HAT medium
எச்ஏடி மீடியம் (ஹைபோக்சாண்டைன்-அமினோப்டெரின்-தைமிடின் மீடியம்) என்பது பாலூட்டி செல் கலாச்சாரத்திற்கான ஒரு தேர்வு ஊடகமாகும், இது அமினோப்டெரின் கலவையை நம்பியுள்ளது, இது டிஎன்ஏ தொகுப்பில் இடைநிலையாக இருக்கும் ஹைபோக்சாண்டைன் (ஒரு பியூரின் வழித்தோன்றல்) மற்றும் தைமிடின் (ஒரு டியோக்ஸினியூக்ளியோசைடு) உடன் டைஹைட்ரோஃபோலேட் ரிடக்டேஸைத் தடுப்பதன் மூலம் சக்திவாய்ந்த ஃபோலேட் வளர்சிதை மாற்றத் தடுப்பானாக செயல்படுகிறது. தந்திரம் என்னவென்றால், அமினோப்டெரின் டிஎன்ஏ டி நோவோ தொகுப்பைத் தடுக்கிறது, இது உயிரணு பிரிவினை தொடர முற்றிலும் தேவைப்படுகிறது, ஆனால் ஹைபோக்சாண்டைன் மற்றும் தைமிடின் ஆகியவை சரியான என்சைம்களைக் கொண்டிருந்தால், அடைப்பைத் தவிர்க்க மூலப்பொருளை ("சால்வேஜ் பாதை") செல்களுக்கு வழங்குகின்றன, அதாவது அவற்றைக் குறியாக்கம் செய்யும் மரபணுக்களின் செயல்பாட்டு நகல்களைக் கொண்டுள்ளன. டைஹைட்ரோஃபோலேட் குறைப்பதன் மூலம் டெட்ராஹைட்ரோஃபோலேட் (டி. எச். எஃப்) உற்பத்தி செய்யும் டைஹைட்ரோஃபோலேட் ரிடக்டேஸ் என்சைம், குறிப்பாக அமினோப்டெரின் மூலம் தடுக்கப்படுகிறது. குறிப்பிட்ட புரதங்களுடன் இணைந்து செயல்படும் டி. எச். எஃப், ஒற்றை கார்பன் அலகுகளைப் பெற முடியும், அவை பின்னர் குறிப்பிட்ட இலக்குகளுக்கு மாற்றப்படுகின்றன. செல்லுலார் இனப்பெருக்கத்திற்கான முக்கியமான இலக்குகளில் ஒன்று தைமிடிலேட் சிந்தேஸ் ஆகும், இது டியோக்ஸியூரைடின் மோனோபாஸ்பேட்டிலிருந்து (டி. யு. எம். பி) தைமிடைன் மோனோபாஸ்பேட்டை (டி. எம். பி) உருவாக்குகிறது. கூடுதல் பாஸ்போரிலேஷன் எதிர்வினைகள் மூலம், டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் டிஎன்ஏவை உருவாக்கப் பயன்படுத்தும் நான்கு நியூக்ளியோடைடு முன்னோடிகளில் ஒன்றான தைமிடின் ட்ரைபாஸ்பேட்டை (டிடிபி) உருவாக்க டிஎம்பி பயன்படுத்தப்படலாம். டிஎம்பி மாற்றுவதற்குத் தேவையான டிஎச்எஃப் இல்லாமல், டிடிபி இருக்க முடியாது, மேலும் டிஎம்பி மற்றொரு மூலத்திலிருந்து உற்பத்தி செய்யப்படாவிட்டால் டிஎன்ஏ தொகுப்பு தொடர முடியாது. மாற்று ஆதாரம் எச்ஏடி ஊடகத்தில் உள்ள தைமிடின் ஆகும், இது செல்களால் உறிஞ்சப்படலாம் மற்றும் தைமிடின் கைனேஸ் (டி. கே.) மூலம் டிஎம்பிக்குள் பாஸ்பரிலேட் செய்யப்படுகிறது. ஐ. எம். பி. யின் தொகுப்புக்கும் (ஜி. எம். பி மற்றும் ஜி. டி. பி. யின் முன்னோடியும், ஏ. எம். பி மற்றும் ஏ. டி. பி. யின் முன்னோடியும்) டி. எச். எஃப் தேவைப்படுகிறது, மேலும் இதைத் தவிர்க்கவும் முடியும். இந்த விஷயத்தில் ஹைபோக்சாண்டைன்-குவானைன் பாஸ்போரிபோசைல் டிரான்ஸ்ஃபெரேஸ் (எச். ஜி. பி. ஆர். டி) ஊடகத்திலிருந்து உறிஞ்சப்பட்ட ஹைபோக்சாண்டைனை பி. ஆர். பி. பி உடன் வினைபுரிந்து, பைரோபாஸ்பேட்டை விடுவித்து, ஒரு மீட்பு பாதை மூலம் ஐ. எம். பி. யை உற்பத்தி செய்கிறது. எனவே, செல் கலாச்சாரத்திற்கு எச். ஏ. டி ஊடகத்தைப் பயன்படுத்துவது வேலை செய்யும் டி. கே மற்றும் எச். ஜி. பி. ஆர். டி கொண்ட செல்களுக்கான செயற்கை தேர்வின் ஒரு வடிவமாகும். இந்த திட்டத்திற்கு பல பயனுள்ள சுத்திகரிப்புகள் உயிரணுக்களைக் கொல்லும் விஷங்களால் சாத்தியமாக்கப்படுகின்றன, ஆனால் இந்த மரபணுக்களில் ஒன்று இல்லாவிட்டால் அவை நோய் எதிர்ப்பு சக்தியைக் கொண்டுள்ளன. எனவே, டி. கே இல்லாத ஒரு செல் புரோமோடோயூரைடினை (பி. ஆர். டி. யூ) எதிர்க்கிறது மற்றும் எச். ஜி. பி. ஆர். டி இல்லாத ஒரு செல் 6-தியோகுவானைன் (6-டி. ஜி) மற்றும் 8-அஸாகுவானைனை எதிர்க்கிறது. எனவே, பிந்தைய இரண்டு மருந்துகளில் ஒன்றைத் தேர்ந்தெடுப்பது, அதைத் தொடர்ந்து எச். ஏ. டி ஊடகம், மாற்று காலனிகளை வழங்கும். பயன்பாடுகள் எச்ஏடி ஊடகம் மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளை தயாரிக்க பயன்படுத்தப்படுகிறது. இந்த செயல்முறை ஹைப்ரிடோமா தொழில்நுட்பம் என்று அழைக்கப்படுகிறது. ஆய்வக விலங்குகள் (எ. கா., எலிகள்) முதலில் ஒரு ஆன்டிஜெனுக்கு ஆளாகின்றன, அதற்கு எதிராக ஒரு ஆன்டிபாடியை தனிமைப்படுத்துவதில் நாம் ஆர்வமாக உள்ளோம். பாலூட்டியில் இருந்து ப்லீனோசைட்டுகள் தனிமைப்படுத்தப்பட்டவுடன், பி செல்கள் பாலிஎதிலீன் கிளைகோல் அல்லது செண்டாய் வைரஸைப் பயன்படுத்தி எச். ஜி. பி. ஆர். டி எதிர்மறை, அழியாத மைலோமா செல்களுடன் இணைக்கப்படுகின்றன. இணைக்கப்பட்ட செல்கள் எச்ஏடி ஊடகத்தில் அடைகாக்கப்படுகின்றன. நடுத்தரத்தில் உள்ள அமினோப்டெரின் டி நோவோ பாதையைத் தடுக்கிறது. எனவே, பயன்படுத்தப்படாத மைலோமா செல்கள் இறந்துவிடுகின்றன, ஏனெனில் அவை டி நோவோ அல்லது மீட்பு பாதை மூலம் நியூக்ளியோடைடுகளை உற்பத்தி செய்ய முடியாது. பயன்படுத்தப்படாத பி செல்கள் குறுகிய ஆயுட்காலம் கொண்டவை என்பதால் அவை இறந்துவிடுகின்றன. இந்த வழியில், பி செல்-மைலோமா கலப்பினங்கள் மட்டுமே உயிர்வாழ்கின்றன. இந்த செல்கள் ஆன்டிபாடிகளை உற்பத்தி செய்கின்றன (பி செல்களின் ஒரு பண்பு) மேலும் அவை அழியாதவை (மைலோமா செல்களின் பண்பு). அடைகாக்கப்பட்ட ஊடகம் பின்னர் பல கிணறு தட்டுகளாக நீர்த்துப் போகிறது, ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் 1 செல் மட்டுமே உள்ளது. பின்னர் ஒவ்வொரு கிணற்றிலும் உள்ள சூப்பர்நேட்டன்ட் விரும்பிய ஆன்டிபாடியை சரிபார்க்கலாம். ஒரு கிணற்றில் உள்ள ஆன்டிபாடிகள் அதே பி செல்லால் உற்பத்தி செய்யப்படுவதால், அவை ஒரே எபிடோப்பை நோக்கி இயக்கப்படும், மேலும் அவை மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. மோனோக்ளோனல் ஆன்டிபாடிகளின் உற்பத்தி முதன்முதலில் சீசர் மில்ஸ்டீன் மற்றும் ஜார்ஜஸ் ஜே. எஃப். கோஹ்லர் ஆகியோரால் கண்டுபிடிக்கப்பட்டது, இது அவர்களுக்கு 1984 ஆம் ஆண்டு உடலியல் அல்லது மருத்துவத்திற்கான நோபல் பரிசைப் பெற்றது, நீல்ஸ் காஜ் ஜெர்னேவுடன் பகிர்ந்து கொண்டது. குறிப்புகள் செல் கலாச்சார ஊடகம்