NKG2D
این کے جی 2 ڈی ایک ایکٹیویٹنگ ریسیپٹر (ٹرانس میمبرین پروٹین) ہے جس کا تعلق سی ٹائپ لیکٹن نما ریسیپٹرز کے این کے جی 2 خاندان سے ہے۔ این کے جی 2 ڈی کو کے ایل آر کے 1 (کلر سیل لیکٹن جیسے ریسیپٹر کے 1) جین کے ذریعے انکوڈ کیا جاتا ہے جو چوہوں میں کروموسوم 6 اور انسانوں میں کروموسوم 12 پر واقع این کے جین کمپلیکس (این کے سی) میں واقع ہے۔ چوہوں میں، اس کا اظہار این کے خلیات، NK1.1 + ٹی خلیات، γδ ٹی خلیات، فعال سی ڈی 8 + αβ ٹی خلیات اور فعال میکروفیجز کے ذریعے کیا جاتا ہے۔ انسانوں میں، یہ این کے خلیات، γδ ٹی خلیات اور سی ڈی 8 + αβ ٹی خلیات کے ذریعے ظاہر ہوتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی ایم آئی سی اور آر اے ای ٹی 1/یو ایل بی پی خاندانوں سے انڈیوسڈ سیلف پروٹین کو پہچانتا ہے جو دباؤ، مہلک تبدیل شدہ، اور متاثرہ خلیوں کی سطح پر ظاہر ہوتے ہیں۔ انسانی این کے جی 2 ڈی رسیپٹر کمپلیکس ایک ہیکسامیرک ڈھانچے میں جمع ہوتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی خود ایک ہوموڈائمر بناتا ہے جس کے آکٹوڈومین لگینڈ بائنڈنگ کے لیے کام کرتے ہیں۔ ہر این کے جی 2 ڈی مونومر ڈی اے پی 10 ڈائمر سے وابستہ ہے۔ یہ تعلق این کے جی 2 ڈی کے ٹرانس میمبرین حصے میں موجود مثبت طور پر چارج شدہ ارجنائن کے آئنک تعامل اور ڈی اے پی 10 ڈائمر کے دونوں ٹرانس میمبرین علاقوں میں منفی طور پر چارج شدہ ایسپارٹک ایسڈ کے ذریعے برقرار رکھا جاتا ہے۔ ڈی اے پی 10 ایک اڈاپٹر پروٹین کے طور پر کام کرتا ہے اور پی آئی 3 کے اور جی آر بی 2-وی اے وی 1 کمپلیکس کے پی 85 سب یونٹ کو بھرتی کرکے لگینڈ بائنڈنگ کے بعد سگنل کو منتقل کرتا ہے جو بعد میں نیچے کی طرف ہونے والے واقعات کے لیے ذمہ دار ہیں۔ چوہوں میں، متبادل اسپلیسنگ دو الگ الگ این کے جی 2 ڈی آئسوفارم پیدا کرتی ہے: لمبی (این کے جی 2 ڈی-ایل) اور مختصر (این کے جی 2 ڈی-ایس)۔ این کے جی 2 ڈی-ایل ڈی اے پی 10 کو انسانی این کے جی 2 ڈی کی طرح باندھتا ہے۔ اس کے برعکس، این کے جی 2 ڈی-ایس دو اڈاپٹر پروٹین کے ساتھ وابستہ ہے: ڈی اے پی 10 اور ڈی اے پی 12۔ ڈی اے پی 10 پی آئی 3 کے کی پی 85 ذیلی اکائی اور جی آر بی 2 اور وی اے وی 1 کے کمپلیکس کو بھرتی کرتا ہے۔ ڈی اے پی 12 آئی ٹی اے ایم موٹف رکھتا ہے اور پروٹین ٹائروسین کنیسز سائک اور زیپ 70 سگنلنگ کو چالو کرتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی لگینڈ این کے جی 2 ڈی لگینڈ انڈیوسڈ سیلف پروٹین ہوتے ہیں جو مکمل طور پر غیر حاضر ہوتے ہیں یا عام خلیوں کی سطح پر صرف نچلی سطح پر موجود ہوتے ہیں، لیکن وہ متاثرہ، تبدیل شدہ، سنسینٹ اور تناؤ والے خلیوں کے ذریعہ حد سے زیادہ ظاہر ہوتے ہیں۔ ان کے اظہار کو مختلف مراحل (ٹرانسکرپشن، ایم آر این اے اور پروٹین اسٹیبلائزیشن، سیل کی سطح سے کلیویج) پر مختلف تناؤ کے راستوں کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے۔ ان میں سے، تناؤ کے سب سے نمایاں راستوں میں سے ایک ڈی این اے کو پہنچنے والے نقصان کا ردعمل ہے۔ جینوٹوکسک تناؤ، رکے ہوئے ڈی این اے کی نقل، ٹیومرجینسیس میں خلیوں کے پھیلاؤ کو ناقص طور پر منظم کرنا، وائرل نقل یا کچھ وائرل مصنوعات اے ٹی ایم اور اے ٹی آر کنیز کو چالو کرتی ہیں۔ یہ کنیز ڈی این اے نقصان رسپانس کا راستہ شروع کرتے ہیں جو این کے جی 2 ڈی لگینڈ اپ ریگولیشن میں حصہ لیتے ہیں۔ اس طرح ڈی این اے کے نقصان کا ردعمل مدافعتی نظام کو ممکنہ طور پر خطرناک خلیوں کی موجودگی سے آگاہ کرنے میں حصہ لیتا ہے۔ تمام این کے جی 2 ڈی لگینڈ ایم ایچ سی کلاس I مالیکیولز کے لیے یکساں ہیں اور انہیں دو خاندانوں میں تقسیم کیا گیا ہے: ایم آئی سی اور آر اے ای ٹی 1/یو ایل بی پی۔ ایم آئی سی خاندان انسانی ایم آئی سی جین ایم ایچ سی لوکس کے اندر واقع ہوتے ہیں اور سات ممبروں (ایم آئی سی اے-جی) پر مشتمل ہوتے ہیں، جن میں سے صرف ایم آئی سی اے اور ایم آئی سی بی فعال نقل تیار کرتے ہیں۔ چوہوں میں ایم آئی سی جین غائب ہوتے ہیں۔ ریئٹ 1/یو ایل بی پی خاندان دس معروف انسانی ریئٹ 1/یو ایل بی پی جینوں میں، چھ انکوڈ فنکشنل پروٹین: ریئٹ 1 ای/یو ایل بی پی 4، ریئٹ 1 جی/یو ایل بی پی 5، ریئٹ 1 ایچ/یو ایل بی پی 2، ریئٹ 1/یو ایل بی پی 1، ریئٹ 1 ایل/یو ایل بی پی 6، ریئٹ 1 این/یو ایل بی پی 3۔ چوہوں میں، آرتھولوگس ریئٹ 1/یو ایل بی پی خاندان کے پروٹین تین ذیلی خاندانوں میں آتے ہیں: ری-1، ایچ 60، اور ملٹ-1۔ یو ایل بی پی 2 ایک تناؤ سے پیدا ہونے والا لگینڈ ہے جو اکثر سنسینٹ خلیوں پر پایا جاتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی لگینڈ ریگولیشن این کے جی 2 ڈی لگینڈ کے اظہار کو متعدد سطحوں پر منظم کیا جاتا ہے جیسے ٹرانسکرپشنل، آر این اے اسپلیسنگ، پوسٹ ٹرانسکرپشنل اور پوسٹ ٹرانسلیشنل۔ نقل کی سطح پر، این کے جی 2 ڈی لگینڈس کو مختلف سالماتی راستوں میں نقل کے عوامل یا ریگولیٹری ترتیب کے ذریعے منظم کیا جا سکتا ہے۔ نیز، خلیوں کے تناؤ، پھیلاؤ کے اشاروں، انفیکشن یا آکسیڈیٹیو تناؤ کے بعد این کے جی 2 ڈی لگینڈس کا ضابطہ ڈی این اے نقصان رسپانس (ڈی ڈی آر) کو چالو کرنے کے قابل ہے۔ سینسر کنیز اے ٹی ایم اور اے ٹی آر کی جکڑن مختلف چیک پوائنٹ کنیز جیسے کہ سی ایچ کے 1 اور سی ایچ کے 2 کو چالو کرنے کا باعث بنتی ہے، جو ایم آئی سی، یو ایل بی پیز یا ریٹ 1 جینز کو شامل کرنے کے لیے اہم ہیں)۔ این کے جی 2 ڈی کے خلیوں کے اظہار کے لیے اہم اشاروں میں سے ایک ڈی ڈی آر کا متحرک ہونا ہے جس کے ساتھ سینسینس پروگرام بھی شامل ہے۔ آر این اے اسپلیسنگ ایک اور طریقہ کار ہے جو این کے جی 2 ڈی لگینڈ کے اظہار کو متاثر کرتا ہے۔ ایم آئی سی اے، یو ایل بی پی 4 اور یو ایل بی پی 5 کے لیے، متبادل اسپلیسنگ آئسوفارم دکھائے گئے ہیں۔ تاہم، اس قسم کے ضابطے کے مالیکیولر میکانزم نامعلوم ہیں۔ پوسٹ ٹرانسکرپشنل ریگولیشن میں، این کے جی 2 ڈی لگینڈ ایم آر این اے کا استحکام کلیدی کردار ادا کرتا ہے۔ مثال کے طور پر اے یو ایف 1 پروٹین، جو آر این اے کے انحطاط میں ثالثی کرتا ہے، آئینی طور پر این کے جی 2 ڈی لگینڈ کے ایم آر این اے کو نشانہ بناتا ہے۔ مزید برآں، این کے جی 2 ڈی کی سطح کے اظہار کی سطح کو مختلف پروٹیز-ثالثی کلیویجز اور ایکزوسوم اظہار کی گھلنشیل شکلوں کے ذریعے کنٹرول کیا جا سکتا ہے۔ فنکشن این کے جی 2 ڈی تبدیل شدہ اور متاثرہ خلیوں کا پتہ لگانے اور ان کے خاتمے کے لیے ایک اہم ریسیپٹر ہے کیونکہ اس کے لگینڈ سیلولر تناؤ کے دوران متاثر ہوتے ہیں، یا تو انفیکشن یا جینومک تناؤ جیسے کینسر کے نتیجے میں۔ این کے خلیوں میں، این کے جی 2 ڈی ایک فعال رسیپٹر کے طور پر کام کرتا ہے، جو خود سائٹوٹوکسائٹی کو متحرک کرنے کے قابل ہے۔ سی ڈی 8 + ٹی خلیوں پر این کے جی 2 ڈی کا کام ان کو فعال کرنے کے لیے مشترکہ محرک سگنل بھیجنا ہے۔ وائرل انفیکشن میں کردار وائرس، انٹرا سیلولر پیتھوجینز کے طور پر، این کے جی 2 ڈی کے لیے اسٹریس لگینڈز کے اظہار کو متاثر کر سکتے ہیں۔ این کے جی 2 ڈی کو وائرل کنٹرول میں اہم سمجھا جاتا ہے کیونکہ وائرس کے پاس این کے جی 2 ڈی کے ردعمل سے بچنے کے لیے موافقت پذیر میکانزم ہوتے ہیں۔ مثال کے طور پر، سائٹومیگالو وائرس (سی ایم وی) ایک پروٹین، یو ایل 16 کو انکوڈ کرتا ہے، جو این کے جی 2 ڈی لگینڈ یو ایل بی پی 1 اور 2 (اس طرح ان کا نام "یو ایل 16 بائنڈنگ پروٹین") اور ایم آئی سی بی سے جڑا ہوتا ہے، جو ان کی سطح کے اظہار کو روکتا ہے۔ ٹیومر پر قابو پانے میں کردار جیسا کہ سرطان کے خلیات پر "دباؤ" ہوتا ہے، این کے جی 2 ڈی لگینڈز کو ریگولیٹ کیا جاتا ہے، جس سے سیل این کے سیل کی ثالثی والے لائسس کا شکار ہو جاتا ہے۔ تاہم، کچھ ٹیومر خلیوں نے اس مدافعتی نگرانی سے بچنے کی صلاحیت حاصل کر لی ہے۔ انہوں نے ٹیومر کے خلیوں کی سطح پر موجود این کے جی 2 ڈی ایل کی زیادہ مقدار کو کم کرنے اور ختم کرنے کی صلاحیت پیدا کی ہے جو ان لگینڈوں کو الگ کرنے والے میٹالوپروٹیز کو خفیہ کرتے ہیں، اور اس وجہ سے وہ این کے خلیوں کے کنٹرول اور ان کی سائٹوٹوکسک سرگرمی سے بچ جاتے ہیں۔ ٹی جی ایف-β ٹی اور این کے سیل فنکشن کو روک کر مدافعتی نگرانی سے بچنے کی اجازت دیتا ہے۔ ٹیومر کے خلیات جو این کے جی 2 ڈی کے ردعمل سے بچ سکتے ہیں اس طرح ان کے پھیلنے کا امکان زیادہ ہوتا ہے۔ سیلولر سینسینس کو شامل کرنے کے دوران ڈی این اے کے نقصان کے ردعمل کے ایک حصے کے طور پر، خلیات این کے جی 2 ڈی لگینڈس کے اظہار کو منظم کرتے ہیں جو گرینیول ایکسوائٹوسس راستے کے ذریعے سینسینٹ خلیوں کے این کے ثالثی قتل کو قابل بناتے ہیں۔ خاص طور پر، سینسنٹ خلیوں پر ایم آئی سی اے اور یو ایل بی پی 2 پروٹین کو قدرتی قاتل خلیوں پر این کے جی 2 ڈی رسیپٹر کے ذریعے پہچانا جاتا ہے، جو سینسنٹ خلیوں کی موثر شناخت اور خاتمے کے لیے ضروری ہے۔ قدرتی قاتل سیل ریسیپٹر این کے جی 2 ڈی کے سینسینٹ سیل سطح کے لگینڈوں کو بڑھانے کے لیے مداخلتوں کو سینسینٹ خلیوں کو ہٹانے کے لیے سینولیٹک تھراپی کے طور پر تجویز کیا گیا ہے۔ این کے جی 2 ڈی سگنلنگ جب این کے جی 2 ڈی رسیپٹر اپنے کسی بھی لگینڈ سے جڑا ہوتا ہے، تو متعلقہ مدافعتی خلیے کو چالو کرنے کے لیے ایک ایکٹیویشن کاسکیڈ شروع ہوتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی اپنے انٹرا سیلولر ڈومین کے اندر کوئی سگنلنگ عنصر نہیں رکھتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی ایک ہوموڈائمر بناتا ہے اور اس کے ٹرانس میمبرین ڈومین میں اڈاپٹر پروٹین کے ساتھ ہیکسامیرک پیچیدہ ڈھانچے میں منسلک ہوتا ہے اور سگنلنگ جھرنوں کو شروع کرتا ہے۔ چوہوں اور انسانوں دونوں میں، یہ سگنلنگ ایک کمپلیکس بنانے والے این کے جی 2 ڈی اور ڈی اے پی 10 پروٹین کے درمیان تعلق پر منحصر ہے۔ لگینڈ کی مصروفیت پر، ڈی اے پی 10 کے سائٹوپلاسمک ڈومین کے اندر ٹائر-ایکس-ایکس-میتھ (وائی ایکس ایکس ایم) موٹف پی آئی 3 کے اور جی آر بی 2 کو این کے سیل سائٹوٹوکسائٹی کے راستوں کو چالو کرنے کے لیے بھرتی کرتا ہے۔ چوہوں میں، این کے جی 2 ڈی ڈی اے پی 10 کے بجائے ڈی اے پی 12 کے ساتھ وابستہ ہوتا ہے، اور این کے جی 2 ڈی-ڈی اے پی 12 کمپلیکس سائک اور زیڈ اے پی 70 راستے کے ذریعے آئی ایف این-جی ایم کی پیداوار میں شامل ہوتا ہے۔ لہذا، این کے جی 2 ڈی پی آئی 3 کے-اے کے ٹی راستے کے ذریعے این کے اور دیگر مدافعتی خلیوں کی سرگرمی میں ملوث ہے۔ یہ راستہ چالو کرنا دو اہم بنیادوں پر منحصر ہے۔ پہلا این کے جی 2 ڈی (ریسیپٹر) کی پلاسٹکٹی اور ساختی تبدیلیاں ہیں جب اس کے لگینڈوں سے جڑے ہوتے ہیں۔ آخری ایک رسیپٹر کے انٹرا سیلولر ڈومین میں ڈی اے پی 10 کی ایسوسی ایشن اور پی آئی 3 کے اور جی آر بی کی بھرتی ہے۔ این کے جی 2 ڈی اور این کے خلیات این کے خلیات پیدائشی قوت مدافعت کا ایک کلیدی حصہ ہیں، جو بنیادی طور پر انفیکشن اور ٹیومر کے خلاف ابتدائی سائٹولیٹک دفاع میں شامل ہیں۔ این کے سیل کی سرگرمی مختلف قسم کے سیل سطح کے رسیپٹرز کے ذریعہ محرک اور روک تھام کی سرگرمی کے ساتھ ثالثی کی جاتی ہے۔ عام حالات میں، این کے خلیات ایک غیر فعال حالت میں موجود ہوتے ہیں، جس میں سگنلنگ پر روک تھام رسیپٹر ایکٹیویشن کا غلبہ ہوتا ہے۔ این کے جی 2 جی ایک کلیدی محرک خلیے کی سطح کا رسیپٹر ہے۔ رسیپٹر کا کم اظہار پہلے سے ہی ابتدائی این کے خلیوں کے پیشگی مراحل میں دیکھا جاتا ہے، نیز این کے خلیوں کی پختگی کے ساتھ رسیپٹرس کا ارتکاز بھی بڑھ جاتا ہے۔ چوہوں میں، دونوں این کے جی 2 ڈی آئسوفارم کا پتہ چلا۔ آرام کی حالت کے دوران، این کے جی 2 ڈی کی لمبی شکلوں کا غلبہ عام ہے، جبکہ فعال خلیوں میں مختصر شکلوں کی تعداد زیادہ ہوتی ہے۔ آئی ایل-15 رسیپٹر (آئی ایل-15 آر) کے ساتھ تعامل ترقی، ہومیوسٹاسس اور این کے خلیوں کی بقا کے لیے ایک اہم عنصر ہے اور این کے جی 2 ڈی سگنلنگ بھی اسی طرح اہم معلوم ہوتی ہے۔ ان دونوں راستوں کے درمیان تعلق ڈی اے پی 10، اڈاپٹر پروٹین اور سگنل ٹرانسڈیوسر کا بائنڈنگ ہے، جو بالترتیب آئی ایل-15 آر یا این کے جی 2 ڈی سے وابستہ ہے۔ یہ رجحان Klrk1 میں ناک آؤٹ ہونے والے چوہوں پر تجربات سے ثابت ہوا-اس طرح کے چوہوں میں پھیلاؤ کی شرح زیادہ ہوتی ہے، تیزی سے تفریق ہوتی ہے اور NK خلیوں کی پختگی ہوتی ہے، جس کے نتیجے میں نامکمل NK خلیوں کی ذیلی آبادی میں عدم توازن پیدا ہوتا ہے اور NK خلیوں کے اپوپٹوسس کا زیادہ خطرہ ہوتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی این کے خلیوں کے ذریعے پہچان سے بچاؤ کے لیے این کے جی 2 ڈی لگینڈز کے موثر ڈاؤن ریگولیشن کے ذریعے پردیی رواداری پیدا کرنے میں شامل ہے۔ خیال کیا جاتا ہے کہ یہ بون میرو میں مکمل تعلیم کے بغیر، لگینڈوں کے لیے این کے خلیوں کی انتہائی ردعمل کے خلاف رکاوٹ کی ایک شکل کے طور پر کام کرتا ہے۔ اسی طرح حمل کے دوران این کے خلیوں کی رواداری کا مشاہدہ کیا جاتا ہے، جب نال این کے جی 2 ڈی کے لیے گھلنشیل اور ایکزوسوم سے جڑے لگینڈ تیار کرتا ہے اور بڑی تعداد میں این کے خلیات جمع کرتا ہے جو جنین کو غیر خود کے طور پر پہچاننے سے روکتے ہیں۔ این کے جی 2 ڈی اور ٹی خلیات ٹی خلیات کی ابتدا کے لیے، ٹی سیل ریسیپٹرز (ٹی سی آر) پر لگینڈ کا بندھن، جھلی ریسیپٹرز اور سائٹوکائنز کے ذریعے مشترکہ محرک تمام ضروری اجزاء ہیں۔ شریک محرک ٹی خلیوں کی ردعمل کو منظم کرتا ہے اور این کے جی 2 ڈی ٹی خلیوں کے لیے اچھی طرح سے دستاویزی مشترکہ محرک مالیکیولز میں سے ایک ہے۔، سی ڈی 28-ثالثی مشترکہ محرک این کے جی 2 ڈی کے ذریعے سی ڈی 8 + ٹی خلیوں میں سائٹوکائن کی پیداوار اور سائٹوٹوکسائٹی کو فروغ دینے کے لیے ضروری ہے۔ سائٹوکائن کی پیداوار اور γδ ٹی خلیوں کے ذریعہ سائٹولیٹک قتل کے لیے، پرائمنگ کی ضرورت نہیں ہے، تاہم این کے جی 2 ڈی کا اظہار آئینی ہے جبکہ صرف γδ ٹی خلیوں میں این کے جی 2 ڈی کو متحرک کرنا سائٹوٹوکسائٹی میں ثالثی نہیں کرتا ہے۔ ٹی خلیوں میں، این کے جی 2 ڈی آئی ایل 15-رسیپٹر سگنلنگ اور میموری سی ڈی 8 ٹی خلیوں کی نشوونما سے بھی وابستہ ہے۔ سی ڈی 8 + ٹی خلیوں کو ایفیکٹر یا میموری کی اقسام میں تبدیل کرنے میں کلیدی کردار ریپامائسن کمپلیکس 1 (ایم ٹی او آر سی 1) کے ممالیہ ہدف کے ذریعے ادا کیا جاتا ہے-میموری کے پیش رو خلیات ایم ٹی او آر سی 1 کی نچلی سطح کی خصوصیت رکھتے ہیں اور اختتامی طور پر مختلف سی ڈی 8 + ٹی خلیوں کے لیے، اعلی سطح کی ایم ٹی او آر سی 1 سرگرمی عام ہے۔ این کے جی 2 ڈی کے ذریعے اینٹی پوپٹک ایم سی ایل-1 پروٹین کی ریگولیشن بھی میموری ٹی خلیوں کی تشکیل کو جنم دیتی ہے۔ میورین میموری ٹی سیل پریکرسرز میں، ٹی-بیٹ ٹرانسکرپشن فیکٹر کا ڈاؤن ریگولیشن بھی اسی طرح این کے جی 2 ڈی سے متاثر ہوتا ہے۔ این کے جی 2 ڈی اور بی خلیات بھی بی خلیات کی نشوونما کو این کے جی 2 ڈی کے ذریعے منظم کیا جاتا ہے-این کے جی 2 ڈی کی کمی والے چوہوں میں تلی میں بی خلیات کی تعداد کم ہو جاتی ہے، جو جزوی طور پر ڈی اے پی 10 پر منحصر ہے۔ این کے خلیوں کے مقابلے میں، بالغ بی خلیات این کے جی 2 ڈی کا اظہار نہیں کرتے ہیں۔ سی ڈی 94/این کے جی 2 قدرتی قاتل سیل این کے جی 2 امیونوواسن حوالہ جات ریسیپٹرز امیونولوجی بھی دیکھیں۔