Restriction landmark genomic scanning
ریسٹریکشن لینڈ مارک جینومک اسکیننگ (آر ایل جی ایس) جینوم تجزیہ کا ایک طریقہ ہے جس میں ہزاروں نشانات، یا پابندی والے مقامات کو تیزی سے بیک وقت دیکھا جا سکتا ہے۔ پابندی والے انزائموں کے امتزاج کا استعمال کرتے ہوئے جن میں سے کچھ ڈی این اے میں ترمیم کے لیے مخصوص ہیں، اس تکنیک کو کسی دیئے گئے جاندار کے جینوم میں میتھیلیشن کی سطح میں فرق کو دیکھنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ آر ایل جی ایس ڈی این اے کی براہ راست لیبلنگ کا استعمال کرتا ہے، جسے پہلے پابندی والے انزائموں کی ایک مخصوص سیریز کے ذریعے کاٹا جاتا ہے، اور پھر تابکار آاسوٹوپ (عام طور پر فاسفورس-32) کے ذریعے لیبل کیا جاتا ہے۔ اس کے بعد دو جہتی الیکٹروفورسس کے عمل کو استعمال کیا جاتا ہے، جس سے اعلی ریزولوشن کے نتائج برآمد ہوتے ہیں۔ اس کے بعد تابکار دوسرے جہتی جیل کو فلم کی ایک بڑی شیٹ کو بے نقاب کرنے کی اجازت دی جاتی ہے۔ تابکار لیبلنگ سے پیدا ہونے والی تابکاری فلم کو بے نقاب کرنے کا سبب بنے گی جہاں بھی پابندی کے ٹکڑے الیکٹروفورسس کے دوران منتقل ہوئے ہیں۔ اس کے بعد فلم تیار کی جاتی ہے، جس سے آٹو ریڈیوگراف کی شکل میں نتائج کی بصری نمائندگی ہوتی ہے۔ پابندی والے انزائموں کا ایک ہی مجموعہ ایک ہی حیاتیات کے نمونوں سے 'دھبوں' کا ایک ہی نمونہ تیار کرے گا، لیکن مختلف قسم کے حیاتیات کے لیے مختلف نمونے پیدا کرے گا۔ مثال کے طور پر، انسان اور چوہے کا ڈی این اے واضح طور پر مختلف نمونے پیدا کرے گا جب انزائموں کے ایک ہی امتزاج سے علاج کیا جائے گا۔ ان تیار شدہ آٹو ریڈز کی ایک دوسرے کے خلاف جانچ کی جا سکتی ہے، جس سے جین کے اظہار میں کسی بھی تبدیلی کا انکشاف ہوتا ہے جو فلم میں بصری اختلافات کا باعث بنتی ہے۔ ہر آٹوڈیگراف میں ہزاروں دھبے ہوتے ہیں، جن میں سے ہر ایک لیبل شدہ ڈی این اے پابندی کے نشان سے مطابقت رکھتا ہے۔ آر ایل جی ایس پورے جینوم اسکین کرتے وقت مفید ہو جاتا ہے، اور مؤثر طریقے سے ایک ہی وقت میں ہزاروں پولیمریز چین رد عمل کا کام کر سکتا ہے۔ یہ آسانی سے معمول سے ہٹنے والی تبدیلیوں کا پتہ لگاتا ہے، اور اس طرح ٹیومر میں ہائپر/ہائپومیتھیلیشن، حذف کرنے یا جینوں کی وسعت، یا کسی جاندار کی نشوونما کے دوران جین کے اظہار میں تبدیلیوں کی نشاندہی کرنے میں غیر معمولی طور پر موثر ہے۔ ذرائع http://www.informatics.jax.org/searches/accession_report.cgi?id=MGI: 71287 روز ویل پارک کمپری ہینسو کینسر سینٹر سے ایک آٹو ریڈ کی تصویر حوالہ جات مالیکیولر بائیولوجی لیبارٹری تکنیک جینومکس