Perlecan
پرلیکن (پی ایل سی) جسے بیسمنٹ میمبرین کے لیے مخصوص ہیپیرن سلفیٹ پروٹیوگلیکن کور پروٹین (ایچ ایس پی جی) یا ہیپیرن سلفیٹ پروٹیوگلیکن 2 (ایچ ایس پی جی 2) بھی کہا جاتا ہے، ایک پروٹین ہے جسے انسانوں میں ایچ ایس پی جی 2 جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے۔ ایچ ایس پی جی 2 جین 4,391 امینو ایسڈ پروٹین کے لیے کوڈ کرتا ہے جس کا سالماتی وزن 468,829 ہے۔ یہ سب سے بڑے معروف پروٹینوں میں سے ایک ہے۔ پرلیکن کا نام گھومتی سایہ دار تصاویر میں "موتیوں کی تار" کے طور پر اس کی ظاہری شکل سے آتا ہے۔ پرلیکن کو اصل میں ٹیومر سیل لائن سے الگ کیا گیا تھا اور تمام مقامی تہہ خانے کی جھلیوں میں موجود دکھایا گیا تھا۔ پرلیکن ایک بڑا ملٹی ڈومین (پانچ ڈومینز، جسے I-V کا نام دیا گیا ہے) پروٹیگلیکن ہے جو بہت سے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس (ای سی ایم) اجزاء اور سیل سطح کے مالیکیولز کو باندھتا ہے اور کراس لنک کرتا ہے۔ پرلیکن کو ویسکولر اینڈوتھیلیل اور ہموار پٹھوں کے خلیات دونوں کے ذریعہ ترکیب کیا جاتا ہے اور پیراہوکسزوانس کے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس میں جمع کیا جاتا ہے۔ پرلیکن تمام انواع میں انتہائی محفوظ ہے اور دستیاب اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ یہ جین کی نقل اور ایکسن شفلنگ کے ذریعے قدیم آباؤ اجداد سے تیار ہوا ہے۔ ڈھانچہ پرلیکن سالماتی وزن 469 کے ڈی اے کے ایک بنیادی پروٹین پر مشتمل ہوتا ہے جس سے گلائکوسامینوگلیکنز کی تین لمبی زنجیراں (ہر ایک تقریبا 70-100 کے ڈی اے) منسلک ہوتی ہیں (اکثر ہیپیرن سلفیٹ، ایچ ایس، لیکن کونڈروٹین سلفیٹ، سی ایس ہو سکتا ہے)۔ بنیادی پروٹین پانچ الگ الگ ساختی ڈومینز پر مشتمل ہوتا ہے۔ این-ٹرمینل ڈومین I (aa ~ 1-195) میں ایچ ایس چینز کے لیے منسلک سائٹس شامل ہیں۔ اگرچہ پروٹین کے درست فولڈنگ اور سراو کے لیے ایچ ایس زنجیروں کی ضرورت نہیں ہے، لیکن ایچ ایس کی کمی یا سلفیشن میں کمی پیریکن کی میٹرکس پروٹین کے ساتھ تعامل کرنے کی صلاحیت کو کم کر سکتی ہے۔ ایچ ایس زنجیروں کو ہٹانا میٹرکس تنظیم اور اینڈوتھیلیل رکاوٹ فنکشن کو متاثر کر سکتا ہے۔ ڈومین II ایل ڈی ایل رسیپٹر کے لگینڈ بائنڈنگ حصے کے لیے چار ریپیٹس پر مشتمل ہے جس میں چھ محفوظ سسٹین کے باقیات اور ایک پینٹاپیپٹائڈ، ڈی جی ایس ڈی ای ہے، جو ایل ڈی ایل رسیپٹر کے ذریعے لگینڈ بائنڈنگ میں ثالثی کرتا ہے۔ ڈومین III میں لیمینن کے ڈومین IVa اور IVb کی ہم آہنگی ہے۔ ڈومین IV آئی جی ماڈیولز کی ایک سیریز پر مشتمل ہے۔ ڈومین IV میں صرف تیسرے امیونوگلوبلین (آئی جی) جیسی تکرار کی ساخت "ایچ ایس پی جی 2" کے لیبل والی شکل میں دکھائی گئی ہے۔ سی-ٹرمینل ڈومین V، جس میں لیمینن کے لمبے بازو کے جی ڈومین کے لیے ہم آہنگی ہے، خود اسمبلی کے لیے ذمہ دار ہے اور ویو میں تہہ خانے کی جھلی کی تشکیل کے لیے اہم ہو سکتا ہے۔ ڈومین V میں ایچ ایس/سی ایس زنجیروں کے لیے منسلک سائٹیں بھی ہیں۔ اس طرح، پرلیکن کور پروٹین اور ایچ ایس چین میٹرکس اسمبلی، سیل پھیلاؤ، لیپو پروٹین بائنڈنگ اور سیل چپکنے کو تبدیل کر سکتے ہیں۔ فنکشن پرلیکن کارٹلیج کے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کا ایک کلیدی جزو ہے جہاں یہ عام گروتھ پلیٹ کی نشوونما اور ہڈیوں کی لمبی نشوونما کے لیے ضروری ہے۔ پرلیکن نیل ماؤس کے ذریعہ ظاہر ہونے والا بونے پن ایف جی ایف آر 3 کے لیے جین میں تغیرات کو چالو کرنے سے پیدا ہونے والے فینوٹائپ سے ملتا جلتا ہے، جو فائبربلاسٹ نمو کے عوامل کے لیے ایک رسیپٹر ہے۔ پرلیکن گروتھ پلیٹ کی نشوونما میں شامل نمو کے عوامل سے منسلک ہوتا ہے۔ ترقی پذیر گروتھ پلیٹوں سے الگ تھلگ پرلیکن کو اس کے ہیپیرن سلفیٹ سائیڈ چینز کے ذریعے ایف جی ایف-2 سے اور اس کے بنیادی پروٹین کے ڈومین III کے ذریعے ایف جی ایف-18 سے جڑا ہوا دکھایا گیا ہے اور ایف جی ایف ریسیپٹرز پر ان کے عمل میں ثالثی کرتا ہے۔ پرلیکن ممکنہ طور پر اینڈوکونڈرل اوسیفیکیشن کے دوران ایف جی ایف-2 اور ایف جی ایف-18 کی ضبطی اور/یا ترسیل میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ پرلیکن ویسکولر ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کا ایک کلیدی جزو بھی ہے، جہاں یہ مختلف قسم کے دیگر میٹرکس اجزاء کے ساتھ تعامل کرتا ہے اور اینڈوتھیلیل رکاوٹ فنکشن کو برقرار رکھنے میں مدد کرتا ہے۔ پرلیکن ہموار پٹھوں کے خلیوں کے پھیلاؤ کا ایک طاقتور روک تھام ہے اور اس طرح خیال کیا جاتا ہے کہ یہ ویسکولر ہومیوسٹاسس کو برقرار رکھنے میں مدد کرتا ہے۔ پرلیکن گروتھ فیکٹر (مثال کے طور پر، ایف جی ایف 2) سرگرمی کو بھی فروغ دے سکتا ہے اور اس طرح اینڈوتھیلیل کی نشوونما اور دوبارہ نسل کو متحرک کر سکتا ہے۔ گلائکوسامینوگلیکن زنجیروں میں ترمیم سی-اور این-ٹرمینل ڈومینز پر ہیپیرن سلفیٹ زنجیروں میں تبدیلیاں پرلیکن کے خفیہ راستے میں سب سے زیادہ مطالعہ شدہ اختلافات ہیں۔ کونڈروئٹین سلفیٹ کو ہیپیرن سلفیٹ کے لیے تبدیل کیا جا سکتا ہے، اور سلفیٹ کی شمولیت یا زنجیروں کی چینی کی ساخت تبدیل ہو سکتی ہے۔ ہیپیرن سلفیٹ کے مصنوعی راستے میں شامل انزائموں کا نقصان متعدد حالات کا باعث بنتا ہے۔ متفرق ہیپیرن سلفیٹ سلسلہ ترمیم متعدد ریگولیٹری سگنلز کے ذریعے ہو سکتی ہے۔ ماؤس کی لمبی ہڈیوں کی گروتھ پلیٹ میں پرلیکن آرام کے زون سے پھیلاؤ والے زون تک کونڈروسائٹ کی ترقی میں گلائکوسیلیشن کی تبدیلیوں کو ظاہر کرتا ہے۔ اگرچہ ابتدائی طور پر پرلیکن کی گلائکوسامینوگلیکن (جی اے جی) زنجیروں کے بارے میں خیال کیا جاتا تھا کہ وہ خصوصی طور پر ہیپیرن سلفیٹ ہیں، کونڈروئٹن سلفیٹ زنجیروں کو تبدیل کیا جا سکتا ہے اور یہ خلیوں کی قسم پر منحصر ہو سکتا ہے۔ پروٹین کے این-ٹرمینل ڈومین I کی ریکومبیننٹ شکل کا اظہار کرتے ہوئے اور یہ ظاہر کرتے ہوئے کہ ہیپرانیز یا کونڈروئٹینیز کے ساتھ پیپٹائڈ کے ہاضمے سے پیپٹائڈ کی سرگرمی کو مکمل نقصان نہیں پہنچا، یہ ظاہر کیا گیا کہ کونڈروئٹن سلفیٹ کی زنجیروں کو انسانی پرلیکن میں شامل کیا جا سکتا ہے۔ یہ پچھلے اعداد و شمار سے متفق تھا جس میں دکھایا گیا تھا کہ کونڈروسائٹس کے ذریعہ تیار کردہ مویشیوں کے پرلیکن سے منسلک کونڈروئٹن سلفیٹ جی اے جی زنجیروں کو دکھایا گیا تھا اور جب چینی ہیمسٹر اووری خلیوں میں اظہار کیا گیا تو یہ کہ ریکومبیننٹ ہیومن ڈومین I پروٹین کو ہیپیرن اور کونڈروئٹن سلفیٹ زنجیروں دونوں کے ساتھ گلائکوسیلیٹ کیا گیا تھا۔ ڈومینز I اور V میں ہیپیرن سلفیٹ یا کونڈروئٹن سلفیٹ زنجیروں کے ترجیحی اضافے سے میسینکائمل ٹشوز کی کارٹلیج، ہڈی یا کسی بھی تعداد میں ٹشوز میں تفریق پر اثر پڑ سکتا ہے، لیکن ہیپیرن سلفیٹ سے کونڈروئٹن سلفیٹ کے اضافے میں تبدیل ہونے کا ریگولیٹری میکانزم اچھی طرح سے سمجھا نہیں گیا ہے۔ نیفریٹک پرم سلیکٹیویٹی پر پروٹیوگلیکن کی ساخت کے اثرات کا مطالعہ کرتے ہوئے، یہ نوٹ کیا گیا کہ انسانی گلوومیرولر اینڈوتھیلیل خلیوں (ایچ جی ای سی) کے پروٹوگلیکن کے علاج نے پروٹیوگلیکن جیسے پروٹیوگلیکن پر جی اے جی زنجیروں کی سلفیشن کی سطح کو تبدیل کر دیا، جس کے نتیجے میں جی اے جی زنجیروں کے استحکام میں کمی واقع ہوئی۔ پروٹیوگلیکنز کے بنیادی پروٹین ایم آر این اے کی سطح متاثر نہیں ہوئی، اس طرح جی اے جی زنجیروں میں کمی کسی اور عنصر کا نتیجہ تھی، جو اس معاملے میں سلفیٹ ٹرانسفرس انزائمز کے اظہار میں کمی ثابت ہوئی، جو جی اے جی بائیو سنتھیسز میں کلیدی کردار ادا کرتے ہیں۔ ایسا معلوم ہوتا ہے کہ ہیپیرن سلفیٹ پروٹیوگلیکن کے اظہار کے نقصان اور ہیپیرن سلفیٹ بائیو سنتھیسس میں شامل انزائموں کے نقصان سے پیدا ہونے والی بیماریوں میں کچھ اوورلیپ ہو سکتا ہے۔ انحطاط کے خلیے اشاروں یا تناؤ کے جواب میں اپنے ماورائے خلیاتی میٹرکس اور تہہ خانے کی جھلیوں میں ترمیم کر سکتے ہیں۔ مخصوص پروٹیسیس خلیوں کے باہر کے ماحول میں پروٹین پر اس وقت عمل کرتے ہیں جب خلیوں کے پاس اپنے ارد گرد حرکت کرنے یا تبدیل کرنے کی وجہ ہوتی ہے۔ کیتھیپسن ایس ایک سسٹین پروٹیز ہے جو ایف جی ایف مثبت خلیوں کے پرلیکن مثبت سبسٹریٹ کے پابند ہونے کو اعتدال سے کم کرتا ہے۔ کیتھیپسن ایس ایک ممکنہ پروٹیز ہے جو تہہ خانے کی جھلی یا اسٹروما میں پرلیکن کے بنیادی پروٹین پر کام کرتا ہے۔ پرلیکن کی ہیپیرن سلفیٹ کی زنجیراں ای سی ایم میں نمو کے عوامل کو باندھتی ہیں، اور ریسیپٹرز سے منسلک ہونے پر شریک لیگینڈ یا لگینڈ بڑھانے والے کے طور پر کام کرتی ہیں۔ ایک اور مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ کلچر میں ایچ ایس باؤنڈ بنیادی ایف جی ایف کی رہائی اسٹروملیسن، ہیپریٹینیز I، ریٹ کولیجنیز اور پلازمین کے ساتھ علاج کے ذریعے حاصل کی جا سکتی ہے، اور ان پروٹیولیسس سائٹس کو شکل 1 میں دکھایا گیا ہے۔ یہ پروٹیسیس کی ایک غیر جامع فہرست کے طور پر تجویز کی گئی تھی جو پرلیکن کی ہیپیرن سلفیٹ زنجیروں سے نمو کے عوامل کی رہائی میں ثالثی کر سکتی ہے۔ اگرچہ وائٹ لاک اور دیگر۔ تجویز کیا کہ تھرومبن کلیویج اتفاق رائے کے سلسلے پرلیکن کے بنیادی پروٹین میں موجود ہیں، وہ یہ بھی مانتے ہیں کہ پرلیکن کا کوئی بھی تھرومبن ایکٹیویشن دراصل دوسرے ای سی ایم اجزاء کے کلیویج سے آتا ہے۔ اس مضمون میں کہا گیا ہے کہ ہیپرانیز میٹرکس میں پرلیکن کی ہیپران سلفیٹ زنجیروں کے پھٹنے کا ذمہ دار ہے۔ یہ ہیپیرن سلفیٹ، خاص طور پر ایف جی ایف-10 سے منسلک نمو کے عوامل کو جاری کرتا ہے۔ تہہ خانے کی جھلی میں اپیتھیلیا کے سیل کلچر میں ہیپرانیز کے اضافے کی وجہ سے ایف جی ایف-10 کے اخراج کی وجہ سے اپیتھیلیل سیل کے پھیلاؤ میں اضافہ ہوا۔ کارنیل اپیتھیلیم کا استعمال کرتے ہوئے وٹرو میں ایکسپلانٹ گروتھ کے ماڈل میں، میٹرکس میٹالوپروٹینز (ایم ایم پی) 2 کا اظہار اصل تہہ خانے کی جھلی کے ابتدائی انحطاط سے متعلق ہے۔ کلچر میں تہہ خانے کی جھلی کی اصلاح کا انحصار ایم ایم پی-2 کے مستقل اظہار کے برعکس ایم ایم پی-9 کے ڈاؤن ریگولیشن کے بعد ابتدائی اپ ریگولیشن پر تھا۔ یہ اس بات کا ثبوت نہیں ہے کہ ایم ایم پی-2 اور ایم ایم پی-9 ویو میں براہ راست پرلیکن پروٹین کو الگ کرتے ہیں لیکن یہ ظاہر کرتا ہے کہ پروٹین واضح طور پر تہہ خانے کی جھلی کی پختگی میں کچھ عنصر کو تبدیل کرتے ہیں۔ میٹالوپروٹیسیس کا ایک اور خاندان، بون مورفوجنیٹک پروٹین 1/ٹولائڈ جیسا خاندان، پرلیکن کور پروٹین کے سی-ٹرمینل اینڈوریپیلن ڈومین کو جاری کرتا ہے۔ لامینن نما گلوبولر ڈومین اینڈوریپیلن کے فعال موٹف پر مشتمل ہوتا ہے، اور بی ایم پی-1 پروٹین کی متغیر اور غیر فعال شکلوں کا اظہار کرنے والے خلیوں کے ذریعہ الگ ہونے سے قاصر ہوتا ہے۔ مزید برآں، اس کلیویج کے ہونے کے لیے ضروری اہم باقیات کو ایس پی 4197 میں مقامی بنایا گیا تھا۔ اس پروٹولائٹک عمل کی بیماری میں اہمیت ہو سکتی ہے کیونکہ اختتامی مرحلے کے گردوں کی ناکامی میں مبتلا مریضوں کے پیشاب میں اور حاملہ خواتین کے امنیٹک سیال میں جو جھلی کے قبل از وقت پھٹنے سے گزر چکے ہیں، ایک متعلقہ ٹکڑا پایا گیا تھا۔ نشوونما کے دوران اظہار اظہار نشوونما کے دوران جین کے اظہار کا وقت ٹشو سے ٹشو میں مختلف ہوتا ہے۔ تہہ خانے کی جھلیاں اکثر اسٹروما اور کنیکٹو ٹشو سے اپیتھیلیا کو الگ کرنے کے پیچھے محرک قوت ہوتی ہیں۔ قلبی، اعصابی اور کارٹلیجینس کی نشوونما میں پرلیکن کی خاص اہمیت ہے۔ پری امپلانٹیشن بلاسٹوسسٹ ڈویلپمنٹ جین ریگولیشن اور انٹر سیلولر سگنلنگ کا ایک کنٹرول شدہ جھرن ہے۔ ماؤس کے جنین کی نشوونما کے بلاسٹوسسٹ مرحلے میں ایکسٹرا سیلولر پرلیکن کا مشاہدہ کیا گیا ہے، خاص طور پر اس مقام پر ریگولیٹ کیا جاتا ہے جب جنین "منسلک صلاحیت" تک پہنچ جاتا ہے۔ اس دریافت کو ایم آر این اے کی سطح اور پروٹین کی سطح دونوں پر برقرار رکھا گیا، جو آر ٹی-پی سی آر اور امیونوسٹیننگ کے ذریعے دکھایا گیا ہے۔ بعد میں جنین کی نشوونما اتنی ہی درست طریقے سے منظم کی جاتی ہے جتنی کہ امپلانٹیشن سے پہلے کی نشوونما، اور تمام بافتوں کی تفریق کی وجہ سے زیادہ پیچیدہ ہوتی ہے۔ جنین کی نشوونما کے دوران پرلیکن کے اظہار کے پہلے مطالعے سے پتہ چلا ہے کہ پروٹین کا اظہار سب سے پہلے قلبی نظام کی نشوونما کے دوران کیا گیا تھا، اور بعد میں جسم میں زیادہ تر بافتوں کی پختگی سے متعلق ہے، یعنی۔ تہہ خانے کی جھلیوں کے ذریعہ اینڈوتھیلیا اور اسٹروما سے اپیتھیلیل تہوں کی علیحدگی۔ ایک بار پھر، قلبی نشوونما کے دوران یہ اپ ریگولیشن اینڈوریپیلن کے طور پر پرلیکن کے سی-ٹرمینس کے کردار کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے۔ نشوونما کے دوران پرلیکن جین کی ٹرانس ایکٹیویشن میں اسپاٹیو-عارضی خاصیت تہہ خانے کی جھلیوں کی پختگی اور اس طرح ایپیٹیلیا کو اینڈوتھیلیا اور اسٹروما سے مکمل طور پر الگ کرنے کی کلید ہے۔ چکن کے جنین کی نشوونما کے دوران پرلیکن کے اظہار کے مکمل مطالعے سے پتہ چلا ہے کہ پرلیکن مورلا مرحلے میں اور باقی نشوونما کے لیے موجود ہوتا ہے، حالانکہ اظہار عارضی ہو سکتا ہے اور بعض بافتوں کے پیشروؤں میں عین مطابق وقت پر ہو سکتا ہے۔ چوہے کے جنین میں، جنین کی نشوونما میں ای 19 کے بعد ویسکولر ہموار پٹھوں کے خلیوں (وی ایس ایم سی) میں پرلیکن کے اظہار میں اضافہ دکھایا گیا ہے۔ یہ ای 18 پر وی ایس ایم سی کے پھیلاؤ کو روکنے اور ان کے فینوٹائپ میں تبدیلی کے ساتھ بالکل مطابقت رکھتا ہے۔ اس مطالعے میں جو نظریہ پیش کیا گیا ہے وہ یہ ہے کہ ایک بار کسی خاص ترقیاتی مقام پر پہنچ جانے کے بعد پیرلیکن وی ایس ایم سی کے لیے انسداد پھیلاؤ کا کردار ادا کرتا ہے، بالکل کلچر میں پیرلیکن کے سنگم پر منحصر اظہار کی طرح۔ ان نتائج کی تصدیق چوہے کی پلمونری شریان اور پھیپھڑوں کے اپیتھیلیا کے مطالعے سے ملتے جلتے نتائج سے ہوئی۔ جنین کے 19 ویں دن کے آس پاس، خلیوں کی تقسیم بند ہونے کے بعد یہ بافت بھی پرلیکن کی پیداوار شروع کرتے پائے گئے۔ اعصابی نظام کی نشوونما اور محوروں کی توسیع قطعی طور پر ایکسٹرا سیلولر میٹرکس مالیکیولز کے اشاروں سے ہوتی ہے۔ ماؤس کی نشوونما میں اولفیکٹری نیورائٹ کی نشوونما کم از کم جزوی طور پر ایک ای سی ایم کے ذریعے کی جاتی ہے جو کہ اولفیکٹری اپیتھیلیل سیلز (او ای سیز) کے ذریعے متعین کی جاتی ہے۔ اس رہنمائی کے راستے میں پرلیکن اور لیمینن-1 اہم معلوم ہوتے ہیں، حالانکہ پرلیکن انڈکشن لیمینن-1 کے مقابلے میں تھوڑی دیر بعد ہوتا ہے۔ اس اعداد و شمار کی تائید پہلے کے اعداد و شمار سے ہوتی ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ او ای سیز گندھک کی نشوونما کے دوران ایف جی ایف-1 کا اظہار کرتے ہیں، اور یہ کہ پرلیکن ایف جی ایف-1 کی موجودگی میں کلچر میں گندھک حسی نیورائٹ کی نشوونما کو متحرک کر سکتا ہے۔ پیرلیکن نے پچھلے مطالعے میں اعصاب کی چپکنے والی خصوصیات بھی ظاہر کیں، جس سے مزید پتہ چلتا ہے کہ یہ پسپا ہونے کے بجائے لامینن کے ساتھ مل کر پرکشش کردار ادا کر سکتا ہے۔ کارٹلیج اور ہڈیوں کی نشوونما پرلیکن کے اظہار پر منحصر ثابت ہوئی ہے۔ پروٹین ماؤس کی نشوونما کے دوران 15 ویں دن امیونوسٹیننگ کے ذریعے نظر آتا ہے، دیگر بیسمنٹ جھلی پروٹینوں سے آزادانہ طور پر، یہ تجویز کرتا ہے کہ یہ صرف کونڈروسائٹس کی نشوونما کے ای سی ایم کا ایک حصہ ہے، اس کے علاوہ کولیجن II اور دیگر کارٹلیج مارکر جو 12 ویں دن سے شروع ہوتے ہیں۔ اعداد و شمار کے ساتھ، کہ پی ایل این جین کی کمی والے چوہے مستحکم کارٹلیج کو برقرار نہیں رکھ سکتے، یہ واضح ہے کہ پرلیکن کارٹلیجینس ڈھانچے کی پختگی اور استحکام کے لیے ضروری ہے۔ اس کی تائید ایک مطالعہ سے ہوتی ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ پرلیکن کی پیداوار کا دستک کلچر میں C3H10T1/2 فائبربلاسٹ میں کونڈروجینک تفریق کے آخری مراحل کو روکتا ہے۔ ہڈیوں کی نشوونما، یعنی۔ کارٹلیجینس ٹشو کی منرلائزیشن، کونڈرو-اوسیوس جنکشن (سی او جے) پر پرلیکن اور ہیپیرن سلفیٹ کے نقصان سے متعلق ہے۔ یہ سمجھنے کی کوشش میں کہ کس طرح ہیپیرن سلفیٹ اور پرلیکن میسینکائمل اسٹیم خلیوں کو آسٹیوجینک راستے میں لے جاتے ہیں، انسانی میسینکائمل اسٹیم خلیوں کا کلچر میں ہیپریناز اور کونڈروئٹینیز کے ساتھ علاج کیا گیا۔ اس کی وجہ سے معدنیات میں اضافہ ہوا اور آسٹیوسیٹ مارکر کے اظہار میں اضافہ ہوا، جس سے اعداد و شمار کی حمایت ہوتی ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ سی او جے میں ہیپیرن سلفیٹ کا نقصان آسٹیوجینیسیس کا ایک اہم عنصر ہے۔ یہ خیال کیا جاتا ہے کہ آسٹیوجینیسیس کی ہیپرانیز اور کونڈروئٹینیز ایکٹیویشن کے پیچھے محرک قوت ہیپران سلفیٹ زنجیروں میں بندھے ہوئے ہڈیوں کے مورفوجینیٹک پروٹین کی رہائی ہے۔ جنین زیبرا فش میں جانوروں کے ماڈل پرلیکن ناک ڈاؤن پرلیکن ٹرانسکرپٹ کو نشانہ بناتے ہوئے مورفولینو کے استعمال کے ذریعے حاصل کیا گیا ہے۔ مورفولینو کا استعمال زیبرا فش ایمبریوز میں پرلیکن ایم آر این اے کے ترجمہ کو روکنے کے لیے کیا گیا تھا، جو کنکال اور ویسکولر نشوونما میں پرلیکن فنکشن کی تحقیقات کے حصے کے طور پر تھا۔ مورفولینو پرلیکن ایم آر این اے کے پانچ اہم غیر ترجمہ شدہ علاقے کو نشانہ بناتا ہے اس طرح پیغام کے ترجمہ کو روکتا ہے۔ ان مچھلیوں میں پرلیکن پروٹین کی کمی سنگین مایوپیتھی اور گردش کے مسائل کا باعث بنی۔ جیسا کہ اسی لیبارٹری کے بعد کے مطالعے میں دکھایا گیا ہے، اس فینوٹائپ کو بیرونی وی ای جی ایف-اے کے اضافے کے ذریعے بچایا جا سکتا ہے۔ ممالیہ کی نشوونما کے لیے پرلیکن کی اہمیت کا مظاہرہ پرلیکن جین ناک آؤٹ تجربات سے ہوتا ہے۔ تمام چوہوں میں سے تقریبا نصف جن میں پرلیکن جین کو باہر کر دیا گیا ہے (پرلیکن نیل چوہے) جنین کے دن 10.5 پر مر جاتے ہیں، جب پرلیکن جین عام طور پر ظاہر ہونا شروع ہوتا ہے۔ دوسرے پیدائش کے فورا بعد شدید نقائص جیسے کہ غیر معمولی تہہ خانے کی جھلی کی تشکیل، عیب دار سیفیلک اور ہڈیوں کی لمبی نشوونما اور آکونڈروپلاسیا کے ساتھ مر جاتے ہیں۔ پرلیکن ناک آؤٹ میں سے ایک کے لیے استعمال کی جانے والی ناک آؤٹ حکمت عملی نیومیسن کیسٹ داخل کرکے ایکسن 6 کی فلوکسنگ تھی، اور اس کے بعد جینوم سے ایکسن 6 کو ہٹانے کے لیے سی آر ای کا اظہار تھا۔ اس کے نتیجے میں کارٹلیج سے سمجھوتہ کرنے والے فینوٹائپ پر پہلے تبادلہ خیال کیا گیا اور مختلف قسم کے بافتوں میں تہہ خانے کی جھلی کی سالمیت کا نقصان ہوا۔ جنین کی اموات کی شرح زیادہ ہے اور زندہ رہنے والا چوہا پیدائش کے فورا بعد مر جاتا ہے۔ ایک علیحدہ طور پر تیار کردہ پرلیکن ناک آؤٹ ماؤس ماڈل پرلیکن جین کے ایکسن 7 میں نیومیسن کیسٹ داخل کرکے بنایا گیا تھا۔ یہ ناک آؤٹ چوہے بھی 40 فیصد جنین مہلک تھے، باقی چوہے پیدائش کے فورا بعد کنکال کی شدید اسامانیتاوں کی وجہ سے مر جاتے ہیں۔ دونوں مطالعات میں پرلیکن ناک آؤٹ فینوٹائپ ایک جیسے تھے اور ایف جی ایف آر 3 کے لیے جین میں تغیرات کو چالو کرنے سے پیدا ہونے والے فینوٹائپ سے ملتے جلتے تھے، جو فائبربلاسٹ نمو کے عوامل کے لیے ایک رسیپٹر ہے۔ ماؤس کے ایک اور ناک آؤٹ ماڈل میں، پرلیکن جین کو اینڈوجینس پرلیکن جین کے ہومولوگس ریکومبینیشن کے ذریعے تبدیل کیا گیا تھا جس میں ایک حذف شدہ ایکسن 3 کے ارد گرد ہومیولوجی کے 2 اور 5 کے بی بازوؤں پر مشتمل ایک تعمیر تھی، جو پرلیکن کے ڈومین I میں 3 میں سے 2 ہیپیرن سلفیٹ منسلک سائٹس کے لیے کوڈ کرتی ہے۔ ایکسون 3 ناک آؤٹ چوہوں سے کلچرڈ فائبربلاسٹس کے ذریعہ تیار کردہ پرلیکن، تاہم، 40 ٪ ہیپیرن سلفیٹ اور 60 ٪ کونڈروئٹن سلفیٹ پر مشتمل ہے کیونکہ، ڈومین I پر باقی ایک ہیپیرن سلفیٹ منسلک سائٹ کے علاوہ، ڈومین V پر منسلک سائٹ بھی موجود ہوگی۔ مطالعہ سے پتہ چلتا ہے کہ ایکسن 3 ناک آؤٹ چوہوں میں زچگی کے بعد کے ہفتے 3 تک لینس کیپسول کی سالمیت ختم ہو گئی تھی، جس سے لینس کیپسول بیسمنٹ جھلی کی سالمیت کو برقرار رکھنے میں پرلیکن کے ڈومین I سے حذف شدہ امینو ایسڈ کے کردار کی نشاندہی ہوتی ہے۔ تاہم، پرلیکن ناک آؤٹ چوہوں کے برعکس، ایکسن 3 ناک آؤٹ چوہوں میں عملداری اور ہڈیوں کی لمبی نشوونما معمول کی بات تھی۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ، ایکسون 3 ناک آؤٹ میں، ایف جی ایف-2 بائنڈنگ کے لیے دستیاب ڈومین I اور V پر ہیپیرن سلفیٹ کے لیے بقیہ منسلک سائٹس یا ایف جی ایف-18 بائنڈنگ کے لیے دستیاب ڈومین 3 پر موجود سائٹ عام لمبی ہڈیوں کی نشوونما کے لیے کافی ہو سکتی ہے۔ ایکسون 3 ناک آؤٹ چوہوں میں لینس میں تبدیلیاں کچھ حد تک ٹی جی ایف-β ناک آؤٹ ماؤس ماڈل سے ملتی جلتی ہیں۔ ایکسن 3 ناک آؤٹ چوہوں نے بھی زخم کی شفا یابی اور انجیوجینیسیس کی صلاحیتوں میں کمی ظاہر کی جب انہیں ایپیڈرمل چوٹ یا کارنیا میں ایف جی ایف-2 کے اضافے سے چیلنج کیا گیا۔ ایپیڈرمل انجری کے مطالعے میں، ایپیڈرمس کی گہرائی میں پھیلا ہوا زخم ایکسون 3-منفی چوہوں اور کنٹرول چوہوں میں پیدا ہوا تھا، اور ناک آؤٹ چوہوں میں انجیوجینیسیس اور زخم کی شفا یابی کے نشانات ممکنہ طور پر ہیپیرن سلفیٹ-منفی پرلیکن کے ذریعہ نمو کے عنصر کی ترتیب میں کمی کی وجہ سے ترقی کرنے میں سست تھے۔ اسی طرح کا نتیجہ کارنیل مائکرو پاکٹ جانچ میں بھی سامنے آیا، جہاں ایف جی ایف-2 کو چوہوں کے کارنیا میں لگایا جاتا ہے اور عام چوہوں میں انجیوجینیسیس پیدا ہوتا ہے۔ ناک آؤٹ چوہوں میں یہ انجیوجینک اثر خراب ہوا، حالانکہ مکمل طور پر نہیں۔ کولیجن ٹائپ II پروموٹر کے کنٹرول میں ایک مکمل لمبائی پرلیکن تعمیر، ایک پرلیکن ٹرانسجینک ماؤس بنانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔ کولیجن ٹائپ II پروموٹر نے صرف کونڈروسائٹس کے ذریعہ بنائے گئے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس میں پرلیکن کے اظہار کی اجازت دی لیکن اینڈوتھیلیل، ایپیٹیلیل یا پٹھوں کے خلیوں کے ذریعہ بنائے گئے تہہ خانے کی جھلیوں میں نہیں۔ پرلیکن نیل ماؤس میں پرلیکن ٹرانسجین نے مہلکیت کو ختم کیا اور ہڈیوں کی لمبی نشوونما کو معمول پر لایا۔ اس سے پتہ چلتا ہے کہ پرلیکن کارٹلیج کی نشوونما میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ تاہم، پرلیکن ٹرانسجینک چوہوں نے پٹھوں کی ہائپر ٹرافی کا مظاہرہ کیا، جو پٹھوں کی نشوونما کے ساتھ ساتھ کارٹلیج گروتھ پلیٹ میں طویل ہڈیوں کی نشوونما میں پرلیکن کے کردار کی نشاندہی کرتا ہے۔ جین ناک آؤٹ چوہوں اور انسانی بیماریوں کے مطالعے سے کارٹلیج کی نشوونما اور نیورومسکلر جنکشن سرگرمی میں پرلیکن کے لیے ویو کرداروں میں بھی اہم انکشاف ہوا ہے۔ سگنلنگ کے راستے اور اظہار پر ان کا اثر سگنلنگ کے راستے جینوں کی نقل کی سطح کو بلند یا کم کرنے کے لیے کام کرتے ہیں، جس کے نتیجے میں خلیات اپنے جین کے اظہار کے پروفائل کو تبدیل کرنے کا سبب بنتے ہیں۔ سگنلنگ راستوں کا حتمی اثر جینوں کے پروموٹر پر پڑتا ہے، جس میں ٹرانسکرپشنل اسٹارٹ سائٹ کے اوپر کی طرف یا نیچے کی طرف عناصر شامل ہو سکتے ہیں، جن میں سے کچھ نقل شدہ جین کے اندر ہی موجود ہو سکتے ہیں۔ متعدد سگنلنگ مالیکیول پرلیکن کے اظہار میں تبدیلیوں کو متاثر کر سکتے ہیں جن میں ٹرانسفارمنگ گروتھ فیکٹر-بیٹا (ٹی جی ایف-β)، انٹرلیوکن (آئی ایل) اور ویسکولر اینڈوتھیلیل گروتھ فیکٹر (وی ای جی ایف) مالیکیولز کے خاندان شامل ہیں۔ ٹرانسکرپشنل ایکٹیویشن پرلیکن پروموٹر ریجن کے اپ اسٹریم 2.5 کلو بیس کا مطالعہ مختلف ہسٹولوجیکل ماخذ کی سیل لائنوں میں سی اے ٹی ایکٹیویشن کے ذریعے کیا گیا۔ اس مطالعے نے یہ نتیجہ اخذ کیا کہ پروموٹر میں ٹرانسکرپشنل اسٹارٹ سائٹ کے اوپر کی طرف صرف 285 بیس جوڑوں میں ایک ٹی جی ایف-β ذمہ دار عنصر موجود ہے۔ اس نتیجے کی تصدیق انسانی بڑی آنت کے کارسنوما خلیوں جیسے بافتوں میں ہوئی ہے۔ اور سیل کلچر میڈیم میں سائٹوکائن کے ان وٹرو اضافے کے ذریعے میورین یوٹرین اپیتھیلیم۔ ٹی جی ایف-β1 سگنلنگ کے وٹرو مطالعے اور پرلیکن اظہار پر اس کے اثرات مختلف خلیوں کی اقسام میں مختلف نتائج حاصل کر سکتے ہیں۔ کلچر میں انسانی کورونری ہموار پٹھوں کے خلیوں میں، ٹی جی ایف-β1 سگنلنگ نے پرلیکن کے اظہار پر کوئی اثر نہیں دکھایا حالانکہ اس نے دیگر میٹرکس اجزاء کو ریگولیٹ کیا۔ ویوو میں پرلیکن کے متحرک ضابطے کا مظاہرہ اور ایکسٹرا سیلولر سگنلنگ راستوں کے ذریعے اس کا کنٹرول ترقی میں پروٹین کے کردار کے بارے میں ہماری سمجھ کے لیے اہم ہے۔ اس مقصد کے لیے، لینس کے لیے مخصوص αA-کرسٹلین پروموٹر کے تحت پورسین TGF-β1 کا اظہار کرنے والی ایک ٹرانسجینک ماؤس لائن بنائی گئی تھی اور پھر اسی طرح کی ایک اور لائن بنائی گئی تھی لیکن βb-کرسٹلین پروموٹر کے ذریعے چلنے والے جین کے ساتھ، جو دوسرے لینس کے لیے مخصوص جین سے مطابقت رکھتی ہے۔ اس ترقیاتی طور پر متحرک ٹشو نے اظہار پر ٹی جی ایف-β1 کے ساتھ پرلیکن سمیت ایکسٹرا سیلولر میٹرکس اجزاء کی سنگین غلط ضابطے کو ظاہر کیا۔ کارنیل میسینکائم میں پرلیکن، فائبرونیکٹن اور تھرومبوسپونڈن-1 کے اظہار میں بہت زیادہ اضافے کی وجہ سے دونوں ٹرانسجینک لائنوں میں ابتدائی نشوونما میں کارنیل اوپیسیفیکیشن ہوا۔ اثر βB-1 کرسٹلین پروموٹر سے چلنے والی لائن میں زیادہ واضح تھا۔ سوزش سائٹوکائنز کا آئی ایل خاندان بھی پی ایل این ٹرانسکرپٹ کو اپ ریگولیٹ کرتا ہے۔ الزائمر کی تختی کی تشکیل کے ماؤس ماڈل میں، آئی ایل-1-الفا دماغ کی چوٹ کے جواب میں پرلیکن کے اظہار میں اضافے کو متاثر کرتا ہے۔ کلچر میں انسانی جنجیول فائبربلاسٹس کے آئی ایل-4 علاج سے پرلیکن سمیت مختلف ہیپیرن سلفیٹ پروٹیوگلیکنز کی پیداوار میں اضافہ ہوا۔ آئی ایل-1-بیٹا کے ساتھ وٹرو میں انسانی پھیپھڑوں کے فائبربلاسٹ کے علاج سے پرلیکن کی پیداوار میں کوئی خاص اضافہ نہیں ہوا۔ پی ایل این ٹرانسکرپشن کو بڑھانے کے لیے دکھایا گیا ایک اور سگنلنگ راستہ وی ای جی ایف راستہ ہے۔ کلچر میں انسانی دماغ کے مائکرو ویسکولر اینڈوتھیلیل خلیوں کا وی ای جی ایف 165 علاج پی ایل این ٹرانسکرپشن میں اضافے کو متحرک کرتا ہے۔ یہ مالیکیول وی ای جی ایف ریسیپٹر-2 (وی جی ایف آر 2) کا لگینڈ ہے، اور ایسا لگتا ہے کہ یہ وی ای جی ایف 165 ردعمل پرلیکن اپ ریگولیشن کے لیے مخصوص ہے، جس کی وجہ سے ایک مثبت فیڈ بیک لوپ ہوتا ہے جس میں فائبربلاسٹک گروتھ فیکٹر (ایف جی ایف)، ایف جی ایف ریسیپٹر (ایف جی ایف آر) اور وی ای جی ایف آر 2 شامل ہوتے ہیں۔ وی ای جی ایف 165 کے ذریعہ یہ مائکرو ویسکولر مخصوص ضابطہ اس امکان کو بڑھاتا ہے کہ پرلیکن کا اینٹی کوگولنٹ فنکشن دماغی اینڈوتھیلیا میں نقصان پر قابو پانے کے عمل کا ایک حصہ ہے۔ پروٹین کینیز سی سگنلنگ پیرلیکن سمیت بعض پروٹیوگلیکنز کے ٹرانسکرپشن اور ترجمہ کو بہتر بنانے کے لیے ممکنہ طور پر ذمہ دار ہے۔ جب ہیلا خلیوں کے اینڈوسیٹک راستے کو میوٹینٹ ڈائنامین کے زیادہ اظہار سے روکا جاتا ہے، تو پروٹین کنیز سی چالو ہوتا ہے اور اس کے بعد پرلیکن پیغام اور پروٹین میں اضافہ ہوتا ہے۔ اس کے برعکس، ہائپرگلیسیمیا کے جواب میں پیرلیکن کی معمول کی کمی پی کے سی-α کے لیے منفی چوہوں میں ختم ہو جاتی ہے۔ ٹرانسکرپشنل ڈاؤن ریگولیشن انٹرفیرون-γ سگنلنگ پیریکن جین کے ٹرانسکرپشنل جبر میں ثالثی کرتا ہے۔ یہ سب سے پہلے بڑی آنت کے کینسر کے خلیوں کی لکیروں میں، اور اس کے بعد دیگر بافتوں کی ابتداء کی خلیوں کی لکیروں میں دکھایا گیا تھا، لیکن ہر معاملے میں سگنل کے اثر انداز ہونے کے لیے برقرار STAT1 ٹرانسکرپشن فیکٹر کی ضرورت تھی۔ اس کی وجہ سے تفتیش کاروں کو یقین ہو گیا کہ ٹرانسکرپشن فیکٹر STAT1 ڈسٹل ریجن میں پی ایل این پروموٹر کے ساتھ تعامل کر رہا تھا، جو ٹرانسکرپشن اسٹارٹ سائٹ کے اوپر کی طرف 660 بیس جوڑوں میں مقامی تھا۔ بلاسٹوسسٹ-اسٹیج میورین ایمبریوز کا انٹرفیرون-γ علاج ٹروپیکٹوڈرم پر پرلیکن کے اظہار کے نقصان کا باعث بنتا ہے، اور اس طرح سیل کلچر میں ایک جنین کی مورفولوجی اور فینوٹائپ، جو تجویز کرتا ہے کہ یہ انٹرفیرون-γ علاج شدہ بلاسٹوسسٹ امپلانٹیشن میں عیب دار ہوں گے۔ ممکنہ طور پر پرلیکن اظہار کا نقصان ایس ٹی اے ٹی 1 ٹرانسکرپشن فیکٹر سرگرمی کے ذریعے ٹرانسکرپشن کو کم کرنے سے ہوتا ہے جیسا کہ پہلے دکھایا گیا ہے۔ یہ ان وٹرو نتائج لازمی طور پر عام فزیالوجیکل انٹرفیرون-γ کے ارتکاز کے نمائندے نہیں ہیں، اور نہ ہی سائٹوکائن عام طور پر وسیع پیمانے پر ظاہر ہوتا ہے بلکہ اس کے بجائے بہت ہی مخصوص ترقیاتی ٹائم پوائنٹس پر ہوتا ہے۔ نوٹ کرنا ضروری ہے کہ پرلیکن کے اظہار کو انٹرفیرون-γ جیسے بیرونی سائٹوکائن کے ساتھ علاج کے ذریعے کم کیا جا سکتا ہے، اور اگر سائٹوکائن کے اظہار میں جسمانی طور پر غیر معمولی اضافہ ہوتا ہے تو یہ امپلانٹیشن میں مداخلت کر سکتا ہے۔ خلیوں کے تناؤ اور اظہار پر ان کا اثر مکینیکل اور کیمیائی تناؤ تہہ خانے کی جھلیوں یا ان خلیوں کو نقصان پہنچا سکتے ہیں جن کی وہ حمایت کرتے ہیں۔ یہ خلیوں کے جین کے اظہار کے خاکے کو متاثر کر سکتا ہے، خاص طور پر ان کے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس میں، جو اکثر خلیوں کو جسمانی مدد اور کیمیائی رکاوٹ فراہم کرتا ہے۔ ہائپوکسیا، سوزش، مکینیکل اور کیمیائی تناؤ کی جانچ کی گئی ہے کہ ان کا پرلیکن کے اظہار سے کیا تعلق ہے۔ ہائپوکسیا ایک ایسی حالت ہے جو بیماری کی حالتوں میں اور چوٹ کے دوران پائی جاتی ہے اور اکثر اس کے نتیجے میں اینڈوتھیلیل سیل کے پھیلاؤ کی کمی ہوتی ہے۔ یہ اور اینڈوریپیلن کے طور پر پرلیکن کے کردار نے ہائپوکسک حالات کے دوران اینڈوتھیلیل خلیوں کے ذریعہ پرلیکن کے اظہار کے ضابطے کی نوعیت کے بارے میں ایک مطالعہ کو جنم دیا۔ ہائپوکسک حالات کے تحت، اس مطالعے سے پتہ چلا ہے کہ چوہے کے کارڈیک مائکرو ویسکولر اینڈوتھیلیل خلیوں کے ذریعہ پرلیکن کے اظہار میں عام کنٹرول کے مقابلے میں 61 فیصد کمی واقع ہوئی ہے۔ اس مقالے کا استدلال یہ ہے کہ پرلیکن ڈاؤن ریگولیشن ایف اے کے ایکٹیویشن کے نقصان کا باعث بنتا ہے اور اس طرح ای آر کے سگنلنگ کم ہوتی ہے، جس سے خلیوں کے پھیلاؤ میں کمی آتی ہے۔ یہ متضاد معلوم ہوتا ہے کہ اینڈوتھیلیل خلیات پرلیکن اور اس کے اینڈوریپیلن ذیلی یونٹ کے نقصان کی وجہ سے کم تیزی سے پھیل جائیں گے۔ یہ ہو سکتا ہے کہ ان اینڈو تھیلیل خلیوں نے ہائپوکسک حالات کے جواب میں بہت سے جینوں کی نقل کو محض کم کر دیا ہو۔ ایک اور تحقیق میں، ہائپوکسیا کی وجہ سے اپوپٹوسس اور خلیوں کی موت سے وابستہ جینوں کو شامل کیا گیا، لیکن جینوں کا جبر کسی مخصوص راستے سے وابستہ پروٹین تک محدود نہیں تھا۔ جب T84 آنتوں کے اپیتھیلیل خلیات کو 24 گھنٹوں کے لیے ہائپوکسک حالات کا سامنا کرنا پڑتا ہے تو پرلیکن ایم آر این اے اور پروٹین کی پیداوار میں نمایاں اضافہ ہوتا ہے۔ وہ اس حقیقت سے متعلق ہیں کہ ہائپوکسیا کے جواب میں بلند ہونے والے بہت سے جین اپنے پروموٹر میں سی اے ایم پی رسپانس عنصر (سی آر ای) پر مشتمل ہوتے ہیں، جیسا کہ پی ایل این کرتا ہے۔ 2007 کے مطالعے سے اینڈوتھیلیل خلیوں اور ان تجربات میں زیر مطالعہ ایپیٹیلیل سیل کے درمیان یہ فرق اس بات کی نشاندہی کرتا ہے کہ مختلف خلیوں کی اقسام میں پرلیکن کے ریگولیٹری میکانزم کتنے مختلف ہو سکتے ہیں۔ دماغ پر بیٹا امیلائڈ تختیوں کی نشوونما الزائمر کی بیماری کے آغاز سے وابستہ ہے۔ یہ تختیاں جمع ہونے والے علاقوں میں سوزش کی مستقل حالت کو جنم دیتی ہیں، جس کی وجہ سے سوزش سے متعلق جین کی کچھ مصنوعات کا اظہار ہوتا ہے، جن میں سے کچھ دماغ کے تناظر میں سوزش کو برقرار رکھتی ہیں۔ جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے، پرلیکن کے اظہار کی سطح پر دماغی سوزش کے اثرات کی تحقیقات کے لیے، چوہوں کے دماغوں میں سوئی کے وار کے زخم پیدا ہوئے، اور سوزش اور بحالی کے متغیر ادوار کے بعد، ایم آر این اے اور پروٹین کی سطح کا اندازہ ان سیٹو ہائبرڈائزیشن اور امیونوسٹیننگ کے ذریعے کیا گیا۔ ہپپوکیمپس میں پرلیکن کی سطح میں اضافہ کیا گیا تھا لیکن شفا یابی کی مدت کے دوران اسٹریٹم میں نہیں، آئی ایل 1-الفا اظہار کے ساتھ۔ پرلیکن اظہار کا سراغ ہپپوکیمپس اور ایسٹروسائٹس میں مائکروگلیل خلیوں سے لگایا گیا تھا۔ بیٹا امیلوئڈ پلیک کی نسل میں پرلیکن کے لیے اس کردار کی حمایت ایک سابقہ مطالعہ سے ہوتی ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ چوہے کے دماغ کے پرلیکن اور بیٹا امیلوئڈ علاج سے سینائل پلیکس کی تشکیل ہوتی ہے، جبکہ صرف بیٹا امیلوئڈ کے ساتھ علاج کا ایک جیسا اثر نہیں ہوتا تھا۔ نامیاتی سطح پر، مکینیکل تناؤ کا ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کی سالمیت پر گہرا اثر پڑتا ہے اور ممکنہ طور پر ٹشو اسٹروما اور بیسمنٹ جھلی میں ای سی ایم کی مرمت اور تجدید کے لیے متعدد ای سی ایم جینوں کو شامل کرنے کا سبب بنتا ہے۔ ایک مطالعہ نے مائیکرو ارے اپروچ اور سیل اسٹریچنگ سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے عالمی جین ٹرانسکرپشن پر دباؤ کے ان وٹرو اثرات کا جائزہ لیا جس کا مقصد آپٹک اعصاب کے سر کے لمینا کریبوسا (کنیکٹو ٹشو) میں انٹراوکولر دباؤ کی تقلید کرنا ہے۔ ان کے نتائج یہ تھے کہ پرلیکن اور کئی دیگر پروٹیوگلیکنز کو اسٹریچنگ محرک کے جواب میں ریگولیٹ کیا گیا تھا۔ ٹی جی ایف-β2 اور وی ای جی ایف کو بھی متاثر کیا گیا، جو ممکنہ طور پر پیریکن ٹرانسکرپٹ اور پروٹین کو بہتر بنانے میں معاون تھے۔ یہ دکھایا گیا ہے کہ آٹوکرائن ٹی جی ایف-β سگنلنگ اینڈوتھیلیل خلیوں میں وٹرو میں مکینیکل تناؤ کا معاوضہ نتیجہ ہے۔ شریانوں کے دباؤ کی نقل کرنے کے لیے اسی طرح کے سیل اسٹریچنگ میکانزم کا استعمال کرتے ہوئے، اس تحقیقات سے پتہ چلا کہ مکینیکل تناؤ کے جواب میں پرلیکن کی پیداوار میں اضافہ ہوا۔ یہ پی 38 اور ای آر کے کے ساتھ مثبت فیڈ بیک لوپ میں ٹی جی ایف-β آٹوکرائن سگنلنگ پر منحصر ہے۔ یہ اینڈو تھیلیل سیل وی ایس ایم سی گروتھ انفیکٹرز کی پیداوار میں اضافہ کرتا ہے۔ ہیپرین) وی ایس ایم سی میں الٹا ہوتا ہے، جہاں مکینیکل تناؤ پھیلاؤ کو جنم دیتا ہے۔ کلچر میں وی ایس ایم سی خلیوں کی اخترتی پرلیکن اپ ریگولیشن کا باعث بنتی ہے، جس میں ہیپیرن سلفیٹ زنجیروں کی سلفیشن میں نمایاں اضافہ ہوتا ہے۔ یہ ان اعداد و شمار کے برعکس نہیں ہے جہاں چوہے وی ایس ایم سی میں e19 سے آگے پرلیکن کا اظہار مستقل ہے، جس سے پتہ چلتا ہے کہ پرلیکن وی ایس ایم سی کے لیے اینٹی پرولیفریٹو کردار ادا کرتا ہے۔ اس صورت میں، ایسا لگتا ہے کہ مالیکیول کا سگنلنگ فنکشن آپریٹو اپ ریگولیٹڈ فیکٹر ہے، خاص طور پر ہیپیرن سلفیٹ زنجیروں کے سلفیشن میں اضافے کی وجہ سے۔ اعضاء کو کیمیائی نقصان نہ صرف خلیے کی جینیاتی اور مکینیکل سالمیت بلکہ ٹشو کے ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کو بھی متاثر کر سکتا ہے۔ جگر کے خلیوں پر کیمیائی نقصان کے اثرات کا مطالعہ کرنے کے لیے، وسٹار چوہوں کو قربانی دینے سے پہلے 48 گھنٹے تک کاربن ٹیٹراکلورائڈ سے علاج کیا گیا۔ سی سی ایل 4 کے ساتھ علاج سے پہلے، پیرلیکن کا داغ جگر کی پت کی نالی اور سینوسائڈل خون کی وریدوں تک محدود تھا۔ علاج کے بعد، نیکروسس کے علاقوں میں پرلیکن کا داغ شدید تھا۔ یہ خراب ٹشو کو دوبارہ پیدا کرنے کی کوشش کے طور پر جگر کی کیپلرائزیشن میں اضافے کی وجہ سے ہو سکتا ہے۔ اسی طرح کی دریافت چوہوں کے ایسیٹامینوفن علاج میں دکھائی گئی تھی، جہاں جگر کے نیکروٹک زخموں میں پرلیکن اور دیگر میٹرکس اجزاء کا بہت زیادہ اظہار کیا گیا تھا۔ سیل کلچر میں اظہار 2 ڈی پلاسٹک پلیٹوں پر سیل کلچر کے ان وٹرو نتائج کی صداقت کے خلاف ایک شاندار دلیل یہ ہے کہ ماحول حیاتیات میں موجود خلیوں کی درست عکاسی نہیں کرتا ہے۔ خلیوں کے لیے سہاروں یا ماحول کے طور پر مختلف قسم کے سبسٹریٹس کا استعمال کرتے ہوئے تھری ڈی سیل کلچر تیار کرکے اس مسئلے سے نمٹا جا رہا ہے۔ اس قسم کی ترتیب میں ای سی ایم جینوں کا اظہار مقامی اظہار پروفائل سے زیادہ قریب سے ملتا جلتا ہونے کی صلاحیت رکھتا ہے۔ تھری ڈی سکیفولڈ، وہ ڈھانچے جن پر کلچر شدہ خلیات بڑھتے ہیں، دوسرے خلیوں پر مشتمل ہو سکتے ہیں، یعنی۔ کوکلچرز، مصنوعی پولیمر جو خلیوں کے قدرتی ماحول کی نقل کرتے ہیں یا صاف شدہ ای سی ایم جیسے میٹرگل، اور ان تینوں اجزاء کا کوئی بھی مرکب۔ کیریٹنوسائٹس اور سٹروما کے درمیان جلد کی نشوونما اور بیسال جھلی کی تشکیل کا مطالعہ کرنے کے لیے ایسا ہی ایک نظام تیار کیا گیا ہے۔ اس نظام کا استعمال اسٹروما میں فائبر بلاسٹ (اس معاملے میں ٹائپ-I کولیجن جیل میں فائبر بلاسٹ) اور جیل کے اوپر اگائے جانے والے کیریٹنوسائٹس کے درمیان تہہ خانے کی جھلی کی نشوونما کو واضح کرنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ پرلیکن اظہار اور اس طرح تہہ خانے کی جھلی کی پختگی اس نظام میں کولیجن IV اور لیمینن γ1 سلسلہ کے نیڈوجن کراس لنکنگ پر منحصر ہے۔ یہ اثر ترقی پذیر ٹشو میں ہیمیڈسموسوم کی کمی کا باعث بھی بنا۔ غیر منظم ہائیڈریٹڈ کولیجن I جیل کا استعمال کرتے ہوئے ایک اور نظام کا استعمال یہ ظاہر کرنے کے لیے کیا گیا ہے کہ بنیادی انسانی کارنیل فائبر بلاسٹ آخر کار جیل پر حملہ کریں گے اور کولیجن ٹائپ I اور پرلیکن کے ساتھ ساتھ کئی دیگر سلفیٹڈ میٹرکس گلائکوپروٹینز پر مشتمل ایک میٹرکس بنائیں گے۔ یہ ان ویو کارنیل فائبرو بلاسٹ کے ترقیاتی پروگرام اور چوٹ کے ردعمل کی نقل کرتا ہے۔ تھری ڈی سیل کلچر سسٹم بنانے کے طویل مدتی اہداف میں سے ایک ٹشوز کو انجینئر کرنا ہے جسے کئی قسم کی بیماریوں کے مریضوں کے متبادل کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ٹشو انجینئرڈ ہارٹ والوز میں جو مییوفائبرو بلاسٹس کو کولیجن ٹائپ I پر بیج لگانے کے بعد اینڈوتھیلیل خلیوں کے بعد بنائے گئے ہیں، ہیپیرن سلفیٹ پروٹیوگلیکن کے اظہار کی تصدیق کی گئی ہے، حالانکہ ان بافتوں میں سنڈیکن اور پرلیکن کے درمیان کوئی فرق نہیں کیا گیا ہے۔ ایک اور طریقہ کار جسے ٹشو انجینئرنگ کے ذریعے ممکن بنایا جا سکتا ہے وہ ہے کیراٹوپیٹیلیوپلاسٹی۔ ٹرانسپلانٹڈ ٹشو کو برقرار رہنا چاہیے، جس کے لیے پہلے سے تشکیل شدہ تہہ خانے کی جھلی کی ضرورت ہوتی ہے۔ کولیجن جیل نے کلچر میں کارنیل ایپیٹیلیل خلیوں کے ذریعے ایک مکمل تہہ خانے کی جھلی کی تشکیل کو فروغ دیا ہے۔ پرلیکن کلچر میں خلیوں کو چڑھانے کے لیے ایک سہارے کے طور پر کام کرنے کا وعدہ بھی رکھتا ہے۔ انسانی سلیوری گلینڈ ڈکٹل اور ایسینار خلیات کو بائیو ایکٹیو پیپٹائڈ پر کامیابی کے ساتھ اگایا گیا ہے جس میں پیریکن پروٹین کے ڈومین IV میں ایک ترتیب دہرائی گئی ہے۔ یہ خلیے کلچر میں مکمل تہہ خانے کی جھلیوں کے ساتھ مقامی غدود اور تنگ جنکشن میں پائے جانے والے ڈھانچوں کی طرح ایکینی جیسے ڈھانچے کو دوبارہ پیدا کرتے ہیں۔ ڈیزیز ایسوسی ایشن کینسر جبکہ پرلیکن دبانا کالعدم چوہوں میں ٹیومر کی نشوونما اور نیووسکولرائزیشن کی خاطر خواہ روک تھام کا سبب بنتا ہے، اس کے برعکس، جب پرلیکن-نل خلیوں کو عریاں چوہوں میں انجکشن کیا جاتا ہے تو کنٹرول کے مقابلے میں ٹیومر کی نشوونما میں اضافہ دیکھا جاتا ہے۔ کینسر کی نشوونما اور پیتھوجینسیس کا غیر سیلولر میٹرکس کی ساخت سے گہرا تعلق ہے اور کینسر میں پرلیکن اور دیگر ای سی ایم مالیکیولز کے کردار کا مطالعہ بڑی تعداد میں لیبارٹریوں کے ذریعے کیا جا رہا ہے۔ چونکہ بیسمنٹ جھلی کارسنوما خلیوں کو نکالنے کی راہ میں پہلی رکاوٹ ہے، اس عمل میں پرلیکن کے افعال متعدد ہیں۔ کارسنوما سیل لائنوں میں پرلیکن کے اظہار کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال ہونے والا ایک ماڈل سسٹم میوو/70 ڈبلیو میلانوما میٹاسٹیٹک پروگریشن سیل لائنوں کا ہے۔ میو خلیات خصوصیت کے لحاظ سے ان کی کلونل مختلف قسم کی سیل لائن 70 ڈبلیو سے کم حملہ آور ہوتے ہیں۔ ایک لیب نے 27 ناگوار میلانوما میں پرلیکن کے اظہار کا مطالعہ کیا اور 27 میں سے 26 نمونوں نے اسی مریضوں کے عام بافتوں کے مقابلے میں پرلیکن کے پیغام میں نمایاں اضافہ دکھایا۔ اس کے بعد انہوں نے یہ مطالعہ کرنے کے لیے می وو اور 70 ڈبلیو سیل لائنوں کا استعمال کیا کہ آیا نیوروٹروفنز کے ساتھ علاج کے دوران پرلیکن کا اظہار تبدیل ہوا ہے، جو میٹرگل ان وٹرو کے ذریعے خلیوں کے حملے کو متحرک کر سکتا ہے۔ زیادہ حملہ آور 70 ڈبلیو خلیات نے نیوروٹروفنس کے ساتھ محرک کے دس منٹ بعد پرلیکن پیغام کا اظہار کرنا شروع کر دیا، اور میو خلیات علاج سے قطع نظر کوئی پی ایل این پیغام پیدا نہیں کرتے تھے۔ اس مطالعے میں اس حقیقت پر خصوصی توجہ دی گئی کہ پرلیکن اپ ریگولیشن ہیپرانیز سے پہلے بھی ہوا، جو اخراج کے عمل میں شامل ایک ضروری پروٹین ہے۔ دوسرے کینسروں کی طرح بیضہ دانی کے کینسر میں بھی بیماری کی ترقی کے دوران پرلیکن کا اظہار مختلف انداز میں ہوتا ہے۔ پیریکن سٹیننگ بیضہ دانی کے تہہ خانے کی جھلی میں ختم ہو جاتی ہے جس کی خلاف ورزی ایک ناگوار اڈینوکارسنوما نے کی ہے، جو کہ عام بیضہ دانی کے تہہ خانے کی جھلیوں میں پیریکن سٹیننگ کے برعکس ہے اور جن میں سودمند ٹیومر ہوتے ہیں، جہاں تہہ خانے کی جھلی یکساں ہوتی ہے اور ساخت میں دوسرے عام بافتوں سے بہت ملتی جلتی ہوتی ہے۔ یہ دوسرے نتائج سے مطابقت رکھتا ہے جو پیلوک لمف نوڈس میں پھیلنے والے ناگوار سروائیکل کینسر سے متاثرہ تہہ خانے کی جھلیوں میں پرلیکن کے نقصان کو ظاہر کرتا ہے، جو کہ اسی طرح کے سروائیکل کارسنوما کے حملے کے ساتھ ہیپرانیز ایم آر این اے کے اظہار کی بلند سطح کے ارتباط کی وجہ سے کوئی تعجب کی بات نہیں ہے۔ اس کے برعکس، چوہوں میں انجکشن کی گئی لافانی ماؤس ایپیٹیلیل سیل لائن آر ٹی 101 کی ٹیومر کی تشکیل ماؤس کے خلیوں کے ذریعے پرلیکن کے اظہار پر منحصر تھی نہ کہ اینڈوجینس چوہے پرلیکن کی موجودگی پر۔ اینٹی سینس کے ذریعے گرائے گئے پرلیکن والے آر ٹی 101 خلیوں نے اس نظام میں ٹیومر کی تشکیل نہیں دکھائی، تاہم اینٹی سینس پرلیکن کا اظہار کرنے والے خلیات اور ماؤس پرلیکن کے ڈومین I، II، اور III کو انکوڈنگ کرنے والے ریکومبیننٹ ڈھانچے نے درحقیقت ٹیومر کی تشکیل کو ظاہر کیا۔ اس طرح اس نظام میں یہ ظاہر ہوتا ہے کہ ٹیومر جمع کرنے کے لیے پرلیکن کا ٹیومر سیل کا اظہار ضروری ہے۔ کینسر کی منتقلی میں پرلیکنز کے کردار کو بہتر طور پر سمجھنے کے لیے بینین ٹیومر خلیوں اور عام بافتوں کے مقابلے میں جی اے جی چین یا ناگوار ٹیومر خلیوں کے ذریعے بنیادی پروٹین میں ترمیم کے بارے میں مزید تحقیق معلوماتی ہوگی۔ کئی لیبارٹریوں نے ان وٹرو ٹیومر سیل انجیوجینیسیس کا مطالعہ کیا ہے جس میں پرلیکن پیغام کے لیے اینٹی سینس تعمیرات کا استعمال کیا گیا ہے۔ مکمل لمبائی ریورس تکمیل سی ڈی این اے، جو ایک مضبوط پروموٹر کے ذریعے چلایا جاتا ہے، پرلیکن اظہار کو ختم کرنے کے لیے مختلف خلیوں کی اقسام میں منتقل کیا جاتا ہے۔ بڑی آنت کے کارسنوما خلیوں میں اینٹی سینس پیریکن ٹرانسلیشن کو روکتا ہے، جس کی وجہ سے ٹیومر کی نشوونما اور انجیوجینیسیس میں کمی واقع ہوتی ہے۔ پھیلاؤ میں اسی طرح کی وٹرو میں کمی این آئی ایچ 3 ٹی 3 خلیوں اور انسانی میلانوما سیل لائن میں ہوئی جو اینٹی سینس پرلیکن ایم آر این اے کا اظہار کرتی ہے۔ کاپوسی کی سارکوما سیل لائنوں کے ساتھ وٹرو میں پائے جانے والے نتائج سے پتہ چلتا ہے کہ اینٹی سینس کی تعمیر کے ساتھ ٹرانسفیکشن کے ذریعے پرلیکن کے نقصان سے اس انتہائی میٹاسٹیٹک سیل کی قسم کے پھیلاؤ اور نقل مکانی میں کمی واقع ہوئی۔ یہ نتائج اسی کاپوسی سارکوما لائنوں کے ساتھ ویو کے نتائج کے برعکس ہیں، جو ظاہر کرتے ہیں کہ پرلیکن میں کمی انجیوجینیسیس میں اضافے کا باعث بنتی ہے، جو منتقلی میں سہولت فراہم کرتی ہے اور اس طرح ٹیومر گریڈ میں اضافے سے وابستہ ہے۔ فائبروسرکوما سیل لائنوں میں پرلیکن کے اینٹی سینس ناک ڈاؤن کی وجہ سے وٹرو اور ویو دونوں میں نشوونما اور نقل مکانی میں اضافہ ہوا۔ ویو میں زیادہ سے زیادہ ٹیومرجینسیس کے ان نتائج کی تائید اعداد و شمار سے ہوتی ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ پرلیکن پروٹین کا سی-ٹرمینس ایک اینڈوسٹیٹک ماڈیول کے طور پر کام کرتا ہے جسے اب اینڈوریپیلن کہا جاتا ہے۔ پرلیکن ترجمہ کی سطح کو کم کرنے میں استعمال کے لیے ایک رائبوزیم کی تعمیر بنائی گئی تھی۔ اس رائبوزیم کو پرلیکن پروٹین کے سیکوینس کوڈنگ ڈومین I پر نشانہ بنایا گیا تھا۔ اس نے پروسٹیٹ کینسر سیل لائن C42B میں پرلیکن کے اظہار کو 80 فیصد تک کم کر دیا۔ پہلے زیر بحث مطالعات کے برعکس ان خلیوں نے ایتھمک چوہوں میں انجکشن لگانے پر اپنے والدین کے خلیوں کے مقابلے میں چھوٹے ٹیومر پیدا کیے۔ حملے کے لیے نتائج میں اس عدم مساوات کا کیا مطلب ہے یہ معلوم نہیں ہے، حالانکہ یہ سچ ہے کہ پرلیکن میسینکائمل ٹشو میں ایکسٹرا سیلولر میٹرکس کا حصہ ہے، اور ایپیٹیلیل-میسینکائمل ٹرانزیشن (ای ایم ٹی) سے گزرنے والے خلیات اپنے ای ایم ٹی پروگرامنگ کے حصے کے طور پر پرلیکن کے اظہار کو بہتر بنا سکتے ہیں۔ ذیابیطس اور قلبی بیماری پرلیکن کی سطح بہت سی بیماریوں کی حالتوں میں کم ہو جاتی ہے-مثال کے طور پر ذیابیطس، ایٹروسکلروسیس اور گٹھیا۔ گلومیرولر فلٹریشن رکاوٹ کی دیکھ بھال میں پرلیکن کا اہم کردار ہے۔ گلومیرولر بیسمنٹ جھلی میں کم ہونے والے پرلیکن کا ذیابیطس البیومینوریا کی نشوونما میں مرکزی کردار ہے۔ پرلیکن کا اظہار بہت سے ایتھروجینک محرکات کے ذریعہ کم ہوتا ہے اور اس طرح پرلیکن کے بارے میں خیال کیا جاتا ہے کہ وہ ایٹروسکلروسیس میں حفاظتی کردار ادا کرتا ہے۔ ذیابیطس اور ایٹروسکلروسیس عام طور پر منسلک سنڈروم ہیں۔ ذیابیطس سے وابستہ 80 فیصد اموات میں کسی نہ کسی طرح کی ایٹروسکلروٹک پیچیدگی شامل ہوتی ہے، اور اینڈوتھیلیا کی تہہ خانے کی جھلی کو ایٹروجینک عمل میں شامل کیا گیا ہے۔ ذیابیطس کے مریضوں کی شریانوں میں اور ایتھروسکلروٹک زخموں کی نشوونما کرنے والی شریانوں میں ہیپیرن سلفیٹ کی ترکیب میں کمی دکھائی گئی۔ وہ طریقہ کار جس کے ذریعے ان زخموں میں ہیپیرن سلفیٹ کو کم کیا گیا تھا کچھ عرصے تک نامعلوم رہا۔ ایک نظریہ یہ بتاتا ہے کہ گردش میں زیادہ گلوکوز پرلیکن کے ساتھ جی اے جی چین کے منسلک میں کمی کا باعث بن سکتا ہے، لیکن ضروری نہیں کہ جی اے جی زنجیروں یا بنیادی پروٹین کے مصنوعی راستے میں تبدیلی ہو۔ اعلی گلوکوز میڈیم کے ساتھ انسانی آورٹک اینڈوتھیلیل خلیوں کے علاج کے بعد، خفیہ شدہ پرلیکن میں مجموعی طور پر جی اے جی چین کی کم شمولیت کے ساتھ کم سلفیٹ شامل ہوتا ہے۔ اگرچہ جی اے جی چین کی شمولیت میں اس کمی کا باعث بننے والے کسی سگنلنگ راستے کی نشاندہی نہیں کی گئی ہے، لیکن یہ تجویز کیا گیا ہے کہ پروٹین کے مجموعی گلائکوسیلیشن میں 30 فیصد نقصان کا مطلب ذیابیطس سے وابستہ ہائپرگلیسیمیا کے اس ماڈل میں پرلیکن پر تین ایچ ایس چینز میں سے ایک کا نقصان ہو سکتا ہے۔ یہ بھی نوٹ کیا گیا ہے کہ بنیادی پروٹین کی زنجیروں کے لیے داغ میں تبدیلی کے بغیر ایکسٹرا سیلولر ایچ ایس میں اسی طرح کی کمی ذیابیطس کے گردوں اور ہائی گلوکوز کے ساتھ علاج کیے جانے والے کلچر میں گردے کے خلیوں میں ہوتی ہے۔ ایتھروسکلروسیس اکثر کورونری دل کی بیماری اور دیگر قلبی حالات میں مجرم ہوتا ہے، اور پرلیکن پروٹین کا ایک بڑا مجموعہ اعلی درجے کی ایتھروسکلروٹک تختیوں کی علامت ہے۔ وی ایس ایم سی اس حالت میں پرلیکن کے پروڈیوسر ہیں، مطلب یہ ہے کہ اس حالت میں پرلیکن اپ ریگولیشن کے ذرائع کو سمجھنے پر کافی تحقیق پر توجہ دی گئی ہے۔ وی ایس ایم سیز کے ذریعے پرلیکن کے اظہار پر گردش کرنے والے نان اسٹیرفائیڈ فیٹی ایسڈز (ذیابیطس اور ایٹروجینیسیس کی علامتی) کے اثر کے ٹیسٹ میں، کنٹرول خلیوں کے مقابلے میں اظہار میں کوئی تبدیلی نہیں آئی۔ یہ دیگر تہہ خانے کی جھلی پروٹیوگلیکنز کے اظہار میں 2-10-گنا اضافے کے برعکس تھا۔ تھرومبن ایک اور مارکر ہے جو ایتھروجینیسیس اور پروکوگولیشن سے وابستہ ہے، اور یہ کلیکشن میں انسانی وی ایس ایم سی میں پرلیکن کی پیداوار کو منتخب طور پر بڑھاتا ہے لیکن دیگر پروٹیوگلیکنز کو نہیں۔ یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ یہ اثر صرف اس وقت دیکھا جاتا ہے جب وی ایس ایم سی سنگم تک پہنچتے ہیں، لیکن سنگم سے پہلے نہیں۔ یہ تصور پہلے مذکور مطالعات سے ملتا جلتا ہے جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ پرلیکن صرف وی ایس ایم سی کے ذریعے اس وقت تیار کیا جاتا ہے جب وہ نشوونما کے دوران پھیلاؤ بند کر دیتے ہیں۔ ایٹروسکلروٹک راستے میں ایک اور مارکر انجیوٹینسن II ہے، جو کلچر میں وی ایس ایم سی میں پرلیکن کے اظہار کو بھی منظم کرتا ہے۔ ایتھروسکلروسیس میں پرلیکن اظہار کی اہمیت کو دیکھتے ہوئے پرلیکن اظہار پر مبنی تھراپی کا امکان ہے اور تحقیق بالآخر اس سمت میں آگے بڑھ سکتی ہے۔ جینیاتی بیماری ایچ ایس پی جی 2 جین میں تغیرات، جو پرلیکن کو انکوڈ کرتا ہے، ڈسسیگمنٹل ڈسپلیسیا، سلور مین-ہینڈ میکر ٹائپ اور شوارٹز-جیمپیل سنڈروم کا سبب بنتا ہے۔ تعاملات پرلیکن کو ایف بی ایل این 2، ایف جی ایف 7، ایف جی ایف بی پی 1، اور ٹرانستھیریٹن کے ساتھ تعامل کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے۔ ایف جی ایف-2، ایف جی ایف-18 حوالہ جات بیرونی روابط گلائکوپروٹین پروٹیوگلیکنز ایکسٹرا سیلولر میٹرکس پروٹین