Endospore staining
எண்டோஸ்போர் கறை என்பது ஒரு பாக்டீரியா மாதிரியில் எண்டோஸ்போர்ஸ் இருப்பதை அடையாளம் காண பாக்டீரியாலஜியில் பயன்படுத்தப்படும் ஒரு நுட்பமாகும். பாக்டீரியாவிற்குள், எண்டோஸ்போர்கள் தீவிர நிலைமைகளைத் தக்கவைக்கப் பயன்படுத்தப்படும் பாதுகாப்பு கட்டமைப்புகள் ஆகும், இதில் அதிக வெப்பநிலை இரசாயனங்களுக்கு அதிக எதிர்ப்பை ஏற்படுத்துகிறது. எண்டோஸ்போர்களில் ஏ. டி. பி குறைவாகவோ அல்லது இல்லாமலோ உள்ளது, இது அவை எவ்வளவு செயலற்றதாக இருக்கும் என்பதைக் குறிக்கிறது. எண்டோஸ்போர்களில் கெராடினால் ஆன கடினமான வெளிப்புற பூச்சு உள்ளது, இது நியூக்ளிக் டிஎன்ஏ மற்றும் பிற தழுவல்களிலிருந்து அவற்றைப் பாதுகாக்கிறது. எண்டோஸ்போர்கள் தாவர உயிரணுக்களாக மறுசீரமைக்க முடியும், இது ஒரு பாதுகாப்பு தன்மையை வழங்குகிறது, இது எளிய கறை மற்றும் கிராம் கறை போன்ற சாதாரண நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி கறை படுவதை கடினமாக்குகிறது. எண்டோஸ்போர் கறைக்கான சிறப்பு நுட்பங்களில் ஷேஃபர்-ஃபுல்டன் கறை மற்றும் மொய்லர் கறை ஆகியவை அடங்கும். எண்டோஸ்போர்கள் முதன்முதலில் 1876 ஆம் ஆண்டில் விஞ்ஞானிகள் கோன் மற்றும் கோச் ஆகியோரால் ஆய்வு செய்யப்பட்டன. மெத்திலீன் நீலம், சஃப்ரானின் மற்றும் கார்போல் ஃபுச்சின் போன்ற எளிய கறைகளைப் பயன்படுத்தி எண்டோஸ்போர்களை கறைபடுத்த முடியாது என்று கண்டறியப்பட்டது. இந்த விஞ்ஞானிகள், ஒரு சிலருடன் சேர்ந்து, வித்திகள் செயலற்றவை மற்றும் வெப்பத்தை எதிர்க்கின்றன என்பதைக் கண்டறிந்தனர். 1900 களின் முற்பகுதியில், ஆராய்ச்சியாளர்கள் இந்த எண்டோஸ்போர்களில் இருந்து நோய் மற்றும் தொற்றுநோயை மேம்படுத்த மாற்று முறைகளைக் கண்டுபிடிக்க முயன்றனர். 1922 ஆம் ஆண்டில், டோர்னர் எண்டோஸ்போர்களை கறைபடுத்துவதற்கான ஒரு முறையை வெளியிட்டார். எண்டோஸ்போர்கள் பச்சை நிறமாகவும், தாவர உயிரணுக்கள் இளஞ்சிவப்பு சிவப்பு நிறமாகவும் தோன்றும் ஒரு வேறுபட்ட கறை நுட்பத்தை அவர் கண்டுபிடித்தார். டோர்னர் இந்த செயல்பாட்டில் வெப்பத்தை ஒரு படியாகப் பயன்படுத்தினார், ஆனால் அது நேரத்தை எடுத்துக்கொண்டது, எனவே 1933 ஆம் ஆண்டில், ஷேஃபர் மற்றும் ஃபுல்டன் அவரது முறையை மாற்றினர். ஷேஃபர் மற்றும் ஃபுல்டன் ஆகியோர் பன்சென் பர்னரைப் பயன்படுத்தி வெப்பமாக்கல் செயல்முறையை மிகவும் விரைவாக செய்தனர். இந்த முறை மிகவும் பயனுள்ளதாக இல்லை என்றாலும், இது டோர்னரின் முறையை விட மிகவும் வசதியானது. இந்த மேம்பட்ட முறை ஒரு விரைவான மற்றும் எளிதான சோதனையை வழங்கியது மற்றும் வித்திகள் சாயங்களுக்கு மிகவும் எளிதில் பாதிக்கப்படக்கூடியதாக இருக்க அனுமதித்தது. இன்றுவரை, பாக்டீரியாவை அடையாளம் காண உதவும் வகையில் ஷேஃபர்-ஃபுல்டன் கறை இன்னும் செய்யப்படுகிறது. எண்டோஸ்போர்கள் உலர்த்துதல் மற்றும் உறைதல் போன்ற பல கடினமான சூழ்நிலைகளில் பல தசாப்தங்களாக நீடிக்கும். ஏனென்றால், எண்டோஸ்போர் உள்ளே உள்ள டிஎன்ஏ நீண்ட காலத்திற்கு உயிர்வாழ முடியும். பெரும்பாலான பாக்டீரியாக்கள் அவற்றின் அதிக எதிர்ப்பின் காரணமாக எண்டோஸ்போர்களை உருவாக்க முடியாது, ஆனால் சில பொதுவான இனங்கள் பேசிலஸ் (100 க்கும் மேற்பட்ட இனங்கள்) மற்றும் க்ளோஸ்ட்ரிடியம் (160 க்கும் மேற்பட்ட இனங்கள்) ஆகும். - ஆந்த்ராக்ஸை ஏற்படுத்தும் பேசிலஸ் ஆந்த்ராசஸ்-பேசிலஸ் செரியஸ்-இரண்டு வகையான உணவு நச்சுத்தன்மையை ஏற்படுத்தும்ஃ எமெடிக் மற்றும் வயிற்றுப்போக்கு-பேசிலஸ் சப்டிலிஸ்-மண்ணில் காணப்படுகிறது-க்ளோஸ்ட்ரிடியம் டெடானி,-பூட்டு தாடை (டெட்டனஸ்) மற்றும் கடுமையான பக்கவாதத்தை ஏற்படுத்தும் வித்தி. க்ளோஸ்ட்ரிடியம் போடுலினம்-சரியாக பதிவு செய்யப்படாத உணவுகளில் காணப்படும் வித்தி. க்ளோஸ்ட்ரிடியம் போடுலினம் சில நேரங்களில் போடாக்ஸாக விற்கப்படுகிறது மற்றும் நரம்பு பரவுவதைத் தடுக்கிறது. - க்ளோஸ்ட்ரிடியம் டிஃபிசைல்-பெருங்குடலில் வீக்கத்தை ஏற்படுத்துகிறது, பெரும்பாலும் மற்ற நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பிகளிலிருந்து. வயிற்றுப்போக்கு, வயிற்று வலி மற்றும் காய்ச்சல் ஆகியவை அறிகுறிகளாகும். அடையாளம் காணக்கூடிய எண்டோஸ்போர்களின் வடிவம் மற்றும் இருப்பிட வகைகள் ஃப்ரீ எண்டோஸ்போர்கள், சென்ட்ரல் எண்டோஸ்போர்கள் (செல்லின் நடுப்பகுதி), சப்டெர்மினல் (செல்லின் இறுதி மற்றும் நடுப்பகுதிக்கு இடையில்) மற்றும் டெர்மினல் (செல்லின் முனை) எண்டோஸ்போர்கள் ஆகியவை அடங்கும். முனையம் அல்லது துணை முனையின் கலவையும் இருக்கலாம். எண்டோஸ்போர்களை வடிவம், கோள அல்லது நீள்வட்ட (ஓவல்), உயிரணுவுடன் தொடர்புடைய அளவு மற்றும் அவை உயிரணுவை வீங்கியதாகத் தோற்றமளிக்கிறதா இல்லையா என்பதைப் பொறுத்து வேறுபடுத்தலாம். ஷேஃபர்-ஃபுல்டன் கறைப்படுத்தும் முறையில், மலாக்கைட் பச்சை நிறத்தைக் கொண்ட ஒரு முதன்மை கறை பாக்டீரியாவை ஆவியாக்குவதன் மூலம் வித்திக்குள் கட்டாயப்படுத்தப்படுகிறது. வித்திகளை கறைபடுத்த மலாக்கைட் பச்சை நிறத்தை ஸ்லைடில் 15 நிமிடங்கள் அல்லது அதற்கு மேல் வைக்கலாம். அவற்றின் அடர்த்தி காரணமாக வித்திகள் கறைபடுவதற்கு நீண்ட நேரம் எடுக்கும், எனவே இந்த வேறுபட்ட கறையைச் செய்யும்போது வெப்பம் மோர்டண்டாக செயல்படுகிறது. மலாக்கைட் பச்சை நீரில் கரையக்கூடியது, எனவே தாவர உயிரணுக்கள் மற்றும் வித்தி தாய் உயிரணுக்களை வடிகட்டிய தண்ணீரால் நிறமாற்றம் செய்யலாம் மற்றும் 0.5 சதவீதம் சஃப்ரானின் மூலம் எதிர்க்கப்படலாம். இறுதியில், ஒரு சரியான ஸ்மீயர் எண்டோஸ்போரை சிவப்பு அல்லது இளஞ்சிவப்பு நிற செல்லுக்குள் ஒரு பச்சை புள்ளியாகக் காண்பிக்கும். மைக்கோபாக்டீரியம் இந்த வகை கறை படியும் செயல்முறையை எதிர்கொள்ளும் ஒரு தடையாக உள்ளது, ஏனெனில் இது எந்த எண்டோஸ்போர்களையும் உற்பத்தி செய்யாவிட்டாலும் பச்சை நிறத்தில் இருக்கும். இது அதன் மெழுகு செல் சுவர் காரணமாகும், இது நிறமாற்ற செயல்முறைக்குப் பிறகும் மலாக்கைட் பச்சை சாயத்தைத் தக்க வைத்துக் கொள்கிறது. இந்த குறிப்பிட்ட வகை பாக்டீரியத்தைப் பற்றிய கூடுதல் தகவல்களைப் பெறுவதற்கு அமில-வேகமான கறை என்று அழைக்கப்படும் வேறு வகையான கறைகள் செய்யப்பட வேண்டும். கறைப்படுத்தும் செயல்முறை அசெப்டிக் நுட்பத்தைப் பயன்படுத்தி, விரும்பிய உயிரினத்துடன் வெப்ப நிலையான ஸ்லைடைத் தயாரித்து காற்றில் உலர்த்தவும். கொதிக்கும் நீர் குளியல் தயார் செய்யுங்கள். ஒரு துண்டு காகித துண்டுடன் ஸ்லைடை மூடி, தண்ணீர் குளியல் மீது கறை ரேக் மீது வைக்கவும். காகித துண்டுகளை ஸ்லைடில் மலாக்கைட் கிரீன் (முதன்மை கறை) கொண்டு நிரப்பவும். 5 முதல் 7 நிமிடங்கள் (மோர்டான்ட்) வரை ஸ்லைடை ஆவியாக்குங்கள். நேரம் முடிந்த பிறகு, ஃபோர்செப்ஸைப் பயன்படுத்தி நீர் குளியலிலிருந்து ஸ்லைடை கவனமாக அகற்றவும். காகிதத் தொப்பியைக் கழற்றவும். ஸ்லைடு குளிர்விக்கட்டும், பின்னர் கறை படிந்த ரேக்கின் மீது ஃபோர்செப்ஸைப் பயன்படுத்தி, ஓட்டம் தெளிவாக இருக்கும் வரை வடிகட்டிய தண்ணீரில் மெதுவாக துவைக்கவும் (டிகலரைசர்). ஏதேனும் அதிகப்படியான தண்ணீரை ஊற்றி, ஒரு நிமிடத்திற்கு சஃப்ரானின் (கவுண்டர்ஸ்டெய்ன்) கொண்டு ஸ்டெய்னிங் ரேக் மற்றும் ஃப்ளட் மீது ஸ்லைடு வைக்கவும். அதிகப்படியான சஃப்ரானினை வடிகட்டிய தண்ணீரில் மெதுவாக துவைத்து, கவனமாக இருபுறமும் உலர வைக்கவும். ஸ்லைடு உலர்ந்திருக்கும் போது, எண்ணெய் மூழ்கும் நோக்கத்தின் (100X) கீழ் நுண்ணோக்கியின் கீழ் ஸ்லைடைப் பார்க்கவும். குறிப்புகள் கறைபடிந்த நுண்ணுயிரியல் நுட்பங்கள் பாக்டீரியாலஜி நுண்ணோக்கி