Nile blue
नील नीला (या नील नीला ए) जीव विज्ञान और ऊतक विज्ञान में उपयोग किया जाने वाला एक दाग है। इसका उपयोग जीवित या स्थिर कोशिकाओं के साथ किया जा सकता है, और कोशिका नाभिक को नीला रंग प्रदान करता है। प्रोकैरियोटिक या यूकेरियोटिक कोशिकाओं में पॉलीहाइड्रॉक्सीब्युटेरेट कणिकाओं की उपस्थिति के लिए दाग लगाने के लिए इसका उपयोग प्रतिदीप्ति सूक्ष्मदर्शी के संयोजन में भी किया जा सकता है। नील नील के घोल को सल्फ्यूरिक एसिड के साथ उबालने से नील लाल (नील नीला ऑक्साज़ोन) पैदा होता है। रासायनिक और भौतिक गुण नील नीला एक प्रतिदीप्ति रंग है। प्रतिदीप्ति विशेष रूप से उच्च मात्रा वाले गैर-ध्रुवीय विलायकों में दिखाई देती है। नील नीले रंग का अवशोषण और उत्सर्जन अधिकतम पीएच और उपयोग किए जाने वाले विलायकों पर दृढ़ता से निर्भर हैः इथेनॉल में नील नीले प्रतिदीप्ति की अवधि 1.42 एनएस के रूप में मापी गई थी। यह 3.65 एनएस के साथ नील लाल के संबंधित मूल्य से छोटा है। प्रतिदीप्ति अवधि 10−3 से 10−8 मोल/एल की सीमा में मंदन पर स्वतंत्र है। नील नीला धुंधलापन जैविक तैयारी के ऊतकीय धुंधलापन के लिए उपयोग किया जाता है। यह तटस्थ लिपिड (ट्राइग्लिसराइड्स, कोलेस्टेरिल एस्टर, स्टेरॉयड) जो दागदार गुलाबी हैं और एसिड (फैटी एसिड, क्रोमोलिपिड्स, फॉस्फोलिपिड्स) जो दागदार नीले रंग के हैं, के बीच के अंतर पर प्रकाश डालता है। क्लीबर्ग के अनुसार नील नीले रंग का धब्बा निम्नलिखित रसायनों का उपयोग करता हैः नील नीला ए 1 प्रतिशत एसिटिक एसिड ग्लिसरॉल या ग्लिसरॉल जिलेटिन कार्यप्रवाह नमूना या जमे हुए भागों को फॉर्मेल्डिहाइड में स्थिर किया जाता है, फिर नील नीले घोल में 20 मिनट या नील नीले ए में 30 सेकंड (आसुत पानी में 1 प्रतिशत डब्ल्यू/वी) के लिए डुबोया जाता है और पानी से धोया जाता है। बेहतर विभेदन के लिए, इसे 1 प्रतिशत एसिटिक एसिड में 10-20 मिनट या 30 सेकंड के लिए तब तक डुबोया जाता है जब तक कि रंग शुद्ध न हो जाएं। इसमें केवल 1 से 2 मिनट लग सकते हैं। फिर नमूने को अच्छी तरह से पानी में धोया जाता है (एक से दो घंटे के लिए)। इसके बाद, दागदार नमूने को सूक्ष्मदर्शी स्लाइड पर लिया जाता है और अतिरिक्त पानी को हटा दिया जाता है। नमूना ग्लिसरॉल या ग्लिसरॉल जिलेटिन में एम्बेड किया जा सकता है। परिणाम असंतृप्त ग्लिसराइड गुलाबी होते हैं, नाभिक और इलास्टिन गहरे रंग के होते हैं, वसा अम्ल और विभिन्न वसा पदार्थ और वसा मिश्रण बैंगनी नीले रंग के होते हैं। उदाहरण-पॉली-बीटा-हाइड्रॉक्सीब्युटेरेट ग्रैन्यूल (पी. एच. बी.) का पता लगाना स्यूडोमोनास सोलानासीरम की कोशिकाओं में पी. एच. बी. ग्रैन्यूल को नील नीले रंग के ए धुंधलापन द्वारा देखा जा सकता है। दागदार स्मीयर में पी. एच. बी. कणिकाओं को तेल विसर्जन के तहत एक एपिफ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोप के साथ देखा जाता है, 1000 गुना आवर्धन पर; 450 एनएम उत्तेजना तरंग दैर्ध्य के तहत वे एक मजबूत नारंगी प्रतिदीप्ति दिखाते हैं। डी. एन. ए. इलेक्ट्रोफोरेसिस में नील नीले रंग का उपयोग डी. एन. ए. इलेक्ट्रोफोरेसिस के लिए उपयोग किए जाने वाले विभिन्न प्रकार के वाणिज्यिक डी. एन. ए. धुंधला बनाने में भी किया जाता है। चूंकि इसे एथीडियम ब्रोमाइड की तरह अगरोज जेल में देखने के लिए यूवी ट्रांस-इल्युमिनेशन की आवश्यकता नहीं होती है, इसलिए इसका उपयोग डीएनए का निरीक्षण करने के लिए किया जा सकता है क्योंकि यह अलग हो जाता है और यूवी-विकिरण द्वारा नुकसान पहुँचाए बिना डीएनए के टुकड़ों के जेल-निष्कर्षण में सहायता के लिए एक रंग के रूप में भी किया जा सकता है। ऑन्कोलॉजी में नील नीला नील नीले के व्युत्पन्न घातक ट्यूमर की फोटोडायनामिक चिकित्सा में संभावित फोटोसेंसिटाइज़र हैं। ये रंग ट्यूमर कोशिकाओं में एकत्रित होते हैं, विशेष रूप से लिपिड झिल्ली में, और/या अलग किए जाते हैं और उपकोशिकीय अंगों में केंद्रित होते हैं। नील नील व्युत्पन्न एन-एथिल-नाइल ब्लू (ई. टी. एन. बी. ए.) के साथ, पशु प्रयोगों में सामान्य और पूर्ववर्ती ऊतकों को प्रतिदीप्ति इमेजिंग में प्रतिदीप्ति स्पेक्ट्रोस्कोपी द्वारा अलग किया जा सकता है। ई. टी. एन. बी. ए. कोई फोटोटॉक्सिक प्रभाव नहीं दिखाता है। संश्लेषण नील नीला और संबंधित नैफ्थॉक्साज़िनियम रंगों को 1-नैफ्थिलामाइन के साथ 5-(डायल्किलामिनो)-2-नाइट्रोसोफेनोल्स, एन-एल्किलेटेड 4-नाइट्रोसो-1-नैफ्थिलामाइन के साथ 3-(डायल्किलामिनो) फिनोल्स, या 4-(डायल्किलामिनो)-1,2-नैफ्थोकुइनोन के साथ एन-डायल्किल-1,4-फेनिलेनेडियामाइन के एसिड-उत्प्रेरित संघनन द्वारा तैयार किया जा सकता है। वैकल्पिक रूप से, 4-नाइट्रोसो-एन, एन-डायलकाइलानिलिन के एसिड-उत्प्रेरित संघनन के उत्पाद को 2-नेफ्थोल (9-(डायलकिलामिनो) बेंजो [ए] फेनोक्साज़िन-7-आयम का नमक) के साथ एक एमाइन की उपस्थिति में ऑक्सीकृत किया जा सकता है, जिससे बेंजो [ए] फेनोक्साज़िनियम प्रणाली की 5-स्थिति में दूसरा एमिनो प्रतिस्थापन स्थापित किया जा सकता है। निम्नलिखित योजना इन चार दृष्टिकोणों में से पहले को दर्शाती है, जो नील ब्लू पर्क्लोरेट की ओर ले जाती हैः संदर्भ ऑक्साज़िन रंग महत्वपूर्ण दाग डायथायलामिनो यौगिक