Temperature-sensitive mutant
درجہ حرارت کے حساس تغیرات جین کی مختلف قسمیں ہیں جو کم درجہ حرارت پر حیاتیات کے معمول کے کام کی اجازت دیتی ہیں، لیکن زیادہ درجہ حرارت پر کام کو تبدیل کرتی ہیں۔ سرد حساس تغیرات جین کی مختلف قسمیں ہیں جو زیادہ درجہ حرارت پر حیاتیات کے معمول کے کام کی اجازت دیتی ہیں، لیکن کم درجہ حرارت پر کام کو تبدیل کرتی ہیں۔ میکانزم زیادہ تر درجہ حرارت کے حساس تغیرات پروٹین کو متاثر کرتے ہیں، اور غیر اجازت والے درجہ حرارت پر پروٹین فنکشن کے نقصان کا سبب بنتے ہیں۔ اجازت دینے والا درجہ حرارت وہ ہوتا ہے جس پر پروٹین عام طور پر مناسب طریقے سے جوڑ سکتا ہے، یا مناسب طریقے سے جوڑتا رہتا ہے۔ زیادہ درجہ حرارت پر، پروٹین غیر مستحکم ہوتا ہے اور مناسب طریقے سے کام کرنا بند کر دیتا ہے۔ یہ تغیرات عام طور پر ڈپلوئڈ حیاتیات میں ریسیسیو ہوتے ہیں۔ درجہ حرارت کے حساس تغیرات ایک بدلنے والا طریقہ کار ترتیب دیتے ہیں اور نشوونما کے مختلف مراحل میں مخصوص جین کی مصنوعات کو کم کرنے کے قابل ہوتے ہیں اور نشوونما کے درجہ حرارت کو تبدیل کرکے آسانی سے کیے جاتے ہیں۔ اجازت دینے والا درجہ حرارت وہ درجہ حرارت ہے جس پر درجہ حرارت کے لحاظ سے حساس میوٹینٹ جین پروڈکٹ ایک عام، فعال فینوٹائپ اختیار کرتا ہے۔ جب درجہ حرارت سے حساس میوٹینٹ کو اجازت دینے والی حالت میں اگایا جاتا ہے، تو میوٹیٹڈ جین پروڈکٹ عام طور پر برتاؤ کرتا ہے (جس کا مطلب ہے کہ فینوٹائپ کا مشاہدہ نہیں کیا جاتا ہے)، چاہے کوئی میوٹینٹ ایلیل موجود ہی کیوں نہ ہو۔ اس کے نتیجے میں خلیے یا جاندار کی بقا ہوتی ہے، گویا یہ ایک جنگلی قسم کا تناؤ ہے۔ اس کے برعکس، غیر اجازت درجہ حرارت یا پابندی درجہ حرارت وہ درجہ حرارت ہے جس پر اتپریورتن فینوٹائپ کا مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ درجہ حرارت کے حساس تغیرات عام طور پر مس سینس تغیرات ہوتے ہیں، جو اس کے بعد معیاری، اجازت دینے والے، کم درجہ حرارت پر ایک مخصوص ضروری جین کے کام کو فروغ دیں گے۔ اس میں متبادل طور پر اعلی، غیر اجازت دینے والے، درجہ حرارت پر فنکشن کی کمی ہوگی اور ایک ہائپومورفک (جین فنکشن کا جزوی نقصان) اور درمیانی، نیم اجازت دینے والے درجہ حرارت کو ظاہر کرے گا۔ تحقیق میں استعمال درجہ حرارت کے حساس تغیرات حیاتیاتی تحقیق میں مفید ہیں۔ وہ خلیے یا جاندار کی بقا کے لیے درکار ضروری عمل کے مطالعہ کی اجازت دیتے ہیں۔ ضروری جینوں میں تغیرات عام طور پر مہلک ہوتے ہیں اور اس لیے درجہ حرارت کے حساس تغیرات محققین کو پابند درجہ حرارت پر فینوٹائپ کو متاثر کرنے اور اثرات کا مطالعہ کرنے کے قابل بناتے ہیں۔ اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے درجہ حرارت کے حساس فینوٹائپ کا اظہار ایک مخصوص ترقیاتی مرحلے کے دوران کیا جا سکتا ہے۔ مثال کے طور پر 1970 کی دہائی کے آخر میں، خلیے کی عملداری اور نئی کلیوں کی نشوونما کے لیے ضروری ابھرتے ہوئے خمیر کے سراغ رسانی راستے کو درجہ حرارت کے حساس تغیرات کا استعمال کرتے ہوئے الگ کیا گیا، جس کے نتیجے میں تیئیس ضروری جینوں کی شناخت ہوئی۔ 1970 کی دہائی میں، پھلوں کی مکھی میں کئی درجہ حرارت سے حساس تغیر پذیر جینوں کی نشاندہی کی گئی، جیسے شیبریٹس، جس کی وجہ سے سنپیٹک فنکشن کا پہلا جینیاتی ٹکڑا ہوا۔ 1990 کی دہائی میں، ہیٹ شاک پروموٹر ایچ ایس پی 70 کو پھلوں کی مکھی میں درجہ حرارت میں ماڈیولڈ جین کے اظہار میں استعمال کیا گیا تھا۔ بیکٹیریوفیج ایک اعلی پابند درجہ حرارت پر ایک بیکٹیریوفیج (فیج) ٹی 4 درجہ حرارت حساس (ٹی ایس) مشروط طور پر مہلک میوٹینٹ کے ذریعہ ای کولی میزبان خلیے کا انفیکشن عام طور پر فیج کی نشوونما کا باعث نہیں بنتا ہے۔ تاہم، مختلف جینوں میں عیب دار دو تغیرات کے ساتھ پابند حالات میں شریک انفیکشن عام طور پر انٹرجینک تکمیل کی وجہ سے مضبوط نشوونما کا باعث بنتا ہے۔ فیج ٹی 4 کے ٹی ایس میوٹینٹس کی دریافت، اور تکمیل کے ٹیسٹوں میں اس طرح کے میوٹینٹس کے استعمال نے اس حیاتیات میں موجود بہت سے جینوں کی شناخت میں اہم کردار ادا کیا۔ کیونکہ جین کے ذریعہ مخصوص پولی پیپٹائڈ کی متعدد کاپیاں اکثر ملٹیمر بناتی ہیں، ایک ہی جین میں عیب دار دو مختلف تغیرات کے ساتھ مخلوط انفیکشن اکثر مخلوط ملٹیمر اور فنکشن کی جزوی بحالی کا باعث بنتا ہے، ایک رجحان جسے انٹراجینک تکمیل کہا جاتا ہے۔ ایک ہی جین میں عیب دار ٹی ایس میوٹینٹس کی انٹراجینک تکمیل ملٹیمر کی ساختی تنظیم کے بارے میں معلومات فراہم کر سکتی ہے۔ جزوی طور پر پابند حالات میں فیج ٹی ایس میوٹینٹس کی نشوونما جین کے افعال کی شناخت کے لیے استعمال کی گئی ہے۔ اس طرح ڈی این اے کے نقصانات کی مرمت میں استعمال ہونے والے جینوں کی نشاندہی کی گئی، ساتھ ہی جینیاتی دوبارہ ملاپ کو متاثر کرنے والے جینوں کی بھی نشاندہی کی گئی۔ مثال کے طور پر، درمیانی درجہ حرارت پر ٹی ایس ڈی این اے مرمت میوٹینٹ کو بڑھانا کچھ پروجینی فیج پیدا کرنے کی اجازت دے گا۔ تاہم، اگر اس تغیر کو یووی روشنی کے ساتھ تابکاری کی جاتی ہے، تو اس کی بقا تابکاری جنگلی قسم کے فیج ٹی 4 کی بقا میں کمی کے مقابلے میں زیادہ مضبوطی سے کم ہو جائے گی۔ اعلی درجہ حرارت پر بڑھنے کے قابل، لیکن کم درجہ حرارت پر بڑھنے سے قاصر، مشروط مہلک میوٹینٹس کو بھی فیج ٹی 4 میں الگ کیا گیا تھا۔ ان سرد حساس تغیرات نے جینوں کے ایک مجرد سیٹ کی وضاحت کی، جن میں سے کچھ کی شناخت پہلے دیگر اقسام کے مشروط مہلک تغیرات نے کی تھی۔ حوالہ جات درجہ حرارت سیل حیاتیات حیاتیات اصطلاحات