P-TEFb
مثبت نقل کی لمبائی کا عنصر، پی-ٹی ای ایف بی، ایک ملٹی پروٹین کمپلیکس ہے جو یوکرائٹس میں آر این اے پولیمریز II (پول II) کے ذریعے نقل کے ضابطے میں اہم کردار ادا کرتا ہے۔ آغاز کے فورا بعد پول II انسانی جینوں کی اکثریت پر پروموٹر پراکسیمل رکے ہوئے مقامات میں پھنس جاتا ہے (شکل 1)۔ پی-ٹی ای ایف بی ایک سائکلین پر منحصر کینیز ہے جو ڈی آر بی حساسیت پیدا کرنے والے عنصر (ڈی ایس آئی ایف) اور منفی طول و عرض عنصر (این ای ایل ایف) کے ساتھ ساتھ پول II کی بڑی ذیلی اکائی کے کاربوکسیل ٹرمینل ڈومین کو فاسفوریلیٹ کر سکتا ہے اور اس کی وجہ سے پیداواری طول و عرض میں منتقلی ہوتی ہے جس کی وجہ سے ایم آر این اے کی ترکیب ہوتی ہے۔ پی-ٹی ای ایف بی کو جزوی طور پر 7 ایس کے ایس این آر این پی کے ساتھ ایک قابل واپسی ایسوسی ایشن کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ پی-ٹی ای ایف بی انفیکٹرز ڈی آر بی یا فلاووپیڈرول کے ساتھ خلیوں کا علاج ایم آر این اے کی پیداوار میں کمی اور بالآخر خلیوں کی موت کا باعث بنتا ہے۔ ڈسکیوری، کمپوزیشن اور اسٹرکچر پی-ٹی ای ایف بی کو ڈروسفیلا خلیوں سے حاصل کردہ ان وٹرو ٹرانسکرپشن سسٹم کا استعمال کرتے ہوئے طویل رن آف ٹرانسکرپٹس کی نسل کے لیے درکار عنصر کے طور پر شناخت اور صاف کیا گیا تھا۔ یہ ایک سائکلین پر منحصر کنیز ہے جس میں اتپریرک ذیلی یونٹ، سی ڈی کے 9، اور ڈروسفیلا میں ایک ریگولیٹری ذیلی یونٹ، سائکلین ٹی ہوتا ہے۔ انسانوں میں پی-ٹی ای ایف بی کی متعدد شکلیں ہیں جن میں سی ڈی کے 9 اور کئی سائکلین ذیلی اکائیوں میں سے ایک، سائکلین ٹی 1، ٹی 2، اور کے پی-ٹی ای ایف بی بروموڈومین پروٹین بی آر ڈی 4 سمیت دیگر عوامل سے وابستہ ہیں، اور یہ پروٹین کے ایک بڑے کمپلیکس سے وابستہ پایا جاتا ہے جسے سپر ایلانگشن کمپلیکس کہا جاتا ہے۔ اہم بات یہ ہے کہ ایڈز وائرس کے لیے، ایچ آئی وی، پی-ٹی ای ایف بی کو ایچ آئی وی ٹی ٹی پروٹین کے ذریعے نشانہ بنایا جاتا ہے جو عام سیلولر پی-ٹی ای ایف بی کنٹرول کو نظرانداز کرتا ہے اور براہ راست پی-ٹی ای ایف بی کو ایچ آئی وی جینوم میں پروموٹر پراکسیمل پوزڈ پولیمریز میں لاتا ہے۔ سی ڈی کے 9 اور سائکلین ٹی 1 پر مشتمل انسانی پی-ٹی ای ایف بی کے ڈھانچے اور ایچ آئی وی ٹی۔ پی-ٹی ای ایف بی کمپلیکس کو ایکس رے کرسٹلگرافی کا استعمال کرتے ہوئے حل کیا گیا ہے۔ حل کی گئی پہلی ساخت سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ دونوں ذیلی اکائیوں کو ترتیب دیا گیا تھا جیسا کہ سائکلین پر منحصر دیگر کنیسوں میں پایا گیا ہے۔ اصل ڈھانچے کے لیے استعمال ہونے والی ذیلی اکائیوں میں نادانستہ طور پر تین امینو ایسڈ کے متبادل متعارف کرائے گئے تھے اور اس کے بعد صحیح ترتیب کا استعمال کرتے ہوئے ڈھانچے کے تعین نے فعال سائٹ کے ارد گرد چند اہم تبدیلیوں کے علاوہ اسی مجموعی ڈھانچے کا مظاہرہ کیا۔ پی-ٹی ای ایف بی سے منسلک ایچ آئی وی ٹی ٹی کی ساخت سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ وائرل پروٹین سائکلین ٹی 1 ذیلی یونٹ (شکل 2) کے ساتھ وسیع رابطے بناتا ہے۔ پی-ٹی ای ایف بی کا ضابطہ یوکرائیوٹک جین کے اظہار کو کنٹرول کرنے میں اس کے مرکزی کردار کی وجہ سے، پی-ٹی ای ایف بی ذیلی اکائیوں کو انکوڈنگ کرنے والے جینوں کی نقل، ذیلی اکائیوں کے ایم آر این اے کا ترجمہ، ذیلی اکائیوں کا کاروبار، اور 7 ایس کے ایس این آر این پی پر مشتمل ایک غیر معمولی طریقہ کار کے ذریعے بھی سخت ضابطے کے تابع ہے۔ جیسا کہ شکل 3 میں دکھایا گیا ہے کہ پی-ٹی ای ایف بی 7 ایس کے ایس این آر این پی میں ڈبل اسٹرینڈڈ آر این اے بائنڈنگ پروٹین ایچ ای ایکس آئی ایم (انسانوں میں ایچ ای ایکس آئی ایم 1 یا ایچ ای ایکس آئی ایم 2) کے ذریعے رکھا جاتا ہے۔ 7 ایس کے آر این اے یا کسی بھی ڈبل اسٹرینڈڈ آر این اے سے جڑا ہوا ہیکسیم پی-ٹی ای ایف بی سے جڑا ہوتا ہے اور کنیز کی سرگرمی کو روکتا ہے۔ دو دیگر پروٹین ہمیشہ 7 ایس کے آر این اے سے وابستہ پائے جاتے ہیں۔ میتھائل فاسفیس کیپنگ انزائم ایم ای پی سی ای 7 ایس کے آر این اے کے پہلے نیوکلیوٹائڈ کے گاما فاسفیٹ پر ایک میتھائل گروپ رکھتا ہے اور لا سے متعلق پروٹین ایل اے آر پی 7 ایس کے کے 3 'سرے سے جڑا ہوتا ہے۔ جب 7 ایس کے ایس این آر این پی سے پی-ٹی ای ایف بی نکالا جاتا ہے، تو 7 ایس کے آر این اے تشکیل میں تبدیلی سے گزرتا ہے، ایچ ای ایکس آئی ایم خارج ہوتا ہے اور ایچ این آر این پی ہٹائے گئے عوامل کی جگہ لے لیتے ہیں۔ پی-ٹی ای ایف بی کی دوبارہ ترتیب کے لیے آر این اے کی ایک اور ترتیب کی ضرورت ہوتی ہے، جس میں ایچ ای ایکس آئی ایم اور پھر پی-ٹی ای ایف بی کا بندھن ہوتا ہے۔ تیزی سے بڑھتے ہوئے خلیوں میں 7 ایس کے ایس این آر این پی پی-ٹی ای ایف بی کی اہم شکل ہے۔ جائزے کے لیے۔ حوالہ جات پروٹین