Fetal bovine serum
فیٹل بووائن سیرم (ایف بی ایس) ذبح خانے میں جمع کرنے کے بند نظام کے ذریعے مویشیوں کے جنین سے نکالے گئے خون سے حاصل کیا جاتا ہے۔ فیٹل بووائن سیرم یوکرائیوٹک خلیوں کے ان وٹرو سیل کلچر کے لیے سب سے زیادہ استعمال ہونے والا سیرم ضمیمہ ہے۔ اس کی وجہ یہ ہے کہ اس میں اینٹی باڈیز کی سطح بہت کم ہوتی ہے اور اس میں نشوونما کے زیادہ عوامل ہوتے ہیں، جس سے بہت سے مختلف سیل کلچر ایپلی کیشنز میں استعداد کی اجازت ملتی ہے۔ گلوبولر پروٹین، مویشیوں کا سیرم البیومین (بی ایس اے)، جنین مویشیوں کے سیرم کا ایک اہم جزو ہے۔ جنین کے مویشیوں کے سیرم میں پروٹین کی بھرپور قسم کلچر شدہ خلیوں کو ایک ایسے میڈیم میں برقرار رکھتی ہے جس میں وہ زندہ رہ سکتے ہیں، بڑھ سکتے ہیں اور تقسیم ہو سکتے ہیں۔ چونکہ یہ ایک حیاتیاتی پروڈکٹ ہے، اس لیے ایف بی ایس ایک مکمل طور پر متعین میڈیا جزو نہیں ہے، اور اس طرح بیچوں کے درمیان ساخت میں فرق ہوتا ہے۔ اس کے نتیجے میں اور مہم جو ایجنٹوں کی منتقلی کے امکان کو کم کرنے کی کوشش میں، سیرم فری اور کیمیائی طور پر متعین میڈیا (سی ڈی ایم) تیار کیا گیا ہے۔ تاہم، سیرم فری میڈیا کی تاثیر محدود ہے کیونکہ بہت سی سیل لائنوں کو اب بھی بڑھنے کے لیے سیرم کی ضرورت ہوتی ہے، اور بہت سے سیرم فری میڈیا فارمولیشن صرف تنگ طور پر متعین اقسام کے خلیوں کی نشوونما میں مدد کر سکتے ہیں۔ پروڈکشن ایف بی ایس گوشت کی صنعت کا ایک ضمنی پروڈکٹ ہے۔ ایف بی ایس، سیل کلچر میں استعمال ہونے والے جانوروں کے سیرم کی اکثریت کی طرح، مویشیوں سے تجارتی ذبح خانوں میں جمع کیے گئے خون سے تیار کیا جاتا ہے جو انسانی استعمال کے لیے گوشت بھی فراہم کرتا ہے۔ ایف بی ایس کے لیے پیداوار کے عمل کا پہلا مرحلہ ذبح شدہ گائے سے جنین کو ہٹائے جانے کے بعد مویشیوں کے جنین سے خون کی کٹائی ہے۔ خون کو جراثیم سے پاک کنٹینر یا خون کے تھیلے میں جمع کیا جاتا ہے اور پھر جمنے دیا جاتا ہے۔ جمع کرنے کا عام طریقہ کارڈیک پنکچر ہے، جس میں دل میں ایک سوئی ڈالی جاتی ہے۔ یہ جنین اور ماحول سے مائکرو حیاتیات کے ساتھ سیرم کی آلودگی کے خطرے کو کم کرتا ہے۔ اس کے بعد صاف پیلے رنگ (تنکے) رنگ کے سیرم سے فائبرائن کے جمنے اور باقی خون کے خلیوں کو ہٹانے کے لیے سینٹرفیوج کیا جاتا ہے۔ سیرم کو مزید پروسیسنگ سے پہلے منجمد کر دیا جاتا ہے جو اسے سیل کلچر کے لیے موزوں بنانے کے لیے ضروری ہے۔ پروسیسنگ کے دوسرے مرحلے میں فلٹریشن شامل ہے، عام طور پر فلٹریشن چین کا استعمال کرتے ہوئے جس میں حتمی فلٹریشن تین جراثیم سے پاک 0.1 مائکرون جھلی فلٹر ہوتے ہیں۔ جراثیم کش طریقے سے پروسیس شدہ ایف بی ایس کو سخت کوالٹی کنٹرول ٹیسٹنگ کا نشانہ بنایا جاتا ہے اور اسے تجزیہ کا تفصیلی سرٹیفکیٹ فراہم کیا جاتا ہے۔ سرٹیفکیٹ ٹیسٹ کے مکمل نتائج اور سیرم کی اصل سے متعلق معلومات فراہم کرتا ہے۔ تجزیہ کے سرٹیفکیٹ تجارتی سپلائرز کے درمیان مختلف ہوتے ہیں، لیکن ہر ایک میں عام طور پر درج ذیل تفصیلات شامل ہوتی ہیں: فلٹریشن بیان، خون جمع کرنے کا ملک، تیاری کا ملک، خلیوں کی نشوونما کی کارکردگی کی جانچ، مائکروبیل نسبندی کی جانچ کے ساتھ ساتھ مائیکوپلاسما اور وائرس کی اسکریننگ، اینڈوٹاکسن، ہیموگلوبن، آئی جی جی گاما گلوٹامائل ٹرانسفرس اور کل پروٹین کی جانچ۔ جمع کرنے کے ملک کے لیے بھی ایف بی ایس کی جانچ کی جا سکتی ہے۔ جنین کو ہونے والی ممکنہ تکلیف کی وجہ سے خون جمع کرنے کے عمل کے حوالے سے اخلاقیات کے اخلاقی سوالات اٹھائے گئے ہیں۔ جنین مویشیوں کے سیرم کو جمع کرنے کے طریقوں کے بارے میں بحث ہوئی ہے۔ انٹرنیشنل سیرم انڈسٹری ایسوسی ایشن (آئی ایس آئی اے) نے ادب شائع کیا ہے جو اس بات کو یقینی بنانے کے لیے استعمال ہونے والے وسیع ضابطوں اور عمل پر تفصیل فراہم کرتا ہے کہ سیرم کو اخلاقی انداز میں جمع کیا جائے۔ اگرچہ ڈیم کو ذبح کرنے کا عمل اور کٹائی سے پہلے ذبح کرنے کے عمل میں گزرنے والا وقت سیرم کی کٹائی سے پہلے جنین کی بے ہوشی یا موت کا باعث بنتا ہے، لیکن یہ خیال کیا گیا ہے کہ زندہ نوزائیدہ بچھڑوں کی آکسیجن کی نمائش سے وہ مرنے سے پہلے آگاہی حاصل کر سکتے ہیں، جس کے نتیجے میں سیرم کی کٹائی کی اخلاقیات کے بارے میں فعال بحث ہو سکتی ہے۔ اگرچہ انڈسٹری ایسوسی ایشن تسلیم کرتی ہے کہ بعض تنظیموں کو خدشات ہیں، لیکن وہ برقرار رکھتے ہیں کہ سیرم کے تمام مجموعے جمع کرنے کے ملک میں مجاز اتھارٹی کے زیر کنٹرول رجسٹرڈ ذبح خانوں میں ویٹرنری نگرانی کے تحت ہوتے ہیں۔ سیرم کا استعمال فیٹل بووائن سیرم بہت سے مینوفیکچررز سے تجارتی طور پر دستیاب ہے، اور چونکہ وٹرو میں اگائے جانے والے خلیات انتہائی حساس ہوتے ہیں، اس لیے گاہک عام طور پر مخصوص بیچوں کی جانچ کرتے ہیں تاکہ ان کی مخصوص خلیے کی قسم کے لیے مناسب ہونے کی جانچ کی جا سکے۔ بیچ سے بیچ میں تبدیل کرتے وقت خلیوں کو مواد کے نئے بیچ کے مطابق ڈھالنا معمول ہے، مثال کے طور پر، پرانے سیرم کے 50 فیصد کو نئے سیرم کے 50 فیصد کے ساتھ ملا کر اور خلیوں کو نئے مواد کے مطابق ڈھالنے کی اجازت دے کر۔ نمو کے عوامل جیسے اجزاء کے استحکام کو برقرار رکھنے کے لیے سیرم کو منجمد رکھا جاتا ہے۔ جب سیرم پگھلا جاتا ہے تو کچھ بارش دیکھی جا سکتی ہے۔ یہ ایک عام رجحان ہے، اور یہ کسی بھی طرح سے سیرم کے معیار سے سمجھوتہ نہیں کرتا ہے۔ سیرم کو جراثیم سے پاک ٹیوبوں میں منتقل کر کے اور 5 منٹ کے لیے 400x گرام پر سینٹری فیوجنگ کر کے بارش کو ہٹایا جا سکتا ہے۔ بارش کی مقدار کو محدود کرنے کے لیے، یہ تجویز کیا جاتا ہے کہ سیرم کو ریفریجریٹر میں 2-8 ڈگری سینٹی گریڈ پر پگھلا جائے۔ اس عمل کے دوران سیرم کو باقاعدگی سے ہلایا جانا چاہیے۔ بار بار منجمد/پگھلنے کے چکروں سے گریز کرنا چاہیے، اور یہ مشورہ دیا جاتا ہے کہ سیرم کو منجمد کرنے سے پہلے ایک بار استعمال ہونے والے الکوٹس میں تقسیم کیا جائے۔ ماخذ کی تاریخ بائیوٹیکنالوجی کی صنعت اور تحقیقی شعبوں میں استعمال کے لیے تیار کردہ سیرم کو انتہائی منظم کیا جاتا ہے۔ عالمی سطح پر جانوروں سے حاصل ہونے والی تمام مصنوعات کو جمع کرنے اور ان کی نقل و حرکت پر سختی سے قابو پایا جاتا ہے۔ جانوروں سے حاصل شدہ مصنوعات کا ویٹرنری کنٹرول بڑی حد تک یورپی یونین (ڈی جی ایس اے این سی او) اور یو ایس (یو ایس ڈی اے) کے مقرر کردہ قواعد و ضوابط کی پیروی کرتا ہے۔ یورپی یونین میں جانوروں کی ضمنی مصنوعات کی درآمد کو کنٹرول کرنے والا موجودہ ضابطہ ریگولیشن (ای یو) 1069/2009 اور نفاذ دستاویز ریگولیشن (ای یو) 142/2011 کے تحت آتا ہے۔ ایف بی ایس دنیا بھر میں جمع کی جانے والی ایک مصنوعات ہے جس کے مرکزی مجموعے امریکہ، آسٹریلیا، نیوزی لینڈ، کینیڈا، وسطی امریکہ، جنوبی امریکہ اور یورپ میں مرکوز ہیں۔ 2008 میں ایف بی ایس کی عالمی فروخت کا تخمینہ عالمی سطح پر 700,000 لیٹر تھا۔ کلکٹر، مینوفیکچررز، اور عالمی سطح پر ایف بی ایس کے اختتامی صارفین آئی ایس آئی اے، انٹرنیشنل سیرم انڈسٹری ایسوسی ایشن کے ممبر ہیں۔ ممبر کمپنیاں آئی ایس آئی اے کی ویب سائٹ پر درج ہیں۔ اس پورٹل کے ذریعے رابطے کی مکمل تفصیلات دستیاب ہیں اور آئی ایس آئی اے اس اہم وسائل کو جمع کرنے اور اس کے استعمال سے متعلق کسی بھی سوال کا جواب دینے کے قابل ہے۔ انٹرنیشنل سیرم انڈسٹری ایسوسی ایشن کو جون 2006 میں پہلے سے غیر معیاری صنعت کو خود منظم کرنے کے لیے شامل کیا گیا تھا۔ آئی ایس آئی اے مشن کے بیان میں کہا گیا ہے: "آئی ایس آئی اے عالمی جانوروں کے سیرم اور جانوروں سے حاصل کردہ مصنوعات کی فراہمی کی صنعت کے کاروباری طریقوں میں اتکرجتا اور اخلاقیات کے غیر سمجھوتہ شدہ معیارات کی تعمیل کو قائم کرے گا، فروغ دے گا اور یقینی بنائے گا۔ ہماری بنیادی توجہ اصل کا پتہ لگانے، لیبلنگ میں سچائی اور مناسب معیار اور نگرانی کے ذریعے سیرم اور جانوروں سے حاصل کردہ مصنوعات کی حفاظت اور محفوظ استعمال پر ہوگی۔ "ایف بی ایس کیمیائی طور پر متعین میڈیم حوالہ جات کے متبادل کے طور پر ہیومن پلیٹلیٹ لائسیٹ (ایچ پی ایل) بھی دیکھیں۔ بیرونی لنکس فیٹل بووائن سیرم کلاس انٹرنیشنل سیرم انڈسٹری ایسوسی ایشن (آئی ایس آئی اے) بلڈ کیٹل پروڈکٹس سیل کلچر ریجینٹس کا تعارف