Aurora kinase B
اورورا کینیز بی ایک پروٹین ہے جو سینٹرومیر سے مائٹوٹک اسپنڈل کے منسلک ہونے میں کام کرتا ہے۔ مائٹوسس کے ساتھ ساتھ مییوسس کے دوران فنکشن کروموسومل علیحدگی کو کینیس اور فاسفیٹیس کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ کروموسوم کی حرکت اور علیحدگی کے دوران اورورا کنیز مائیکرو ٹیوبلز کے ساتھ وابستہ ہوتے ہیں۔ اورورا کینیز بی کنیٹوچورس کے قریب مائکرو ٹیوبلز میں مقامی ہوتا ہے، خاص طور پر کے فائبر نامی خصوصی مائکرو ٹیوبلز میں، اور اورورا کینیز اے (ایم آئی ایم 603072) سینٹروسومز میں مقامی ہوتا ہے (لیمپسن ایٹ ال۔، 2004)۔ [او ایم آئی ایم کے ذریعہ فراہم کردہ] کینسر کے خلیوں میں، ان انزائموں کا زیادہ اظہار جینیاتی معلومات کی غیر مساوی تقسیم کا سبب بنتا ہے، جس سے اینیوپلوئڈ خلیات پیدا ہوتے ہیں، جو کینسر کی پہچان ہے۔ 1998 میں دریافت کیا گیا، اورورا کنیز بی کی شناخت انسانوں میں پولیمرس چین ری ایکشن اسکرین کے ذریعے کی گئی تھی جو کینسروں میں حد سے زیادہ ظاہر ہوتے ہیں۔ اسی سال، چوہا اورورا کینیس بی کی شناخت ایک اسکرین میں کی گئی تھی جو کینیس کو تلاش کرنے کے لیے ڈیزائن کی گئی تھی جس نے زیادہ اظہار ہونے پر ایس سیریوسیا کے پھیلاؤ کو تبدیل کر دیا تھا۔ اظہار اور ذیلی سیلولر لوکلائزیشن ارورا بی کے اظہار اور سرگرمی کو سیل سائیکل کے مطابق منظم کیا جاتا ہے۔ ارورا بی کا اظہار جی 2-ایم منتقلی پر زیادہ سے زیادہ پہنچ جاتا ہے، جبکہ ارورا بی پروٹین مائٹوسس کے دوران سب سے زیادہ متحرک ہوتا ہے۔ اورورا بی ایک کروموسومل مسافر پروٹین ہے۔ خاص طور پر، اورورا بی پروفیز میں کروموسوم، پرومیٹافیز اور میٹافیز میں سینٹرومیر، اور انافس میں مرکزی مائٹوٹک تکلا کو مقامی بناتا ہے۔ اس لوکلائزیشن کا تعین ممالیہ، سی ایلیگنس، اور ڈروسفیلا خلیوں میں بالواسطہ امیونو فلوریسنس کے ذریعے کیا گیا ہے۔ اورورا بی کو سبز فلوروسینٹ پروٹین کے ساتھ ٹیگ کرکے ممالیہ خلیوں میں اورورا بی لوکلائزیشن کا مزید تفصیلی تجزیہ کیا گیا ہے۔ اس تجزیے سے پتہ چلتا ہے کہ سینٹرومیرس کے ساتھ اورورا بی کا تعلق متحرک ہے (سینٹرومیر پر اورورا بی مسلسل سائٹوپلاسمک اورورا بی کے پول کے ساتھ تبادلہ کر رہا ہے)۔ ٹیگ شدہ اورورا بی کے تجزیے سے یہ بھی پتہ چلتا ہے کہ یہ مائٹوسس کے انافس کے دوران اسپنڈل مائکرو ٹیوبلز کے ساتھ منسلک ہوتا ہے اور یہ ایسوسی ایشن اس کی نقل و حرکت کو نمایاں طور پر محدود کرتی ہے۔ آخر میں، ٹیگ شدہ ارورا بی کا ایک حصہ استوائی خلیے کے پرانتستا میں مقامی ہو گیا، جسے اسٹرل مائکرو ٹیوبلز کے ذریعے اس مقام پر منتقل کیا گیا تھا۔ تین دیگر پروٹین، سروائن، بوریلین اور آئی این سی ای این پی کے ساتھ اورورا بی اورورا بی کمپلیکس کا ضابطہ۔ کمپلیکس کے چار اجزاء میں سے ہر ایک دیگر تین کی مناسب لوکلائزیشن اور فنکشن کے لیے ضروری ہے۔ INCENP اورورا بی کنیز سرگرمی کو متحرک کرتا ہے۔ بچ جانے والا بھی ایسا ہی کر سکتا ہے۔ پرومیٹا فیز اور میٹا فیز کے دوران اورورا بی کو سینٹرومیر میں لوکلائزیشن کے لیے ممالیہ کینیٹوکور-مخصوص ہسٹون-ایچ 3 مختلف قسم کے سینٹرومیر پروٹین اے (سی ای این پی-اے) کے فاسفوریلیشن کی ضرورت ہوتی ہے۔ سی ای این پی-اے سینٹرومیر کے ساتھ منسلک ہوتا ہے اور کنیٹوکور کی اسمبلی کے لیے ضروری ہے۔ ارورا اے کنیز کے ذریعہ سیرین 7 پر سی ای این پی-اے کا فاسفوریلیشن ارورا بی کو سینٹرومیر میں بھرتی کرتا ہے۔ ارورا بی، خود، سی ای این پی-اے کو بھرتی کرنے کے بعد اسی باقیات پر فاسفوریلیٹ بھی کر سکتا ہے (نیچے دیکھیں)۔ مزید برآں، ٹوپو آئسومیرس II کو اورورا بی لوکلائزیشن اور اینزیمیٹک سرگرمی کے ضابطے میں شامل کیا گیا ہے۔ یہ ریگولیٹری کردار انافیس سے پہلے بہن کرومیٹائڈز کو الگ کرنے میں ٹوپو آئسومیرس II کے کردار سے براہ راست وابستہ ہو سکتا ہے۔ ٹوپو آئسومیرس II-ختم شدہ خلیوں میں، ارورا بی اور آئی این سی ای این پی دیر سے مائٹوسس میں مرکزی تکلے میں منتقل نہیں ہوتے ہیں۔ اس کے بجائے، وہ غیر منقطع بہن کرومیٹائڈز کے سینٹرومیرز کے ساتھ مضبوطی سے وابستہ رہتے ہیں۔ اس کے علاوہ، ٹوپو آئسومیرس II میں کمی والے خلیات اورورا بی کینیس کی سرگرمی میں نمایاں کمی ظاہر کرتے ہیں۔ ٹوپو آئسومیرس II کے نقصان کی وجہ سے اورورا B کی روک تھام کا انحصار BubR1 سرگرمی پر لگتا ہے (نیچے دیکھیں)۔ ارورا بی کو اینڈ بائنڈنگ پروٹین 1 (ای بی 1) سے جڑا ہوا دکھایا گیا ہے، جو ایک پروٹین ہے جو مائیکرو ٹیوبل ڈائنامکس کو منظم کرتا ہے۔ بالواسطہ امیونو فلوریسنس سے پتہ چلتا ہے کہ ارورا بی اور ای بی 1 مرکزی تکلے پر انافس کے دوران اور سائٹوکینیسس کے دوران مڈ باڈی میں کولکالائز ہوتے ہیں۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ ای بی 1 کا حد سے زیادہ اظہار اورورا بی کنیز کی سرگرمی کو بڑھاتا ہے، کم از کم جزوی طور پر کیونکہ ای بی 1 پروٹین فاسفیٹیز 2 اے کے ذریعے اورورا بی کے ڈیفاسفوریلیشن/غیر فعال ہونے کو روکتا ہے۔ کروموسوم بائیورینٹیشن میں کردار متعدد حیاتیات میں مطالعات سے پتہ چلتا ہے کہ اورورا بی اس بات کو یقینی بناتے ہوئے کروموسوم بائیورینٹیشن کی نگرانی کرتا ہے کہ اسپنڈل مائکرو ٹیوبلز اور کنیٹوچورس کے درمیان مناسب رابطے بنائے گئے ہیں۔ آر این اے کی مداخلت یا اینٹی باڈیز کو روکنے کے مائیکرو انجیکشن کے ذریعے اورورا بی فنکشن کی روک تھام مائٹوٹک تکلے کے خط استوا پر کروموسوم کی صف بندی کو متاثر کرتی ہے۔ صف بندی کے اس عمل کو کروموسوم کانگریشن کہا جاتا ہے۔ اس عیب کی وجہ جاری مطالعہ کا موضوع ہے۔ ارورا بی کی روک تھام سنٹیلیک منسلک کی تعداد میں اضافے کا باعث بن سکتی ہے (بہن کرومیٹڈ جوڑے جس میں دونوں بہن کنیٹوکورز ایک ہی تکلے کے قطب سے نکلنے والے مائکرو ٹیوبلز سے منسلک ہوتے ہیں)۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ اورورا بی کی غالب منفی اور اتپریرک طور پر غیر فعال شکل کے اظہار نے کنیٹوکور سے مائیکرو ٹیوبل کے منسلک کو متاثر کیا اور کینیٹوکورز کے ساتھ ڈائن اور سینٹرومیر پروٹین ای (سی ای این پی-ای) کی وابستگی کو روک دیا۔ خمیر سے لے کر انسان تک کے حیاتیات میں اورورا کنیز کے متعدد کینیٹوکور اہداف کا تعین کیا گیا ہے۔ خاص طور پر، سی ای این پی-اے اورورا بی کا ہدف ہے۔ ارورا بی کے ذریعہ سی ای این پی-اے کا فاسفوریلیشن پرومیٹافیز میں زیادہ سے زیادہ تک پہنچ جاتا ہے۔ در حقیقت، ارورا اے اسی سی ای این پی-اے فاسفوریلیشن سائٹ کو ارورا بی کے طور پر نشانہ بناتا ہے، اور ارورا اے کے ذریعہ سی ای این پی-اے فاسفوریلیشن کو ارورا بی سے پہلے سمجھا جاتا ہے۔ اس طرح، ایک ماڈل تجویز کیا گیا ہے جس میں ارورا اے کی طرف سے سی ای این پی-اے فاسفوریلیشن ارورا بی کو سینٹرومیر میں بھرتی کرتا ہے، مؤخر الذکر سی ای این پی-اے کی فاسفوریلیشن حالت کو مثبت فیڈ بیک لوپ میں برقرار رکھتا ہے۔ عجیب بات یہ ہے کہ سی ای این پی-اے میں اس فاسفوریلیشن سائٹ کی تغیر سائٹوکینیسس میں نقائص کا باعث بنتی ہے۔ اورورا بی مائٹوٹک سینٹرومیر سے وابستہ کینیسن (ایم سی اے کے) کے ساتھ بھی تعامل کرتا ہے۔ اورورا بی اور ایم سی اے کے دونوں پرومیٹا فیز کے دوران اندرونی سینٹرومیر پر مقامی ہوتے ہیں۔ ارورا بی کو سینٹرومیر میں ایم سی اے کے اور مختلف باقیات پر براہ راست فاسفوریلیٹ ایم سی اے کے بھرتی کرنے کے لیے دکھایا گیا ہے۔ ارورا بی کے ذریعہ ایم سی اے کے کا فاسفوریلیشن مائیکرو ٹیوبلز کو ڈی پولیمرائز کرنے کی ایم سی اے کے کی صلاحیت کو محدود کرتا ہے۔ اہم بات یہ ہے کہ متعدد طریقوں سے ایم سی اے کے کی روک تھام مائیکرو ٹیوبلز کو سپنڈل کرنے کے لیے کینیٹوکورز کے نامناسب منسلک ہونے کا باعث بنتی ہے۔ یہ قیاس کیا گیا ہے کہ ایمفیٹیلک لگاؤ سے پیدا ہونے والا تناؤ (بائیورینٹیشن ؛ مخالف تکلے کے قطبوں سے بہن کنیٹوکورس کا لگاؤ) بہن کینیٹوکورس کو الگ کرتا ہے، اس طرح سینٹرومیر کے اندرونی حصے میں اورورا بی کے مائیکرو ٹیوبل بائنڈنگ سائٹس کے ساتھ بیرونی ترین سینٹرومیر کے ریشے دار کورونا پر تعامل میں خلل پڑتا ہے۔ خاص طور پر، بائیورینٹیشن سے پیدا ہونے والا تناؤ ایم سی اے کے کو اورورا بی لوکلائزیشن کے علاقے سے باہر کھینچتا ہے۔ اس طرح، مائٹوسس اس کے سبسٹریٹس سے اورورا بی کے بائیورینٹیشن اور علیحدگی پر آگے بڑھتا ہے۔ کروموسوم کے ارتکاز اور کروموسوم کے ہم آہنگی میں کردار اورورا بی مائٹوسس کے دوران سیرائن 10 پر ہسٹون-ایچ 3 کے فاسفوریلیشن کے لیے ذمہ دار ہے۔ یہ ترمیم خمیر (جہاں کینیس کو آئی پی ایل 1 کے نام سے جانا جاتا ہے) سے لے کر انسان تک محفوظ ہے۔ خاص طور پر، ارورا بی کی طرف سے ہسٹون-ایچ 3 فاسفوریلیشن کرومیٹن کے گاڑھا ہونے کا ذمہ دار نہیں لگتا ہے۔ اگرچہ ارورا بی سینٹرومیرز پر افزودہ ہوتا ہے، لیکن یہ تمام کرومیٹن کے لیے مختلف طور پر مقامی ہوتا ہے۔ ڈروسفیلا خلیوں میں، اورورا بی کی کمی کروموسوم کی ساخت اور مرکب میں خلل ڈالتی ہے۔ ان خلیوں میں، کنڈینسن کمپلیکس کروموسوم کے لیے مناسب طریقے سے مقامی نہیں ہوتا ہے۔ اسی طرح، سی۔ ایلیگنس میں، کنڈینسن کی سرگرمی میٹا فیز میں اورورا بی پر منحصر ہے۔ تاہم، زینوپس انڈے کے خلیے سے پاک نکات میں، کنڈینسن بائنڈنگ اور کروموسوم کنڈینسیشن عام طور پر اورورا بی کی عدم موجودگی میں بھی ہوتا ہے۔ اسی طرح، خلیوں کا علاج اورورا بی انزائم انفیکٹر (اورورا بی لوکلائزیشن متاثر نہیں ہوتی) کے ساتھ کرنے کے بعد، کنڈینسن کمپلیکس عام طور پر لوکلائز ہو جاتا ہے۔ ارورا بی سی کے میٹا فیز I میں ہومولوگس کروموسوم کے جوڑے والے بازوؤں میں مقامی ہوتا ہے۔ ایلیگنس مییوسس، اور مائٹوسس میں مائکرو ٹیوبل حرکیات کو پریشان کرتا ہے۔ اس ہم آہنگی کی رہائی، جو اورورا بی پر منحصر ہے، انافس I کی ترقی اور ہومولوگس کروموسوم کی علیحدگی کے لیے ضروری ہے۔ مائٹوٹک ریڑھ کی ہڈی والے بی لیمفوسائٹس میں، متعدد اورورا بی بائنڈنگ پارٹنرز کی مناسب سینٹرومیرک لوکلائزیشن کے لیے کوہیسن کی ضرورت ہوتی ہے۔ سائٹوکینیسس میں کردار آرورا بی کمپلیکس ریڑھ کی ہڈی والے جانوروں، سی ایلیگنس، ڈروسفیلا، اور فشن خمیر میں سائٹوکینیسس کے لیے ضروری ہے۔ مختلف خلیوں کی اقسام میں، اتپریرک طور پر غیر فعال اورورا بی کا حد سے زیادہ اظہار سائٹوکینیسس کو روکتا ہے۔ اورورا بی بائنڈنگ پارٹنرز کی اتپریورتن کی وجہ سے اورورا بی غلط لوکلائزیشن سے بھی سائٹوکینیسس میں خلل پیدا ہو سکتا ہے۔ ارورا بی متعدد پروٹینوں کو نشانہ بناتا ہے جو کلیویج فیرو میں مقامی ہوتے ہیں، جن میں ٹائپ-III انٹرمیڈیٹ فلامینٹ پروٹین ویمینٹن، ڈیسمین، اور گلیل فائبرلیری ایسڈک پروٹین (جی ایف اے پی) شامل ہیں۔ عام طور پر، فاسفوریلیشن درمیانی تنوں کو غیر مستحکم کرتا ہے۔ لہذا، یہ تجویز کیا گیا ہے کہ کلیویج فیرو پر انٹرمیڈیٹ تنوں کا فاسفوریلیشن سائٹوکینیسس کی تیاری میں تنوں کو غیر مستحکم کرتا ہے۔ اس مفروضے سے اتفاق کرتے ہوئے، انٹرمیڈیٹ فلامینٹ پروٹین میں اورورا بی ٹارگٹ سائٹس کی اتپریورتن فلامینٹ کی اخترتی میں نقائص کا باعث بنتی ہے اور سائٹوکینیسس کے آخری مرحلے کو روکتی ہے۔ اورورا بی کلیویج فیرو پر میوسن II ریگولیٹری لائٹ چین کو بھی فاسفوریلیٹ کرتا ہے۔ اورورا بی سرگرمی کی روک تھام کلیویج فیرو میں مناسب مایوسن II لوکلائزیشن کو روکتی ہے اور اسپنڈل مڈزون تنظیم میں خلل ڈالتی ہے۔ اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ میں کردار اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ میٹوسیس کی ترقی کو میٹا فیز سے انافس تک روکتا ہے جب تک کہ تمام بہن کرومیٹڈ جوڑے بائیوریئنٹڈ نہ ہو جائیں۔ اورورا بی کی کمی والے خلیے میٹا فیز میں گرفتار کرنے میں ناکام رہتے ہیں یہاں تک کہ جب کروموسوم میں مائکرو ٹیوبل منسلک نہیں ہوتا ہے۔ نتیجتا، ارورا بی کی کمی غلط ترتیب شدہ کروموسوم کی موجودگی کے باوجود انافس کے ذریعے ترقی کا باعث بنتی ہے۔ ارورا بی ایم اے ڈی 2 اور بی بی آر 1 کی لوکلائزیشن میں شامل ہو سکتا ہے، پروٹین جو اسپنڈل مائکرو ٹیوبلز سے کروموسوم کے صحیح منسلک کو پہچانتے ہیں۔ ارورا بی کا نقصان کنیٹوچورس پر میڈ 2 اور بوبر 1 کے ارتکاز کو کم کرتا ہے۔ خاص طور پر، ایسا لگتا ہے کہ ارورا بی ان کی ابتدائی بھرتی کے بعد کینیٹوکور میں میڈ 2 اور بوبر 1 کی لوکلائزیشن کو برقرار رکھنے کا ذمہ دار ہے، جو کہ ارورا بی سے آزاد ہوتا ہے۔ ارورا بی جنگلی قسم کے خلیوں میں مائٹوسس میں نظر آنے والے بوبر 1 کے ہائپر فاسفوریلیشن میں براہ راست یا بالواسطہ طور پر ملوث ہو سکتا ہے۔ تعاملات اورورا بی کنیز کو BARD1، BIRC5، اور CDCA8 ٹی اے سی سی 1 کے ساتھ تعامل کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے۔ ایف بی ایکس ایل 2۔ کینسر میں کردار اورورا بی کینیز کی غیر معمولی طور پر بلند سطح خلیوں کی تقسیم کے دوران غیر مساوی کروموسومل علیحدگی کا سبب بنتی ہے، جس کے نتیجے میں کروموسوم کی غیر معمولی تعداد والے خلیات کی تشکیل ہوتی ہے، جو کینسر کی وجہ اور محرک دونوں ہیں۔ کینسر کے خلیوں میں بی آئی 811283 کے ذریعہ اورورا بی کینیز کی روک تھام کروموسوم (پولی پلائیڈ) کی شدید غیر معمولی تعداد والے خلیوں کی تشکیل کا باعث بنتی ہے۔ جوابی طور پر، اورورا بی کینیز کی روک تھام دراصل تشکیل شدہ پولی پلائڈ خلیوں کو تقسیم کرنے کا سبب بنتی ہے، تاہم، کیونکہ ان خلیوں میں شدید کروموسومل اسامانیتا ہوتی ہے، وہ بالآخر تقسیم ہونا بند کر دیتے ہیں یا خلیوں کی موت کا شکار ہو جاتے ہیں۔ محور کی نشوونما اور محور کی تخلیق نو میں کردار حال ہی میں نیوران میں اورورا بی کنیز کے لیے ایک نئی تقریب کی اطلاع ملی ہے۔ کلچرڈ نیوران کی ایکسوٹومی کے بعد، اورورا بی کینیز جین کے اظہار میں نمایاں اضافہ دیکھا گیا جو کہ دوبارہ پیدا ہونے والے ایکسونل شگفتگی کے ساتھ موافق تھا۔ مزید برآں، اورورا بی کینیز کے حد سے زیادہ اظہار کے نتیجے میں زیبرا فش کی نشوونما میں ریڑھ کی ہڈی کے موٹر نیوران کی محوری نشوونما میں تیزی آتی ہے۔ ارورا کینیس ارورا اے کینیس ارورا سی کینیس آئی این سی ای این پی اسپنڈل اسمبلی چیک پوائنٹ حوالہ جات مزید پڑھنا بیرونی روابط ای سی 2.7.11