Oxidase test
آکسیڈیز ٹیسٹ کا استعمال اس بات کا تعین کرنے کے لیے کیا جاتا ہے کہ آیا کسی جاندار میں سائٹوکروم سی آکسیڈیز انزائم موجود ہے۔ یہ ٹیسٹ نیسیریا، موراکسیلا، کیمپیلوبیکٹر اور پاسچوریلا پرجاتیوں (آکسیڈیز مثبت) کی تفریق کے لیے ایک امداد کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ یہ سڈوموناڈز کو متعلقہ انواع سے الگ کرنے کے لیے بھی استعمال ہوتا ہے۔ درجہ بندی کے تناؤ یا تو آکسیڈیز مثبت (OX +) یا آکسیڈیز منفی (OX-) ہو سکتے ہیں۔ OX + OX + کا عام طور پر مطلب ہے کہ بیکٹیریا میں سائٹوکروم سی آکسیڈیز (جسے کمپلیکس IV بھی کہا جاتا ہے) ہوتا ہے اور اس لیے وہ الیکٹران ٹرانسفر چین کے ساتھ O2 کو H2O2 یا H2O میں تبدیل کر کے توانائی کی پیداوار کے لیے آکسیجن کا استعمال کر سکتا ہے۔ سیوڈوموناڈیسی عام طور پر OX + ہوتے ہیں۔ گرام منفی ڈپلوکوکی نیسیریا اور موراکسیلا آکسیڈیز مثبت ہیں۔ بہت سی گرام منفی، سرپل منحنی سلاخیں بھی آکسیڈیز مثبت ہوتی ہیں، جن میں ہیلیکوبیکٹر پائلوری، ویبریو ہیضہ، اور کیمپیلوبیکٹر جیجونی شامل ہیں۔ آکسیڈیز متغیر لیجیئنلا نیوموفلا آکسیڈیز مثبت ہو سکتا ہے۔ OX-OX-عام طور پر اس کا مطلب ہے کہ بیکٹیریا میں سائٹوکروم سی آکسیڈیز نہیں ہوتا ہے اور اس لیے، یا تو الیکٹران ٹرانسفر چین کے ساتھ توانائی کی پیداوار کے لیے آکسیجن کا استعمال نہیں کر سکتا یا الیکٹرانوں کو آکسیجن میں منتقل کرنے کے لیے مختلف سائٹوکروم کا استعمال نہیں کر سکتا۔ اینٹروبیکٹیریا عام طور پر OX− ہوتے ہیں۔ میکانزم ٹیسٹ میں ریجینٹ کے ساتھ امپریگنٹڈ ڈسک کا استعمال کیا جاتا ہے جیسے کہ N، N، N′، N′-tetramethyl-p-fhenylenediamine، TMPD (یا N، N-dimethyl-p-fhenylenediamine، DMPD، جو کہ ایک ریڈوکس انڈیکیٹر بھی ہے)۔ آکسیڈائز ہونے پر ریجینٹ گہرے نیلے رنگ سے مرون رنگ کا ہوتا ہے، اور کم ہونے پر بے رنگ ہوتا ہے۔ آکسیڈیز مثبت بیکٹیریا میں سائٹوکروم آکسیڈیز یا انڈوفینول آکسیڈیز (ایک آئرن پر مشتمل ہیموپروٹین) ہوتا ہے۔ یہ دونوں ڈونر مرکبات (این اے ڈی ایچ) سے الیکٹران قبولوں (عام طور پر آکسیجن) تک الیکٹرانوں کی نقل و حمل کو متحرک کرتے ہیں۔ ٹیسٹ ریجینٹ ٹی ایم پی ڈی انزائم آکسیڈیز کے لیے مصنوعی الیکٹران ڈونر کے طور پر کام کرتا ہے۔ آکسیڈائزڈ ریجینٹ رنگین مرکب انڈوفینول نیلے رنگ کی تشکیل کرتا ہے۔ سائٹوکروم نظام عام طور پر صرف ایروبک حیاتیات میں موجود ہوتا ہے جو آکسیجن کو ٹرمینل الیکٹران قبولیت کے طور پر استعمال کرنے کے قابل ہوتے ہیں۔ اس میٹابولزم کی اختتامی پیداوار یا تو پانی یا ہائیڈروجن پیرو آکسائیڈ ہے (کیٹالیز کے ذریعے ٹوٹ جاتا ہے)۔ طریقہ کار ہر ڈسک کو ڈیونائزڈ پانی کے تقریبا چار ٹیکہ لگانے والے لوپس سے گیلا کرتے ہیں۔ خالص بیکٹیریا کی ایک بڑی مقدار کو ڈسک میں غیر فعال طور پر منتقل کرنے کے لیے لوپ کا استعمال کریں۔ تین منٹ تک ڈسک کا مشاہدہ کریں۔ اگر ٹیکہ لگانے کا علاقہ گہرا نیلا ہو کر مرون ہو کر تقریبا کالا ہو جاتا ہے، تو نتیجہ مثبت آتا ہے۔ اگر تین منٹ کے اندر رنگ کی تبدیلی نہیں ہوتی ہے تو نتیجہ منفی آتا ہے۔ متبادل طریقے سے، ٹرپٹیکیز سویا اگر پلیٹوں پر کاشت کیے جانے والے زندہ بیکٹیریا کو سنگل لائن اسٹریک ٹیکہ کاری کے ساتھ جراثیم سے پاک تکنیک کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا جا سکتا ہے۔ کالونیاں قائم کرنے کے لیے ٹیکہ شدہ پلیٹوں کو 37 ڈگری سیلسیس پر 24-48 گھنٹوں کے لیے انکیوبیٹ کیا جاتا ہے۔ تازہ بیکٹیریل تیاریوں کا استعمال کیا جانا چاہیے۔ میڈیم پر کالونیاں بڑھنے کے بعد، ہر جاندار کی سطح پر ریجینٹ ڈی ایم پی ڈی کے 2-3 قطرے شامل کیے جاتے ہیں جن کی جانچ کی جاتی ہے۔ ایک مثبت ٹیسٹ (OX +) کے نتیجے میں 10-30 سیکنڈ کے اندر، بنفشی سے جامنی رنگ میں رنگ تبدیل ہو جائے گا۔ ایک منفی ٹیسٹ (OX-) کے نتیجے میں ہلکا گلابی یا رنگ کی عدم موجودگی ہوگی۔ حوالہ جات امریکن سوسائٹی فار مائکروبیولوجی، آکسیڈیز ٹیسٹ پروٹوکول۔ 2013 میں۔ اے ایس ایم مائکروب لائبریری، 1-9۔ چینگ ڈبلیو جے، لن سی ڈبلیو، وو ٹی جی، ایس یو سی ایس، سیح ایم ایس۔ 2013۔ آکسیجن سیچوریٹڈ وینوس خون کے نمونوں کے ساتھ کیپلری خون کی پیمائش کے لیے گلوکوز آکسیڈیز پر مبنی ٹیسٹ سٹرپس کی پیمائش۔ کلینکا چیمیکا ایکٹا۔ 415، 152-157۔ کورچیا ایل، ہبولٹ آر، کوئنکینل بی، این گوین۔ 2015. پاسچوریلا ملٹوسیڈا کی وجہ سے تیزی سے پھیلنے والا کنجکٹوائٹس، جو امیونو سمجھوتہ شدہ میزبان میں جانوروں کی بوندوں کے ساتھ براہ راست ٹیکہ لگانے کے بعد ہوتا ہے۔ بی ایم سی اپتھلمولوجی 15.1، 21۔ فلوچ سی، ایلارکون-گوٹیریز ای، کریکیٹ ایس۔ 2007۔ مٹی میں فینول آکسیڈیز سرگرمی کا اے بی ٹی ایس تجزیہ۔ جرنل آف مائیکرو بائیولوجیکل میتھڈز۔ 71، 319-324۔ گیبی ڈبلیو ایل، ہیڈلی سی۔ 1957۔ سیوڈوموناس ایروگینوسا کی شناخت کے لیے عملی لیبارٹری ٹیسٹ۔ جرنل آف بیکٹیریولوجی۔ 74، 356-358۔ گیلانی ایم، منیر ٹی، لطیف ایم، گیلانی ایم، رحمان ایس، انصاری ایم، حفیظ اے، نجیب ایس، سعد این۔ 2015۔ ای-ٹیسٹ کے ذریعے سیوڈوموناس ایروگینوسا اور ایسینیٹوبیکٹر بومانی کے خلاف ڈوریپینم کی وٹرو افادیت میں۔ جرنل آف دی کالج آف فزیشنز اینڈ سرجنز پاکستان 25، 726-729۔ کس ایس، ٹینر ای ای ایل، آرڈوواس-مونٹینز ایم، کامپٹن آر جی۔ 2017۔ الیکٹرو کیمیکل ریکگنیشن اینڈ کوانٹیفیکیشن آف سائٹوکروم سی ایکسپریشن ان اینڈ ایروب/اینیروب یوزنگ، '،'-ٹیٹرامیتھائل-فینیلین-ڈائامین (ٹی ایم پی ڈی)۔ کیمیائی سائنس 8.11، 7682-7688۔ ویب سائٹ۔ ایوانووا این وی، زیملک ٹی ایس، ہینر آر ایچ، ہیبرٹ پی ڈی این۔ 2007۔ مچھلی کے ڈی این اے بارکوڈنگ کے لیے یونیورسل پرائمر کاک ٹیل۔ مالیکیولر ایکولوجی نوٹس۔ 7، 544-54۔ پرنس سی۔ 2009۔ میڈیکل مائکروبیولوجی کا عملی دستی (جےپی برادرز میڈیکل پبلشرز (پی) لمیٹڈ) 112-112۔ شیلڈز پی، کیتھکارٹ ایل۔ 2013۔ آکسیڈیز ٹیسٹ پروٹوکول-لائبریری۔ امریکن سوسائٹی فار مائکروبیولوجی، اے ایس ایم مائکروب لائبریری، 1-5۔ اسٹیل کے جے۔ 1961 میں۔ ٹیکسونومک ٹول کے طور پر آکسیڈیز رد عمل۔ جرنل آف جنرل مائکروبیولوجی۔ 25، 297-306۔ زینڈریگو ایف اور دیگر۔ 2018. [11C] ہارمون بائنڈنگ ٹو برین مونوامین آکسیڈیز اے: ٹیسٹ-ریٹیسٹ پراپرٹیز اور نان انویسیو کوانٹیفیکیشن۔ سالماتی امیجنگ اور حیاتیات۔ 20، 667-681۔ بیرونی روابط آکسیڈیز ٹیسٹ ویڈیو آکسیڈیز ٹیسٹ طریقہ کار بائیو کیمسٹری کا پتہ لگانے کے رد عمل مائکروبیولوجی تکنیک