Phage display
பேஜ் டிஸ்ப்ளே என்பது புரதம்-புரதம், புரதம்-பெப்டைட் மற்றும் புரதம்-டி. என். ஏ தொடர்புகள் பற்றிய ஆய்வுக்கான ஒரு ஆய்வக நுட்பமாகும், இது புரதங்களை அவற்றைக் குறியாக்கம் செய்யும் மரபணு தகவல்களுடன் இணைக்க பாக்டீரியோபேஜ்களைப் (பாக்டீரியாவைப் பாதிக்கும் வைரஸ்கள்) பயன்படுத்துகிறது. இந்த நுட்பத்தில், ஆர்வமுள்ள புரதத்தை குறியாக்கம் செய்யும் ஒரு மரபணு ஒரு ஃபேஜ் கோட் புரத மரபணுவில் செருகப்படுகிறது, இதனால் ஃபேஜ் புரதத்தை அதன் வெளிப்புறத்தில் "காட்சிப்படுத்த" காரணமாகிறது, அதே நேரத்தில் புரதத்திற்கான மரபணுவை அதன் உள்ளே கொண்டுள்ளது, இதன் விளைவாக மரபணு வகைக்கும் பினோட்டைப்புக்கும் இடையிலான தொடர்பு ஏற்படுகிறது. காட்டப்படும் புரதத்திற்கும் பிற மூலக்கூறுகளுக்கும் இடையிலான தொடர்புகளைக் கண்டறிவதற்காக, பேஜ்கள் வெளிப்படுத்தும் புரதங்கள் மற்ற புரதங்கள், பெப்டைடுகள் அல்லது டி. என். ஏ வரிசைமுறைகளுக்கு எதிராக திரையிடப்படலாம். இந்த வழியில், புரதங்களின் பெரிய நூலகங்களை இன் விட்ரோ தேர்வு எனப்படும் செயல்முறையில் திரையிடலாம் மற்றும் பெருக்கலாம், இது இயற்கை தேர்வுக்கு ஒத்ததாகும். ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளேவில் பயன்படுத்தப்படும் மிகவும் பொதுவான பாக்டீரியோபேஜ்கள் எம் 13 மற்றும் எஃப் டி ஃபிலமென்டஸ் ஃபேஜ் ஆகும், இருப்பினும் டி 4, டி 7 மற்றும் λ ஃபேஜ் ஆகியவையும் பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளன. பேஜ் டிஸ்ப்ளே முதன்முதலில் 1985 ஆம் ஆண்டில் ஜார்ஜ் பி. ஸ்மித் என்பவரால் விவரிக்கப்பட்டது, அவர் வைரஸின் கேப்சிட் புரதத்தை பெப்டைட் வரிசைகளின் தொகுப்பிலிருந்து ஒரு பெப்டைடுடன் இணைப்பதன் மூலம் இழை பேஜ் (பாக்டீரியாவைப் பாதிக்கும் நீண்ட, மெல்லிய வைரஸ்கள்) மீது பெப்டைடுகளின் காட்சியை நிரூபித்தார். இது வைரஸ் குளோன்களின் சேகரிப்பின் வெளிப்புற மேற்பரப்புகளில் வெவ்வேறு பெப்டைடுகளைக் காட்டியது, அங்கு செயல்முறையின் ஸ்கிரீனிங் படி பெப்டைடுகளை மிக உயர்ந்த பிணைப்பு உறவுடன் தனிமைப்படுத்தியது. 1988 ஆம் ஆண்டில், ஸ்டீபன் பார்ம்லி மற்றும் ஜார்ஜ் ஸ்மித் ஆகியோர் இணைப்புத் தேர்வுக்கான பயோபானிங்கை விவரித்தனர், மேலும் ஒரு பில்லியனில் 1 அல்லது அதற்கும் குறைவான குளோன்களுக்கு தொடர்ச்சியான சுற்றுத் தேர்வு வளப்படுத்த முடியும் என்பதை நிரூபித்தனர். 1990 ஆம் ஆண்டில், ஜேமி ஸ்காட் மற்றும் ஜார்ஜ் ஸ்மித் ஆகியோர் பெரிய சீரற்ற பெப்டைட் நூலகங்களை உருவாக்குவதை விவரித்தனர். கிரெக் விண்டர் மற்றும் ஜான் மெக்காஃபெர்ட்டியுடன் மூலக்கூறு உயிரியல் ஆய்வகம், ரிச்சர்ட் லெர்னர் மற்றும் கார்லோஸ் பார்பாஸுடன் தி ஸ்க்ரிப்ஸ் ரிசர்ச் இன்ஸ்டிடியூட் மற்றும் ஃபிராங்க் பிரைட்லிங் மற்றும் ஸ்டீபன் டூபெல் ஆகியோருடன் ஜெர்மன் புற்றுநோய் ஆராய்ச்சி மையம் ஆகியவற்றில் உள்ள குழுக்களால் ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பம் மேலும் மேம்படுத்தப்பட்டு மேம்படுத்தப்பட்டது. பேஜ் டிஸ்ப்ளேவை உருவாக்குவதில் அவர்கள் செய்த பங்களிப்பிற்காக ஸ்மித் மற்றும் விண்டர் ஆகியோருக்கு 2018 ஆம் ஆண்டின் வேதியியலுக்கான நோபல் பரிசில் பாதி பங்கு வழங்கப்பட்டது. 1985 முதல் முன்னுரிமை கோரி ஜார்ஜ் பீசெனிக் காப்புரிமை பெற்றதும் பெப்டைட் நூலகங்களின் தலைமுறையை விவரிக்கிறது. கோட்பாடு இரண்டு கலப்பின அமைப்பைப் போலவே, பேஜ் டிஸ்ப்ளேவும் புரத தொடர்புகளின் உயர்-செயல்திறன் திரையிடலுக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது. எம்13 ஃபிலமென்டஸ் பேஜ் டிஸ்ப்ளேவைப் பொறுத்தவரை, டிஎன்ஏ குறியீட்டு புரதம் அல்லது ஆர்வமுள்ள பெப்டைட் முறையே சிறிய அல்லது பெரிய கோட் புரதத்தை குறியாக்கம் செய்து, பிஐஐ அல்லது பிவிஐஐ மரபணுவில் இணைக்கப்படுகிறது. பல குளோனிங் தளங்கள் சில நேரங்களில் துண்டுகள் மூன்று சாத்தியமான வாசிப்பு சட்டகங்களிலும் செருகப்படுவதை உறுதிசெய்ய பயன்படுத்தப்படுகின்றன, இதனால் சிடிஎன்ஏ துண்டு சரியான சட்டகத்தில் மொழிபெயர்க்கப்பட்டுள்ளது. பேஜ் மரபணு மற்றும் செருகும் டிஎன்ஏ கலப்பினமானது பின்னர் டிஜி1, எஸ்எஸ்320, ஈஆர்2738, அல்லது எக்ஸ்எல்1-ப்ளூ ஈ. கோலை போன்ற ஈ. கோலை பாக்டீரியா உயிரணுக்களில் செருகப்படுகிறது ("கடத்தல்" என்று அழைக்கப்படும் ஒரு செயல்முறை). ஒரு "ஃபேஜெமிட்" திசையன் பயன்படுத்தப்பட்டால் (ஒரு எளிமைப்படுத்தப்பட்ட காட்சி கட்டுமான திசையன்) ஈ. கோலி செல்களில் இருந்து ஃபேஜ் துகள்கள் ஹெல்பர் ஃபேஜ் நோயால் பாதிக்கப்படும் வரை வெளியிடப்படாது, இது ஃபேஜ் டிஎன்ஏவை பேக்கிங் செய்ய உதவுகிறது மற்றும் முதிர்ந்த வைரியன்களை பொருத்தமான புரதத் துண்டுடன் அவற்றின் வெளிப்புற கோட் பகுதியாக சிறிய (பிஐஐ) அல்லது பெரிய (பிவிஐஐ) கோட் புரதத்தில் இணைக்கிறது. ஒரு தொடர்புடைய டிஎன்ஏ அல்லது புரத இலக்கை (களை) ஒரு மைக்ரோடிட்டர் தட்டு கிணற்றின் மேற்பரப்பில் நிலைநிறுத்துவதன் மூலம், அதன் மேற்பரப்பில் உள்ள அந்த இலக்குகளில் ஒன்றுடன் பிணைக்கும் ஒரு புரதத்தைக் காட்டும் ஒரு பேஜ் இருக்கும், மற்றவை கழுவுவதன் மூலம் அகற்றப்படும். எஞ்சியிருப்பவை அகற்றப்படலாம், அதிக ஃபேஜை உற்பத்தி செய்ய பயன்படுத்தப்படலாம் (ஹெல்பர் ஃபேஜ் மூலம் பாக்டீரியா நோய்த்தொற்றால்) மற்றும் பொருத்தமான (அதாவது. பிணைப்பு) ஃபேஜ். விரும்பத்தகாத பொருட்களை அகற்றுவதன் மூலம் தங்க மாதிரியை செறிவூட்டுவதைக் குறிக்கும் வகையில், இந்த படிகளின் தொடர்ச்சியான சைக்கிள் ஓட்டுதல் 'பானிங்' என்று குறிப்பிடப்படுகிறது. இறுதி கட்டத்தில் வெளியேற்றப்பட்ட ஃபேஜ் ஒரு பொருத்தமான பாக்டீரியா ஹோஸ்டை பாதிக்க பயன்படுத்தப்படலாம், இதிலிருந்து ஃபேஜெமிட்களை சேகரிக்க முடியும் மற்றும் தொடர்புடைய டி. என். ஏ வரிசை நீக்கப்பட்டு, தொடர்புடைய, ஊடாடும் புரதங்கள் அல்லது புரத துண்டுகளை அடையாளம் காண வரிசைப்படுத்தப்படுகிறது. 'பாக்டீரியா பேக்கேஜிங் செல் லைன்' தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் ஹெல்பர் பேஜின் பயன்பாட்டை அகற்ற முடியும். குறைந்த pH எல்யூஷன் இடையகத்தை சோனிஃபிகேஷனுடன் இணைத்து எல்யூஷன் செய்யப்படலாம், இது பெப்டைட்-இலக்கு தொடர்புகளை தளர்த்துவதோடு மட்டுமல்லாமல், இலக்கு மூலக்கூறை நிலைநிறுத்த மேற்பரப்பிலிருந்து பிரிக்கவும் உதவுகிறது. இந்த அல்ட்ராசவுண்ட் அடிப்படையிலான முறை உயர்-பாசம் கொண்ட பெப்டைட்டின் ஒற்றை-படி தேர்வை செயல்படுத்துகிறது. பேஜ் டிஸ்ப்ளே தொழில்நுட்பத்தின் பயன்பாடுகளில் ஒரு புரதத்தின் தொடர்பு கூட்டாளிகளை தீர்மானிப்பது அடங்கும் (இது ஒரு செல், திசு அல்லது உயிரினத்தின் அனைத்து குறியீட்டு வரிசைகளையும் கொண்ட டிஎன்ஏ நூலகத்துடன் அசையாத பேஜ் "தூண்டில்" ஆகப் பயன்படுத்தப்படும்) இதனால் அந்த புரதத்தின் செயல்பாடு அல்லது செயல்பாட்டின் வழிமுறை தீர்மானிக்கப்படலாம். ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே என்பது இன் விட்ரோ புரத பரிணாம வளர்ச்சிக்கு (புரத பொறியியல் என்றும் அழைக்கப்படுகிறது) பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படும் முறையாகும். எனவே, மருந்து கண்டுபிடிப்பில் ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே ஒரு பயனுள்ள கருவியாகும். புரதங்களை குறிவைக்க புதிய ஈந்தணைவிகளைக் (நொதி தடுப்பான்கள், ஏற்பி அகோனிஸ்டுகள் மற்றும் எதிரிகள்) கண்டுபிடிப்பதற்கு இது பயன்படுத்தப்படுகிறது. கட்டி ஆன்டிஜென்களைத் தீர்மானிக்கவும் (நோயறிதல் மற்றும் சிகிச்சை இலக்கில் பயன்படுத்த) மற்றும் சீரற்ற பிரிவுகளுடன் சிறப்பாக கட்டப்பட்ட டிஎன்ஏ நூலகங்களைப் பயன்படுத்தி புரத-டிஎன்ஏ தொடர்புகளைத் தேடுவதற்கும் இந்த நுட்பம் பயன்படுத்தப்படுகிறது. சமீபத்தில், தத்தெடுக்கப்பட்ட செல் பரிமாற்ற அணுகுமுறை போன்ற புற்றுநோய் சிகிச்சைகளின் பின்னணியிலும் ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே பயன்படுத்தப்பட்டுள்ளது. இந்த சந்தர்ப்பங்களில், கட்டியின் மேற்பரப்பு புரதங்களை குறிவைக்கும் செயற்கை ஆன்டிபாடிகளை உருவாக்கவும் தேர்ந்தெடுக்கவும் பேஜ் டிஸ்ப்ளே பயன்படுத்தப்படுகிறது. நோயாளியிடமிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட டி-செல்களுக்கான செயற்கை ஏற்பிகளாக இவை தயாரிக்கப்படுகின்றன, அவை நோயை எதிர்த்துப் போராடப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. இன் விட்ரோ புரத பரிணாம வளர்ச்சிக்கான போட்டி முறைகளில் ஈஸ்ட் டிஸ்ப்ளே, பாக்டீரியா டிஸ்ப்ளே, ரைபோசோம் டிஸ்ப்ளே மற்றும் எம்ஆர்என்ஏ டிஸ்ப்ளே ஆகியவை அடங்கும். ஆன்டிபாடி ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளேவின் கண்டுபிடிப்பு ஆன்டிபாடி மருந்து கண்டுபிடிப்பில் புரட்சியை ஏற்படுத்தியது. எம்ஆர்சி மூலக்கூறு உயிரியல் ஆய்வகம் (கிரெக் விண்டர் மற்றும் ஜான் மெக்காஃபெர்டி), ஸ்க்ரிப்ஸ் ஆராய்ச்சி நிறுவனம் (ரிச்சர்ட் லெர்னர் மற்றும் கார்லோஸ் எஃப். பார்பாஸ்) மற்றும் ஜெர்மன் புற்றுநோய் ஆராய்ச்சி மையம் (ஃபிராங்க் பிரைட்லிங் மற்றும் ஸ்டீபன் டூபெல்) ஆகியவற்றில் உள்ள ஆய்வகங்களால் ஆரம்ப வேலை செய்யப்பட்டது. 1991 ஆம் ஆண்டில், தி ஸ்க்ரிப்ஸ் குழு பேஜ் மீது மனித ஆன்டிபாடிகளின் முதல் காட்சி மற்றும் தேர்வை அறிவித்தது. இந்த ஆரம்ப ஆய்வு டெட்டனஸ் நச்சுத்தன்மையை பிணைக்கும் மனித ஆன்டிபாடி ஃபேப்பின் விரைவான தனிமைப்படுத்தலை விவரித்தது, பின்னர் தடுப்பூசி வடிவமைப்பு மற்றும் சிகிச்சைக்காக மனித எச். ஐ. வி-1 ஆன்டிபாடிகளை விரைவாக குளோன் செய்ய இந்த முறை நீட்டிக்கப்பட்டது. ஆன்டிபாடி நூலகங்களின் ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே நோயெதிர்ப்பு மறுமொழியைப் படிப்பதற்கும், சிகிச்சைக்கு மனித ஆன்டிபாடிகளை விரைவாகத் தேர்ந்தெடுத்து உருவாக்குவதற்கும் ஒரு சக்திவாய்ந்த முறையாக மாறியுள்ளது. ஆன்டிபாடி பேஜ் டிஸ்ப்ளே பின்னர் தி ஸ்க்ரிப்ஸ் ரிசர்ச் இன்ஸ்டிடியூட்டில் கார்லோஸ் எஃப். பார்பாஸால் செயற்கை மனித ஆன்டிபாடி நூலகங்களை உருவாக்க பயன்படுத்தப்பட்டது, இது 1990 ஆம் ஆண்டில் பிரைட்லிங் மற்றும் சக ஊழியர்களால் (காப்புரிமை சிஏ 2035384) முதன்முதலில் காப்புரிமை பெற்றது, இதன் மூலம் செயற்கை பன்முகத்தன்மை கூறுகளிலிருந்து மனித ஆன்டிபாடிகளை விட்ரோவில் உருவாக்க அனுமதிக்கிறது. ஃபேஜ் மீது மில்லியன் கணக்கான வெவ்வேறு ஆன்டிபாடிகளைக் காட்டும் ஆன்டிபாடி நூலகங்கள் பெரும்பாலும் மருந்துத் துறையில் மிகவும் குறிப்பிட்ட சிகிச்சை ஆன்டிபாடி தடங்களை தனிமைப்படுத்த பயன்படுத்தப்படுகின்றன, ஆன்டிபாடி மருந்துகளாக முதன்மையாக புற்றுநோய் எதிர்ப்பு அல்லது அழற்சி எதிர்ப்பு சிகிச்சையாக உருவாக்கப்படுகின்றன. கேம்பிரிட்ஜ் ஆன்டிபாடி டெக்னாலஜியால் D2E7 என கண்டுபிடிக்கப்பட்டு அபோட் ஆய்வகங்களால் உருவாக்கப்பட்டு சந்தைப்படுத்தப்பட்ட அடாலிமுமாப் மிகவும் வெற்றிகரமான ஒன்றாகும். டிஎன்எஃப் ஆல்பாவின் ஆன்டிபாடியான அடாலிமுமாப், வருடாந்திர விற்பனையை 1 பில்லியன் டாலருக்கும் அதிகமாக எட்டிய உலகின் முதல் முழு மனித ஆன்டிபாடியாகும். விரும்பிய இலக்கு புரதம் அல்லது டிஎன்ஏ வரிசைக்கு அதிக தொடர்புடன் பிணைக்கும் பாலிபெப்டைட்களை அடையாளம் காண ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே ஸ்கிரீனிங்கில் பின்பற்றப்படும் நிகழ்வுகளின் வரிசை கீழே உள்ளதுஃ இலக்கு புரதங்கள் அல்லது டிஎன்ஏ வரிசைகள் ஒரு மைக்ரோடிட்டர் தகட்டின் கிணறுகளுடன் நிலைநிறுத்தப்படுகின்றன. பல மரபணு வரிசைகள் ஒரு பாக்டீரியோபேஜ் நூலகத்தில் பாக்டீரியோபேஜ் கோட் புரதத்துடன் இணைப்புகளின் வடிவத்தில் வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன, இதனால் அவை வைரஸ் துகள்களின் மேற்பரப்பில் காட்டப்படுகின்றன. காட்டப்படும் புரதம் பேஜுக்குள் உள்ள மரபணு வரிசைக்கு ஒத்திருக்கிறது. இந்த ஃபேஜ்-டிஸ்ப்ளே நூலகம் டிஷில் சேர்க்கப்பட்டு, ஃபேஜ் நேரத்தை பிணைக்க அனுமதித்த பிறகு, டிஷ் கழுவப்படுகிறது. இலக்கு மூலக்கூறுகளுடன் தொடர்பு கொள்ளும் ஃபேஜ்-டிஸ்ப்ளேயிங் புரதங்கள் டிஷுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளன, அதே நேரத்தில் மற்ற அனைத்தும் கழுவப்படுகின்றன. இணைக்கப்பட்ட ஃபேஜ் அகற்றப்படலாம் மற்றும் பொருத்தமான பாக்டீரியா புரவலன்களின் நோய்த்தொற்றின் மூலம் அதிக ஃபேஜை உருவாக்க பயன்படுத்தப்படலாம். புதிய ஃபேஜ் ஒரு செறிவூட்டப்பட்ட கலவையை உருவாக்குகிறது, இதில் கணிசமாக குறைவான பொருத்தமற்ற ஃபேஜ் உள்ளது (அதாவது. பிணைப்பு அல்லாதவை) ஆரம்ப கலவையில் இருந்ததை விட. 3 முதல் 5 வரையிலான படிகள் விருப்பப்படி ஒன்று அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்படுகின்றன, இது புரதங்களை பிணைப்பதில் பேஜ் நூலகத்தை மேலும் வளப்படுத்துகிறது. மேலும் பாக்டீரியா அடிப்படையிலான பெருக்கத்தைத் தொடர்ந்து, இடைவினை புரதம் அல்லது புரதத் துண்டுகளை அடையாளம் காண இடைவினை செய்யும் கட்டத்திற்குள் உள்ள டிஎன்ஏ வரிசைப்படுத்தப்படுகிறது. கோட் புரதம் ஃபிலமென்டஸ் பேஜஸ் பிஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐஐ. கிளைசின் நிறைந்த இணைப்பிகளால் இணைக்கப்பட்ட மூன்று களங்களை (N1, N2 மற்றும் CT) pIII கொண்டுள்ளது. வைரியன் நோய்த்தொற்றின் போது N2 களம் F பைலஸுடன் பிணைக்கப்பட்டு N1 களத்தை விடுவிக்கிறது, பின்னர் இது பாக்டீரியாவின் மேற்பரப்பில் உள்ள TolA புரதத்துடன் தொடர்பு கொள்கிறது. இந்த புரதத்திற்குள் உள்ள செருகல்கள் வழக்கமாக நிலை 249 (சி. டி மற்றும் என் 2 க்கு இடையில் ஒரு இணைப்பு பகுதிக்குள்), நிலை 198 (என் 2 களத்திற்குள்) மற்றும் என்-முனையத்தில் (என்-முனைய சுரப்பு வரிசைக்கும் என்-முனையத்திற்கும் இடையில் செருகப்படுகின்றன. இருப்பினும், நிலை 198 இல் அமைந்துள்ள பாம்ஹி தளத்தைப் பயன்படுத்தும் போது, இணைக்கப்படாத சிஸ்டைன் எச்சங்கள் (சி201) குறித்து கவனமாக இருக்க வேண்டும், இது pIII இன் துண்டிக்கப்படாத பதிப்பைப் பயன்படுத்தினால் பேஜ் டிஸ்ப்ளேவின் போது சிக்கல்களை ஏற்படுத்தக்கூடும். pVIII ஐ விட pIII ஐப் பயன்படுத்துவதன் ஒரு நன்மை என்னவென்றால், pIII ஒரு ஃபாகெமிட் (ஃப்ஃப் ஃபேஜ்களிலிருந்து பெறப்பட்ட பிளாஸ்மிட்) ஒரு ஹெல்பர் ஃபேஜுடன் இணைக்கும்போது மோனோவலன்ட் டிஸ்ப்ளேவை அனுமதிக்கிறது. மேலும், pIII பெரிய புரத வரிசைகளை (> 100 அமினோ அமிலங்கள்) செருக அனுமதிக்கிறது மற்றும் pVIII ஐ விட அதிக சகிப்புத்தன்மை கொண்டது. இருப்பினும், இணைவு கூட்டாளியாக pIII ஐப் பயன்படுத்துவது பேஜ் தொற்று குறைவதற்கு வழிவகுக்கும், இது பேஜ் வளர்ச்சி விகிதத்தில் உள்ள வேறுபாட்டால் ஏற்படும் தேர்வு சார்பு அல்லது அதைவிட மோசமானது, அதன் புரவலனை பாதிக்க ஃபேஜ் இயலாமை போன்ற சிக்கல்களுக்கு வழிவகுக்கும். ஒரு ஃபேஜெமிட் பிளாஸ்மிட் மற்றும் ஒரு ஹெல்பர் பேஜ் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் பேஜ் தொற்று இழப்பைத் தவிர்க்க முடியும், இதனால் இதன் விளைவாக வரும் பேஜ் காட்டு வகை மற்றும் இணைவு pIII இரண்டையும் கொண்டுள்ளது. இரண்டு நிரப்பு லியூசின் சிப்பர்கள் அமைப்பு, டைரக்ட் இன்டராக்ஷன் ரெஸ்க்யூ அல்லது சி-முனையத்தில் சி. டி. என். ஏ மற்றும் பி. ஐ. ஐ இடையே ஒரு 8-10 அமினோ அமில இணைப்பியை சேர்ப்பதன் மூலம் pIII ஐப் பயன்படுத்தி cDNA பகுப்பாய்வு செய்யப்பட்டுள்ளது. pVIII pVIII என்பது Ff பேஜ்களின் முக்கிய கோட் புரதமாகும். பெப்டைடுகள் பொதுவாக pVIII இன் N-முனையத்துடன் இணைக்கப்படுகின்றன. பொதுவாக pVIII உடன் இணைக்கக்கூடிய பெப்டைடுகள் 6 முதல் 8 அமினோ அமிலங்கள் நீளமாக இருக்கும். அளவு கட்டுப்பாடு சேர்க்கப்பட்ட பகுதியால் ஏற்படும் கட்டமைப்புத் தடையுடன் குறைவாகவும், கோட் புரத ஏற்றுமதியின் போது பிஐவி காரணமாக ஏற்படும் அளவு விலக்குடனும் தொடர்புடையதாகத் தெரிகிறது. ஒரு வழக்கமான ஃபேஜ்களில் புரதத்தின் சுமார் 2700 பிரதிகள் இருப்பதால், ஒரு ஃபாகெமிட் பயன்படுத்தப்பட்டாலும் ஆர்வமுள்ள புரதம் பன்முகத்தன்மையுடன் வெளிப்படுத்தப்படுவதற்கான வாய்ப்புகள் அதிகம். இது இந்த புரதத்தின் பயன்பாட்டை அதிக உறவு பிணைப்பு கூட்டாளர்களின் கண்டுபிடிப்புக்கு சாதகமற்றதாக ஆக்குகிறது. pVIII இன் அளவு சிக்கலை சமாளிக்க, செயற்கை கோட் புரதங்கள் வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. ஒரு உதாரணம் வெயிஸ் மற்றும் சித்துவின் தலைகீழ் செயற்கை கோட் புரதம் (ஏ. சி. பி) ஆகும், இது சி-முனையத்தில் பெரிய புரதங்களை காட்சிப்படுத்த அனுமதிக்கிறது. ஏ. சி. பி. க்கள் 20kDa புரதத்தைக் காட்ட முடியும், இருப்பினும், குறைந்த அளவுகளில் மட்டுமே (பெரும்பாலும் ஒரே மாதிரியாக மட்டுமே). சிடிஎன்ஏ நூலகங்களின் காட்சிக்கு பிவிஐ பிவிஐ பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. பேஜ் டிஸ்ப்ளே வழியாக சி. டி. என். ஏ நூலகங்களின் காட்சி, ஈஸ்ட்-2-கலப்பின முறைக்கு ஒரு கவர்ச்சிகரமான மாற்றாகும், இது அதன் அதிக செயல்திறன் திறன் காரணமாக ஊடாடும் புரதங்கள் மற்றும் பெப்டைடுகளைக் கண்டுபிடிப்பதற்கான ஒரு மாற்றாகும். சி. டி. என். ஏ நூலகங்களின் வெளிப்பாட்டிற்கு பி. வி. ஐ முன்னுரிமை அளிக்கப்படுகிறது, ஏனெனில் பேஜ் அசெம்பிளியில் பி. வி. ஐயின் பங்கை பெரிதும் பாதிக்காமல் பி. வி. ஐயின் சி-முனையத்தில் ஆர்வமுள்ள புரதத்தைச் சேர்க்க முடியும். இதன் பொருள் என்னவென்றால், சிடிஎன்ஏவில் உள்ள ஸ்டாப் கோடான் இனி ஒரு பிரச்சினை அல்ல. இருப்பினும், யூகாரியோடிக் உயிரணுக்களில் உள்ள மொழிபெயர்ப்புக்கு பிந்தைய மாற்றங்களை உருவாக்குவதில் பெரும்பாலான புரோக்கரியோட்டுகளின் இயலாமை அல்லது பல கள புரதங்களை தவறாக மடிப்பதன் மூலம் சிடிஎன்ஏவின் பேஜ் காட்சி எப்போதும் மட்டுப்படுத்தப்படுகிறது. சிடிஎன்ஏ நூலகங்களின் பகுப்பாய்விற்கு பிவிஐ பயனுள்ளதாக இருந்தபோதிலும், பிஐஐ மற்றும் பிவிஐஐ பேஜ் டிஸ்ப்ளேவுக்கு மிகவும் பயன்படுத்தப்படும் கோட் புரதங்களாக உள்ளன. பிவிஐஐ மற்றும் பிஐஎக்ஸ் 1995 ஆம் ஆண்டில் ஒரு பரிசோதனையில், குளுதாதயோன் எஸ்-டிரான்ஸ்ஃபெரேஸை பிவிஐஐ மற்றும் பிஐஎக்ஸ் இரண்டிலும் காட்சிப்படுத்த முயற்சி செய்யப்பட்டது மற்றும் தோல்வியடைந்தது. இருப்பினும், என்-முனையத்தில் ஒரு பெரிபிளாஸ்மிக் சிக்னல் வரிசை (பெல்பி அல்லது ஓம்பா) சேர்க்கப்பட்ட பிறகு இந்த புரதத்தின் பேஜ் டிஸ்ப்ளே வெற்றிகரமாக முடிக்கப்பட்டது. ஒரு சமீபத்திய ஆய்வில், AviTag, FLAG மற்றும் ஹிஸ் ஆகியவை சிக்னல் வரிசை தேவையில்லாமல் pVII இல் காட்டப்படலாம் என்று காட்டப்பட்டுள்ளது. பின்னர் ஒற்றை சங்கிலி எஃப். வி (எஸ். சி. எஃப். வி) மற்றும் ஒற்றை சங்கிலி டி செல் ஏற்பிகள் (எஸ். சி. டி. சி. ஆர்) ஆகியவற்றின் வெளிப்பாடு சமிக்ஞை வரிசையுடன் மற்றும் இல்லாமல் வெளிப்படுத்தப்பட்டது. PelB (புரதத்தை பெரிபிளாசத்திற்கு குறிவைக்கும் ஒரு அமினோ அமில சமிக்ஞை வரிசை, அங்கு ஒரு சமிக்ஞை பெப்டிடேஸ் பின்னர் PelB ஐ பிளவுபடுத்துகிறது) சமிக்ஞை வரிசை இல்லாமல் pVII மற்றும் PIX இணைப்புகளுடன் ஒப்பிடும்போது பேஜ் டிஸ்ப்ளே அளவை மேம்படுத்தியது. இருப்பினும், இது ஃபேஜெமிட் மரபணுக்களை விட அதிக உதவி ஃபேஜ் மரபணுக்களை இணைக்க வழிவகுத்தது. அனைத்து சந்தர்ப்பங்களிலும், pIII இணைவைப் பயன்படுத்துவதை விட ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே நிலைகள் குறைவாக இருந்தன. இருப்பினும், குறைந்த டிஸ்ப்ளே உண்மையான மோனோவலன்ட் டிஸ்ப்ளேவுக்கு நெருக்கமாக இருப்பதால், பைண்டர்களைத் தேர்ந்தெடுப்பதற்கு குறைந்த டிஸ்ப்ளே மிகவும் சாதகமாக இருக்கலாம். ஆறு சந்தர்ப்பங்களில் ஐந்தில், அஃபினிட்டி தேர்வு மதிப்பீடுகளில் pIII ஃப்யூஷன்களை விட பெல்பி இல்லாத pVII மற்றும் PIX ஃப்யூஷன்கள் மிகவும் திறமையானவை. பிவிஐஐ மற்றும் பிஐஎக்ஸ் டிஸ்ப்ளே தளங்கள் நீண்ட காலத்திற்கு பிஐஐஐஐ விட சிறப்பாக செயல்படக்கூடும் என்றும் அந்த கட்டுரை கூறுகிறது. pIII க்கு பதிலாக pVII மற்றும் PIX ஐப் பயன்படுத்துவதும் ஒரு நன்மையாக இருக்கலாம், ஏனெனில் பயன்படுத்தப்படும் pIII காட்டு வகையாக இருந்தால் விரியன்-ஆன்டிஜென் பிணைப்பை உடைக்காமல் விரியன் மீட்பு மேற்கொள்ளப்படலாம். அதற்கு பதிலாக, மணிகளுக்கும் ஆன்டிஜெனுக்கும் இடையில் ஒரு பகுதியில் ஒருவர் பிளவுபடலாம். pIII அப்படியே இருப்பதால், ஆன்டிஜென் பேஜுடன் பிணைக்கப்பட்டுள்ளதா என்பது முக்கியமல்ல. டி7 பேஜ்கள் ஃபேஜ் காட்சிக்கு எஃப்எஃப் பேஜ்களைப் பயன்படுத்துவதில் உள்ள சிக்கல் என்னவென்றால், அவை பேஸுக்குள் இணைக்கப்படுவதற்கு முன்பு பாக்டீரியா உள் சவ்வின் குறுக்கே இடமாற்றம் செய்யப்பட வேண்டும். சில புரதங்கள் இந்த செயல்முறைக்கு உட்படுத்தப்பட முடியாது, எனவே அவை Ff பேஜ்களின் மேற்பரப்பில் காட்டப்பட முடியாது. இந்த சந்தர்ப்பங்களில், அதற்கு பதிலாக T7 ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளே பயன்படுத்தப்படுகிறது. T7 ஃபேஜ் டிஸ்ப்ளேவில், காட்டப்பட வேண்டிய புரதம் T7 இன் மரபணு 10 கேப்சிட் புரதத்தின் சி-முனையத்துடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது. T7 ஐப் பயன்படுத்துவதில் உள்ள குறைபாடு என்னவென்றால், மேற்பரப்பில் வெளிப்படுத்தக்கூடிய புரதத்தின் அளவு குறுகிய பெப்டைட்களுக்கு மட்டுப்படுத்தப்பட்டுள்ளது, ஏனெனில் T7 மரபணுவில் பெரிய மாற்றங்களை M13 இல் இருப்பதைப் போல இடமளிக்க முடியாது, அங்கு ஃபேஜ் அதன் மேல்புறத்தை அதற்குள் உள்ள பெரிய மரபணுவிற்கு ஏற்றவாறு நீண்டதாக ஆக்குகிறது. இருப்பினும், எஸ். சி. எஃப். வி தேர்வுக்கு ஒரு பெரிய புரத நூலகத்தின் உற்பத்திக்கு இது பயனுள்ளதாக இருக்கும், அங்கு எஸ். சி. எஃப். வி ஒரு எம் 13 பேஜில் வெளிப்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் ஆன்டிஜென்கள் டி 7 பேஜில் மேற்பரப்பில் வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன. உயிர் தகவலியல் வளங்கள் மற்றும் கருவிகள் தரவுத்தளங்கள் மற்றும் மிமோடோப்புகளுக்கான கணக்கீட்டு கருவிகள் பேஜ் டிஸ்ப்ளே ஆய்வின் முக்கிய பகுதியாக உள்ளன. தரவுத்தளங்கள், நிரல்கள் மற்றும் வலை சேவையகங்கள் இலக்கு-தொடர்பற்ற பெப்டைடுகளை விலக்குவதற்கும், சிறிய மூலக்கூறுகள்-புரத தொடர்புகளை வகைப்படுத்துவதற்கும், புரத-புரத தொடர்புகளை வரைபடமாக்குவதற்கும் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. பயனர்கள் ஒரு புரதத்தின் முப்பரிமாண அமைப்பு மற்றும் பேஜ் டிஸ்ப்ளே பரிசோதனையிலிருந்து தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பெப்டைடுகளைப் பயன்படுத்தி இணக்கமான எபிடோப்புகளை வரைபடமாக்கலாம். சில வேகமான மற்றும் திறமையான கணக்கீட்டு முறைகள் ஆன்லைனில் கிடைக்கின்றன. மேலும் காண்க வழிநடத்தப்பட்ட பரிணாம புரதம்-புரதம் இடைவினைகள் பெல்பி தலைவர் வரிசை போட்டி நுட்பங்கள்ஃ இரண்டு கலப்பின அமைப்பு எம்ஆர்என்ஏ காட்சி ரைபோசோம் காட்சி ஈஸ்ட் காட்சி குறிப்புகள் மேலும் வாசிப்பு வேதியியல் பொறியியலில் தேர்வு மற்றும் வடிவமைப்பு ஈடிஎச்-2 மனித ஆன்டிபாடி பேஜ் நூலகம் வெளிப்புற இணைப்புகள் மூலக்கூறு உயிரியல் பாக்டீரியோபேஜ்கள் நுண்ணுயிரியல் புரதம்-புரதம் தொடர்பு மதிப்பீடுகள் காட்சி நுட்பங்கள்