Minusheet perfusion culture system
மைனுஷீட் பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார அமைப்பு அட்ஹெரென்ட் செல்களுடன் இணைந்து மேம்பட்ட செல் கலாச்சார சோதனைகளுக்கு பயன்படுத்தப்படுகிறது மற்றும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பயோ மெட்டீரியல்கள், சிறப்பு திசு கேரியர்கள் மற்றும் இணக்கமான பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார கொள்கலன்களுடன் இணைந்து சிறப்பு திசுக்களை உருவாக்குகிறது. மினஷீட் பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார அமைப்பின் தொழில்நுட்ப வளர்ச்சி, இன் விட்ரோ நிலைமைகளின் கீழ் உயிரினத்திற்குள் காணப்படும் சிறப்பு திசுக்களின் நிலைமையை முடிந்தவரை ஒத்த ஒரு சூழலை உருவாக்கும் யோசனையால் உந்தப்பட்டது. எனவே இந்த கண்டுபிடிப்பின் அடிப்படை மினுஷீட் திசு கேரியர்களில் பொருத்தப்பட்ட உகந்த செல் ஒட்டுதலுக்கான தனித்தனியாக தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பயோ மெட்டீரியல்கள் ஆகும். மேலும், சுவாச வாயு உள்ளிட்ட புதிய ஊட்டச்சத்தை எப்போதும் வழங்குவதற்கும், திசு-குறிப்பிட்ட திரவ சூழலை உருவகப்படுத்துவதற்கும், திசு கேரியர்களை இணக்கமான வாசனை திரவ கலாச்சார கொள்கலன்களில் செருகலாம். இதன் விளைவாக, இந்த புதுமையான அணுகுமுறையால் உருவாக்கப்பட்ட திசுக்கள் ஒரு சிறந்த மற்றும் நிலையான தரத்தை வெளிப்படுத்துகின்றன என்பதை பல்வேறு வெளியீடுகள் விளக்குகின்றன. எனவே, ஒருபுறம் இந்த அமைப்பு பின்பற்றக்கூடிய உயிரணுக்களின் கலாச்சாரம் மற்றும் சிறப்பு திசுக்களின் தலைமுறைக்கு மிகவும் தகவமைக்கக்கூடிய அடிப்படையை வழங்குகிறது. மறுபுறம் மைனுஷீட் வாசனை திரவியம் கல்ச்சர் அமைப்பு வழக்கமான நிலையான 24 கிணறு கலாச்சார தட்டு மற்றும் நவீன வாசனை திரவியம் கலாச்சார தொழில்நுட்பத்திற்கு இடையிலான முறையான இடைவெளியைக் குறைக்கிறது. மீளுருவாக்கம் மருத்துவம், திசு பொறியியல், நானோ தொழில்நுட்பம், உயிரியல் பொருள் ஆராய்ச்சி மற்றும் புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட மருந்துகளின் மேம்பட்ட நச்சுத்தன்மை சோதனை ஆகியவற்றில் கலாச்சாரத்தில் சிறப்பு திசுக்களின் முக்கியமான தலைமுறை அவசரமாக தேவைப்படுகிறது. இருப்பினும், உயர்த்தப்பட்ட திசுக்கள் எதிர்பார்க்கப்பட்ட செயல்பாட்டு அம்சங்களை வெளிப்படுத்துவதில்லை என்பது பெரும்பாலும் கவனிக்கப்படுகிறது. அதற்கு பதிலாக விலகல் கவனிக்கப்படுகிறது [1-4]. இந்த உயிரணு உயிரியல் மாற்றங்கள் உயிரணுக்களை தனிமைப்படுத்திய பிறகு எழுகின்றன மற்றும் குறைந்த உகந்த திரவ சூழல் மற்றும் உயிரியல் பொருட்களில் சிறிய ஒட்டுதல் காரணமாக ஒரு டிஷில் நிலையான கலாச்சாரத்தின் போது தொடர்கின்றன. ஊட்டச்சத்து மற்றும் சுவாச வாயுவுடன் மேலும் கட்டுப்பாடற்ற வழங்கல், வளர்சிதை மாற்றங்கள் மற்றும் பாராகிரைன் காரணிகளின் மிகைப்படுத்தல் அல்லது ரியோலாஜிக்கல் மன அழுத்தம் இல்லாதது விலகல் அளவை அதிகரிக்கும். இதன் விளைவாக, சிறப்பு திசுக்களின் உகந்த தலைமுறையைப் பொறுத்தவரை, ஒரு சக்திவாய்ந்த உத்தி முடிந்தவரை தீங்கு விளைவிக்கும் அளவுருக்களை விலக்க வேண்டும், அதே நேரத்தில் திசு வளர்ச்சியின் செயல்முறையை ஆதரிக்கும் காரணிகள் தீவிரப்படுத்தப்பட வேண்டும் [5]. தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உயிர்ப்பொருட்கள் ஒரு திசு கேரியருக்குள் வளர்ச்சியை ஊக்குவிக்கின்றன இயற்கையான நிலைமைகளின் கீழ் ஒரு உகந்த திசு வளர்ச்சிக்கு ஒரு முன்நிபந்தனை செல்களுக்கு வெளியே உள்ள மேட்ரிக்ஸுடன் ஒரு செல்-குறிப்பிட்ட தொடர்பு ஆகும், அதே நேரத்தில் இன் விட்ரோ நிலைமைகளின் கீழ் செல்களுக்கு வெளியே உள்ள மேட்ரிக்ஸுக்கு மாற்றாக தேர்ந்தெடுக்கப்பட வேண்டும். இருப்பினும், முக்கியமான சிக்கல் என்னவென்றால், ஒரு பயோ மெட்டீரியல் ஒரு முதிர்ச்சியடையும் திசுவிற்குள் செயல்பாட்டு அம்சங்களின் வளர்ச்சியை நல்ல மற்றும் மோசமான அர்த்தத்தில் பாதிக்கலாம். இதன் விளைவாக, ஒரு டீசெல்லுலரைஸ் எக்ஸ்ட்ரா செல்லுலார் மேட்ரிக்ஸ், புதிதாக உருவாக்கப்பட்ட செயற்கை பாலிமர்கள், மக்கும் சாரக்கட்டு, மட்பாண்டங்கள் அல்லது உலோக உலோகக்கலவைகளின் பொருத்தத்தை கணிக்க முடியாது, ஆனால் சோதிக்கப்பட வேண்டும். செல் ஒட்டுதல் மற்றும் தகவல்தொடர்புகளை சாதகமாக பாதிக்கும் அளவுருக்களை பூர்த்தி செய்ய, தொழில்நுட்ப கருத்து ஒரு மைனுஷீட் திசு கேரியரை அடிப்படையாகக் கொண்டது (படம். 1). இந்த கருவியின் உதவியுடன் உயிரணு ஒட்டுதல் மற்றும் திசுவின் வளர்ச்சியை தனித்தனியாக தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட உயிரியல் பொருட்களுடன் சோதிக்க முடியும். இந்த சோதனைகள் முதலில் நிலையான கீழ் செய்யப்படலாம் (படம். 2) பின்னர் டைனமிக் கீழ் (படம். 3) கலாச்சார நிலைமைகள் [6]. இரண்டு நிகழ்வுகளிலும் ஒரு மைனுஷீட் திசு கேரியர் சேதத்தைத் தடுக்கிறது, ஆனால் பரிசோதனையின் போது அடங்கிய செல்கள் அல்லது திசுக்களின் வளர்ச்சியை ஆதரிக்கிறது. வழக்கமான 24 கிணறு வளர்ப்பு தகடுகளுடன் இணக்கமாக இருக்க, ஒரு தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பயோ மெட்டீரியல் 13 மிமீ விட்டம் கொண்டதாக இருக்க வேண்டும். இந்த வடிவத்தில் பல பொருட்கள் வணிக ரீதியாகவும் கிடைக்கின்றன. வடிகட்டிகள், படலங்கள், வலைகள், தோல்கள் மற்றும் சாரக்கட்டு வடிவில் மேலும் பொருட்களைப் பயன்படுத்தலாம் (படம். 1ஏ). எளிதில் கையாளுவதற்கும், வளர்ச்சியின் போது சேதத்தைத் தடுப்பதற்கும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட மாதிரிகள் ஒரு மைனுஷீட் திசு கேரியரின் அடிப்பகுதியில் வைக்கப்படுகின்றன (படம். 1பி). ஒரு பதற்றம் வளையத்தை கீழே அழுத்துவதன் மூலம் உயிரியல் பொருள் நிலையில் வைக்கப்படுகிறது (படம். 1சி). ஒரு திசு கேரியர் பொருத்தப்பட்ட பிறகு ஒரு பையில் மூடப்பட்டு கிருமி நீக்கம் செய்யப்படுகிறது. ஒரு திசு கேரியரின் மீது செல் விதைப்பு செல் விதைப்புக்கு ஏற்றப்பட்ட திசு கேரியர் 24 கிணறு கலாச்சார தட்டில் ஒரு ஃபோர்செப்ஸ் மூலம் மாற்றப்படுகிறது (படம். 2). ஒரு திசு கேரியர் கலாச்சார ஊடகத்தின் மேல் செல்களை குவிக்க ஒரு மட்டத்தில் சேர்க்கப்படுகிறது, இதனால் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பயோ மெட்டீரியல் வெறுமனே ஈரப்படுத்தப்படுகிறது. பின்னர் உயிரணுக்களின் ஒரு அலிகோட் ஒரு குழாய் மூலம் ஏற்றப்பட்ட பயோ மெட்டீரியலின் மேற்பரப்புக்கு மாற்றப்படுகிறது. ஒரு திசு கேரியருடன் ஒரு நிலையான கலாச்சார நெறிமுறை மேல் பக்கத்தில் செல்களை விதைப்பதன் மூலம் தொடங்கப்படலாம். ஒரு திசு கேரியரைத் திருப்பும்போது, செல்களை மறுபுறத்திலும் விதைக்க முடியும், இதனால் இரண்டு வெவ்வேறு உயிரணு வகைகளுடன் இணை வளர்ப்பு சோதனைகள் சாத்தியமாகும். ஒற்றை செல்கள் மட்டுமல்லாமல், ஒரு மெல்லிய திசு துண்டையும் ஒரு மினஷீட் திசு கேரியருக்குள் நெய்த வலையின் இரண்டு துண்டுகளுக்கு இடையில் பொருத்தலாம். கொலாஜன் தாள்கள் போன்ற மேலும் நெகிழ்வான பொருட்கள் ஒரு டிரம் தோல் போன்ற திசு கேரியரில் பயன்படுத்தப்படலாம். இடஞ்சார்ந்த பேரன்கைமா வளர்ச்சிக்கு [5,6,8] ஒரு செயற்கை இன்டர்ஸ்டிடியமாக ஒரு பாலியஸ்டர் தோலை ஏற்றுவதன் மூலம் கடைசியாக ஆனால் குறைந்தது சிறந்த முடிவுகள் பெறப்பட்டன. ஒவ்வொரு சிறப்பு திசுவிற்கும் ஒரு திசு கேரியருக்குள் மிகவும் தனிப்பட்ட இடஞ்சார்ந்த சூழல்களை உருவாக்க முடியும் என்பது வெளிப்படையானது. இணக்கமான வாசனை திரவியம் கல்ச்சர் கொள்கலன்கள் 24 கிணறு கல்ச்சர் தட்டுக்குள் நிலையான சூழல் ஊட்டச்சத்து மற்றும் ஹார்மோன்களின் குறைவுக்கு வழிவகுக்கிறது, வளர்சிதை மாற்றங்களின் கட்டுப்பாடற்ற அதிகரிப்பு மற்றும் காலப்போக்கில் பாராகிரைன் காரணிகளின் மிகைப்படுத்தலுக்கு வழிவகுக்கிறது என்று நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. இந்த காரணங்களால், 24 கிணறு வளர்ப்பு தட்டில் செல் விதைப்பின் குறுகிய காலத்திற்கு மட்டுமே ஒட்டும் செல்களைக் கொண்ட ஒரு மைனுஷீட் திசு கேரியர் பயன்படுத்தப்படுகிறது. இதன் விளைவாக, செல்கள் ஒட்டப்பட்ட பிறகு திசு கேரியர் ஒரு மாறும் திரவ சூழலை வழங்க ஒரு வாசனை கலாச்சார கொள்கலனுக்கு மாற்றப்படுகிறது. சிறப்பு திசுக்களின் தனிப்பட்ட தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்காக பல்வேறு வகையான வாசனை திரவிய வளர்ப்பு கொள்கலன்கள் கட்டப்பட்டன (படம். 3). ஒவ்வொரு பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார கொள்கலன்களும் கலாச்சார ஊடகத்தின் போக்குவரத்துக்கு குறைந்தபட்சம் ஒரு நுழைவாயில் மற்றும் ஒரு கடையை கொண்டுள்ளன. ஒரு கொள்கலனின் அடிப்படை பதிப்பு தொடர்ச்சியான நடுத்தர போக்குவரத்தின் கீழ் முறையே வளரும் திசுக்களை உயிரணுக்களின் எளிய குளியல் அனுமதிக்கிறது (படம். 4ஏ). ஒரு சாய்வு கொள்கலனில் திசு கேரியர் அடிப்பகுதிக்கும் மூடிக்கும் இடையில் வைக்கப்படுகிறது, இதனால் இருபுறமும் எபிடெலியாவுக்கான ஒரு பொதுவான சூழலைப் பிரதிபலிக்கும் தனிப்பட்ட ஊடகங்களை வழங்க முடியும் (படம். 4பி). மேலும் ஒரு கலாச்சார கொள்கலன் ஒரு வெளிப்படையான மூடி மற்றும் அடித்தளத்தால் ஆனது, இது திசு வளர்ச்சியின் போது நுண்ணோக்கி கண்காணிப்பை அனுமதிக்கிறது (படம். 4சி). கூடுதலாக, ஒரு வாசனை கல்ச்சர் கொள்கலன் ஒரு நெகிழ்வான சிலிகான் மூடியை வெளிப்படுத்த முடியும். ஒரு விசித்திரமான சுழல் மூலம் இந்த மூடிக்கு விசையைப் பயன்படுத்துவது குருத்தெலும்பு மற்றும் எலும்பு திசு பொறியியலில் தேவைக்கேற்ப ஒரு இயந்திர சுமையை உருவகப்படுத்துகிறது. ஒரு காது அல்லது பல்வேறு வகையான குருத்தெலும்பு போன்ற வடிவ திசுக்கள் ஒரு சிறப்பு திசு பொறியியல் கொள்கலனில் தனிப்பட்ட சாரக்கட்டு மூலம் உருவாக்கப்படலாம். இறுதியாக, சிறுநீரக தண்டு/பிறப்புறுப்பு உயிரணுக்களிலிருந்து பெறப்பட்ட குழாய்களின் இடஞ்சார்ந்த விரிவாக்கம் பாலியஸ்டர் தோலால் செய்யப்பட்ட செயற்கை இன்டர்ஸ்டிடியம் நிரப்பப்பட்ட ஒரு வாசனை திரவியம் கொள்கலனுக்குள் பெறப்படுகிறது. இறுதியாக, இந்த கொள்கலன்கள் அனைத்தும் ஒரு சிறப்பு பாலிகார்பனேட்டிலிருந்து (மக்ரோலோன்®) இயந்திரமயமாக்கப்படுகின்றன, இதனால் அவை அனைத்தும் பல பயன்பாடுகளுக்கு தானாக இணைக்கப்படலாம். வாசனை கல்ச்சர் சோதனைகளின் செயல்திறன் ஒரு வாசனை கல்ச்சர் கொள்கலனுக்குள் 37 டிகிரி செல்சியஸ் வெப்பநிலையை பராமரிக்க, ஒரு வெப்பத் தட்டு (மெடாக்ஸ்-நாகல், கீல், ஜெர்மனி) மற்றும் ஒரு கவர் மூடி (காட்டப்படவில்லை) வாரங்களுக்கு கலாச்சார சோதனைகளின் செயல்திறனின் போது பயன்படுத்தப்படுகின்றன (படம். 5, 7). மெதுவாக சுழலும் பெரிஸ்டால்டிக் பம்பைப் (ISMATEC, IPC N8, வெர்த்தைம், ஜெர்மனி) பயன்படுத்தி கலாச்சார ஊடகத்தின் போக்குவரத்து சிறப்பாக செய்யப்படுகிறது. இது ஒரு மணி நேரத்திற்கு 0.1 முதல் 5 மில்லி வரை சரிசெய்யக்கூடிய மற்றும் துல்லியமான பம்ப் விகிதங்களை வழங்க முடியும். சேமிப்பு பாட்டிலில் இருந்து வாசனை கல்ச்சர் கொள்கலன் வழியாக செல்லும் பாதையில் உள்ள செல்களை வழங்குவதற்காக பொருத்தப்பட்ட திசு கேரியர் வழியாக கொண்டு செல்லப்படுகிறது. எல்லா பக்கங்களிலிருந்தும் எப்போதும் புதிய ஊட்டச்சத்து மற்றும் சுவாச வாயுவுடன் நடுத்தர விநியோகத்தை கொண்டு செல்லும் போது ஒரு வாசனை கலாச்சார கொள்கலனுக்குள் திசு கேரியரின் சரியான வடிவியல் இடம் உத்தரவாதம் அளிக்கிறது. அதே நேரத்தில் இது வளர்சிதை மாற்ற பொருட்களின் உடலியல் குவிப்பு மற்றும் பாராகிரைன் காரணிகளின் மிகைப்படுத்தல் ஆகியவற்றைத் தடுக்கிறது. இந்த கட்டுப்படுத்தப்பட்ட சூழலை முழு கலாச்சாரக் காலத்திற்கும் பராமரிக்க, வளர்சிதை மாற்ற ஊடகம் ஒரு தனி கழிவு பாட்டிலில் சேகரிக்கப்படுகிறது. இதன் விளைவாக, நடுத்தர மறுசுழற்சி செய்யப்படவில்லை. வாசனை திரவிய வளர்ப்பின் போது pH இன் நிலைப்படுத்தல் பொதுவாக உயிரணு வளர்ப்பு சோதனைகள் ஒரு CO2 இன்குபேட்டரில் செய்யப்படுகின்றன. அத்தகைய வளிமண்டலத்தில் வாசனை திரவிய கலாச்சார சோதனைகள் செய்யப்படலாம். இருப்பினும், ஒரு ஆய்வக மேசையில் வளிமண்டல காற்றின் கீழ் வாசனை திரவியம் வளர்ப்பு சோதனைகளின் செயல்திறன் ஒரு சிறந்த தீர்வாகும், ஏனெனில் இது முழுமையான கையாளுதலை எளிதாக்குகிறது. இருப்பினும், இந்த விஷயத்தில் கலாச்சார ஊடகம் வளிமண்டல காற்றுடன் சரிசெய்யப்பட வேண்டும். ஒரு இன்குபேட்டருக்குள் 5 சதவீதம் கார்பன் டை ஆக்சைடு வளிமண்டலத்தில் ஊடகத்தை வைத்திருப்பது எப்போதும் 7.7 முதல் 7.4 வரை நிலையான pH ஐ பராமரிக்க ஒப்பீட்டளவில் அதிக அளவு NaHCO3 ஐக் கொண்டுள்ளது. அத்தகைய வடிவமைக்கப்பட்ட ஊடகம் ஒரு CO2 இன்குபேட்டருக்கு வெளியே வாசனை திரவிய வளர்ப்புக்கு பயன்படுத்தப்பட்டால், வளிமண்டல காற்றில் CO2 இன் குறைந்த உள்ளடக்கம் காரணமாக pH உடலியல் வரம்பிலிருந்து அதிக கார மதிப்புகளுக்கு மாறும். அந்த காரணத்திற்காக ஒரு CO2 இன்குபேட்டருக்கு வெளியே வாசனை திரவியம் சேர்ப்பதற்கு பயன்படுத்தப்படும் எந்த ஊடகமும் NaHCO3 செறிவைக் குறைப்பதன் மூலமும்/அல்லது HEPES (GIBCO/Invitrogen, Karlsruhe, ஜெர்மனி) அல்லது BUFFER ALL (Sigma-Aldrich-Chemi, München, ஜெர்மனி) போன்ற உயிரியல் இடையகங்களைச் சேர்ப்பதன் மூலமும் உறுதிப்படுத்தப்பட வேண்டும். உயிரியல் இடையக கரைசலின் அதிகரித்த அளவிலான அளவை ஒரு நடுத்தர அலிகோட்டுடன் கலப்பதன் மூலம் தேவையான அளவை எளிதில் தீர்மானிக்க முடியும். பின்னர் நடுத்தரமானது வளிமண்டல காற்றின் கீழ் 37 டிகிரி செல்சியஸில் ஒரு தெர்மோ பிளேட்டில் இரவு முழுவதும் சமநிலைப்படுத்தப்பட வேண்டும். எடுத்துக்காட்டாக, 50 mmol/L HEPES இன் பயன்பாடு அல்லது BUFFER ALL க்கு சமமானது (ca. 1 சதவீதம்) முதல் ஐஎம்டிஎம் வரை (இஸ்கோவின் மாற்றியமைக்கப்பட்ட டல்பெக்கோவின் மீடியம், ஜிஐபிசிஓ/இன்விட்ரோஜன்) ஒரு ஆய்வக அட்டவணையில் வளிமண்டல காற்றின் கீழ் நீண்ட கால வாசனை திரவியம் கலாச்சாரம் முழுவதும் 7,4 இன் நிலையான pH ஐ பராமரிக்கும். நடுத்தர அளவில் ஆக்சிஜன் கிடைப்பது ஒரு பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார பரிசோதனையில் ஐ. எம். டி. எம் போன்ற தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட ஊடகமான O2 இன் உயர் செறிவூட்டலைப் பெற ஒரு வாயு ஊடுருவக்கூடிய சிலிகான் குழாய் வழியாக கொண்டு செல்லப்பட வேண்டும். ஒரு சிலிகான் குழாயின் பயன்பாடு ஒரு மெல்லிய சுவர் (1 மிமீ), சிறிய உள் விட்டம் (1 மிமீ) மற்றும் அதன் நீட்டிக்கப்பட்ட நீளம் (1 மீ) காரணமாக வாயு பரிமாற்றத்திற்கு ஒரு பெரிய மேற்பரப்பை வழங்குகிறது. எடுத்துக்காட்டாக, ஒரு நிலையான பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார பரிசோதனையின் போது வளிமண்டல காற்றுக்கு எதிராக சமப்படுத்தப்பட்ட ஐஎம்டிஎம் (3024 மி. கி/எல் நாக்சோ 3,50 எம்எம்ஓஎல்/எல் ஹெப்ஸ்) பகுப்பாய்வு குறைந்தது 160 எம்எம்எச்ஜி ஓ 2 [7] நிலையான பகுதி அழுத்தங்களைக் காட்டுகிறது. ஆக்ஸிஜன் உள்ளடக்கத்தின் பண்பேற்றம் வளரும் செல்கள் மற்றும் திசுக்களுக்கு மிகவும் தனிப்பட்ட ஆக்ஸிஜன் தேவைகள் உள்ளன என்பது நிரூபிக்கப்பட்டுள்ளது. இந்த காரணத்தால், ஆக்ஸிஜனின் உள்ளடக்கத்தை தனிப்பட்ட வாசனை திரவியம் வளர்ப்பு சோதனைகளில் மாற்றியமைக்க முடியும் என்பது முக்கியம். தொழில்நுட்ப தீர்வு ஒரு எரிவாயு பரிமாற்றி தொகுதி ஒரு எரிவாயு நுழைவாயில் மற்றும் வெளியேறும் (படம். 6ஏ). மேலும் நடுத்தர போக்குவரத்துக்கான நீண்ட மெல்லிய சுவர் சிலிக்கான் குழாய் கொண்ட ஒரு சுழல் தொகுதிக்குள் பொருத்தப்பட்டுள்ளது. குழாய் மிகவும் வாயு-ஊடுருவக்கூடியதாக இருப்பதால், எரிவாயு பரிமாற்ற தொகுதியின் கலாச்சார நடுத்தர மற்றும் உள் வளிமண்டலத்திற்கு இடையில் வாயுக்களின் உகந்த பரவலை இது உறுதி செய்கிறது. இதன் விளைவாக, தொகுதி வழியாக ஒரு குறிப்பிட்ட வாயு கலவையின் நிலையான ஓட்டத்தால் விரும்பிய வாயு வளிமண்டலத்தை சரிசெய்ய முடியும். இந்த வழியில் ஆக்ஸிஜன் அல்லது வேறு எந்த வாயுக்களின் உள்ளடக்கத்தையும் ஊடகத்தில் பரவுவதன் மூலம் மாற்றியமைக்க முடியும். இந்த எளிய நெறிமுறையைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம், முற்றிலும் மலட்டுத்தன்மையற்ற நிலைமைகளின் கீழ் நீண்ட கால கலாச்சார சோதனைகளின் போது கொண்டு செல்லப்பட்ட ஊடகத்திற்குள் ஆக்ஸிஜன் பகுதி அழுத்தத்தைக் குறைக்க முடிந்தது [7]. தீங்கு விளைவிக்கும் வாயு குமிழிகளை அகற்றுவது வாசனை கல்ச்சர் சோதனைகளைச் செய்வது கலாச்சார ஊடகத்தின் மெதுவான போக்குவரத்தின் போது வாயு குமிழிகள் உருவாகின்றன என்பதை எப்போதும் கருத்தில் கொள்ள வேண்டும். சேமிப்பு பாட்டிலில் நடுத்தர உறிஞ்சும் போது, குழாய்க்குள் கொண்டு செல்லும் போது, கலாச்சார கொள்கலனுக்குள் விநியோகிக்கும் போது மற்றும் கழிவு பாட்டிலுக்கு செல்லும் வழியில் அகற்றப்படும் போது அவை எழுகின்றன. அறியப்படாத காரணங்களால் வாயு குமிழிகள் குறிப்பாக குழாய்கள், இணைப்பிகள் மற்றும் வாசனை திரவிய கொள்கலன்களுக்கு இடையிலான பொருள் மாற்றங்களில் குவிகின்றன. முதலில் இந்த வாயு குமிழிகள் மிகவும் சிறியவை, அவை மனித கண்ணால் கவனிக்கப்பட முடியாது, ஆனால் கலாச்சார ஊடகத்தின் தொடர்ச்சியான போக்குவரத்தின் போது அவை அளவு அதிகரிக்கிறது மற்றும் நடுத்தர ஓட்டத்தை பெருமளவில் தடுக்கும் ஒரு எம்போலஸை உருவாக்க முடியும். ஒரு கலாச்சார கொள்கலனுக்குள் வாயு குமிழிகள் நடுத்தர விநியோகத்தின் பிராந்திய பற்றாக்குறைக்கு வழிவகுக்கின்றன, மேலும் திரவ தொடர்ச்சியில் இடைவெளிகளை ஏற்படுத்துகின்றன, இதனால் பெரிய திரவ அழுத்தம் மாறுகிறது. ஒரு சாய்வு வாசனை கலாச்சார கொள்கலனில், இரண்டு ஊடகங்கள் ஒரே வேகத்தில் கொண்டு செல்லப்படுகின்றன, எம்பாலிக் விளைவுகள் அழுத்த வேறுபாடுகளுக்கு வழிவகுக்கும், இதில் உள்ள எபிடெலியல் தடையை அழிக்கும் [5,9]. ஒரு பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சார பரிசோதனைக்குள் வாயு குமிழிகளின் செறிவைத் தவிர்ப்பதற்காக, ஒரு வாயு விரிவாக்க தொகுதி உருவாக்கப்பட்டது (படம். 6பி). இந்த தொகுதி போக்குவரத்தின் போது ஊடகத்திலிருந்து வாயு குமிழிகளை நீக்குகிறது. நடுத்தர வாயு விரிவாக்க தொகுதிக்குள் நுழையும் போது, அது ஒரு சிறிய நீர்த்தேக்கத்திற்குள் உயர்ந்து, ஒரு தடையை கீழே விழுவதற்கு முன்பு விரிவடைகிறது. இந்த செயல்பாட்டின் போது வாயு குமிழிகள் வாயு விரிவாக்க தொகுதியின் மேற்புறத்தில் உள்ள ஊடகத்திலிருந்து பிரிக்கப்படுகின்றன. இதன் விளைவாக, கொள்கலனை விட்டு வெளியேறும் நடுத்தரமானது ஆக்ஸிஜன்-நிறைவுற்றது, ஆனால் வாயு குமிழிகள் இல்லாதது [8,9]. பயன்பாடுகளின் பரந்த ஸ்பெக்ட்ரம் கடந்த ஆண்டுகளில் மைனுஷீட் வாசனை திரவியம் கலாச்சார அமைப்பைக் கையாளும் ஏராளமான கட்டுரைகள் வெளியிடப்பட்டன. திசு பொறியியல், உயிரியல் பொருள் ஆராய்ச்சி மற்றும் மேம்பட்ட மருந்து மருந்து நச்சுத்தன்மை சோதனை ஆகியவற்றில் பயன்படுத்தப்படும் சிறந்த உயிரணு உயிரியல் தரத்தில் சிறப்பு திசுக்களை உருவாக்க மாடுலர் அமைப்பு பயன்படுத்தப்பட்டது என்பதை பரந்த ஸ்பெக்ட்ரம் விளக்குகிறது. இந்த பயன்பாடுகளின் முழுமையான பட்டியல் 'புரோசிடிங்ஸ் இன் பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சாரம்' என்ற தரவு வங்கியில் காணப்படுகிறது ('வெளிப்புற இணைப்புகள்' ஐப் பார்க்கவும்). பல காப்புரிமைகள் மூலம் நிரூபிக்கப்பட்டபடி (DE 39 23 279, DE 42 00 446, DE 42 08 805, DE 44 43 902, DE 19530 556, DE 196 48 876 C2, DE 199 52 847 B4, US 5 190 878, US 5 316 945, US 5 665 599, J 2847669, DE 10 2005002 938, PA 10 2004 054 125.6, PA 10 2005001 747.9, காப்புரிமைகள் நிலுவையில் உள்ளன) வில் டபிள்யூ. மினுத் வழங்கப்பட்ட மினஷீட் வாசனை கலாச்சார அமைப்பைக் கண்டுபிடித்துள்ளார். கடந்த ஆண்டுகளில் லூசியா டென்க் மற்றும் வில் டபிள்யூ மினுத் ஆகியோரால் மைனுஷீட் வாசனை திரவிய கலாச்சார அமைப்புடன் ஏராளமான சோதனை முயற்சிகள் மேற்கொள்ளப்பட்டன. சோதனை வேலை தற்போது காயமடைந்த சிறுநீரக பாரன்கைமாவை சரிசெய்ய ஒரு செயற்கை பாலியஸ்டர் இன்டர்ஸ்டிடியத்தை உருவாக்குவதில் கவனம் செலுத்துகிறது. 1992 ஆம் ஆண்டில் மைனுஷீட் வாசனை திரவியம் கலாச்சார அமைப்பு ஜெர்மனியின் முனிச்சில் 'எதிர்கால சவால்' என்ற பிலிப் மோரிஸ் ஆராய்ச்சி விருதைப் பெற்றது. இந்த விருதை ஹென்றி கிஸ்ஸிங்கர், ஹான்ஸ் ஜோச்சிம் ஃப்ரெட்ரிக்ஸ் மற்றும் பால் முல்லர் ஆகியோர் வழங்கினர். மினஷீட் வாசனை திரவிய கலாச்சார அமைப்பை சந்தையில் அறிமுகப்படுத்த, கேத்தரினா லோரென்ஸ்-மினுத் இலாப நோக்கற்ற மினூசெல்ஸ் மற்றும் மினூடிஸ்யூ வெர்ட்ரீப்ஸ் ஜி. எம். பி. எச் (டி-93077 பேட் அப்பாச்/ஜெர்மனி) ஆகியவற்றை நிறுவினார். வெளிப்புற இணைப்புகள் வாசனை கலாச்சாரத்தில் நடவடிக்கைகள் பிலிப் மோரிஸ் ஸ்டிஃப்டங் மைனுஷீட் வலைத்தள குறிப்புகள் 1. எலாட் ஜி, ஹென்கென்ஸ் டி, பாபேலூ பி, ஸ்னைக்கர்ஸ் எஸ், வின்கென் எம், வான்ஹேக்கே டி, ரோஜியர்ஸ் வி (2006) தனிமைப்படுத்தப்பட்ட ஹெபடோசைட்டுகள் மற்றும் அவற்றின் கலாச்சாரங்களின் விலகல் செயல்முறையின் அடிப்படையிலான மூலக்கூறு வழிமுறைகள். கர்ர் மருந்து மெட்டாப் 7 (6): 629-60. 2. ஷூ ஈ, ஹாஃப்மேன் எஸ், ஸ்டோக் கே, நோட்போம் எச், முல்லர் ஆர், ராட்டர் என் (2011) 3D இல் காண்ட்ரோசைட் மறுபரிசீலனைஃ ஒட்டுதல் தள அடர்த்தி மற்றும் அடி மூலக்கூறு நெகிழ்ச்சித்தன்மையின் விளைவு. ஜே பயோமெட் மெட்டீரியல் ரெஸ் ஏஃ டிஓஐ 10.1002/jbm.a.33226. 3. ஜாங் ஒய், லி டிஎஸ், லீ எஸ். டி, வாவ்ரோவ்ஸ்கி கேஏ, செங் கே, கலாங் ஜி, மல்லியாராஸ் கே, ஆபிரகாம் எம்ஆர், வாங் சி, மார்பன் இ (2010) பாலூட்டி கேடியோமயோசைட்டுகளின் வேறுபாடு மற்றும் பெருக்கம் 2010 ப்லோஸ் ஒன் 5 (9): ஈ12559. 4. லியு ஒய், ஜியாங் எக்ஸ், யூ எம்கே, டோங் ஜே, ஜாங் எக்ஸ், சாங் எல். எல், சுங் ஒய். டபிள்யூ, லி டி, சான் எச். சி. (2010) எலும்பு மஜ்ஜையில் இருந்து பெறப்பட்ட நரம்பணுக்களிலிருந்து சிதைவு மற்றும் டிரான்ஸ்லைனேஜ் மறுபரிசீலனை மூலம் எபிடெலியல் செல்களுக்கு மாறுதல். செல் பயோல் இன்ட் 34 (11): 1075-83. 5. மினுத் டபிள்யூ. டபிள்யூ மற்றும் டென்க் எல் 2011 இணக்கமான உயிரணுக்களுடன் மேம்பட்ட கலாச்சார சோதனைகள். ஒற்றை செல்கள் முதல் வாசனை திரவியம் வளர்ப்பில் சிறப்பு திசுக்கள் வரை. ISBN Nr. 978-3-88246-330-9, http://epub.uni-regensburg.de/21484 6. மினுத் டபிள்யூ டபிள்யூ, டெங்க் எல், கிளாஷௌசர் ஏ 2010 பல சிறப்பு திசுக்களின் தலைமுறைக்கான ஒரு மாடுலர் கலாச்சார அமைப்பு. உயிர்ப்பொருட்கள் 31:2945-2954. 7. ஸ்ட்ரெல் ஆர், ஷூமேக்கர் கே, மினுத் டபிள்யூ டபிள்யூ 2004 பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சாரத்தில் கரு சிறுநீரக ஆய்வுகளுக்கு சுவாச வாயு விநியோகத்தை கட்டுப்படுத்தியது. திசு ஆங்கிலம் 10 (7-8): 1196-203. 8. மினுத் டபிள்யூ டபிள்யூ, ஸ்ட்ரெல் ஆர், ஷூமேக்கர் கே 2004 திசு தொழிற்சாலை செயல்பாட்டு திசுக்களின் இன் விட்ரோ தலைமுறைக்கான ஒரு மாடுலர் அமைப்பின் கருத்தியல் வடிவமைப்பு. திசு ஆங்கிலம் 10:285-294. 9. மினுத் டபிள்யூ டபிள்யூ, டென்க் எல், ரோஸ்கர் ஏ 2009 கிரேடியன்ட் பெர்ஃப்யூஷன் கலாச்சாரம்-பயோமெடிசினில் எபிடெலியாவுக்கான திசு-குறிப்பிட்ட சூழலை உருவகப்படுத்துதல். ஜே எபிடெலியல் உயிரியல் மற்றும் மருந்தியல் 2:1-13. உயிரியல் பொருட்கள் உயிரியல் மருத்துவ உயிரணு வளர்ப்பு மூலக்கூறு உயிரியல் நுட்பங்கள்