Magnetic-activated cell sorting
مقناطیسی ایکٹیویٹڈ سیل چھانٹنا (ایم اے سی ایس) مختلف خلیوں کی آبادیوں کو ان کی سطح کے اینٹیجنز (سی ڈی مالیکیولز) کے لحاظ سے الگ کرنے کا ایک طریقہ ہے جسے ملٹینی بائیوٹیک نے ایجاد کیا ہے۔ ایم اے سی ایس نام کمپنی کا رجسٹرڈ ٹریڈ مارک ہے۔ یہ طریقہ ملٹینی بائیوٹیک کے ایم اے سی ایس سسٹم کے ساتھ تیار کیا گیا تھا، جو سپر پیرامیگنیٹک نینو پارٹیکلز اور کالموں کا استعمال کرتا ہے۔ سپر پیرامیگنیٹک نینو پارٹیکلز 100 این ایم کی ترتیب کے ہوتے ہیں۔ انہیں ہدف شدہ خلیوں کو ٹیگ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے تاکہ انہیں کالم کے اندر پکڑا جا سکے۔ کالم کو مستقل میگیٹس کے درمیان رکھا جاتا ہے تاکہ جب مقناطیسی ذرہ خلیہ کمپلیکس اس سے گزرے تو ٹیگ کیے گئے خلیوں کو پکڑا جا سکے۔ کالم اسٹیل اون پر مشتمل ہوتا ہے جو مستقل مقناطیس کے درمیان کالم رکھے جانے پر علیحدگی کی کارکردگی کو زیادہ سے زیادہ کرنے کے لیے مقناطیسی میدان کے میلان کو بڑھاتا ہے۔ مقناطیسی فعال سیل چھانٹنا امیونولوجی، کینسر ریسرچ، نیورو سائنس، اور اسٹیم سیل ریسرچ جیسے شعبوں میں عام طور پر استعمال ہونے والا طریقہ ہے۔ ملٹینی مائکرو بیڈز فروخت کرتا ہے جو مقناطیسی نینو پارٹیکلز ہوتے ہیں جو اینٹی باڈیز سے جڑے ہوتے ہیں جو مخصوص خلیوں کو نشانہ بنانے کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ طریقہ کار ایم اے سی ایس طریقہ خلیوں کو کسی خاص سطح کے اینٹیجن کے خلاف اینٹی باڈیز کے ساتھ لیپت مقناطیسی نینو پارٹیکلز کا استعمال کرکے الگ کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ اس کی وجہ سے اس اینٹیجن کا اظہار کرنے والے خلیات مقناطیسی نینو پارٹیکلز سے منسلک ہو جاتے ہیں۔ موتیوں اور خلیوں کو انکیوبیٹ کرنے کے بعد، محلول کو مضبوط مقناطیسی میدان میں ایک کالم میں منتقل کر دیا جاتا ہے۔ اس مرحلے میں، نینو پارٹیکلز سے منسلک خلیات (اینٹیجن کا اظہار کرتے ہوئے) کالم پر رہتے ہیں، جبکہ دوسرے خلیات (اینٹیجن کا اظہار نہیں کرتے ہوئے) بہتے ہیں۔ اس طریقہ کار کے ذریعے خلیوں کو مخصوص اینٹیجن کے حوالے سے مثبت یا منفی طور پر الگ کیا جا سکتا ہے۔ مثبت اور منفی انتخاب مثبت انتخاب کے ساتھ، دلچسپی کے اینٹیجن کا اظہار کرنے والے خلیات، جو مقناطیسی کالم سے منسلک ہوتے ہیں، مقناطیسی میدان سے کالم کو ہٹانے کے بعد، ایک علیحدہ برتن میں دھوئے جاتے ہیں۔ یہ طریقہ کسی خاص قسم کے خلیے کو الگ کرنے کے لیے مفید ہے، مثال کے طور پر سی ڈی 4 لیمفوسائٹس۔ مزید برآں، یہ سپرم کا جلد پتہ لگانے کے قابل بناتا ہے جو اپوپٹوسس کا آغاز کرتا ہے، حالانکہ وہ مناسب ظاہری شکل اور حرکت پذیری ظاہر کر سکتے ہیں۔ ایک مقناطیسی لیبل والا رسیپٹر جو اینکسین سے جڑا ہوتا ہے، سپرم میں شامل کیا جاتا ہے۔ عام خلیوں کے اندر، فاسفیٹائڈیلسرین مالیکیول سیل جھلی کے اندر سائٹوپلازم کی طرف واقع ہوتے ہیں۔ اس کے باوجود، ان خلیوں میں جو اپوپٹوٹک عمل شروع کرتے ہیں فاسفیٹائڈیلسرین اس کے بجائے خلیے کی جھلی کے بیرونی حصے کا سامنا کرتا ہے، جو ضمیمہ کنجوگیٹ سے جڑا ہوتا ہے۔ لہذا، عام سپرمیٹوزوا لیبل شدہ رسیپٹر کے پابند ہونے کے بغیر کالم سے گزرے گا۔ دوسری طرف، پرواپپٹوٹک سپرم پھنسے رہیں گے، جو مقناطیسی لیبل والے اینٹی باڈی کی بدولت سپرم کے انتخاب کے عمل کے طور پر سامنے آتا ہے۔ آخر کار، اس تکنیک نے اپنی افادیت ظاہر کی ہے، حالانکہ یہ محدود ہے۔ منفی انتخاب کے ساتھ، استعمال شدہ اینٹی باڈی سطح کے اینٹیجن کے خلاف ہوتی ہے جو ان خلیوں پر موجود ہونے کے لیے جانا جاتا ہے جن میں دلچسپی نہیں ہوتی ہے۔ کالم پر خلیوں/مقناطیسی نینو پارٹیکلز کے حل کی انتظامیہ کے بعد ان اینٹیجنز کا اظہار کرنے والے خلیات کالم سے جڑے ہوتے ہیں اور جو حصہ گزرتا ہے اسے جمع کیا جاتا ہے، کیونکہ اس میں ان ناپسندیدہ اینٹیجنز کے ساتھ تقریبا کوئی خلیات نہیں ہوتے ہیں۔ تبدیلیاں دلچسپی کے اینٹیجن کے خلاف اینٹی باڈی سے منسلک مقناطیسی نینو پارٹیکلز ہمیشہ دستیاب نہیں ہوتے ہیں، لیکن اس سے بچنے کا ایک طریقہ موجود ہے۔ چونکہ فلوروفور سے جڑے ہوئے اینٹی باڈیز بہت زیادہ عام ہیں، اس لیے اینٹی فلوروکروم اینٹی باڈیز کے ساتھ لیپت مقناطیسی نینو پارٹیکلز کا استعمال ممکن ہے۔ وہ دلچسپی کے اینٹیجن کے خلاف فلوروسینٹ لیبلڈ اینٹی باڈیز کے ساتھ انکیوبیٹ کیے جاتے ہیں اور اس طرح اینٹیجن کے حوالے سے سیل علیحدگی کے لیے کام کر سکتے ہیں۔ فلو سائٹومیٹری ڈائنابیڈز کلسٹرز آف ڈفریٚنسیشن مالیکیولر بائیولوجی حوالہ جات ایس۔ ملٹینی، ڈبلیو۔ مولر، ڈبلیو۔ ویچل، اور اے۔ ریڈبروچ، "ہائی گریڈینٹ میگنیٹک سیل سیپریشن ود ایم اے سی ایس"، سائٹومیٹری، جلد بھی دیکھیں۔ 11، نہیں۔ 2، پی پی۔ 231-238، 1990۔