Kinesin-like protein KIF11
کینیسن نما پروٹین کے آئی ایف 11 ایک مالیکیولر موٹر پروٹین ہے جو مائٹوسس میں ضروری ہے۔ انسانوں میں اسے جین کے آئی ایف 11 کے ذریعے کوڈ کیا جاتا ہے۔ کینیسن نما پروٹین کے آئی ایف 11 کینیسن سپر فیملی کا ایک رکن ہے، جو نینوموٹر ہیں جو خلیے میں مائکرو ٹیوبل ٹریکس کے ساتھ ساتھ حرکت کرتے ہیں۔ دریافت کے ابتدائی دنوں میں مطالعات سے نامزد، اسے کینیسن خاندان کے بانی ارکان کی بنیاد پر کینیسن-5، یا بی ایم سی، ای جی 5 یا این-2 کے نام سے بھی جانا جاتا ہے۔ فی الحال، 70 سے زیادہ مختلف یوکرائیوٹک کینیسن-5 پروٹین ہیں جن کی شناخت ترتیب کی مماثلت سے ہوتی ہے۔ اس پروٹین خاندان کے اراکین کو مختلف قسم کے تکلے کی حرکیات میں شامل ہونے اور مائٹوسس کے لیے ضروری ہونے کے لیے جانا جاتا ہے۔ اس جین پروڈکٹ کے کام میں کروموسوم کی پوزیشننگ، سینٹروسوم کی علیحدگی اور سیل مائٹوسس کے دوران دو قطبی تکلا قائم کرنا شامل ہے۔ انسانی کینیسن-5 پروٹین کا مائٹوسس میں اس کے کردار اور کینسر کے علاج کے ہدف کے طور پر اس کی صلاحیت کے لیے فعال طور پر مطالعہ کیا گیا ہے۔ فنکشن کے آئی ایف 11 (جسے کینیسین-5 اور ای جی 5 بھی کہا جاتا ہے) ایک ہوموٹیٹریمر ہے جو اسپنڈل دو قطبیت کو برقرار رکھنے کے لیے مائٹوٹک اسپنڈل میں اینٹی متوازی مائکرو ٹیوبلز کو کراس لنک کرتا ہے۔ موٹر ڈومین یا موٹر ہیڈ این-ٹرمینس پر ہوتا ہے اور اے ٹی پی ہائیڈرولیسس انجام دیتا ہے اور مائکرو ٹیوبلز سے جڑا رہتا ہے۔ کینیسن-5 موٹرز ایک دو قطبی ہوموٹیٹریمیرک ڈھانچے میں جمع ہوتے ہیں جو مخالف متوازی پر مبنی مائکرو ٹیوبلز کے بنڈلوں کو الگ کرنے کی صلاحیت رکھتے ہیں۔ یہ موٹر زیادہ تر حیاتیات میں مائٹوسس کے لیے ضروری ہے، جس میں یہ مائکرو ٹیوبل پر مبنی مائٹوٹک اسپنڈل کی سیلف اسمبلی میں حصہ لیتا ہے، لیکن بصورت دیگر سیل کی عملداری کے لیے اس کی ضرورت نہیں ہے۔ موٹر ممالیہ نیورونل عمل کی مناسب نشوونما میں بھی کردار ادا کر سکتی ہے، بشمول گروتھ کون نیویگیشن اور لمبائی۔ مائٹوسس میں فنکشن زیادہ تر یوکرائیوٹک خلیوں میں، کینیسن-5 کے بارے میں خیال کیا جاتا ہے کہ وہ پروفیس اور پرومیٹافیس میں مخالف سمت والے مائکرو ٹیوبلز کے جوڑوں کے درمیان کراس برج بناتا ہے اور مائٹوٹک اسپنڈل کی تشکیل کے دوران ڈپلیکیٹڈ سینٹروسومز کو الگ کرتا ہے۔ یہ ایک مستحکم ریاست دو قطبی مائکروٹوبول اسپنڈل ڈھانچے کے قیام کی اجازت دیتا ہے۔ جانوروں، پودوں اور پھپھوندی سمیت جانچ کیے گئے زیادہ تر یوکرائیوٹک حیاتیات میں مائٹوسس کے آغاز سے کینیسن-5 فنکشن کا نقصان، مائٹوسس کی تباہ کن ناکامی کا باعث بنتا ہے۔ مائٹوسس کے آغاز کے دوران اس موٹر کا فنکشن اہم ہوتا ہے، جس میں اس کے فنکشن کے نقصان کے نتیجے میں تکلے کے قطبوں کا خاتمہ، یا الٹ جانا ہوتا ہے، جس سے مرکزی طور پر تعینات سینٹروسوم جوڑے مائیکرو ٹیوبلز کی ریڈیل صف کے ساتھ پردیی گاڑھا کروموسوم کے ساتھ ہوتے ہیں۔ اس اثر کی ایک رعایت نیماتوڈ، سی۔ ایلیگنس کے اندر مائٹوسس ہے، جس میں کینیسن-5 مائٹوسس کے لیے سختی سے ضروری نہیں ہے، لیکن اس کے باوجود خلیوں کی تقسیم کی مجموعی وفاداری پر کافی اثر پڑتا ہے۔ کینسر سیل لائنوں پر ایک اہم ان وٹرو فینوٹائپک اسکریننگ کے ذریعے انسانی کینیسن-5 کے چھوٹے کیمیائی انفیکٹرز کی دریافت نے نئے اینٹی کینسر علاج کے ایجنٹوں اور مائیکرو ٹیوبل موٹر پروٹین کے طریقہ کار کی تحقیقات کے لیے نئے ٹولز دونوں کی ترقی کا باعث بنی ہے۔ ایلوسٹرک انفیکٹرز کا یہ ٹول کٹ مائٹوٹک اسپنڈل اسمبلی میں کینیسن-5 کے مخصوص کردار کے ساتھ ساتھ موٹر ڈومین فنکشن کے باریک ڈسیکشن کی تحقیقات کے لیے استعمال کیا گیا ہے۔ اس کام کے ذریعے یہ پایا گیا کہ ممالیہ خلیوں میں، پروفیز اور پرومیٹافیز کے دوران مائٹوٹک اسپنڈل کی ابتدائی اسمبلی کے لیے کینیسن-5 کی ضرورت ہوتی ہے، لیکن یہ مائٹوسس کے ایک دور کے دوران بعد کے انافیز کو عبور کرنے کے لیے قابل رسائی ہے۔ نیز، موٹر پر ایک ایلوسٹرک سائٹ پر کینیسن-5 انفیکٹرز کا پابند ہونا اس طریقہ کار میں خلل ڈالتا ہے جس کے ذریعے یہ انزائم اے ٹی پی ہائیڈرولیسس کی کیمیائی توانائی کو مائیکرو ٹیوبلز کو منتقل کرنے کے مکینیکل کام میں تبدیل کرتا ہے، اس طرح یہ انزائم کیسے کام کرتا ہے اس کے بارے میں بصیرت فراہم کرتا ہے۔ بہت سے ماڈل ہیں جو مائیکرو ٹیوبلز پر مبنی مائٹوٹک اسپنڈل کی خود اسمبلی کو ساختی عنصر کے طور پر بیان کرنے کی کوشش کرتے ہیں، اور مائیکرو ٹیوبل موٹروں کا ایک مجموعہ، بشمول کینیسن-5، انہیں منتقل کرنے اور آرڈر کرنے کے لیے۔ ان میں سے بہت سے ماڈل اسپنڈل مائکرو ٹیوبلز کے اندر مخالف میں کام کرنے والی موٹر قوتوں کے پیش گوئی شدہ توازن کی بنیاد پر میٹا فیز پر اسپنڈل کی مستحکم حالت کی وضاحت کرنے کی کوشش کرتے ہیں۔ پھر بھی، یہ واضح نہیں ہے کہ آیا اسپنڈل اسمبلی کے لیے درکار تمام ساختی عناصر معلوم ہیں، یا کس طرح موٹروں، بشمول کینیسن-5، کو جگہ اور وقت میں منظم کیا جا سکتا ہے۔ اس طرح کے انتباہات اس طرح کے ماڈلز کا اندازہ لگانا مشکل بناتے ہیں۔ تاہم، حالیہ اعداد و شمار سے پتہ چلتا ہے کہ 'فورس بیلنس' ماڈل کے وہ پہلو جو مائنس اینڈ ڈائریکٹڈ مائیکرو ٹیوبل سلائڈنگ اور پلس اینڈ ڈائریکٹڈ مائیکرو ٹیوبل سلائڈنگ کے درمیان توازن کے ذریعے مراقبہ کرنے کے لیے اسپنڈل کی لمبائی اور استحکام کو ظاہر کرتے ہیں، کیڑوں کے خلیوں میں موٹروں کی مخالفت کرتے ہوئے، ممالیہ خلیوں میں ایسا نہیں لگتا۔ مائٹوٹک اسپنڈل کی خود اسمبلی کا عمل سیل بائیولوجی میں ایک بڑا غیر حل شدہ سوال بنا ہوا ہے، اور ایک مضبوط ماڈل مختلف مائکرو ٹیوبل موٹروں اور اس مشینری کو تشکیل دینے والے ساختی عناصر کے ضابطے اور طرز عمل کی مزید تفصیلات کا انتظار کر رہا ہے۔ نیوران میں فنکشن اگرچہ خلیوں کی تقسیم کے دوران تمام خلیوں میں کینیسن-5 کی ضرورت ہوتی ہے، لیکن ایسا لگتا ہے کہ یہ زیادہ تر غیر تقسیم شدہ خلیوں کے میٹابولزم میں اہم کردار ادا نہیں کرتا ہے۔ غیر تقسیم کرنے والے خلیوں میں، کینیسن-5 نیوران کے اندر سب سے زیادہ افزودہ ہوتا ہے، جس میں یہ محور اور ڈینڈرائٹس تک پھیلے ہوئے بڑے مائکرو ٹیوبل بنڈلوں کو سجاتا ہے۔ مثال کے طور پر، یہ دکھایا گیا ہے کہ کنسین-5 کے دستک کے پس منظر میں نیوران مکمل طور پر قابل عمل رہتے ہیں، لیکن یہ کہ نیورونل نشوونما اور مورفوجینیسیس میں تبدیلیاں آتی ہیں۔ نیوران کی فارماکولوجیکل روک تھام کی ترقی اور کے آئی ایف 11 کے ایس آئی آر این اے ناک ڈاؤن کے نتیجے میں لمبے محور، زیادہ شاخیں، محور کے پیچھے ہٹنے کے کم مقابلے اور نشوونما کے شنک کے پسپا سبسٹریٹس کے ساتھ رابطے کو چالو کرنے میں ناکامی ہوتی ہے۔ ہجرت کرنے والے نیوران میں، کے آئی ایف 11 کی روک تھام نیوران کو بے ترتیب انداز میں منتقل کرنے کا سبب بنتی ہے اور مختصر معروف عمل تشکیل دیتی ہے۔ کے آئی ایف 15 اور کے آئی ایف 23 کی طرح کے آئی ایف 11 کے بارے میں خیال کیا جاتا ہے کہ وہ محور کے ساتھ دو سمتوں میں حرکت کرنے والے چھوٹے مائکرو ٹیوبلز کے محاصرے کے طور پر کام کرتا ہے، جو سائٹوپلاسمک ڈائنین کے خلاف مخالف قوتوں کا استعمال کرتا ہے۔ بالغ نیوران میں، کے آئی ایف 11 ڈینڈرائٹس میں مختصر مائکرو ٹیوبلز کی نقل و حرکت کو محدود کرتا ہے، جو ڈینڈرائٹس کی خصوصیت کی شکل کی تشکیل میں معاون ہوتا ہے۔ کے آئی ایف 11 کا اظہار بالغ ڈورسل روٹ گینگلیئن نیوران میں بھی ہوتا ہے، حالانکہ یہ بہت کم سطح پر ہوتا ہے۔ بالغ نیوران میں اس کا مختصر مائکرو ٹیوبل ٹرانسپورٹ کی شرح کو روکنے پر اسی طرح کا اثر پڑتا ہے لہذا فارماکولوجیکل انبیشن اور بالغ کے آئی ایف 11 کا ایس آئی آر این اے ناک ڈاؤن بالغ محور کی تخلیق نو کے اضافے کے لیے ایک ممکنہ علاج کا ذریعہ ہو سکتا ہے۔ تاہم، نیوروجینسیس میں کینیسن-5 کے لیے ویو رول میں واضح ہونا باقی ہے۔ قابل ذکر بات یہ ہے کہ ممکنہ اینٹی کینسر تھراپی کے لیے کینیسن-5 انفیکٹرز کے حالیہ مرحلے I یا مرحلے II کے ٹرائلز سے گزرنے والے مریضوں میں غیر معمولی پردیی نیوروپیتھیز کا مشاہدہ نہیں کیا گیا ہے۔ فنکشنل ریگولیشن 1995 میں، کینیسن-5 کو اس کی سی-ٹرمینل دم کے اندر بعد از ترجمہ فاسفوریلیٹ ہونے کا تعین کیا گیا تھا۔ ایک بار جب کینسین-5 کو ابتدائی پروفیس میں اس باقیات پر فاسفوریلیٹ کیا جاتا ہے، تو یہ مائٹوٹک اسپنڈل میں مقامی ہوجاتا ہے جہاں یہ مائکرو ٹیوبلز سے جڑا ہوتا ہے۔ 2008 میں کینیسن-5 دم پر ایک اضافی فاسفوسائٹ کی نشاندہی کی گئی تھی، تاہم، اس باقیات پر کل مائیکرو ٹیوبل سے وابستہ کینیسن-5 کا صرف 3 فیصد فاسفوریلیٹڈ ہے۔ اگرچہ کینیسن-5 دم، ڈنٹھل اور موٹر کے اندر اضافی فاسفوسائٹس یا دیگر ترجمے کے بعد کی تبدیلیوں کی نشاندہی کی گئی ہے، لیکن مائیٹوسس میں اپنے ضروری کاموں کو انجام دینے کے لیے کینیسن-5 کے لیے کوئی دوسری ترمیم ضروری ثابت نہیں ہوئی ہے۔ کینیسن-5 کو دوسرے پروٹین کے ساتھ براہ راست تعامل کے ذریعے بھی منظم کیا جاتا ہے۔ مائکرو ٹیوبل سے وابستہ پروٹین، ٹی پی ایکس 2، مائٹوسس میں کینیسن-5 کے ساتھ وابستہ ہے۔ ان کا تعامل مائٹوٹک تکلے میں کینیسن-5 کی لوکلائزیشن، تکلے کو مستحکم کرنے اور تکلے کے قطب کی علیحدگی کے لیے ضروری ہے۔ کینیسین-5 کو ویو اور ان وٹرو میں ڈائنکٹین سب یونٹ پی 150 گلیوڈ کے ساتھ ساتھ سیل سائیکل سے متعلق بہت سے دوسرے پروٹینوں کے ساتھ تعامل کرتے ہوئے دکھایا گیا ہے، تاہم، اس بات کی تصدیق کے لیے اضافی تجربے کی ضرورت ہے کہ کینیسین-5 کے عام طور پر کام کرنے کے لیے ان کی ایسوسی ایشن ضروری ہے۔ سالماتی میکانزم اے ٹی پی ہائیڈرولیسس کینیسن-5، تمام موٹر پروٹینوں کی طرح، پانی کے مالیکیول کا استعمال کرتے ہوئے اے ٹی پی کو اے ڈی پی اور غیر نامیاتی فاسفیٹ میں توڑ دیتا ہے، اور کیمیائی توانائی کو مائکرو ٹیوبلز کے ساتھ طاقت اور حرکت میں تبدیل کرتا ہے۔ حرکی تجربات اس شرح کو ظاہر کرتے ہیں کہ اتپریرک میں درمیانی مراحل کتنی تیزی سے ہوتے ہیں اور کینیسن-5 حرکیات پر مطالعات کا سب سے وسیع مجموعہ انسانی پروٹین پر رہا ہے۔ ایکس رے کرسٹلگرافی، کریو الیکٹران مائکروسکوپی، اور ریئل ٹائم انفراریڈ سپیکٹروسکوپی کا استعمال مختلف اتپریرک درمیانی حالتوں میں کینیسن-5 کی ساخت کی پیمائش کے لیے کیا گیا ہے۔ ثانوی ڈھانچے میں تبدیلیاں، یا کنفارمیشنل سوئچنگ، اتپریرک فعال سائٹ میں بائیو کیمیکل تبدیلیوں کو سیلولر حرکت کے لیے ضروری بڑی نقل و حرکت میں تبدیل کرنے اور بڑھانے کے لیے ضروری ہے۔ مثال کے طور پر، اے ٹی پی ہائیڈرولیسس کا پہلا مرحلہ، جو کہ پانی کے مالیکیول کے ذریعے اے ٹی پی کے ٹرمینل فاسفیٹ کا حملہ ہے، کسی بھی کینیسن پروٹین میں ایکس رے کرسٹلگرافی کے ذریعے مشاہدہ نہیں کیا گیا تھا، حال ہی میں کینیسن-5 میں۔ اس کرسٹل ڈھانچے سے پتہ چلتا ہے کہ پانی کے ایک نہیں بلکہ دو مالیکیول تھے اور وہ ایک دوسرے کے ساتھ قریبی تعلق میں ہیں۔ حقیقی وقت میں اور ایک مختلف ذیلی خاندان میں کینیسن پروٹین میں کینیسن-5 اتپریرک کو ٹریک کرنے کے لیے ایک متبادل طریقہ کے ذریعے دو پانی کے اتپریرک ماڈل کی تجویز اور تصدیق کی گئی تھی۔ دو پانی کے اتپریرک ماڈل بھی ایک متفرق موٹر پروٹین، میوسن میں تجویز کیے جاتے ہیں، اور اس کے کرسٹل ڈھانچے میں سے ایک میں تجرباتی طور پر مشاہدہ کیا جاتا ہے۔ مکینیکل خصوصیات کینیسن-5 خاندان کی مخالف متوازی ٹیٹریمیرک تنظیم بنیادی طور پر دیگر کینیسن کی اکثریت سے مختلف ہے جو ڈائمر ہیں، جیسے کہ اچھی طرح سے خصوصیات والے روایتی کینیسن-1 (کے آئی ایف 5 بی)۔ روایتی کینیسین اس انداز میں ڈائمرائز ہوتا ہے کہ اتپریرک (سر) ڈومین کمپلیکس کے ایک سرے پر ایک ساتھ ہوتے ہیں تاکہ مائیکرو ٹیوبل کے ساتھ ہاتھ سے ہاتھ کی نقل و حرکت کو آسان بنایا جا سکے جو سیلولر کارگو کی طویل فاصلے تک، ہدایت شدہ نقل و حمل کو قابل بناتا ہے۔ کینیسن-5 پروٹین کی منفرد اسمبلی نہ صرف پروٹین کمپلیکس کو ایک مختلف سیلولر فنکشن (اینٹی پیریلل مائکرو ٹیوبل سلائڈنگ، جو اوپر بیان کیا گیا ہے) کے لیے منظم کرتی ہے بلکہ کلاسیکی تجربات کا استعمال کرتے ہوئے موٹر کی مکینیکل خصوصیات کا مطالعہ کرنا بھی مشکل بنا دیتی ہے جو ڈائمرک کینیسن کے لیے بنائے گئے تھے۔ ان رکاوٹوں کو یا تو کینیسن-5 کی ٹیٹرامیرک تنظیم کا تجزیہ کرنے کے لیے اصل تجربات کو اپنانے، یا چھوٹے کینیسن-5 پروٹین کے ساتھ کام کرنے سے دور کیا گیا ہے جو روایتی کینیسن کی طرح ڈائمر بناتے ہیں۔ کینیسن-5 حرکت پذیری کے تجزیے کے سب سے نمایاں نتائج یہ ہیں کہ یہ 50 نینو میٹر فی سیکنڈ کی حد میں رفتار کے ساتھ سست ہے-روایتی کینیسن-1 سے تقریبا 10 گنا سست ہے اور یہ بہت زیادہ میکانی قوت پیدا کر سکتا ہے (7-9 پیکو نیوٹن فی مالیکیول)۔ یہ اقدار تین قسم کے تجرباتی ڈیٹا سے آتی ہیں: مائیکرو ٹیوبل گلائڈنگ اسیسز، سنگل مالیکیول موٹیلٹی اسیسز، اور آپٹیکل ٹریپ اسیسز۔ مائکرو ٹیوبل گلائڈنگ اسیس میں، کینیسن شیشے کی سطح سے منسلک ہوتے ہیں اور مائکرو ٹیوبلز کو اوپر رکھا جاتا ہے۔ چونکہ موٹروں کو شیشے سے منسلک کیا جاتا ہے، اس لیے ان کا متحرک طرز عمل لنگر بند کینیسین کے پار مائیکرو ٹیوبل کی حرکت میں تبدیل ہوتا ہے، جیسا کہ کوئی ہجوم سرفنگ کر رہا ہوتا ہے۔ ان تجربات نے ہمیں کینیسن-5 حرکت پذیری کا پہلا تجزیہ دیا۔ مائیکرو ٹیوبلز کو پہلے شیشے کی سطح سے جوڑ کر، پھر حل میں مفت مائیکرو ٹیوبلز کے ساتھ کینیسن-5 کو شامل کرکے، مائیکرو ٹیوبل گلائڈنگ اسیس کو اپنانا ممکن تھا تاکہ یہ ظاہر کیا جا سکے کہ کینیسن-5 دو مائیکرو ٹیوبلز کو کراس لنک کر سکتا ہے اور انہیں مخالف سمتوں میں منتقل کر سکتا ہے۔ اس تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ کینیسن-5 درحقیقت اس کردار کو انجام دینے کی صلاحیت رکھتا تھا جو اس کے لیے مائٹوسس میں تجویز کیا گیا تھا-مائٹوٹک تکلے میں مخالف سمت میں مائکرو ٹیوبلز کو سلائڈنگ کرنا۔ انفرادی کینیسن-5 مالیکیولز کے رویے کا مطالعہ کرنے کے لیے، سنگل مالیکیول موٹیلٹی اسیسز مائیکرو ٹیوبلز کو شیشے کی سطح سے جوڑ کر، پھر فلووروفور کے ساتھ کینیسن-5 کا ایک پتلا محلول شامل کر کے انجام دیے گئے۔ یہ تجرباتی سیٹ اپ مبصر کو مائیکرو ٹیوبل کے ساتھ "چلتے ہوئے" علیحدہ کینیسن-5 مالیکیولز کی پیروی کرنے کے قابل بناتا ہے، جو نہ صرف رفتار کے بارے میں معلومات فراہم کرتا ہے، بلکہ عمل کے بارے میں بھی معلومات فراہم کرتا ہے-ایک کینیسن کی مائیکرو ٹیوبل کے ساتھ ساتھ متعدد قدم اٹھانے کی صلاحیت۔ اس سیٹ اپ میں کینیسین-5 نے دو سمت کا مظاہرہ کیا ہے۔ اس طرح یہ دونوں سمتوں میں "چل" سکتا ہے۔ سمت کی تبدیلی کو اعلی درستگی کے ساتھ کنٹرول کیا جاتا ہے۔ سنگل مالیکیول موٹیلٹی اسیسوں میں، کینیسن-5 کی رفتار مائیکرو ٹیوبل گلائڈنگ اسیسوں میں نظر آنے والی رفتاروں سے ملتی جلتی تھی، اور موٹر کو کمزور طور پر عمل آور دیکھا گیا۔ آپٹیکل ٹریپ تجربات میں، کینیسن-5 مالیکیول ایک مالا سے منسلک ہوتے ہیں جسے باریک فوکسڈ لیزر کے ذریعے اپنی جگہ پر رکھا جا سکتا ہے۔ مالا کو مائکرو ٹیوبل کے قریب منتقل کرنے سے، کینیسن مائکرو ٹیوبل سے جڑا رہ سکتا ہے اور مالا کو پیچھے کھینچتے ہوئے قدم بڑھانا شروع کر سکتا ہے۔ چونکہ مالا کو ٹریپ لیزر کے ذریعے اپنی جگہ پر رکھا جا رہا ہے، اس لیے یہ ایک اسپرنگ کی طرح کام کرتا ہے اور ایک ایسی قوت کا استعمال کرتا ہے جو کینیسین کی آگے کی حرکت کا مقابلہ کرتی ہے۔ یہ اسٹال فورس کی پیمائش کی اجازت دیتا ہے-طاقت کی زیادہ سے زیادہ مقدار جو موٹر کے ذریعے مائیکرو ٹیوبل سے نکلنے سے پہلے لگائی جا سکتی ہے۔ آپٹیکل ٹریپ کے تجربات سے پتہ چلتا ہے کہ کینیسن-5 خارج ہونے سے پہلے زیادہ سے زیادہ 7 پیکو نیوٹن قوت پیدا کرتا ہے، لیکن یہ کہ اس کا طرز عمل دوسرے کینیسن سے مختلف ہے کیونکہ کوئی قابل مشاہدہ سطح مرتفع مرحلہ نہیں تھا جس میں موٹر جانے سے پہلے اپنی زیادہ سے زیادہ قوت پیدا کرنے پر "جدوجہد" کرتی ہے۔ حرکی اعداد و شمار کے اخراج سے پتہ چلتا ہے کہ کنیسن-5 کے ذریعے نظری جال میں پیدا ہونے والی زیادہ سے زیادہ مشاہدہ شدہ قوت دراصل ایک کم تخمینہ ہے اور یہ کہ یہ نظریاتی طور پر زیادہ سے زیادہ 9 پیکو نیوٹن تک طاقت کا استعمال کر سکتا ہے، حالانکہ اس کی جانچ کے لیے مزید تجرباتی کام کی ضرورت ہے۔ کے آئی ایف 11 کے فارماکولوجیکل انفیکٹرز انفیکٹرز کو کینسر کے علاج میں کیموتھراپیٹک ایجنٹوں کے طور پر تیار کیا گیا ہے۔ ایسی دوائیں جو خاص طور پر صرف انسانی کینیسن-5 کو روکتی ہیں وہ ٹیکسینس اور ونک الکلائڈز کے متبادل ہیں جو مائیکرو ٹیوبلز کو نشانہ بناتے ہیں، اور اس طرح تمام خلیات، اور جو فی الحال طبی طور پر استعمال ہوتے ہیں۔ کینیسن-5 کی روک تھام خلیوں کو مائٹوٹک گرفتاری سے گزرنے کا سبب بنتی ہے، اپوپٹوسس سے گزرتی ہے اور مونوسٹر تکلے بناتی ہے۔ پہلا کے آئی ایف 11 انفیکٹر، موناسٹرول سیل پارगम्य مرکبات کی ایک بڑی لائبریری کی کیمیائی اسکرین میں دریافت ہوا۔ اس کے بعد سے، سائنسی ادب میں ایلوسٹیرک انفیکٹرز کی 100 سے زیادہ مختلف کیمیائی کلاسوں کی نشاندہی کی گئی ہے اور ان میں انسانی کینیسن-5 کے خلاف طاقت کی ایک وسیع رینج ہے۔ عام کے آئی ایف 11 انفیکٹرز میں شامل ہیں: موناسٹرول، ایس-ٹریٹل-ایل-سسٹین (ایس ٹی ایل سی)، ایچ آر 22 سی 16، اور سی کے 0106023۔ انسانی کینیسین-5 انفیکٹرز کی اکثریت انتخابی ہوتی ہے، کیونکہ وہ ایک منشیات 'ہاٹ اسپاٹ' سے جڑے ہوتے ہیں، جو α2 اور α3 ہیلیکس کے باقیات اور موٹر ڈومین کی سطح پر لچکدار L5 لوپ پر مشتمل ہوتا ہے۔ اس ایل 5 لوپ میں سپر فیملی کے اندر کینیسن-5 آرتھولوگس اور دیگر کینیسن کے درمیان اعلی ترتیب کی تغیر پذیری ہے۔ انسانی کینیسین-5 میں ایل 5 لوپ انفیکٹر کے ارد گرد بند ہو جاتا ہے اور انفیکٹر کی عدم موجودگی میں کھلا رہتا ہے۔ یہ ساختی تبدیلیاں اتپریرک فعال سائٹ میں دیگر تبدیلیوں کے ساتھ منسلک ہیں۔ انسانی کینیسین-5 موٹر ڈومین میں انفیکٹر بائنڈنگ کے دیگر مقامات کی نشاندہی کی گئی ہے۔ ایل 5 جیب سے جڑے انابائٹرز کے لیے، روک تھام کا طریقہ کار یہ ہے کہ وہ اتپریرک فعال سائٹ سے اے ڈی پی کی رہائی کو سست کرتے ہیں اور اے ٹی پی پر منحصر دشاتمک حرکت کو روکتے ہیں۔ تاہم، مائکرو ٹیوبلز کے ساتھ کینیسن-5 کی طرف سے پہلے سے نامعلوم پھیلی ہوئی حرکت کا انکشاف اس وقت ہوا جب موناسٹرول نے موٹر ڈومین کو روک دیا۔ چھوٹے مالیکیول انفیکٹرز نہ صرف خلیوں میں نینو موٹورز کو سمجھنے کے لیے اہم اوزار ہیں بلکہ ان میں کلینک میں آلات کے طور پر کام کرنے کی صلاحیت بھی ہوتی ہے۔ انسانی کینیسن-5 انفیکٹرز سے متاثر ہو کر، مائٹوٹک گرفتاری کے نتیجے میں کچھ ٹیومر سیل لائنوں اور انسانی ٹیومر زینو گرافٹ ماڈلز میں اپوپٹوسس ہوتا ہے۔ ان امید افزا پری کلینیکل مطالعات کے ساتھ، اسپینیسیب (ایس بی-715992 ؛ سائٹوکینیٹکس/جی ایس کے)، سائٹوکینیٹکس/جی ایس کے سے ایس بی-743921، مرک سے ایم کے-0731، فلانیسیب (اے آر آر وائی-520) (ارے بائیو فارما)، اور لیٹرونیسیب (ایل وائی 2523355) (ایلی للی) کلینیکل ٹرائلز میں داخل ہو چکے ہیں۔ اگرچہ دوسری نسل کے کینیسین-5 انفیکٹرز کو بہتر کامیابی ملی ہے، لیکن کسی کو بھی مکمل طور پر تیار اور کینسر مخالف علاج کے طور پر فروخت نہیں کیا گیا ہے۔ انسانی کینیسین-5 میں ایل 5 جیب (ایل 5، α2، اور α3) میں مخصوص باقیات کے کردار کا تجربہ کیا گیا ہے، لیکن ابھی تک منظم طریقے سے اس کی کھوج نہیں کی گئی ہے۔ ان تغیرات کے تجربات کا ابتدائی مقصد یہ طے کرنا تھا کہ منشیات کی نشوونما میں کون سے باقیات کی سب سے زیادہ فارماکولوجیکل اہمیت ہے۔ مثال کے طور پر، کے آئی ایف 11 جین میں تغیرات مائٹوٹک سیل لائنوں کی مزاحمت کو موناسٹرول اور ایس ٹی ایل سی جیسے انفیکٹرز تک پہنچاتے ہیں۔ مثال کے طور پر، انفیکٹر بائنڈنگ پاکٹ، R119A، D130A، L132A، I136A، L214A اور E215A میں پوائنٹ میوٹیشنز موناسٹرول کو مزاحمت فراہم کرتے ہیں، جبکہ R119A، D130A اور L214A میوٹیشنز STLC کو مزاحمت فراہم کرتے ہیں۔ فنکشن کے نقصان کے تجربات کے برعکس، ڈروسفیلا کینیسن-5 کا استعمال کرتے ہوئے ایک گین آف فنکشن کے تجربے سے پتہ چلتا ہے کہ تمام ایل 5 ڈائریکٹڈ انفیکٹر کینیسن-5 موٹر ڈومین کے اندر اسی طرح سے بات چیت نہیں کرتے ہیں۔ تغیراتی مطالعات کا دوسرا مقصد یہ سمجھنا ہے کہ خلیوں میں منشیات کی مزاحمت صرف ایک باقیات کو تبدیل کرنے سے کیسے ہوتی ہے۔ انفیکٹر بائنڈنگ جیب میں یہ تبدیلیاں کینیسین-5 موٹر ڈومین کی مرکزی بیٹا شیٹ کی ساختی ترمیم، یا موڑ کے ساتھ منسلک ہیں۔ اس طریقے سے، ایل 5 لوپ براہ راست نیوکلیوٹائڈ بائنڈنگ کو کنٹرول کرنے کے قابل ہو سکتا ہے اور بیٹا شیٹ موڑ ملحقہ مائکرو ٹیوبل بائنڈنگ سائٹ کو ہیرا پھیری کر سکتا ہے۔ یہ وضاحت کر سکتا ہے کہ ٹیومر کے خلیات کس طرح تیزی سے کے آئی ایف 11 انفیکٹرز کے خلاف منشیات کے خلاف مزاحم بن سکتے ہیں۔ انسانی تغیرات کے آئی ایف 11 تغیرات کو کینسر میں بڑے پیمانے پر بیان کیا گیا ہے، اور کے آئی ایف 11 انفیکٹرز کے ساتھ بہت سے ٹرائلز جاری ہیں۔ کلینیکل اہمیت کے آئی ایف 11 میں جرملین اتپریورتن کووریوریٹینوپیتھی، لمفیڈیما، یا ذہنی معذوری (ایم سی ایل ایم آر) کے ساتھ یا اس کے بغیر مائیکروسیفلی کا سبب بنتا ہے۔ یہ سنڈروم متغیر اظہار کے ساتھ ایک آٹوسومل غالب عارضے کے طور پر مشاہدہ کیا جاتا ہے لیکن یہ وقفے وقفے سے بھی ہو سکتا ہے۔ اس کی خصوصیت ہلکی سے شدید مائکروسیفلی ہوتی ہے، جو اکثر نشوونما میں تاخیر، آکولر نقائص اور لمفیڈیما سے وابستہ ہوتی ہے، عام طور پر پیروں کے ڈورسم پر۔ مریضوں کی فینوٹائپک تشخیص (این = 87) میں 91 فیصد میں مائیکروسیفلی، 72 فیصد میں آنکھوں کی بے ضابطگیاں، 67 فیصد میں دانشورانہ معذوری اور 47 فیصد مریضوں میں لمپیڈیما کا انکشاف ہوا۔ غیر متاثرہ کیریئر نایاب تھے (87 میں سے 4:5 ٪)۔ تشخیص کے لیے خاندانی تاریخ ضروری نہیں ہے ؛ 31 فیصد (52 میں سے 16) نئے کیس تھے۔ تمام موروثی معاملات، اور ایم سی ایل ایم آر کے 50 فیصد چھٹپٹ معاملات جرم لائن کے آئی ایف 11 اتپریورتن کی وجہ سے ہوتے ہیں۔ مزید پڑھنے کے لیے حوالہ جات بیرونی روابط بلاک، اسٹیون گلبرٹ، سوسن کپور، ترون کم، سنیونگ کوزیلسکی، فرینک مورز، کیرولن رائس، سارہ روزن فیلڈ، اسٹیون ووزک، ایڈورڈ ورتھیلیک، ڈیوڈ