Simmons' citrate agar
سیمنس کا سائٹریٹ اگر سائٹریٹ کے استعمال کی بنیاد پر گرام منفی بیکٹیریا میں فرق کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، خاص طور پر خاندان اینٹروبیکٹیریاسی کے گاماپروٹوبیکٹیریا یا یہاں تک کہ ایک ہی نسل کی انواع کے درمیان فرق کرنے کے لیے۔ مثال کے طور پر، سالمونیلا اینٹیرائٹیڈس سیمنس کے اگر پر ایک مثبت (نیلا) نتیجہ دے گا اور اس طرح اسے دیگر سالمونیلا پرجاتیوں جیسے سالمونیلا ٹائیفی، سالمونیلا پلورم، اور سالمونیلا گیلینارم سے ممتاز کیا جائے گا، جو ایک منفی (سبز) نتیجہ دے گا۔ سیمنس اگر کے لیے ایک عام ایپلی کیشن فضلہ کی آلودگی کے لیے کھانے یا پانی کی نگرانی کرنا ہے، جس کی نشاندہی ای کولی جیسے اینٹروبیکٹیریلز آرڈر میں فضلہ کولیفارم کی موجودگی سے ہوتی ہے۔ ایک نمونے میں، ای کولی، جو سائٹریٹ منفی ہے، کو غیر فضلہ، سائٹریٹ مثبت کولیفارم سے ممتاز کیا جا سکتا ہے جو اکثر پانی، مٹی اور پودوں پر سیمنس اگر کا استعمال کرتے ہوئے پائے جاتے ہیں۔ مزید برآں، سیمنس کا اگر عام طور پر کولیفارم کی شناخت کے لیے آئی ایم وی آئی سی ٹیسٹ کے حصے کے طور پر استعمال ہوتا ہے۔ یہ ان حیاتیات کے انتخاب کے لیے مفید ہے جو سائٹریٹ کو اس کے اہم کاربن اور توانائی کے ذریعہ کے طور پر استعمال کرتے ہیں۔ یہ ایک متعین، انتخابی اور تفریقی ذریعہ ہے جو کسی جاندار کی سائٹریٹ کو واحد کاربن ذریعہ اور امونیم آئنوں کو واحد نائٹروجن ذریعہ کے طور پر استعمال کرنے کی صلاحیت کی جانچ کرتا ہے۔ سائٹریٹ کے کسی خلیے میں سائٹریٹ پرمیسیس کے ذریعے داخل ہونے کے بعد، سائٹریٹ لائز اسے ایسیٹیٹ اور آکسالوسیٹیٹ میں تقسیم کر دیتا ہے، جو مزید کاربن ڈائی آکسائیڈ اور پائروویٹ میں ٹوٹ جاتا ہے۔ خلیے کے پی ایچ پر منحصر ہے، پائروویٹ ایسیٹیٹ میں تبدیل ہو سکتا ہے اور 7 سے نیچے پی ایچ پر تشکیل دے سکتا ہے، یا ایسیٹیٹ + لیکٹیٹ + کاربن ڈائی آکسائیڈ اور ایسیٹوئن + کاربن ڈائی آکسائیڈ 7 اور اس سے نیچے پی ایچ پر تشکیل دے سکتا ہے۔ جب اگر میں پانی اور سوڈیم کاربونیٹ سائٹریٹ میٹابولزم میں خارج ہونے والے کاربن ڈائی آکسائیڈ کے ساتھ رد عمل ظاہر کرتے ہیں، تو الکلین مصنوعات بن جاتی ہیں اور پی ایچ کو بڑھاتی ہیں، جس کی وجہ سے اگر کا رنگ سبز سے نیلے رنگ میں بدل جاتا ہے۔ میڈیم میں سوڈیم کلورائڈ، سوڈیم سائٹریٹ، امونیم ڈائی ہائیڈروجن فاسفیٹ، ڈایپوٹاشیم فاسفیٹ، اور میگنیشیم سلفیٹ ہوتے ہیں۔ اس میں بروموتھیمول بلیو بھی ہوتا ہے، جو ایک پی ایچ اشارے ہے۔ بروموتھیمول نیلا 6.9 سے نیچے پی ایچ پر سبز ہوتا ہے، اور پھر 7.6 یا اس سے زیادہ پی ایچ پر نیلا ہو جاتا ہے۔ جیمز ایس سیمنس نے 1926 میں سیٹریٹ میٹابولزم سے آکسیڈیٹیو رد عمل کے نتیجے میں پی ایچ میں ہونے والی تبدیلیوں کا مشاہدہ کرنے کے لیے کوسر کے سیٹریٹ اگر میں پی ایچ اشارے کے طور پر 1.5 فیصد اگر اور بروموتھیمول بلیو شامل کر کے سیٹریٹ اگر تیار کیا تھا۔ کوسر کا اگر، جسے اسٹیورٹ اے کوسر نے 1923 میں تیار کیا تھا، ایک واضح، بے رنگ اگر ہے جو گندگی کے ذریعے بیکٹیریا کی نشوونما کا مشاہدہ کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ بے رنگ اگر کے ساتھ، منفی نتائج کو مثبت کے طور پر غلط تشریح کرنا زیادہ عام ہے، جسے سیمنس کے بروموتھیمول بلیو کو شامل کرنے کی ترمیم سے کم کیا جا سکتا ہے۔ ساخت میڈیم 1 لیٹر ڈیونائزڈ پانی میں پی ایچ 6.9 ± 0.2 (25 ڈگری سیلسیس پر) پر مندرجہ ذیل ساخت کے ساتھ تیار کیا جاتا ہے، تیاری اگرچہ اسے دیگر شکلوں میں استعمال کیا جا سکتا ہے (مثال کے طور پر، پیٹری پلیٹیں)، سیمنس کا سائٹریٹ اگر اکثر ٹیسٹ ٹیوبوں میں جھکاؤ یا ڈھلوانوں میں استعمال ہوتا ہے۔ پیٹری کے پکوانوں پر جھکاؤ کا استعمال کرنے کا ایک فائدہ آکسیجن تک رسائی ہے، جو سائٹریٹ میٹابولزم کے لیے ضروری ہے۔ سیمنس کا اگر سپلائرز سے تیار شدہ پاؤڈر یا سلینٹ کے طور پر خریدا جا سکتا ہے۔ گرم اگر کو ٹیسٹ ٹیوب میں شامل کرکے اور اسے جھکاؤ والے زاویے پر مضبوط ہونے کی اجازت دے کر ایک جھکاؤ تیار کیا جاتا ہے۔ خلیوں کو نمونے سے اگر میں منتقل کرنے کے لیے، نمونے سے ایک الگ کالونی کا انتخاب کرنے اور اگر کی سطح پر لکیر لگانے کے لیے ایک جراثیم سے پاک سوئی کا استعمال کیا جاتا ہے، جیسا کہ اگر پلیٹ پر کیا جاتا ہے۔ لائٹ سیل انوکولم تیار کرنا ضروری ہے کیونکہ انوکولم سے کاربن اور نائٹروجن پر مشتمل غذائی اجزاء یا مردہ بیکٹیریل سیل مادے کا لے جانا غلط مثبت نتائج پیدا کر سکتا ہے۔ خلیے کے نمونے کو منتقل کرنے کے لیے سوئی کا استعمال اضافی انوکولم کو لے جانے کو کم کر سکتا ہے۔ سمونس کے سائٹریٹ اگر پر اگنے والے تشریح حیاتیات سائٹریٹ کو واحد کاربن ماخذ کے طور پر استعمال کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں اور وہ درمیانے درجے میں امونیم نمک کو میٹابولائز کر سکتے ہیں (نشوونما کے لیے واحد نائٹروجن ذریعہ کے طور پر کام کر رہے ہیں)۔ سائٹریٹ کے استعمال کے نتیجے میں کاربونیٹس اور بائی کاربونیٹس بطور ضمنی مصنوعات پیدا ہوتے ہیں۔ سائٹریٹ کو خراب کرنے والے حیاتیات کو امونیا پیدا کرتے ہوئے امونیم نمکیات کا بھی استعمال کرنا چاہیے، اس طرح میڈیم کے پی ایچ میں اضافہ ہوتا ہے۔ پی ایچ میں اضافہ پھر بروموتھیمول نیلے اشارے میں رنگ کی تبدیلی کا سبب بنتا ہے، اور اسے نیلا کر دیتا ہے۔ غیر جانبدار حالات میں میڈیم سبز رنگ کا رہتا ہے۔ نیلے رنگ میں رنگ کی تبدیلی مفید ہے کیونکہ سیمنس کے سائٹریٹ اگر پر نمو اکثر محدود ہوتی ہے اور اگر یہ رنگ کی تبدیلی کے لیے نہ ہوتی تو اس کا مشاہدہ کرنا مشکل ہوتا۔ بعض اوقات، نیلے رنگ میں رنگ کی تبدیلی کے بغیر سیمنس کے سائٹریٹ اگر پر نمو کا پتہ لگانا ممکن ہے۔ یہ سائٹریٹ کے استعمال کے ٹیسٹ کے لیے منفی کے طور پر اسکور کیا جانا چاہیے۔ سالمونیلا اور پروویڈینشیا جیسے بیکٹیریا اس طرح کے ذرائع پر تیار ہوتے ہیں۔ حوالہ جات بیرونی روابط اے ایس ایم مائیکروبی لائبریری مضمون "سائٹریٹ ٹیسٹ پروٹوکول" مائیکرو بائیولوجیکل میڈیا