Convulxin
کونولکسن ایک سانپ کا زہر ہے جو ایک اشنکٹبندیی ریٹلسنک میں پایا جاتا ہے جسے کروٹلس ڈوریسس خوفناک کہا جاتا ہے۔ یہ ہیموٹوکسن کے خاندان سے تعلق رکھتا ہے، جو سرخ خون کے خلیوں کو تباہ کرتا ہے یا، جیسا کہ کنولکسن کے معاملے میں ہوتا ہے، خون کے جمنے کو جنم دیتا ہے۔ یہ خون میں پلیٹلیٹ ایکٹیویشن کا سبب بنتا ہے، جمنے اور دباؤ کی تعمیر کا سبب بنتا ہے۔ کونولکسن جی پی وی آئی رسیپٹر کے لیے ایک ایگونسٹ کے طور پر کام کرتا ہے، جو کولیجن کے لیے اہم سگنلنگ رسیپٹر ہے۔ اس سے خون کا بہاؤ پھٹ سکتا ہے، یا دل یا دماغ میں خون بہہ سکتا ہے، جس کے نتیجے میں موت واقع ہو سکتی ہے۔ یہ ایک ٹیٹریمر سی قسم کا لیکٹن ہے جس میں اولیگومیرک ڈھانچہ ہوتا ہے، جو ہیٹروڈیمیرک ذیلی اکائیوں سے بنا ہوتا ہے۔ فیملی کونولکسن سانپ کے زہر سی قسم کے لیکٹین خاندان کا حصہ ہے، جو خون بہنے والے زہریلے مادوں کا ایک گروپ ہے جو جسم کے ہومیوسٹاسس کو متاثر کرتا ہے۔ یہ نام ساخت میں ان کی مماثلت کو دوسرے جانوروں کے سی قسم کے لیکٹنس سے بیان کرتا ہے، پروٹین جو مختلف سگنلنگ راستوں کو متاثر کرنے کے لیے کیلشیم کو باندھتے ہیں۔ لمبائی میں تقریبا 130 امینو ایسڈ کے پروٹین، سی قسم کے لیکٹنس میں کم از کم ایک کاربوہائیڈریٹ ریکگنیشن ڈومین (سی آر ڈی) ہوتا ہے، جو چینی اور کیلشیم کے پابند ہونے میں ثالثی کرتا ہے۔ وہ مختلف حیاتیاتی سرگرمیوں میں شامل ہوتے ہیں، جن میں سیل سیل چپکنے، سیرم گلائکوپروٹین کے کاروبار سے لے کر مدافعتی ردعمل اور سیل اپوپٹوسس تک شامل ہیں۔ ٹاکسن کو پہلی بار 1969 میں کیمپیناس یونیورسٹی کے دو برازیلین محققین، جولیا پراڈو-فرانسیسچی اور اوسوالڈو وائٹل-برازیل نے تفصیل سے بیان کیا تھا۔ سانپ سی قسم کے لیکٹین کنولکسن کے بارے میں اطلاع دی گئی تھی کہ وہ 1970 کی دہائی کے آخر میں کولیجن کی طرح پلیٹلیٹس کو چالو کرتا ہے، لیکن اس کا اعلان صرف ایف سی آر γ-چین کے ساتھ وابستگی کی دریافت کے بعد اور جی پی وی آئی کے ذریعے سرگرمی میں ثالثی کے لیے تسلیم کیے جانے کے بعد کیا گیا تھا۔ اب یہ زہر بڑے پیمانے پر ممالیہ پلیٹلیٹ ریسیپٹرز کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ ڈھانچہ کنولکسن ایک ہیٹروڈائمر ہے جو α-(13.9 kDa) اور β-(12.6 kDa) ذیلی اکائیوں سے بنا ہے، جس میں 38 ٪ ترتیب کی شناخت اور یکساں ڈھانچے ہیں۔ ذیلی اکائیاں ڈائیسلفائیڈ پلوں کے ذریعے جڑی ہوئی ہیں تاکہ ایک چکور، رنگ جیسی α4β4 ساخت بن سکے۔ اس کا کام کولیجن، گلائکوپروٹین (جی پی) VI کے لیے پلیٹلیٹ ریسیپٹر کے ساتھ اعلی وابستگی کے ساتھ پابند ہونے کی صلاحیت سے پیدا ہوتا ہے۔ لہذا، ہیٹروڈائمر پر جی پی وی آئی کے لیے بائنڈنگ سائٹ کا تعین کرنا ایک اہم کام ہے۔ ہیٹروڈائمر ڈھانچہ ایک کنکریٹ سطح پیش کرتا ہے، جس کی پیش گوئی لگینڈ بائنڈنگ سائٹ ہے۔ مزید برآں، سی-ٹائپ لیکٹن فیملی میں عمومی تحقیق بائنڈنگ سائٹ کو لوپ علاقوں کے ذریعہ تشکیل پانے کے طور پر بیان کرتی ہے، جو α-اور β-ذیلی اکائیوں دونوں پر دوسرے α-ہیلکس اور دوسرے β-اسٹرینڈ کے درمیان آتا ہے۔ ان ڈھانچوں کے مخصوص ترتیبات کی تحقیقات سے اعلی تغیر پذیری ظاہر ہوئی، جس سے پتہ چلتا ہے کہ یہ درحقیقت یہ متغیر، کنکیو لوپس ہیں جو لگینڈ بائنڈنگ میں خاصیت پیش کرتے ہیں۔ مخصوص سی وی ایکس ڈھانچے کے تجزیے سے جی پی وی آئی کے ساتھ تعامل کے 3 ممکنہ مقامات کا انکشاف ہوا ہے۔ سب سے پہلے، α-ذیلی اکائی پر مثبت اور منفی چارج کے دو ملحقہ پیچ ؛ دوسرا، مندرجہ ذیل باقیات کے ساتھ ایک ہی ذیلی اکائی لائنوں میں ایک کیویٹی: Trp23، Ser67، Leu104، Ala117، Gly121 اور Ile123 ؛ آخر میں، β-ذیلی اکائی پر منفی چارج شدہ پیچ۔ عمل کا طریقہ کار عام طور پر، اینڈوتھیلیم کو چوٹ لگنے پر، کولیجن کی ثالثی سے جی پی وی آئی سگنلنگ تھروم بوکسن اے 2 کے ذریعے پلیٹلیٹ کی تشکیل میں اضافہ کرتی ہے، اس لیے خون کا جمنہ پیدا ہوتا ہے۔ خون کی شریانوں کو نقصان پہنچنے کی صورت میں، ایکسٹرا سیلولر میٹرکس پر موجود کولیجن بے نقاب ہو جاتا ہے۔ جیسے جیسے پلیٹلیٹس اس کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، ایک ایکٹیویشن سگنل جمع کرنے کے لیے بھیجا جاتا ہے۔ پلیٹلیٹس بلاواسطہ طور پر کولیجن کے ساتھ تعامل کرتے ہیں، وان ولی برانڈ فیکٹر (وی ڈبلیو ایف) کے ذریعے، جو کولیجن کو پلیٹلیٹ جی پی آئی بی رسیپٹر سے جوڑتا ہے، اور انہیں برتن کے نقصان کی جگہ کے قریب مجبور کرتا ہے۔ وہاں، وہ ایکسٹرا سیلولر میٹرکس پر ریسیپٹرز کے ساتھ تعامل کر سکتے ہیں، جو انٹیگرنس (ہیٹروڈائمر α2β1)، اور ڈاون اسٹریم سگنلنگ کے ذریعے چپکنے کو متحرک کرتے ہیں۔ جی پی وی آئی ایف سی ریسیپٹر (ایف سی آر) γ-چین کے ساتھ ایک کمپلیکس کے طور پر موجود ہے، جو ایک محرک کے ذریعے فعال ہونے کے نتیجے میں ایس وائی کے کے ذریعے فاسفوریلیٹ ہو جاتا ہے۔ یہ نیچے کی طرف سگنل پیدا کرتا ہے، جس کی وجہ سے پلیٹلیٹ ایکٹیویشن ہوتا ہے۔ اگرچہ یہ چوٹ کی صورت میں اہم ہے، پلیٹلیٹس کی نامناسب سرگرمی گردش کے اندر جمنے کا باعث بن سکتی ہے۔ کونولکسن کے معاملے میں ایسا ہی ہوتا ہے، جو کولیجن کی طرح سگنلنگ کاسکیڈ کو جنم دے سکتا ہے۔ اس کی اعلی وابستگی کی وجہ سے، کونولکسن جی پی وی آئی سے جڑا رہتا ہے اور گلائکوپروٹینز کے کلسٹرنگ کا سبب بنتا ہے۔ تحقیق نے ثابت کیا ہے کہ جی پی ایل بی کنوولکسن-انڈیوسڈ ایکٹیویشن میں شامل نہیں ہے، لیکن یہ کہ پی 62/جی پی وی آئی کولیجن ریسیپٹر منفرد بائنڈنگ سائٹ ہے، اور پروٹین فاسفوریلیشن کولیجن کے مقابلے میں زیادہ تیزی سے اور زیادہ شدت سے ہوتا ہے۔ مزید برآں، α، β، یا دونوں ذیلی اکائیوں پر مشتمل زہریلے مادے کے غیر فطری نمونوں سے پلیٹلیٹ جمع کرنے یا ٹائروسائن فاسفوریلیشن کو متاثر نہیں کیا گیا ہے جس سے یہ پتہ چلتا ہے کہ گولی کی تشکیل کے لیے پروٹین کی مقامی تشکیل کی ضرورت ہوتی ہے۔ تاہم، کم کنولکسن ذیلی یونٹ اب بھی کولیجن کے اثر کو روکتے ہیں کیونکہ وہ پلیٹلیٹس کے کولیجن ایکٹیویشن کے لیے ضروری ایک عام رسیپٹر سے جڑے ہوتے ہیں۔ ۔ فری ٹاکسن کو ریٹیکولو اینڈوتھیلیل سسٹم (زیادہ تر حصے کے لیے جگر اور گردے) کے ذریعے اوپسونائزیشن کے ذریعے نکالا جا سکتا ہے یا یہ لائسوسومز کے ذریعے خراب ہو سکتا ہے۔ لہذا، کنولکسن کولیجن کے لیے ایک ایگونسٹ کے طور پر کام کرتا ہے، جو جی پی وی آئی بائنڈنگ کے ذریعے پلیٹلیٹ ایکٹیویشن کو جنم دیتا ہے، بالآخر ہومیوسٹیٹک سگنل کی عدم موجودگی میں خون کے جمنے کا سبب بنتا ہے۔ کنولکسن کے زہریلے پن پر کیے گئے زہریلے مطالعے سے پتہ چلتا ہے کہ علامات خوراک کا ایک کام ہیں۔ ٹاکسن کے اثرات نمائش کے بعد علامات کی اچانک اور مختصر مدت کے دوران نمایاں ہوتے ہیں۔ چوہوں میں، کم خوراکیں (5 μg/جانور) نس کے ذریعے دی گئیں (I. V.) 20 سیکنڈ کے اندر ٹیکیپینیا کا پتہ چلا، اس کے بعد اپنیا ہوا۔ مختصر مدت کے اپنیا کے لیے ای ڈی 50 کا تعین 180 ایم کیو جی/کلوگرام کیا گیا تھا۔ زیادہ خوراک (10 مائیکرو گرام/جانور) نے شدید آتش گیر بحران کو جنم دیا، اور عام طور پر جانور کی موت کے ساتھ ختم ہوا۔ LD50 کا تعین 524 μg/کلوگرام کیا گیا تھا۔ انٹراپیریٹونیل (آئی پی) 200 مائیکرو گرام/جانور تک کا انتظام غیر موثر ثابت ہوا۔ بلیوں میں، آئی۔ وی۔ 100 μg/کلوگرام کے انجیکشن میں سانس کی خرابی، میوسس، تھوک، پیٹ میں درد، نسٹاگمس، توازن کا نقصان، آتشزدگی اور بعض اوقات ہائپوٹونیا کا ایک مختصر مرحلہ ظاہر ہوا۔ آتشزدگی کے لیے ای ڈی 50 خوراک 80 مائیکروگرام/کلوگرام ہے۔ زیادہ تر جانور 30 منٹ کے اندر صحت یاب ہو گئے۔ کتوں میں، کنولکسن کے اثر نے دو مراحل دکھائے۔ آئی وی کے بعد۔ 100-125 μg/کلوگرام کا انجکشن لگانے سے وہ پرجوش ہو گئے، بھونکنے لگے اور توازن میں کمی، سانس لینے میں خلل، نسٹاگمس، پیشاب، رفع حاجت اور الٹی کا مظاہرہ کرنے لگے۔ صحت یاب ہونے کے بعد، پانچ میں سے دو جانوروں کو کلونک آتشزدگی کا وقفے وقفے سے بحران تھا جو 24 گھنٹوں کے بعد ظاہر ہوا اور ان کی موت تک جاری رہا۔ دیگر تین کتوں نے ٹورپور کے ساتھ باری باری واضح تحریک کے ادوار دکھائے۔ اگرچہ انسانوں میں مہلک خوراک ابھی تک معلوم نہیں ہے، لیکن جو دریافت ہوا ہے وہ یہ ہے کہ زہریلے اثرات کی سطح سانپ کی اصل پر منحصر ہے۔ جہاں تک علاج کا تعلق ہے، اب تک ایک پولی ویلینٹ سانپ اینٹی وینوم استعمال کیا جا رہا ہے۔ حوالہ جات سانپ کے زہریلے پروٹین