Plaque reduction neutralization test
پلاک ریڈکشن نیوٹرلائزیشن ٹیسٹ کا استعمال وائرس کے لیے نیوٹرلائزنگ اینٹی باڈی کے ٹائٹر کی مقدار کے لیے کیا جاتا ہے۔ ٹیسٹ کیے جانے والے سیرم کے نمونے یا اینٹی باڈی کے محلول کو پتلا کیا جاتا ہے اور وائرل معطلی کے ساتھ ملایا جاتا ہے۔ یہ انکیوبیٹ کیا جاتا ہے تاکہ اینٹی باڈی وائرس کے ساتھ رد عمل ظاہر کر سکے۔ یہ میزبان خلیوں کی ایک متصل یک پرت پر ڈالا جاتا ہے۔ سیل پرت کی سطح کو اگر یا کاربوکسی میتھائل سیلولوز کی پرت میں ڈھانپ دیا جاتا ہے تاکہ وائرس کو اندھا دھند پھیلنے سے روکا جا سکے۔ پلاک بنانے والی اکائیوں کے ارتکاز کا اندازہ چند دنوں کے بعد بننے والی تختیوں (متاثرہ خلیوں کے علاقوں) کی تعداد سے لگایا جا سکتا ہے۔ وائرس پر منحصر ہے، پلاک بنانے والی اکائیوں کو خوردبین مشاہدے، فلوروسینٹ اینٹی باڈیز یا مخصوص رنگوں سے ماپا جاتا ہے جو متاثرہ خلیوں کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں۔ سیرم سے پاک وائرس کے مقابلے میں تختیوں کی تعداد کو 50 فیصد تک کم کرنے کے لیے سیرم کا ارتکاز اس بات کی پیمائش کرتا ہے کہ اینٹی باڈی کتنی موجود ہے یا یہ کتنی موثر ہے۔ اس پیمائش کو پی آر این ٹی 50 ویلیو کے طور پر ظاہر کیا جاتا ہے۔ فی الحال اسے اینٹی باڈیز کا پتہ لگانے اور پیمائش کرنے کے لیے "گولڈ اسٹینڈرڈ" سمجھا جاتا ہے جو بہت سی بیماریوں کا سبب بننے والے وائرس کو بے اثر کر سکتے ہیں۔ اس کی حساسیت دیگر ٹیسٹوں جیسے ہیماگلوٹینیشن اور بہت سے تجارتی انزیم امیونواسے کے مقابلے میں زیادہ ہوتی ہے جس میں خاصیت پر سمجھوتہ نہیں کیا جاتا ہے۔ مزید برآں، یہ کچھ اربو وائرس کی تشخیص کے لیے دیگر سیرولوجیکل طریقوں سے زیادہ مخصوص ہے۔ تاہم، ای آئی اے کٹس کے مقابلے میں ٹیسٹ نسبتا مشکل اور وقت طلب (چند دن) ہوتا ہے جو فوری نتائج دیتا ہے (عام طور پر کئی منٹ سے لے کر چند گھنٹے تک)۔ اس جانچ کے ساتھ ایک مسئلہ جس کی حال ہی میں نشاندہی کی گئی ہے وہ یہ ہے کہ اینٹی باڈیز کی غیر جانبدار کرنے کی صلاحیت وائرین کی پختگی کی حالت اور جانچ میں استعمال ہونے والی خلیے کی قسم پر منحصر ہے۔ لہذا، اگر جانچ کے لیے غلط سیل لائن کا استعمال کیا جاتا ہے تو ایسا لگ سکتا ہے کہ اینٹی باڈیز میں غیر جانبدار ہونے کی صلاحیت ہوتی ہے جب وہ حقیقت میں نہیں ہوتے ہیں، یا اس کے برعکس وہ غیر موثر لگ سکتے ہیں جب وہ حقیقت میں غیر جانبدار ہونے کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ پلیک اسیس حوالہ جات امیونولوجک ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے وائرل کوانٹیفیکیشن بھی دیکھیں تشخیصی وائرولوجی لیبارٹری تکنیک