Frog test
مینڈک کی جانچ حمل کی جانچ کا ایک طریقہ ہے جو خواتین کی حمل کی حیثیت کو ظاہر کرنے کے لیے مینڈکوں پر انحصار کرتا ہے۔ بشرطیکہ 1960 کی دہائی سے پہلے امیونولوجیکل حمل کے ٹیسٹ ابھی تیار نہیں کیے گئے تھے، ایک صدی قبل رہنے والی خواتین مختلف جانوروں کا استعمال کرتے ہوئے پیشاب پر مبنی حمل کے ٹیسٹ پر انحصار کرتی تھیں، چوہوں سے لے کر مینڈکوں تک۔ آج کل طبی ٹیکنالوجی میں ہونے والی ترقی نے خواتین کو گھر پر 'پی-آن-اے-اسٹک' حمل کی جانچ کٹس کا استعمال کرکے اپنے حمل کی صورتحال کو درست طریقے سے جانچنے کے قابل بنایا ہے۔ ان قابل رسائی اور آسان ٹیسٹ کٹس کی ایجاد سے پہلے، سائنس دانوں نے ایک قدرتی، آسان ٹیسٹ کے ذریعے حمل سے متعلق ہارمونز کا پتہ لگانے کا ایک طریقہ دریافت کرنے کی کوشش کی، جہاں عمل کو آسان بنانے کے لیے جانوروں کو اکثر طبی آلات کے طور پر شامل کیا جاتا تھا۔ مینڈک ٹیسٹ یا مینڈک حمل ٹیسٹ ماضی میں رائج حمل کی اسکیننگ کے طریقوں میں سے ایک ہے۔ پوری تاریخ میں، خواتین کی حمل کی حیثیت کی نشاندہی کرنے کے مقصد سے مینڈک کے مختلف ٹیسٹ ہوئے ہیں۔ مینڈک کا سب سے مشہور ٹیسٹ، ہوگبن ٹیسٹ ہے، جو حمل کی جانچ کا ایک طریقہ ہے جو 1940 سے 1960 کی دہائی میں رائج ہے، جس میں ہارمون کے بنیادی اصول اور کچھ مینڈک پرجاتیوں کی دونوں جنسوں میں اس کے بعد کے حیاتیاتی ردعمل کا استعمال کیا جاتا ہے۔ گلی-مینینی ٹیسٹ ایک اور مینڈک ٹیسٹ ہے جو اسی طرح کے اصولوں کی بنیاد پر تیار کیا گیا ہے۔ خیال کیا جاتا ہے کہ ان ٹیسٹوں کے لیے استعمال ہونے والے افریقی پنجے والے مینڈکوں کی وسیع پیمانے پر برآمد اور ٹریفک چیٹریڈیومائیکوسس کے بین البراعظمی پھیلاؤ کی بنیادی وجہ ہے۔ پس منظر ہیومن کوریونک گونڈوٹروفین (ایچ سی جی) ایک ہارمون ہے جو عورت کے حاملہ ہونے پر پیدا ہوتا ہے، اور اس کی وجہ یہ ہے کہ نال اس کی پیداوار کا ذمہ دار ہوتا ہے۔ فرٹیلائزڈ انڈے کو فیلوپین ٹیوبوں سے بچہ دانی میں منتقل ہونے میں تقریبا 9 دن لگتے ہیں، جہاں یہ خود کو بچہ دانی کی دیواروں میں لگا لیتا ہے۔ پھر، نال کی نشوونما شروع ہو جائے گی اور ماں کے خون کے بہاؤ میں ایچ سی جی چھوڑے گا، جو پیشاب میں منتقل ہو سکتا ہے۔ فرٹیلائزڈ انڈے لگانے کے بعد، یا پہلی ماہواری ختم ہونے کے فورا بعد، خون میں ایچ سی جی کی سطح کا پتہ لگانے میں تقریبا 6 دن لگتے ہیں۔ پیشاب پر چھڑی حمل کا ٹیسٹ صرف ایچ سی جی کی موجودگی کا پتہ لگاتا ہے، اور خون میں ایچ سی جی کی سطح کی پیمائش نہیں کر سکتا۔ لہذا، انہیں حمل کے لیے اسکریننگ کے طور پر استعمال کیا جا سکتا ہے، تاہم ایچ سی جی کی سطح حمل کے بارے میں معلومات بھی فراہم کر سکتی ہے۔ عام طور پر، حمل کے پہلے 14 ہفتوں میں ایچ سی جی کی سطح بڑھ جاتی ہے اور عروج پر ہوتی ہے، اور بچے کی پیدائش کے بعد ایچ سی جی کا پتہ نہیں چلتا ہے۔ ایچ سی جی کی مقدار حمل کی عکاسی بھی کر سکتی ہے۔ کم ایچ سی جی ایک ہی حمل میں خارج ہوتا ہے۔ اسی طرح، زیادہ ایچ سی جی جاری کیا جاتا ہے اگر ماں تین گنا لے رہی ہے، اس کے مقابلے میں اگر وہ جڑواں بچے لے رہی ہے۔ ایچ سی جی خون کے ٹیسٹ پیدائشی نقائص کی بھی جانچ کر سکتے ہیں۔ کسی فرد میں، ایچ سی جی موجود نہیں ہونا چاہیے جب تک کہ وہ حاملہ نہ ہوں۔ تاہم، ایچ سی جی جراثیمی خلیے کے ٹیومر کے ذریعے بھی پیدا کیا جا سکتا ہے، جو انڈوں یا سپرم کے ٹیومر ہوتے ہیں۔ ایچ سی جی ٹیسٹ کو بچہ دانی کے کینسر، یا مولر حمل کی اسکریننگ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے، جو اس وقت ہوتا ہے جب بچہ دانی میں غیر معمولی پلاسینٹل نشوونما ہوتی ہے۔ ایچ سی جی ٹیسٹ اسقاط حمل کے بعد بھی کیا جا سکتا ہے تاکہ یہ یقینی بنایا جا سکے کہ مولر حمل موجود نہیں ہے۔ مردوں میں، ایچ سی جی ٹیسٹ کو خصیوں کے کینسر کی موجودگی کی جانچ کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ہاگ بین ٹیسٹ، جس کا نام برطانوی حیوانیات کے ماہر لینسلٹ ہاگ بین کے نام پر رکھا گیا ہے، 1940 سے 1960 کی دہائی تک حمل کے سب سے قابل اعتماد اور تیز رفتار ٹیسٹوں میں سے ایک تھا۔ پیشاب کے نمونوں کو افریقی پنجے والے مینڈکوں میں انجکشن کیا گیا تھا۔ گیلی-مینینی ٹیسٹ کے برعکس، جو نر مینڈکوں کا استعمال کرتا ہے، ہوگبن ٹیسٹ میں مادہ مینڈکوں کا استعمال کیا جاتا ہے۔ ہوگبن کے ابتدائی کام پیٹیوٹری ہارمونز اور مینڈکوں کے گرد گھومتے تھے۔ ایک دن، ہوگبین اور ان کی ٹیم نے مشاہدہ کیا کہ بالغ مینڈکوں کی جلد کا رنگ ان کے بڑھتے ہوئے ماحول پر منحصر ہے۔ رنگ سیاہ ماحول سے ہوتا ہے جس کی وجہ سے جلد کا رنگ سیاہ ہوتا ہے، ہلکے ماحول میں جہاں ہلکے رنگ کے مینڈک پائے جاتے تھے۔ ہوگبن نے پیٹیوٹری غدود کی موجودگی کے نتیجے میں اس دلچسپ رجحان کا مفروضہ پیش کیا۔ ہوگبن نے یہ ثابت کرتے ہوئے اپنے مفروضے کی توثیق کی کہ پیٹیوٹری گلینڈ کو ہٹانے کے نتیجے میں مینڈکوں کی جلد کا رنگ ان کے بڑھتے ہوئے ماحول سے قطع نظر سفید ہو جائے گا۔ مزید نمایاں طور پر، مینڈک پیٹیوٹری گلینڈ کے اپنے مطالعے کے دوران، اس نے دریافت کیا کہ بیل پیٹیوٹری گلینڈ کے نکات کو اس کی ڈوسرل لمف تھیلی میں انجکشن لگانے کے بعد، خواتین مینڈک بیضہ کریں گی، جس نے اس کی مستقبل کی دریافت کی بنیاد بنائی۔ جب ہوگ بین اپنا کام جاری رکھے ہوئے تھے جب وہ 1927 میں جنوبی افریقہ چلے گئے، جہاں ان کی تحقیق زینوپس لیوس کو بیل کے پیٹیوٹری گلینڈ کے نکات کے ساتھ انجیکشن لگانے کے گرد گھومتی تھی، انہوں نے غلطی سے دریافت کیا کہ زینوپس مینڈک اگر پیٹیوٹری نکات کے ساتھ انجکشن کیے جائیں تو ایک دن کے اندر اندر انڈاکار ہو جائیں گے، کیونکہ وہ کسی بھی ہارمونل تبدیلیوں کے لیے بہت حساس تھے۔ اس عرصے کے دوران، سائنس دانوں کو معلوم تھا کہ خواتین کے پیشاب میں پیٹیوٹری ہارمونز ہوتے ہیں، اور ہوگبن کو یہ احساس ہوا کہ شاید حاملہ خواتین کے پیشاب میں پیٹیوٹری ہارمونز کی موجودگی کا پتہ ان مینڈکوں میں بیضہ دانی کے ردعمل سے بھی لگایا جا سکتا ہے۔ اس دریافت کے بعد، ہوگبین اور ایک اور جانوروں کے جینیاتی ماہر فرانسس البرٹ ایلی کریو نے لیب کی ترتیب میں ان مینڈکوں کو پالنے اور برقرار رکھنے کا طریقہ تیار کرنے میں دو سال گزارے، جس کی وجہ سے ہوگبین ٹیسٹوں میں بیس سال کی تیزی آئی، جن کے بارے میں دعوی کیا گیا کہ وہ تقریبا 100% درست ہیں۔ حقیقت میں، مختلف مطالعات نے ٹیسٹ کی درستگی کو بالترتیب 93.1%، 97.99 ٪ اور 99.93 ٪ کے طور پر ماپا ہے۔ ہاگ بین ٹیسٹ کے لیے جانچ کے طریقہ کار ہاگ بین ٹیسٹ کے طریقہ کار میں خواتین کے پیشاب کا نمونہ مینڈک کی پیٹھ کی جلد میں، خاص طور پر ڈورسل لمف تھیلی میں انجیکشن لگانے پر مشتمل تھا۔ تقریبا 12 گھنٹے بعد، نتائج دیکھے جا سکے۔ اگر عورت حاملہ ہوتی تو مینڈک کا بیضہ ہوتا، اور مینڈک کے پچھلے سرے پر انڈوں کا ایک چھوٹا جھنڈ دیکھا جا سکتا تھا۔ دلچسپ بات یہ ہے کہ زینوپس لیوس کی مردانہ انواع میں بھی یہی مشاہدہ کیا جا سکتا ہے، اور انہیں حاملہ عورت کے پیشاب کے انجیکشن پر سپرم تیار کرتے ہوئے دیکھا گیا۔ یہ طریقہ کار پٹیوٹری ہارمون ہیومن کوریونک گونڈوٹروپن (ایچ سی جی) کی وجہ سے ہے، جو صرف حاملہ عورت کے پیشاب میں موجود ہوتا ہے۔ اگر عورت حاملہ نہیں ہے تو بالترتیب نر یا مادہ مینڈک سے کوئی سپرم یا انڈہ پیدا نہیں ہوگا۔ فوائد حمل کے پچھلے ٹیسٹ، جنہیں اے زیڈ ٹیسٹ یا خرگوش کے ٹیسٹ کہا جاتا ہے، پریشان کن اور وقت طلب تھے۔ ان میں خواتین کے پیشاب کو دن میں دو بار، تین دن کے لیے، چوہوں یا خرگوش میں انجیکشن لگانا شامل تھا۔ پھر، چوہوں کو مارنا پڑے گا اور سائنس دان اس بات کی جانچ کریں گے کہ آیا چوہوں کے اعضاء بڑھ گئے تھے۔ یہ بیضہ دانی کی نشوونما ایچ سی جی کی وجہ سے ہوتی ہے۔ ہوگبن ٹیسٹ جلد ہی زیادہ مقبول ہو گئے اور اے زیڈ ٹیسٹوں کے مقابلے میں زیادہ وسیع پیمانے پر انجام دیے گئے کیونکہ نتائج ایک دن سے بھی کم وقت میں دیکھے جا سکتے تھے، اور انتہائی درست نتائج برآمد ہوئے۔ مزید برآں، ہوگبن ٹیسٹوں میں مینڈکوں کو مارنا شامل نہیں تھا، لہذا ہر مینڈک کو دوبارہ استعمال کیا جا سکتا تھا، A-Z ٹیسٹوں کے برعکس جہاں بیضہ دانی کی توسیع کی جانچ کرنے کے لیے چوہوں کو مارنا پڑتا تھا۔ زینوپس لیوس کو چوہوں کے مقابلے میں برقرار رکھنا بھی آسان تھا، اور ان کی پرورش کم لاگت سے ہوتی تھی۔ یہ موثر اور قابل اعتماد ہوگبن ٹیسٹ 1960 کی دہائی کے آخر میں اس سے بھی آسان اور جانوروں سے پاک حمل کے ٹیسٹ کی ترقی تک استعمال کیا گیا تھا۔ ایپلی کیشنز کی ترقی مینڈک کی جانچ 1930 کی دہائی سے 1960 کی دہائی میں امیونولوجیکل ٹیسٹ پیش کیے جانے تک حمل کی جانچ کا ایک انتہائی قابل اعتماد طریقہ رہا ہے۔ فارماسسٹ مینڈکوں میں مادہ کے پیشاب کے ابتدائی نمونے کا انجیکشن لگائیں گے اور 18 گھنٹوں کے اندر انڈوں کی افزائش کے ساتھ ان کے حمل کی تصدیق کریں گے۔ تاہم، ٹیسٹ کو درست طریقے سے انجام دینے کے لیے ایک اہم شرط تھی۔ خواتین کو اپنی دیر سے ماہواری کے نشان کے بعد مزید چند دن انتظار کرنا چاہیے۔ چونکہ یہ ٹیسٹ ناقابل یقین حد تک مددگار اور کافی وقت مؤثر تھا، بہت سے ممالک نے زینوپس لیوس درآمد کرنا شروع کر دیا، جس نے یورپ، آسٹریلیا، ایشیا، شمالی امریکہ اور دنیا بھر میں تقریبا ہر جگہ اس پرجاتیوں کے پھیلاؤ میں اہم کردار ادا کیا۔ آج، ہوگبن کا ٹیسٹ متروک ہو گیا ہے، تاہم، اس نے زینوپس مینڈکوں کو سائنسی برادری میں ایک اہم نمونہ اور جاندار بنا دیا ہے، اور زینوپس پرجاتیوں کو مختلف قسم کی بیماریوں کا مطالعہ کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ یہاں تک کہ زینوپس پرجاتیوں کے ٹیڈ پولز کو بھی ترقیاتی حیاتیات کے مطالعہ میں استعمال ہونے والے جاندار کے طور پر شامل کیا گیا ہے، جیسے کہ پولی سسٹک گردے کی بیماری کے مینڈک پر مبنی تشخیصی آلات میں۔ گیلی-مینینی ٹیسٹ کارلوس گیلی مینینی (1914-1961)، جو اینڈوکرائنولوجی میں بھی مہارت رکھتے ہیں، نے موجودہ ہوگبن ٹیسٹ کو بہتر بنانے کی کوشش کی، جس میں حمل کی ابتدائی اسکریننگ میں 12 گھنٹے سے زیادہ کا وقت لگا۔ یہ مشاہدہ کرنے کے بعد کہ نر مینڈک یا ٹاڈ مادہ مینڈکوں کے ساتھ طویل رابطے کے بعد سپرمیٹوزوا پیدا کرتے ہیں، گونڈوٹروپک ہارمون خواتین کے جسم سے خارج ہوتا ہے۔ اس نے محسوس کیا کہ ہوگبن کے ٹیسٹ میں استعمال ہونے والی مادہ مینڈکوں کی جگہ جنوبی امریکی نر مینڈک یا ٹاڈ لے سکتے ہیں۔ خواتین کے پیشاب کو بالغ مرد مینڈک کے ڈوسرل لمف تھیلی میں انجکشن کیا جا سکتا ہے۔ حاملہ خواتین کے پیشاب میں گونڈوٹروپک ہارمون، انجکشن کے بعد، مینڈکوں سے سپرم کی رہائی کا باعث بنتا ہے۔ جانچ کا یہ نیا طریقہ وسیع پیمانے پر استعمال ہونے لگا کیونکہ یہ نتائج کے لیے صرف 3 گھنٹے انتظار کے وقت کے ساتھ اور بھی زیادہ موثر تھا۔ اس نے اس تجربے کے لیے موزوں مختلف انواع تلاش کیں، زیادہ تر اسرائیل کے مقامی مینڈک، جیسے یورپی گرین ٹاڈ، مارش مینڈک، اور یورپی ٹری مینڈک۔ ہوگبن ٹیسٹ کی طرح، خواتین کے پیشاب کی تھوڑی مقدار مرد مینڈک کی ڈوسرل لمف تھیلی میں انجکشن کی جاتی ہے۔ حاملہ خواتین کے پیشاب میں ہیومن کوریونک گونڈوٹروفین ہارمون ہوتا ہے۔ لہذا مرد مینڈک میں انجکشن کیے گئے پیشاب میں اس ہارمون کی موجودگی، مینڈک کو تین گھنٹوں کے اندر سپرم چھوڑنے کا سبب بنے گی۔ سپرم کے خلیوں کو خوردبین کے نیچے دیکھا جا سکتا ہے۔ یہ طریقہ کار مینڈک کے لیے بے درد ہے، اور مینڈک کو 2 ہفتوں کے بعد دوسرے ٹیسٹ کے لیے دوبارہ استعمال کیا جا سکتا ہے۔ حمل کے ٹیسٹ کے لیے مینڈک کے نر پرجاتیوں کی تجاویز کے بعد، محققین ٹیسٹ کی درستگی کی توثیق پر کام کر رہے تھے، دوسرے ممکنہ ذرائع کو مسترد کر کے جو نر مینڈک کے پیشاب میں بالغ زندہ سپرمیٹوزوا کی موجودگی کا باعث بنے۔ یہ پایا گیا کہ خشک شمالی چیتے کے مینڈک خاص طور پر آستین والے پانی کے لیے حساس ہوتے ہیں اور گونڈوٹروپک ہارمون کے لیے کم حساس ہوتے ہیں۔ درستگی کو بہتر بنانے کے لیے کچھ مزید طریقے بھی تجویز کیے گئے۔ حمل کے لیے حوالہ جات کے ٹیسٹ طب کی تاریخ