Eukaryotic DNA replication
யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பு என்பது ஒரு பாதுகாக்கப்பட்ட பொறிமுறையாகும், இது டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பை ஒரு செல் சுழற்சிக்கு ஒரு முறை கட்டுப்படுத்துகிறது. குரோமோசோமால் டிஎன்ஏவின் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ பிரதி ஒரு உயிரணுவின் நகலெடுப்புக்கு மையமாக உள்ளது மற்றும் யூகாரியோடிக் மரபணுவின் பராமரிப்புக்கு அவசியம். டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் என்பது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களின் செயல்பாடாகும், இது அசல் டெம்ப்ளேட் ஸ்ட்ராண்டிற்கு நிரப்பு டிஎன்ஏ ஸ்ட்ராண்டை ஒருங்கிணைக்கிறது. டிஎன்ஏவை ஒருங்கிணைக்க, இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களுக்கு முன்னால் டிஎன்ஏ ஹெலிகேஸ்களால் அவிழ்க்கப்படுகிறது, இது இரண்டு ஒற்றை இழைகள் கொண்ட வார்ப்புருக்கள் கொண்ட ஒரு பிரதி முட்கரண்டி உருவாக்குகிறது. ரெப்ளிகேஷன் செயல்முறைகள் ஒற்றை டிஎன்ஏ இரட்டை ஹெலிக்ஸை இரண்டு டிஎன்ஏ ஹெலிக்ஸ்களாக நகலெடுக்க அனுமதிக்கின்றன, அவை மைட்டோசிஸில் மகள் உயிரணுக்களாக பிரிக்கப்படுகின்றன. ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் மேற்கொள்ளப்படும் முக்கிய நொதி செயல்பாடுகள் புரோக்கரியோட்டுகள் முதல் யூகாரியோட்டுகள் வரை நன்கு பாதுகாக்கப்பட்டுள்ளன, ஆனால் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனில் உள்ள ரெப்ளிகேஷன் இயந்திரம் மிகப் பெரிய சிக்கலானது, இது பல புரதங்களை ரெப்ளிகேஷன் செய்யும் இடத்தில் ஒருங்கிணைத்து, ரெப்லிசோமை உருவாக்குகிறது. ஒவ்வொரு பெருக்க உயிரணுவிலும் உள்ள மரபணு டிஎன்ஏ முழுவதையும் நகலெடுப்பதற்கு ரெப்லிசோம் பொறுப்பாகும். இந்த செயல்முறை பரம்பரை/மரபணு தகவல்களை பெற்றோரின் உயிரணுவிலிருந்து மகள் உயிரணுவுக்கு உயர் நம்பகத்தன்மையுடன் அனுப்ப அனுமதிக்கிறது, எனவே இது அனைத்து உயிரினங்களுக்கும் அவசியம். செல் சுழற்சியின் பெரும்பகுதி டிஎன்ஏ பிரதி பிழைகள் இல்லாமல் ஏற்படுவதை உறுதிசெய்வதைச் சுற்றி கட்டப்பட்டுள்ளது. செல் சுழற்சியின் ஜி1 கட்டத்தில், பல டிஎன்ஏ பிரதி ஒழுங்குமுறை செயல்முறைகள் தொடங்கப்படுகின்றன. யூகாரியோட்டுகளில், பெரும்பாலான டிஎன்ஏ தொகுப்பு செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டத்தில் நிகழ்கிறது, மேலும் முழு மரபணுவும் கட்டுக்கடங்காமல் இருக்க வேண்டும் மற்றும் இரண்டு மகள் நகல்களை உருவாக்க நகலெடுக்கப்பட வேண்டும். G2 இன் போது, ஏதேனும் சேதமடைந்த டிஎன்ஏ அல்லது பிரதி பிழைகள் சரிசெய்யப்படுகின்றன. இறுதியாக, மரபணுக்களின் ஒரு நகல் மைட்டோசிஸ் அல்லது எம் கட்டத்தில் ஒவ்வொரு மகள் உயிரணுவிலும் பிரிக்கப்படுகிறது. இந்த மகள் நகல்கள் ஒவ்வொன்றும் பெற்றோரின் இரட்டை டிஎன்ஏவிலிருந்து ஒரு இழையையும், ஒரு புதிய எதிர் இணையான இழையையும் கொண்டுள்ளன. இந்த வழிமுறை புரோக்கரியோட்டுகள் முதல் யூகாரியோட்டுகள் வரை பாதுகாக்கப்படுகிறது, மேலும் இது செமிகன்சர்வேடிவ் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் என்று அழைக்கப்படுகிறது. டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் தளத்திற்கான செமிகன்சர்வேடிவ் ரெப்ளிகேஷன் செயல்முறை ஒரு முட்கரண்டி போன்ற டிஎன்ஏ அமைப்பு, ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க், டிஎன்ஏ ஹெலிக்ஸ் திறந்திருக்கும் அல்லது காயப்படாத இடத்தில், இணைக்கப்படாத டிஎன்ஏ நியூக்ளியோடைடுகளை அடையாளம் காண்பதற்கும், இலவச நியூக்ளியோடைடுகளை இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏவில் இணைப்பதற்கான அடிப்படை இணைப்பிற்கும் வெளிப்படுத்துகிறது. யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனின் துவக்கம் டிஎன்ஏ தொகுப்பின் முதல் கட்டமாகும், அங்கு டிஎன்ஏ இரட்டை ஹெலிக்ஸ் அழிக்கப்பட்டு, டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α இன் ஆரம்ப ப்ரைமிங் நிகழ்வு முன்னணி இழையில் நிகழ்கிறது. பின்தங்கிய ஸ்ட்ராண்டில் உள்ள ப்ரைமிங் நிகழ்வு ஒரு ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கை நிறுவுகிறது. டிஎன்ஏ ஹெலிக்ஸின் ப்ரைமிங் என்பது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α மூலம் டிஎன்ஏ தொகுப்பை அனுமதிக்க ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமரின் தொகுப்பைக் கொண்டுள்ளது. ப்ரைமிங் முன்னணி இழையின் தோற்றத்திலும், பின்தங்கிய இழையின் மீது ஒவ்வொரு ஒகாசாகி துண்டின் தொடக்கத்திலும் ஒரு முறை நிகழ்கிறது. ரெப்ளிகேஷனின் தோற்றம் ரெப்ளிகேஷனின் தோற்றத்தில் தொடங்குகிறது. இந்த தளங்களைக் கொண்ட டிஎன்ஏ வரிசைகள் ஆரம்பத்தில் 1970 களின் பிற்பகுதியில் பிளாஸ்மிட்களின் பிரதிபலிப்பை ஆதரிக்கும் திறனின் அடிப்படையில் தனிமைப்படுத்தப்பட்டன, எனவே தன்னியக்கமாக பிரதிபலிக்கும் வரிசைகளின் (ஏஆர்எஸ்) பெயர். தோற்றங்கள் அவற்றின் செயல்திறனில் பரவலாக வேறுபடுகின்றன, சில கிட்டத்தட்ட ஒவ்வொரு உயிரணு சுழற்சியிலும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, மற்றவை ஆயிரம் எஸ் கட்டங்களில் ஒன்றில் மட்டுமே பயன்படுத்தப்படலாம். ஈஸ்ட் ஏ. ஆர். எஸ்ஸின் மொத்த எண்ணிக்கை குறைந்தது 1600 ஆகும், ஆனால் குறைவான செயலில் உள்ள தளங்கள் கணக்கிடப்பட்டால் 5000 க்கும் அதிகமாக இருக்கலாம், அதாவது, ஒவ்வொரு 2000 முதல் 8000 அடிப்படை ஜோடிகளுக்கு ஒரு ஏ. ஆர். எஸ் இருக்கலாம். முன்-ரெப்ளிகேட்டிவ் காம்ப்ளக்ஸ் பல ரெப்ளிகேட்டிவ் புரதங்கள் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனைத் தொடங்க இந்த ரெப்ளிகேட்டிவ் தோற்றத்திலிருந்து ஒன்றிணைந்து பிரிகின்றன. முன்-ரெப்ளிகேஷன் காம்ப்ளக்ஸ் (முன்-ஆர். சி) உருவாக்கம் ரெப்ளிகேஷன் துவக்க செயல்பாட்டில் ஒரு முக்கிய இடைநிலையாக உள்ளது. குரோமாட்டின் உரிமம் மற்றும் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் காரணி 1 புரதம் (சிடிடி 1) மூலம் எளிதாக்கப்பட்ட மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு (எம்சிஎம் 2-7) சிக்கலான புரதங்களை ஏற்றுவதற்கான ஒரு தளத்தை உருவாக்க செல் பிரிவு சுழற்சி 6 புரதத்தை (சிடிசி 6) ஒரு ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்துடன் அசோசியேஷன் ஆஃப் தி ஆரிஜின் ரெக்கக்னிஷன் காம்ப்ளக்ஸ் (ஓஆர்சி) நியமிக்கிறது. செல் சுழற்சியின் ஜி1 கட்டத்தில் ரெப்ளிகேட்டிவ் தோற்றத்துடன் மெக்ம்2-7 வளாகத்தின் நிலையான தொடர்புக்கு ஓஆர்சி, சிடிசி6 மற்றும் சிடிடி1 ஆகியவை ஒன்றாகத் தேவைப்படுகின்றன. ரெப்ளிகேஷனின் யூகாரியோடிக் தோற்றம் பல புரத வளாகங்களின் உருவாக்கத்தைக் கட்டுப்படுத்துகிறது, இது இரண்டு இருதரப்பு டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகளின் கூட்டத்திற்கு வழிவகுக்கிறது. இந்த நிகழ்வுகள் ரெப்ளிகேஷனின் தோற்றத்தில் முன்-ரெப்ளிகேஷன் காம்ப்ளக்ஸ் (முன்-ஆர். சி) உருவாக்கம் மூலம் தொடங்கப்படுகின்றன. இந்த செயல்முறை செல் சுழற்சியின் ஜி 1 கட்டத்தில் நடைபெறுகிறது. ஆர். சி. க்கு முந்தைய உருவாக்கம் தோற்றம் அங்கீகார வளாகம் (ஓ. ஆர். சி), சி. டி. சி 6 புரதம், சி. டி. டி 1 புரதம் மற்றும் மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதங்கள் (எம். சி. எம் 2-7) உள்ளிட்ட பல பிரதி காரணிகளின் வரிசைப்படுத்தப்பட்ட கூட்டத்தை உள்ளடக்கியது. முன்-ஆர். சி உருவானவுடன், சிக்கலை செயல்படுத்துவது சைக்ளின்-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ் 2 (சி. டி. கே) மற்றும் டி. பி. எஃப் 4-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ் (டி. டி. கே) ஆகிய இரண்டு கைனேஸ்களால் தூண்டப்படுகிறது, இது டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் தொடங்குவதற்கு முன்பு முன்-ஆர். சி. யை துவக்க வளாகத்திற்கு மாற்ற உதவுகிறது. இந்த மாற்றம் டிஎன்ஏவைத் தளர்த்துவதற்கும், காயப்படாத டிஎன்ஏவைச் சுற்றி பல யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களைக் குவிக்கவும் கூடுதல் பிரதி காரணிகளின் வரிசைப்படுத்தப்பட்ட கூட்டத்தை உள்ளடக்கியது. ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்தில் இருதரப்பு ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகள் எவ்வாறு நிறுவப்படுகின்றன என்ற கேள்வியின் மையமாக ORC இரண்டு தலை முதல் தலை மேக்எம் 2-7 வளாகங்களை ஒவ்வொரு ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்திற்கும் முன்-ரெப்ளிகேஷன் வளாகத்தை உருவாக்குவதற்கான பொறிமுறையாகும். தோற்றம் அங்கீகார சிக்கலானது முன்-பிரதி சிக்கலானது (முன்-ஆர். சி.) அசெம்பிளியின் முதல் படி, தோற்றம் அங்கீகார சிக்கலானது (ஓ. ஆர். சி.) பிரதி தோற்றத்துடன் பிணைக்கப்படுவதாகும். தாமதமான மைட்டோசிஸில், சி. டி. சி 6 புரதம் பிணைக்கப்பட்ட ஓ. ஆர். சி உடன் இணைகிறது, அதைத் தொடர்ந்து சி. டி. டி 1-எம். சி. எம் 2-7 வளாகத்தை பிணைக்கிறது. டிஎன்ஏவில் ஆறு புரத மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு (எம்சிஎம் 2-7) வளாகத்தை ஏற்றுவதற்கு ஓஆர்சி, சிடிசி 6 மற்றும் சிடிடி 1 அனைத்தும் தேவைப்படுகின்றன. ஓ. ஆர். சி என்பது ஆறு-துணை அலகு, ஓர்க்1பி-6, புரதச் சேர்மமாகும், இது டிஎன்ஏவில் உள்ள ரெப்ளிகேட்டிவ் தோற்ற தளங்களைத் தேர்ந்தெடுத்து ரெப்ளிகேஷனைத் தொடங்குகிறது மற்றும் குரோமாடினுடன் ஓஆர்சி பிணைப்பு செல் சுழற்சி மூலம் கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது. பொதுவாக, ORC துணை அலகுகளின் செயல்பாடு மற்றும் அளவு பல யூகாரியோடிக் மரபணுக்கள் முழுவதும் பாதுகாக்கப்படுகிறது, வேறுபாடு அவற்றின் வேறுபட்ட டிஎன்ஏ பிணைப்பு தளங்கள் ஆகும். மிகவும் பரவலாக ஆய்வு செய்யப்பட்ட தோற்றம் அங்கீகாரம் சிக்கலானது Saccharomyces cerevisiae அல்லது ஈஸ்ட் ஆகும், இது தன்னாட்சி பிரதி வரிசை (ஏஆர்எஸ்) உடன் பிணைக்கப்படுவதாக அறியப்படுகிறது. எஸ். செரிவிசியா ஓ. ஆர். சி குறிப்பாக 30 அடிப்படை ஜோடிகளின் பிராந்தியத்தில் பரவியிருக்கும் ஈஸ்ட் தோற்றத்தின் ஏ மற்றும் பி 1 கூறுகளுடன் தொடர்பு கொள்கிறது. இந்த வரிசைகளுடன் பிணைப்பதற்கு ஏடிபி தேவைப்படுகிறது. ஏஆர்எஸ் டிஎன்ஏவுடன் பிணைக்கப்பட்ட எஸ். செரிவிசியா ஓஆர்சியின் அணு அமைப்பு தீர்மானிக்கப்பட்டுள்ளது. ஓர்க் 1, ஓர்க் 2, ஓர்க் 3, ஓர்க் 4 மற்றும் ஓர்க் 5 ஆகியவை ஏ உறுப்பில் டிஎன்ஏவை வளைக்கும் அடிப்படை அல்லாத குறிப்பிட்ட மற்றும் அடிப்படை குறிப்பிட்ட இரண்டு வகையான தொடர்புகளின் மூலம் ஏ உறுப்பைச் சுற்றி வருகின்றன. ஐந்து துணை அலகுகளும் ஏ தனிமத்தின் பல புள்ளிகளில் சர்க்கரை பாஸ்பேட் முதுகெலும்பைத் தொடர்புகொண்டு அடிப்படை குறிப்பிட்ட தன்மை இல்லாமல் ஒரு இறுக்கமான பிடியை உருவாக்குகின்றன. ஓர்க் 1 மற்றும் ஓர்க் 2 ஆகியவை ஏ தனிமத்தின் சிறிய பள்ளத்தைத் தொடர்புகொள்கின்றன, அதே நேரத்தில் ஓர்க் 4 இன் இறக்கைகள் கொண்ட ஹெலிக்ஸ் களம் ஏ தனிமத்தின் முக்கிய பள்ளத்தில் உள்ள மாறாத டி. எஸ்ஸின் மெத்தில் குழுக்களை செருகும் ஹெலிக்ஸ் (ஐ. எச்) வழியாக தொடர்புகொள்கிறது. மெட்டாசோவான்களில் இந்த ஐ. எச் இல்லாதது மனித ஓ. ஆர். சி. யில் வரிசை குறிப்பிட்ட தன்மை இல்லாததை விளக்குகிறது. எஸ். சி. ஓ. ஆர். சி. யில் இருந்து ஐ. எச். ஐ அகற்றுவது ஏ உறுப்புக்கான அதன் தனித்துவத்தை இழக்கச் செய்கிறது, மேலும் ஊக்குவிப்பு பகுதிகளுடன் வெளிப்படையாகவும் முன்னுரிமையாகவும் (83 சதவீதம்) பிணைக்கிறது. ஆர்சி2, ஆர்சி5 மற்றும் ஆர்சி6 ஆகியவற்றுடன் தொடர்புகொள்வதன் மூலம் ஏஆர்எஸ் டிஎன்ஏ பி1 தனிமத்தில் வளைந்துள்ளது. ஓ. ஆர். சி மூலம் தோற்ற டிஎன்ஏவின் வளைவு பரிணாம ரீதியாக பாதுகாக்கப்பட்டதாகத் தெரிகிறது, இது மெக்ம் 2-7 சிக்கலான ஏற்றுதல் பொறிமுறைக்கு தேவைப்படலாம் என்பதைக் குறிக்கிறது. ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்தில் டிஎன்ஏவுடன் ஓஆர்சி பிணைக்கும்போது, இது முன்-ரெப்ளிகேஷன் காம்ப்ளக்ஸின் பிற முக்கிய துவக்க காரணிகளின் கூட்டத்திற்கு ஒரு சாரக்கட்டு போல் செயல்படுகிறது. செல் சுழற்சியின் ஜி 1 கட்டத்தில் இந்த முன்-பிரதி சிக்கலான அசெம்பிளி எஸ் கட்டத்தில் டிஎன்ஏ பிரதி செயல்படுத்தப்படுவதற்கு முன்பு தேவைப்படுகிறது. மெட்டாபேஸில் குரோமோசோமில் இருந்து வளாகத்தின் ஒரு பகுதியையாவது (ஓர்க் 1) அகற்றுவது பாலூட்டி ஓ. ஆர். சி. யின் ஒழுங்குமுறையின் ஒரு பகுதியாகும், இது மெட்டாபேஸ் முடிவதற்கு முன்னர் முன்-பிரதி சிக்கலான உருவாக்கம் அகற்றப்படுவதை உறுதி செய்கிறது. சி. டி. சி. 6 புரதம் செல் பிரிவு சுழற்சி 6 (சி. டி. சி. 6) புரதத்தை தோற்றம் அங்கீகார வளாகத்துடன் (ஓ. ஆர். சி) பிணைப்பது, பிரதிபலிப்பின் தோற்றத்தில் முன்-பிரதி சிக்கலின் (முன்-ஆர். சி) அசெம்பிளியில் ஒரு அத்தியாவசிய படியாகும். சி. டி. சி. 6 டி. என். ஏவில் உள்ள ஓ. ஆர். சி உடன் ஏடிபி-சார்ந்த முறையில் பிணைக்கிறது, இது ஆர்க் 1 ஏடிபேஸ் தேவைப்படும் தோற்ற பிணைப்பின் வடிவத்தில் மாற்றத்தைத் தூண்டுகிறது. சி. டி. சி. 6 குரோமாடினுடன் இணைவதற்கு ஓ. ஆர். சி தேவைப்படுகிறது, மேலும் சி. டி. டி 1-எம். சி. எம் 2-7 ஹெப்டாமர் குரோமாடினுடன் பிணைக்கப்படுவதற்கு இது தேவைப்படுகிறது. ORC-Cdc6 காம்ப்ளக்ஸ் ஒரு வளைய வடிவ அமைப்பை உருவாக்குகிறது மற்றும் பிற ATP-சார்ந்த புரத இயந்திரங்களுக்கு ஒத்ததாகும். சி. டி. சி 6 இன் நிலைகள் மற்றும் செயல்பாடு செல் சுழற்சியின் போது பிரதிபலிப்பின் தோற்றம் பயன்படுத்தப்படும் அதிர்வெண்ணை கட்டுப்படுத்துகிறது. சி. டி. டி. 1 புரதம் குரோமாட்டின் உரிமம் மற்றும் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் காரணி 1 (சி. டி. டி. 1) புரதம் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுக்கான குரோமாட்டின் உரிமத்திற்கு தேவைப்படுகிறது. எஸ். செரிவிசியாவில், சி. டி. டி 1 மெக்ம்2-7 ஒற்றை ஹெக்ஸாமரின் இடது கை திறந்த வளைய கட்டமைப்பை உறுதிப்படுத்துவதன் மூலம் குரோமோசோமின் மீது ஒரு நேரத்தில் மெக்ம்2-7 சிக்கலை ஏற்றுவதற்கு உதவுகிறது. குரோமாடினுடன் மெக்ம் புரதங்களின் தொடர்பை ஒத்துழைப்புடன் ஊக்குவிக்க சி. டி. சி 6 இன் சி முனையத்துடன் சி. டி. டி 1 தொடர்புடையது என்று காட்டப்பட்டுள்ளது. ஓ. சி. சி. எம் (ஓ. ஆர். சி-சி. டி. சி 6-சி. டி. டி 1-எம். சி. எம்) வளாகத்தின் கிரையோ-ஈ. எம் அமைப்பு, சி. டி. டி 1-சி. டி. டி மெக்ம் 6-டபிள்யூ. எச். டி உடன் தொடர்பு கொள்கிறது என்பதைக் காட்டுகிறது. மெட்டாசோவான்களில், செல் சுழற்சியின் போது சி. டி. டி 1 செயல்பாடு புரத ஜெமினின் உடனான அதன் தொடர்பால் இறுக்கமாக கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது, இவை இரண்டும் டிஎன்ஏவின் மறு பிரதிபலிப்பைத் தடுப்பதற்காக எஸ் கட்டத்தில் சி. டி. டி 1 செயல்பாட்டைத் தடுக்கிறது மற்றும் எங்கும் பரவுவதையும் அடுத்தடுத்த புரோட்டியோலிசிஸையும் தடுக்கிறது. மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதச் சிக்கலானது மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு (எம். சி. எம்) புரதங்கள் ஏ. ஆர். எஸ்-குறிப்பிட்ட முறையில் பிளாஸ்மிட் ஸ்திரத்தன்மையை பாதிக்கும் எஸ். செரிவிசியாவில் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் துவக்க பிறழ்வுகளுக்கான மரபணுத் திரையின் பெயரால் பெயரிடப்பட்டன. மெக்ம்2, மெக்ம்3, மெக்ம்4, மெக்ம்5, மெக்ம்6 மற்றும் மெக்ம்7 ஆகியவை மெக்ம்2 மற்றும் மெக்ம்5 இடையே ஒரு இடைவெளியுடன் திறந்த-வளைய கட்டமைப்பைக் கொண்ட ஒரு ஹெக்ஸாமெரிக் வளாகத்தை உருவாக்குகின்றன. குரோமாட்டின் மீது மெக்ம் புரதங்களின் அசெம்பிளி தோற்றம் அங்கீகாரம் வளாகம் (ORC), Cdc6, மற்றும் Cdt1 ஒருங்கிணைந்த செயல்பாடு தேவைப்படுகிறது. குரோமாடினில் மெக்ம் புரதங்கள் ஏற்றப்பட்டவுடன், அடுத்தடுத்த டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தடுக்காமல் குரோமாடினில் இருந்து ஓஆர்சி மற்றும் சி. டி. சி 6 ஐ அகற்றலாம். இந்த அவதானிப்பு முன்-பிரதிச் சிக்கலின் முதன்மைப் பங்கு மெக்ம் புரதங்களை சரியாக ஏற்றுவதாகும் என்று கூறுகிறது. குரோமாடினில் உள்ள எம். சி. எம் புரதங்கள் தலை முதல் தலை வரை இரட்டை ஹெக்ஸாமரை உருவாக்குகின்றன, இரண்டு வளையங்களும் சற்று சாய்ந்துள்ளன, முறுக்கப்பட்டுள்ளன மற்றும் மையப்படுத்தப்படாதவை, மைய சேனலில் ஒரு கிங்க் உருவாக்குகின்றன, அங்கு பிணைக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ இரண்டு வளையங்களின் இடைமுகத்தில் பிடிக்கப்படுகிறது. ஒவ்வொரு ஹெக்ஸாமெரிக் மெக்எம்2-7 வளையமும் முதலில் ரெப்லிசோமின் அசெம்பிளிக்கான சாரக்கட்டு மற்றும் பின்னர் வினையூக்கி சிஎம்ஜி (சி. டி. சி. 45-எம். சி. எம்-ஜி. ஐ. என். எஸ்) ஹெலிகேஸின் மையமாக செயல்படுகிறது, இது ரெப்லிசோமின் முக்கிய அங்கமாகும். ஒவ்வொரு எம். சி. எம் புரதமும் மற்ற அனைத்துடனும் மிகவும் தொடர்புடையது, ஆனால் ஒவ்வொரு துணை அலகு வகைகளையும் வேறுபடுத்தும் தனித்துவமான வரிசைகள் யூகாரியோட்டுகள் முழுவதும் பாதுகாக்கப்படுகின்றன. அனைத்து யூகாரியோட்டுகளும் சரியாக ஆறு எம். சி. எம் புரத ஒப்புமைகளைக் கொண்டுள்ளன, அவை ஒவ்வொன்றும் தற்போதுள்ள வகுப்புகளில் (எம். சி. எம் 2-7) ஒன்றில் விழுகின்றன, இது ஒவ்வொரு எம். சி. எம் புரதத்திற்கும் ஒரு தனித்துவமான மற்றும் முக்கியமான செயல்பாடு உள்ளது என்பதைக் குறிக்கிறது. டிஎன்ஏ ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டிற்கு மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதங்கள் தேவைப்படுகின்றன. எஸ் கட்டத்தில் ஆறு எம். சி. எம் புரதங்களில் ஏதேனும் ஒன்றை செயலிழக்கச் செய்வது ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் மேலும் முன்னேற்றத்தைத் தடுக்கிறது, இது ஹெலிகேஸை மறுசுழற்சி செய்ய முடியாது என்றும் ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்தில் கூடியிருக்க வேண்டும் என்றும் பரிந்துரைக்கிறது. மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரத சிக்கலான ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டுடன், இந்த வளாகம் ATPase செயல்பாட்டையும் தொடர்புபடுத்தியுள்ளது. மெக்ம் புரத வளாகத்திற்குள் குறிப்பிட்ட வினையூக்கி ஜோடி மெக்ம் புரதங்கள் உள்ளன என்று ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன, அவை ஏடிபி நீராற்பகுப்பை ஒருங்கிணைக்க ஒன்றாக செயல்படுகின்றன. இந்த ஆய்வுகள், மெக்ம்2-7 வளாகங்களின் கிரையோ-ஈ. எம் கட்டமைப்புகளால் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது, மெக்ம் வளாகம் மெக்ம்2-எம். சி. எம்6-எம். சி. எம்4-எம். சி. எம்7-எம். சி. எம்3-எம். சி. எம்5-வரிசையில் ஒரு வளையத்தில் அமைக்கப்பட்ட துணை அலகுகளைக் கொண்ட ஒரு ஹெக்ஸாமர் என்பதைக் காட்டுகிறது. ஒவ்வொரு வினையூக்கி ஜோடியின் இரண்டு உறுப்பினர்களும் ஏடிபி பிணைப்பு மற்றும் நீராற்பகுப்பை அனுமதிக்கும் இணக்கத்திற்கு பங்களிக்கின்றனர், மேலும் செயலில் மற்றும் செயலற்ற துணை அலகுகளின் கலவையானது மெக்ம் ஹெக்ஸாமெரிக் வளாகத்தை ஏடிபி பிணைப்பு மற்றும் நீராற்பகுப்பை ஒட்டுமொத்தமாக முடிக்க அனுமதிக்கிறது, இது ஒரு ஒருங்கிணைந்த ஏடிபிஎஸ் செயல்பாட்டை உருவாக்குகிறது. மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதங்களின் அணு உள்ளூர்மயமாக்கல் வளர்ந்து வரும் ஈஸ்ட் செல்களில் கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது. எம்சிஎம் புரதங்கள் செல் சுழற்சியின் ஜி1 நிலை மற்றும் எஸ் கட்டத்தில் கருவில் உள்ளன, ஆனால் ஜி2 நிலை மற்றும் எம் கட்டத்தில் சைட்டோபிளாஸத்திற்கு ஏற்றுமதி செய்யப்படுகின்றன. செல் அணுக்கருவில் நுழைய ஒரு முழுமையான மற்றும் அப்படியே இருக்கும் ஆறு துணை அலகு எம். சி. எம் காம்ப்ளக்ஸ் தேவைப்படுகிறது. எஸ். செரிவிசியாவில், அணு ஏற்றுமதி சைக்ளின்-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ் (சி. டி. கே) செயல்பாட்டின் மூலம் ஊக்குவிக்கப்படுகிறது. குரோமாடினுடன் தொடர்புடைய எம். சி. எம் புரதங்கள் சி. டி. கே. க்கு அணுகல் இல்லாததால் சி. டி. கே ஏற்றுமதி இயந்திரங்களிலிருந்து பாதுகாக்கப்படுகின்றன. உயிரணுச் சுழற்சியின் ஜி1 கட்டத்தில், ரெப்ளிகேஷன் துவக்கக் காரணிகள், தோற்றம் அங்கீகரிப்பு காம்ப்ளக்ஸ் (ஓ. ஆர். சி), சி. டி. சி6, சி. டி. டி1 மற்றும் மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு (எம். சி. எம்) புரத காம்ப்ளக்ஸ் ஆகியவை டி. என். ஏவுடன் தொடர்ச்சியாக பிணைக்கப்பட்டு எம். சி. எம் வளைய காம்ப்ளக்ஸின் தலை முதல் தலை டைமரை உருவாக்குகின்றன, இது முன்-ரெப்ளிகேஷன் காம்ப்ளக்ஸ் (முன்-ஆர். சி) என்று அழைக்கப்படுகிறது. ஈஸ்ட் முன்-ஆர்சி ஒரு மூடிய டிஎன்ஏ வளாகத்தை உருவாக்கும் அதே வேளையில், மனித முன்-ஆர்சி ஒரு திறந்த வளாகத்தை உருவாக்குகிறது. செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டத்திற்கு ஜி 1 கட்டத்தின் மாற்றத்தில், எஸ் கட்ட-குறிப்பிட்ட சைக்ளின்-சார்ந்த புரத கைனேஸ் (சி. டி. கே) மற்றும் சி. டி. சி 7/டி. பி. எஃப் 4 கைனேஸ் (டி. டி. கே) ஆகியவை மந்தமான முன்-ஆர். சி. யை இரண்டு இருதரப்பு ரெப்லிசோம்களைச் சேர்க்கும் திறன் கொண்ட ஒரு செயலில் உள்ள வளாகமாக மாற்றுகின்றன. இரண்டு டி. டி. கே. க்கள் இரண்டு வளையங்களில் பரவியிருக்கும் எம். சி. எம் இரட்டை ஹெக்ஸாமரின் இடைமுகத்தில் சுயாதீனமாக இணைக்கப்படுவதை கிரையோஈஎம் கட்டமைப்புகள் காட்டின. எம். சி. எம். 4, எம். சி. எம். 2 மற்றும் எம். சி. எம். 6 ஆகியவற்றின் என். டி. இ. களில் உள்ள பல அடி மூலக்கூறுகளின் தொடர்ச்சியான பாஸ்பரிலேஷன் ஒரு தடுமாற்ற பொறிமுறையால் அடையப்படுகிறது, இதன் மூலம் டி. பி. எஃப். 4 அதன் பல அடி மூலக்கூறுகளின் மீது சி. டி. சி 7 ஐ நிலைநிறுத்த வெவ்வேறு தடுமாற்ற நிலைகளை கருதுகிறது. எம்சிஎம் இரட்டை ஹெக்ஸாமரின் பாஸ்பரிலேஷன், குறிப்பாக எம்சிஎம் 4-என்எஸ்டி, டி. டி. கே மூலம், ஈஸ்டில் நம்பகத்தன்மைக்கு அவசியம். டி. டி. கே மற்றும் சி. டி. கே மூலம் எம். சி. எம். க்கள் செயல்படுத்தப்பட்ட பிறகு சி. டி. சி 45 மற்றும் ஜி. ஐ. என். எஸ் ஆட்சேர்ப்பு தொடர்கிறது. Cdc45 புரத செல் பிரிவு சுழற்சி 45 (Cdc45) புரதம் முன்-பிரதி சிக்கலை துவக்க வளாகமாக மாற்றுவதற்கான ஒரு முக்கியமான அங்கமாகும். சி. டி. சி 45 புரதம் துவக்கத்திற்கு முன் ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்தில் ஒருங்கிணைக்கிறது மற்றும் சாக்கரோமைசஸ் செரிவிசியாவில் ரெப்ளிகேஷன் தொடங்குவதற்கு தேவைப்படுகிறது, மேலும் நீளத்தின் போது ஒரு முக்கிய பங்கைக் கொண்டுள்ளது. எனவே, குரோமோசோமால் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனின் துவக்கம் மற்றும் நீளம் ஆகிய இரண்டு கட்டங்களிலும் சி. டி. சி 45 முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது. சி. டி. சி 45 குரோமாடினுடன் தொடர்புடையது, ஜி 1 நிலையின் பிற்பகுதியில் துவக்கத்தின் தொடக்கத்திற்குப் பிறகு மற்றும் செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டத்தில். சி. டி. சி. 45 மெக்ம்5 உடன் உடல் ரீதியாக தொடர்புபடுத்துகிறது மற்றும் மெக்ம் மரபணு குடும்பத்தின் ஆறு உறுப்பினர்களில் ஐந்து பேர் மற்றும் ஓஆர்சி2 மரபணுவுடன் மரபணு தொடர்புகளைக் காட்டுகிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α, டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ε, ரெப்ளிகேஷன் புரதம் ஏ (ஆர்பிஏ) மற்றும் குரோமாடினில் செல் நியூக்ளியர் ஆன்டிஜென் (பிசிஎன்ஏ) பெருக்குதல் உள்ளிட்ட பல்வேறு ரெப்ளிகேஷன் புரதங்களை ஏற்றுவதற்கு குரோமாடினில் சி. டி. சி 45 ஐ ஏற்றுவது முக்கியமானது. செனோப்பஸ் நியூக்ளியஸ் இல்லாத அமைப்புக்குள், பிளாஸ்மிட் டி. என். ஏவை அவிழ்க்க சி. டி. சி 45 தேவை என்று நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. செனோப்பஸ் நியூக்ளியஸ் இல்லாத அமைப்பு டிஎன்ஏ தளர்த்தல் மற்றும் இறுக்கமான ஆர். பி. ஏ குரோமாடினுடன் பிணைப்பது சி. டி. சி 45 முன்னிலையில் மட்டுமே நிகழ்கிறது என்பதையும் நிரூபிக்கிறது. சி. டி. சி. 45 ஐ குரோமாடினுடன் பிணைப்பது சி. எல். பி-சி. டி. சி. 28 கைனேஸ் செயல்பாடு மற்றும் செயல்பாட்டு சி. டி. சி 6 மற்றும் எம். சி. எம் 2 ஐப் பொறுத்தது, இது எஸ்-கட்ட சைக்ளின்-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ்களை (சி. டி. கே) செயல்படுத்திய பிறகு சி. டி. சி. 45 ஆர். சி-க்கு முந்தைய தொடர்புகளுடன் தொடர்புடையது என்பதைக் குறிக்கிறது. நேரம் மற்றும் சி. டி. கே சார்பு ஆகியவற்றால் சுட்டிக்காட்டப்பட்டபடி, சி. டி. சி 45 ஐ குரோமாடினுடன் பிணைப்பது டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதற்கான உறுதிப்பாட்டிற்கு முக்கியமானது. எஸ் கட்டத்தில், சி. டி. சி 45 குரோமாடினில் உள்ள எம். சி. எம் புரதங்களுடன் உடல் ரீதியாக தொடர்பு கொள்கிறது; இருப்பினும், குரோமாடினில் இருந்து சி. டி. சி 45 இன் விலகல் எம். சி. எம் ஐ விட மெதுவாக உள்ளது, இது புரதங்கள் வெவ்வேறு வழிமுறைகளால் வெளியிடப்படுகின்றன என்பதைக் குறிக்கிறது. ஜி. ஐ. என். எஸ் ஆறு மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதங்கள் மற்றும் சி. டி. சி 45 ஆகியவை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகளின் இயக்கத்திற்கும் டிஎன்ஏவின் தளர்த்தலுக்கும் துவக்கம் மற்றும் நீளத்தின் போது அவசியம். துவக்கத்தின் போது ரெப்ளிகேஷனின் தோற்றத்தில் மெக்ம் மற்றும் சி. டி. சி 45 இன் தொடர்புக்கு ஜிஐஎன்எஸ் அவசியம், பின்னர் ரெப்லிகோம் முன்னேறும்போது டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்ஸில் அவசியம். ஜி. ஐ. என். எஸ் காம்ப்ளக்ஸ் நான்கு சிறிய புரதங்கள் எஸ். எல். டி 5 (சி. டி. சி 105), பி. எஸ். எஃப் 1 (சி. டி. சி 101), பி. எஸ். எஃப் 2 (சி. டி. சி 102) மற்றும் பி. எஸ். எஃப் 3 (சி. டி. சி 103) ஆகியவற்றால் ஆனது, ஜி. ஐ. என். எஸ் என்பது 'கோ, ஐச்சி, நி, சான்' என்பதைக் குறிக்கிறது, அதாவது ஜப்பானிய மொழியில் '5,1,2,3'. சி. டி. சி. 45, எம். சி. எம். 2-7 மற்றும் ஜி. ஐ. என். எஸ் ஆகியவை இணைந்து சி. எம். ஜி ஹெலிகேஸை உருவாக்குகின்றன, இது ரெப்லிகோமின் ரெப்ளிகேட்டிவ் ஹெலிகேஸ் ஆகும். மெக்ம்2-7 காம்ப்ளக்ஸ் மட்டும் பலவீனமான ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டிருந்தாலும், வலுவான ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டிற்கு சி. டி. சி 45 மற்றும் ஜி. ஐ. என். எஸ் தேவைப்படுகிறது, குரோமோசோம் பிரதிபலிப்புக்கு மெக்ம் 10 மெக்ம் 10 அவசியம் மற்றும் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பின் தோற்றத்தில் செயலற்ற வடிவத்தில் ஏற்றப்படும் மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு 2-7 ஹெலிகேஸுடன் தொடர்பு கொள்கிறது. மெக்ம்10 வினையூக்கி டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α ஐ சேப்பரோன் செய்கிறது மற்றும் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்ஸில் பாலிமரேஸை உறுதிப்படுத்த உதவுகிறது. டி. டி. கே மற்றும் சி. டி. கே கைனேஸ்கள் எஸ் கட்டத்தின் தொடக்கத்தில், முன்-பிரதி சிக்கலானது இரண்டு எஸ் கட்ட-குறிப்பிட்ட கைனேஸ்களால் செயல்படுத்தப்பட வேண்டும், இது பிரதிபலிப்பின் தோற்றத்தில் ஒரு துவக்க சிக்கலை உருவாக்குகிறது. ஒரு கைனேஸ் டி. பி. எஃப் 4-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ் (டி. டி. கே) எனப்படும் சி. டி. சி 7-டி. பி. எஃப் 4 கைனேஸ் ஆகும், மற்றொன்று சைக்ளின்-டிபெண்டன்ட் கைனேஸ் (சி. டி. கே) ஆகும். ஈஸ்ட் மற்றும் செனோபஸில் உள்ள Cdc45 இன் குரோமாட்டின்-பிணைப்பு மதிப்பீடுகள், CDK செயல்பாட்டின் கீழ்நிலை நிகழ்வு Cdc45 ஐ குரோமாடினில் ஏற்றுவதாகக் காட்டுகின்றன. சி. டி. சி 6 மற்றும் சி. டி. கே இடையேயான தொடர்பு மற்றும் சி. டி. சி 6 இன் சி. டி. கே-சார்ந்த பாஸ்போரிலேஷன் காரணமாக சி. டி. சி 6 சி. டி. கே நடவடிக்கையின் இலக்காக ஊகிக்கப்படுகிறது. சி. டி. சி 6 இன் சி. டி. கே-சார்ந்த பாஸ்பரிலேஷன் எஸ் கட்டத்திற்குள் நுழைய தேவை என்று கருதப்படுகிறது. டி. டி. கே, சி. டி. சி 7 இன் வினையூக்கி துணை அலகுகள் மற்றும் ஆக்டிவேட்டர் புரதம், டி. பி. எஃப் 4 ஆகிய இரண்டும் யூகாரியோட்டுகளில் பாதுகாக்கப்பட்டுள்ளன, மேலும் அவை செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டத்தின் தொடக்கத்திற்கு தேவைப்படுகின்றன. Cdc45 ஐ குரோமாட்டின் தோற்றத்தில் ஏற்றுவதற்கு Dbf4 மற்றும் Cdc7 இரண்டும் தேவைப்படுகின்றன. டி. டி. கே கைனேஸை பிணைப்பதற்கான இலக்கு மெக்ம் காம்ப்ளக்ஸின் குரோமாட்டின்-பிணைக்கப்பட்ட வடிவமாகும். உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட கிரையோஈஎம் கட்டமைப்புகள் டி. டி. கே இன் டி. பி. எஃப் 4 துணை அலகு டிஎன்ஏ-பிணைக்கப்பட்ட எம்சிஎம்-டிஹெச் இன் ஹெக்ஸாமர் இடைமுகத்தின் குறுக்கே பரவியிருப்பதைக் காட்டியது, ஒரு ஹெக்ஸாமரின் எம்சிஎம் 2 மற்றும் எதிர் ஹெக்ஸாமரின் எம்சிஎம் 4/6 ஐத் தொடர்புகொள்கிறது. எம். சி. எம். 2, எம். சி. எம். 4 மற்றும் எம். சி. எம். 6 அனைத்தும் டி. டி. கே மூலம் பாஸ்பரிலேஷனின் அடி மூலக்கூறுகள், ஆனால் எம். சி. எம் 4 இன் என்-டெர்மினல் செரின்/த்ரோயோனின் நிறைந்த களம் (என். எஸ். டி) மட்டுமே ஒரு அத்தியாவசிய டி. டி. கே இலக்காகும். என்எஸ்டியின் பாஸ்பரிலேஷன் மெக்ம் ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டை செயல்படுத்த வழிவகுக்கிறது. Dpb11, Sld3, மற்றும் Sld2 புரதங்கள் Sld3, Sld2, மற்றும் Dpb11 ஆகியவை பல ரெப்ளிகேஷன் புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன. எஸ். எல். டி. 3 மற்றும் சி. டி. சி. 45 ஆகியவை ஒரு சிக்கலை உருவாக்குகின்றன, இது ஜி 11 கட்டத்தில் கூட பிரதிபலிப்பின் ஆரம்ப தோற்றத்தில் முன்-ஆர். சி உடன் தொடர்புடையது மற்றும் பரஸ்பர எம். சி. எம்-சார்ந்த முறையில் எஸ் கட்டத்தில் பிரதிபலிப்பின் பிற்கால தோற்றத்துடன் தொடர்புடையது. டி. பி. பி. 11 மற்றும் எஸ். எல். டி. 2 ஆகியவை பாலிமரேஸ் உடன் தொடர்பு கொள்கின்றன மற்றும் குறுக்கு-இணைக்கும் சோதனைகள் டி. பி. பி. 11 மற்றும் பாலிமரேஸ் எஸ் கட்டத்தில் இணைகின்றன மற்றும் ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்துடன் தொடர்புடையவை என்பதைக் குறிக்கின்றன. எஸ். எல். டி 3 மற்றும் எஸ். எல். டி 2 ஆகியவை சி. டி. கே மூலம் பாஸ்பரிலேட்டட் செய்யப்படுகின்றன, இது இரண்டு ரெப்ளிகேட்டிவ் புரதங்களையும் டி. பி. பி 11 உடன் பிணைக்க உதவுகிறது. Dpb11 இரண்டு ஜோடி BRCA1 C டெர்மினஸ் (BRCT) களங்களைக் கொண்டிருந்தது, அவை பாஸ்போபெப்டைட்-பைண்டிங் களங்கள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன. பிஆர்சிடி களங்களின் என்-முனைய ஜோடி பாஸ்போரிலேட்டட் எஸ்எல்டி3 உடன் பிணைக்கிறது, மேலும் சி-முனைய ஜோடி பாஸ்போரிலேட்டட் எஸ்எல்டி2 உடன் பிணைக்கிறது. ஈஸ்டில் டிஎன்ஏ வளரும் சிடிகே-சார்ந்த செயல்பாட்டிற்கு இந்த இரண்டு தொடர்புகளும் அவசியம். டி. பி. பி. 11 ஜி. ஐ. என். எஸ் உடன் தொடர்பு கொள்கிறது மற்றும் குரோமோசோமல் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பின் துவக்கம் மற்றும் நீளம் படிகளில் பங்கேற்கிறது. ஜி. ஐ. என். எஸ் என்பது ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகளில் காணப்படும் ரெப்ளிகேஷன் புரதங்களில் ஒன்றாகும் மற்றும் சி. டி. சி 45 மற்றும் எம். சி. எம் உடன் ஒரு வளாகத்தை உருவாக்குகிறது. டிஎன்பி11, எஸ்எல்டி2 மற்றும் எஸ்எல்டி3 ஆகியவற்றுக்கு இடையிலான இந்த பாஸ்போரிலேஷன்-சார்ந்த தொடர்புகள் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனை சிடிகே-சார்ந்த செயல்பாட்டிற்கு இன்றியமையாதவை, மேலும் சில சோதனைகளுக்குள் குறுக்கு-இணைக்கும் வினைப்பொருள்களைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், ப்ரீ-லோடிங் காம்ப்ளக்ஸ் (ப்ரீ-எல்சி) என்று அழைக்கப்படும் ஒரு பலவீனமான காம்ப்ளக்ஸ் அடையாளம் காணப்பட்டது. இந்த வளாகம் போல், ஜி. ஐ. என். எஸ், எஸ். எல். டி 2 மற்றும் டிபிபி 11 ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது. முன்-எல். சி. ஒரு சி. டி. கே-சார்ந்த மற்றும் டி. டி. கே-சார்ந்த முறையில் தோற்றத்துடன் எந்தவொரு தொடர்புக்கும் முன்பு உருவாகிறது மற்றும் சி. டி. கே செயல்பாடு முன்-எல். சி உருவாக்கம் மூலம் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதை ஒழுங்குபடுத்துகிறது. நீளமாக்கல் முன்-பிரதி சிக்கலான (முன்-ஆர். சி) உருவாக்கம் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதற்கான சாத்தியமான தளங்களைக் குறிக்கிறது. இரட்டை சிக்கலான டிஎன்ஏவைச் சுற்றியுள்ள மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு வளாகத்திற்கு இணங்க, முன்-ஆர்சி உருவாக்கம் தோற்ற டிஎன்ஏவை உடனடியாக அவிழ்க்கவோ அல்லது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களை ஆட்சேர்ப்பு செய்யவோ வழிவகுக்காது. அதற்கு பதிலாக, செல் சுழற்சியின் ஜி 1 இன் போது உருவாகும் முன்-ஆர். சி டிஎன்ஏவைத் தளர்த்தவும், செல்கள் ஜி 1 இலிருந்து செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டத்திற்குச் சென்ற பிறகு பிரதிபலிப்பைத் தொடங்கவும் மட்டுமே செயல்படுத்தப்படுகிறது. துவக்கச் சிக்கலானது உருவாகி, செல்கள் எஸ் கட்டத்திற்குள் சென்றவுடன், சிக்கலானது ஒரு பிரதிபலிப்பாக மாறுகிறது. யூகாரியோடிக் ரெப்லிசோம் காம்ப்ளக்ஸ் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனை ஒருங்கிணைப்பதற்கு பொறுப்பாகும். முன்னணி மற்றும் பின்தங்கிய இழைகளில் பிரதிபலிப்பு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ε மற்றும் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ மூலம் செய்யப்படுகிறது. கிளாஸ்பின், அண்ட்1, ரெப்ளிகேஷன் காரணி சி கிளாம்ப் லோடர் மற்றும் ஃபோர்க் பாதுகாப்பு காம்ப்ளக்ஸ் உள்ளிட்ட பல ரெப்லிசோம் காரணிகள் பாலிமரேஸ் செயல்பாடுகளை ஒழுங்குபடுத்துவதற்கும், சி. டி. சி 45-எம். சி. எம்-ஜி. ஐ. என். எஸ் காம்ப்ளக்ஸ் மூலம் டெம்ப்ளேட் ஸ்ட்ராண்டை அவிழ்ப்பதன் மூலம் டிஎன்ஏ தொகுப்பை ஒருங்கிணைப்பதற்கும் காரணமாகின்றன. டிஎன்ஏ கட்டப்படாமல் இருக்கும்போது திருப்பத்தின் எண்ணிக்கை குறைகிறது. இதை ஈடுசெய்ய ரிட் எண் அதிகரிக்கிறது, டி. என். ஏவில் நேர்மறை சூப்பர் காயில்களை அறிமுகப்படுத்துகிறது. இந்த சூப்பர் காயில்கள் அகற்றப்படாவிட்டால் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் நிறுத்தப்படும். ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கிற்கு முன்னதாக இந்த சூப்பர் காயில்களை அகற்றுவதற்கு டோபோஐசோமரேஸ்கள் பொறுப்பாகும். ஒவ்வொரு பெருக்க உயிரணுவிலும் உள்ள முழு மரபணு டிஎன்ஏவையும் நகலெடுப்பதற்கு ரெப்லிசோம் பொறுப்பாகும். மகள் ஹெலிக்ஸை உருவாக்கும் அடிப்படை இணைத்தல் மற்றும் சங்கிலி உருவாக்கம் எதிர்வினைகள் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களால் ஊக்குவிக்கப்படுகின்றன. இந்த நொதிகள் ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ வழியாக நகர்கின்றன, மேலும் டெம்ப்ளேட் இழையை "வாசிப்பதன்" மூலம் புதிய டிஎன்ஏ இழையை விரிவுபடுத்த அனுமதிக்கின்றன, மேலும் சரியான பியூரின் நியூக்ளியோபேஸ்கள், அடினின் மற்றும் குவானைன் மற்றும் பைரிமிடின் நியூக்ளியோபேஸ்கள், தைமின் மற்றும் சைட்டோசின் ஆகியவற்றை இணைக்க அனுமதிக்கின்றன. ஆக்டிவேட்டட் ஃப்ரீ டியோக்ஸிரிபோநியூக்ளியோடைடுகள் உயிரணுவில் டியோக்ஸிரிபோநியூக்ளியோடைடு ட்ரைபாஸ்பேட்டுகளாக (டிஎன்டிபி) உள்ளன. இந்த இலவச நியூக்ளியோடைடுகள் கடைசியாக இணைக்கப்பட்ட நியூக்ளியோடைடில் வெளிப்படும் 3 '-ஹைட்ராக்சில் குழுவில் சேர்க்கப்படுகின்றன. இந்த எதிர்வினையில், இலவச டிஎன்டிபியிலிருந்து ஒரு பைரோபாஸ்பேட் வெளியிடப்படுகிறது, இது பாலிமரைசேஷன் எதிர்வினைக்கு ஆற்றலை உருவாக்குகிறது மற்றும் 5 'மோனோபாஸ்பேட்டை வெளிப்படுத்துகிறது, பின்னர் இது 3' ஆக்ஸிஜனுடன் சகப்பிணைப்புடன் பிணைக்கப்படுகிறது. கூடுதலாக, தவறாக செருகப்பட்ட நியூக்ளியோடைடுகள் அகற்றப்பட்டு, ஆற்றல் ரீதியாக சாதகமான எதிர்வினையில் சரியான நியூக்ளியோடைடுகளால் மாற்றப்படலாம். டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பின் போது ஏற்படும் பிழைகளை முறையான சரிபார்ப்பு மற்றும் சரிசெய்ய இந்த பண்பு முக்கியமானது. ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் என்பது புதிதாக பிரிக்கப்பட்ட டெம்ப்ளேட் இழைகளுக்கு இடையிலான சந்திப்பாகும், இது முன்னணி மற்றும் பின்தங்கிய இழைகள் என்று அழைக்கப்படுகிறது, மேலும் இரட்டை ஸ்ட்ராண்டட் டிஎன்ஏ. இரட்டை டிஎன்ஏ எதிர் இணையாக இருப்பதால், டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் இரண்டு புதிய இழைகளுக்கு இடையில் எதிர் திசைகளில் நிகழ்கிறது, ஆனால் அனைத்து டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களும் புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட இழையைப் பொறுத்து டிஎன்ஏவை 5 'முதல் 3' திசையில் ஒருங்கிணைக்கிறது. டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பின் போது மேலும் ஒருங்கிணைப்பு தேவைப்படுகிறது. இரண்டு ரெப்ளிகேட்டிவ் பாலிமரேஸ்கள் டிஎன்ஏவை எதிர் நோக்குநிலைகளில் ஒருங்கிணைக்கிறது. பாலிமரேஸ் ε "முன்னணி" டிஎன்ஏ இழையில் டிஎன்ஏவை தொடர்ந்து ஒருங்கிணைக்கிறது, ஏனெனில் இது டிஎன்ஏவின் அதே திசையில் சுட்டிக்காட்டுகிறது. இதற்கு மாறாக, பாலிமரேஸ் δ டிஎன்ஏவை "பின்தங்கிய" இழையில் ஒருங்கிணைக்கிறது, இது எதிர் டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் இழையாகும், இது துண்டு துண்டான அல்லது தொடர்ச்சியற்ற முறையில் உள்ளது. பின்தங்கிய இழைகளில் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் தயாரிப்புகளின் தொடர்ச்சியற்ற நீட்சிகள் ஒகசாகி துண்டுகள் என்று அழைக்கப்படுகின்றன, மேலும் யூகாரியோடிக் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகளில் சுமார் 100 முதல் 200 தளங்கள் நீளம் கொண்டவை. பின்தங்கிய இழையில் பொதுவாக ஒற்றை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏவின் நீண்ட நீட்சிகள் உள்ளன, அவை ஒற்றை இழைகள் கொண்ட பிணைப்பு புரதங்களுடன் பூசப்படுகின்றன, இது இரண்டாம் நிலை அமைப்பு உருவாவதைத் தடுப்பதன் மூலம் ஒற்றை இழைகள் கொண்ட வார்ப்புருக்களை உறுதிப்படுத்த உதவுகிறது. யூகாரியோட்டுகளில், இந்த ஒற்றை இழைகள் கொண்ட பிணைப்பு புரதங்கள் ரெப்ளிகேஷன் புரதம் ஏ (ஆர். பி. ஏ) எனப்படும் ஹெட்டோரோட்ரிமெரிக் காம்ப்ளக்ஸ் ஆகும். ஒவ்வொரு ஒகாசாகி துண்டுக்கும் முன்னதாக ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமர் உள்ளது, இது தொகுப்பின் போது அடுத்த ஒகாசாகி துண்டின் ஊர்வலத்தால் இடம்பெயர்க்கப்படுகிறது. ஆர்என்ஏ எச் டிஎன்ஏவை அங்கீகரிக்கிறதுஃ ஆர்என்ஏ ப்ரைமர்களைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் உருவாக்கப்படும் ஆர்என்ஏ கலப்பினங்கள் மற்றும் ஒரு ப்ரைமரை விட்டு, பிரதி இழையிலிருந்து இவற்றை அகற்றுவதற்கு பொறுப்பாகும்ஃ டெம்ப்ளேட் சந்திப்பு. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α, இந்த தளங்களை அங்கீகரிக்கிறது மற்றும் ப்ரைமர் அகற்றுவதன் மூலம் எஞ்சியிருக்கும் இடைவெளிகளை நீட்டிக்கிறது. யூகாரியோடிக் செல்களில், ஆர்என்ஏ ப்ரைமரின் உடனடியாக மேல்நோக்கி உள்ள டிஎன்ஏ பிரிவின் ஒரு சிறிய அளவு இடம்பெயர்ந்து, ஒரு மடிப்பு கட்டமைப்பை உருவாக்குகிறது. இந்த மடிப்பு பின்னர் எண்டோநியூக்ளியேஸ்களால் பிளவுபடுத்தப்படுகிறது. ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில், மடிப்பை அகற்றிய பிறகு டிஎன்ஏவில் உள்ள இடைவெளி டிஎன்ஏ லிகேஸ் I ஆல் மூடப்படுகிறது, இது புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட இழையின் 3 '-ஓஎச் மற்றும் 5' பாஸ்பேட் இடையே எஞ்சியிருக்கும் நிக்குகளை சரிசெய்கிறது. யூகாரியோடிக் ஒகசாகி துண்டின் ஒப்பீட்டளவில் குறுகிய தன்மை காரணமாக, பின்தங்கிய இழையில் தொடர்ச்சியாக நிகழும் டிஎன்ஏ பிரதி தொகுப்பு குறைவான செயல்திறன் கொண்டது மற்றும் முன்னணி-ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பை விட அதிக நேரம் எடுக்கும். அனைத்து ஆர்என்ஏ ப்ரைமர்களும் அகற்றப்பட்டு நிக்குகள் சரிசெய்யப்பட்டவுடன் டிஎன்ஏ தொகுப்பு நிறைவடைகிறது. முன்னணி ஸ்ட்ராண்ட் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனின் போது, ரெப்லிசோம் பெற்றோரின் டுப்லெக்ஸ் டிஎன்ஏவை 5 'முதல் 3' திசையில் இரண்டு ஒற்றை-ஸ்ட்ராண்டட் டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் அவிழ்த்து விடும். முன்னணி ஸ்ட்ராண்ட் என்பது டெம்ப்ளேட் ஸ்ட்ராண்ட் ஆகும், இது ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் இயக்கத்தின் அதே திசையில் பிரதிபலிக்கப்படுகிறது. இது புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட ஸ்ட்ராண்ட் அசல் ஸ்ட்ராண்டிற்கு நிரப்பு 5 'முதல் 3' வரை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் இயக்கத்தின் அதே திசையில் ஒருங்கிணைக்க அனுமதிக்கிறது. முன்னணி இழையின் 3 'முனையில் ஒரு ப்ரைமேஸ் மூலம் ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமர் சேர்க்கப்பட்டவுடன், டிஎன்ஏ தொகுப்பு முன்னணி இழையைப் பொறுத்தவரை 3' முதல் 5 'திசையில் தடையின்றி தொடரும். டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ε தொடர்ந்து டெம்ப்ளேட் ஸ்ட்ராண்டில் நியூக்ளியோடைடுகளைச் சேர்க்கும், எனவே முன்னணி ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்புக்கு ஒரு ப்ரைமர் மட்டுமே தேவைப்படுகிறது மற்றும் தடையற்ற டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. பின்தங்கிய ஸ்ட்ராண்டில் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் தொடர்ச்சியற்றது. பின்தங்கிய ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பில், ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் எதிர் திசையில் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸின் இயக்கத்திற்கு பல ஆர்என்ஏ ப்ரைமர்களின் பயன்பாடு தேவைப்படுகிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ஒகாசாகி துண்டுகள் எனப்படும் டிஎன்ஏவின் குறுகிய துண்டுகளை ஒருங்கிணைக்கும், அவை ப்ரைமரின் 3 'முனையில் சேர்க்கப்படுகின்றன. இந்த துண்டுகள் யூகாரியோட்டுகளில் 100 முதல் 400 நியூக்ளியோடைடுகள் வரை நீளமாக இருக்கலாம். ஒகாசாகி துண்டு தொகுப்பின் முடிவில், டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ முந்தைய ஒகாசாகி துண்டுக்குள் ஓடுகிறது மற்றும் ஆர்என்ஏ ப்ரைமர் மற்றும் டிஎன்ஏவின் ஒரு சிறிய பகுதியைக் கொண்ட அதன் 5 'முனையை இடமாற்றம் செய்கிறது. இது ஒரு ஆர்என்ஏ-டிஎன்ஏ ஒற்றை ஸ்ட்ராண்ட் ஃப்ளாப்பை உருவாக்குகிறது, இது பிளவுபடுத்தப்பட வேண்டும், மேலும் இரண்டு ஒகசாகி துண்டுகளுக்கு இடையிலான நிக் டிஎன்ஏ லிகேஸ் I ஆல் சீல் செய்யப்பட வேண்டும். இந்த செயல்முறை ஒகாசாகி துண்டு முதிர்ச்சி என்று அழைக்கப்படுகிறது மற்றும் இரண்டு வழிகளில் கையாளப்படலாம்ஃ ஒரு பொறிமுறை குறுகிய மடிப்புகளை செயலாக்குகிறது, மற்றொன்று நீண்ட மடிப்புகளைக் கையாள்கிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ அதன் பாலிமரைசேஷனுக்கு முன்னதாக டிஎன்ஏ அல்லது ஆர்என்ஏவின் 2 முதல் 3 நியூக்ளியோடைடுகளை இடமாற்றம் செய்ய முடியும், இது ஃபென் 1 க்கான ஒரு குறுகிய "ஃப்ளாப்" அடி மூலக்கூறை உருவாக்குகிறது, இது ஒரு நேரத்தில் ஒரு நியூக்ளியோடைடு என்ற ஃப்ளாப்பிலிருந்து நியூக்ளியோடைடுகளை அகற்ற முடியும். இந்த செயல்முறையின் சுழற்சிகளை மீண்டும் மீண்டும் செய்வதன் மூலம், டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ மற்றும் ஃபென்1 ஆகியவை ஆர்என்ஏ ப்ரைமர்களை அகற்றுவதை ஒருங்கிணைக்க முடியும் மற்றும் பின்தங்கிய இழையில் டிஎன்ஏ நிக்கை விட்டுச்செல்லலாம். இந்த மறு செய்கை செயல்முறை உயிரணுவை விட விரும்பத்தக்கது என்று முன்மொழியப்பட்டுள்ளது, ஏனெனில் இது இறுக்கமாக கட்டுப்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் அகற்றப்பட வேண்டிய பெரிய மடிப்புகளை உருவாக்காது. கட்டுப்பாடற்ற ஃபென் 1/டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ செயல்பாடு ஏற்பட்டால், செல் டிஎன்ஏ 2 ஐப் பயன்படுத்தி நீண்ட மடிப்புகளை உருவாக்க மற்றும் செயலாக்க ஒரு மாற்று பொறிமுறையைப் பயன்படுத்துகிறது, இது ஹெலிகேஸ் மற்றும் நியூக்ளியேஸ் செயல்பாடுகளைக் கொண்டுள்ளது. இந்த நீண்ட மடிப்புகளை அகற்ற டி. என். ஏ 2 இன் நியூக்ளியேஸ் செயல்பாடு தேவைப்படுகிறது, இது ஃபென் 1 ஆல் செயலாக்கப்படுவதற்கு ஒரு குறுகிய மடிப்பை விட்டுச்செல்கிறது. எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி ஆய்வுகள் பின்தங்கிய இழையில் நியூக்ளியோசோம் ஏற்றுதல் தொகுப்பு தளத்திற்கு மிக அருகில் நிகழ்கிறது என்பதைக் குறிக்கிறது. எனவே, ஒகசாகி துண்டு முதிர்ச்சி என்பது ஒரு திறமையான செயல்முறையாகும், இது புதிதாக உருவாகும் டிஎன்ஏ ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட உடனேயே நிகழ்கிறது. ரெப்ளிகேட்டிவ் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் ரெப்ளிகேட்டிவ் ஹெலிகேஸ் பெற்றோரின் டிஎன்ஏ டுப்லெக்ஸை அவிழ்த்த பிறகு, இரண்டு ஒற்றை-இழையுள்ள டிஎன்ஏ வார்ப்புருக்களை அம்பலப்படுத்தி, பெற்றோரின் மரபணுவின் இரண்டு நகல்களை உருவாக்க ரெப்ளிகேட்டிவ் பாலிமரேஸ்கள் தேவைப்படுகின்றன. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் செயல்பாடு மிகவும் சிறப்பு வாய்ந்தது மற்றும் குறிப்பிட்ட வார்ப்புருக்கள் மற்றும் குறுகிய உள்ளூர்மயமாக்கல்களில் பிரதிபலிப்பை நிறைவேற்றுகிறது. யூகாரியோடிக் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில், டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுக்கு பங்களிக்கும் மூன்று தனித்துவமான ரெப்ளிகேட்டிவ் பாலிமரேஸ் வளாகங்கள் உள்ளனஃ பாலிமரேஸ் α, பாலிமரேஸ் δ மற்றும் பாலிமரேஸ் ε. இந்த மூன்று பாலிமரேஸ்களும் உயிரணுவின் உயிர்வாழ்வுக்கு இன்றியமையாதவை. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களுக்கு டிஎன்ஏ தொகுப்பைத் தொடங்க ஒரு ப்ரைமர் தேவைப்படுவதால், பாலிமரேஸ் α (போல் α) ஒரு ரெப்ளிகேட்டிவ் ப்ரைமேஸாக செயல்படுகிறது. போல் α ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமேஸுடன் தொடர்புடையது மற்றும் இந்த சிக்கலானது ஆர்என்ஏவின் குறுகிய 10 நியூக்ளியோடைடு நீட்சியையும் அதைத் தொடர்ந்து 10 முதல் 20 டிஎன்ஏ தளங்களையும் கொண்ட ஒரு ப்ரைமரை ஒருங்கிணைப்பதன் மூலம் ப்ரைமிங் பணியை நிறைவேற்றுகிறது. முக்கியமாக, இந்த முதன்மையான செயல் முன்னணி-ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பைத் தொடங்குவதற்கான தோற்றத்தில் பிரதிபலிப்பு துவக்கத்தில் நிகழ்கிறது, மேலும் பின்தங்கிய ஸ்ட்ராண்டில் உள்ள ஒவ்வொரு ஒகசாகி துண்டின் 5 'முனையிலும் நிகழ்கிறது. இருப்பினும், போல் α ஆல் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடர முடியாது, மேலும் டிஎன்ஏ தொகுப்பைத் தொடர மற்றொரு பாலிமரேஸ் மூலம் மாற்றப்பட வேண்டும். பாலிமரேஸ் மாற்றத்திற்கு கிளாம்ப் ஏற்றிகள் தேவைப்படுகின்றன, மேலும் சாதாரண டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுக்கு மூன்று டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களின் ஒருங்கிணைந்த செயல்பாடுகள் தேவை என்று நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளதுஃ ப்ரைமிங் தொகுப்புக்கு போல் α, லீடிங்-ஸ்ட்ராண்ட் ரெப்ளிகேஷனுக்கு போல் ε, மற்றும் தொடர்ந்து ஏற்றப்படும் போல் δ, பின்தங்கிய-ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பின் போது ஒகாசாகி துண்டுகளை உருவாக்குவதற்கு. பாலிமரேஸ் α (போல் α): ஒரு சிறிய வினையூக்கி துணை அலகு (பிரிஎஸ்) மற்றும் ஒரு பெரிய வினையூக்கி அல்லாத (பிரிஎல்) துணை அலகு கொண்ட ஒரு வளாகத்தை உருவாக்குகிறது. முதலாவதாக, ஆர்என்ஏ ப்ரைமரின் தொகுப்பு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ஆல்பா மூலம் டிஎன்ஏ தொகுப்பை அனுமதிக்கிறது. முன்னணி இழையின் தோற்றத்திலும், பின்தங்கிய இழையின் ஒவ்வொரு ஒகசாகி துண்டின் தொடக்கத்திலும் ஒரு முறை நிகழ்கிறது. பிரி துணை அலகுகள் ஒரு ப்ரைமேஸாக செயல்படுகின்றன, இது ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமரை ஒருங்கிணைக்கிறது. டிஎன்ஏ போல் α புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட ப்ரைமரை டிஎன்ஏ நியூக்ளியோடைடுகளுடன் நீளப்படுத்துகிறது. சுமார் 20 நியூக்ளியோடைடுகளுக்குப் பிறகு, நீளம் முன்னணி இழையில் போல் ε மற்றும் பின்தங்கிய இழையில் போல் δ ஆல் எடுத்துக் கொள்ளப்படுகிறது. பாலிமரேஸ் δ (போல் δ): அதிக செயல்முறை மற்றும் சரிபார்ப்பு, 3 '-> 5' எக்ஸோ நியூக்ளியேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. விவோவில், இது பின்தங்கிய இழைகள் மற்றும் முன்னணி இழைகள் தொகுப்பு ஆகிய இரண்டிலும் ஈடுபடும் முக்கிய பாலிமரேஸ் ஆகும். பாலிமரேஸ் ε (போல் ε): அதிக செயல்முறை மற்றும் சரிபார்ப்பு, 3 '-> 5' எக்ஸோ நியூக்ளியேஸ் செயல்பாட்டைக் கொண்டுள்ளது. போல் δ உடன் மிகவும் தொடர்புடையது, விவோவில் இது முக்கியமாக போல் δ இன் பிழைச் சரிபார்ப்பில் செயல்படுகிறது. சி. டி. சி 45-எம். சி. எம்-ஜி. ஐ. என். எஸ் ஹெலிகேஸ் காம்ப்ளக்ஸ் டிஎன்ஏ ஹெலிகேஸ்கள் மற்றும் பாலிமரேஸ்கள் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் நெருங்கிய தொடர்பில் இருக்க வேண்டும். தொகுப்புக்கு முன்பே தளர்த்தல் ஏற்பட்டால், ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏவின் பெரிய பகுதிகள் வெளிப்படுகின்றன. இது டிஎன்ஏ சேத சமிக்ஞையை செயல்படுத்தலாம் அல்லது டிஎன்ஏ பழுதுபார்க்கும் செயல்முறைகளைத் தூண்டலாம். இந்த சிக்கல்களைத் தடுக்க, யூகாரியோடிக் ரெப்லிசோம் சிறப்பு புரதங்களைக் கொண்டுள்ளது, அவை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கிற்கு முன்னதாக ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டை ஒழுங்குபடுத்த வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன. இந்த புரதங்கள் ஹெலிகேஸ்கள் மற்றும் பாலிமரேஸ்களுக்கு இடையிலான உடல் தொடர்புக்கான டாக்கிங் தளங்களையும் வழங்குகின்றன, இதன் மூலம் டுப்லெக்ஸ் அவிழ்ப்பு டிஎன்ஏ தொகுப்புடன் இணைக்கப்படுவதை உறுதி செய்கிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் செயல்படுவதற்கு, இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ ஹெலிக்ஸ் இரண்டு ஒற்றை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏ வார்ப்புருக்கள் பிரதிபலிப்புக்காக அம்பலப்படுத்தப்பட வேண்டும். குரோமோசோம் பிரதிபலிப்பின் போது இரட்டை இழைகள் கொண்ட டி. என். ஏவை அவிழ்ப்பதற்கு டிஎன்ஏ ஹெலிகேஸ்கள் காரணமாகின்றன. யூகாரியோடிக் செல்களில் உள்ள ஹெலிகேஸ்கள் குறிப்பிடத்தக்க வகையில் சிக்கலானவை. ஹெலிகேஸின் வினையூக்கி மையம் ஆறு மினிக்ரோமோசோம் பராமரிப்பு (எம்சிஎம் 2-7) புரதங்களால் ஆனது, இது ஒரு ஹெக்ஸாமெரிக் வளையத்தை உருவாக்குகிறது. டிஎன்ஏவிலிருந்து விலகி, மெக்ம்2-7 புரதங்கள் ஒற்றை ஹெட்டோரோஹெக்ஸாமரை உருவாக்குகின்றன, மேலும் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனின் தோற்றத்தில் செயலற்ற வடிவத்தில் இரட்டை இழைகள் கொண்ட டிஎன்ஏவைச் சுற்றி தலை முதல் தலை இரட்டை ஹெக்ஸாமர்களாக ஏற்றப்படுகின்றன. எம்சிஎம் புரதங்கள் ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்திற்கு ஆட்சேர்ப்பு செய்யப்படுகின்றன, பின்னர் எஸ் கட்டத்தில் மரபணு டிஎன்ஏ முழுவதும் மறுவிநியோகம் செய்யப்படுகின்றன, இது ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் அவற்றின் உள்ளூர்மயமாக்கலைக் குறிக்கிறது. எம். சி. எம் புரதங்களை ஏற்றுவது செல் சுழற்சியின் ஜி 1 இன் போது மட்டுமே நிகழலாம், மேலும் ஏற்றப்பட்ட வளாகம் எஸ் கட்டத்தில் சி. டி. சி 45 புரதம் மற்றும் ஜி. ஐ. என். எஸ் வளாகத்தை ஆட்சேர்ப்பு செய்வதன் மூலம் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்ஸில் செயலில் உள்ள சி. டி. சி 45-எம். சி. எம்-ஜி. ஐ. என். எஸ் (சி. எம். ஜி) ஹெலிகேஸை உருவாக்குகிறது. டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்புக்கு எஸ் கட்டம் முழுவதும் எம்சிஎம் செயல்பாடு தேவைப்படுகிறது. சிஎம்ஜி ஹெலிகேஸைச் சுற்றி பல்வேறு ஒழுங்குமுறை காரணிகள் ஒன்றிணைந்து 'ரெப்லிஸோம் புரோகிரஷன் காம்ப்ளக்ஸ்' ஐ உருவாக்குகின்றன, இது டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களுடன் இணைந்து யூகாரியோடிக் ரெப்லிசோமை உருவாக்குகிறது, இதன் அமைப்பு அதன் பாக்டீரியா எதிர்ப்பாளருடன் ஒப்பிடுகையில் இன்னும் மிகவும் மோசமாக வரையறுக்கப்பட்டுள்ளது. தனிமைப்படுத்தப்பட்ட சிஎம்ஜி ஹெலிகேஸ் மற்றும் ரெப்லிஸோம் புரோகிரஷன் காம்ப்ளக்ஸ் ஒரு ஒற்றை எம்சிஎம் புரத வளைய வளாகத்தைக் கொண்டுள்ளன, இது எம்சிஎம் புரதங்களின் ஏற்றப்பட்ட இரட்டை ஹெக்ஸாமரை துவக்க செயல்முறையின் ஒரு பகுதியாக இரண்டு ஒற்றை ஹெக்ஸாமெரிக் வளையங்களாகப் பிரிக்கலாம், ஒவ்வொரு எம்சிஎம் புரத சிக்கலான வளையமும் சிஎம்ஜி ஹெலிகேஸின் மையத்தை உருவாக்குகிறது. டிஎன்ஏ ஓய்வெடுக்க முழு சிஎம்ஜி காம்ப்ளக்ஸ் தேவைப்படுகிறது, மேலும் சி. டி. சி 45-எம்சிஎம்-ஜிஐஎன்எஸ் காம்ப்ளக்ஸ் யூகாரியோடிக் செல்களில் செயல்பாட்டு டிஎன்ஏ ஹெலிகேஸ் ஆகும். சி. டி. எஃப் 4 மற்றும் அண்ட் 1 புரதங்கள் சி. எம். ஜி காம்ப்ளக்ஸ் சி. டி. எஃப் 4 மற்றும் அண்ட் 1 புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்வதன் மூலம் ரெப்லிசோமுடன் தொடர்பு கொள்கிறது. சி. டி. எஃப் 4/மற்றும் 1 புரதங்கள் சிஎம்ஜி காம்ப்ளக்ஸ் மற்றும் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α ஆகிய இரண்டுடனும் தொடர்பு கொள்கின்றன. சி. டி. எஃப் 4 என்பது ஒரு பாலிமரேஸ் α துணை காரணி, இது பாலிமரேஸ் α ஐ ரெப்ளிகேஷன் தோற்றத்திற்கு ஆட்சேர்ப்பு செய்வதற்கு தேவைப்படுகிறது. எம்ஆர்சி1 மற்றும் கிளாஸ்பின் புரதங்கள் எம்ஆர்சி1/கிளாஸ்பின் புரதங்கள் சிஎம்ஜி சிக்கலான ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டுடன் முன்னணி-ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பை இணைக்கின்றன. எம்ஆர்சி1 பாலிமரேஸ் ε மற்றும் எம்சிஎம் புரதங்களுடன் தொடர்பு கொள்கிறது. ஹெலிகேஸ் மற்றும் முன்னணி-ஸ்ட்ராண்ட் பாலிமரேஸ் இடையேயான இந்த நேரடி இணைப்பின் முக்கியத்துவம் வளர்க்கப்பட்ட மனித உயிரணுக்களின் முடிவுகளால் அடிக்கோடிட்டுக் காட்டப்படுகிறது, அங்கு திறமையான ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் முன்னேற்றத்திற்கு எம்ஆர்சி 1/கிளாஸ்பின் தேவைப்படுகிறது. திறமையான டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுக்கு ஹெலிகேஸ்கள் மற்றும் முன்னணி-ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்பின் இணைப்பும் தேவை என்று இந்த முடிவுகள் தெரிவிக்கின்றன. செல் நியூக்ளியர் ஆன்டிஜென் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களை விரிவுபடுத்துவதற்கு டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பை ஆதரிக்க கூடுதல் காரணிகள் தேவைப்படுகின்றன. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் ஒரு அரை மூடிய 'கை' கட்டமைப்பைக் கொண்டுள்ளன, இது பாலிமரேஸை டிஎன்ஏவில் ஏற்ற அனுமதிக்கிறது மற்றும் இடமாற்றம் செய்யத் தொடங்குகிறது. இந்த அமைப்பு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸை ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ வார்ப்புருவைப் பிடிக்கவும், செயலில் உள்ள இடத்தில் டிஎன்டிபிகளை இணைக்கவும், புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட இரட்டை இழையுள்ள டிஎன்ஏவை வெளியிடவும் அனுமதிக்கிறது. இருப்பினும், டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களின் அமைப்பு டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏவுடன் தொடர்ச்சியான நிலையான தொடர்புகளை அனுமதிக்காது. பாலிமரேஸ் மற்றும் டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ இடையேயான தொடர்புகளை வலுப்படுத்த, டிஎன்ஏ ஸ்லைடிங் கிளாம்ப்கள் பாலிமரேஸுடன் இணைந்து ரெப்ளிகேட்டிவ் பாலிமரேஸின் செயல்முறையை ஊக்குவிக்கின்றன. யூகாரியோட்டுகளில், ஸ்லைடிங் கிளாம்ப் என்பது பெருகிவரும் செல் நியூக்ளியர் ஆன்டிஜென் (பிசிஎன்ஏ) என்று அழைக்கப்படும் ஒரு ஹோமோட்ரிமர் வளைய அமைப்பு ஆகும். பிசிஎன்ஏ வளையம் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களுடன் தொடர்பு கொள்ளும் மேற்பரப்புகளுடன் துருவமுனைப்பைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் அவற்றை டிஎன்ஏ வார்ப்புருவுடன் பாதுகாப்பாக இணைக்கிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களின் பிசிஎன்ஏ-சார்ந்த உறுதிப்படுத்தல் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பில் குறிப்பிடத்தக்க விளைவை ஏற்படுத்துகிறது, ஏனெனில் பிசிஎன்ஏக்கள் பாலிமரேஸ் செயல்முறையை 1,000 மடங்கு வரை மேம்படுத்த முடியும். பிசிஎன்ஏ ஒரு அத்தியாவசிய கோஃபாக்டர் மற்றும் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் பல செயல்முறைகளுக்கு இடமளிக்க ரெப்லிசோமில் மிகவும் பொதுவான தொடர்பு தளங்களில் ஒன்றாகும், எனவே பிசிஎன்ஏ டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்களுக்கான ஒழுங்குமுறை கோஃபாக்டராகவும் பார்க்கப்படுகிறது. ரெப்ளிகேஷன் காரணி சி பிசிஎன்ஏ டிஎன்ஏ டெம்ப்ளேட் இழையை முழுமையாகச் சுற்றி வருகிறது, மேலும் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் டிஎன்ஏவில் ஏற்றப்பட வேண்டும். முன்னணி ஸ்ட்ராண்டில், பிசிஎன்ஏவை ஏற்றுவது ஒரு அரிதான செயல்முறையாகும், ஏனெனில் முன்னணி ஸ்ட்ராண்டில் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் நிறுத்தப்படும் வரை தொடர்கிறது. இருப்பினும், பின்தங்கிய இழையில், டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் δ ஒவ்வொரு ஒகசாகி துண்டின் தொடக்கத்திலும் தொடர்ந்து ஏற்றப்பட வேண்டும். ஒகாசாகி துண்டு தொகுப்பின் இந்த நிலையான துவக்கத்திற்கு திறமையான டிஎன்ஏ பிரதிக்கு மீண்டும் மீண்டும் பிசிஎன்ஏ ஏற்றுதல் தேவைப்படுகிறது. பிசிஎன்ஏ ஏற்றுதல் ரெப்ளிகேஷன் காரணி சி (ஆர்எஃப்சி) காம்ப்ளக்ஸ் மூலம் செய்யப்படுகிறது. ஆர்எஃப்சி வளாகம் ஐந்து ஏடிபிஏஸ்களைக் கொண்டுள்ளதுஃ ஆர்எஃப்சி1, ஆர்எஃப்சி2, ஆர்எஃப்சி3, ஆர்எஃப்சி4 மற்றும் ஆர்எஃப்சி5. ஆர்எஃப்சி ப்ரைமர்-டெம்ப்ளேட் சந்திப்புகளை அங்கீகரிக்கிறது மற்றும் இந்த தளங்களில் பிசிஎன்ஏவை ஏற்றுகிறது. பிசிஎன்ஏ ஹோமோட்ரிமர் ஏடிபி நீராற்பகுப்பு மூலம் ஆர்எஃப்சியால் திறக்கப்பட்டு பின்னர் பாலிமரேஸுடன் அதன் தொடர்பை எளிதாக்க சரியான நோக்குநிலையில் டிஎன்ஏவில் ஏற்றப்படுகிறது. கிளாம்ப் ஏற்றிகள் டிஎன்ஏவிலிருந்து பிசிஎன்ஏவை இறக்கலாம்; பிரதி நிறுத்தப்பட வேண்டிய போது ஒரு வழிமுறை தேவைப்படுகிறது. ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கில் நிறுத்தப்பட்ட ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் டியோக்ஸினியூக்ளியோடைட் ட்ரைபாஸ்பேட்டுகளின் (டிஎன்டிபி) பற்றாக்குறையால் அல்லது டிஎன்ஏ சேதத்தால் நிறுத்தப்படலாம், இதன் விளைவாக ரெப்ளிகேஷன் அழுத்தம் ஏற்படுகிறது. இந்த ரெப்ளிகேஷன் நிறுத்தம் ஒரு நிறுத்தப்பட்ட ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் என்று விவரிக்கப்படுகிறது. டிஎன்ஏ சேதம் அல்லது பிற ரெப்ளிகேஷன் சிக்கல்களை சரிசெய்யும் வரை புரதங்களின் ஒரு முட்கரண்டி பாதுகாப்பு வளாகம் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கை உறுதிப்படுத்துகிறது. நீண்டகால ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் நிறுத்தம் மேலும் டிஎன்ஏ சேதத்திற்கு வழிவகுக்கும். ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கை ஏற்படுத்தும் சிக்கல்கள் தீர்க்கப்பட்டால் நிறுத்தப்படும் சமிக்ஞைகள் செயலிழக்கச் செய்யப்படும். யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனை நிறுத்துவதற்கு குரோமோசோம்கள் வட்டமானதா அல்லது நேரியல் என்பதைப் பொறுத்து வெவ்வேறு செயல்முறைகள் தேவைப்படுகின்றன. நேரியல் மூலக்கூறுகளைப் போலல்லாமல், வட்ட குரோமோசோம்கள் முழு மூலக்கூறையும் பிரதிபலிக்க முடியும். இருப்பினும், இரண்டு டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளும் ஒன்றாக இணைக்கப்பட்டிருக்கும். இந்த சிக்கல் ஒரு வகை II டோபோஐசோமரேஸ் மூலம் இரண்டு டிஎன்ஏ மூலக்கூறுகளை சிதைப்பதன் மூலம் கையாளப்படுகிறது. வகை II டோபோஐசோமரேஸ்கள் நேரியல் இழைகளை பிரிக்கவும் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, ஏனெனில் அவை உயிரணுக்குள் ஒரு நியூக்ளியோசோமில் சிக்கலான முறையில் மடிக்கப்படுகின்றன. முன்பு குறிப்பிட்டபடி, நேரியல் குரோமோசோம்கள் வட்ட டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பில் காணப்படாத மற்றொரு சிக்கலை எதிர்கொள்கின்றன. டிஎன்ஏ தொகுப்பைத் தொடங்குவதற்கு ஒரு ஆர்என்ஏ ப்ரைமர் தேவைப்படுவதால், பின்தங்கிய இழைகள் முழு குரோமோசோமையும் பிரதிபலிப்பதில் ஒரு பாதகமான நிலையில் உள்ளன. முன்னணி ஸ்ட்ராண்ட் டிஎன்ஏ ஸ்ட்ராண்டின் 5 'முனையத்தை நீட்டிக்க ஒற்றை ஆர்என்ஏ ப்ரைமரைப் பயன்படுத்த முடியும் என்றாலும், பல ஆர்என்ஏ ப்ரைமர்கள் பின்தங்கிய ஸ்ட்ராண்ட் தொகுப்புக்கு காரணமாகி, ஒகாசாகி துண்டுகளை உருவாக்குகின்றன. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் டிஎன்ஏ இழையின் 3 'முனையில் மட்டுமே சேர்க்க முடியும் என்பதால் இது ஒரு சிக்கலுக்கு வழிவகுக்கிறது. டிஎன்ஏ பாலிமரேஸின் 3 '-5' செயல்பாடு ஒகாசாகி துண்டுகள் சரிசெய்யப்படும்போது தாய் இழையின் 3 'முனையில் ஒரு குறுகிய ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ (எஸ்எஸ்டிஎன்ஏ) பகுதியை விட்டுச்செல்கிறது. தாய் குரோமோசோம்களின் எதிர் முனைகளில் எதிர் திசைகளில் பிரதிபலிப்பு ஏற்படுவதால், ஒவ்வொரு இழையும் ஒரு முனையில் பின்தங்கிய இழையாகும். காலப்போக்கில் இது இரு மகள் குரோமோசோம்களின் முற்போக்கான சுருக்கத்திற்கு வழிவகுக்கும். இது இறுதி ரெப்ளிகேஷன் சிக்கல் என்று அழைக்கப்படுகிறது. இறுதிப் பிரதி சிக்கல் யூகாரியோடிக் செல்களில் டெலோமியர் பகுதிகள் மற்றும் டெலோமரேஸ் மூலம் கையாளப்படுகிறது. டெலோமியர்ஸ் பெற்றோரின் குரோமோசோமின் 3 'முனையை மகள் இழையின் 5' முனைக்கு அப்பால் நீட்டிக்கிறது. இந்த ஒற்றை-இழையுள்ள டிஎன்ஏ அமைப்பு டெலோமரேஸை ஆட்சேர்ப்பு செய்யும் பிரதி உருவாக்கத்தின் தோற்றமாக செயல்பட முடியும். டெலோமரேஸ் என்பது ஒரு சிறப்பு டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் ஆகும், இது பல புரத துணை அலகுகள் மற்றும் ஒரு ஆர்என்ஏ கூறுகளைக் கொண்டுள்ளது. டெலோமெரேஸின் ஆர்என்ஏ கூறு டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏவின் ஒற்றை ஸ்ட்ராண்டட் 3 'முனையில் அனீல் செய்கிறது மற்றும் டெலோமெரிக் வரிசையின் 1.5 பிரதிகள் உள்ளன. டெலோமரேஸ் ஒரு புரத துணைக்குழுவைக் கொண்டுள்ளது, இது டெலோமரேஸ் ரிவர்ஸ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் அல்லது TERT எனப்படும் தலைகீழ் டிரான்ஸ்கிரிப்டேஸ் ஆகும். டெலோமரேஸ் ஆர்என்ஏ டெம்ப்ளேட்டின் இறுதி வரை டிஎன்ஏவை டிஇஆர்டி ஒருங்கிணைக்கிறது, பின்னர் பிரிக்கப்படுகிறது. பெற்றோரின் டிஎன்ஏ மூலக்கூறின் 3 'முனையின் நீட்டிப்புடன் இந்த செயல்முறையை தேவைக்கேற்ப பல முறை மீண்டும் செய்யலாம். இந்த 3 'சேர்க்கை இழையின் டிஎன்ஏ தொகுப்பில் பின்தங்கியிருப்பதன் மூலம் மகள் இழையின் 5' முனையை நீட்டிப்பதற்கான ஒரு வார்ப்புருவை வழங்குகிறது. டெலோமரேஸ் செயல்பாட்டின் கட்டுப்பாடு டெலோமியர்-பிணைப்பு புரதங்களால் கையாளப்படுகிறது. ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் தடைகள் புரோக்கரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் இரு திசையில் உள்ளது; ஒரு ரெப்ளிகேட்டிவ் தோற்றத்திற்குள், ரெப்லிகேஷன் தோற்றத்தின் ஒவ்வொரு முனையிலும் ரெப்லிகோம் வளாகங்கள் உருவாக்கப்படுகின்றன மற்றும் ரெப்லிகோம்கள் ஆரம்ப தொடக்க புள்ளியில் இருந்து ஒருவருக்கொருவர் விலகிச் செல்கின்றன. புரோக்கரியோட்டுகளில், இருதரப்பு பிரதிபலிப்பு வட்ட குரோமோசோமில் ஒரு பிரதி தோற்றத்தில் தொடங்குகிறது மற்றும் தோற்றத்தின் ஆரம்ப தொடக்கத்திலிருந்து எதிர்க்கும் இடத்தில் முடிவடைகிறது. இந்த முடிவடையும் பகுதிகளில் டெர் தளங்கள் எனப்படும் டிஎன்ஏ வரிசைகள் உள்ளன. இந்த டெர் தளங்கள் டஸ் புரதத்தால் பிணைக்கப்பட்டுள்ளன. டெர்-டஸ் காம்ப்ளக்ஸ் ஹெலிகேஸ் செயல்பாட்டை நிறுத்த முடியும், இது ரெப்ளிகேஷனை நிறுத்துகிறது. யூகாரியோடிக் உயிரணுக்களில், பொதுவாக இரண்டு செயலில் உள்ள ரெப்ளிகேஷன் தோற்றங்களுக்கு இடையில் இரண்டு ரெப்ளிகேட்டிவ் ஃபோர்க்குகள் மோதுவதன் மூலம் ரெப்ளிகேஷன் நிறுத்தப்படுகிறது. மோதலின் இடம் துப்பாக்கிச் சூட்டின் தொடக்க நேரத்தைப் பொறுத்து மாறுபடும். இந்த வழியில், ஒரு ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் ஒரு குறிப்பிட்ட தளத்தில் நிறுத்தப்பட்டால் அல்லது இடிந்து விழுந்தால், எதிர் திசையில் பயணிக்கும் ஒரு ரெப்லிகோம் பிராந்தியத்தை நகலெடுப்பதை முடிக்கும்போது தளத்தின் ரெப்ளிகேஷன் மீட்கப்படலாம். மரபணு முழுவதும் பல்வேறு இடங்களில் ஆர்எஃப்பி புரதங்களால் பிணைக்கப்பட்ட திட்டமிடப்பட்ட ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க் தடைகள் (ஆர்எஃப்பி) உள்ளன, அவை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகளை நிறுத்தவோ அல்லது இடைநிறுத்தவோ முடியும், இது ரெப்லிகோமின் முன்னேற்றத்தை தடுக்கிறது. ரெப்ளிகேஷன் தொழிற்சாலைகள் செல் நியூக்ளியஸில் உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்ட வழியில் ரெப்ளிகேஷன் நிகழ்கிறது என்பது கண்டறியப்பட்டுள்ளது. தேங்கி நிற்கும் டிஎன்ஏ உடன் நகரும் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகள் பற்றிய பாரம்பரிய பார்வைக்கு மாறாக, ரெப்ளிகேஷன் தொழிற்சாலைகள் என்ற கருத்து உருவானது, அதாவது ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்குகள் சில அசையாத 'தொழிற்சாலை' பகுதிகளை நோக்கி குவிந்துள்ளன, இதன் வழியாக டெம்ப்ளேட் டிஎன்ஏ இழைகள் கன்வேயர் பெல்ட்கள் போல செல்கின்றன. செல் சுழற்சி ஒழுங்குமுறை டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் என்பது செல் சுழற்சியின் சூழலில் கட்டுப்படுத்தப்படும் ஒரு இறுக்கமான ஒழுங்கமைக்கப்பட்ட செயல்முறையாகும். செல் சுழற்சியின் மூலம் முன்னேற்றம் மற்றும் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பு ஆகியவை முன்-பிரதி சிக்கல்களை (முன்-ஆர். சி. க்கள்) உருவாக்கி செயல்படுத்துவதன் மூலம் இறுக்கமாக கட்டுப்படுத்தப்படுகின்றன, இது சைக்ளின்-சார்ந்த கைனேஸ்களை (சி. டி. கே. க்கள், சி. டி. கே. க்கள்) செயல்படுத்துவதன் மூலமும் செயலிழக்கச் செய்வதன் மூலமும் அடையப்படுகிறது. குறிப்பாக இது சைக்ளின்கள் மற்றும் சைக்ளின் சார்ந்த கைனேஸ்களின் தொடர்புகளாகும், அவை ஜி 1 இலிருந்து எஸ்-கட்டத்திற்கு மாறுவதற்கு காரணமாகின்றன. செல் சுழற்சியின் ஜி 1 கட்டத்தில் குறைந்த அளவிலான சி. டி. கே செயல்பாடு உள்ளது. இந்த குறைந்த அளவிலான சிடிகே செயல்பாடு புதிய ஆர்சி-க்கு முந்தைய வளாகங்களை உருவாக்க அனுமதிக்கிறது, ஆனால் புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட ஆர்சி-களால் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடங்க இது போதுமானதாக இல்லை. செல் சுழற்சியின் மீதமுள்ள கட்டங்களில் சி. டி. கே செயல்பாட்டின் உயர்ந்த நிலைகள் உள்ளன. இந்த உயர் மட்ட சி. டி. கே செயல்பாடு டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதற்கும், புதிய ஆர்சி-க்கு முந்தைய சிக்கலான உருவாக்கத்தைத் தடுப்பதற்கும் காரணமாகும். டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் தொடங்கப்பட்டவுடன் ஆர். சி. க்கு முந்தைய வளாகம் உடைக்கப்படுகிறது. செல் சுழற்சியின் எஸ் கட்டம், ஜி 2 மற்றும் எம் கட்டங்களில் சி. டி. கே அளவுகள் அதிகமாக இருப்பதால், புதிய முன்-ஆர். சி வளாகங்களை உருவாக்க முடியாது. இவை அனைத்தும் செல் பிரிவு முடியும் வரை எந்த துவக்கமும் ஏற்படாது என்பதை உறுதிப்படுத்த உதவுகிறது. சைக்ளின் சார்ந்த கைனேஸ்களுக்கு கூடுதலாக, சி. டி. டி 1 இன் குறைப்பு மூலம் ஒரு புதிய சுற்று பிரதி தடுக்கப்படும் என்று கருதப்படுகிறது. இது சி. டி. டி 1 இன் சீரழிவு மூலமாகவும், ஜெமினின் எனப்படும் புரதத்தின் தடுப்பு நடவடிக்கைகள் மூலமாகவும் அடையப்படுகிறது. ஜெமினின் சி. டி. டி 1 உடன் இறுக்கமாக பிணைக்கப்பட்டுள்ளது மற்றும் மறு-பிரதிபலிப்பின் முக்கிய தடுப்பானாக கருதப்படுகிறது. ஜெமினின் முதலில் எஸ்-கட்டத்தில் தோன்றுகிறது மற்றும் மெட்டாபேஸ்-அனாபேஸ் மாற்றத்தில் சீரழிக்கப்படுகிறது, அனாபேஸ் ஊக்குவிக்கும் சிக்கலான (ஏபிசி) மூலம் எங்கும் பரவுவதன் மூலம் இருக்கலாம். செல் சுழற்சி முழுவதும் பல்வேறு செல் சுழற்சி சோதனைச் சாவடிகள் உள்ளன, அவை ஒரு செல் முழுமையாகப் பிரிப்பதன் மூலம் முன்னேறுமா என்பதைத் தீர்மானிக்கின்றன. முக்கியமாக பிரதிபலிப்பில் ஜி 1, அல்லது கட்டுப்பாடு, சோதனைச் சாவடி பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதா இல்லையா அல்லது செல் ஜி 0 எனப்படும் ஓய்வு கட்டத்தில் வைக்கப்படுமா என்பதை தீர்மானிக்கிறது. மினி குரோமோசோம் பராமரிப்பு புரதங்கள் வெளிப்படுத்தப்படாததால், செல் சுழற்சியின் G0 கட்டத்தில் உள்ள செல்கள் ஒரு சுற்று பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதைத் தடுக்கின்றன. எஸ்-கட்டத்திற்குள் மாற்றம் என்பது பிரதிபலிப்பு தொடங்கியிருப்பதைக் குறிக்கிறது. ரெப்ளிகேஷன் செக்பாயிண்ட் புரதங்கள் உயிரணு பிரிவின் போது மரபணு தகவல்களைப் பாதுகாக்க, டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் அதிக நம்பகத்தன்மையுடன் முடிக்கப்பட வேண்டும். இந்த பணியை அடைவதற்காக, யூகாரியோடிக் செல்கள் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பின் போது ஏதேனும் பிழைகளைக் கண்டறியக்கூடிய மற்றும் மரபணு ஒருமைப்பாட்டைப் பாதுகாக்கக்கூடிய பிரதி செயல்முறையின் சில புள்ளிகளின் போது புரதங்களைக் கொண்டுள்ளன. இந்த சோதனைச் சாவடி புரதங்கள் டிஎன்ஏ பழுதுபார்ப்புக்கான நேரத்தை அனுமதிக்கும் பொருட்டு உயிரணு சுழற்சியை மைட்டோசிஸுக்குள் நுழைவதைத் தடுக்க முடியும். சோதனைச் சாவடி புரதங்கள் சில டிஎன்ஏ பழுதுபார்க்கும் பாதைகளிலும் ஈடுபட்டுள்ளன, அதே நேரத்தில் அவை மேலும் சேதத்தைத் தடுக்க ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் கட்டமைப்பை உறுதிப்படுத்துகின்றன. பிறழ்வுகள் அல்லது பிற குரோமோசோமால் பிறழ்வுகளை சந்ததியினருக்கு அனுப்புவதைத் தவிர்க்க இந்த சோதனைச் சாவடி புரதங்கள் அவசியம். யூகாரியோடிக் சோதனைச் சாவடி புரதங்கள் நன்கு பாதுகாக்கப்பட்டுள்ளன மற்றும் இரண்டு பாஸ்பாடிடைலினோசிட்டால் 3-கினேஸ் தொடர்பான கைனேஸ்கள் (பி. ஐ. கே. கே), ஏடிஆர் மற்றும் ஏடிஎம் ஆகியவற்றை உள்ளடக்கியது. ஏடிஆர் மற்றும் ஏடிஎம் இரண்டும் ஒரு இலக்கு பாஸ்போரிலேஷன் வரிசையைப் பகிர்ந்து கொள்கின்றன, SQ/TQ மையக்கருத்து, ஆனால் உயிரணுக்களில் அவற்றின் தனிப்பட்ட பாத்திரங்கள் வேறுபடுகின்றன. டிஎன்ஏ இரட்டை இழைகள் உடைவதற்கு பதிலளிக்கும் வகையில் செல் சுழற்சியை தடுப்பதில் ஏடிஆர் ஈடுபட்டுள்ளது. ஏடிஆர் ஒரு கட்டாய சோதனைச் சாவடி கூட்டாளியான ஏடிஆர்-இன்டராக்ட்டிங்-புரோட்டீன் (ஏடிஆர்ஐபி) ஐக் கொண்டுள்ளது, மேலும் இந்த இரண்டு புரதங்களும் ரெப்ளிகேஷன் புரதம் ஏ (ஆர்பிஏ) மூலம் பூசப்பட்ட ஒற்றை-இழையுள்ள டிஎன்ஏவின் நீட்சிகளுக்கு பதிலளிக்கின்றன. ஒற்றை-இழையுள்ள டிஎன்ஏ உருவாக்கம் அடிக்கடி நிகழ்கிறது, பெரும்பாலும் பிரதி அழுத்தத்தின் போது நிகழ்கிறது. ஏ. டி. ஆர்-ஏ. டி. ஆர். ஐ. பி மரபணு ஒருமைப்பாட்டைப் பாதுகாக்க செல் சுழற்சியைக் கட்டுப்படுத்த முடியும். ஆர். பி. ஏ மற்றும் கிளாஸ்பின் போன்ற எஸ் கட்டத்தில் குரோமாடினில் ஏடிஆர் காணப்படுகிறது. ரெப்ளிகேஷன் சேதத்தின் கீழ்நோக்கிய சோதனைச் சாவடி பாதைகளைத் தொடங்குவதில் ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ பாதைகளின் உருவாக்கம் முக்கியமானது. ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ போதுமான நீளமாக மாறியவுடன், ஆர்பிஏ உடன் பூசப்பட்ட ஒற்றை இழையுள்ள டிஎன்ஏ ஏடிஆர்-ஏடிஆர்ஐபி ஐ நியமிக்க முடியும். முழுமையாக சுறுசுறுப்பாக இருக்க, ஏடிஆர் கைனேஸ் சென்சார் புரதங்களை நம்பியுள்ளது, அவை சோதனைச் சாவடி புரதங்கள் டிஎன்ஏ பிரதி அழுத்தத்தின் செல்லுபடியாகும் தளத்திற்கு உள்ளூர்மயமாக்கப்பட்டுள்ளதா என்பதைப் புரிந்துகொள்கின்றன. ஆர்ஏடி9-எச்யூஎஸ்1-ராட்1 (9-1-1) ஹெட்டோரோட்ரிமெரிக் கிளாம்ப் மற்றும் அதன் கிளாம்ப் லோடர் ஆர்எஃப்சிஆர்ஏடி17 ஆகியவை கேப் செய்யப்பட்ட அல்லது நிக் செய்யப்பட்ட டிஎன்ஏவை அடையாளம் காண முடியும். RFCRad17 கிளாம்ப் ஏற்றுபவர் 9-1-1 ஐ சேதமடைந்த டிஎன்ஏ மீது ஏற்றுகிறது. டிஎன்ஏவில் 9-1-1 இருப்பது ஏடிஆர்-ஏடிஆர்ஐபி மற்றும் டிஓபிபி1 மற்றும் எம்ஆர்சி1/கிளாஸ்பின் போன்ற சோதனைச் சாவடி மத்தியஸ்தர்கள் என்று அழைக்கப்படும் புரதங்களின் குழுவுக்கு இடையிலான தொடர்புக்கு உதவுகிறது. டிஓபிபி1 9-1-1 இன் பாஸ்போரிலேட்டட் ராட்9 கூறுகளுடன் தொடர்பு கொண்டு ஆட்சேர்ப்பு செய்கிறது மற்றும் ஏடிஆர்-ஏடிஆர்ஐபி ஐ பிணைக்கிறது, இது சோக்1 ஐ பாஸ்போரிலேட் செய்கிறது. ஏ. டி. ஆர்-ஏ. டி. ஆர். ஐ. பி இன் முழுமையான செயல்பாட்டிற்கு எம். ஆர். சி 1/கிளாஸ்பின் தேவைப்படுகிறது, இது முக்கிய கீழ்நிலை சோதனைச் சாவடி விளைவு கைனேஸ் சி. எச். கே 1 ஐ பாஸ்பரிலேட் செய்கிறது. கிளாஸ்பின் என்பது ரெப்லிசோமின் ஒரு அங்கமாகும், மேலும் இது Chk1 உடன் இணைப்பதற்கான ஒரு களத்தைக் கொண்டுள்ளது, இது டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனின் போது கிளாஸ்பின் ஒரு குறிப்பிட்ட செயல்பாட்டை வெளிப்படுத்துகிறதுஃ ரெப்லிசோமில் சோதனைச் சாவடி சமிக்ஞையை ஊக்குவித்தல். உயிரணு சுழற்சியை கட்டுப்படுத்துவதற்கும், முழுமையற்ற டிஎன்ஏ பிரதி அல்லது டிஎன்ஏ சேதத்துடன் உயிரணுக்கள் மைட்டோசிஸுக்குள் நுழைவதைத் தடுப்பதற்கும் Chk1 சமிக்ஞை முக்கியமானது. ஏ. டி. ஆர்-சி. எச். கே 1 சோதனைச் சாவடி செயல்பாட்டிற்கும், செல் சுழற்சியைக் கட்டுப்படுத்துவதற்கும், டிஎன்ஏ பழுதுபார்க்கும் வழிமுறைகளை முடிக்க போதுமான நேரத்தை அனுமதிப்பதற்கும் சி. எச். கே 1 சார்ந்த சி. டி. கே தடுப்பு முக்கியமானது, இது சேதமடைந்த டிஎன்ஏவின் பரம்பரைத் தடுப்பைத் தடுக்கிறது. கூடுதலாக, எஸ் கட்டத்தின் போது தோற்றம் துப்பாக்கிச் சூட்டைத் தடுப்பதில் Chk1-சார்ந்த Cdk தடுப்பு முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது. இந்த வழிமுறை தொடர்ச்சியான டிஎன்ஏ தொகுப்பைத் தடுக்கிறது மற்றும் ரெப்ளிகேஷன் ஸ்ட்ரெஸ் மற்றும் சாத்தியமான ஜீனோடாக்ஸிக் நிலைமைகளின் முன்னிலையில் மரபணுவின் பாதுகாப்புக்கு இது தேவைப்படுகிறது. இவ்வாறு, ஏ. டி. ஆர்-சி. எச். கே 1 செயல்பாடு, உயிரணு-சுழற்சி தடுப்பை பராமரிக்கும் சமிக்ஞை அடுக்கு அணைக்கப்படும் வரை, மரபணு முழுவதும் பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குவதைத் தடுப்பதன் மூலம் ஒற்றை பிரதி தோற்றத்தின் மட்டத்தில் சாத்தியமான பிரதி சிக்கல்களைத் தடுக்கிறது. நியூக்ளியோசோம்கள் மூலம் பிரதிபலிப்பு யூகாரியோடிக் டி. என். ஏ கருவின் வரையறுக்கப்பட்ட இடத்திற்குள் பொருந்துவதற்காக இறுக்கமாக சுருக்கப்பட வேண்டும். குரோமோசோம்கள் ஹிஸ்டோன் புரதங்களின் ஆக்டேமரைச் சுற்றி 147 நியூக்ளியோடைடுகளை மடித்து ஒரு நியூக்ளியோசோமை உருவாக்குவதன் மூலம் தொகுக்கப்படுகின்றன. நியூக்ளியோசோம் ஆக்டேமரில் ஒவ்வொரு ஹிஸ்டோன் H2A, H2B, H3 மற்றும் H4 ஆகியவற்றின் இரண்டு பிரதிகள் உள்ளன. டிஎன்ஏவுடன் ஹிஸ்டோன் புரதங்களின் இறுக்கமான தொடர்பு காரணமாக, யூகாரியோடிக் செல்கள் புரதங்களைக் கொண்டுள்ளன, அவை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கிற்கு முன்னால் ஹிஸ்டோன்களை மறுவடிவமைக்க வடிவமைக்கப்பட்டுள்ளன, இது ரெப்லிசோமின் மென்மையான முன்னேற்றத்தை அனுமதிக்கிறது. நியூக்ளியோசோம் இணக்கத்தை மீண்டும் நிறுவுவதற்காக ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் பின்னால் ஹிஸ்டோன்களை மீண்டும் இணைப்பதில் புரதங்களும் உள்ளன. பல ஹிஸ்டோன் சேப்பரோன்கள் உள்ளன, அவை ரெப்ளிகேஷனுக்குப் பிறகு நியூக்ளியோசோம் அசெம்பிளியில் ஈடுபடுவதாக அறியப்படுகிறது. எஃப்ஏசிடி காம்ப்ளக்ஸ் டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ் α-ப்ரைமேஸ் காம்ப்ளக்ஸுடன் தொடர்பு கொள்வது கண்டறியப்பட்டுள்ளது, மேலும் எஃப்ஏசிடி காம்ப்ளக்ஸின் துணை அலகுகள் மரபணு ரீதியாக ரெப்ளிகேஷன் காரணிகளுடன் தொடர்பு கொள்கின்றன. எஃப்ஏசிடி காம்ப்ளக்ஸ் என்பது ஏடிபியை ஹைட்ரோலைஸ் செய்யாத ஒரு ஹெட்டோரோடைமர் ஆகும், ஆனால் நியூக்ளியோசோம்களில் உள்ள ஹிஸ்டோன்களை "தளர்த்த" முடியும், ஆனால் டிஎன்ஏ அகற்றலுக்கான ஹிஸ்டோன்களின் இறுக்கமான தொடர்பை எஃப்ஏசிடி காம்ப்ளக்ஸ் எவ்வாறு விடுவிக்க முடியும் என்பது பதிலளிக்கப்படவில்லை. ரெப்லிசோமுடன் தொடர்புடைய மற்றொரு ஹிஸ்டோன் சேப்பரோன் அஸ்ஃப் 1 ஆகும், இது ஹிஸ்டோன் டைமர்கள் எச் 3-எச் 4 ஐப் பொறுத்து மெக்ம் காம்ப்ளக்ஸுடன் தொடர்பு கொள்கிறது. ASF1 புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட H3-H4 டைமரை ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கின் பின்னணியில் உள்ள படிவு காரணிகளுக்கு அனுப்ப முடியும், மேலும் இந்த செயல்பாடு H3-H4 ஹிஸ்டோன் டைமர்களை ரெப்ளிகேஷனுக்குப் பிறகு ஹிஸ்டோன் படிவு இடத்தில் கிடைக்கச் செய்கிறது. ஏ. எஸ். எஃப்1 (மற்றும் அதன் பங்குதாரர் ஆர். டி. டி109) எஸ்-கட்டத்தின் போது நகலெடுக்கப்பட்ட மரபணுக்களிலிருந்து மரபணு வெளிப்பாட்டைத் தடுப்பதில் ஈடுபட்டுள்ளனர். ஹெட்டோரோட்ரிமெரிக் சேப்பரோன் குரோமாடின் அசெம்பிளி காரணி 1 (சிஏஎஃப்-1) என்பது ஒரு குரோமாடின் உருவாக்கும் புரதமாகும், இது புதிதாகப் பிரதிபலிக்கப்பட்ட டிஎன்ஏ இழைகள் இரண்டிலும் ஹிஸ்டோன்களை டெபாசிட் செய்து குரோமாடினை உருவாக்குகிறது. சிஏஎஃப்-1 ஒரு பிசிஎன்ஏ-பிணைப்பு மையக்கருத்தைக் கொண்டுள்ளது, இது பிஐபி-பாக்ஸ் என்று அழைக்கப்படுகிறது, இது சிஏஎஃப்-1 ஐ பிசிஎன்ஏ மூலம் ரெப்லிசோமுடன் இணைக்க அனுமதிக்கிறது மற்றும் ஹிஸ்டோன் எச் 3-எச் 4 டைமர்களை புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட டிஎன்ஏவில் டெபாசிட் செய்ய முடியும். Rtt106 சேப்பரோனும் இந்த செயல்பாட்டில் ஈடுபட்டுள்ளது, மேலும் குரோமாட்டின் உருவாக்கத்தின் போது CAF-1 மற்றும் H3-H4 டைமர்களுடன் தொடர்புடையது. இந்த செயல்முறைகள் புதிதாக ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட ஹிஸ்டோன்களை டி. என். ஏவில் ஏற்றுகின்றன. H3-H4 ஹிஸ்டோன்கள் படிந்த பிறகு, நியூக்ளியோசோம்கள் ஹிஸ்டோன் H2A-H2B இன் சங்கத்தால் உருவாகின்றன. இந்த செயல்முறை FACT காம்ப்ளக்ஸ் மூலம் நிகழ்கிறது என்று கருதப்படுகிறது, ஏனெனில் இது ஏற்கனவே ரெப்லிசோமுடன் தொடர்புடையது மற்றும் இலவச H2A-H2B ஐ பிணைக்க முடியும், அல்லது மற்றொரு H2A-H2B சேப்பரோன், நாப் 1 சாத்தியம் உள்ளது. எலக்ட்ரான் நுண்ணோக்கி ஆய்வுகள் இது மிக விரைவாக நிகழ்கிறது என்பதைக் காட்டுகின்றன, ஏனெனில் நியூக்ளியோசோம்கள் ரெப்ளிகேஷன் ஃபோர்க்கிற்குப் பிறகு சில நூறு அடிப்படை ஜோடிகளை உருவாக்குவதைக் காணலாம். எனவே, புதிய நியூக்ளியோசோம்களை உருவாக்கும் முழு செயல்முறையும் ஹிஸ்டோன் சேப்பரோன்களை ரெப்லிசோமுடன் இணைப்பதன் காரணமாக ரெப்ளிகேஷனுக்குப் பிறகு நடைபெறுகிறது. புரோக்கரியோடிக் மற்றும் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுடன் ஒப்பிடும்போது, யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனை நிறைவு செய்வது மிகவும் சிக்கலானது மற்றும் பல வகையான ரெப்ளிகேஷன் மற்றும் ரெப்ளிகேட்டிவ் புரதங்களின் தோற்றத்தை நிறைவேற்றுவதை உள்ளடக்கியது. புரோக்கரியோடிக் டிஎன்ஏ ஒரு வட்ட வடிவத்தில் அமைக்கப்பட்டுள்ளது, மேலும் பிரதிபலிப்பு தொடங்கும் போது ஒரே ஒரு பிரதி தோற்றத்தைக் கொண்டுள்ளது. இதற்கு மாறாக, யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ நேரியல் ஆகும். பிரதிபலிக்கும்போது, பிரதிபலிப்பின் ஆயிரம் தோற்றங்கள் உள்ளன. யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ இருதரப்பு ஆகும். இங்கே இருதரப்பு என்ற வார்த்தையின் பொருள் வேறுபட்டது. யூகாரியோடிக் லீனியர் டிஎன்ஏ பல தோற்றங்களைக் கொண்டுள்ளது (ஓ என்று அழைக்கப்படுகிறது) மற்றும் டெர்மினி (டி என்று அழைக்கப்படுகிறது). "டி" என்பது "ஓ" இன் வலதுபுறத்தில் உள்ளது. ஒரு "ஓ" மற்றும் ஒரு "டி" ஒன்றாக ஒரு பிரதி உருவாக்குகிறது. துவக்கத்திற்கு முந்தைய காம்ப்ளக்ஸ் உருவான பிறகு, ஒரு ரெப்லிகான் நீளமடையத் தொடங்கும் போது, இரண்டாவது ரெப்லிகானில் துவக்கம் தொடங்குகிறது. இப்போது, முதல் ரெப்லிகான் கடிகார திசையில் நகர்ந்தால், இரண்டாவது ரெப்லிகான் முதல் ரெப்லிகானின் "டி" அடையும் வரை எதிரெதிர் திசையில் நகர்கிறது. "டி" இல், இரண்டு ரெப்ளிகான்களும் ஒன்றிணைந்து ரெப்ளிகேஷன் செயல்முறையை நிறைவு செய்கின்றன. இதற்கிடையில், இரண்டாவது ரெப்லிகான் முன்னோக்கி திசையிலும் நகர்கிறது, மூன்றாவது ரெப்லிகானை சந்திக்க. இரண்டு பிரதிகளின் இந்த கடிகார திசையிலும் எதிர் கடிகார திசையிலும் நகர்வது இருதரப்பு பிரதி என்று அழைக்கப்படுகிறது. யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனுக்கு அனைத்து டிஎன்ஏ பாலிமரேஸ்கள் மற்றும் தொடர்புடைய புரதங்களின் துல்லியமான ஒருங்கிணைப்பு தேவைப்படுகிறது, ஒவ்வொரு முறையும் ஒரு செல் பிரியும் போது முழு மரபணுவையும் பிரதிபலிக்க வேண்டும். இந்த செயல்முறை பிரதிபலிப்பின் தோற்றத்தில் புரதக் கூட்டங்களின் தொடர்ச்சியான படிகளின் மூலம் அடையப்படுகிறது, முக்கியமாக டிஎன்ஏவுடன் எம்சிஎம் ஹெலிகேஸின் தொடர்புடன் டிஎன்ஏ பிரதிபலிப்பை ஒழுங்குபடுத்துவதில் கவனம் செலுத்துகிறது. ரெப்ளிகேஷனின் இந்த தோற்றம், ரெப்ளிகேஷனைத் தொடங்குவதற்கு உருவாகும் புரதச் சேர்மங்களின் எண்ணிக்கையை வழிநடத்துகிறது. புரோக்கரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் ஒழுங்குமுறையில் டிஎன்ஏஏ துவக்க புரதத்தை டிஎன்ஏவுடன் பிணைப்பதில் கவனம் செலுத்துகிறது, ஒரு செல் சுழற்சியின் போது பல முறை பிரதிபலிப்பைத் தொடங்குகிறது. புரோக்கரியோடிக் மற்றும் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ இரண்டும் ஏடிபி பிணைப்பு மற்றும் நீராற்பகுப்பைப் பயன்படுத்தி ஹெலிகேஸ் ஏற்றுதலை இயக்குகின்றன, மேலும் இரண்டு நிகழ்வுகளிலும் ஹெலிகேஸ் செயலற்ற வடிவத்தில் ஏற்றப்படுகிறது. இருப்பினும், யூகாரியோடிக் ஹெலிகேஸ்கள் இரட்டை ஹெக்ஸாமர்கள் ஆகும், அவை இரட்டை ஸ்ட்ராண்டட் டிஎன்ஏவில் ஏற்றப்படுகின்றன, அதே நேரத்தில் புரோக்கரியோடிக் ஹெலிகேஸ்கள் ஒற்றை ஹெக்ஸாமர்கள் ஒற்றை ஸ்ட்ராண்டட் டிஎன்ஏவில் ஏற்றப்படுகின்றன. குரோமோசோம்களின் பிரிப்பு என்பது புரோக்கரியோடிக் மற்றும் யூகாரியோடிக் செல்களுக்கு இடையிலான மற்றொரு வேறுபாடாகும். பாக்டீரியா போன்ற விரைவாகப் பிரியும் உயிரணுக்கள், பெரும்பாலும் இன்னும் பிரதிபலிப்பு செயல்பாட்டில் இருக்கும் குரோமோசோம்களைப் பிரிக்கத் தொடங்கும். யூகாரியோடிக் உயிரணுக்களில் அனைத்து குரோமோசோம்களிலும் பிரதிபலிப்பு முடியும் வரை மகள் உயிரணுக்களில் குரோமோசோம் பிரிப்பு தொடங்கப்படுவதில்லை. இருப்பினும், இந்த வேறுபாடுகள் இருந்தபோதிலும், பிரதிபலிப்பின் அடிப்படை செயல்முறை புரோக்கரியோடிக் மற்றும் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ஆகிய இரண்டிற்கும் ஒத்திருக்கிறது. யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் புரதப் பட்டியல் யூகாரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷனில் ஈடுபடும் முக்கிய புரதங்களின் பட்டியல்ஃ மேலும் காண்க டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் புரோக்கரியோடிக் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன் செயல்முறை குறிப்புகள் டிஎன்ஏ ரெப்ளிகேஷன்