CRISPR RNA
சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் ஆர். என். ஏ அல்லது சி. ஆர். ஆர். என். ஏ என்பது சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் லோகஸிலிருந்து ஒரு ஆர். என். ஏ டிரான்ஸ்கிரிப்ட் ஆகும். சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர்-சி. ஏ. எஸ் (கிளஸ்டர் செய்யப்பட்ட, வழக்கமாக இடைப்பட்ட குறுகிய பாலிண்ட்ரோமிக் ரிபீட்ஸ்-சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் தொடர்புடைய அமைப்புகள்) என்பது பாக்டீரியா மற்றும் ஆர்க்கியாவில் காணப்படும் ஒரு தகவமைப்பு நோயெதிர்ப்பு அமைப்பு ஆகும், இது வைரஸ்கள், பிளாஸ்மிட்கள் மற்றும் டிரான்ஸ்போசான்கள் போன்ற நடமாடும் மரபணு கூறுகளிலிருந்து பாதுகாக்கிறது. சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் லோகஸ் தனித்துவமான ஸ்பேசர்களுடன் இடைப்பட்ட தொடர்ச்சியான மீள்நிகழ்வுகளைக் கொண்டுள்ளது. இந்த தனித்துவமான ஸ்பேசர்களை எம்ஜிஇ-களிலிருந்து பெறலாம். முன்-சி. ஆர். ஆர். என். ஏ சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் லோகஸின் டிரான்ஸ்கிரிப்ஷனுக்குப் பிறகு மற்றும் காஸ் புரதங்களால் செயலாக்கப்படுவதற்கு முன்பு உருவாகிறது. முதிர்ந்த சி. ஆர். ஆர். என். ஏ டிரான்ஸ்கிரிப்ட்களில் ஒரு பகுதி பாதுகாக்கப்பட்ட பகுதி மீண்டும் மீண்டும் மற்றும் இலக்கு டிஎன்ஏவுக்கு நிரப்பு என்று இடைவெளி ஒரு வரிசை உள்ளது. சி. ஆர். ஆர். என். ஏ ஒரு ஒற்றை நியூக்ளீஸ் அல்லது பல காஸ் புரதங்களுடன் ஒரு விளைவு வளாகத்தை உருவாக்குகிறது, இது ஒரு காஸ்கேட் (வைரஸ் தடுப்பு மருந்துக்கான சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர்-தொடர்புடைய வளாகம்) என்று அழைக்கப்படுகிறது. விளைவு சிக்கலானது உருவாக்கப்பட்டவுடன் ஒரு காஸ் நியூக்ளியேஸ் அல்லது ஒற்றை விளைவு புரதம் சி. ஆர். ஆர். என். ஏ பொருத்தத்தால் வழிநடத்தப்படும் குறுக்கீட்டை ஏற்படுத்தும். செயல்பாட்டு வகை-I வகை-I CRISPR அமைப்புகள் Cas3, ஒரு நியூக்ளியேஸ்-ஹெலிகேஸ் புரதம் மற்றும் பல துணை அலகு அடுக்கு (வைரஸ் தடுப்பு CRISPR-தொடர்புடைய வளாகம்) ஆகியவற்றால் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. சி. ஆர். ஆர். என். ஏ காஸ்கேடில் உள்ள காஸ் புரதங்களுடன் ஒரு வளாகத்தை உருவாக்கி, வளாகத்தை இலக்கு டிஎன்ஏ வரிசைக்கு வழிநடத்த முடியும். நியூக்ளியேஸ்-ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டிற்காக Cas3 தேர்ந்தெடுக்கப்படுகிறது. பொதுவாக காஸ்கேடில், Cas6 முதிர்ந்த சி. ஆர். ஆர். என். ஏக்களை உருவாக்குகிறது, அதே நேரத்தில் Cas5 மற்றும் Cas7 செயல்முறை மற்றும் சி. ஆர். ஆர். என். ஏவை உறுதிப்படுத்துகிறது. வகை-II வகை-II CRISPR அமைப்புகள் ஒற்றை கையொப்ப நியூக்ளியேஸ் Cas9 ஆல் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. வகை-II சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் அமைப்புகளில் சி. ஆர். ஆர். என். ஏ மற்றும் டிராக் ஆர். ஆர். என். ஏ (டிரான்ஸ்-ஆக்டிவேட்டிங் சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் ஆர் ஆர். என். ஏ) ஆகியவை வழிகாட்டி ஆர். என். ஏ அல்லது ஜி. ஆர். என். ஏ எனப்படும் ஒரு சிக்கலை உருவாக்கலாம். ஜி. ஆர். என். ஏவுக்குள் உள்ள சி. ஆர். ஆர். என். ஏ என்பது பி. ஏ. எம் கண்டுபிடிக்கப்பட்ட பிறகு இலக்கு வரிசை அல்லது புரோட்டோஸ்பேசருடன் பொருந்துகிறது. போட்டி முடிந்ததும், Cas9 ஒரு இரட்டை இடைவேளை எடுக்கும். வகை-III வகை-III சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் அமைப்புகள் ஆர்என்ஏ பிளவுபடுத்தும் புரதமான காஸ் 10 ஆல் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. வகை-I ஐப் போலவே, ஒரு பெரிய துணை அலகு விளைவு வளாகம் உருவாகிறது மற்றும் சி. ஆர். ஆர். என். ஏ வளாகத்தை இலக்கு வரிசைக்கு வழிநடத்துகிறது. முதிர்ந்த சிஆர்ஆர்என்ஏவை உருவாக்க கேஎஸ்6 உதவுகிறது. வகை-IV வகை-IV சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் அமைப்புகள் ஒரு விளைவு நியூக்ளியேஸைக் கொண்டிருக்கவில்லை மற்றும் பிளாஸ்மிட்கள் மற்றும் புரோபேஜ்களுடன் தொடர்புடையவை. ஒரு காஸ்6 போன்ற நொதி சி. ஆர். ஆர். என். ஏவின் முதிர்ச்சியுடன் தொடர்புடையது. அனைத்து வகை-IV அமைப்புகளும் ஒரு சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் லோகஸைக் கொண்டிருக்கவில்லை, எனவே சி. ஆர். ஆர். என். ஏ இல்லை. வகை-வி வகை-வி சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் அமைப்புகள் கேஸ் 12 ஆல் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன, இது எஸ். எஸ். டி. என். ஏ, டி. எஸ். டி. என். ஏ மற்றும் ஆர். என். ஏவை பிளவுபடுத்தக்கூடிய ஒரு நியூக்ளியேஸ் ஆகும். Cas9 ஐப் போலவே, Cas12 என்பது ஒற்றை விளைவு அணுக்கரு ஆகும். வகை-வி அமைப்புகள் டிராக்ஆர்ஆர்என்ஏ இல்லாமல் முன்-சிஆர்ஆர்என்ஏவை செயலாக்குகின்றன. Cas12 உடன் வளாகத்தில் உள்ள முதிர்ந்த சி. ஆர். ஆர். என். ஏ ஆர்வமுள்ள டிஎன்ஏ வரிசையை குறிவைத்து டிஎன்ஏவை பிளவுபடுத்துகிறது. வகை-VI வகை-VI சி. ஆர். ஐ. எஸ். பி. ஆர் அமைப்புகள் ஆர். என். ஏவை குறிவைக்கும் ஒற்றை விளைவு புரதமான காஸ் 13 ஆல் வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. வகை-V அமைப்பைப் போலவே, Cas13 யும் முன்-சி. ஆர். ஆர். என். ஏவை டிராக்ஆர்ஆர்என்ஏ இல்லாமல் செயலாக்க முடியும். Cas13 உடன் வளாகத்தில் உள்ள முதிர்ந்த சி. ஆர். ஆர். என். ஏ வளாகத்தை இலக்கு ஆர். என். ஏ க்கு வழிநடத்துகிறது மற்றும் அதை சீரழிக்கிறது. குறிப்புகள் ஆர்என்ஏ