TCEP
ٹی سی ای پی (ٹرس (2-کاربوکسیتھائل) فاسفین) ایک کم کرنے والا ایجنٹ ہے جو اکثر بائیو کیمسٹری اور مالیکیولر بائیولوجی ایپلی کیشنز میں استعمال ہوتا ہے۔ یہ اکثر تیار کیا جاتا ہے اور 286.65 گرام/مول کے سالماتی وزن کے ساتھ ہائیڈروکلورائڈ نمک (TCEP-HCl) کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ یہ پانی میں گھلنشیل ہے اور غیر جانبدار پی ایچ پر ایک مستحکم حل کے طور پر دستیاب ہے اور کم کرنے والے ایجنٹ کو ہٹانے میں سہولت کے لیے ایگروز سپورٹ پر متحرک ہے۔ ایپلی کیشنز ٹی سی ای پی کو اکثر جیل الیکٹروفورسس کے لیے تیاری کے مرحلے کے طور پر پروٹین کے اندر اور ان کے درمیان ڈائیسلفائڈ بانڈز کو توڑنے کے لیے کم کرنے والے ایجنٹ کے طور پر استعمال کیا جاتا ہے۔ اس مقصد کے لیے استعمال ہونے والے دیگر دو سب سے عام ایجنٹوں (ڈیتھوتھریٹول اور β-مرکیپٹو ایتھانول) کے مقابلے میں، ٹی سی ای پی میں بے بو ہونے کے فوائد ہیں، ایک زیادہ طاقتور کم کرنے والا ایجنٹ، ایک ناقابل واپسی کم کرنے والا ایجنٹ (اس معنی میں کہ ٹی سی ای پی دوبارہ پیدا نہیں ہوتا ہے-ٹی سی ای پی کی ثالثی میں ڈائیسلفائیڈ کلیویج کا آخری پروڈکٹ حقیقت میں دو فری تھائولز/سسٹین ہے)، زیادہ ہائیڈروفیلک، اور ہوا میں آکسیکرن کے لیے زیادہ مزاحم ہے۔ یہ غیر متحرک دھاتی وابستگی کرومیٹوگرافی میں استعمال ہونے والی دھاتوں کو بھی کم نہیں کرتا ہے۔ ٹی سی ای پی خاص طور پر مفید ہوتا ہے جب سسٹین کے باقیات کو میلیمائڈز کے ساتھ لیبل کیا جاتا ہے۔ ٹی سی ای پی سسٹین کو ڈائی سلفایڈ بانڈ بنانے سے روک سکتا ہے اور ڈیتھوتھریٹول اور β-مرکیپٹو ایتھانول کے برعکس، یہ ملیمائڈ کے ساتھ اتنی آسانی سے رد عمل ظاہر نہیں کرے گا۔ تاہم، ٹی سی ای پی کو بعض شرائط کے تحت میلیمائڈ کے ساتھ رد عمل ظاہر کرنے کی اطلاع دی گئی ہے۔ ٹی سی ای پی کا استعمال آر این اے آئسولیشن کے لیے ٹشو ہوموجینائزیشن کے عمل میں بھی کیا جاتا ہے۔ الٹرا وایلیٹ-ویزیبل سپیکٹروسکوپی ایپلی کیشنز کے لیے، ٹی سی ای پی مفید ہے جب 250 سے 285 نینو میٹر تک جذب میں مداخلت سے بچنا ضروری ہے جو ڈیتھوتھریٹول کے ساتھ ہو سکتا ہے۔ ڈیتھوتھریٹول وقت کے ساتھ آہستہ آہستہ اس سپیکٹرم میں زیادہ سے زیادہ روشنی جذب کرے گا کیونکہ مختلف ریڈوکس رد عمل ہوتے ہیں۔ ٹرائیالکی فاسفائنز کے ساتھ حیاتیاتی سالمات میں کمی پر کئی دہائیوں تک بہت کم توجہ دی گئی کیونکہ تاریخی طور پر دستیاب فاسفائنز انتہائی ناقص اور/یا پانی میں اگھلنشیل تھیں۔ 1969 میں، ٹی سی ای پی کو بائیو کیمیکل استعمال کے لیے موزوں اوڈر لیس اور پانی میں گھلنشیل ٹرائالکی فاسفائن کے طور پر رپورٹ کیا گیا تھا، تاہم بائیو کیمیکل ایپلی کیشنز کے لیے ٹی سی ای پی کے ممکنہ استعمال کو کئی دہائیوں تک تقریبا مکمل طور پر نظر انداز کر دیا گیا۔ 1991 میں، برنز نے ٹی سی ای پی کے لیے ایک نئے آسان مصنوعی طریقہ کار کی اطلاع دی، جس نے ٹی سی ای پی کو زیادہ وسیع پیمانے پر دستیاب ہونے اور بائیو کیمیکل استعمال کے لیے "نئے" کم کرنے والے ایجنٹ کے طور پر مارکیٹ کرنے کا آغاز کیا، اور اس طرح ٹی سی ای پی 1990 کی دہائی میں زیادہ وسیع پیمانے پر استعمال میں آیا۔ رد عمل کچھ دوسرے ضمنی رد عمل بھی رپورٹ کیے گئے ہیں: ٹی سی ای پی اور حرارت (90 ڈگری سینٹی گریڈ) کی موجودگی میں سسٹین کے باقیات کو ایلینائن میں تبدیل کرنا۔ ہلکے حالات میں سسٹین کے باقیات پر پروٹین کی ریڑھ کی ہڈی کا پھٹنا (4 ڈگری سینٹی گریڈ پر دو ہفتے کے اسٹوریج کے لیے سست (لیکن اہم، 40 فیصد پھٹنا رپورٹ کیا گیا)۔ حیاتیاتی تحقیق میں ٹی سی ای پی کا استعمال مختلف کیمیائی سپلائرز سے ہائیڈروکلورائڈ نمک کے طور پر دستیاب ہے۔ جب پانی میں تحلیل ہوتا ہے تو ٹی سی ای پی-ایچ سی ایل تیزابی ہوتا ہے۔ ایک رپورٹ شدہ تیاری 0.5 ایم ٹی سی ای پی-ایچ سی ایل آبی اسٹاک حل ہے جو پی ایچ قریب غیر جانبدار پی ایچ میں ایڈجسٹ ہوتا ہے اور-20 ڈگری سینٹی گریڈ پر منجمد ہوتا ہے۔ ٹی سی ای پی مبینہ طور پر فاسفیٹ بفرز میں کم مستحکم ہے۔ یہ بھی دیکھیں 2-مرکپٹو ایتھانول (بی ایم ای) ڈیتھوتھریٹول (ڈی ٹی ٹی) ڈیتھوبوٹیلامائن (ڈی ٹی بی اے) حوالہ جات کاربوکسلک ایسڈ ترتیری فاسفائنز کم کرنے والے ایجنٹ