Floxing
आनुवंशिकी में, फ्लॉक्सिंग दो लॉक्स पी साइटों के बीच एक डी. एन. ए. अनुक्रम (जिसे तब फ्लॉक्स कहा जाता है) के सैंडविचिंग को संदर्भित करता है। इन शब्दों का निर्माण "एल. ओ. एस. पी. द्वारा फ़्लैंकिंग/फ़्लैंक्ड" वाक्यांश पर किया गया है। एल. ओ. एस. पी. स्थलों के बीच पुनर्संयोजन को क्रे पुनर्संयोजन द्वारा उत्प्रेरित किया जाता है। एक जीन को फ्लॉक्स करने से इसे हटा दिया जाता है (बाहर कर दिया जाता है), स्थानांतरित किया जाता है या क्री-लॉक्स पुनर्संयोजन नामक प्रक्रिया में उल्टा किया जाता है। वैज्ञानिक मॉडल प्रणालियों के विकास में जीन का फ्लोक्सिंग आवश्यक है क्योंकि यह शोधकर्ताओं को जीन अभिव्यक्ति में स्थानिक और अस्थायी परिवर्तन करने की अनुमति देता है। इसके अलावा, चूहों जैसे जानवरों का उपयोग मानव रोग का अध्ययन करने के लिए मॉडल के रूप में किया जा सकता है। इसलिए, मानव रोगों और दवा के विकास का अध्ययन करने के लिए जीन अभिव्यक्ति में हेरफेर करने के लिए चूहों में क्रे-लॉक्स प्रणाली का उपयोग किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, क्रे-लॉक्स प्रणाली का उपयोग करके, शोधकर्ता ऑन्कोजीन्स और ट्यूमर सप्रेसर जीन और चूहों के मॉडल में कैंसर के विकास और प्रगति में उनकी भूमिका का अध्ययन कर सकते हैं। शोध में उपयोग एक जीन को फ्लॉक्स करने से इसे हटाया जा सकता है (बाहर निकाला जा सकता है), स्थानांतरित किया जा सकता है या डाला जा सकता है (क्रे-लॉक्स पुनर्संयोजन में विभिन्न तंत्रों के माध्यम से)। वैज्ञानिक मॉडल प्रणालियों के विकास में जीन का फ्लोक्सिंग आवश्यक है क्योंकि यह जीन अभिव्यक्ति के स्थानिक और अस्थायी परिवर्तन की अनुमति देता है। आम आदमी के शब्दों में, वैज्ञानिक द्वारा चुने गए किसी भी समय विवो में एक विशिष्ट ऊतक में जीन को नॉक-आउट (निष्क्रिय) किया जा सकता है। वैज्ञानिक तब नॉक-आउट जीन के प्रभावों का मूल्यांकन कर सकते हैं और जीन के सामान्य कार्य की पहचान कर सकते हैं। यह गर्भधारण से शुरू होने वाले जीन की अनुपस्थिति से अलग है, जिससे जीव के विकास के लिए आवश्यक जीन की निष्क्रियता या हानि कोशिकाओं के सामान्य कार्य में हस्तक्षेप कर सकती है और व्यवहार्य संतानों के उत्पादन को रोक सकती है। विलोपन घटनाओं का तंत्र जीन संपादन प्रयोगों को सटीक रूप से या यहां तक कि पूरे जीन के खंडों को संपादित करने के माध्यम से करने के लिए उपयोगी है। विलोपन के लिए रुचि के खंड को एल. ओ. एक्स. पी. साइटों के साथ फ्लोक्सिंग की आवश्यकता होती है जो एक ही दिशा का सामना करते हैं। क्रे रिकॉम्बिनेस एक दिशात्मक एल. ओ. एक्स. पी. स्थलों का पता लगाएगा और डी. एन. ए. के फ्लोक्स्ड खंड को एक्साइज करेगा। सफलतापूर्वक संपादित क्लोन को एक चयन मार्कर का उपयोग करके चुना जा सकता है जिसे उसी क्री-लॉक्सपी प्रणाली का उपयोग करके हटाया जा सकता है। एक ही तंत्र का उपयोग एक एफ. आर. टी./एफ. एल. पी. साइट पेश करके सशर्त एलील बनाने के लिए किया जा सकता है जो एक ही तंत्र को पूरा करता है लेकिन एक अलग एंजाइम के साथ। व्युत्क्रम व्युत्क्रम घटनाओं का तंत्र आनुवंशिक सामग्री की मात्रा को बनाए रखने के लिए उपयोगी है। उल्टा जीन अक्सर असामान्य फेनोटाइप से जुड़े नहीं होते हैं, जिसका अर्थ है कि उल्टा जीन आम तौर पर व्यवहार्य होते हैं। क्रे-लॉक्सपी पुनर्संयोजन जिसके परिणामस्वरूप सम्मिलन में रुचि के जीन को फ्लॉक्स करने के लिए लॉक्सपी साइटों की आवश्यकता होती है, जिसमें लॉक्सपी साइटें एक दूसरे की ओर उन्मुख होती हैं। क्री पुनर्संयोजन से गुजरने से, एल. ओ. एक्स. पी. स्थलों द्वारा फ्लोक्स किया गया क्षेत्र उल्टा हो जाएगा, यह प्रक्रिया स्थायी नहीं है और इसे उलट दिया जा सकता है। स्थानान्तरण स्थानांतरण घटनाओं का तंत्र तब होता है जब एल. ओ. एक्स. पी. एक दिशात्मक अभिविन्यास में दो अलग-अलग डी. एन. ए. अणुओं पर फ्लॉक्स जीन को स्थापित करता है। इसके बाद क्री रिकॉम्बिनेस का उपयोग दो डीएनए अणुओं के बीच एक स्थानांतरण उत्पन्न करने के लिए किया जाता है, एक डीएनए अणु से दूसरे में आनुवंशिक सामग्री का आदान-प्रदान करके दोनों फ्लोक्स्ड जीन का एक साथ स्थानांतरण किया जाता है। शोध कार्डियोमायोसाइट्स (हृदय की मांसपेशियों के ऊतक) में सामान्य अनुप्रयोगों को एक प्रकार के क्रे पुनर्संयोजन को व्यक्त करने के लिए दिखाया गया है जो कार्डियोमायोसाइट्स के लिए अत्यधिक विशिष्ट है और शोधकर्ताओं द्वारा अत्यधिक कुशल पुनर्संयोजन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। यह एक प्रकार के क्री का उपयोग करके प्राप्त किया जाता है जिसकी अभिव्यक्ति-मायोसिन भारी श्रृंखला प्रवर्तक (-मायएचसी) द्वारा संचालित होती है। ये पुनर्संयोजन इस तरह से जीन को बाधित करने में सक्षम हैं जो विवो में केवल हृदय के ऊतकों के लिए विशिष्ट है और ज्यादातर नियंत्रण के रूप में उपयोग के लिए हृदय के सशर्त नॉकआउट के निर्माण की अनुमति देता है। उदाहरण के लिए,-मायएचसी प्रवर्तक के साथ क्रे पुनर्संयोजन का उपयोग करने से फ्लोक्स्ड जीन अकेले हृदय में निष्क्रिय हो जाता है। इसके अलावा, ये नॉकआउट प्रेरक हो सकते हैं। कई माउस अध्ययनों में, टेमॉक्सिफेन का उपयोग क्रे पुनर्संयोजन को प्रेरित करने के लिए किया जाता है। इस मामले में, क्री पुनर्संयोजन को माउस एस्ट्रोजन रिसेप्टर (ई. आर.) के एक हिस्से से जोड़ा जाता है जिसमें इसके लिगैंड बाइंडिंग डोमेन (एल. बी. डी.) के भीतर एक उत्परिवर्तन होता है। उत्परिवर्तन रिसेप्टर को निष्क्रिय कर देता है, जो हीट शॉक प्रोटीन 70 और 90 (एच. एस. पी. 70 और एच. एस. पी. 90) जैसे चैपरोन प्रोटीन के साथ इसकी बातचीत के माध्यम से गलत स्थानीयकरण की ओर ले जाता है। टैमोक्सिफेन क्री-ईआर से जुड़ता है और चैपरोन के साथ इसकी बातचीत को बाधित करता है, जो क्री-ईआर संलयन प्रोटीन को नाभिक में प्रवेश करने और फ्लोक्स्ड जीन पर पुनर्संयोजन करने की अनुमति देता है। इसके अतिरिक्त, विशिष्ट ऊष्मा आघात तत्वों (एच. एस. ई.) के नियंत्रण में होने पर क्री पुनर्संयोजन को ऊष्मा द्वारा प्रेरित किया जा सकता है। संदर्भ डीएनए आनुवंशिकी तकनीकें