Clb 5,6 (Cdk1)
سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 خمیر میں بی ٹائپ، ایس فیز سائکلین ہیں جو سیل سائیکل ریگولیشن میں مدد کرتے ہیں۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 سی ڈی کے 1 کو باندھتے اور چالو کرتے ہیں، اور ایس مرحلے میں داخل ہونے کے لیے ان سائکلین کی اعلی سطح کی ضرورت ہوتی ہے۔ سی ڈی کے 1 سے منسلک ایس فیز سائکلین براہ راست ڈی این اے کی نقل کے ساتھ ساتھ سیل سائیکل کے اگلے مرحلے میں ترقی کو متحرک کرتا ہے۔ ساخت سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 ابھرتے ہوئے خمیر میں چھ بی قسم کے سائکلین میں سے دو ہیں، جن میں ایک مختصر، ہائیڈروفوبک امینو ایسڈ کی ترتیب ہوتی ہے جو ڈی این اے کی نقل کو منظم کرنے والے کچھ پروٹینوں کے ہدف شدہ انحطاط اور فاسفوریلیشن کی اجازت دیتی ہے۔ یہ انحطاط دیر سے مائٹوسس میں ہوتا ہے اور انافس پروموٹنگ کمپلیکس (اے پی سی) کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ سی ایل بی 1-6 تمام اہداف اور واحد خمیر سائکلین پر منحصر کنیز، سی ڈی کے 1 کو چالو کریں۔ سی ایل بی 6 کو 380 امینو ایسڈ (44.1kDa) کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے، اور یہ 49.7% سی ایل بی 5 سے ملتا جلتا ہے۔ سی ایل بی 5 435 امینو ایسڈ (50.4 کے ڈی اے) ہے۔ ہائیڈروفوبک باکس موٹف دونوں سائکلین کے سی ٹرمینس پر پایا جاتا ہے، اور اس میں بی قسم کے سائکلین کی خصوصیت رکھنے والی محفوظ FLRRISK ترتیب شامل ہے۔ فنکشن سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 ایک ریگولیٹری نیٹ ورک کا حصہ ہیں جو ایس مرحلے کے دوران ڈی این اے کی نقل شروع کرتے ہیں۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کی سطح جی 1 (دیگر بی قسم کے سائکلین سے پہلے) کے دوران بڑھتی ہے اور ایس اور ایم مراحل میں بلند رہتی ہے۔ ایس مرحلے کے دوران، سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کا اظہار بیک وقت دوسرے جینوں کے ساتھ کیا جاتا ہے جو انفرادی ڈی این اے اسٹرینڈ کی نقل اور علیحدگی کے لیے درکار پروٹین کو انکوڈنگ کرتے ہیں۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 مختلف طور پر سی ڈی کے 1 سے منسلک ہوتے ہیں، اور یہ ایکٹیویشن براہ راست نقل کے مختلف ماخذوں کی فائرنگ کو فروغ دیتا ہے۔ سی ایل بی 5، خاص طور پر، امینو ایسڈ کا منفرد ہائیڈروفوبک سیکشن ہے جو ڈی این اے پر پابند پری ریپلیکیشن کمپلیکس میں پروٹین کے ساتھ مخصوص تعاملات کی اجازت دیتا ہے اور سی ایل بی 5 کو ڈی این اے ریپلیکیشن کی ابتداء میں مقامی بنانے میں مدد کرتا ہے۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 ایس مرحلے کے دوران اسپنڈل پول باڈی ڈپلیکیشن میں بھی مدد کرتے ہیں، بنیادی طور پر جب سی ایل بی 3 اور سی ایل بی 4 غیر فعال ہوتے ہیں۔ تاہم، اسپنڈل پول باڈی ڈپلیکیشن اور سی ایل بی 5 کے ساتھ اس کے تعاملات کو اچھی طرح سے نہیں سمجھا گیا ہے۔ دیگر بی قسم کے سائکلین کے برعکس، جو ایس سی بی بائنڈنگ فیکٹر (ایس بی ایف) اور ایم سی بی بائنڈنگ فیکٹر (ایم بی ایف) کو منفی طور پر منظم کرتے ہیں، سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 جی 1 سائکلین سی ایل این 1,2,3 کی عدم موجودگی میں جی 1/ایس منتقلی کو چالو کر سکتے ہیں۔ یہ جین ریگولیٹری پروٹین جی 1/ایس جینوں کو کنٹرول کرتے ہیں، اور ان کا منفی ریگولیشن ایس مرحلے کے دوران جی 1 سائکلین کے اظہار کو بند کرنے میں مدد کرتا ہے۔ آخر میں، سی ایل بی 5-سی ڈی کے 1 کو خمیر میں سی ڈی ایچ 1 کے فاسفوریلیشن کے لیے اہم دکھایا گیا ہے، اور سی ایل بی 5 کی تباہی ایس آئی سی 1 کے ڈیفاسفوریلیشن کو فروغ دیتی ہے۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کی تباہی عام طور پر اے پی سی-سی ڈی سی 20 کے ذریعے کی جاتی ہے۔ مطالعات سے یہ بھی پتہ چلا ہے کہ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کی کمی والے خلیوں نے اسپورولیشن کی استعداد کو ڈرامائی طور پر کم کر دیا ہے۔ تعاملات Sic1 ریگولیشن سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کی سطح ایس مرحلے کے آغاز میں زیادہ ہوتی ہے، حالانکہ وہ ابتدائی طور پر جی 1 میں بڑھتے ہیں۔ خلیے کی تقسیم سے وابستگی کے بعد، G1/S سائکلین کی سطح بڑھتی ہے، Cdk1 کو باندھتی ہے، اور فوری طور پر فعال کمپلیکس بناتی ہے۔ سی۔ ایل۔ بی۔ 5 اور سی۔ ایل۔ بی۔ 6 بھی ظاہر کیے جاتے ہیں اور سی۔ ڈی۔ کے۔ 1 کو باندھتے ہیں، لیکن سی۔ ایل۔ بی۔ مخصوص سی۔ ڈی۔ کے۔ 1 انفیکٹر سی۔ سی۔ 1 کے کنٹرول کی بنیاد پر غیر فعال ہیں۔ جی 1/ایس سائکلین-سی ڈی کے کمپلیکس ایس آئی سی 1 کی تباہی کو فروغ دیتے ہیں اور سی ایل بی 5-اور سی ایل بی 6-سی ڈی کے 1 کمپلیکس کو چالو کرنے کی اجازت دیتے ہیں۔ جیسے جیسے خمیر خلیہ جی 1 کے ذریعے منتقل ہوتا ہے، وہاں سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6-سی ڈی کے 1 کمپلیکس کا ایک بڑا، غیر فعال پول ہوتا ہے۔ ایکٹیویشن کے بعد، سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 ڈی این اے کی نقل کو متحرک کر سکتے ہیں، بلکہ فاسفوریلیٹ ایس آئی سی 1 کو بھی تباہ کرنے کے لیے نشانہ بنا سکتے ہیں۔ اس طرح، سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 سیل سائیکل کے اس عرصے کے دوران اپنی خود کی سرگرمی کو فروغ دینے کے لیے ایک مثبت فیڈ بیک لوپ میں مصروف ہیں۔ اے پی سی انٹرایکشن جی 1 کے دوران ایک اہم ریگولیٹری واقعہ انافس پروموٹنگ کمپلیکس (اے پی سی-سی ڈی ایچ 1) کی غیر فعالیت ہے۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 ایکٹیویشن اے پی سی-سی ڈی ایچ 1 کو غیر فعال کرنے میں مدد کرتا ہے، حالانکہ مکمل طریقہ کار واضح نہیں ہے۔ یہ قیاس کیا جاتا ہے کہ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 اے پی سی-سی ڈی ایچ 1 انحطاط کے لیے کسی حد تک مزاحم ہیں کیونکہ وہ بنیادی طور پر اے پی سی-سی ڈی سی 20 کے ذریعے منظم ہوتے ہیں۔ تغیرات میٹوسس نقل کی مخصوص ابتداء ہیں جو سیل سائیکل کے ابتدائی یا آخری مرحلے میں متحرک ہوتی ہیں۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 انکوڈنگ جینوں کو نشانہ بنانے والے ڈائریکٹڈ میوٹیشنل اسٹڈیز سے پتہ چلا ہے کہ دونوں عام طور پر سیل سائیکل کے اوائل میں نقل شدہ ابتداء کو چالو کر سکتے ہیں، لیکن صرف سی ایل بی 5 دیر سے مرحلے کی ابتداء کو چالو کر سکتا ہے۔ سی ایل بی 5 کے بغیر خلیوں میں، ایس مرحلے کو بڑھایا جاتا ہے کیونکہ آخری مرحلے کی ابتداء کو سی ایل بی 5 سے متحرک نقل کے بجائے نقل کے کانٹوں کے بتدریج پھیلاؤ کے ذریعے نقل کرنے کی ضرورت ہوتی ہے۔ سی ایل بی 6 کے بغیر خلیوں میں بہت کم یا کوئی فینوٹائپک تبدیلیاں نہیں ہوتی ہیں کیونکہ سی ایل بی 5 دونوں قسم کی ابتداء کو متحرک کر سکتا ہے۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کے لیے ڈبل میوٹینٹس میں، ایس مرحلے کا آغاز (لمبائی کے بجائے) نمایاں طور پر تاخیر کا شکار ہوتا ہے، لیکن آخر کار دوسرے مائٹوٹک سائکلین (سی ایل بی 1-4) کی تشکیل کے ضمنی نتیجہ کے طور پر ہوگا۔ ان ڈبل میوٹینٹس میں ایس مرحلے کی لمبائی عام ہے۔ مییوسس اسی طرح کے مطالعات نے سی ایل بی 5 یا سی ایل بی 6 کی کمی والے خلیوں میں مائٹوسس اور مییوسس کی ترقی کے درمیان ایک اہم فرق دکھایا ہے، بنیادی طور پر یہ کہ مییوسس ایس مرحلہ سی ایل بی 5 کے بغیر مناسب طریقے سے نہیں ہو سکتا۔ یہ متغیر خلیات اپنے غیر نقل شدہ ڈی این اے کو الگ کرتے ہیں، جو مہلک ہے، اور ایم ای سی 1-ڈی این اے ایم-فیز چیک پوائنٹ کو چالو کرنے میں ناکام رہتے ہیں، جو عام طور پر سیل سائیکل کی ترقی کو روکتا ہے اگر ڈی این اے کی نقل نہیں کی گئی ہے۔ سی ایل بی 1-4 کی سی ایل بی 5 سرگرمی کی کمی کی تلافی کرنے میں ناکامی کو ممکنہ طور پر وقت اور جمع ہونے کے دلائل سے سمجھایا جا سکتا ہے۔ اس مفروضے میں، سیل سائیکل کے اگلے مرحلے میں آگے بڑھنے کے لیے سائکلین کی تعداد میں اضافہ اور جمع ہونا ضروری ہے۔ مائٹوٹک نمو میں، سی ایل بی 1-4 کی سطح سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کی سطح کے فورا بعد بڑھ جاتی ہے، جس سے تیزی سے جمع ہونے کی اجازت ملتی ہے۔ مییوٹک نمو میں، سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کے اظہار کے بعد سی ایل بی 1-4 کی سطح میں اضافے سے پہلے کا وقفہ لمبا ہوتا ہے، جس سے جمع ہونے کے لیے کم وقت ملتا ہے اور اس کے نتیجے میں بحالی کے لیے اعلی سطح کی ضرورت ہوتی ہے۔ اس بات کے بھی شواہد موجود ہیں کہ سی ایل بی 5 اتپریورتن خلیوں میں ڈبل اسٹرینڈ بریکس (ڈی ایس بی) سے ڈی این اے کے دوبارہ ملاپ کا امکان کم ہوتا ہے، جو اس سی ایل بی 5 ضابطے کا ضمنی اثر ہو سکتا ہے۔ سی ایل بی 5 اور سی ایل بی 6 کے درمیان فرق ان دونوں سائکلین کے درمیان "ٹھیک ٹھیک اور ناقص طور پر سمجھے جانے والے" فعال فرق ہیں۔ سی ایل بی 5 نقل کے ابتدائی اور آخری مرحلے کی ابتداء کو متحرک کرتا ہے، جبکہ سی ایل بی 6 صرف آخری مرحلے کی ابتداء کو متحرک کرتا ہے۔ فنکشنل طور پر، سی ایل بی 5 میں ایک مائٹوٹک ڈیسٹرکشن باکس بھی ہے جو مختلف پروٹولائٹک افعال میں شامل کیا گیا ہے۔ سی ایل بی 5 کو سی ایل این 1-3 ٹرپل میوٹینٹس کو بچانے کے لیے بھی دکھایا گیا ہے، جو بی قسم کے خمیر سائکلین میں منفرد ہے۔ حوالہ جات سیل سائیکل