Cytometry
சைட்டோமெட்ரி என்பது உயிரணுக்களின் எண்ணிக்கை மற்றும் பண்புகளின் அளவீடு ஆகும். உயிரணு அளவு, உயிரணு எண்ணிக்கை, உயிரணு உருவவியல் (வடிவம் மற்றும் அமைப்பு), உயிரணு சுழற்சி கட்டம், டிஎன்ஏ உள்ளடக்கம் மற்றும் உயிரணு மேற்பரப்பில் அல்லது சைட்டோபிளாஸத்தில் குறிப்பிட்ட புரதங்கள் இருப்பது அல்லது இல்லாதது ஆகியவை சைட்டோமெட்ரிக் முறைகளால் அளவிடக்கூடிய மாறிகள் ஆகும். முழுமையான இரத்த எண்ணிக்கை போன்ற பொதுவான இரத்த பரிசோதனைகளில் இரத்த அணுக்களை வகைப்படுத்தவும் எண்ணவும் சைட்டோமெட்ரி பயன்படுத்தப்படுகிறது. இதே பாணியில், உயிரணு உயிரியல் ஆராய்ச்சி மற்றும் மருத்துவ நோயறிதல் ஆகியவற்றில் சைட்டோமெட்ரி பயன்படுத்தப்படுகிறது, இது புற்றுநோய் மற்றும் எய்ட்ஸ் போன்ற நோய்களுடன் தொடர்புடைய பரந்த அளவிலான பயன்பாடுகளில் செல்களை வகைப்படுத்துகிறது. சைட்டோமெட்ரிக் சாதனங்கள் பட சைட்டோமீட்டர்கள் பட சைட்டோமெட்ரி என்பது சைட்டோமெட்ரியின் பழமையான வடிவமாகும். பட சைட்டோமீட்டர்கள் ஒளியியல் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி அதிக எண்ணிக்கையிலான செல்களை நிலையான இமேஜிங் செய்வதன் மூலம் செயல்படுகின்றன. பகுப்பாய்விற்கு முன், செல்கள் பொதுவாக மாறுபாட்டை மேம்படுத்துவதற்கோ அல்லது ஃப்ளோரோக்ரோம்களுடன் பெயரிடுவதன் மூலம் குறிப்பிட்ட மூலக்கூறுகளைக் கண்டறிவதற்கோ கறை படிந்துள்ளன. பாரம்பரியமாக, உயிரணுக்கள் கையால் எண்ணுவதற்கு உதவ ஒரு ஹீமோசைட்டோமீட்டருக்குள் பார்க்கப்படுகின்றன. டிஜிட்டல் கேமரா அறிமுகப்படுத்தப்பட்டதிலிருந்து, 1990 களின் நடுப்பகுதியில், பட சைட்டோமீட்டர்களின் தானியங்கி நிலை சீராக அதிகரித்துள்ளது. இது எளிய செல் கவுண்டர்கள் முதல் அதிநவீன உயர் உள்ளடக்க ஸ்கிரீனிங் அமைப்புகள் வரை தானியங்கி பட சைட்டோமீட்டர்களின் வணிக ரீதியான கிடைக்கும் தன்மைக்கு வழிவகுத்தது. ஓட்டம் சைட்டோமீட்டர்கள் நுண்ணோக்கியை தானியக்கமாக்குவதில் ஆரம்பகால சிரமங்கள் காரணமாக, ஓட்டம் சைட்டோமீட்டர் 1950 களின் நடுப்பகுதியில் இருந்து சைட்டோமெட்ரிக் சாதனத்தில் ஆதிக்கம் செலுத்துகிறது. ஓட்டம் சைட்டோமீட்டர்கள் ஓட்டம் நுட்பங்களைப் பயன்படுத்தி ஒற்றை செல்களை சீரமைப்பதன் மூலம் செயல்படுகின்றன. செல்கள் ஒளியியல் ரீதியாகவோ அல்லது கூல்டர் கொள்கை எனப்படும் மின் மின்மறுப்பு முறையைப் பயன்படுத்துவதன் மூலமோ வகைப்படுத்தப்படுகின்றன. ஒளியியல் ரீதியாக வகைப்படுத்தப்படும்போது குறிப்பிட்ட மூலக்கூறுகளைக் கண்டறிய, செல்கள் பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில் பட சைட்டோமீட்டர்களால் பயன்படுத்தப்படும் அதே வகை ஃப்ளோரோக்ரோம்களால் கறைபடிந்துள்ளன. ஃப்ளோ சைட்டோமீட்டர்கள் பொதுவாக பட சைட்டோமீட்டர்களை விட குறைவான தரவை வழங்குகின்றன, ஆனால் கணிசமாக அதிக செயல்திறனைக் கொண்டுள்ளன. செல் சார்ட்டர்கள் என்பது செல்களை அவற்றின் பண்புகளுக்கு ஏற்ப வரிசைப்படுத்தும் திறன் கொண்ட ஓட்டம் சைட்டோமீட்டர்கள் ஆகும். இன்க்ஜெட் அச்சுப்பொறிகளில் பயன்படுத்தப்படுவதைப் போன்ற தொழில்நுட்பத்தைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் வரிசைப்படுத்தல் அடையப்படுகிறது. திரவ ஓட்டம் ஒரு இயந்திர அதிர்வு மூலம் நீர்த்துளிகளாக பிரிக்கப்படுகிறது. நீர்த்துளிகளுக்குள் உள்ள உயிரணுவின் பண்புகளின்படி நீர்த்துளிகள் பின்னர் மின்சாரத்தால் சார்ஜ் செய்யப்படுகின்றன. அவற்றின் மின்னூட்டத்தைப் பொறுத்து, நீர்த்துளிகள் இறுதியாக ஒரு மின்சார புலத்தால் வெவ்வேறு கொள்கலன்களாக திசை திருப்பப்படுகின்றன. டைம்-லேப்ஸ் சைட்டோமீட்டர்கள் ஒளி-உமிழும் டையோட்கள் போன்ற வெப்பத்தை உருவாக்காத ஒளி மூலங்களைப் பயன்படுத்துவது டைம்-லேப்ஸ் சைட்டோமீட்டர்களின் முக்கிய பண்பு ஆகும். இது ஒரு வழக்கமான செல் கலாச்சார இன்குபேட்டருக்குள் ஒரு டைம்-லேப்ஸ் சைட்டோமீட்டரை வைக்க அனுமதிக்கிறது, இது இன்குபேட்டருக்குள் வெப்பம் கட்டப்படாமல் செல்லுலார் செயல்முறைகளை தொடர்ந்து கண்காணிக்க உதவுகிறது. ஹீமோசைட்டோமீட்டர் வரலாறு சைட்டோமெட்ரியின் ஆரம்பகால வரலாறு இரத்த அணுக்களின் எண்ணிக்கையின் வளர்ச்சியுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது. கார்ல் வான் வியரோர்ட், லூயிஸ்-சார்லஸ் மலாசெஸ், கார்ல் புர்கர் மற்றும் பிறரின் பணியின் மூலம் 19 ஆம் நூற்றாண்டின் பிற்பகுதியில் இரத்த அணுக்களின் செறிவை இரத்த அணுக்களை எண்ணும் அறை, ஹீமோசைட்டோமீட்டர் மற்றும் ஒளியியல் நுண்ணோக்கி ஆகியவற்றைப் பயன்படுத்தி துல்லியமாக அளவிட முடியும். 1950கள் வரை இரத்த அணுக்களைக் கணக்கிடுவதற்கான நிலையான முறையாக ஹீமோசைட்டோமீட்டர் இருந்தது. இரத்த அணுக்களை எண்ணும் பயன்பாடுகளில் ஹீமோசைட்டோமீட்டர் இப்போது எலக்ட்ரானிக் செல் கவுண்டர்களால் மாற்றப்பட்டுள்ளது. இருப்பினும், செல் வளர்ப்பு ஆய்வகங்களில் செல்களை எண்ணுவதற்கு ஹீமோசைட்டோமீட்டர் இன்னும் பயன்படுத்தப்படுகிறது. ஒரு நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி கணக்கிடும் கையால் செய்யப்படும் பணி, சிறிய தானியங்கி பட சைட்டோமீட்டர்களால் எடுக்கப்படுகிறது. ஃப்ளோரசன்ஸ் நுண்ணோக்கி 1904 ஆம் ஆண்டில், ஜெனாவில் உள்ள கார்ல் ஜீஸில் மோரிட்ஸ் வான் ரோர் மற்றும் ஆகஸ்ட் கோஹ்லர் ஆகியோர் முதல் புற ஊதா நுண்ணோக்கியை உருவாக்கினர். நுண்ணோக்கியின் நோக்கம் காட்சி ஒளியை விட குறுகிய அலைநீளத்துடன் ஒளியைப் பயன்படுத்துவதன் மூலம் அதிக ஒளியியல் தெளிவுத்திறனைப் பெறுவதாகும். இருப்பினும், உயிரியல் பொருட்களைக் கவனிக்கும் போது அவர்கள் தன்னியக்க ஃப்ளோரசன்ஸில் சிரமங்களை அனுபவித்தனர். அதிர்ஷ்டவசமாக, ஃப்ளோரசன்ஸின் திறனை கோஹ்லர் கண்டார். ஃப்ளோரசன்ஸ் கிளர்ச்சி ஒளிக்கான வடிகட்டுதல் நுட்பம் 1910 ஆம் ஆண்டில் ஹென்ரிச் லெஹ்மனால் ஜீஸ்ஸில் உருவாக்கப்பட்டது, இது ராபர்ட் வூட்டின் பணியை அடிப்படையாகக் கொண்டது. இருப்பினும், அவர் உருவாக்கிய "லுமின்சென்ஸ்மிக்ரோஸ்கோப்" சந்தையில் இரண்டாவது இடத்தில் இருந்தது, வியன்னாவில் உள்ள சி ரெய்செர்ட், ஆப்டிஸ்சே வெர்கே ஏ. ஜி. யில் பணிபுரிந்த ஆஸ்கர் ஹெய்ம்ஸ்டாட் சுயாதீனமாக உருவாக்கிய ஒன்றிற்குப் பிறகு, இது இன்று லைகா மைக்ரோசிஸ்டம்ஸின் ஒரு பகுதியாகும். சைட்டோஃபோட்டோமெட்ரி 1930 களின் முற்பகுதியில் பல்வேறு நிறுவனங்கள் புற ஊதா ஒளிரும் நுண்ணோக்கிகளை தயாரித்தன. சைட்டோமெட்ரி இப்போது நிறுவப்பட்ட ஹீமோசைட்டோமீட்டருக்கு அப்பால் செல்ல கட்டம் அமைக்கப்பட்டது. இந்த நேரத்தில், ஸ்டாக்ஹோமில் உள்ள கரோலின்ஸ்கா நிறுவனத்தில் பணிபுரியும் டோர்ப்ஜோர்ன் காஸ்பர்சன், சைட்டோஃபோட்டோமீட்டர்கள் எனப்படும் படிப்படியாக மிகவும் அதிநவீன கருவிகளின் தொடரை உருவாக்கினார். இந்த கருவிகள் ஒரு ஃப்ளோரசன்ட் நுண்ணோக்கியை ஒரு ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமீட்டருடன் இணைத்து செல்லுலார் நியூக்ளிக் அமிலங்கள் மற்றும் செல் வளர்ச்சி மற்றும் செயல்பாட்டுடன் அவற்றின் தொடர்பை அளவிடுகின்றன. காஸ்பர்சனின் ஆரம்பகால கருவி இப்போது நம்பிக்கையற்ற வகையில் பழமையானதாகத் தெரிகிறது. ஆனால், இந்த பழமையான கருவியும் கூட முடிவுகளைப் பெற்று, மற்ற ஆராய்ச்சியாளர்களின் கவனத்தை ஈர்த்தது. 1940 களில் இருந்து பகுப்பாய்வு சைட்டாலஜியில் பல முன்னேற்றங்கள் ஸ்டாக்ஹோமுக்கு யாத்திரை மேற்கொண்ட மக்களால் செய்யப்பட்டன. பல்ஸ் சைட்டோஃபோட்டோமெட்ரி செல் எண்ணிக்கையை தானியக்கமாக்குவதற்கான முதல் முயற்சிகள் இரண்டாம் உலகப் போரைச் சுற்றி செய்யப்பட்டன. குக்கர் மற்றும் பலர். ஏரோசோல்களில் உள்ள பாக்டீரியாவைக் கண்டறிய ஒரு சாதனத்தை உருவாக்குகிறது. லாக்ராண்ட்ஸ் நுண்ணோக்கியின் அடிப்படையில் ஒரு தானியங்கி செல் கவுண்டரை உருவாக்குகிறது மற்றும் 1934 இல் மோல்டவன் முன்மொழிந்தபடி, நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி தனித்தனியாக கணக்கிடப்பட வேண்டிய செல்களை சீரமைப்பதில் உள்ள சிரமங்களை அடையாளம் காட்டுகிறது. ஜோசப் மற்றும் வாலஸ் கோல்டர் ஒரு திரவத்தில் இடைநீக்கம் செய்யப்பட்ட நுண் துகள்களை எண்ணுவதற்கும் அளவிடுவதற்கும் மின் மின்மறுப்பைப் பயன்படுத்துவதற்கான கொள்கையை கண்டுபிடிப்பதன் மூலம் இந்த சிரமங்களை சுற்றி வருகிறார். இந்தக் கோட்பாடு இன்று கூல்டர் கொள்கை என்று அழைக்கப்படுகிறது மற்றும் 1954 இல் கூல்டர் எலக்ட்ரானிக்ஸ் வெளியிட்ட தானியங்கி இரத்த செல் கவுண்டரில் பயன்படுத்தப்பட்டது. "கூல்டர் கவுண்டர்" முதல் வணிக ஓட்ட சைட்டோமீட்டர் ஆகும். 1960 களில் டிட்ரிச், கோஹேட் மற்றும் கமென்ட்ஸ்கி ஆகியோர் 30 ஆண்டுகளுக்கு முன்பு காஸ்பர்சன் முன்னோடியாக இருந்த வடிவமைப்பை மேம்படுத்துகின்றனர். டிட்ரிச் மற்றும் கோஹ்டேயின் துடிப்பு சைட்டோஃபோட்டோமீட்டர் ஒரு ஜீஸ் ஃப்ளோரசன்ட் நுண்ணோக்கியைச் சுற்றி கட்டப்பட்டது மற்றும் 1968 இல் பார்டெக் ஜி. எம். பி. எச் ஆல் ஐ. சி. பி 11 ஆக வணிகமயமாக்கப்பட்டது. கமென்ஸ்கியின் சாதனம் 1970 ஆம் ஆண்டில் பயோ/இயற்பியல் சிஸ்டம்ஸ் இன்க் நிறுவனத்தால் சைட்டோகிராஃப் என்ற பெயரில் வணிகமயமாக்கப்பட்டது. முந்தைய கூல்டர் கவுண்டரைப் போலவே இந்த சாதனங்களால் செல்களை எண்ண முடிந்தது. ஆனால் மிக முக்கியமாக, அவை செல்லுலார் பண்புகளை அளவிடக்கூடிய திறன் கொண்டவை. இருப்பினும், இந்த ஆரம்பகால சைட்டோஃபோட்டோமீட்டர்கள் நுண்ணோக்கியை அடிப்படையாகக் கொண்டவை. 1953 ஆம் ஆண்டில் கிராஸ்லேண்ட்-டெய்லர் நுண்ணோக்கியைப் பயன்படுத்தி சிவப்பு இரத்த அணுக்களை எண்ணும் ஒரு தோல்வியுற்ற முயற்சியை வெளியிட்டார், அதில் அவர் உயிரணுக்களை ஹைட்ரோடினமிகலாக மையப்படுத்த உறையின் திரவத்தைப் பயன்படுத்தி உயிரணுக்களை சீரமைக்கும் சிக்கலைத் தீர்த்தார். 1960 களின் பிற்பகுதியில், லாஸ் அலமோஸ் தேசிய ஆய்வகத்தில் வான் டில்லா முதல் நுண்ணோக்கி அல்லாத அடிப்படையிலான சைட்டோஃபோட்டோமீட்டரை உருவாக்கினார். கிராஸ்லேண்ட்-டெய்லரின் முன்னேற்றத்தை முதலில் நுண்ணோக்கிக்காக உருவாக்கப்பட்ட ஃப்ளோரசன்ட் சாயங்கள் மற்றும் லேசர் அடிப்படையிலான ஃப்ளோரசன்ட் கண்டறிதல் அமைப்பு-இன்று நாம் அறிந்தபடி ஃப்ளோ சைட்டோமீட்டருடன் இணைப்பதன் மூலம் அவர் இதைச் செய்தார். ஃபுல்வைலர், லாஸ் அலமோஸிலும், கோல்டர் கொள்கையை தொடர்ச்சியான இன்க்ஜெட் பிரிண்டர் தொழில்நுட்பத்துடன் இணைத்து 1965 ஆம் ஆண்டில் முதல் செல் சார்ட்டரை உருவாக்கியது. 1973 ஆம் ஆண்டில் ஸ்டெய்ன்காம்பும் லாஸ் அலமோஸில் உள்ள குழுவும் ஃப்ளோரசன்ஸ் அடிப்படையிலான செல் சார்ட்டரைப் பின்தொடர்ந்தனர். 1978 ஆம் ஆண்டில், புளோரிடாவின் பென்சகோலாவில் நடந்த அமெரிக்க பொறியியல் அறக்கட்டளையின் மாநாட்டில், துடிப்பு சைட்டோஃபோட்டோமெட்ரி என்ற பெயர் ப்ளோவ் சைட்டோமெட்ரி என்று மாற்றப்பட்டது, இது விரைவில் பிரபலமானது. அந்த நேரத்தில் துடிப்பு சைட்டோஃபோட்டோமெட்ரி ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரியின் நவீன வடிவமாக உருவானது, இது பத்து ஆண்டுகளுக்கு முன்பு வான் தில்லாவால் முன்னோடியாக இருந்தது. மேலும் காண்க மாஸ் சைட்டோமெட்ரி குறிப்புகள் பர்டூ பல்கலைக்கழக சைட்டோமெட்ரி ஆய்வகங்களின் சைட்டோமெட்ரி தொகுதி 10 வெளிப்புற இணைப்புகள் இரத்த சோதனைகள் செல் உயிரியல் மருத்துவ நோயியல் ஓட்டம் சைட்டோமெட்ரி ஆய்வக நுட்பங்கள் ஆய்வக உபகரணங்கள் உயிரியல் நுட்பங்கள் மற்றும் கருவிகள்