Tn3 transposon
டிஎன்3 டிரான்ஸ்போசன் என்பது 4957 அடிப்படை ஜோடி நடமாடும் மரபணு உறுப்பு ஆகும், இது புரோக்கரியோட்டுகளில் காணப்படுகிறது. இது மூன்று புரதங்களை குறியாக்கம் செய்கிறதுஃ β-லாக்டமேஸ், β-லாக்டம் நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளுக்கு எதிர்ப்பை வழங்கும் ஒரு நொதி (மற்றும் மரபணு ப்ளேவால் குறியாக்கம் செய்யப்படுகிறது). டிஎன்3 டிரான்ஸ்போசேஸ் (மரபணு டிஎன்பிஏ மூலம் குறியிடப்பட்டது) டிஎன்3 ரிசல்வேஸ் (மரபணு டிஎன்பிஆர் மூலம் குறியிடப்பட்டது) ஆரம்பத்தில் டிரான்ஸ்போசேஸின் ஒடுக்கியாக கண்டுபிடிக்கப்பட்டது, டிஎன்3 பிரதிபலிப்பை எளிதாக்குவதில் ரிசல்வேஸ் ஒரு பங்கைக் கொண்டுள்ளது (ஷெர்ராட் 1989). டிரான்ஸ்போசன் ஒரு ஜோடி 38 பிபி தலைகீழ் மீள்நிகழ்வுகளால் சூழப்பட்டுள்ளது. ரெப்ளிகேஷன் பொறிமுறை படி 1-ரெப்ளிகேட்டிவ் ஒருங்கிணைப்பு இந்த முதல் கட்டம் டிரான்ஸ்போசேஸ் மூலம் ஊக்குவிக்கப்படுகிறது. டிரான்ஸ்போசான் (நன்கொடையாளர் பிளாஸ்மிட்) கொண்ட பிளாஸ்மிட் ஒரு புரவலன் பிளாஸ்மிட் (இலக்கு பிளாஸ்மிட்) உடன் இணைகிறது. இந்த செயல்பாட்டில், டிரான்ஸ்போசன் மற்றும் புரவலன் டிஎன்ஏவின் ஒரு குறுகிய பகுதி பிரதிபலிக்கப்படுகின்றன. இறுதி தயாரிப்பு டிரான்ஸ்போசனின் இரண்டு நகல்களைக் கொண்ட ஒரு 'கோயின்டெக்ரேட்' பிளாஸ்மிட் ஆகும். ஷாபிரோ (1978) இந்த செயல்முறைக்கு பின்வரும் பொறிமுறையை முன்மொழிந்தார்ஃ நான்கு ஒற்றை-ஸ்ட்ராண்ட் பிளவுகள் ஏற்படுகின்றன-நன்கொடையாளர் பிளாஸ்மிட்டின் ஒவ்வொரு இழையிலும் ஒன்று மற்றும் இலக்கு பிளாஸ்மிட்டின் ஒவ்வொரு இழையிலும் ஒன்று. நன்கொடையாளர் மற்றும் இலக்கு பிளாஸ்மிட்கள் ஒன்றாக இணைக்கப்பட்டுள்ளன, ஆனால் அசல் பிளவுகளின் நிலைப்பாட்டின் காரணமாக இரண்டு ஒற்றை-இழையுள்ள பகுதிகள் உள்ளன. டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஒற்றை இழைகள் கொண்ட பகுதிகளை இரட்டை இழைகளாக ஆக்குகிறது, தற்போதுள்ள இழையை ஒரு வார்ப்புருவாகப் பயன்படுத்துகிறது. இந்த கட்டத்தில்தான் டிரான்ஸ்போசன் பிரதிபலிக்கப்படுகிறது. வலதுபுறத்தில் உள்ள வரைபடங்கள் பிளாஸ்மிட்கள் இணைக்கப்பட்டவுடன் பிளவுகளின் நிலைகள் சில பகுதிகளின் பிரதிக்கு வழிவகுக்கும் வழியை விளக்குகின்றன. படி 2-தீர்மானம் புரவலன் மற்றும் இலக்கு மூலக்கூறுகளை பிரிக்க டிஎன்3 ரிசல்வேஸ் டிரான்ஸ்போசனின் ஒவ்வொரு நகலிலும் இருக்கும் ரெஸ் எனப்படும் ஒரு குறிப்பிட்ட தளத்தில் டிரான்ஸ்போசனின் பழைய மற்றும் புதிய நகலுக்கு இடையில் தள-குறிப்பிட்ட மறுசீரமைப்பை செயல்படுத்துகிறது. ரெஸ் 114 பிபி நீளம் கொண்டது மற்றும் இது 3 துணை தளங்களைக் கொண்டுள்ளது, அதாவது தளங்கள் I, II மற்றும் III. இந்த தளங்கள் ஒவ்வொன்றும் வெவ்வேறு நீளங்களைக் கொண்டுள்ளன (முறையே 28,34 மற்றும் 25 பிபி) மேலும் அவை சமமற்ற இடைவெளியில் 22 பிபி தளங்கள் I மற்றும் II ஐப் பிரிக்கின்றன மற்றும் தளங்கள் II மற்றும் III க்கு இடையில் 5 பிபி மட்டுமே உள்ளன. தளங்கள் 6 பிபி தலைகீழ் மீண்டும் மீண்டும் மையக்கருத்துக்களைக் கொண்டுள்ளன, அவை மாறுபட்ட நீளத்தின் மைய வரிசையைக் கொண்டுள்ளன. இந்த மையக்கருத்துக்கள் தீர்வுக்கான பிணைப்பு தளங்களாக செயல்படுகின்றன, இதனால் ஒவ்வொரு தளமும் ஒரு தீர்க்கும் டைமரை பிணைக்கிறது, ஆனால் மாறுபட்ட தொடர்பு மற்றும் சற்றே மாறுபட்ட புரத-டி. என். ஏ சிக்கலான கட்டமைப்பைக் கொண்டுள்ளது. இந்த மூன்று துணை தளங்களும் மறுசீரமைப்புக்கு இன்றியமையாதவை. மறுசீரமைப்பின் போது, ஒவ்வொரு துணை தளத்துடனும் பிணைக்கப்பட்ட ரிசல்வேஸ் டைமர்களுடன் இரண்டு நேரடியாக மீண்டும் மீண்டும் ரெஸ் தளங்கள், ஒன்றாக வந்து சினாப்டோசோம் எனப்படும் ஒரு பெரிய சிக்கலான கட்டமைப்பை உருவாக்குகின்றன. தளங்கள் II மற்றும் III உடன் பிணைக்கப்பட்ட தீர்வு இந்த வளாகத்தின் கூட்டத்தைத் தொடங்குகிறது. இந்த கட்டமைப்பில், அதன் சரியான கட்டமைப்பு இன்னும் தெளிவாகத் தெரியவில்லை, இரண்டு ரெஸ் தளங்கள் தளம் I இன் இரண்டு பிரதிகளை இணைக்கும் வகையில் பின்னிப் பிணைக்கப்பட்டுள்ளன, இது ஒவ்வொரு தளத்திற்கும் பிணைக்கப்பட்ட ரிசல்வேஸ் டைமர்களை ஒரு டெட்ராமரை உருவாக்க அனுமதிக்கிறது. மீண்டும், இது துணை தளங்களில் (தளங்கள் II மற்றும் III) பிணைக்கப்பட்ட ரிசல்வேஸ் டைமர்களுக்கு இடையிலான தொடர்பு மற்றும் தளம் I இல் ரிசல்வேஸ் ஆகும், இதனால் இரு டைமர்கள் ஒத்திசைந்து ஒரு டெட்ராமரை உருவாக்குகின்றன. டெட்ராமர் உருவான பிறகு அது செயல்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் மேல் மற்றும் கீழ் டிஎன்ஏ இழைகள் ஒரே நேரத்தில் தளத்தின் நடுவில் 2 பிபி ஓவர்ஹாங்குடன் பிளவுபடுத்தப்படுகின்றன. 180 டிகிரி நிகர சுழற்சியுடன் இன்னும் அறியப்படாத பொறிமுறையால் இழைப் பரிமாற்றம் நிகழ்கிறது. சரம் பரிமாற்றத்தைத் தொடர்ந்து மதம் பின்பற்றப்படுகிறது (ஸ்டார்க் மற்றும் பலர், 1992). இரண்டு நேரடியாக மீண்டும் மீண்டும் ரெஸ் தளங்களுக்கு இடையிலான மறுசீரமைப்பு, இரண்டு அசல் மூலக்கூறுகளாகப் பிரிக்கிறது அல்லது தீர்க்கிறது, ஒவ்வொன்றும் இப்போது டிஎன் 3 டிரான்ஸ்போசனின் நகலைக் கொண்டுள்ளன. தெளிவுக்குப் பிறகு இந்த இரண்டு மூலக்கூறுகளும் ஒரு எளிய இரண்டு-முனைய கேட்டினேனாக இணைக்கப்பட்டுள்ளன, அவை விவோவில் ஒரு வகை II டோபோஐசோமரேஸ் (கிரைண்ட்லி 2002) மூலம் எளிதில் பிரிக்கப்படலாம். காட்டு வகை ரிசல்வேஸ் அமைப்புக்கு முற்றிலும் ஒரு சூப்பர் காயில் அடி மூலக்கூறு தேவைப்படுகிறது மற்றும் மறுசீரமைப்பு தளங்கள் அதே டிஎன்ஏ மூலக்கூறில் நேரடியாக மீண்டும் மீண்டும் நோக்கப்படுகின்றன. இருப்பினும், துணை தளங்களுக்கான தேவையை இழந்த பல "கட்டுப்பாடற்ற" அல்லது "ஹைபராக்டிவ்" பிறழ்வுகள் தனிமைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன. இந்த பிறழ்வுகள் தளம் I இன் இரண்டு பிரதிகளுக்கு இடையில் மறுசீரமைப்பை ஊக்குவிக்கும் திறன் கொண்டவை, இது அடிப்படையில் மறுசீரமைப்பு தளத்தின் அளவை 114 பிபி இலிருந்து 28 பிபி ஆக மட்டுமே குறைக்கிறது. மேலும், இந்த பிறழ்வுகளுக்கு சூப்பர் காய்லிங் அல்லது இணைப்புத் தேவைகள் எதுவும் இல்லை (அர்னால்ட் மற்றும் பலர், 1999) மற்றும் பாலூட்டி உயிரணுக்களில் செயல்படுவதாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது. ஹைபராக்டிவ் ரிசல்வேஸ் பிறழ்வுகள் இதுவரை மாற்றப்பட்ட வரிசை குறிப்பிட்ட தன்மையுடன் தீர்வுகளை உருவாக்குவதில் பயனுள்ளதாக நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளன, ஆனால் கட்டமைப்பு வேலைகளிலும் பயனுள்ளதாக உள்ளன. முழு ரிசல்வேஸ் மறுசீரமைப்பு எதிர்வினையும் விட்ரோவில் மீண்டும் உருவாக்க முடியும், இதற்கு ரிசல்வேஸ், ஒரு அடி மூலக்கூறு டிஎன்ஏ மற்றும் பன்முக நேர்மின் அயனிகள் மட்டுமே தேவைப்படுகின்றன, காட்டு வகை புரதம் அல்லது ஹைபராக்டிவ் பிறழ்வுகளைப் பயன்படுத்துகின்றன. ஹைபராக்டிவ் ரிசல்வேஸ் பிறழ்வுகள், மேலும் வளர்ந்தால், மூலக்கூறு உயிரியலில் இன்றுவரை பொதுவாகப் பயன்படுத்தப்படும் மறுசீரமைப்பு அமைப்புகளான க்ரீ மற்றும் எஃப். எல். பி. க்கு மாற்றாக மாறக்கூடும். குறிப்புகள் ஷெரட், டி. ஜே. (1989). Tn3 மற்றும் தொடர்புடைய இடமாற்றக் கூறுகள்ஃ தள-குறிப்பிட்ட மறுசீரமைப்பு மற்றும் இடமாற்றம். பெர்க், டி. இ., ஹோவ், எம். (பதிப்புகள்) மொபைல் டிஎன்ஏ. அமெரிக்கன் சொசைட்டி ஃபார் மைக்ரோபயாலஜி, வாஷிங்டன், டிசி பிபி. 163-184 கிரைண்ட்லி, என். டி. எஃப். (2002). டிஎன்3 போன்ற கூறுகளின் இயக்கம்ஃ மாற்றம் மற்றும் ஒருங்கிணைந்த தீர்மானம். மொபைல் டிஎன்ஏ II இல், கிரேக், என்., கிரேகி, ஆர்., கெல்லர்ட், எம். மற்றும் லாம்போவிட்ஸ், ஏ. (ed. ), pp 272-302. ஏஎஸ்எம் பிரஸ், வாஷிங்டன், டிசி, அமெரிக்கா மூலக்கூறு உயிரியல் மூலக்கூறு மரபியல் டிஎன்ஏ நடமாடும் மரபணு கூறுகள்