شریک محرک مالیکیولز سے سگنلنگ ڈومینز کا کامیابی سے تجربہ کیا گیا ہے، جن میں CD28، CD27، CD134 (OX40)، اور CD137 (4−1BB) شامل ہیں۔ استعمال شدہ انٹرا سیلولر سگنلنگ ڈومین سی اے آر ٹی سیل کی نسل کی وضاحت کرتا ہے۔ پہلی نسل کے سی اے آر میں صرف سی ڈی 3-زیٹا سائٹوپلاسمک ڈومین شامل ہے۔ دوسری نسل کے سی اے آر ایک مشترکہ محرک ڈومین شامل کرتے ہیں، جیسے سی ڈی 28 یا 4-1 بی بی۔ ان انٹرا سیلولر سگنلنگ ڈومینز کی شمولیت ٹی سیل کے پھیلاؤ، سائٹوکائن کے سراو، اپوپٹوسس کے خلاف مزاحمت، اور ویو استقامت کو بہتر بناتی ہے۔ تیسری نسل کے سی اے آر ٹی سیل کی سرگرمی کو بڑھانے کے لیے متعدد شریک محرک ڈومینز، جیسے سی ڈی 28-41 بی بی یا سی ڈی 28-او ایکس 40 کو یکجا کرتے ہیں۔ پری کلینیکل ڈیٹا سے پتہ چلتا ہے کہ تیسری نسل کے سی اے آر دوسری نسل کے سی اے آر کے مقابلے میں بہتر ایفیکٹر افعال اور ویو استقامت میں بہتر کارکردگی کا مظاہرہ کرتے ہیں۔ اگرچہ تمام مریضوں میں سی اے آر ٹی سیل تھراپی کے بعد ابتدائی طبی معافی کی شرح 90 فیصد تک زیادہ ہے، لیکن طویل مدتی بقا کی شرح بہت کم ہے۔ اس کی وجہ عام طور پر لیوکیمیا کے خلیوں کا ظہور ہوتا ہے جو سی ڈی 19 کا اظہار نہیں کرتے ہیں اور اس لیے سی ڈی 19-سی اے آر ٹی خلیوں کے ذریعے پہچان سے بچتے ہیں، یہ ایک رجحان ہے جسے اینٹیجن فرار کہا جاتا ہے۔ سی ڈی 19 پلس سی ڈی 22 یا سی ڈی 19 پلس سی ڈی 20 کے دوہرے ہدف کے ساتھ سی اے آر ٹی خلیات تیار کرنے والے پری کلینیکل مطالعات نے وعدہ کا مظاہرہ کیا ہے، اور سی ڈی 19 ڈاؤن ریگولیشن کو روکنے کے لیے دو مخصوص ہدف کا مطالعہ کرنے والے ٹرائلز جاری ہیں۔ 2018 میں، کار کا ایک ورژن تیار کیا گیا تھا جسے سپرا کار، یا اسپلٹ، یونیورسل، اور پروگرام کے قابل کہا جاتا ہے۔ سپرا کار کی سرگرمی کو باریک طریقے سے منظم کرنے کے لیے متعدد میکانزم تعینات کیے جا سکتے ہیں، جو حد سے زیادہ سرگرمی کو محدود کرتا ہے۔ روایتی سی اے آر ڈیزائن کے برعکس، ایس یو پی آر اے سی اے آر کسی شخص کے مدافعتی خلیوں میں مزید جینیاتی ترمیم کے بغیر متعدد اینٹی جینز کو نشانہ بنانے کی اجازت دیتا ہے۔ امیونو اونکولوجی میں ایس ایم ڈی سی (چھوٹے مالیکیول ڈرگ کنجوگیٹس) پلیٹ فارم ایک تجرباتی نقطہ نظر ہے جو ایک واحد یونیورسل سی اے آر ٹی سیل کی انجینئرنگ کو ممکن بناتا ہے، جو فلوروسین آئسوتھیوسیانیٹ (ایف آئی ٹی سی) کے طور پر نامزد ایک سودمند مالیکیول کے ساتھ غیر معمولی طور پر اعلی وابستگی کے ساتھ جڑا ہوتا ہے۔ اس کے بعد ان خلیوں کو مختلف قسم کے کینسر کے علاج کے لیے استعمال کیا جاتا ہے جب انہیں دو مخصوص ایس ایم ڈی سی اڈاپٹر مالیکیولز کے ساتھ مل کر دیا جاتا ہے۔ یہ منفرد دو مخصوص اڈاپٹر ایک ایف آئی ٹی سی مالیکیول اور ایک ٹیومر ہومنگ مالیکیول کے ساتھ بنائے جاتے ہیں تاکہ کینسر کے خلیوں کے ساتھ یونیورسل سی اے آر ٹی سیل کو درست طریقے سے پل کیا جا سکے، جو مقامی ٹی سیل ایکٹیویشن کا سبب بنتا ہے۔ چوہوں میں اینٹی ٹیومر سرگرمی صرف اس وقت پیدا ہوتی ہے جب دونوں عالمگیر سی اے آر ٹی خلیات اور صحیح اینٹیجن مخصوص اڈاپٹر مالیکیول موجود ہوں۔ زیر انتظام اڈاپٹر مالیکیول کی خوراک کو ایڈجسٹ کرکے ٹیومر مخالف سرگرمی اور زہریلے پن کو کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔ اینٹیجینک طور پر متنوع ٹیومر کا علاج مطلوبہ اینٹیجن مخصوص اڈاپٹرز کے مرکب کی انتظامیہ کے ذریعے حاصل کیا جا سکتا ہے۔ کار ٹی فنکشن چوتھی نسل کے کار (جسے ٹرکس یا بکتر بند کار بھی کہا جاتا ہے) مزید ایسے عوامل کا اضافہ کرتے ہیں جو ٹی سیل کی توسیع، استقامت اور ٹیومر مخالف سرگرمی کو بڑھاتے ہیں۔ اس میں سائٹوکائنز شامل ہو سکتے ہیں، جیسے کہ آئی ایل-2، آئی ایل-5، آئی ایل-12 اور شریک محرک لگینڈ۔ کنٹرول میکانزم انجینئرڈ ٹی خلیوں میں مصنوعی کنٹرول میکانزم کا اضافہ ڈاکٹروں کو زہریلے ضمنی اثرات کو کم کرنے کے مقصد کے ساتھ مریض کے جسم میں ٹی خلیوں کی استقامت یا سرگرمی کو درست طریقے سے کنٹرول کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ کنٹرول کی بڑی تکنیکیں ٹی سیل کی موت کو متحرک کرتی ہیں یا ٹی سیل ایکٹیویشن کو محدود کرتی ہیں، اور اکثر ٹی سیل کو ایک علیحدہ دوا کے ذریعے منظم کرتی ہیں جسے ضرورت کے مطابق متعارف کرایا یا روکا جا سکتا ہے۔ خودکش جین: جینیاتی طور پر تبدیل شدہ ٹی خلیات ایک یا زیادہ جینوں کو شامل کرنے کے لیے تیار کیے جاتے ہیں جو ایک ایکسٹرا سیلولر مالیکیول کے ذریعے فعال ہونے پر اپوپٹوسس کو جنم دے سکتے ہیں۔ ہرپس سمپلیکس وائرس تھائمیڈائن کینیس (ایچ ایس وی-ٹی کے) اور انڈسیبل کیسپیس 9 (آئی کاسپ 9) دو قسم کے خودکشی جین ہیں جنہیں سی اے آر ٹی خلیوں میں ضم کیا گیا ہے۔ آئی کیسپ 9 سسٹم میں، خودکش جین کمپلیکس کے دو عناصر ہوتے ہیں: ایک تبدیل شدہ ایف کے 506 بائنڈنگ پروٹین جس میں چھوٹے مالیکیول ریمیڈوسیڈ/اے پی 1903 کی اعلی خاصیت ہوتی ہے، اور ایک جین جو پرو ڈومین سے حذف شدہ انسانی کیسپیس 9 کو انکوڈنگ کرتا ہے۔ ریمیڈوسیڈ کے ساتھ مریض کی خوراک خودکشی کے نظام کو متحرک کرتی ہے، جس کی وجہ سے جینیاتی طور پر تبدیل شدہ ٹی خلیوں کا تیزی سے اپوپٹوسس ہوتا ہے۔ اگرچہ ایچ ایس وی-ٹی کے اور آئی کیسپ 9 دونوں نظام طبی آزمائشوں میں حفاظتی تبدیلی کے طور پر ایک قابل ذکر فنکشن کا مظاہرہ کرتے ہیں، لیکن کچھ نقائص ان کے اطلاق کو محدود کرتے ہیں۔ ایچ ایس وی-ٹی کے وائرس سے ماخوذ ہے اور انسانوں کے لیے امیونوجینک ہو سکتا ہے۔ فی الحال یہ بھی واضح نہیں ہے کہ آیا خودکشی جین کی حکمت عملی خطرناک آف ٹیومر سائٹوٹوکسائٹی کو روکنے کے لیے تمام حالات میں تیزی سے کام کرے گی یا نہیں۔ ڈوئل اینٹیجن ریسیپٹر: سی اے آر ٹی خلیات ایک ہی وقت میں ٹیومر سے وابستہ دو اینٹیجن ریسیپٹرز کو ظاہر کرنے کے لیے تیار کیے جاتے ہیں، اس امکان کو کم کرتے ہیں کہ ٹی خلیات غیر ٹیومر خلیات پر حملہ کریں گے۔ دوہری اینٹیجن رسیپٹر سی اے آر ٹی خلیوں کے کم شدید مضر اثرات کی اطلاع دی گئی ہے۔ چوہوں میں ایک ویوو مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ دوہری رسیپٹر سی اے آر ٹی خلیات نے مؤثر طریقے سے پروسٹیٹ کینسر کا خاتمہ کیا اور مکمل طویل مدتی بقا حاصل کی۔ آن-سوئچ اور آف-سوئچ: اس نظام میں، سی اے آر ٹی خلیات صرف ٹیومر اینٹیجن اور ایک سودمند بیرونی مالیکیول دونوں کی موجودگی میں کام کر سکتے ہیں۔ اسے حاصل کرنے کے لیے، سی اے آر ٹی سیل کے انجینیئرڈ چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹر کو دو الگ الگ پروٹینوں میں تقسیم کیا جاتا ہے جو کام کرنے کے لیے ایک ساتھ آنا ضروری ہے۔ پہلے رسیپٹر پروٹین میں عام طور پر ایکسٹرا سیلولر اینٹیجن بائنڈنگ ڈومین ہوتا ہے، جبکہ دوسرے پروٹین میں ڈاون اسٹریم سگنلنگ عناصر اور شریک محرک مالیکیولز (جیسے سی ڈی 3 ز اور 4-1 بی بی) ہوتے ہیں۔ ایک بیرونی مالیکیول (جیسے ریپامائسن اینالاگ) کی موجودگی میں، بائنڈنگ اور سگنلنگ پروٹین ایک ساتھ ڈائمرائز ہو جاتے ہیں، جس سے سی اے آر ٹی خلیات ٹیومر پر حملہ کر سکتے ہیں۔ انسانی ای جی ایف آر کاٹا ہوا فارم (ایچ ای جی ایف آر ٹی) سیٹکسیماب کا استعمال کرتے ہوئے سی اے آر ٹی خلیوں کے لیے آف سوئچ کے طور پر استعمال کیا گیا ہے۔ بسپسفک مالیکیول بطور سوئچ: بسپسفک مالیکیول ٹی خلیوں کی سطح پر ٹیومر سے وابستہ اینٹیجن اور سی ڈی 3 مالیکیول دونوں کو نشانہ بناتے ہیں۔ یہ اس بات کو یقینی بناتا ہے کہ ٹی خلیات اس وقت تک فعال نہیں ہو سکتے جب تک کہ وہ ٹیومر سیل کے قریب جسمانی قربت میں نہ ہوں۔ اینٹی-سی ڈی 20/سی ڈی 3 دو مخصوص مالیکیول چوہوں میں مہلک بی خلیات اور کینسر کے خلیات دونوں کے لیے اعلی خاصیت ظاہر کرتا ہے۔ ایف آئی ٹی سی اس حکمت عملی میں استعمال ہونے والا ایک اور دو فعال مالیکیول ہے۔ ایف آئی ٹی سی ایف آئی ٹی سی مخصوص سی اے آر ٹی خلیوں کی سرگرمی کو فولیٹ ریسیپٹرز والے ٹیومر خلیوں کی طرف ری ڈائریکٹ اور ریگولیٹ کر سکتا ہے۔ سی اے آر ٹی سیل مینوفیکچرنگ میں پیش رفت۔ سی اے آر ٹی سیل تھراپی کی زیادہ لاگت کی وجہ سے، سی اے آر ٹی سیل مینوفیکچرنگ کو بہتر بنانے اور لاگت کو کم کرنے کے لیے متعدد متبادل کوششوں کی تحقیقات کی جا رہی ہیں۔ ویوو کار ٹی سیل مینوفیکچرنگ کی حکمت عملیوں کی جانچ کی جا رہی ہے۔ اس کے علاوہ، سی اے آر ٹی سیل کی نسل کے لیے بائیو انسٹرکٹو مواد تیار کیا گیا ہے۔ تیز رفتار سی اے آر ٹی سیل کی نسل کو مختصر کرنے یا ایکٹیویشن اور توسیعی اقدامات کو ختم کرنے کے ذریعے بھی ممکن ہے۔ معاشیات سی اے آر ٹی سیل تھراپی کی لاگت کو تنقید کا نشانہ بنایا گیا ہے، جس میں ٹساجینلیکلیوسل (کیمریا) اور آکسیکابٹیجین کلولیوسل (یسکارٹا) کی ابتدائی لاگت بالترتیب $375,000 اور $475,000 ہے۔ سی اے آر ٹی تھراپی کی زیادہ قیمت خصوصی گڈ مینوفیکچرنگ پریکٹس (جی ایم پی) سہولیات میں پیچیدہ سیلولر مینوفیکچرنگ کے ساتھ ساتھ سی اے آر ٹی خلیوں کے انتظام کے بعد سائٹوکائن ریلیز سنڈروم جیسے خطرات کی وجہ سے ہسپتال کی اعلی سطح کی دیکھ بھال کی وجہ سے ہے۔ ریاستہائے متحدہ میں، سی اے آر ٹی سیل تھراپی کا احاطہ میڈیکیئر اور بہت سے لیکن تمام نجی بیمہ کنندگان کے ذریعے نہیں کیا جاتا ہے۔ سی اے آر ٹی خلیوں کے مینوفیکچررز نے سی اے آر ٹی تھراپی کی زیادہ لاگت کی وجہ سے متبادل ادائیگی کے پروگرام تیار کیے ہیں، جیسے کہ ادائیگی کی ضرورت صرف اس صورت میں ہوتی ہے جب سی اے آر ٹی تھراپی علاج کے بعد ایک مخصوص وقت تک مکمل معافی کا باعث بنتی ہے۔ مزید برآں، سی اے آر ٹی سیل تھراپی ابھی تک دنیا بھر میں دستیاب نہیں ہیں۔ چین، آسٹریلیا، سنگاپور، برطانیہ اور کچھ یورپی ممالک میں سی اے آر ٹی سیل تھراپی کی منظوری دی گئی ہے۔ فروری 2022 میں برازیل نے ٹساجینلیکلیوسل (کیمریا) علاج کی منظوری دی۔ سیل تھراپی چیک پوائنٹ انفیکٹر جین تھراپی امیون چیک پوائنٹ ایپکوریٹاماب حوالہ جات بیرونی روابط CAR T خلیات: انجینئرنگ مریضوں کے امیون خلیات ان کے کینسر کے علاج کے لیے دیکھیں۔ نیشنل کینسر انسٹی ٹیوٹ جولائی 2019 کینسر امیونوتھراپی جین تھراپی امیون سسٹم لیوکیمیا لمفوما ٹی سیلز