SEA Native Peptide Ligation
غیر محفوظ پیپٹائڈ حصوں کے مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن کے ذریعے پروٹین کی کیمیائی ترکیب پروٹین تیار کرنے کے لیے زندہ نظام کے استعمال کا ایک دلچسپ تکمیل اور ممکنہ متبادل ہے۔ پروٹین کی ترکیب کے لیے موثر مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن طریقوں کی ضرورت ہوتی ہے، جو غیر محفوظ پیپٹائڈ حصوں کے درمیان آبی محلول میں مقامی پیپٹائڈ بانڈ کی کیموسیلیکٹو تشکیل کو قابل بناتے ہیں۔ پروٹین کی ترکیب کے لیے سب سے زیادہ استعمال ہونے والی تکنیک مقامی کیمیائی لائیگیشن (این سی ایل) ہے۔ تاہم، متبادل ابھر رہے ہیں، جن میں سے ایک SEA مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن ہے۔ جائزہ ایس ای اے گروپ کا تعلق این، ایس-ایسیل شفٹ سسٹم سے ہے کیونکہ اس کی رد عمل پیپٹائڈ سیگمنٹ کے سی-ٹرمینل کاربونل گروپ پر ایک ایس ای اے تھائول گروپ کے انٹرا مالیکیولر نیوکلیوفیلک اضافے سے طے ہوتا ہے۔ اس کے نتیجے میں پیپٹائڈ سلسلہ نائٹروجن سے سلفر کی طرف منتقل ہوتا ہے۔ ایس ای اے مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن کے مجموعی عمل میں پہلے پیپٹائڈ تھیوسٹر کی ان سیٹو تشکیل کے لیے این، ایس-ایسیل شفٹ شامل ہے، اور بعد میں، تھیول-تھیوسٹر تبادلے کے بعد، پیپٹائڈ بانڈ کی تشکیل کے لیے ایس، این-ایسیل شفٹ شامل ہے۔ رد عمل کی تفصیل SEA بیس (2-سلفینیلتھائل) امیڈو (اسکیم 1) کا مخفف ہے۔ ایس ای اے لائیگیشن میں ایک پیپٹائڈ کا رد عمل شامل ہوتا ہے جس میں سی-ٹرمینل بیس (2-سلفینیلتھائل) امیڈو گروپ ہوتا ہے جس میں سیس پیپٹائڈ ہوتا ہے۔ یہ تعامل غالبا ایک عارضی تھیوسٹر انٹرمیڈیٹ کی تشکیل کے ذریعے آگے بڑھتا ہے، جو پیپٹائڈ سی-ٹرمینل کاربونل گروپ پر ایک ایس ای اے تھائول کے انٹرا مالیکیولر حملے سے حاصل ہوتا ہے جیسا کہ اسکیم 1 میں دکھایا گیا ہے۔ اس کے بعد، تھیوسٹر تھائول-تھیوسٹر تبادلوں کے ایک سلسلے سے گزرتا ہے، جس میں لائیگیشن مرکب میں موجود بیرونی تھائولز جیسے کہ مرکیپٹوفینائل ایسیٹک ایسڈ (ایم پی اے اے) شامل ہیں۔ دوسرے پیپٹائڈ حصے کے سسٹین تھائول گروپ کے ساتھ تبادلے کے نتیجے میں ایک عارضی تھیوسٹر انٹرمیڈیٹ ہوتا ہے، جو جہاں تک مقامی کیمیائی ربط کا تعلق ہے، انٹرا مالیکیولر ایس، این-ایسیل کی طرف سے دوبارہ ترتیب دیا جاتا ہے اور منتقلی کو مقامی پیپٹائڈ بانڈ میں منتقل کرتا ہے۔ اشاعت ایس ای اے کے مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن کو بیان کرنے والی پہلی ہم مرتبہ جائزہ لینے والی اشاعت میلنک، او ایٹ ال کے نامیاتی خطوط میں شائع ہوئی تھی۔ (اولیویر، این۔ ؛ دھیور، جے۔ ؛ میڈیا، آر۔ ؛ بلینپین، اے۔ ؛ میلنیک، او۔، بیس (2-سلفینیلتھائل) امینو مقامی پیپٹائڈ لائیگیشن۔ آرگ۔ لیٹ۔ 2010، 12، (22)، 5238-41 ؛ اشاعت کی تاریخ (ویب): اکتوبر 21، 2010۔ چند ہفتوں کے بعد، یہی رد عمل لیو، سی۔ ایف (ہو، ڈبلیو۔ ؛ ژانگ، ایکس۔ ؛ لی، ایف۔ ؛ لیو، سی۔ ایف۔، پیپٹائڈیل این، این-بیس (2-مرکیپٹوتھائل)-امیڈس کے طور پر تھیویسٹر پریکرسرز فار نیٹو کیمیکل لائیگیشن کے ذریعے اسی جریدے میں شائع کیا گیا۔ آرگ۔ لیٹ۔ 2011، 13، 386-389 ؛ اشاعت کی تاریخ (ویب): دسمبر 22، 2010)۔ ایس ای اے آن/آف تصور ایس ای اے آن/آف تصور ایس ای اے گروپ کی ریڈوکس خصوصیات کا استحصال کرتا ہے۔ ایس ای اے کی آکسیکرن کے نتیجے میں ایک چکور ڈائیسلفائڈ پیدا ہوتا ہے جسے ایس ای اے آف کہا جاتا ہے، جو ایس ای اے آن کی خود سے محفوظ شکل ہے۔ ایس ای اے آف اور ایس ای اے آن کو آسانی سے کمی/آکسیکرن کے ذریعے ایک دوسرے میں تبدیل کیا جا سکتا ہے جیسا کہ اسکیم 2 میں دکھایا گیا ہے۔ حوالہ جات پیپٹائڈز کیمیائی رد عمل