P19 cell
P19 செல்கள் என்பது எலிகளில் கரு-பெறப்பட்ட டெராடோகார்சினோமாவிலிருந்து பெறப்பட்ட ஒரு கரு புற்றுநோய் செல் வரிசை ஆகும். செல் லைன் ப்ளூரிபோடெண்ட் மற்றும் மூன்று கிருமி அடுக்குகளின் செல் வகைகளாக வேறுபடுத்திக் காட்ட முடியும். மேலும், இது மிகவும் வகைப்படுத்தப்பட்ட கரு புற்றுநோய் (ஈ. சி.) செல் வரிசையாகும், இது பல்வேறு குறிப்பிட்ட சிகிச்சைகள் மூலம் இதய தசை செல்கள் மற்றும் நரம்பியல் செல்களுக்குள் தூண்டப்படலாம். உண்மையில், டைமெத்தில் சல்பாக்சைடுக்கு (டி. எம். எஸ். ஓ) திரட்டப்பட்ட பி19 செல்களை வெளிப்படுத்துவது இதய மற்றும் எலும்பு தசையில் வேறுபாட்டைத் தூண்டுகிறது. மேலும், பி19 செல்களை ரெட்டினோயிக் அமிலத்திற்கு (ஆர்ஏ) வெளிப்படுத்துவது அவற்றை நரம்பியல் செல்களாக வேறுபடுத்தலாம். மனிதர்களில் P19 செல் லைன் புற்றுநோய் உயிரணுக்களின் தோற்றம் ஆக்கிரமிப்பு புற்றுநோய் உயிரணு வளர்ந்து மெட்டாஸ்டாஸைஸ் செய்தால் நோயாளியின் மரணத்திற்கு வழிவகுக்கும். இருப்பினும், மேலும் குறிப்பிட்ட சிகிச்சைகளைக் கண்டுபிடிப்பதற்காக புற்றுநோய் உயிரணுக்களின் வளர்ச்சியைப் படிக்க ஆராய்ச்சியாளர்கள் இந்த உயிரணுக்களைப் பயன்படுத்துகின்றனர். வளர்ச்சி உயிரியலாளர்களைப் பொறுத்தவரை, டெராடோகார்சினோமாவிலிருந்து பெறப்பட்ட கரு புற்றுநோய், வளர்ச்சி ஆய்வுக்கு ஒரு நல்ல பொருளாகும். 1982 ஆம் ஆண்டில், மெக்பர்னி மற்றும் ரோஜர்ஸ் ஆகியோர் கட்டி வளர்ச்சியைத் தூண்டுவதற்காக 7,5 நாள் சுட்டி கருவை விந்தணுக்களில் மாற்றினர். வேறுபடுத்தப்படாத ஸ்டெம் செல்களைக் கொண்ட செல் கலாச்சாரங்கள் ஒரு யூப்லோயிட் கேரியோடைப் கொண்ட முதன்மை கட்டியிலிருந்து தனிமைப்படுத்தப்பட்டன. இந்த ஸ்டெம் செல்கள் கரு புற்றுநோய் பி19 செல்கள் என்று பெயரிடப்பட்டன. இந்த பெறப்பட்ட P19 செல்கள் ஊட்டி செல்கள் இல்லாமல் வேகமாக வளர்ந்தன மற்றும் பராமரிக்க எளிதானது. மேலும், பி19 செல்களின் பன்முகத்தன்மை பின்னர் மற்றொரு சுட்டி திரிபுகளின் பிளாஸ்டோசிஸ்ட்களில் செல்களை செலுத்துவதன் மூலம் உறுதிப்படுத்தப்பட்டது. பெறுநர் எலியில் வளர்ந்து வரும் மூன்று கிருமி அடுக்குகளிலிருந்தும் திசுக்கள் இருப்பதை ஆராய்ச்சியாளர்கள் கண்டறிந்தனர். அவர்களின் தொடர்ச்சியான ஆய்வுகளின் அடிப்படையில், அவர்கள் அசல் P19 செல்களிலிருந்து துணை வகை செல் கோடுகளைப் பெற்றனர்ஃ P19S18, P19D3, P19RAC65 மற்றும் P19C16. ரெட்டினோயிக் அமிலம் அல்லது டி. எம். எஸ். ஓ சிகிச்சைக்கு பதிலளிக்கும் வகையில் நரம்பியல் செல்கள் அல்லது தசை செல்களாக வேறுபடுத்தும் திறன் முறையே இந்த துணை வகை செல் கோடுகளுக்கு இடையிலான வேறுபாடாகும். மிக சமீபத்தில், பல்வேறு ஆய்வுகள் ஆரம்பத்தில் வேறுபடுத்தப்பட்ட P19 செல்களிலிருந்து பெறப்பட்ட செல் கோடுகளை உருவாக்குகின்றன. பி19 செல்களின் ப்ளூரிபோடென்சி காரணமாக, அந்த புதிய பெறப்பட்ட செல் கோடுகள் எக்டோடெர்ம், மெசோடெர்ம் மற்றும் எண்டோடெர்ம் போன்ற செல்களாக இருக்கலாம். பி19 உயிரணுக்களின் வேறுபாடு பி19 உயிரணுக்கள் ஒரு நிலையான குரோமோசோம் கலவை காரணமாக அதிவேக வளர்ச்சியில் பராமரிக்கப்படலாம். கரு புற்றுநோய் மூன்று கிருமி அடுக்குகளின் உயிரணுக்களாக வேறுபடுவதால், பி 19 செல்கள் அந்த எக்டோடெர்ம், மெசோடெர்ம் மற்றும் எண்டோடெர்ம் போன்ற உயிரணுக்களாகவும் வேறுபடுகின்றன. கரு புற்றுநோய் செல்கள் அதிக அடர்த்தியில் வளர்க்கப்படும்போது, அவை வேறுபடத் தொடங்குகின்றன. உயிரணுக்களை ஒரு கரு உடலுக்குள் ஒருங்கிணைப்பதன் மூலம், ஈ. சி செல்கள் வேறுபாட்டைச் செயல்படுத்தலாம். P19 உயிரணுக்களில், ஒருங்கிணைந்த கருப்பொருள் உடல் உயிரணுக்களுக்கு நச்சுத்தன்மையற்ற மருந்துகளின் செறிவுகளைச் சேர்ப்பது, சேர்க்கப்பட்ட மருந்தைப் பொறுத்து P19 உயிரணுக்களை குறிப்பிட்ட உயிரணுக் கோடுகளாக வேறுபடுத்துவதைத் தூண்டும். ரெட்டினோயிக் அமிலம் (ஆர்ஏ) மற்றும் டைமெத்தில் சல்பாக்சைடு (டிஎம்எஸ்ஓ) ஆகியவை மிகவும் பொதுவான மற்றும் பயனுள்ள இரண்டு மருந்துகளாகும். ஆர்ஏவின் ஒரு குறிப்பிட்ட செறிவு பி19 செல்களை நியூரான்கள் மற்றும் கிளைல் செல்கள் உள்ளிட்ட நரம்பியல் செல்களாக வேறுபடுத்தத் தூண்டும் என்று ஆய்வுகள் காட்டுகின்றன, அதேசமயம் டிஎம்எஸ்ஓ பி19 செல்களை இதய அல்லது எலும்பு தசை செல்களாக வேறுபடுத்த வழிவகுத்தது. ஆர்ஏ சிகிச்சை முறையில், நரம்பணுக்கள், ஆஸ்ட்ரோலியா மற்றும் ஃபைப்ரோபிளாஸ்ட்களை திரட்டலுக்குப் பிறகு அடையாளம் காணலாம். வேறுபடுத்தப்பட்ட செல்கள் கோலின் அசிடைல் டிரான்ஸ்ஃபெரேஸ் மற்றும் அசிடைல் கோலினெஸ்டரேஸ் செயல்பாடுகளையும் கொண்டுள்ளன. டிஎம்எஸ்ஓ மூலம் சிகிச்சையளிக்கப்பட்டபோது, வெளிப்பாட்டின் 5 நாட்களுக்குப் பிறகு இதய தசை செல்கள் உருவாகின, மேலும் வெளிப்பாட்டின் 8 நாட்களுக்குப் பிறகு எலும்பு தசை செல்கள் தோன்றின. அந்த ஆய்வுகள் மருந்து வெளிப்பாடு பன்முக பி 19 செல்கள் செல்களின் வெவ்வேறு அடுக்குகளாக வேறுபடுவதற்கு காரணமாகிறது என்பதைக் காட்டுகிறது. ரெட்டினோயிக் அமிலம் அல்லது டி. எம். எஸ். ஓவின் செறிவு செல்களுக்கு நச்சுத்தன்மையற்றது என்பதால், மருந்து-குறிப்பிட்ட வேறுபாடு செல்களைத் தூண்டுவதன் காரணமாகும், தேர்வு அல்ல. மருந்து-குறிப்பிட்ட வேறுபாட்டின் பொறிமுறையை ஆராய P19 உயிரணுக்களின் பிறழ்வுகள் உருவாக்கப்பட்டுள்ளன. மேலும், நரம்பியக்கவியல் மற்றும் மையோஜெனீசிஸ் தொடர்பான சமிக்ஞை பாதைகள் மரபணு வெளிப்பாட்டைப் படிப்பதன் மூலமோ அல்லது பி 19 உயிரணுக்களின் பிறழ்வுகளை உருவாக்குவதன் மூலமோ ஆராயப்பட்டன. P19 உயிரணுக்களில் நியூரோஜெனெசிஸ். ரெட்டினோயிக் அமிலத்துடன் வேறுபடுத்தப்படாத P19 செல்களை சிகிச்சையளிப்பது அவற்றை நரம்பியல் செல்களுக்குள் குறிப்பாகத் தூண்டும். 1 மைக்ரோமீட்டர் முதல் 3 மைக்ரோமீட்டர் ஆர். ஏ. வரையிலான அளவுகளைப் பயன்படுத்துவது நியூரான்களை மிகவும் ஏராளமான உயிரணு வகையாக உருவாக்க முடியும். இந்த சிகிச்சையின் கீழ் நரம்பணுக்கள் ஆறு நாட்கள் முதல் ஒன்பது நாட்களுக்கு இடையில் மிக உயர்ந்த எண்ணிக்கையை அடைந்தன. நியூரோஃபிலமென்ட் புரதங்கள், எச்என்கே-1 ஆன்டிஜென் மற்றும் டெட்டனஸ் டாக்ஸின் பிணைப்பு தளங்கள் போன்ற பல நரம்பியல் குறிப்பான்கள் இந்த நாட்களில் மிக உயர்ந்த மட்டங்களில் வெளிப்படுத்தப்படுகின்றன. ஆறு முதல் ஒன்பது நாட்கள் சிகிச்சைக்குப் பிறகு, நரம்பியல் அல்லாத உயிரணுக்களின் விரைவான பெருக்கம் காரணமாக, ஒப்பீட்டளவில் நரம்பியல் மக்கள் தொகை குறைகிறது. 10 நாட்கள் வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு, கிளைல் ஃபைப்ரில்லரி அமில புரதம் (ஜி. எஃப். ஏ. பி) பயன்படுத்தி ஆஸ்ட்ரோகிளியல் செல்களைக் கண்டறிய முடியும், இது கிளைல் செல்களின் ஒரு குறிப்பிட்ட அடையாளமாகும். நியூரான்கள் மற்றும் ஆஸ்ட்ரோசைட்டுகளைத் தவிர, P19 செல்கள் ஒலிகோடென்ட்ரோசைட்டுகளாக வேறுபடுத்திக் காட்டலாம், அவை குறிப்பிட்ட குறிப்பான்கள், மெய்லின்-தொடர்புடைய கிளைகோபுரோட்டீன் மற்றும் 2 ', 3'-சைக்ளிக்-நியூக்ளியோடைடு 3 '-பாஸ்போடிடெரேஸ் ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி கண்டறியப்படலாம். மேலும், ஆர்ஏ-தூண்டப்பட்ட செல்கள் மூளையில் இடமாற்றம் செய்யப்பட்டபோது எலிகளில் உள்ள ஃபைபர் மூட்டைகளிலும் ஒலிகோடென்ட்ரோசைட்டுகள் உருவாகி இடம்பெயர்ந்தன. ரெட்டினோயிக் அமிலம் P19 செல்களை மட்டுமல்லாமல் பிற பிறப்புறுப்பு செல்கள் அல்லது கரு ஸ்டெம் செல்களையும் வேறுபடுத்துவதற்குத் தூண்டும். ரெட்டினோயிக் அமில சிகிச்சைக்குப் பிறகு செல்கள் உடனடியாக நரம்பியல் மார்க்கர் மரபணுக்களை வெளிப்படுத்தாததால், ஆர்ஏ செல்லுலார் வேறுபாட்டைச் செயல்படுத்த சில பாதைகளைத் தொடங்க வேண்டும். பல ஆய்வுகள் ஆர்ஏ-தூண்டப்பட்ட வழிமுறைகளை ஆராய பி 19 செல்களைப் பயன்படுத்தின, இதில் ரெட்டினோயிக் அமில ஏற்பி மரபணுக்களின் பிறழ்ந்த அல்லீலை உருவாக்குவது மற்றும் ஆர்ஏ-க்கு வெளிப்படும் போது ஏற்பி மரபணுக்கள், ஹாக்ஸ் மரபணுக்கள் மற்றும் ரெட்டினால் பிணைப்பு புரதங்களின் வெளிப்பாட்டைப் படிப்பது ஆகியவை அடங்கும். இந்த ஆய்வுகள் அனைத்தும் குறிப்பிட்ட செல்லுலார் பாதையில் தலையிடும் மருந்துகளின் பொறிமுறையை ஆராய்வதற்கான பி 19 செல் ஒரு நல்ல இன் விட்ரோ மாதிரி அமைப்பு என்பதைக் குறிக்கிறது. மேலும், பி19 செல்லில் ஆர்ஏ-தூண்டப்பட்ட நரம்பியக்கடத்தலின் திறனைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், பல ஆராய்ச்சியாளர்கள் நரம்பியல் அல்லது கிளியோஜெனெசிஸின் இன் விட்ரோ வேறுபாடு வழிமுறைகளை அடையாளம் காணத் தொடங்கினர். பல தொடர்புடைய பாதைகள் அல்லது டபிள்யூஎன்டி/β-கேடெனின் பாதை, நாட்ச் பாதை மற்றும் முள்ளம்பன்றி பாதை ஆகியவை மரபணு வெளிப்பாட்டைப் பயன்படுத்தி அல்லது தொடர்புடைய மரபணுக்களுக்கான அல்லீல்களை உருவாக்குவதன் மூலம் ஆராயப்படுகின்றன. ரெட்டினோயிக் அமிலத்தைப் போலவே, டி. எம். எஸ். ஓ தூண்டப்பட்ட வேறுபாடு பி 19 உயிரணுக்களுக்கு குறிப்பிட்டதாக இல்லை. இது நியூரோபிளாஸ்டோமா செல்கள், நுரையீரல் புற்றுநோய் செல்கள் மற்றும் சுட்டி ஈஎஸ் செல்களைத் தூண்டும். 0.5-1% டி. எம். எஸ். ஓ செறிவில் P19 செல்கள் மெசோடெர்மல் மற்றும் எண்டோடெர்மல் செல் வகைகளை ஒருங்கிணைக்கவும் செயலாக்கவும் தூண்டப்பட்டன. திரட்டல் மற்றும் வேறுபாட்டின் போது ஏற்படும் செல்லுலார் பொறிமுறை இன்னும் முழுமையாக ஆய்வு செய்யப்படவில்லை. இருப்பினும், சில ஆய்வுகள் P19 உயிரணுக்களில் தசை வேறுபாட்டில் செல்லுலார் தொடர்பு முக்கிய பங்கு வகிக்கிறது என்பதைக் காட்டுகின்றன, இது தசை வேறுபாட்டைச் செயல்படுத்த செல்கள் ஏன் முதலில் ஒருங்கிணைக்க வேண்டும் என்பதை விளக்கக்கூடும். P19 உயிரணுக்களில் உள்ள மையோஜெனீசிஸின் பொறிமுறையை தெளிவுபடுத்துவதற்காக, GATA-4, MEF2c, MSx-1, Nkx2.5, MHox, MSx-2 மற்றும் MLP உள்ளிட்ட பல இதய குறிப்பிட்ட டிரான்ஸ்கிரிப்ஷன் காரணிகள் வேறுபாட்டின் போது மாறுவது கண்டறியப்பட்டுள்ளது. DMSO தூண்டலுக்குப் பிறகு GATA-4, NKx2.5 மற்றும் MEF2c அனைத்தும் ஒழுங்குபடுத்தப்பட்டதாக அறிக்கைகள் காட்டுகின்றன. சமீபத்திய ஆண்டுகளில், P19 செல்கள் இதய வேறுபாடு மற்றும் மையோஜெனெசிஸ் பொறிமுறையைப் படிப்பதற்கும் பயன்படுத்தப்பட்டன. முக்கிய பாதிக்கப்பட்ட சமிக்ஞை பாதை, எலும்பு மார்போஜெனெடிக் புரதங்கள் (பி. எம். பி) பாதை பி 19 உயிரணுக்களில் மிகவும் வலுவாக ஆய்வு செய்யப்பட்ட சமிக்ஞையாகும். பி 19 சி எல் 6 நோக்ஜின் செல் லைனை உருவாக்குவதன் மூலம், இது பி. எம். பி எதிரியான நோக்ஜினை மிகைப்படுத்துகிறது, டி. எம். எஸ். ஓவின் 1 சதவீதத்துடன் சிகிச்சையளிக்கப்படும்போது பிறழ்ந்த செல்கள் கார்டியோமயோசைட்டுகளாக வேறுபடவில்லை என்பதை அவர்கள் கண்டறிந்தனர், இது இந்த அமைப்பில் கார்டியோமயோசைட் வேறுபாட்டிற்கு பி. எம். பி. க்கள் இன்றியமையாதவை என்பதைக் குறிக்கிறது. கார்டியோஜெனிக் பி. எம். பி சமிக்ஞை பாதையில் டிஏகே1, Nkx-2.5 மற்றும் ஜிஏடிஏ-4 ஆகியவை முக்கியமானவை என்பதற்கான ஆதாரங்களையும் அவர்கள் வழங்கினர். எதிர்கால திசைகளில் P19 செல்கள் நரம்பியல் செல்கள் மற்றும் இன் விட்ரோ தசை செல்கள் ஆகிய இரண்டின் மதிப்புமிக்க உருவாக்கத்தை வழங்குகின்றன. பிற கரு ஸ்டெம் செல்களுடன் ஒப்பிடும்போது பி 19 செல்கள் பராமரிக்க எளிதானது மற்றும் வளர்க்கப்படுவதால், அவை விட்ரோவில் வளர்ச்சி ஆய்வுகளைச் செய்ய ஒரு வசதியான மாதிரியாகும். சில மரபணுக்களை வெளிப்படுத்த அல்லது வெளியேற்ற இந்த உயிரணு வரிசையை கையாளுவதற்கான நுட்பங்கள் சமிக்ஞை பாதைகள், செயல்பாட்டு அம்சங்கள் மற்றும் மியோஜெனீசிஸ் மற்றும் நியூரோஜெனெசிஸின் புரத வெளிப்பாட்டை ஒழுங்குபடுத்துதல் பற்றிய விரிவான விசாரணைக்கு அனுமதிக்கின்றன. நீட்டிக்கப்பட்ட ஆராய்ச்சி இதயம் அல்லது மூளை வளர்ச்சி மற்றும் முதிர்ச்சியின் பிற்கால நிலைகளையும் தெளிவுபடுத்தலாம். குறிப்புகள் வெளிப்புற இணைப்புகள் P19 கொறித்துண்ணிகள் செல் கோடுகளுக்கான செலோசாரஸ் நுழைவு