Ovarian culture
கருப்பை வளர்ப்பு என்பது கருப்பையின் வளர்ச்சி, நச்சுயியல் மற்றும் நோயியல் பற்றிய விசாரணையை அனுமதிக்கும் ஒரு இன்-விட்ரோ செயல்முறையாகும். கருவுறுதல் சிகிச்சைகளின் சாத்தியமான பயன்பாடுகளை ஆய்வு செய்வதற்கும் இந்த நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தலாம். எ. கா. கருவுறுதலுக்கு பயன்படுத்தக்கூடிய முதன்மையான கருப்பை நுண்ணறைகளிலிருந்து ஊசைட்டுகளை தனிமைப்படுத்துதல். எலியின் கருப்பை திசுக்களைப் பயன்படுத்தி வளர்ப்பு முறைகள் கருப்பை மற்றும் ஃபோலிகுலர் வளர்ச்சி மற்றும் வளர்ச்சியை ஆராய பல கலாச்சார அமைப்புகள் பயன்படுத்தப்படலாம். முழு கருப்பை கலாச்சாரம் அப்படியே இருக்கும் கருப்பைகளின் கலாச்சாரம் ஆரம்பகால நுண்ணறிவுகளின் உருவாக்கம் மற்றும் வளர்ச்சியை ஆதரிக்கிறது. கருப்பைகள் பிறந்த எலியின் குட்டிகளிடமிருந்து துண்டிக்கப்பட்டு, α-குறைந்தபட்ச அத்தியாவசிய ஊடகத்தில் (αMEM) கரைக்கப்பட்ட போவின் சீரம் ஆல்புமன் (BSA) கொண்ட கருப்பை வளர்ப்பு ஊடகத்தில் வைக்கப்படுகின்றன. கலாச்சாரங்கள் 37 டிகிரி செல்சியஸ், 5 சதவீதம் CO2 இன்குபேட்டரில் பராமரிக்கப்படுகின்றன, பின்னர் கருப்பைகள் உறைந்திருக்கும் அல்லது மேலும் ஆய்வுக்கு வசதியாக சரிசெய்யப்படுகின்றன. ஃபோலிக்கிள் கலாச்சாரம் தனிநபர் இந்த வளர்ப்பு முறை தனிப்பட்ட ஃபோலிக்கிள்களின் வளர்ச்சியை பிற்பகுதியில் முன்-ஆன்ட்ரல் முதல் முன்-அண்டவிடுப்பின் நிலை வரை ஆதரிக்கிறது. இந்த அமைப்பு நுண்ணறை வளர்ச்சி மற்றும் ஹார்மோன் உற்பத்தியை ஆய்வு செய்ய அனுமதிக்கிறது. இளம் எலிகளின் கருப்பைகள் (19-23 நாட்கள்) அகற்றப்பட்டு பாதியாக குறைக்கப்பட்டு, நுண்ணோக்கியின் கீழ் மயிர்க்கால்கள் அடையாளம் காணப்படுகின்றன. லேட் ப்ரீ-ஆன்ட்ரல் ஃபோலிக்கிள்கள் 180-200 மைக்ரோமீட்டர் விட்டம் கொண்டவை மற்றும் கிரானுலோசா செல்களின் 2-3 அடுக்குகளைக் கொண்டுள்ளன என்று அடையாளம் காணப்படுகின்றன. ஃபோலிக்கிள்கள் கைமுறையாக துண்டிக்கப்பட்டு பின்னர் கலாச்சாரத்திற்கு பொருத்தமானதா என்று சோதிக்கப்படுகிறது. ஃபோலிக்கல்கள் ஆரோக்கியமாக இருந்தால் மட்டுமே அவை வளர்ப்புக்குத் தேர்ந்தெடுக்கப்படுகின்றன (விட்டம் 190 ± 10 மைக்ரோமீட்டர்; ஒளி ஊடுருவக்கூடியது; இருண்ட அட்ரெடிக் பகுதிகள் இல்லாமல்; அப்படியே அடித்தள லேமினா). ஃபோலிக்கிள் கலாச்சார ஊடகம் (α-குறைந்தபட்ச அத்தியாவசிய ஊடகம், மறுசீரமைப்பு மனித ஃபோலிக்கிள் தூண்டுதல் ஹார்மோன், அஸ்கார்பிக் அமிலம் மற்றும் வயது வந்த பெண் சுட்டி சீரம்) கொண்ட கிணறுகள் கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்ட சிலிக்கான் எண்ணெயுடன் மூடப்பட்டுள்ளன, இது நடுத்தர ஆவியாதலைத் தடுக்கிறது. ஒவ்வொரு கிணற்றின் அடிப்பகுதியில் ஒரு நுண்ணறை வைக்கப்பட்டு 37 டிகிரி செல்சியஸ், 5 சதவீதம் கார்பன் டை ஆக்சைடு இன்குபேட்டரில் பராமரிக்கப்பட்டு, 6 நாட்கள் வரை புதிய நடுத்தரத்தைக் கொண்ட கிணற்றுக்குள் நகர்த்தப்படுகிறது. வளர்ச்சி அளவீடுகள் பார்வைக்கு எடுக்கப்பட்டால், எண்ணெய் அடுக்கு காரணமாக ஏற்படும் விலகல் கணக்கிடப்பட வேண்டும். ஃபோலிக்கல்கள் உறைந்திருக்கும் அல்லது சரிசெய்யப்படுகின்றன, எனவே மேலும் பகுப்பாய்வு செய்யப்படலாம். 2 ஃபோலிக்கிள்களை நெருக்கமாக வளர்ப்பதன் மூலம், ஃபோலிக்கிள்-ஃபோலிக்கிள் தொடர்புகளை ஆய்வு செய்யலாம். நுண்ணறிவுகள் ஒன்றாக வளர்ந்து இரண்டு-நுண்ணறை அலகு உருவாகலாம். மேலே உள்ளபடி கருப்பையில் இருந்து நுண்ணறிவுகள் பிரிக்கப்பட்டு, பின்னர் ஜோடியாக ஒருவருக்கொருவர் தொடர்பு கொண்டு, நுண்ணறை வளர்ப்பு நடுத்தர மற்றும் கிருமி நீக்கம் செய்யப்பட்ட சிலிக்கான் எண்ணெயுடன் ஒரு கிணற்றில் வைக்கப்படுகின்றன. வெவ்வேறு மரபணு மூலங்களிலிருந்து வரும் ஃபோலிக்கல்களை இணை வளர்க்கலாம், இதனால் திசு தோற்றத்தை இணை வளர்ப்புக்குள் வேறுபடுத்திக் காட்ட முடியும். ஊடகம் ஒவ்வொரு 2 நாட்களுக்கும் மாற்றப்படுகிறது மற்றும் 6 நாட்களுக்குப் பிறகு கலாச்சாரம் மேலும் செயலாக்கத்திற்காக சரி செய்யப்படுகிறது அல்லது உறைக்கப்படுகிறது. ஃபோலிக்கிள்-கருப்பை இணை வளர்ப்பு இந்த முறை ஃபோலிக்கிள்-கருப்பை தொடர்புகளை ஆய்வு செய்ய அனுமதிக்கிறது. கருப்பைகள் மற்றும் நுண்ணறிவுகள் மேலே உள்ளபடி துண்டிக்கப்படுகின்றன, பின்னர் ஒரு நுண்ணறை ஒரு தட்டில் ஒரு பிறந்த கருப்பையின் ஒரு துருவத்துடன் தொடர்பு கொள்ள வைக்கப்படுகிறது. ஃபோலிக்கிள்-ஓவரி பிளேட் ஃபோலிக்கிள் கலாச்சார ஊடகத்தில் 37 டிகிரி செல்சியஸில் வளர்க்கப்படுகிறது, 5 சதவீதம் கார்பன் டை ஆக்சைடு 5 நாட்கள் வரை. இந்த கட்டத்தில் இணை வளர்ப்பு மேலும் செயலாக்கத்திற்கு முன் உறைந்த அல்லது சரி செய்யப்படுகிறது. திசு தோற்றத்திற்கு இடையிலான வேறுபாட்டை எளிதாக்குவதற்கு கருப்பை மற்றும் நுண்ணறை வெவ்வேறு மரபணு மூலங்களிலிருந்து இருக்க வேண்டும். கருப்பை வளர்ப்பு நுட்பங்களின் பயன்பாடுகள் நச்சுயியல் ஆய்வுகள் தற்போது இனப்பெருக்க நச்சுயியல் துறையில் ஆராய்ச்சி முக்கியமாக விவோவில் மேற்கொள்ளப்படுகிறது, இருப்பினும் கருப்பை நுண்ணறிவுகளை விட்ரோவில் வளர்க்க அனுமதிக்கும் நோக்கத்துடன் புதிய கலாச்சார முறைகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன. இந்த புதிய முறைகள் தனிமைப்படுத்தப்பட்ட கருப்பை நுண்ணறிவுகள், கருக்கள், கருப்பைகள் (முழு உறுப்பு அல்லது திசுவின் ஒரு பகுதி மட்டுமே) மற்றும் கரு ஸ்டெம் செல்களை வளர்க்க அனுமதிக்கின்றன. கருப்பை கலாச்சாரங்கள் ஆராய்ச்சிக்கு பயனுள்ளதாக இருக்கும், ஏனெனில் அவை முறையான நுண்ணறை வளர்ச்சி, காலமுறை அண்டவிடுப்பின் மற்றும் நுண்ணறை அட்ரேஸியாவை ஒரு சூழலில் மாற்றியமைக்கப்பட்ட கலாச்சாரம் conditions.The கருப்பையில் சேதம் மற்றும் நுண்ணறைகள் மற்றும் ஊசைட்டுகளின் அதன் சிறப்பு கட்டமைப்புகளைக் கண்டறியும் இன் விட்ரோ கருப்பை கலாச்சாரங்களின் திறனுடன் பிரதிபலிக்க அனுமதிக்கும், இது சாத்தியமான வளர்ச்சி மற்றும்/அல்லது இனப்பெருக்க நச்சுத்தன்மையை விரைவாக பரிசோதிக்க அனுமதிக்கிறது. எனவே, கருப்பை வளர்ப்பு அமைப்புகள் இனப்பெருக்க உயிரியல் மற்றும் நச்சுயியல் ஆகியவற்றில் பெருகிய முறையில் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன. முழு கருப்பை அல்லது கருப்பை துண்டுகளின் கலாச்சாரம் பல்வேறு அளவுருக்களை கட்டுப்படுத்தப்பட்ட வழியில் மதிப்பீடு செய்ய அனுமதிக்கிறது, எனவே, முழுமையான இனப்பெருக்க நச்சுத்தன்மை ஆய்வுகளுக்கான சாத்தியக்கூறுகளைக் கொண்டுள்ளது. கருப்பை வளர்ப்பின் ஒரு பெரிய நன்மை என்னவென்றால், கருப்பை இருப்புக்களை உருவாக்கும் ஆரம்பகால நுண்ணறிவுகளின் குளத்தில் மருந்துகளின் விளைவை மதிப்பிடும் திறன் ஆகும். இருப்பினும், இந்த மூலோபாயம் கலாச்சார நேரத்தின் கால அளவைப் பொறுத்தவரை கட்டுப்படுத்தப்பட்டுள்ளது, ஏனெனில் ஃபோலிகுலர் வளர்ச்சியை உறுதிப்படுத்த குறுகிய காலங்கள் போதுமானதாக இருக்காது. மாறாக, செல்கள் நீண்ட கால கலாச்சாரத்தால் எதிர்மறையாக பாதிக்கப்படலாம். பெரும்பாலான இன் விட்ரோ நச்சுயியல் ஆய்வுகள் பெண் எலிகள் மற்றும் எலி மாதிரிகளைப் பயன்படுத்துகின்றன. கையாளும் எளிமை மற்றும் சிறிய அளவு காரணமாக இனப்பெருக்க செயல்பாடு மற்றும் கருவுறுதல் ஆகியவற்றில் மருந்துகளின் பாதகமான விளைவுகளை மதிப்பிடுவதற்காக இந்த இனங்கள் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்டுள்ளன. கூடுதலாக, இந்த இனங்கள் நன்கு வகைப்படுத்தப்பட்டுள்ளன; உடற்கூறியல், உடலியல் மற்றும் மரபணு ரீதியாக. அவர்களின் குறுகிய வாழ்க்கைச் சுழற்சிகள் கர்ப்பம், தாய்ப்பால் கொடுப்பது மற்றும் பருவமடைதல் ஆகியவற்றை மதிப்பிடுவதை வசதியாக ஆக்குகின்றன. பன்முக மனித மக்கள்தொகையில் நச்சுயியல் ஆபத்து மதிப்பீட்டிற்கான விலங்கு ஆய்வுகளின் பொருத்தப்பாடு தீர்மானிக்கப்படவில்லை, ஏனெனில் பெறப்பட்ட முடிவுகளை மனிதர்களுக்கு விரிவுபடுத்த முடியுமா என்பது தெரியவில்லை. கருவுறுதல் சிகிச்சை கருப்பை வளர்ப்பில் இன் விவோ முதிர்ச்சியைப் பயன்படுத்துவது பாலிசிஸ்டிக் ஓவரி சிண்ட்ரோம் (பிசிஓஎஸ்) நோயாளிகளுக்கு ஐவிஎஃப் போது கருப்பை ஹைப்பர்ஸ்டிமுலேஷன் சிண்ட்ரோமின் அபாயத்தை அகற்றும். பி. சி. ஓ. எஸ் இல்லாதவர்களுக்கு, இன் விட்ரோ முதிர்ச்சிக்கு இன்னும் நன்மைகள் உள்ளன, ஏனெனில் இந்த செயல்முறை குறைவான தீவிரம் கொண்டது, ஏனெனில் சூப்பர்ஓவுலேஷன் தேவையில்லை. கருப்பை வளர்ப்பின் கோட்பாடுகள் FSH அல்லது ஈஸ்ட்ரோஜன் உணர்திறன் கட்டிகளை எதிர்க்கும் பெண்களுக்கு பயன்படுத்தப்படலாம். ஐவிஎஃப் உடன் ஒப்பிடுகையில், இன் விட்ரோ முதிர்ச்சியில் பயன்படுத்தப்படும் செல்கள் சிறிய அளவில் அறுவடை செய்யப்படுகின்றன, முதிர்ச்சியற்றவை மற்றும் ஒடுக்கற்பிரிவுகளின் மெட்டாபேஸ் I கட்டத்தில் கைது செய்யப்படுகின்றன. ஆய்வகத்தில் ஒருமுறை அவை மெட்டாபேஸ் II க்கு முதிர்ச்சியடைகின்றன. கருவுறுதல் பாதுகாப்பு கருப்பை திசு கருப்பை சேதப்படுத்தும் சிகிச்சைகளுக்கு முன் அறுவடை செய்யப்படலாம் மற்றும் கிரையோப்பிரேசர்வேஷன் பயன்படுத்தி பிற்காலத்தில் மீண்டும் பொருத்தப்படலாம். இருப்பினும், இந்த முறை கருப்பை புற்றுநோய் மற்றும் லுகேமியா உள்ளவர்களில் புற்றுநோய் மீண்டும் வருவதுடன் தொடர்புடையது. கோட்பாட்டில், கருப்பை திசு வளர்ப்பு இந்த நோயாளிகளுக்கு கருத்தரித்தல் முதிர்ந்த oocytes உற்பத்தி செய்ய ஒரு பாதுகாப்பான முறையாகும். குறிப்புகள் வெளிப்புற இணைப்புகள் இன் விட்ரோ கருத்தரித்தல் செல் கலாச்சாரம் இனப்பெருக்கம் கருவுறுதல் மருத்துவம் சுற்றுச்சூழல் நச்சுயியல்