Tissue cytometry
திசு பட சைட்டோமெட்ரி அல்லது திசு சைட்டோமெட்ரி என்பது டிஜிட்டல் ஹிஸ்டோபாதாலஜியின் ஒரு முறையாகும், இது கிளாசிக்கல் டிஜிட்டல் நோயியல் (கண்ணாடி ஸ்லைடுகள் ஸ்கேனிங் மற்றும் மெய்நிகர் ஸ்லைடு உருவாக்கம்) மற்றும் கணக்கீட்டு நோயியல் (டிஜிட்டல் பகுப்பாய்வு) ஆகியவற்றை அனைத்து வகையான நோய்கள், திசு மற்றும் உயிரணு வகைகள் மற்றும் மூலக்கூறு குறிப்பான்கள் மற்றும் தொடர்புடைய கறை முறைகள் ஆகியவற்றிற்கான தீர்வுகளுடன் ஒரு ஒருங்கிணைந்த அணுகுமுறையாக ஒருங்கிணைக்கிறது. திசு சைட்டோமெட்ரி மெய்நிகர் ஸ்லைடுகளைப் பயன்படுத்துகிறது, ஏனெனில் அவை பல, வணிக ரீதியாக கிடைக்கக்கூடிய ஸ்லைடு ஸ்கேனர்கள் மற்றும் பிரத்யேக பட பகுப்பாய்வு மென்பொருளால் உருவாக்கப்படலாம்-முன்னுரிமை இயந்திரம் மற்றும் ஆழமான கற்றல் வழிமுறைகள் உட்பட. திசு சைட்டோமெட்ரி தடிமனான திசுக்களுக்குள் செல்லுலார் பகுப்பாய்வை செயல்படுத்துகிறது, வரையறுக்கப்பட்ட செல்லுலார் துணை மக்கள்தொகை குறித்த இடஞ்சார்ந்த தகவல்கள் உட்பட உருவவியல் மற்றும் சூழல் தகவல்களைத் தக்க வைத்துக் கொள்கிறது. இந்த செயல்பாட்டில், ஒரு திசு மாதிரி, ஃபார்மலின்-ஃபிக்ஸ் செய்யப்பட்ட பாராஃபின்-உட்பொதிக்கப்பட்ட (எஃப். எஃப். பி. இ) அல்லது உறைந்த திசு பிரிவு, "கிரையோகட்" என்றும் குறிப்பிடப்படுகிறது, இது இம்யூனோஹிஸ்டோகெமிஸ்ட்ரி (ஐ. எச். சி) அல்லது இம்யூனோஃப்ளோரசன்ட் மார்க்கர்களுடன் பெயரிடப்பட்டுள்ளது, உயர்-செயல்திறன் ஸ்லைடு ஸ்கேனர்களுடன் ஸ்கேன் செய்யப்படுகிறது மற்றும் மெய்நிகர் ஸ்லைடுகளிலிருந்து சேகரிக்கப்பட்ட தரவு திசு சூழலில் தனிப்பட்ட செல்களை தானாக அடையாளம் காணவும், ஒவ்வொரு உயிரணுவிற்கும் நியூக்ளியஸ் மற்றும் சைட்டோபிளாஸத்தை வேறுபடுத்தவும் முடியும் மென்பொருளைப் பயன்படுத்தி செயலாக்கப்பட்டு பகுப்பாய்வு செய்யப்படுகிறது. கூடுதல் வழிமுறைகள் செல்லுலார் சவ்வுகள், துணை செல்லுலார் கட்டமைப்புகள் (சைட்டோஸ்கெலிட்டல் இழைகள், வெற்றிடங்கள், நியூக்ளியோலி போன்றவை) மற்றும்/அல்லது பல்லுயிர் திசு கட்டமைப்புகள் (சுரப்பிகள், குளோமெருலி, மேல் தோல் அல்லது கட்டி மையங்கள்) ஆகியவற்றை அடையாளம் காணலாம். ஃப்ளோரசன்ஸ் ஆக்டிவேட்டட் செல் ஸார்டிங் (எஃப். ஏ. சி. எஸ்) என்பது ஒற்றை உயிரணுக்களில் ஃப்ளோரசன்ஸ் சமிக்ஞைகளை அளவிடும் ஒரு பகுப்பாய்வு முறையாகும், அங்கு சமிக்ஞை ஆன்டிபாடி-மத்தியஸ்தம் செய்யப்பட்ட கறை நுட்பங்கள் மற்றும் ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி மூலம் கண்டறியப்பட்ட பினோடைப்ஸ்களிலிருந்து வருகிறது. ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரியின் முக்கிய வரம்பு என்னவென்றால், இது கரைசலில் உள்ள உயிரணுக்களுக்கு மட்டுமே பயன்படுத்தப்படலாம்-பெயர் குறிப்பிடுவது போல. திடமான திசுக்களை "கரைக்கும்" முறைகள் இருந்தாலும், அத்தகைய எந்தவொரு செயலாக்கமும் திசு கட்டமைப்பையும் எந்தவொரு இடஞ்சார்ந்த சூழலையும் மாற்ற முடியாத வகையில் அழிக்கிறது. எனவே, திசு சைட்டோமெட்ரி அடிப்படை ஆராய்ச்சி, மருத்துவ நடைமுறை மற்றும் மருத்துவ பரிசோதனைகளில் ஃப்ளோ சைட்டோமெட்ரி மற்றும் ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கியின் பயன்பாட்டை பூர்த்தி செய்கிறது, இது திடமான திசு பிரிவுகளில் (அதே போல் பின்பற்றப்பட்ட செல் கலாச்சாரங்கள்) எஃப்ஏசிஎஸ் போன்ற பகுப்பாய்வுகளை வழங்குகிறது. ஓட்ட சைட்டோமெட்ரிக்கு எதிராக திசு சைட்டோமெட்ரியின் நன்மை என்னவென்றால், திசு சைட்டோமெட்ரிக்கு செல்களை திரவத்தில் தொங்கவிட வேண்டிய அவசியமில்லை, இது திசு அமைப்பு, உருவவியல் மற்றும் சூழல் தகவல்களின் ஒருமைப்பாட்டை பராமரிக்க உதவுகிறது, மேலும் துல்லியமான மற்றும் துல்லியமான சூழல் பகுப்பாய்விற்கு உதவுகிறது. இம்யூனோஹிஸ்டோகெமிஸ்ட்ரி மருத்துவ நடைமுறையில் பயன்படுத்தப்படுகிறது, அங்கு ஒவ்வொரு சாத்தியமான புற்றுநோய் நோயாளிகளிடமிருந்தும் திசு பிரேதப் பரிசோதனைகள் சேகரிக்கப்பட்டு, பார்மலினில் பொருத்தப்பட்டு, பாராஃபினில் உட்பொதிக்கப்படுகின்றன. இந்த திசு பிரிவுகள் ஒரு மைக்ரோடோமில் தொடர்ச்சியாக வெட்டப்பட்டு மெல்லிய பிரிவுகளை வழங்குகின்றன, இது மருத்துவ நோயறிதலுக்கான நோயறிதல் பொருளைக் குறிக்கிறது. புற்றுநோய் செல்களைக் கண்டறிய ஆரம்பத்தில் ஹெமடாக்சிலின் மற்றும் இயோசின் கறை கொண்டு ஒரு முறை கறை படிந்தது. பெருக்கம், பரம்பரை, முன்கணிப்பு மற்றும் புற்றுநோய்க்கான இலக்குகளுக்கு பல மார்க்கர் கறை செய்யப்படுகிறது. நோயியல் நிபுணர்கள் ஆப்டிகல் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி அப்ஜெக்டிவ் லென்ஸ்கள் மூலம் மதிப்பீடு செய்து, கறையை சதவீதத்தில் அல்லது நேர்மறை/எதிர்மறையாக மதிப்பெண் பெறுவதன் மூலம் நோயறிதலை முடிக்கிறார்கள். காட்சி மதிப்பீடு ஒரு அகநிலை நோயறிதல் மற்றும் சிகிச்சையின் திட்டத்தை வழங்குகிறது. ஒரு நிலையான திசுவில் உள்ள நோயெதிர்ப்பு மண்டல உயிரணுக்களில் ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரி போன்ற பகுப்பாய்வுகளைச் செய்ய மிகவும் வலுவான மற்றும் தானியங்கி அமைப்பு வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் திசு சைட்டோமெட்ரி என்று அழைக்கப்படுகிறது. 1990 களில் ஸ்டெய்னர் மற்றும் எக்கர் (சி. இ. ஓ/நிறுவனர் டிஸ்யூ க்னோஸ்டிக்ஸ்) ஆகியோரின் காப்புரிமைகளின் அடிப்படையில் இந்த நுட்பம் அறிமுகப்படுத்தப்பட்டது, இது "திசு பிரிவுகளில் உள்ள மாறுபட்ட செல் மக்கள்தொகையின் சைட்டோமெட்ரிக் பகுப்பாய்வு அல்லது ஃப்ளோரசன்ஸ் சாயங்கள் மற்றும்/அல்லது குரோமோஜன்கள் மூலம் காட்சிப்படுத்தப்பட்ட செல் கலாச்சாரம்" என்பதற்கான ஒரு நடைமுறையை விவரிக்கிறது. 21 ஆம் நூற்றாண்டின் முற்பகுதியில் ஹெர்னானி மற்றும் பலர் கூடுதல் காப்புரிமைகளை தாக்கல் செய்தனர். நோயெதிர்ப்பு திசுக்களில் மெய்நிகர் ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரியை செய்ய. ஸ்பெக்ட்ரல் குறிப்பு நூலகத்துடன் இணைந்து காரணி பகுப்பாய்வைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் ஸ்பெக்ட்ரல் கலவைகளின் தர பகுப்பாய்வை விவரிக்கும் 1982 ஆம் ஆண்டில் கில்லெட் மற்றும் பலர் முன்வைத்த செயல்முறையிலிருந்து பிந்தையவரின் அடிப்படைகள் பெறப்பட்டன. இந்த ஆய்வைத் தொடர்ந்து, ஜோ ஆர் மற்றும் பலர். டையமினோபென்சைடின் (டிஏபி) ஐ அடி மூலக்கூறாகப் பயன்படுத்தி பெராக்ஸிடேஸ்-ஆன்டிபெராக்ஸிடேஸ் (பிஏபி) சிக்கலான நுட்பத்துடன் புரோஸ்டேட் கட்டியின் ஹிஸ்டோலாஜிக் பிரிவுகளில் புரோஸ்டேட்-குறிப்பிட்ட அமில பாஸ்பேடேஸை (பிஎஸ்ஏபி) அளவிட ஒரு முறையை வெளியிட்டது. திசு சைட்டோமெட்ரி கட்டி நுண் சூழலின் பயன்பாடுகள்ஃ திசு சைட்டோமெட்ரி என்பது கட்டி நுண் சூழலை வகைப்படுத்த ஆராய்ச்சியில் பெரிதும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. எ. கா. ஐ. எச். சி/ஐ. எஃப்-பதப்படுத்தப்பட்ட திசு பிரிவுகளுக்குள் நோயெதிர்ப்பு நிலப்பரப்பு அல்லது கட்டி-வாஸ்குலரைசேஷன் அடையாளம் காணுதல். ஒரு காரணம் என்னவென்றால், இந்த தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் சிக்கலான திசு கட்டமைப்பு அப்படியே உள்ளது, எனவே செல்லுலார் பினோட்டைப்கள் மற்றும்/அல்லது பல்லுயிர் கட்டமைப்புகளுக்கு இடையிலான இடஞ்சார்ந்த உறவுகளையும் பகுப்பாய்வு செய்யலாம். திசு சைட்டோமெட்ரியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் பல ஆராய்ச்சிக் குழுக்களால் பல்வேறு நோயெதிர்ப்பு உயிரணு துணை மக்கள்தொகைகளின் (சிடி4, சிடி68, சிடி8, சிடி20, ஃபாக்ஸ்பி3, பிடி1) தாக்கத்தை வெவ்வேறு புற்றுநோய் வகைகளில் (எ. கா. மார்பக புற்றுநோய், பெருங்குடல் புற்றுநோய், இரைப்பை புற்றுநோய், மெலனோமா, சிறிய செல் அல்லாத நுரையீரல் புற்றுநோய்). புற்றுநோய் சிகிச்சையில் ஒரு புதிய சிகிச்சை உத்தி நோயெதிர்ப்பு சோதனைச் சாவடிகளை (ஆண்டிடூமோரல் நோயெதிர்ப்பு எதிர்வினையைத் தடுக்கும் மூலக்கூறுகள்) இலக்காகக் கொண்டிருப்பதால், திசு சைட்டோமெட்ரியால் பெறப்பட்ட நுண்ணறிவுகள் புதிய இலக்கு மூலக்கூறுகள்/பயோமார்க்கர்களைக் கண்டறியவும், நோயாளிகளுக்கான சிறந்த சிகிச்சை உத்தியைத் தீர்மானிக்கவும் உதவும். நோயெதிர்ப்புத் திறன்ஃ நோயெதிர்ப்பு உயிரணு சூழல் அழற்சி நோய்களின் சொற்பிறப்பியல் வரையறுக்க முக்கியமானது, இது பெரும்பாலும் தகவமைப்பு மற்றும்/அல்லது உள்ளார்ந்த நோயெதிர்ப்பு உயிரணுக்களின் பலவீனமான செயல்பாட்டின் விளைவாகும். திசு சைட்டோமெட்ரி குறிப்பிட்ட செல்களை, குறிப்பாக பன்முகத்தன்மை கொண்ட மக்களை, அவற்றின் சொந்த திசு சூழலுக்குள் கண்டறிந்து உள்ளூர்மயமாக்குவதற்கும், நோய்க்கு பின்னால் உள்ள குறிப்புகளை அடையாளம் காண்பதற்கும் பயனுள்ளதாக இருக்கும். எடுத்துக்காட்டாக, இது IgG4-தொடர்பான நோய்களை ஆராய பயன்படுத்தப்பட்டதுஃ ஒரு ஆய்வறிக்கை ஃபைப்ரோசிங் மெடியாஸ்டினிடிஸ் Th2 செல்களை விட CD4 + CTL களால் இயக்கப்படுவதைப் பற்றி தெரிவிக்கிறது, அங்கு CD4 + CTL களின் ஊடுருவல் திசு சைட்டோமெட்ரி மூலம் விளக்கப்பட்டுள்ளது. IgG4-தொடர்பான நோய் மற்றும் கிமுரா நோயில் ஃபோலிகுலர் டி செல்கள் பி-செல் வகுப்பு-மாற்றும் நிகழ்வுகளை எவ்வாறு பாதிக்கின்றன என்பதை பின்தொடர்தல் ஆய்வுகள் ஆராய்ந்தன-ஆராய்ச்சியாளர்கள் திசு சைட்டோமெட்ரியைப் பயன்படுத்தி AICDA + CD19 + B செல்கள் மற்றும் IgG4 வெளிப்பாட்டிற்கு இடையே ஒரு தொடர்பைக் கண்டறிந்தனர். மெசென்கைமல் ஸ்டெம் செல்கள் பண்புகள்ஃ மெசென்கைமல் ஸ்டெம் செல்கள் (எம். எஸ். சி) என்பது எலும்பு, குருத்தெலும்பு, தசை, வளரும் பற்கள் மற்றும் கொழுப்பு திசு போன்ற பல துணை வகைகளாக வேறுபடுத்தும் திறன் கொண்ட பன்முக செல்கள் ஆகும், அவை மீளுருவாக்கம் மருத்துவத்திற்கு மருத்துவ முக்கியத்துவம் வாய்ந்தவை. இருப்பினும், குறைந்தபட்ச பினோடிபிக் அளவுகோல்கள் வரையறுக்கப்பட்டிருந்தாலும், எம். எஸ். சி. க்கள் அவற்றின் பன்முகத்தன்மை காரணமாக அவற்றின் தனித்துவமான பயோமார்க்கர்களைப் பற்றி மேலும் வகைப்படுத்தப்பட வேண்டும். திசு சைட்டோமெட்ரி அமைதியான எம். சி. எஸ்ஸின் பயோமார்க்கர்களை விவரிக்க உறுதியுடன் உதவுகிறது, மேலும் இந்த மக்கள்தொகையில் ஹைலூரோனனின் விளைவை வகைப்படுத்துகிறது. திசு சைட்டோமெட்ரி கிளியோபிளாஸ்டோமாவுடன் எம். எஸ். சி. யின் தொடர்புகளை ஆராயவும் பயன்படுத்தப்படலாம்ஃ செல் இணைவு, செல்களுக்கு வெளியே உள்ள வெசிகிள் பரிமாற்றம் மற்றும் செல்களுக்கு இடையேயான தகவல்தொடர்புகளை வகைப்படுத்த. கூடுதலாக, திசு சைட்டோமெட்ரி முரைன் ஹிப்போகாம்பஸைப் படம்பிடிக்கவும், அல்சைமர் நோய்க்கான ஒரு மாதிரியாக எம்எஸ்சி மாற்று அறுவை சிகிச்சையுடன் எலிகளில் எம் 1/எம் 2 மைக்ரோகிலியாவைக் காட்சிப்படுத்தவும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. கொவிட்-19: கொவிட்-19 பெருந்தொற்றுக்கு நோய் வளர்ச்சி மற்றும் தீவிரத்தை கோடிட்டுக் காட்ட பல்வேறு கருவிகள் தேவைப்பட்டன. திசு சைட்டோமெட்ரியைப் பயன்படுத்தி, நோயெதிர்ப்பு உயிரணுக்கள் மற்றும் SARS-CoV-2 வைரஸின் தொடர்பு மற்றும் நோயில் அதன் விளைவு பற்றி ஆராய்ச்சியாளர்கள் தெரிவித்தனர்ஃ எடுத்துக்காட்டாக, கடுமையான COVID-19 இல் நுரையீரலில் CD4 + சைட்டோடாக்ஸிக் டி செல்கள் கணிசமாக விரிவடைந்தன என்று ஒரு ஆய்வு காட்டுகிறது. மற்றொரு கண்டுபிடிப்பு கடுமையான COVID-19 இல் நிணநீர் கணுக்கள் மற்றும் ஸ்ப்லீன்களில் முளைக்கும் மையங்களின் இழப்பை விளக்குகிறது, இது பல வண்ண இம்யூனோஃப்ளோரசென்ஸ் சைட்டோமெட்ரியால் காட்டப்பட்டது. நரம்பியல்ஃ நரம்பியல் வளர்ச்சி செயல்முறைகளைக் கண்காணிப்பது நரம்பியல் அறிவியலில் ஒரு செயலில் உள்ள ஆராய்ச்சித் துறையாகும். நரம்பு மண்டலத்தில் வெவ்வேறு தூண்டுதல்களின் பங்கை தீர்மானிக்க அளவு திசு பகுப்பாய்வு பரவலாக பயன்படுத்தப்படுகிறது. ஒரு ஆராய்ச்சிக் குழு ப்ளூரிபோடன்ட் ஸ்டெம் செல்களின் நரம்பியல் வேறுபாட்டில் காந்தப்புலத்தின் விளைவு பற்றி அறிக்கை செய்தது, அங்கு திசு சைட்டோமெட்ரியைப் பயன்படுத்தி தோற்ற வகை விளைவுகள் காணப்பட்டன. நரம்பியல் அறிவியலில் திசு சைட்டோமெட்ரியின் மற்றொரு பயன்பாடு ஹைபோதாலமிக் நியூரான்களில் மன அழுத்தத்தின் விளைவை மதிப்பீடு செய்ய வடிவமைக்கப்பட்ட ஒரு ஆய்வில் காட்டப்பட்டுள்ளது. மருத்துவ நோயியல் ஆய்வக நுட்பங்கள் மருத்துவ இமேஜிங் ஹிஸ்டோபாதாலஜி நுண்ணோக்கி