U937 (cell line)
U-937 خلیات بائیو میڈیکل ریسرچ میں استعمال ہونے والی ایک پرو مونوسیٹک ماڈل سیل لائن ہیں۔ انہیں 1974 میں ایک 37 سالہ مرد مریض کے ہسٹیوسیٹک لیمفوما سے الگ کیا گیا تھا۔ توسیع شدہ ثقافتوں کی نسبتا یکسانیت اور کم دیکھ بھال کی ضروریات کی وجہ سے ان خلیوں کو تب سے فگوسیٹ تفریق اور مختلف قسم کے خلیوں سے خلیوں کے تعاملات کا مطالعہ کرنے کے لیے ایک اہم آلے کے طور پر استعمال کیا جاتا رہا ہے۔ U-937 خلیے متعدد گھلنشیل محرکات کے جواب میں پختہ ہوتے ہیں اور مختلف ہوتے ہیں، جس میں مونوسیٹس، میکروفیجز یا ڈینڈرائٹک خلیوں کی مورفولوجی اور خصوصیات کو اپنایا جاتا ہے۔ U-937 خلیے مائیلوئڈ نسب کے ہوتے ہیں اور اس طرح بڑی تعداد میں سائٹوکائنز اور کیموکائنز یا تو آئینی طور پر (مثال کے طور پر، آئی ایل-1 اور جی ایم-سی ایس ایف) یا گھلنشیل محرکات کے جواب میں خارج ہوتے ہیں۔ مثال کے طور پر ٹی این ایف اے اور ریکومبیننٹ جی ایم-سی ایس ایف آزادانہ طور پر یو 937 خلیوں میں آئی ایل-10 کی پیداوار کو فروغ دیتے ہیں۔ اس لیے یہ سیل لائن مختلف کیمیائی مرکبات کی نمائش کے نتیجے میں سائٹوکائن کی سطح کے پڑھنے کے لیے بڑے پیمانے پر استعمال ہوتی ہے۔ یعنی، آئی ایل-1β، آئی ایل-6، آئی ایل-8، آئی ایل-10، ٹی این ایف-α، آئی این او ایس، سی او ایکس-2 اور این ایف-κB کی پیداوار کو عام طور پر ماپا جاتا ہے۔ U-937 خلیات t (10 ؛ 11) (p13 ؛ q14) ٹرانسلوکیشن کو برداشت کرتے ہیں جس کی وجہ سے ایم ایل ایل ٹی 10 اور اے پی-3 جیسے کلاتھرین اسمبلی پروٹین پی آئی سی اے ایل ایم کا فیوژن ہوتا ہے۔ U-937 خلیوں میں موجود HLA ایلیلز HLA-A * 03:01، A * 31:01، B * 18:01، B * 51:01، Cw * 01:02 اور Cw * 07:02 ہیں۔ دیکھ بھال اور تفریق U-937 لائن کو 3 ماہ تک وٹرو میں کلچر کیا جا سکتا ہے یا مناسب پروٹوکول پر عمل کرتے ہوئے کئی سالوں تک-80 ڈگری سینٹی گریڈ میں منجمد رکھا جا سکتا ہے۔ آر پی ایم آئی 1640 یا، متبادل طور پر، ڈی ایم ای ایم میڈیا استعمال کیا جا سکتا ہے، دونوں کو 10 ٪ ایف بی ایس اور اینٹی بائیوٹکس (عام طور پر پینسلن یا سٹریپٹومیسن) کے ساتھ ضمیمہ کیا جاتا ہے۔ کچھ معاملات میں، ایک اور ضمیمہ جو استعمال کیا جا سکتا ہے وہ ہے زوٹیریونک بفر-ہیپس۔ تفریق انڈکشن مونوسیٹس یا میکروفیجز میں U-937 کی تفریق کا انڈکشن مختلف ایجنٹوں جیسے پی ایم اے (فوربول 12-مائرسٹیٹ 13-ایسیٹیٹ)، ریٹینوک ایسڈ، وٹامن ڈی 3 (1,25-ڈائی ہائیڈروکسی وٹامن ڈی 3) یا ٹی پی اے (12-O-ٹیٹریڈیکانوئلفوربول 13-ایسیٹیٹ) کے ذریعے حاصل کیا جا سکتا ہے۔ ڈینڈریٹک خلیوں میں مزید تفریق انہیں اپولیپوپروٹین ای (Ep1.B) سے سیلف پیپٹائڈ کے سامنے لا کر پیدا کی جا سکتی ہے۔ یہ علاج سطح کے مارکر کے اظہار میں تبدیلیوں کا باعث بنتا ہے اور اس طرح ڈی سی جیسی مورفولوجی کے حصول کو جنم دیتا ہے۔ اوپر بیان کردہ خلیوں کی اقسام کے علاوہ، U-937 خلیوں کو آسٹیوکلاسٹس میں تقسیم کیا جا سکتا ہے-خلیوں کی ذیلی قسم جو ہڈیوں کی بازیافت اور تجدید کے لیے اہم ہے۔ یہ فینوٹائپ میگنیشیم کے اضافے کے ساتھ پی ایم اے اور وٹامن ڈی 3 کے ساتھ محرک کو ملا کر حاصل کیا جا سکتا ہے، جو تفریق کے عمل کو مزید برقرار رکھ سکتا ہے۔ تحقیق میں خصوصی خصوصیات اور استعمال بنیادی میکروفیجز کے حصول کے محدود امکانات کی وجہ سے، ٹی ایچ پی-1 خلیوں کے ساتھ، یو-937 سیل لائن، ان فیگوسیٹس ان وٹرو کا مطالعہ کرنے کے لیے ایک اہم ذریعہ ہے۔ تاہم، یہ بات ذہن میں رکھنی چاہیے کہ مذکورہ دونوں سیل لائنیں کلچر کے بعد الگ الگ نتائج پیش کرتی ہیں۔ U-937 سے ماخوذ میکروفیجز ترجیحی طور پر M2 پیدا کرنے والے محرکات کا جواب دیتے ہیں، جس کے نتیجے میں وہ متبادل طور پر فعال میکروفیجز کے فینوٹائپ کو حاصل کرنے کی طرف لے جاتے ہیں۔ جبکہ، ٹی ایچ پی-1 خلیوں کے معاملے میں، پولرائزیشن کلاسیکی ایم 1 میکروفیجز کے حق میں الٹ جاتی ہے۔ دونوں سیل لائنوں کو مصنوعی طور پر دونوں سمتوں میں پولرائز کیا جا سکتا ہے۔ فرق صرف اتنا ہے کہ U-937 سے ماخوذ میکروفیجز میں M1 فینوٹائپ کا قیام اتنا مضبوط نہیں ہوگا جتنا کہ THP-1 میں ہے، اور اس کے برعکس۔ لیوکیمیا کے مطابق Si et al. (2022)، U-937 سیل لائن خاص طور پر شدید مائیلوئڈ لیوکیمیا کے لیے ایک امید افزا نمونہ ہو سکتا ہے، کیونکہ یہ تقریبا 10 فیصد AML مریضوں میں مشاہدہ کیے گئے JAK3M511I فعال تغیر کو فعال طور پر ظاہر کرنے کے لیے دکھایا گیا تھا۔ اس مطالعے میں، وہ اس بات کی بھی تصدیق کرتے ہیں کہ U-937 خلیات ایک ماڈل JAK3 انفیکٹر کا جواب دیتے ہیں، اور اس طرح ان کا پھیلاؤ اس سے متاثر ہوتا ہے۔ جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے، U-937 فگوسیٹس کے علم کو وسیع کرنے کے لیے ایک قیمتی ذریعہ ہے۔ ان خصلتوں میں سے ایک جو خاص طور پر مطالعہ کے قابل ہے وہ ہے غیر مخصوص مدافعتی ردعمل کے ایک حصے کے طور پر آر او ایس (ری ایکٹیو آکسیجن پرجاتیوں) کی نسل کی صلاحیت۔ پرساد اور دیگر۔ (2020) الیکٹران پیرا مقناطیسی گونج سپیکٹروسکوپی اور کنفوکل لیزر اسکیننگ مائکروسکوپی کے ذریعے ان خلیوں میں آر او ایس امیجنگ کے موجودہ امکانات پیش کرتے ہیں۔ اپوپٹوسس U-937V ایک مختلف قسم کی سیل لائن ہے جو اصل U-937 خلیوں سے حاصل کی گئی ہے، فرق یہ ہے کہ ٹی این ایف اے کے اثرات کے لیے ان کی حساسیت میں اضافہ ہوا ہے۔ ان خلیوں کی منفرد خصوصیت apoptosis کے ایک ساتھ رجحان کے طور پر سیلولر تحلیل کی عدم موجودگی ہے۔ یہ دستاویزی کیا گیا تھا کہ ان خلیوں میں اپوپٹوسس کی شمولیت کے بعد بنیادی سالماتی عمل (ڈی این اے کا انحطاط، پی ایس بیرونی کاری، کیسپیس سرگرمی یا سائٹی سی ریلیز) میں بہت زیادہ تبدیلی نہیں آتی ہے۔ اس لیے یہ ذیلی قسم اپوپٹوٹک جسم کی تشکیل یا بلبنگ کے ضابطے کے لیے ایک اچھے ماڈل کے طور پر کام کر سکتی ہے۔ حوالہ جات بیرونی روابط U937 انسانی خلیے کی لکیروں کے لیے سیلوسورس کا اندراج