Structured Illumination Light Sheet Microscopy
கட்டமைக்கப்பட்ட ஒளிரும் ஒளி தாள் நுண்ணோக்கி (எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம்) என்பது மூன்று பரிமாணங்களிலும் உயர் தற்காலிக மற்றும் இடஞ்சார்ந்த தெளிவுத்திறனுடன் அளவீட்டு இமேஜிங்கை அடைய பயன்படுத்தப்படும் ஒரு ஒளியியல் இமேஜிங் நுட்பமாகும். இது கட்டமைக்கப்பட்ட ஒளிரும் நுண்ணோக்கியின் உயர் அச்சு மற்றும் இடஞ்சார்ந்த தெளிவுத்திறன் பண்புடன் ஒப்பீட்டளவில் தடிமனான மாதிரிகள் முழுவதும் இடஞ்சார்ந்த தெளிவுத்திறனை பராமரிக்கும் ஒளி தாள் நுண்ணோக்கியின் திறனை ஒருங்கிணைக்கிறது. எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் நூற்றுக்கணக்கான மைக்ரோமீட்டர் தடிமனான உயிரியல் மாதிரிகளில் 100 என். எம் க்கும் குறைவான பக்கவாட்டு தெளிவுத்திறனை அடைய முடியும். செல் கலாச்சாரங்கள் போன்ற உயிருள்ள உயிரியல் மாதிரிகளின் ஒளிரும் இமேஜிங்கிற்கு எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் பெரும்பாலும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இது குறிப்பாக நீளமான ஆய்வுகளுக்கு பயனுள்ளதாக இருக்கும், அங்கு மாதிரியை சேதப்படுத்தாமல் நீண்ட காலத்திற்கு உயர் விகித இமேஜிங் செய்யப்பட வேண்டும். 3டி மாதிரிகளின் ஃப்ளோரசன்ட் இமேஜிங்கிற்கு மிகவும் பயன்படுத்தப்படும் இரண்டு முறைகள்-கான்ஃபோகல் மைக்ரோஸ்கோபி மற்றும் வைட்ஃபீல்ட் மைக்ரோஸ்கோபி-இரண்டும் இந்த வகை பயன்பாட்டிற்கு குறிப்பிடத்தக்க குறைபாடுகளைக் கொண்டுள்ளன. பரந்த புல நுண்ணோக்கியில், ஆர்வமுள்ள தளத்திலிருந்து இன்-ஃபோகஸ் ஒளி மற்றும் மீதமுள்ள மாதிரியிலிருந்து அவுட்-ஆஃப்-ஃபோகஸ் ஒளி இரண்டும் ஒன்றாக பெறப்படுகின்றன, இது "காணாமல் போன கூம்பு சிக்கலை" உருவாக்குகிறது, இது உயர் தெளிவுத்திறன் இமேஜிங்கை கடினமாக்குகிறது. கான்ஃபோகல் நுண்ணோக்கி பெரும்பாலும் கவனம் செலுத்தப்படாத ஒளியைத் தடுக்க ஒரு பின்ஹோலைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் இந்த சிக்கலைத் தீர்க்கிறது என்றாலும், இந்த நுட்பம் தவிர்க்க முடியாமல் பயனுள்ள சமிக்ஞையைத் தடுக்கிறது, இது சமிக்ஞை ஏற்கனவே மிகவும் பலவீனமாக இருக்கும்போது ஃப்ளோரசன்ட் இமேஜிங்கில் குறிப்பாக தீங்கு விளைவிக்கும். கூடுதலாக, வைட்ஃபீல்ட் மற்றும் கான்ஃபோகல் நுண்ணோக்கி இரண்டும் இமேஜிங் முழுவதும் மாதிரியின் முழுமையையும் ஒளிரச் செய்கின்றன, இது சில மாதிரிகளில் ஃபோட்டோப்லீச்சிங் மற்றும் ஃபோட்டோடாக்ஸிசிட்டி சிக்கல்களுக்கு வழிவகுக்கிறது. ஒளி-புல நுண்ணோக்கி மட்டுமே இந்த சிக்கல்களில் பெரும்பாலானவற்றை தீர்க்க முடியும் என்றாலும், அதன் அடையப்பட்ட தீர்மானம் இன்னும் ஒளியின் விலகல் மூலம் அடிப்படையில் மட்டுப்படுத்தப்பட்டுள்ளது மற்றும் சூப்பர்-தெளிவுத்திறனை அடைய முடியவில்லை. எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் படம்பிடிக்கப்படும் ஒரு தொகுதியின் ஒற்றை தளத்தை ஒளிரச் செய்ய சீரான ஒளி தாளுக்கு பதிலாக ஒரு வடிவத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் செயல்படுகிறது. இந்த வழியில், இது ஒளி-தாள் நுண்ணோக்கியின் பல நன்மைகளை பராமரிக்கிறது, அதே நேரத்தில் கட்டமைக்கப்பட்ட ஒளிரும் நுண்ணோக்கியின் உயர் தெளிவுத்திறனை அடைகிறது. பின்னணி மற்றும் கோட்பாடு கட்டமைக்கப்பட்ட வெளிச்சம் மற்றும் ஒளி தாள் நுண்ணோக்கியின் தனித்துவமான வளர்ச்சியைக் கருத்தில் கொள்வதன் மூலம் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் இன் பின்னணியில் உள்ள கோட்பாடு நன்கு புரிந்து கொள்ளப்படுகிறது. கட்டமைக்கப்பட்ட ஒளிரும் நுண்ணோக்கி (SIM) என்பது சூப்பர்-தெளிவுத்திறன் கொண்ட நுண்ணோக்கியின் ஒரு முறையாகும், இது ஒரே மாதிரியின் பல படங்களை வெவ்வேறு ஒளி வடிவங்களின் கீழ் பெறுவதன் மூலம் செய்யப்படுகிறது, பின்னர் கணக்கீட்டு ரீதியாக இந்த படங்களை இணைத்து, விவரக்குறிப்பு வரையறுக்கப்பட்ட பக்கவாட்டு தெளிவுத்திறனை விட 2x முன்னேற்றத்துடன் ஒற்றை புனரமைப்பை அடைய முடியும். இந்தக் கோட்பாடு முதன்முதலில் ஜான் எம். குர்ராவால் 1995 ஆம் ஆண்டு ஆய்வறிக்கையில் முன்மொழியப்பட்டு செயல்படுத்தப்பட்டது, அதில் 50 என்எம் கோடுகள் மற்றும் இடைவெளிகள் கொண்ட ஒரு சிலிக்கான் கிராட்டிங் 650 என்எம் அலைநீளம் (காற்றில்) வெளிச்சத்துடன் தீர்க்கப்பட்டது. "கட்டமைக்கப்பட்ட வெளிச்ச நுண்ணோக்கி" என்ற பெயர் 2000 ஆம் ஆண்டில் எம்ஜிஎல் என்பவரால் உருவாக்கப்பட்டது. குஸ்டாஃப்ஸன். சிம் "மோயிர் விளைவை" பயன்படுத்திக் கொள்கிறது, இது இரண்டு வடிவங்கள் பெருக்கமாக மிகைப்படுத்தப்படும்போது நிகழ்கிறது. மேற்பரப்பு "மோயிர் விளிம்புகள்" தோன்ற காரணமாகிறது, அவை அசல் வடிவத்தை விட படிப்படியாக உள்ளன, ஆனால் அதிக அதிர்வெண் வடிவங்களைப் பற்றிய தகவல்களைக் கொண்டுள்ளன, அவை இல்லையெனில் புலப்படாது. சிம்மின் பின்னணியில் உள்ள கோட்பாடு ஃபோரியர் அல்லது அதிர்வெண் களத்தில் நன்கு புரிந்து கொள்ளப்படுகிறது. பொதுவாக, இமேஜிங் அமைப்புகள் விவரக்குறிப்பு வரம்பிற்குக் கீழே உள்ள அதிர்வெண்களை மட்டுமே தீர்க்க முடியும். எனவே, ஃபோரியர் களத்தில், படம்பிடித்த மாதிரியிலிருந்து பதிவு செய்யப்பட்ட அனைத்து அதிர்வெண்களும் ஒரு நிலையான ஆரம் கொண்ட வட்டத்திற்குள் இருக்கும். இந்த வரம்பிற்கு வெளியே உள்ள எந்த அதிர்வெண்களையும் தீர்க்க முடியாது. இருப்பினும், மாதிரியை வடிவமைப்பு ஒளியுடன் படம்பிடிக்குவதன் மூலம் அதிர்வெண் நிறமாலையை மாற்றலாம். பெரும்பாலும், வடிவம் ஒரு 1D சைனூசாய்டல் சாய்வு ஆகும், மேலே உள்ள படத்தில் மொய்ர் விளிம்புகளை உருவாக்க பயன்படுத்தப்படும் வடிவம் போன்றது. சைனூசாய்டின் ஃபோரியர் உருமாற்றம் ஒரு மாற்றப்பட்ட டெல்டா செயல்பாடு என்பதால், இந்த வடிவத்தின் உருமாற்றம் மூன்று டெல்டா செயல்பாடுகளைக் கொண்டிருக்கும்ஃ ஒன்று பூஜ்ஜிய அதிர்வெண்ணில் மற்றும் இரண்டு சைனூசாய்டின் நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை அதிர்வெண் கூறுகளுடன் தொடர்புடையவை (கீழே உள்ள படத்தைப் பார்க்கவும்). இந்த வடிவத்தைப் பயன்படுத்தி இலக்கு ஒளிரும் போது, இலக்கு மற்றும் ஒளிரும் முறை பெருக்கமாக மிகைப்படுத்தப்படுகிறது, அதாவது இதன் விளைவாக வரும் படத்தின் ஃபோரியர் உருமாற்றம் இலக்கு மற்றும் ஒளிரும் வடிவத்தின் தனிப்பட்ட உருமாற்றங்களின் சுழற்சியாகும். டெல்டா செயல்பாட்டுடன் எந்தவொரு செயல்பாட்டையும் இணைப்பது அசல் செயல்பாட்டின் மையத்தை டெல்டா செயல்பாட்டின் இடத்திற்கு மாற்றும் விளைவைக் கொண்டுள்ளது. எனவே, இந்த சூழ்நிலையில், இலக்கின் அதிர்வெண் நிறமாலை மாற்றப்படுகிறது மற்றும் முன்பு தீர்க்க முடியாத அளவுக்கு அதிகமாக இருந்த அதிர்வெண்கள் இப்போது தீர்க்கக்கூடிய அதிர்வெண்களின் வட்டத்திற்குள் உள்ளன. இதன் விளைவாக, சிம் மூலம் ஒரு படத்தைப் பெறுவதற்கு, ஃபோரியர் களத்தில் உள்ள மூன்று தனித்தனி பகுதிகளிலிருந்து அதிர்வெண் கூறுகள் (மையம் மற்றும் நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை மாற்றங்களுடன் தொடர்புடையவை) அனைத்தும் ஒன்றாக பிடிக்கப்படுகின்றன. இறுதியாக, இடஞ்சார்ந்த களத்தில் சுழற்சி ஃபோரியர் களத்தில் அதே சுழற்சியை விளைவிப்பதால், முழு 360 டிகிரிக்கு மேல் அதிக அதிர்வெண்களை ஒளிரும் வடிவத்தை சுழற்றுவதன் மூலம் பிடிக்க முடியும். படம் b) கீழே உள்ள படத்தில் 4 தனித்தனி படங்களைப் பெறுவதன் மூலமும், ஒவ்வொரு கையகப்படுத்துதலுக்கும் இடையில் ஒளிரும் வடிவத்தை 45 டிகிரி சுழற்றுவதன் மூலமும் எந்த அதிர்வெண் கூறுகள் பிடிக்கப்படும் என்பதைக் காட்டுகிறது. அனைத்து படங்களும் கைப்பற்றப்பட்டவுடன், ஒரு இறுதி படத்தை கணக்கீட்டு ரீதியாக மறுகட்டமைக்க முடியும். இந்த நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி, விலகல் வரம்பை விட 2x வரை தெளிவுத்திறனை மேம்படுத்தலாம். இந்த 2x வரம்பு விதிக்கப்படுகிறது, ஏனெனில் ஒளிரும் முறை இன்னும் விலகல் குறைவாக உள்ளது. 2டி சிம்மின் பின்னணியில் உள்ள கருத்தாக்கங்களை 3டி வால்யூமெட்ரிக் இமேஜிங் வரை விரிவுபடுத்தலாம். தூண்டுதல் ஒளியின் மூன்று பரஸ்பர ஒத்திசைவான கற்றைகளைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், பட மாதிரியில் பல அதிர்வெண் கூறுகளுடன் குறுக்கீடு வடிவங்களை உருவாக்க முடியும். இது இறுதியில் மூன்று அச்சுகளிலும் 2x மேம்பட்ட தெளிவுத்திறனுடன் 3D புனரமைப்புகளைச் செய்ய உதவுகிறது. இருப்பினும், உயிரியல் திசுக்களின் வலுவான சிதறல் குணகம் காரணமாக, இந்த கோட்பாட்டு தீர்மானத்தை சுமார் 10 உம் விட மெல்லிய மாதிரிகளில் மட்டுமே அடைய முடியும். அதற்கு அப்பால், சிதறல் அதிகப்படியான பின்னணி சமிக்ஞைக்கு வழிவகுக்கிறது, இது துல்லியமான புனரமைப்பை சாத்தியமற்றதாக ஆக்குகிறது. ஒளி தாள் நுண்ணோக்கி (எல். எஸ். எம்) இயற்பியல் பிரிவு அல்லது அகற்றுதல் தேவையில்லாமல் தடிமனான உயிரியல் மாதிரிகளின் சிறந்த ஒளியியல் பிரிவை அனுமதிக்கும் வகையில் உருவாக்கப்பட்டது, இது நேரத்தை எடுக்கும் மற்றும் இன்-விவோ இமேஜிங்கிற்கு தீங்கு விளைவிக்கும். பெரும்பாலான ஃப்ளோரசன்ட் இமேஜிங் நுட்பங்கள் சீரமைக்கப்பட்ட வெளிச்சம் மற்றும் கண்டறிதல் அச்சுகளைப் பயன்படுத்துகின்றன, எல்எஸ்எம் ஆர்த்தோகனல் அச்சுகளைப் பயன்படுத்துகிறது. ஒரு கவனம் செலுத்தப்பட்ட ஒளி தாள் பக்கத்திலிருந்து மாதிரியை ஒளிரச் செய்ய பயன்படுத்தப்படுகிறது, அதே நேரத்தில் ஒளிரும் சமிக்ஞை மேலே இருந்து கண்டறியப்படுகிறது. இவை இரண்டும் பரந்த புல நுண்ணோக்கியின் "கூம்பு சிக்கலை" நீக்குகிறது, விமானங்கள் தீவிரமாக படம்பிடிக்கப்படாததால் மையத்திற்கு வெளியே உள்ள பங்களிப்புகளை நீக்குவதன் மூலம் மற்றும் முழு மாதிரியும் இமேஜிங் முழுவதும் ஒளிராததால் ஃபோட்டோப்லீச்சிங்கின் தாக்கத்தை குறைக்கிறது. கூடுதலாக, மாதிரி பக்கத்திலிருந்து ஒளிரும் என்பதால், ஒளிரும் ஒளியின் கவனம் ஆழத்தை சார்ந்தது அல்ல, இதனால் உயிரியல் மாதிரிகளின் அளவீட்டு இமேஜிங் மிகவும் சாத்தியமானது. எல்எஸ்எம் இல் ஒரு பெரிய சவால் ஒளி தாளை வடிவமைப்பதில் உள்ளது. பொதுவாக, ஒளியியல் அச்சில் ஒளி தாளின் தடிமன் (இது பெரும்பாலும் அச்சுத் தெளிவுத்திறனை தீர்மானிக்கிறது) மற்றும் ஒளி தாள் போதுமான தடிமன் பராமரிக்கும் புலத்தின் பார்வை ஆகியவற்றுக்கு இடையே ஒரு பரிமாற்றமாகும். இந்த சிக்கலை எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் இன் கூடுதல் தீர்மானம் மூலம் ஓரளவு தீர்க்க முடியும். தொழில்நுட்பங்கள் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம்-ஐ இரண்டு முக்கிய பிரிவுகளாகப் பிரிக்கலாம். ஒளியியல் பிரிவு எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் மிகவும் பொதுவான அணுகுமுறையாகும், மேலும் கவனம் செலுத்தப்படாத பின்னணி சமிக்ஞையின் தாக்கத்தை மேலும் குறைப்பதன் மூலம் அச்சுத் தெளிவுத்திறனை மேம்படுத்துகிறது. சூப்பர்-ரெசல்யூஷன் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் 3டி மாதிரிகளில் சூப்பர்-ரெசல்யூஷனை அடைய 2டி சிமின் வெளிச்சம் மற்றும் புனரமைப்பு நுட்பங்களைப் பயன்படுத்துகிறது. ஒளியியல் பிரிவு எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் ஒளியியல் பிரிவு எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் (ஓ. எஸ்-எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம்) முதன்முதலில் 1997 ஆம் ஆண்டு எம். ஏ. நீல் மற்றும் பலர். சூப்பர்-தெளிவுத்திறனை அடைவதற்குப் பதிலாக, இந்த நுட்பம் கட்டமைக்கப்பட்ட ஒளியின் பின்னணியில் உள்ள யோசனைகளைப் பயன்படுத்தி, ஒளிரும் ஒளி தாள் மிகவும் கவனம் செலுத்தும் இடத்தைத் தவிர வேறு அடுக்குகளிலிருந்து பின்னணி மூடுபனியை அகற்றுவதன் மூலம் அச்சுத் தெளிவுத்திறனை மேம்படுத்துகிறது. இதை அடைவதற்கு பல அணுகுமுறைகள் இருந்தாலும், மிகவும் பொதுவான அணுகுமுறை "மூன்று கட்ட" சிம் என்று அழைக்கப்படுகிறது, இது இங்கே விவரிக்கப்படும். ஒரு இலக்கை ஒரு கட்டம் ஒளிரும் வடிவத்துடன் படம்பிடிக்குவதன் மூலம் பெறப்பட்ட சமிக்ஞையை பின்வரும் சமன்பாட்டின் மூலம் குறிப்பிட முடியும் என்று நீல் காகிதத்தில் காட்டப்பட்டுள்ளதுஃ இங்கே, பின்னணி சமிக்ஞை, மற்றும் கோசைன் மற்றும் சைன் கூறுகளால் ஒளிரும் இலக்கின் பகுதியிலிருந்து சமிக்ஞைகள் கட்டம். ஆர்வமுள்ள தளத்தின் இன்-ஃபோகஸ் படத்தை சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி புனரமைக்க முடியும் என்றும் காட்டப்பட்டுள்ளதுஃ கட்டம் ஒளிரும் நிலைமைகளின் கீழ் மூன்று தனித்தனி படங்களைப் பெறுவதன் மூலம் இதை அடைய முடியும், ஒவ்வொரு கையகப்படுத்தலுக்கும் இடையில் கட்டத்தை 60 டிகிரி சுழற்றலாம். விரும்பிய 2டி படத்தை சமன்பாட்டைப் பயன்படுத்தி மறுசீரமைக்க முடியும்ஃ இது கட்டம் வெளிச்சம் வடிவத்தின் மிகவும் கவனம் செலுத்தும் பகுதியிலிருந்து மட்டுமே தகவல்களைக் கொண்ட 2டி படத்தை உருவாக்குகிறது. இந்த வடிவம் ஒரு ஒளி தாளைப் பயன்படுத்தி உருவாக்கப்பட்டால், தாளை அச்சு திசையில் ஸ்கேன் செய்து ஒரு மாதிரியின் முழு 3D புனரமைப்பை உருவாக்க முடியும். பின்னணி சமிக்ஞையை குறைக்க இந்த அணுகுமுறையைப் பயன்படுத்துவதில் உள்ள முதன்மை குறைபாடு என்னவென்றால், இது இறுதியில் இரண்டு படங்களுக்கு இடையில் பகிரப்பட்ட பின்னணி சமிக்ஞையை கழிப்பதை நம்பியுள்ளது. சில இன்-ஃபோகஸ் சிக்னல்கள் தவிர்க்க முடியாமல் பின்னணி மூடுபனியுடன் கழிக்கப்படும். இது ஒட்டுமொத்தமாக சிக்னலைக் குறைக்கும், இது குறைந்த சிக்னல் ஃப்ளோரசன்ட் இமேஜிங்கில் தீங்கு விளைவிக்கும். ஆயினும்கூட, இந்த நுட்பம் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் இன் மிகவும் பொதுவான பயன்பாடாகும் மற்றும் எல். எஸ். எம் மீது மட்டும் மேம்பட்ட அச்சுத் தெளிவுத்திறனைக் காட்டியுள்ளது. சூப்பர்-ரெசல்யூஷன் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் சூப்பர்-ரெசல்யூஷன் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் (எஸ். ஆர்-எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம்) 2டி அல்லது 3டி சிம்மில் இருந்து நுட்பங்களைப் பயன்படுத்துகிறது, அதே நேரத்தில் ஒளி தாளை ஒளிரும் ஆதாரமாகப் பயன்படுத்தி சிமின் இடஞ்சார்ந்த தெளிவுத்திறனை அடைய ஆழமான சுயாதீனமான இமேஜிங் மற்றும் எல். எஸ். எம் இன் குறைந்த ஃபோட்டோப்லீச்சிங். மிகவும் பொதுவான பயன்பாட்டில், 3டி இலக்கு மாதிரியின் ஒற்றை தளத்தில் 1டி சைனுசாய்டல் வடிவத்தை உருவாக்க ஒரு ஒளி தாள் பயன்படுத்தப்படுகிறது. உயர் தெளிவுத்திறன் கொண்ட 2டி மறுசீரமைப்புக்கு போதுமான படங்களைப் பெற இந்த ஒற்றை விமானத்தில் வடிவம் பல முறை சுழற்றப்படுகிறது. ஒளி அச்சுத் தெளிவுத்திறனில் ஸ்கேன் செய்யப்பட்டு, முழு 3D புனரமைப்புக்கு போதுமான 2D படங்கள் இருக்கும் வரை செயல்முறை மீண்டும் மீண்டும் செய்யப்படுகிறது. பொதுவாக, இந்த அணுகுமுறை மேம்பட்ட தெளிவுத்திறனை மட்டுமல்லாமல், ஓஎஸ்-எஸ்ஐ-எல்எஸ்எம் மீது மேம்பட்ட எஸ்என்ஆர்-ஐ நிரூபிக்கிறது, ஏனெனில் புனரமைப்பில் எந்த தகவலும் நிராகரிக்கப்படவில்லை. கூடுதலாக, எஸ்ஆர்-எஸ்ஐ-எல்எஸ்எம்-க்கான கோட்பாட்டு தீர்மானம் 3டி சிம்மை விட சற்றே குறைவாக இருந்தாலும், ஆழத்தில்> 10 உம் இந்த நுட்பம் எல்எஸ்எம்-இன் ஒளிரும் ஒளி பண்புகளின் ஆழம்-சுயாதீனமான கவனம் செலுத்துவதன் காரணமாக 3டி சிம்மில் மேம்பட்ட செயல்திறனைக் காட்டுகிறது. எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம். இல் ஒரு பெரிய சவால் பொறியியல் அமைப்புகள் ஆகும், அவை ஒளி தாள்களில் கட்டமைக்கப்பட்ட வடிவங்களை உருவாக்கும் திறன் கொண்டவை. இதை நிறைவேற்றுவதற்கான மூன்று முக்கிய அணுகுமுறைகள் குறுக்கிடும் ஒளி தாள்கள், டிஜிட்டல் எல்எஸ்எம் மற்றும் இடஞ்சார்ந்த ஒளி மாடுலேட்டர்களைப் பயன்படுத்துகின்றன. குறுக்கிடும் ஒளி தாள்களுடன், இரண்டு ஒத்திசைவான எதிர் பரப்புதல் தாள்கள் மாதிரியில் அனுப்பப்படுகின்றன. இந்த தாள்களுக்கு இடையிலான குறுக்கீடு முறை விரும்பிய ஒளிரும் வடிவத்தை உருவாக்குகிறது, இது தாள்களை திசைதிருப்ப சுழலும் கண்ணாடிகளைப் பயன்படுத்தி சுழற்றப்படலாம் மற்றும் ஸ்கேன் செய்யப்படலாம். ஒளி வடிவங்களை உருவாக்க டிஜிட்டல் ஒளி-தாள் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் கூடுதல் நெகிழ்வுத்தன்மையைச் சேர்க்கலாம். டிஜிட்டல் எல்எஸ்எம் இல், லேசர் கற்றை மாதிரியின் மூலம் விரைவாக ஸ்கேன் செய்வதன் மூலம் ஒளி தாள் உருவாக்கப்படுகிறது. இது ஸ்கேன் செய்யும் போது லேசரின் தீவிரத்தை மாற்றியமைப்பதன் மூலம் குறிப்பிட்ட ஒளிரும் வடிவத்தின் மீது சிறந்த கட்டுப்பாட்டை அனுமதிக்கிறது. இந்த நுட்பம் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் உடன் கூடுதலாக பல வகையான ஒளி தாள் நுண்ணோக்கியின் திறன் கொண்ட அமைப்புகளை உருவாக்க பயன்படுத்தப்படுகிறது. இறுதியாக, ஒளி வடிவங்களை மின்னணு முறையில் கட்டுப்படுத்த இடஞ்சார்ந்த ஒளி மாடுலேட்டர்களைப் பயன்படுத்தலாம், இது வடிவங்களுக்கு இடையில் மிகச் சிறந்த கட்டுப்பாடு மற்றும் வேகமாக மாறுவதை அனுமதிக்கும் நன்மையைக் கொண்டுள்ளது. கூடுதலாக, எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம்-ஐச் சுற்றியுள்ள சமீபத்திய ஆய்வுகளில் பெரும்பாலானவை உயிரியல் திசுக்களில் ஆழமான இமேஜிங் செய்வதற்கான அணுகுமுறையை மற்ற நுட்பங்களுடன் இணைப்பதில் கவனம் செலுத்துகின்றன. உதாரணமாக, 2021 ஆம் ஆண்டு ஆய்வறிக்கை என். ஐ. ஆர்-II ஒளியுடன் எஸ். ஐ-எல். எஸ். எம் பயன்பாட்டை நிரூபித்தது, டிரான்ஸ்கிரானியல் மவுஸ் மூளை இமேஜிங்கின் தெளிவுத்திறனை ~ 1.7x ஆல் ~ 750 உம் ஊடுருவல் ஆழத்துடன் மேம்படுத்துகிறது மற்றும் சமிக்ஞை-பின்னணி விகிதத்தில் கிட்டத்தட்ட 16x முன்னேற்றம். எல்எஸ்எம் இல் ஒளி தாள்களை வடிவமைப்பதற்கான பிற நுட்பங்களுடன் சிம் இணைத்தல், இரண்டு-ஃபோட்டான் கிளர்ச்சியுடன் எஸ்ஐ-எல்எஸ்எம் இணைத்தல் அல்லது தெளிவுத்திறன் வரம்புகளை மேலும் தள்ள நேரியல் அல்லாத ஃப்ளோரசன்ஸைப் பயன்படுத்துதல் ஆகியவை பிற நம்பிக்கைக்குரிய திசைகளில் அடங்கும். குறிப்புகள் நுண்ணோக்கி ஒளியியல் இமேஜிங் அளவீட்டு கருவிகள்