Rabbit hybridoma
முயல் ஹைப்ரிடோமா என்பது புற்றுநோய் பி-செல் (மைலோமா) உடன் முயல் பி செல் உற்பத்தி செய்யும் ஆன்டிபாடியின் இணைப்பால் உருவாக்கப்பட்ட ஒரு கலப்பின செல் வரிசை ஆகும். வரலாறு முயல் நோயெதிர்ப்பு அமைப்பு அதிக தொடர்பு கொண்ட ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்குவதற்கான ஒரு வாகனமாக ஆவணப்படுத்தப்பட்டுள்ளது மற்றும் பாஸ்போ-பெப்டைடுகள், கார்போஹைட்ரேட்டுகள் மற்றும் இம்யூனோஜென்கள் உள்ளிட்ட பல மூலக்கூறுகளை மிகவும் மாறுபட்ட அங்கீகாரம் அளித்துள்ளது, அவை எலியில் நோயெதிர்ப்பு சக்தியை ஏற்படுத்தாது. இருப்பினும், சமீப காலம் வரை, முயலில் இருந்து கிடைக்கும் ஆன்டிபாடிகளின் வகை பாலிக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளுக்கு வரம்பில் மட்டுப்படுத்தப்பட்டிருந்தது. 1970 களில் மவுஸ் ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பத்தின் வளர்ச்சிக்குப் பிறகு முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்க பல முயற்சிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்க சுட்டி-ராபிட் ஹெடெரோ-ஹைப்ரிடோமாக்கள் குறித்து ஆராய்ச்சி நடத்தப்பட்டது. இருப்பினும், இந்த ஹெடெரோ-ஹைப்ரிடோமாக்கள் இறுதியில் குளோன் செய்வது கடினமாக இருந்தது, மேலும் குளோன்கள் பொதுவாக நிலையற்றவை, மேலும் நீண்ட காலத்திற்கு ஆன்டிபாடிகளை சுரக்கவில்லை. 1995 ஆம் ஆண்டில், சிகாகோவின் லயோலா பல்கலைக்கழகத்தில் கேத்ரின் நைட் மற்றும் அவரது சகாக்கள், இம்யூனோகுளோபூலின் கனரக மற்றும் ஒளி சங்கிலி மேம்பாட்டாளர்களின் கட்டுப்பாட்டின் கீழ் ஆன்கோஜென்கள் வி-ஏபிஎல் மற்றும் சி-மைக் ஆகியவற்றை அதிகமாக வெளிப்படுத்தும் இரட்டை மரபணு மாற்றப்பட்ட முயல்களை உருவாக்குவதில் வெற்றி பெற்றனர். முயல் ஒரு மைலோமா போன்ற கட்டியை உருவாக்கியது, இது 240E-1 என்று பெயரிடப்பட்ட பிளாஸ்மாசைட்டோமா செல் வரிசையை தனிமைப்படுத்த அனுமதித்தது. முயல் லிம்போசைட்டுகளுடன் 240E-1 உயிரணுக்களின் இணைவு ஹைப்ரிடோமாக்களை உருவாக்கியது, இது முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை சீரான முறையில் சுரக்கிறது. இருப்பினும், 1970 களில் உருவாக்கப்பட்ட ஆரம்பகால சுட்டி மைலோமா கோடுகளைப் போலவே, ஸ்திரத்தன்மையும் ஒரு கவலையாக இருந்தது. டாக்டர் நைட்டின் ஆய்வகத்திலிருந்து 240E-1 செல் லைனைப் பெற்ற பல ஆய்வகங்கள் இணைவு செல் லைன் 240E-1 இல் நிலைத்தன்மை சிக்கல்களைப் புகாரளித்தன. மேம்பட்ட இணைவு பங்குதாரர் 1996 ஆம் ஆண்டில், கலிபோர்னியா சான் பிரான்சிஸ்கோ பல்கலைக்கழகத்தில் (யு. சி. எஸ். எஃப்) வெய்மின் ஜு மற்றும் ராபர்ட் பைடெலா, டாக்டர் நைட்டின் ஆய்வகத்திலிருந்து 240இ-1 ஐப் பெற்று, ஒரு மேம்பட்ட முயல் கலப்பினத்தை உருவாக்க முயன்றனர். 240E-1 இன் பண்புகளில் முன்னேற்றங்கள் மீண்டும் மீண்டும் துணை குளோனிங், அதிக இணைவு செயல்திறனுக்கான தேர்வு, வலுவான வளர்ச்சி மற்றும் கட்ட-மாறுபட்ட நுண்ணோக்கியின் கீழ் பிரகாசமான தோற்றம் போன்ற உருவவியல் பண்புகள் மூலம் நிறைவேற்றப்பட்டன. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட துணை குளோன்கள் ஒரு நிலையான ஹைப்ரிடோமா மற்றும் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடி சுரப்பை உருவாக்கும் திறனுக்காக மேலும் சோதிக்கப்பட்டன. பல சுற்று துணை குளோனிங் மற்றும் தேர்வு செயல்முறைகளுக்குப் பிறகு, 240E-W என்ற புதிய செல் வரிசை அடையாளம் காணப்பட்டது, இது சிறந்த இணைவு செயல்திறன் மற்றும் ஸ்திரத்தன்மையை வெளிப்படுத்தியது. ஆராய்ச்சி மற்றும் வணிக பயன்பாடுகளுக்கான முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் உற்பத்திக்கு செல் லைன் 240E-W மேலும் உருவாக்கப்பட்டு உகந்ததாக உள்ளது. செயல்முறை ஒரு முயலில் ஹைப்ரிடோமா உருவாக்கும் செயல்முறை முதலில் நோய்த்தடுப்பு செய்யப்பட்ட ஒரு முயலில் இருந்து பி-செல்களைப் பெறுவதை உள்ளடக்கியது. முயல்களுக்கு ஏராளமான நோய்த்தடுப்பு நெறிமுறைகள் உள்ளன, குறிப்பாக பாலிக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் தலைமுறைக்கு. நோய்த்தடுப்பு மருந்துக்குப் பிறகு, பி-செல்கள் ஒரு முயல் இணைவு கூட்டாளர் செல் வரிசையுடன் இணைக்கப்பட்டு கலப்பினங்களை உருவாக்குகின்றன. ஹைப்ரிடோமாக்களின் விளைவாக வரும் ஆன்டிபாடிகள் எலிசா, வெஸ்டர்ன் பிளாட், இம்யூனோஹிஸ்டோகெமிஸ்ட்ரி மற்றும் எஃப். ஏ. சி. எஸ் போன்ற நோயறிதல் சோதனைகள் மூலம் ஆர்வத்தின் அளவுகோல்களைப் பூர்த்தி செய்யும் ஒரு ஆன்டிஜெனுக்கு திரையிடப்படுகின்றன. இதன் விளைவாக வரும் ஹைப்ரோடோமாக்கள் மோனோக்ளோனல் பண்புகளை உறுதிப்படுத்த துணைக் குளோன் செய்யப்படலாம். தேசிய புற்றுநோய் நிறுவனத்தில் (பெதஸ்தா, அமெரிக்கா) முயல் ஆன்டிபாடிகளின் மனிதமயமாக்கல் மிட்செல் ஹோ மற்றும் ஈரா பாஸ்டன் முயல் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் குழுவை தனிமைப்படுத்தியது (எ. கா. ஒய். பி. 218, ஒய். பி. 223) புற்றுநோய் சிகிச்சைக்காக சி முனையத்திற்கு அருகில் உள்ள மோசமான நோயெதிர்ப்பு தளங்கள் உட்பட மெசோதெலினின் அரிய எபிடோப்புகளை அங்கீகரிக்கிறது. டாக்டர் ஹோவின் ஆய்வகம் புரோட்டீன் டேட்டா வங்கியில் இருந்து அவற்றின் ஆன்டிஜென்களுடன் முயல் ஆன்டிபாடிகளின் சிக்கலான கட்டமைப்புகளை பகுப்பாய்வு செய்தது, மேலும் அதன் ஆன்டிஜெனுக்கு 6 ஆங்ஸ்ட்ரோம் தூரத்திற்குள் முயல் எஃப். வி. யில் ஆன்டிஜென்-தொடர்பு எச்சங்களை அடையாளம் கண்டது. அவர்கள் "எச். வி. 4" மற்றும் "எல். வி. 4" என்று பெயரிட்டனர், அவை நிரப்பு-தீர்மானிக்கும் பகுதி (சி. டி. ஆர்) சுழல்கள், அவை கட்டமைப்பு ரீதியாக ஆன்டிஜெனுக்கு நெருக்கமாக உள்ளன மற்றும் முறையே முயல் கன சங்கிலி மற்றும் ஒளி சங்கிலியின் கட்டமைப்பு 3 இல் அமைந்துள்ளன. கணக்கீட்டு கட்டமைப்பு மாதிரியின் அடிப்படையில், ஹோ மற்றும் ஜாங் ஆகியோர் ஒருங்கிணைந்த கபட்/ஐ. எம். ஜி. டி/பாராடோம் சி. டி. ஆர்களை மனித ஜெர்ம்லைன் கட்டமைப்பின் வரிசையாக இணைப்பதன் மூலம் ஒரு மனிதமயமாக்கல் மூலோபாயத்தை வடிவமைத்தனர். மனிதமயமாக்கப்பட்ட முயல் Fvs ஆல் ஆன இம்யூனோடாக்சின்கள் (எ. கா. எச். ஒய். பி. 218) மருத்துவ ரீதியாகப் பயன்படுத்தப்படும் நச்சுடன் இணைக்கப்பட்டது, அவற்றின் அசல் முயல் எஃப். வி. களிலிருந்து பெறப்பட்ட இம்யூனோடாக்சின்களை விட கட்டி உயிரணுக்களுக்கு எதிராக வலுவான சைட்டோடாக்சிசிட்டியைக் காட்டியது. எச். ஒய். பி. 218 ஆன்டிபாடியை அடிப்படையாகக் கொண்ட சி. ஏ. ஆர். டி செல்கள் எலிகளில் கட்டி வளர்ச்சியை திறம்பட தடுக்கின்றன. முறை (அதாவது. ஒருங்கிணைந்த கபட்/ஐஎம்ஜிடி/பாராடோம் முயல் சி. டி. ஆர்களை ஒரு நிலையான மனித கிருமி கட்டமைப்பிற்கு ஒட்டுதல்) முயல் ஆன்டிபாடிகளை மனிதமயமாக்குவதற்கான பொதுவான அணுகுமுறையாக பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. குறிப்புகள் வெளிப்புற இணைப்புகள் 240இ-டபிள்யூ நோயெதிர்ப்பு உயிரித் தொழில்நுட்பத்திற்கான 240இ-1 செல்லோசொரஸ் நுழைவுக்கான செல்லோசொரஸ் நுழைவு மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகள் சிகிச்சை ஆன்டிபாடிகள் முயல் செல் கோடுகள்