Solid-phase reversible immobilization
திட-கட்ட பின்னோக்கி நகர்த்தக்கூடிய நிலைப்படுத்தல் அல்லது எஸ். பி. ஆர். ஐ என்பது கரைசலில் இருந்து நியூக்ளிக் அமிலங்களை சுத்திகரிக்கும் ஒரு முறையாகும். இது சிலிக்கா அல்லது கார்பாக்சில் பூசப்பட்ட பாரா காந்த மணிகளைப் பயன்படுத்துகிறது, அவை பாலிஎதிலீன் கிளைகோல் மற்றும் உப்பு முன்னிலையில் நியூக்ளிக் அமிலங்களுடன் தலைகீழாக பிணைக்கப்படுகின்றன. எஸ். பி. ஆர். ஐ தொழில்நுட்பத்தின் பொதுவான பயன்பாடு பி. சி. ஆர் மூலம் பெருக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ மாதிரிகளை வரிசைமுறை எதிர்விளைவுகளுக்காக சுத்திகரிப்பதாகும்ஃ நியூக்ளிக் அமில சுத்திகரிப்பில் பயன்படுத்தப்படும் எஸ். பி. ஆர். ஐ மணிகள் சிலிக்கா அல்லது கார்பாக்சில் குழுக்களால் பூசப்பட்ட பாரா காந்த மணிகள் ஆகும். பாலிஎதிலீன் கிளைகோல் மற்றும் உப்புகளின் அதிக செறிவு கொண்ட கரைசல்களில் மணிகள் மீண்டும் இடைநிறுத்தப்படும்போது, அவை நியூக்ளிக் அமிலங்களுடன் தலைகீழாக பிணைக்கும் திறன் கொண்டவை. இந்த பிணைப்பு அளவு தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டதாகும், இதில் நியூக்ளிக் அமிலங்களின் நீண்ட பாலிமர்கள் குறுகியவற்றை விட மிகவும் திறமையாக பிணைக்கப்படுகின்றன. ஒரு எஸ். பி. ஆர். ஐ சுத்திகரிப்பு பொதுவாக பின்வரும் படிகளை உள்ளடக்கியதுஃ பாலிஎதிலீன் கிளைகோல் மற்றும் சோடியம் குளோரைடு கரைசலில் உள்ள எஸ். பி. ஆர். ஐ மணிகள் நியூக்ளிக் அமிலங்களின் மாதிரியுடன் கலக்கப்படுகின்றன. நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மணிகளுடன் பிணைக்கப்படுகின்றன. கலவை ஒரு காந்தப்புலத்தில் வைக்கப்படுகிறது, இது நியூக்ளிக்-அமில பிணைக்கப்பட்ட மணிகளை கரைசலில் இருந்து பிரிக்கிறது. கரைசல் அகற்றப்பட்டு மணிகள் 80 சதவீதம் எத்தனால் தண்ணீரில் பல முறை கழுவப்படுகின்றன. எஞ்சியிருக்கும் எத்தனால் அகற்ற மணிகள் உலர அனுமதிக்கப்படுகிறது. மணிகள் காந்தப்புலத்திலிருந்து அகற்றப்பட்டு தண்ணீரில் அல்லது ஒரு எல்யூஷன் இடையகத்தில் மீண்டும் இடைநிறுத்தப்படுகின்றன, இது மணிகளிலிருந்து நியூக்ளிக் அமிலங்களை வெளியிடுகிறது. கலவை மீண்டும் ஒரு காந்தப்புலத்தில் வைக்கப்பட்டு, மணிகளை கரைசலில் இருந்து பிரிக்கிறது. இப்போது சுத்திகரிக்கப்பட்ட நியூக்ளிக் அமிலங்களைக் கொண்ட கரைசல் அகற்றப்பட்டு கீழ்நிலைப் பயன்பாடுகளுக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது. நியூக்ளிக் அமில முறைகள் டிஎன்ஏ வரிசைமுறை திட-கட்ட பிரித்தெடுத்தல் குறிப்புகள் நியூக்ளிக் அமிலங்களையும் பார்க்கவும்